Name: Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Leer de Morris water maze-methode voor het beoordelen van cognitieve tekorten bij muismodellen van Alzheimer. Dit protocol optimaliseert testomgeving en achtergrondstam voor nauwkeurige resultaten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door het Nationaal Instituut voor de General Medical Sciences (Reed / Engler-Chiurazzi - U54GM104942), het Nationaal Instituut voor Neurologische Aandoeningen en Stroke (Ashe - R01NS33249, R01NS63249 en R01NS79374), Cobre (Engler-Chiurazzi - P20GM109098), de Alzheimer&#39;s Association (Reed - NIRG-12-242187), een WVU Faculty Research Senaat Grant (Reed), een WVU PSCOR subsidie ​​(Reed), en de interne middelen van de WVU College of Medicine Dean&#39;s Office (Engler-Chiurazzi). De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en niet noodzakelijkerwijs de officiële standpunten van de NIH of Alzheimer&#39;s Association.

<ol><li>Ramsden, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+neurofibrillary+tangle+formation%2C+neuron+loss%2C+and+memory+impairment+in+a+mouse+model+of+human+tauopathy+%28P301L%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Age-dependent neurofibrillary tangle formation, neuron loss, and memory impairment in a mouse model of human tauopathy (P301L).</a> The Journal of Neuroscience. 25, 10637-10647 (2005).</li>
<li>Attar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+shortened+barnes+maze+protocol+reveals+memory+deficits+at+4-months+of+age+in+the+triple-transgenic+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A shortened barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> PLoS One. 8, e80355(2013).</li>
<li>Johnson, J. M., Bailey, J. M., Johnson, J. E., Newland, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice+under+an+incremental+repeated+acquisition+of+behavioral+chains+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Processes%22%5BJournal%5D)">Performance of BALB/c and C57BL/6 mice under an incremental repeated acquisition of behavioral chains procedure.</a> Behavioural Processes. 84, 705-714 (2010).</li>
<li>Crawley, J. N. What's wrong with my Mouse Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 1st edition, Wiley-Liss. 94-95 (2000).</li>
<li>Westerman, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+abeta+and+memory+in+the+Tg2576+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The relationship between abeta and memory in the Tg2576 mouse model of Alzheimer's disease.</a> The Journal of Neuroscience. 22, 1858-1867 (2002).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Santa Cruz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau+suppression+in+a+neurodegenerative+mouse+model+improves+memory+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tau suppression in a neurodegenerative mouse model improves memory function.</a> Science. 309, 476-481 (2005).</li>
<li>Hunsberger, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+memory+deficits+in+mice+with+adult-onset+P301L+tau+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of memory deficits in mice with adult-onset P301L tau expression.</a> Behavioural Brain Research. 272, 181-195 (2014).</li>
<li>Yue, M., Hanna, A., Wilson, J., Roder, H., Janus, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+difference+in+pathology+and+memory+decline+in+rTg4510+mouse+model+of+tauopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Aging%22%5BJournal%5D)">Sex difference in pathology and memory decline in rTg4510 mouse model of tauopathy.</a> Neurobiology of Aging. 32, 590-603 (2011).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+plasticity%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural plasticity. 6, 41-52 (1998).</li>
<li>Hölscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+impairs+performance+in+spatial+water+maze+learning+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">C. impairs performance in spatial water maze learning tasks.</a> Behavioural Brain Research. 100, 225-235 (1999).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Reed, M. N., Liu, P., Kotilinek, L. A., Ashe, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+reference+memory+deficits+in+the+morris+water+maze+in+Tg2576+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of reference memory deficits in the morris water maze in Tg2576 mice.</a> Behavioural Brain Research. 212, 115-120 (2010).</li>
<li>Huang, Y., Zhou, W., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+lighting+conditions+during+testing+increase+thigmotaxis+and+impair+water+maze+performance+in+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Bright lighting conditions during testing increase thigmotaxis and impair water maze performance in BALB/c mice.</a> Behavioral Brain Research. 226, 26-31 (2012).</li>
<li>Baker, R. Water maze. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.watermaze.org">http://www.watermaze.org</a> (2013).</li>
<li>Ivonen, H., Nurminen, L., Harri, M., Tanila, H., Puolivali, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+in+mice+tested+in+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hypothermia in mice tested in Morris water maze.</a> Behavioural Brain Research. 141, 207-213 (2003).</li>
<li>Rubinow, M. J., Arseneau, L. M., Beverly, J. L., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+estrous+cycle+on+water+maze+acquisition+depends+on+the+temperature+of+the+water%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effect of estrous cycle on water maze acquisition depends on the temperature of the water.</a> Behavioral Neuroscience. 118 (4), 863-868 (2004).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

