Name: Contrast Imaging in muis embryos met behulp van hoge-frequentie Ultrasound (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: Leer contrastversterkte echografie van vasculaire structuren in muizenembryo's met behulp van microbellen. Deze methode maakt gedetailleerde perfusie-analyse en onderzoek naar vasculaire dynamiek in ontwikkelingsbiologie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door het Terry Fox-programma van het National Cancer Institute of Canada.

<ol><li>Voigt, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Ultrasound molecular imaging.</a> Methods. 48 (2), 92-97 (2009).</li>
<li>Klibanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+targeted+microbubbles%3A+Ultrasound+contrast+agents+for+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Biological+Engineering+Computing%22%5BJournal%5D)">Preparation of targeted microbubbles: Ultrasound contrast agents for molecular imaging.</a> Medical Biological Engineering Computing. 47 (8), 875-882 (2009).</li>
<li>Cosgrove, D., Lassau, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+perfusion+using+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+Of+Nuclear+Medicine+And+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging of perfusion using ultrasound.</a> European Journal Of Nuclear Medicine And Molecular Imaging. 37 (S1), 65(2010).</li>
<li>Williams, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+microbubble+contrast-enhanced+US+to+measure+tumor+response+to+targeted+therapy%3A+A+proposed+clinical+protocol+with+results+from+renal+cell+carcinoma+patients+receiving+antiangiogenic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Dynamic microbubble contrast-enhanced US to measure tumor response to targeted therapy: A proposed clinical protocol with results from renal cell carcinoma patients receiving antiangiogenic therapy.</a> Radiology. 260 (2), 581(2011).</li>
<li>Burns, P. N., Wilson, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+liver+masses%3A+Enhancement+patterns+on+contrast-enhanced+Images+-+Concordance+of+US+scans+with+CT+scans+and+MR+images%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Focal liver masses: Enhancement patterns on contrast-enhanced Images - Concordance of US scans with CT scans and MR images.</a> Radiology. 242 (1), 162(2006).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((40+MHz+doppler+characterization+of+umbilical+and+dorsal+aortic+Blood+flow+in+the+early+mouse+embryo.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22In+Medicine+And+Biology%22%5BJournal%5D)">40 MHz doppler characterization of umbilical and dorsal aortic Blood flow in the early mouse embryo. Ultrasound.</a> In Medicine And Biology. 26 (8), 1275-1283 (2000).</li>
<li>Phoon, C. K. L., Aristizabal, O., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+velocity+profile+in+mouse+embryonic+aorta+and+doppler-derived+volumetric+flow%3A+A+preliminary+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Spatial velocity profile in mouse embryonic aorta and doppler-derived volumetric flow: A preliminary model.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283, H908-H916 (2002).</li>
<li>Aristizábal, O., Williamson, R., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAristiz%C3%A1bal%2C+O+%2212A-4+in+vivo+3D+contrast-enhanced+imaging+of+the+embryonic+mouse+vasculature.+Paper+presented+at+Ultrasonics+Symposium%22">12A-4 in vivo 3D contrast-enhanced imaging of the embryonic mouse vasculature. Paper presented at Ultrasonics Symposium</a>. , IEEE. New York, NY. (2007).</li>
<li>Bartelle, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+genetic+approach+for+in+vivo+vascular+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.Res%22%5BJournal%5D)">Novel genetic approach for in vivo vascular imaging in mice.</a> Circ.Res. 110 (7), 938-947 (2012).</li>
<li>Endoh, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+gene+transfer+by+intrauterine+injection+with+microbubble-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Fetal gene transfer by intrauterine injection with microbubble-enhanced ultrasound.</a> Molecular Therapy. 5 (5), 501-508 (2002).</li>
<li>Yamada, M., Hatta, T., Otani, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+exo+utero+development+system%3A+Protocol+and+troubleshooting%5BTitle%5D)+AND+%22Congenital+Anomalies%22%5BJournal%5D)">Mouse exo utero development system: Protocol and troubleshooting.</a> Congenital Anomalies. 48 (4), 183-187 (2008).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Hudson, J. M., Purin, M. C., Foster, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGFR2-targeted+molecular+imaging+in+the+mouse+embryo%3A+An+alternative+to+the+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+medicine+and+biology%22%5BJournal%5D)">VEGFR2-targeted molecular imaging in the mouse embryo: An alternative to the tumor model.</a> Ultrasound in medicine and biology. 40 (2), 389-399 (2014).</li>
<li>Paauwe, M., Dijke, ten, P,, Hawinkels, L. J. A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+for+tumor+imaging+and+targeted+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+On+Therapeutic+Targets%22%5BJournal%5D)">Endoglin for tumor imaging and targeted cancer therapy.</a> Expert Opinion On Therapeutic Targets. 17 (4), 421-435 (2013).</li>
