Name: Chick Heart Invasion Assay voor het testen van de Invasiviteit van kankercellen en de activiteit van potentieel anti-invasieve verbindingen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 16 s
Description: Leer een orgaankweekmethode om tumorinvasie in drie dimensies te bestuderen met embryonale kippenhartfragmenten. Deze techniek helpt onderzoekers anti-invasieve geneesmiddelen te testen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We danken Marleen De Meulemeester voor het demonstreren van de assaytechniek in de videofilm. B. I. R. is een postdoctorale onderzoeksassistent van het Fonds voor Wetenschappelijk Onderzoek – Vlaanderen (FWO – Vlaanderen). L.M.M. is een ontvanger van een Emmanuel van der Schueren-beurs van de Vlaamse Liga tegen Kanker.

<ol><li>Mareel, M. M., Bracke, M. E., Van Roy, F. M., de Baetselier, P. Molecular mechanisms of cancer invasion. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMareel%2C+MM+%22Encyclopedia+of+Cancer%22">Encyclopedia of Cancer</a>. JR, B. ertino 2, Academic Press. San Diego. 1072-1083 (1997).</li>
<li>Mareel, M., Kint, J., Meyvisch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+study+of+the+invasion+of+malignant+C3H+mouse+fibroblasts+into+embryonic+chick+heart+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Virchows+Arch.+B.+Cell+Pathol.+Incl.+Mol.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Methods of study of the invasion of malignant C3H mouse fibroblasts into embryonic chick heart in vitro.</a> Virchows Arch. B. Cell Pathol. Incl. Mol. Pathol. 30 (1), 95-111 (1979).</li>
<li>Albini, A., Noonan, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%E2%80%98chemoinvasion%E2%80%99+assay%2C+25+years+and+still+going+strong%3A+the+use+of+reconstituted+basement+membranes+to+study+cell+invasion+and+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The ‘chemoinvasion’ assay, 25 years and still going strong: the use of reconstituted basement membranes to study cell invasion and angiogenesis.</a> Curr. Opin. Cell Biol. 22 (5), 677-689 (2010).</li>
<li>De Wever, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+cell+and+spheroid+collagen+type+I+invasion+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Single cell and spheroid collagen type I invasion assay.</a> Methods Mol. Biol. 1070, 12-35 (2014).</li>
<li>Wolff, E., Schneider, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((La+transplantation+prolong%C3%A9e+d%E2%80%99un+sarcome+de+souris+sur+des+organes+embryonnaires+de+poulet+cultiv%C3%A9s+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22C.R.+Seances+Soc.+Biol.+Fil%22%5BJournal%5D)">La transplantation prolongée d’un sarcome de souris sur des organes embryonnaires de poulet cultivés in vitro.</a> C.R. Seances Soc. Biol. Fil. 151 (7), 1291-1292 (1957).</li>
<li>Easty, G. C., Easty, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+organ+culture+system+for+the+examination+of+tumor+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An organ culture system for the examination of tumor invasion.</a> Nature. 199, 1104-1105 (1963).</li>
<li>Schleich, A. B., Frick, M., Mayer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+invasive+growth+in+vitro.+Human+decidua+graviditatis+confronted+with+established+human+cell+lines+and+primary+human+explants%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Natl.+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Patterns of invasive growth in vitro. Human decidua graviditatis confronted with established human cell lines and primary human explants.</a> J. Natl. Cancer Inst. 56 (2), 221-237 (1976).</li>
<li>Sys, G. M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+In+ovo+CAM-assay+as+a+Xenograftodel+for+Sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">The In ovo CAM-assay as a Xenograftodel for Sarcoma.</a> J. Vis. Exp. (77), e50522(2013).</li>