De MWM taak wordt wijd gebruikt om ruimtelijk leren en geheugen beoordelen. Echter, de robuustheid van deze taak beïnvloed door vele factoren en vereist optimalisatie voor zowel de achtergrond stam en testomgeving. Zoals getoond in figuur 4, dezelfde trainingsprotocol en toegepast visuele aanwijzingen die in twee verschillende testen kamers (equivalente omvang en layout) leverde aanzienlijk verschillend probe prestaties. Omdat veel functies van de testkamer kan bijdragen aan ruimtelijke signalen 4,...

Transgene muismodellen zijn geweest bij het evalueren van de pathofysiologie van de ziekte van Alzheimer (AD), alsmede de mogelijke therapeutische interventies geweest. Cognitieve taken, zoals de Morris water maze (MWM), worden vaak in deze modellen om de moleculaire correlaten van geheugengebreken identificeren en werkzaamheid preklinische geneesmiddelen te beoordelen. Het is echter essentieel dat het dynamisch bereik van de cognitieve taak breed genoeg om subtiele behandelingseffecten te detecteren. Met muismodellen van AD, cognitieve tekorten zijn doorgaans leeftijdsafhankelijk, en muizen weer progressieve daling in de prestaties (bv 1). Toepassing van een gevoelige cognitieve taak kan detecteren van subtiele verschillen mogelijk vroeger in het leven van het dier, waardoor de kosten van het verouderen dieren verminderen. Bijvoorbeeld, vermindering van het aantal training proeven in de hippocampus-afhankelijke Barnes doolhof 15-5 verhoogde de moeilijkheid van de taak, waardoor het detection van tekorten in de 3xTg model op een jongere leeftijd dan eerder gemeld 2. Eerdere detectie van gebreken biedt niet alleen veel tijd en kostenbesparing, verhoogt ook de kans dat de onderliggende moleculaire veranderingen cognitieve defecten kunnen worden geïdentificeerd. Eén factor die de gevoeligheid van cognitieve taken is de genetische achtergrond stam van het muismodel. Bijvoorbeeld, BALB / c-muizen vertonen superieure prestaties bij leren en geheugen taken vergeleken met andere stammen, zoals C57BL / 6 3. De F1 FVB / N x 129S6 achtergrond wordt gebruikt voor twee van de meest gebruikte modellen van AD, de Tg2576 en RTG (TauP301L) 4510 modellen. Deze stam vertoont een superieure leervermogen in de MWM ten opzichte van andere stammen, waaronder B6 / SJL muizen 4. Door deze superieure leervermogen, kan het gebruik van één sonde na uitgebreide training groepsverschillen van de te veel training maskeren. Bovendien, de sensitivity van probe studies, kunnen leeftijd afhankelijk zijn. We hebben eerder aangetoond dat eerder probe trials, met een beperkte verborgen platform training, gevoeliger zijn verschillen bij jonge Tg2576 vergeleken met jonge transgene nestgenoot-negatieve controles dan zijn probe trials ingevoegd uitgebreidere training 5. In tegenstelling, probe trials na uitgebreide training zijn gevoeliger bij oudere (20-25 maand) Tg2576 muizen in vergelijking met ouder littermates dan zijn eerdere sonde proeven 5. Door her probe trials gedurende training wordt de kans dat een gevoelige proef wordt geïdentificeerd verhoogd, vooral als longitudinale testen uitgevoerd en de gevoeligheid van een bepaalde probe trial leeftijdsafhankelijke. Figuur 1 toont de superieure prestaties van F1 FVB / N x 129S6 muizen onder het protocol geoptimaliseerd voor deze stam in vergelijking met muizen van de B6 / SJL achtergrond opgeleid in het kader van een protocol met meer uitgebreide training. De MWM isalgemeen gedacht om betrouwbare maatregelen die reproduceerbaar in zowel tijd en laboratoria 6 zijn voorzien. Zo werd het primaire protocol oorspronkelijk door ons laboratorium Minnesota 1,7 succes uitgevoerd met ondergeschikte modificaties van West Virginia University 8. Ook gelijkwaardige impairment werden waargenomen in RTG (TauP301L) 4510 muizen ten opzichte van nestgenoten controleren of gehuisvest onder pathogeenvrije of conventionele omstandigheden 