<li>Bourdeau, A., Faughnan, M. E., Letarte, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin-deficient+mice%2C+a+unique+model+to+study+hereditary+hemorrhagic+telangiectasia%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">Endoglin-deficient mice, a unique model to study hereditary hemorrhagic telangiectasia.</a> Trends Cardiovasc. Med. 10 (7), 279-285 (2000).</li>
<li>Whiteley, K. J., Adamson, S. L., Pfarrer, C. D. Vascular corrosion casting of the uteroplacental and fetoplacental vasculature in mice. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhiteley%2C+KJ+%22Placenta+And+Trophoblast%3A+Methods+And+Protocols%22">Placenta And Trophoblast: Methods And Protocols</a>. 121 (121), Humana Press. Totowa, NJ. 371-392 (2006).</li>
<li>Kulandavelu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+and+neonatal+phenotyping+of+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Embryonic and neonatal phenotyping of genetically engineered mice.</a> ILAR Journal. 47 (2), 103-10 (2006).</li>
<li>Kalaskar, V. K., Lauderdale, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+embryonic+development+in+a+serum-free+whole+embryo+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse embryonic development in a serum-free whole embryo culture system.</a> Journal of Visualized Experiments. 85, (2014).</li>
<li>Willmann, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+contrast-enhanced+ultrasound+imaging+of+tumor+angiogenesis+with+contrast+microbubbles+conjugated+to+integrin-binding+knottin+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Targeted contrast-enhanced ultrasound imaging of tumor angiogenesis with contrast microbubbles conjugated to integrin-binding knottin peptides.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 51 (3), 433-440 (2010).</li>
<li>Deshpande, N., Ren, Y., Foygel, K., Rosenberg, J., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+angiogenic+marker+expression+levels+during+tumor+growth%3A+Longitudinal+assessment+with+molecularly+targeted+microbubbles+and+US+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Tumor angiogenic marker expression levels during tumor growth: Longitudinal assessment with molecularly targeted microbubbles and US imaging.</a> Radiology. 258 (3), 804-811 (2011).</li>
<li>Lyshchik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+2+expression+using+targeted+contrast-enhanced+high-frequency+ultrasonography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Ultrasound+In+Medicine%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of vascular endothelial growth factor receptor 2 expression using targeted contrast-enhanced high-frequency ultrasonography.</a> Journal Of Ultrasound In Medicine. 26 (11), 1575-1586 (2007).</li>
<li>Jerkic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoglin+regulates+nitric+oxide-dependent+vasodilatation%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Endoglin regulates nitric oxide-dependent vasodilatation.</a> The FASEB Journal. 18 (3), 609-611 (2004).</li>
<li>Denbeigh, J. M., Nixon, B. A., Lee, J. J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDenbeigh%2C+JM+%22Contrast-Enhanced+Molecular+Ultrasound+Differentiates+Endoglin+Genotypes+in+Mouse+Embryos%22">Contrast-Enhanced Molecular Ultrasound Differentiates Endoglin Genotypes in Mouse Embryos</a>. , Angiogenesis. Press. (2014).</li>
<li>Adamson, S. L., Lu, Y., Whiteley, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+trophoblast+cells+and+the+maternal+and+fetal+circulation+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions between trophoblast cells and the maternal and fetal circulation in the mouse placenta.</a> Dev Biol. 250, 358-35 (2002).</li>
<li>Needles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+contrast+imaging+with+an+array-based+micro-ultrasound+system.+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+Biology%22%5BJournal%5D)">Nonlinear contrast imaging with an array-based micro-ultrasound system. Ultrasound.</a> Medicine Biology. 36 (12), 2097(2010).</li>
<li>Watson, E. D., Cross, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+structures+and+transport+functions+in+the+mouse+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Development of structures and transport functions in the mouse placenta.</a> Physiology. 20 (3), 180-193 (2005).</li>
<li>Shalaby, F., Rossant, J., Yamaguchi, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+blood-island+formation+and+vasculogenesis+in+Flk-1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Failure of blood-island formation and vasculogenesis in Flk-1-deficient mice.</a> Nature. 376, 62-66 (1995).</li>
<li>Kwee, L., Baldwin, H. S., Shen, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defective+development+of+the+embryonic+and+extraembryonic+circulatory+systems+in+vascular+cell+adhesion+molecule+%28VCAM-1%29+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Defective development of the embryonic and extraembryonic circulatory systems in vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) deficient mice.</a> Development. 121, (1995).</li>
