De Modified Hole Board - Het meten van gedrag en cognitieve en sociale interactie bij muizen en ratten

Het algemene doel van de volgende experimenten is om het onconditionele gedrag van kleine laboratoriumzoogdieren te meten en hun cognitieve vermogens te analyseren. Dit wordt bereikt door de dieren in het aangepaste gatbord te plaatsen om hun onconditionele gedrag te observeren en te scoren, met of zonder de aanwezigheid van hun kooigenoten. Daarnaast kan er vóór de test een nieuw en bekend object of een voedselpellet in het apparaat worden geplaatst, wat gebruikt kan worden om objectherkenning of voedselinname-inhibitie te meten.

Een derde toepassing van deze methode is het plaatsen van het dier in de cognitieve versie van het aangepaste hele bord, waarbij de beloning wordt gekoppeld aan een contrasterende gekleurde identificatie. Om de cognitieve vermogens van het proefobject te meten, tonen de resultaten een spectrum van ongeconditioneerd gedrag. Aangezien de methode meerdere gedragsdimensies combineert in één enkel paradigma, dat kenmerken bevat van een traditioneel hole board en een open field test, is het belangrijkste voordeel van deze techniek dat het de nadelen van een testbatterij overwint door het aantal gebruikte dieren te verminderen, mogelijke effecten van de testvolgorde te omzeilen en tijdeffecten en kosten te verlagen. De tests moeten worden uitgevoerd in de reguliere huisvestingsruimte tijdens de donkere fase, de meest actieve fase van het dier; voor de doeleinden van deze video wordt de test uitgevoerd onder heldere lichtomstandigheden.

Gedragstesten moeten worden uitgevoerd op dieren die gewend zijn geraakt aan hun omgeving en aan de hantering door de experimentator. Plaats het bord met de cilinders in het midden van de experimentele bak. Positioneer vervolgens een podiumlamp boven het bord om een contrast in lichtintensiteit tussen het bord en de bak te creëren, waardoor het aversieve karakter van het bord wordt vergroot.

Plaats voor aanvang het bekende object in het apparaat, op twee centimeter afstand van een nieuw object in de hoek tegenover het startpunt. Haal vervolgens het te testen dier uit de thuiskooi en plaats het met de kop naar de wand in een specifieke hoek van het apparaat. Laat het dier gedurende ongeveer vijf minuten vrij verkennen.

Laat een ervaren waarnemer de gedragsparameters scoren met behulp van software voor gedragsscoren. Gebruik de parameters die in deze tabel staan vermeld en meet daarnaast de tijd die het dier nodig heeft om het nieuwe en het bekende object of het nieuwe en het bekende voedingsmiddel te benaderen. Reinig de apparatuur na elke trial met kraanwater en een papieren handdoek.

Om een bias op basis van olfactorische signalen te voorkomen, plaatst u de groepsgenoten 10 tot 30 minuten voor het testen van het experimentele dier in het groepscompartiment om gewenning mogelijk te maken. Plaats vervolgens het experimentele dier in het testcompartiment en laat het vijf minuten, of zo lang als vereist door uw eigen protocol, vrij verkennen op het aangepaste gehele bord. Laat opnieuw een ervaren waarnemer de gedragsparameters live scoren met behulp van gedragsscore-software, gebruikmakend van de in tabel één vermelde parameters zoals voorheen.

Maak de dieren vóór aanvang van dit experiment vertrouwd met een zeer smakelijke beloning. Hier wordt een stukje amandel gebruikt. Bied de beloning met een pincet aan in de thuiskooi, één keer per dag gedurende twee opeenvolgende dagen vóór het experiment; plaats een scheidingswand om de afmetingen van de box te verkleinen naar 50 bij 50 centimeter.

Plaats voor het testen van de muizen een kleiner bord in het midden van de bak. Dit diagram toont de opstelling van het gemodificeerde gatbord. Vervolgens worden alle 10 cilinders voorzien van een geur waartoe de dieren worden aangetrokken, zoals vanille, en worden alle cilinders voorzien van het lokmiddel dat onder een rooster is geplaatst zodat het niet verwijderd kan worden.

Q3-cilinders met een gekleurde ring die contrasteert met het PVC en lok deze cilinders met een verwijderbare beloning. Plaats het dier opnieuw in dezelfde hoek van de apparatus en laat een ervaren waarnemer live scoren. De gedragsparameters met behulp van gedragsscore-software.

Meet de parameters die zijn vermeld in tabel twee, naast die welke eerder in tabel één zijn getoond, met uitzondering van de parameters die betrekking hebben op objectherkenning of remming van de voedselinname. Voer dagelijks vier trainingssessies uit met een constant interval tussen de sessies, totdat een constante tijd voor het verzamelen van alle drie de amandelen is vastgesteld. Reinig de apparatus na elke sessie met kraanwater en een papieren handdoek om een bias op basis van olfactorische signalen bij het testen van reversal learning te voorkomen.

Zodra het dier volledig is getraind, worden drie verschillende cilinders, of zoveel cilinders als vereist is door uw eigen protocol, gecued en gelockt, waarna het dier wordt getest over het vereiste aantal pogingen. De eerste vier afbeeldingen tonen de resultaten van het cognitieve testparadigma dat de cognitieve functie meet van C 57 black six J muizen met milde cerebrale hypoxie-ischemie (aangeduid als HI 45), ernstige hypoxie-ischemie (aangeduid als HI 75) en sham-controlemuizen. Deze grafiek toont de gemiddelde latentietijd om de vier pogingen van een testdag te voltooien.

Deze grafiek toont het aantal herbezoeken aan een gelokt gat op elke testdag. Een maatstaf voor fouten in het kortetermijngeheugen. Hier worden de bezoeken aan niet-gelokte gaten weergegeven.

Dit is een maatstaf voor fouten in het langetermijngeheugen. Hier worden de gegevens voor het aantal weglatingfouten weergegeven. Een weglatingfout wordt gedefinieerd als het aantal niet bezochte lokcilinders.

Om te bevestigen dat de I 45-groep geen cognitieve stoornissen vertoonde, werd deze groep getest ten opzichte van de sham-controles. Bij een reversal-taak werden de drie gelokte gaten toegewezen aan drie verschillende cilinders, en werden de dieren gedurende vier trials getest. Het reversal-effect wordt duidelijk bij het vergelijken van de laatste trial van de eerste fase met de eerste trial van de reversal-fase.

Deze afbeelding toont de latentietijd om de proef te voltooien voor beide groepen, waarbij een duidelijk algemeen behandelingseffect zichtbaar is. Dit betekent dat er een verminderde cognitieve flexibiliteit is in de HI 45-groep die detecteerbaar was met behulp van het aangepaste volledige bord met de reversal-taak. Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u het aangepaste volledige bord gebruikt in zowel de algemene als de cognitieve versie.