9. Echter, de testomgeving de gevoeligheid van de MWM taak beïnvloeden. Factoren zoals verlichting, ventilatieopeningen, temperatuurgradiënten en geluiden dragen allemaal bij aan omgevingsfactoren 4 die uiteindelijk de prestaties kunnen beïnvloeden. Wanneer onze Minnesota laboratorium vivarium werden verplaatst naar een nieuw gebouw, tot een vermindering van 38% wild-type prestatie werd waargenomen, het dynamisch bereik van de taak en het vermogen om transgene deficits detecteren aanzienlijk verminderen. Deze verandering in performance opgetreden ondanks het ontwerpen van de testkamer van dezelfde grootte en configuratie zijn, en dezelfde toegepaste visuele signalen. A &quot;re-optimalisatie&quot; van het oorspronkelijke protocol was nodig om het dynamisch bereik van de MWM taak in de nieuwe testomgeving verhogen. Hier het oorspronkelijke protocol ontworpen voor gebruik met de F1 FVB / N x 129S6 achtergrond 5 wordt beschreven. Omdat sommige studies suggereren stress geassocieerd met slechte prestaties MWM 10 en pre-behandeling kan deze stress geïnduceerde tekorten verlichten uitvoering 11 werd een pre-behandeling protocol ontworpen om de muizen om de invoering en verwijdering van de pool vóór MWM test wennen . Na de pre-handling, muizen zichtbaar platform training, waarin een verhoogd platform is gemarkeerd met een vlag te ondergaan. Zichtbare platform training wordt gebruikt om muizen te identificeren met performance problemen met betrekking tot sensomotorische afwijkingen. Met behulp van uitsluitingscriteria in de prot beschrevenocol sectie, performance-incompetente muizen worden verwijderd uit de daaropvolgende onderzoeken van verborgen platform training en probe trials. Stoornissen in verborgen platform training en probe trials worden geïnterpreteerd als cognitieve tekorten omdat sensomotorische prestaties wordt meegenomen uit de data. Na voltooiing van zichtbare platform training, muizen beginnen verborgen platform training waarbij het platform is ondergedompeld in water en blijft in dezelfde positie ten opzichte van externe stimuli. Proeven waarbij het platform wordt verwijderd (probe trials) worden gestrooid door verborgen platform training om de invloed van additionele training evalueren. Omdat probe trials voorkomen aan het begin van elke dag, zodat er extra verborgen platform training, probe trials meet het vermogen van het dier om de locatie van het platform na een 20 uur vertraging herinneren, als een maat voor referentie geheugen 12. Tenslotte wijzen waarop deze oorspronkelijke protocol werd opnieuw geoptimaliseerd wanneer veranderingen in de testomgevingverstoord controle prestaties worden beschreven.

<table><tbody><tr><td>Viewer Tracking software</td><td>Biobserve</td><td></td><td>Deze specifieke software is geen vereiste - er zijn andere trackingsystemen beschikbaar</td></tr><tr><td>Pre-handling pool</td><td></td><td></td><td>Afmetingen ongeveer 1 voet breed x 2 voet lang x 1,5 voet diep</td></tr><tr><td>Kunststof beker</td><td></td><td></td><td>1 L</td></tr><tr><td>Schop</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Klein net</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stopwatch</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Niet-toxische witte tempera verf</td><td></td><td></td><td>Elke kleur verf kan worden gebruikt; echter, de meeste trackingsoftwareprogramma's vereisen dat de verf contrasteert met de kleur van het dier.</td></tr><tr><td>Zichtbare platform</td><td></td><td></td><td>Kleur moet contrasteren met die van het doolhof</td></tr><tr><td>Gordijnroede</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gordijnen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ronde kuip</td><td></td><td></td><td>Meestal wit van kleur; ongeveer 4 voet in diameter</td></tr><tr><td>Verborgen platform</td><td></td><td></td><td>Geverfd in dezelfde kleur als het water</td></tr></tbody></table>