<li>Mercurio, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+the+%CE%B12+integrin+knockout+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+journal+of+pathology%22%5BJournal%5D)">Lessons from the α2 integrin knockout mouse.</a> The American journal of pathology. , 161-163 (2002).</li>
<li>Hodivala-Dilke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1v%CE%B23+integrin+and+angiogenesis%3A+a+moody+integrin+in+a+changing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">αvβ3 integrin and angiogenesis: a moody integrin in a changing environment.</a> Curr Opin Cell Biol. 20, 514-519 (2008).</li>
<li>Pysz, M. A., Gambhir, S. S., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging%3A+current+status+and+emerging+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+radiology%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging: current status and emerging strategies.</a> Clinical radiology. 65, 500-516 (2010).</li>
<li>Cybulsky, M. I., Iiyama, K., Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+role+for+VCAM-1%2C+but+not+ICAM-1%2C+in+early+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">A major role for VCAM-1, but not ICAM-1, in early atherosclerosis.</a> J Clin Invest. 107, 1255-1262 (2001).</li>
<li>Xu, H., Gonzalo, J. A., St Pierre,, Y,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocytosis+and+resistance+to+septic+shock+in+intercellular+adhesion+molecule+1-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Leukocytosis and resistance to septic shock in intercellular adhesion molecule 1-deficient mice.</a> J Exp Med. 180, 95-109 (1994).</li>
<li>Gerwin, N., Gonzalo, J. A., Lloyd, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+eosinophil+accumulation+in+allergic+lung+interstitium+of+ICAM-2-deficient+mice+results+in+extended+hyperresponsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Prolonged eosinophil accumulation in allergic lung interstitium of ICAM-2-deficient mice results in extended hyperresponsiveness.</a> Immunity. 10, 9-19 (1999).</li>
<li>Johnson, R. C., Mayadas, T. N., Frenette, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+cell+dynamics+in+P-selectin-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Blood cell dynamics in P-selectin-deficient mice.</a> Blood. 86, 1106-1114 (1995).</li>
<li>Corrigan, N., Brazil, D., McAuliffe, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-frequency+ultrasound+assessment+of+the+murine+heart+from+embryo+through+to+juvenile%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">High-frequency ultrasound assessment of the murine heart from embryo through to juvenile.</a> Reproductive Sciences. 17 (2), 147-14 (2010).</li>
<li>Turnbull, D. H., Bloomfield, T. S., Baldwin, H. S., Foster, F. S., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+backscatter+microscope+analysis+of+early+mouse+embryonic+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ultrasound backscatter microscope analysis of early mouse embryonic brain development.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92, 2239-2243 (1995).</li>
<li>Greco, A., Mancini, M. L., Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+Biomicroscopy+in+Small+Animal+Research%3A+Applications+in+Molecular+and+Preclinical+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound Biomicroscopy in Small Animal Research: Applications in Molecular and Preclinical Imaging.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2012, (2012).</li>
<li>Pysz, M. A., Guracar, I., Foygel, K., Tian, L., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tumor+angiogenesis+using+real-time+motion-compensated+contrast-enhanced+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tumor angiogenesis using real-time motion-compensated contrast-enhanced ultrasound imaging.</a> Angiogenesis. 15, 433-442 (2012).</li>
<li>Larina, I. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+blood+flow+in+mammalian+embryos+using+doppler+swept-source+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J.Biomed.Opt%22%5BJournal%5D)">Live imaging of blood flow in mammalian embryos using doppler swept-source optical coherence tomography.</a> J.Biomed.Opt. 13 (6), 060506-06 (2008).</li>
<li>Garcia, M. D., Udan, R. S., Hadjantonakis, A. K., Dickinson, M. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGarcia%2C+MD+%22Live+imaging+of+mouse+embryos%22">Live imaging of mouse embryos</a>. 4 (4), Cold Spring Harbor. 104-10 (2011).</li>
<li>Teichert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+nitric+oxide+synthase+gene+expression+during+murine+embryogenesis.+Commencement+of+expression+in+the+embryo+occurs+with+the+establishment+of+a+unidirectional+circulatory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Endothelial nitric oxide synthase gene expression during murine embryogenesis. Commencement of expression in the embryo occurs with the establishment of a unidirectional circulatory system.</a> Circulation Research. 103 (1), 24-33 (2008).</li>
<li>Walls, J. R., Coultas, L., Rossant, J., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+analysis+of+vascular+development+in+the+mouse+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional analysis of vascular development in the mouse embryo.</a> PLoS One. 3 (8), (2008).</li>
</ol>

F.S. Foster erkent zijn rol als consultant voor VisualSonics Inc.

Ultrageluidcontrastmiddelen werden geïnjecteerd in een laat stadium van de dracht muis embryo&#39;s en niet-lineaire contrast beelden werden verworven om perfusie parameters te meten en gerichte microbellen bindend. Succesvolle beeldvorming microbellen in embryonale vasculatuur was afhankelijk van een aantal factoren, waarvan de eerste levensvatbaar embryo. Alle apparatuur en toestellen werden voorbereid om de benodigde tijd voor isolatie van embryo van de baarmoeder naar het begin van injectie te minimaliseren. Aangezi...

Contrastversterkte echografie maakt gebruik van microbellen contrastmiddelen te visualiseren en te karakteriseren de vasculaire milieu. Deze agenten in staat stellen niet-invasieve evaluatie van de microcirculatie, vasculariteit en cardiovasculaire functie. Bovendien kan modificatie van het oppervlak bel leiden gerichte microbellen binden aan endotheel biomarkers, zoals aangetoond in preklinische toepassingen van angiogenese, atherosclerose en ontsteking 1,2 waardoor moleculaire ultrasone beeldvorming van vasculaire voorvallen mogelijk. Contrastechografie ultrageluid kan derhalve worden gebruikt om de complexe en diverse omgevingen die invloed gezonde en zieke bloedvaten toestanden 3-5 identificeren. In de afgelopen aantal jaren is de belangstelling voor het nut van microbellen beeldvorming uitgebreid tot de veelzijdige muis embryo model. Als een model van de ontwikkeling van zoogdieren, introductie van microbellen in de embryonale vaatstelsel verbetert fysiologischestudie van de ontwikkeling bloedsomloop (bijvoorbeeld bloedstroom, hartminuutvolume) en in geval van transgene en gerichte mutant muismodellen van hartziekte 6,7, kan informatie krijgen over hoe genetische factoren veranderen cardiovasculaire functie. In feite, kwantitatieve en kwalitatieve analyses van 2D embryonale hersenen vasculatuur al bereikt 8. Bovendien, de muis embryo presenteert als een uitstekend model voor het onderzoeken van de binding van gerichte microbellen vasculaire markers in vivo. Bartelle et al. 9, bijvoorbeeld, hebben avidine microbellen geïntroduceerd in embryo cardiale ventrikels om gerichte binding beoordelen Biotag-BirA transgene embryo&#39;s en onderzoeken vasculaire anatomie. Het genereren van heterozygote en homozygote muismodellen kunnen ook worden gebruikt als een surrogaat voor tumormodel studies gericht op de kwantitatieve aard van moleculaire ultrageluid bepalen - een belangrijke benchmark vertaling van deze techniek om de kliniek. 8-10. In utero injecties worden echter geconfronteerd met een aantal uitdagingen. Deze omvatten injectie begeleiding, de noodzaak om de beweging in de moeder en geëxterioriseerde embryo tegen te gaan, het onderhoud van hemodynamische levensvatbaarheid bij de moeder en exteriorized embryo&#39;s, het aanpakken van de lange-termijn effecten van anesthesie en complicaties als gevolg van bloedingen 11. Daarom is het doel van het onderzoek was een techniek voor het injecteren van microbelletjes in geïsoleerde levende laat-stadium embryo 12 ontwikkelen. Deze optie biedt meer vrijheid in termen van injectie controle en positionering, reproduceerbaarheid van het beeldvlak zonder obstructie, en vereenvoudigde beeldanalyse en kwantificering. In de huidige studie, schetsen we een nieuwe procedure voor de injectie van microbellen in levende muizen embryo&#39;s for de toepassing van het bestuderen van microbellen kinetisch gedrag en van het bestuderen van gerichte microbellen binden aan endogene endotheeloppervlak markers. Niet-lineaire contrast specifieke echografie wordt gebruikt voor het meten van een aantal basis perfusieparameters inclusief piekverhogingsfactor (PE), wassen-in en de tijd tot piek (TTP) in geïsoleerde E17.5 embryo&#39;s. We tonen ook de geldigheid van de embryo voor de beoordeling van de kwantitatieve aard van moleculaire ultrageluid in een embryonale endoglin functieverlies transgeen muismodel, waarbij endoglin een klinisch relevant doel vanwege de hoge expressie in vasculaire endotheelcellen op plaatsen van actieve angiogenese 13 . De hechting van-endogline gerichte (MB E), rat isotype IgG 2 controlepunten (MB C) en ongerichte (MB U) microbellen wordt geëvalueerd in heterozygote endoglin (Eng +/-) en homozygote endoglin (Eng + / +) uiten van embryo&#39;s. Analyse van de gerichte binding blijkt dat moleculaire echografie te maken tussen genotypen en endoglin betrekking receptor dichtheden meetbare moleculaire ultrageluid niveaus.