morris water maze test: optimalisatie voor mouse strain en testomgeving

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

Het Morris water maze (MWM) is een veelgebruikt taak om hippocampaal-afhankelijk ruimtelijk leren en geheugen te beoordelen bij transgene muismodellen van ziekten, inclusief neurocognitieve stoornissen zoals de ziekte van Alzheimer. Echter, de achtergrondstam van het gebruikte muismodel kan een substantieel effect hebben op het waargenomen gedragsfenotype, waarbij sommige stammen een superieure leercapaciteit vertonen in vergelijking met andere. Om ervoor te zorgen dat verschillen tussen transgeen-negatieve en transgeen-positieve muizen kunnen worden gedetecteerd, is identificatie van een trainingsprocedure die gevoelig is voor de achtergrondstam essentieel. Het niet aanpassen van het MWM-protocol aan de achtergrondstam van het muismodel kan leiden tot onder- of overtraining, waardoor groepsverschillen in probe-trials worden gemaskeerd. Hier wordt een MWM-protocol beschreven dat is aangepast voor gebruik met de F1 FVB/N x 129S6 achtergrond. Dit is een veelgebruikt achtergrondras om de leeftijdsafhankelijke effecten van mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 muizen) op de geheugenproblemen geassocieerd met de ziekte van Alzheimer te bestuderen. Ook wordt een strategie beschreven om opnieuw te optimaliseren, zoals gedicteerd door de specifieke testomgeving die wordt gebruikt.

We hebben de Morris water maze gebruikt om de effecten van bèta-amyloïde (Tg2576 muizen) en mutant tau P301L (RTG (TauP301L) 4510 muizen) ruimtelijke voorbeeldgeheugen (bijvoorbeeld 1,5,7,8). Figuur 3 is de studie de vertegenwoordiger resultaat gerapporteerd in onze studie naar het effect van volwassen-onset P301L tau-expressie op leren en geheugen 8, met behulp van testen Milieu A. Om motor en visuele mogelijkheden te beoordelen, werden muizen vergeleken heel zichtbaar pl...

Dit manuscript beschrijft een Morris water maze (MWM) protocol dat is aangepast voor gebruik met een veelgebruikte muismodel van de ziekte van Alzheimer. De MWM wordt veel gebruikt in transgene muismodellen. Implementatie van een procedure die gevoelig is voor de achtergrondstam van het muismodel is essentieel voor het detecteren van verschillen tussen groepen.

Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Het doel van deze procedure is om cognitieve tekortkomingen in een muismodel voor de ziekte van Alzheimer te identificeren middels een Morris Water Maze-protocol, specifiek afgestemd op de 1 2 9 6 FBB achtergrondstam. Dit wordt bereikt door de muizen eerst te laten wennen aan de taak om door stress veroorzaakte prestatiebeperkingen te verminderen. De tweede stap is het gebruik van de visuele platformtaak, waarbij een platform één inch boven de waterlijn wordt geplaatst om de visuele en motorische functies te beoordelen.Vervolgens worden de proeven met het verborgen platform uitgevoerd, waarbij het platform vijf millimeter onder het wateroppervlak is ondergedompeld. De laatste stap bestaat uit probe-proeven waarbij het platform wordt verwijderd om het ruimtelijke referentiegeheugen te beoordelen en het type gebruikte zoekstrategie te bepalen. Uiteindelijk maakt deze aangepaste water-MA-procedure de beoordeling van ruimtelijk leren en geheugen mogelijk in een veelgebruikt muismodel voor de ziekte van Alzheimer.Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn met deze methode moeite hebben vanwege de noodzaak om de testprocedures te optimaliseren, zoals het aantal trainingspogingen en gebruikte probes op basis van de achtergrondstam van de muizenlijn en de omgeving waarin de muizen worden getest. Dit deel van de procedure acclimatiseert de muizen aan het betreden en verlaten van de trekbak. Plaats eerst de bak op een comfortabele hoogte en vul deze met twee liter water bij een temperatuur van 21 °C tot een niveau van ongeveer één centimeter.Nadat de muizen naar de testruimte zijn gebracht, haalt u een proefdier uit de kooi, verifieert u de identificatie van het proefdier en markeert u vervolgens de staart met een niet-toxische permanente marker om het te onderscheiden van muizen die de procedure nog niet hebben doorlopen. Plaats een muis gedurende ongeveer vijf seconden in het overdrachtsbekerglas. Giet de muis vervolgens voorzichtig uit het bekerglas in het pre-handling bad en laat de muis 20 seconden in het bad.Nadat de tijd is verstreken, plaatst u voorzichtig een schep voor de muis zonder deze schuin te houden. Laat de muis de schep betreden en verkennen. Indien nodig stimuleert u de muis om op de schep te gaan door de schep voorzichtig onder de muis te schuiven terwijl u deze langzaam optilt. Let erop dat u de muizen niet met de schep verschrikt.Herhaal deze procedures voor elke muis in de kooi één keer per dag gedurende 10 dagen. Verzamel na elk dier de fecale bolussen en bodembedekking uit de bak met een net, waarbij de overzetbeker tussen de kooien wordt gebruikt. Voer de zichtbare training uit op de testdagen één, twee en drie, met zes pogingen per dag en ongeveer 10 minuten tussen elke poging.Stel eerst de software voor het bijhouden van de prestaties van muizen in en maak de runsheets aan volgens de instructies in het tekstgedeelte van het protocol. Zodra de software is geconfigureerd, wordt de kamer ingericht door eerst gordijnen op te hangen zodat alle ruimtelijke aanwijzingen worden afgeschermd. Stel vervolgens de bak in door deze te vullen met kraanwater bij 21 °C.Gebruik een thermometer om er zeker van te zijn dat de watertemperatuur tijdens de gehele test binnen één graad van deze temperatuur blijft. Plaats het platform, voorzien van een gemonteerde vlag met een hoogte van 13 centimeter en afmetingen van 4,5 bij 4,5 centimeter met daarop een in reliëf aangebracht vet S-vormig teken, op de eerste vooraf bepaalde locatie in de kuip, zodanig dat het ongeveer één inch boven het wateroppervlak uitsteekt.Pak nu de eerste muis uit de kooi. Verifieer de identificatie van het proefdier, markeer de staart met een permanente marker in de juiste kleur en plaats de muis in een overdrachtsbeker. Plaats de muis voorzichtig in de bak.Start de timer en zorg ervoor dat de trackingsoftware het dier volgt. Geef de muis tot twee minuten de tijd om het platform te vinden. Zodra de muis het platform heeft gevonden, laat u de muis 20 seconden op het platform verblijven.Als het dier het platform niet binnen de periode van twee minuten vindt, wordt de muis opgevist en gedurende 20 seconden op het platform geplaatst. Na 20 seconden op het platform wordt de muis van het platform verwijderd, zoals gedaan bij de acclimatisatietraining, en geplaatst in een verwarmde kooi bekleed met papieren handdoeken en verwarmd tot ongeveer 31 °C met een warmtemat en warmtelamp gedurende 30 seconden. Plaats de muis vervolgens in de houdkooi met enkel een warmtemat, maar zonder warmtelamp, om te herstellen tussen de proeven.Nadat de kuip met een net is schoongemaakt van vuil, worden deze stappen herhaald voor elke muis in de groep. Wanneer de