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagents</td></tr><tr><td colspan="4">Antilichamen (biotinyleerd, eBioscience) &#8212; Antilichaamkeuze is afhankelijk van het experiment</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>rat isotype IgG2 control</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-4321-85</td><td>Deze antilichaam/microbubbel combinatie is vaak vereist als experimentele controle&nbsp;</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>biotin anti-mouse CD309</li></ul></td><td>eBioscience</td><td>13-5821-85</td><td></td></tr><tr><td>Biotinyleerde rat MJ 7/18 antilichaam voor muis endoglin</td><td>In house hybridoma</td><td></td><td>Buiten antilichamen kunnen ook geschikt zijn: we&nbsp; hebben eBioscience (13-1051-85 ) in het verleden gebruikt</td></tr><tr><td>Gedestilleerd water</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Embryo media</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>500 ml Dulbecco&rsquo;s Modified Eagle&rsquo;s Medium met hoge glucose</li></ul></td><td>Sigma</td><td>D5796</td><td></td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>50 ml Fetal Bovine Serum</li></ul></td><td>ATCC</td><td>30-2020</td><td>lot # 7592456</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>Hepes</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15630</td><td>5 ml, 1 M</td></tr><tr><td><ul style="padding:0px;margin:0px"><li>Penicillin-Streptomycin</li></ul></td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>5 ml, 10.000 eenheden Pen., 10.000 &#956;g Strep</td></tr><tr><td>Ethanol, 70%</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>IJs</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Sigma</td><td>76240</td><td>4%</td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline [1x]&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>D8537</td><td>1x, zonder calciumchloride &amp; magnesiumchloride</td></tr><tr><td>Zwangere muis, CD-1</td><td>Charles River Laboratories Inc.&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9% natriumchloride (zoutoplossing)</td><td>Hospira</td><td>0409-7984-11</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasone contrastmiddel, doelwit klaar en niet-doelgericht</td><td>MicroMarker; VisualSonics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrasone gel (Aquasonic 100, kleurloos)</td><td>CSP Medical</td><td>133-1009</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Apparatuur</td></tr><tr><td>Celcultuur platen (4) :&nbsp; 100&nbsp;x&nbsp;20&nbsp;mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-772-22</td><td></td></tr><tr><td>Celcultuur platen (12) : 60&nbsp;x&nbsp;15&nbsp;mm</td><td>Sigma</td><td>D8054</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Sorvall Legend RT centrifuge&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Conische buizen, 50 ml BD Falcon</td><td>VWR</td><td>21008-938</td><td></td></tr><tr><td>Verdunningsmiddel</td><td>Beckman Coulter</td><td>Isoton II Diluent, 8448011</td><td></td></tr><tr><td>Dissectie schaar (Wagner)</td><td>Fine Science Tools</td><td>Wagner 14068-12</td><td></td></tr><tr><td>Pincetten (2), Dumont SS (0,10 x 0,06 mm)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11200-33</td><td></td></tr><tr><td>Pincet, splinter</td><td>VWR</td><td>25601-134</td><td></td></tr><tr><td>Glasbeker, 2 L (Griffin Beaker)</td><td>VWR</td><td>89000-216</td><td></td></tr><tr><td>Glas capillairen, 1 x 90&nbsp;mm GD-1 met filament</td><td>Narishige</td><td>GD-1</td><td></td></tr><tr><td>Glas naald puller</td><td>Narishige</td><td>PN-30</td><td></td></tr><tr><td>Handschoenen</td><td>Ansell</td><td>4002</td><td></td></tr><tr><td>Grote anatomie sonde</td><td>Fine Science Tools</td><td>10088-15</td><td></td></tr><tr><td>Hot plate</td><td>VWR</td><td>89090-994</td><td></td></tr><tr><td>IJsemmer</td><td>Cole Parmer</td><td>RK 06274-01</td><td></td></tr><tr><td>Beeldvorming Platform</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>Integrated Rail System</td><td></td></tr><tr><td>Lichtbron, glasvezel</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-562-36</td><td>Ideaal is een verstelbare armen</td></tr><tr><td>Luers (12), polypropyleen gebarste vrouwelijke &frac14;-28 UNF draad</td><td>Cole Parmer</td><td>45500-30</td><td></td></tr><tr><td>Micro-ultrasone systeem, hoogfrequent</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>Vevo2100</td><td></td></tr><tr><td>Naalden, 21 gauge&nbsp; (1&rdquo;)</td><td>VWR</td><td>305165</td><td></td></tr><tr><td>Deeltjesgrootte analyzer</td><td>Beckman Coulter</td><td>Multisizer 3 Coulter Counter</td><td></td></tr><tr><td>Geperforeerde lepel (Moria)</td><td>Fine Science Tools</td><td>MC 17 10373-17</td><td></td></tr><tr><td>Pins (6), zwart geanodiseerd minutien 0,15 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-15</td><td></td></tr><tr><td>Pipetten [2-20 &#956;l, 20-200 &#956;l, 100-1.000 &#956;l]</td><td>Eppendorf</td><td>Research Plus&nbsp; aanpasbaar 3120000038;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 3120000054;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 3120000062</td><td></td></tr><tr><td>Pipettip [2-200&nbsp;&#956;l, 50-1.000&nbsp;&#956;l]</td><td>Eppendorf</td><td>epT.I.P.S.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 22491334;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 022491351</td><td></td></tr><tr><td>Schaar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td><td>Dow Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buis, Tygon laboratorium 1/32&rdquo;