eerste proef voor elke muis is voltooid, wordt het platform naar de tweede vooraf bepaalde locatie verplaatst. Voer de training met het verborgen platform uit van dag vier tot en met dag 10 na het ophangen van de gordijnen.Plaats, zoals eerder beschreven, strategisch cues op de gordijnen. Zorg ervoor dat de cues groot zijn en contrasterende kleuren bevatten voor een betere zichtbaarheid, en dat ze op een afstand en hoogte zijn geplaatst waarbij ze voor de muizen vanuit de bak zichtbaar zijn. Configureer de software volgens de instructies in het geschreven gedeelte van het protocol.Stel vervolgens de bak in door deze eerst te vullen met water, zodat het platform zich ongeveer vijf millimeter onder het wateroppervlak bevindt. Plaats het platform op de vooraf bepaalde locatie. De positie van het platform blijft gedurende alle dagen en tests constant.Het is essentieel om de startlocatie te variëren, zodat de dieren geen niet-ruimtelijke, niet-hippocampale motorische strategie ontwikkelen. Om het doolhof op te lossen, gebruik je niet-giftige witte temperaverf om het water ondoorzichtig te maken. Doe dit om ervoor te zorgen dat de bovenkant van het platform onzichtbaar is vanaf het ooghoogte-niveau van het dier tijdens het zwemmen.Nadat de muizen vooraf zijn geïdentificeerd en gemarkeerd, wordt de muis voorzichtig in het doolhof geplaatst, waarbij de neus naar de wand is gericht. Elke muis wordt voor elke unieke trial op dezelfde startlocatie geplaatst. Start de timer op het moment dat de muis wordt losgelaten en neem positie in een gebied waar de tester niet gemakkelijk zichtbaar is voor de muizen.Zodra het dier het platform bereikt, laat het dan 15 seconden op het platform blijven om zijn ruimtelijke positie in de kamer te oriënteren. Als de muis het platform niet binnen 60 seconden vindt, schep de muis dan voorzichtig op en plaats deze op het platform. Na 15 seconden op het platform haalt u de muis uit het doolhof en plaatst u deze terug in de verwarmde kooi.Nadat het doolhof vooraf is gereinigd van vuil, worden deze procedures herhaald voor de overige muizen in de groep. Voer voor testdagen vier tot en met negen dus dagelijks vier trainingstrials met het verborgen platform uit, met ongeveer 20 minuten tussen elke trial. Voer probe-trials uit voorafgaand aan de platformtraining op dag zes, zeven en acht, en voer vervolgens de laatste probe-trial uit.Voer op dag 10 de probe-tests uit op een vergelijkbare manier als de training met het verborgen platform, met als enige uitzondering dat er geen platform in het doolhof aanwezig is. Laat een muis los vanuit een vooraf bepaald loslaatpunt en geef de muis 60 seconden de tijd om in het doolhof te zwemmen. Na de probe-test op dag 10 worden er tijdens de probe-tests geen verdere tests uitgevoerd. Gebruik de software voor dierentracering om de afgelegde weg van het dier, het percentage van de tijd dat het dier in elk kwadrant van het doolhof doorbrengt en het aantal keren dat een dier over het gebied zwemt waar zich voorheen het platform bevond, bij te houden.Open het tabblad met de experimentele lijst en haal de metingen op uit het tabblad voor data-analyse en het tabblad van het waterdoolhof. Exporteer deze direct naar een Excel-spreadsheet. Analyseer vervolgens de gegevens volgens de instructies in het geschreven gedeelte van het protocol.41 TP 3 0 1 L-muizen die het menselijke P 3 0 1 LTL-gen bevatten en 46 controles werden volgens dit protocol getest op een leeftijd van ongeveer 6,5 maand. Dit komt overeen met drie maanden Tau P 3 0 1 L-expressie bij de transgenen. Elke groep bevatte ongeveer gelijke aantallen mannetjes en vrouwtjes path length.Training met het onzichtbare platform verschilde niet tussen de controlegroep en de TP 3 0 1 L-muizen. Dit gebrek aan verschil geeft aan dat de controle- en tau P 3 0 1 LM-groepen niet verschillen in visuele of locomotorische vermogens, en dat prestatiedeficiënties tijdens de tests met het verborgen platform daarom kunnen worden toegeschreven aan geheugenstoornissen. Tijdens de training met het verborgen platform vertoonden TP 3 0 1 LM echter significant langere padlengtes over alle trainingsblokken.Ten slotte verbeterden de resultaten van de controlegroep gedurende de vier probe-runs. Terwijl de Tau P 3 0 1 L-muizen dit niet deden, waren de controlemuizen beter in staat om een ruimtelijke strategie te gebruiken om de taak op te lossen en hadden zij beter geleerd het platform in de doelzone te lokaliseren. Bij het aanpassen van deze procedure voor gebruik met andere muislijnen is het belangrijk om de leersnelheid van de controlegroep te beoordelen, om het aantal benodigde trainingsruns met rake treffers te identificeren en om te bepalen wanneer de eerste probe-run moet worden ingevoegd.

morris-water-maze-test-optimization-for-mouse-strain-testing

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

De Morris water maze is een goed geaccepteerd instrument dat wordt gebruikt om de betrokkenheid van de hippocampus in een gedrags-taak document.

Morris Water Maze Experiment

De Lashley III doolhof is een route-learning taak die niet afhankelijk is van aversieve stimuli of visuele cues. Het is dus een zeer aantrekkelijke optie voor het evalueren van leren en geheugen, vooral in ouder worden muizen of anderszins waar stress is een overweging.

Lage-stress Route leren met behulp van de Lashley III Maze in Muizen

Ondiep water (Peddelen) Varianten van het Water Maze Tests in Muizen

De Morris Water Maze is een gedrags taak om hippocampus-afhankelijke leer-en geheugen te testen. Het is op grote schaal gebruikt in de studie van neurobiologie, neurofarmacologie en neurocognitieve stoornissen in knaagdier modellen.

Morris Water Maze test voor leren en geheugen Tekortkomingen in de ziekte van Alzheimer Model Muizen

Cognitieve stoornissen als gevolg van radiotherapeutische behandeling van hersentumoren vormen een klinisch hardnekkige aandoening die de kwaliteit van leven nadelig beïnvloedt. De mogelijkheid om potentiële interventies voor het verbeteren van stralingsgeïnduceerde cognitieve achteruitgang kritisch te evalueren, hangt uiteindelijk af van het vermogen om rigoureuze kwantitatieve beoordelingen van de cognitie uit te voeren.

Kwantificeren Cognitieve Vermindert Veroorzaakt door Cranial Radiotherapie

De droge land Barnes doolhof wordt veel gebruikt om ruimtenavigatie vermogen te meten in reactie op licht aversieve stimuli. Over opeenvolgende dagen, de prestaties (bijvoorbeeld latency te ontsnappen kooi lokaliseren) van controlepersonen verbetert, indicatief voor normale leren en geheugen. Verschillen tussen ratten en muizen noodzakelijk apparatuur en methodiek veranderingen die hier worden beschreven.

Barnes Maze Teststrategieën met de kleine en grote knaagdieren modellen

Een uitgebreide gedrags testbatterij van motorische vaardigheden, stemming — met inbegrip van sociale interactie, depressie en angst — en cognitie is ontworpen voor de herhaalde beoordeling van neurodegeneratie-gerelateerde gedragsveranderingen bij muizen.

Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen

Hierin, een protocol om de Morris water doolhof tests uit te voeren om het vermogen van het leren en het geheugen van de ziekte van Alzheimer model muizen te evalueren en om het effect van handmatige acupunctuur voor de behandeling van hen te beoordelen wordt beschreven.

Analyse van leren en geheugen vermogen in een ziekte van Alzheimer muis model met behulp van de Morris water Maze

Hier presenteren we een protocol om hypoxie op te wekken bij neonatale muizen door ze af te leveren in gecontroleerde omgevingen met variërende zuurstofconcentraties. Muismodellen die bij de geboorte aan zuurstofvariaties zijn blootgesteld, hebben de expressie van miRNA's die betrokken zijn bij de inductie van gedragsfenotypische veranderingen zoals autisme duurzaam gevarieerd.

Hypoxie verandert de miRNA-niveaus die betrokken zijn bij niet-Mendeliaanse overerving van autismespectrumstoornis bij muizen

Het achtarmige radiale waterlabyrint is ontworpen om referentie- en werkgeheugenprestaties gelijktijdig te evalueren door proefpersonen te verplichten extra-labyrintsignalen te gebruiken om ontsnappingsplatforms te lokaliseren en verhelpt de beperkingen die zijn waargenomen in landgebaseerde radiale armlabyrintontwerpen.

Gebruik van een acht-arm Radial Water Maze te Werken en Reference geheugen Assess Na Neonatale Hersenletsel

Leer de Morris water maze-methode voor het beoordelen van cognitieve tekorten bij muismodellen van Alzheimer. Dit protocol optimaliseert testomgeving en achtergrondstam voor nauwkeurige resultaten.

Morris Water Maze Test: Optimalisatie voor Mouse Strain en testomgeving

Meer video's verkennen