contrast imaging in muis embryo&#39;s met behulp van hoge-frequentie ultrasound

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Ultrasoundcontrast-verbeterde beeldvorming kan essentiële kwantitatieve informatie overleveren met betrekking tot weefselvasculairiteit en perfusie en, in gerichte toepassingen, de detectie en meting van vasculaire biomarkers op moleculair niveau vergemakkelijken. Binnen de muisembryo kan deze niet-invasieve techniek worden gebruikt om fundamentele mechanismen te onthullen die ten grondslag liggen aan de vasculaire ontwikkeling in het vroege muiscirculatiesysteem en in genetische modellen van hart- en vaatziekten. De muisembryo presenteert zich ook als een uitstekend model voor het bestuderen van de adhesie van microbubbels aan angiogenese-doelwitten (inclusief vasculair endotheelgroeifactorreceptor 2 (VEGFR2) of αvβ3) en voor het beoordelen van de kwantitatieve aard van moleculaire echografie. Daarom ontwikkelden we een methode om echografiecontrastmiddelen in het vaatstelsel van levende, geïsoleerde embryo's te introduceren. Dit biedt vrijheid in termen van injectiecontrole en positionering, reproduceerbaarheid van het beeldvlak zonder obstructie en beweging, en vereenvoudigde beeldanalyse en kwantificering. Murine embryo's in een late zwangerschapsfase (embryonale dag (E)16.6 en E17.5) werden geïsoleerd uit de baarmoeder, voorzichtig uit de dooierzak gehaald en microbubbelcontrastmiddelen werden geïnjecteerd in aders die toegankelijk zijn op het chorionoppervlak van de placentale schijf. Vervolgens werd niet-lineair contrastechografie gebruikt om een aantal basisperfusieparameters (piekversterking, was-in-snelheid en tijd tot piek) te verzamelen en het gerichte microbubbelbinding in een endoglin-muismodel te kwantificeren. We tonen de succesvolle circulatie van microbubbels binnen levende embryo's en de bruikbaarheid van deze aanpak bij het karakteriseren van embryonaal vaatstelsel en microbubbelgedrag.

De injectie van ultrageluid contrastmiddelen in ex utero muizenembryo&#39;s is afhankelijk van de succesvolle isolatie van levende, late zwangerschap stadium embryo van de baarmoeder en het onderhoud van levensvatbaarheid in de loop van de injectie en bijbehorende echografie. Zodra het embryo is buiten gebracht en gepositioneerd, zoals getoond in figuur 1, zorgvuldig injectie van contrastmiddel in de embryonale vasculatuur mogelijk. Een typisch B-modus ultrasoon beeld van een E17.5 muis embryo ...

Hier presenteren we een protocol om echografie microbellen contrastmiddelen in levende, geïsoleerde late zwangerschap stadium muizen embryo&#39;s te injecteren. Deze methode maakt de studie van perfusie parameters en vasculaire moleculaire merkers binnen het embryo met contrastmiddel hoogfrequente ultrasone beeldvorming.

Contrast Imaging in muis embryo&#39;s met behulp van hoge-frequentie Ultrasound

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Het algemene doel van deze procedure is het injecteren van microbellen in geïsoleerde levende muisembryo's voor contrastversterkte echografie. Dit wordt bereikt door eerst levende E 16.5 of E 17.5 embryo's te oogsten uit een drachtige muis.Nadat de targetende microbellen zijn geprepareerd, worden de microbellen in het levende embryo geïnjecteerd via het placentaire vasculaire netwerk. De laatste stap is het in beeld brengen van de microbellen met behulp van echografie. Uiteindelijk kan contrastversterkte echografie worden gebruikt om vasculaire perfusieparameters te meten en de binding van de targetende microbellen in embryo's te beoordelen.Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn met deze methode moeite hebben met de delen van het protocol die betrekking hebben op de hantering en injectie van embryo's, totdat zij voldoende oefening hebben gehad in het uitoefenen van de druk met de naald en de pincet die nodig is voor een succesvol experiment. De procedure wordt gedemonstreerd door Brian Nixon, een co-op student uit ons laboratorium. Om de target ready vials te reconstitueren, begint u met het verdunnen van 20 micrograms van de antilichaamoplossing tot een eindvolume van 1

contrast-imaging-in-mouse-embryos-using-high-frequency-ultrasound

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Ontwikkelingsbiologie

In utero overleven chirurgie bij muizen laat de moleculaire manipulatie van genexpressie tijdens de ontwikkeling. Hier beschrijven we het gebruik van hoge-frequentie ultrasonografie om de injectie van retrovirale vectoren gids in de muis hersenen op embryonale dag (E) 9.5.

Ultrasound-Guided micro-injectie in de muis voorhersenen In Utero At E9.5

Foetale en perinatale sterfte is een gemeenschappelijk kenmerk bij het bestuderen van genetische veranderingen die van invloed cardiale ontwikkeling. Hoogfrequente echografie is verbeterd 2-D resolutie en kan uitstekende informatie te verstrekken over de vroege ontwikkeling van het hart en is een ideale methode om de impact op cardiale structuur en functie te detecteren voorafgaand aan het overlijden.

Murine Foetale echocardiografie

This video demonstrates a procedure to inject microbubble contrast agents into an isolated late gestation stage mouse embryo. The microbubble contrast agent-based ultrasound imaging helps visualize and characterize the vascular environment of the embryo.

Injection of Microbubbles into Isolated Mouse Embryos: A Technique to Deliver Microbubble Contrast Agents into the Vasculature of Living Murine Embryos

In this video, we demonstrate high-frequency ultrasonography to image embryo implantation sites in a pregnant murine model. This imaging technique successfully detects viable pregnancy and characterizes embryo-implantation sites during early murine pregnancy.

High-frequency Ultrasonography Based Early Pregnancy Characterization: A Technique to Study Embryo Implantation and Pregnancy Progression in Pregnant Murine Model

Ultra-hoge frequentie echografie is een krachtige live-imaging tool om cardiale afwijkingen in kleine proefdieren. Zijn noninvasiveness maakt het handhaven van de fysiologische toestand van de embryo's. Hierin tonen we het gebruik van M-mode echo om de hartslag van embryo meten E18.5 in de baarmoeder.

In utero Meting van de hartslag in de Muis door invasieve M-mode echocardiografie

Muizen worden veel gebruikt om te studeren zwangerschapsduur biologie. Beëindiging van de zwangerschap is echter vereist voor dergelijke studies die zich verzet tegen longitudinale onderzoek en vereist het gebruik van grote aantallen dieren. Daarom beschrijven we een niet-invasieve techniek van hoge-frequentie Ultrasonografie voor de vroegtijdige opsporing en het toezicht na implantatie gebeurtenissen in de zwangere muis.

Een roman gebruik van driedimensionale hoogfrequente Ultrasonografie voor vroege zwangerschap karakterisering in de muis

Hoge-frequentie echografie beeldvorming van de foetale muis kan imaging resolutie is verbeterd en nauwkeurige niet-invasieve karakterisering van cardiale ontwikkeling en structurele gebreken. Het protocol hierin geschetst is ontworpen om uit te voeren real-time foetale muizen echocardiografie in vivo.

Foetale muis cardiovasculaire Imaging met behulp van een systeem van hoge-frequentie echografie (30 / 45MHZ)

Hier beschrijven we de techniek van de hoge frequentie echografie voor in vivo analyse van foetussen in muizen. Met deze methode kunt de opvolging van foetussen en de analyse van de placenta parameters evenals moederlijk en foetaal bloedstroom in de gehele zwangerschap.

Hoge frequentie echografie voor de analyse van de ontwikkeling van de foetus en placenta In Vivo

Echografie met hoge resolutie kan helpen bij het stroomlijnen van experimenten die getijde zwangere muizen vereisen door de staat van zwangerschap, zwangerschapsduur en zwangerschapsverliezen te bepalen. Hier wordt een protocol gepresenteerd om methoden te illustreren om muiszwangerschappen te beoordelen, evenals mogelijke valkuilen (beeldartefacten) die zwangerschap kunnen nabootsen.

Is mijn muis zwanger? Hoogfrequente echografie

Dit protocol beschrijft drie methoden voor het verkrijgen en gebruiken van 5 tot 8 dagen oude kippenembryo's en hun chorioallantoic membrane (CAM) als een in vivo model om contrastverbeterde ultrasone beeldvorming en microbubbel-gemedieerde medicijnafgifte te bestuderen.

De voorbereiding van Chicken Ex Ovo Embryo's en Chorioallantoic Membrane Vessels als In Vivo Model voor Contrast-Enhanced Ultrasound Imaging en Microbubble-Gemedieerde Drug Delivery Studies

We presenteren een gedetailleerd protocol voor het kweken en beeldvorming van muizenembryo's dat 3D + tijdbeeldvorming van cardiale voorlopercellen mogelijk maakt. Deze video-toolkit behandelt de belangrijkste vaardigheden die nodig zijn voor succesvolle live imaging die anders moeilijk te verkrijgen zijn uit tekstpublicaties.

Live beeldvorming van vroege cardiale voorlopers in het muizenembryo

Leer contrastversterkte echografie van vasculaire structuren in muizenembryo's met behulp van microbellen. Deze methode maakt gedetailleerde perfusie-analyse en onderzoek naar vasculaire dynamiek in ontwikkelingsbiologie mogelijk.

Contrast Imaging in muis embryo's met behulp van hoge-frequentie Ultrasound

Meer video's verkennen