<li>Bracke, M. E., Van Larebeke, N. A., Vyncke, B. M., Mareel, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinoic+acid+modulates+both+invasion+and+plasma+membrane+ruffling+of+MCF-7+human+mammary+carcinoma+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Retinoic acid modulates both invasion and plasma membrane ruffling of MCF-7 human mammary carcinoma cells in vitro.</a> Br. J. Cancer. 63 (6), 867-872 (1991).</li>
<li>Vermeulen, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transition+from+the+noninvasive+to+the+invasive+phenotype+and+loss+of+alpha-catenin+in+human+colon+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Transition from the noninvasive to the invasive phenotype and loss of alpha-catenin in human colon cancer cells.</a> Cancer Res. 55 (20), 4722-4728 (1995).</li>
<li>Parmar, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-invasive+activity+of+3%2C7-dimethoxyflavone+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharma.+Sci%22%5BJournal%5D)">Anti-invasive activity of 3,7-dimethoxyflavone in vitro.</a> J. Pharma. Sci. 83 (9), 1217-1221 (1994).</li>
<li>Parmar, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-invasive+activity+of+alkaloids+and+polyphenolics+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Anti-invasive activity of alkaloids and polyphenolics in vitro.</a> Bioorg. Med. Chem. 5 (8), 1609-1619 (1997).</li>
<li>Gaillard, P. J. Organ culture technique using embryologic watch glasses. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGaillard%2C+PJ+%22Methods+in+Medical+Research%22">Methods in Medical Research</a>. MB, V. isser 2, Year Book Publishers. Chicago. 241-24 (1951).</li>
<li>Romeis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Das+mikrotom%5BTitle%5D)+AND+%22Mikroskopische+Technik.+15+Verb.+Aufl.+Kapitel%22%5BJournal%5D)">Das mikrotom.</a> Mikroskopische Technik. 15 Verb. Aufl. Kapitel. 7, München: Leibniz. 114-120 (1948).</li>
<li>Van Marck, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P-cadherin+promotes+cell-cell+adhesion+and+counteracts+invasion+in+human+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">P-cadherin promotes cell-cell adhesion and counteracts invasion in human melanoma.</a> Cancer Res. 65 (19), 8774-8783 (2005).</li>
<li>Attia, M. A., Weiss, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunology+of+spontaneous+mammary+carcinomas+in+mice.+V.+Acquired+tumor+resistance+and+enhancement+in+strain+A+mice+infected+with+mammary+tumor+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Immunology of spontaneous mammary carcinomas in mice. V. Acquired tumor resistance and enhancement in strain A mice infected with mammary tumor virus.</a> Cancer Res. 26 (8), 1787-1800 (1966).</li>
<li>Katritzky, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((QSAR+modeling+of+anti-invasive+activity+of+organic+compounds+using+structural+descriptors%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">QSAR modeling of anti-invasive activity of organic compounds using structural descriptors.</a> Bioorg. Med. Chem. 14 (20), 6933-6939 (2006).</li>
<li>McKinnell, R. G., Bruyneel, E. A., Mareel, M. M., Seppanen, E. D., Mekala, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+in+vitro+by+explants+of+Lucke+renal+carcinoma+cocultered+with+normal+tissue+is+temperature+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Invasion in vitro by explants of Lucke renal carcinoma cocultered with normal tissue is temperature dependent.</a> Clin. Exp. Metastasis. 4 (4), 237-243 (1986).</li>
<li>Wanson, J. C., de Ridder, L., Mosselmans, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+of+hyperplastic+nodule+cells+from+diethylnitrosamine+treated+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Invasion of hyperplastic nodule cells from diethylnitrosamine treated cells.</a> Cancer Res. 41 (12 Pt 1), 5162-5175 (1981).</li>
<li>Mareel, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+on+invasion+of+MO4+mouse+fibrosarcoma+cells+in+organ+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature on invasion of MO4 mouse fibrosarcoma cells in organ culture.</a> Clin. Exp. Metastasis. 2 (2), 107-125 (1984).</li>
<li>Laerum, O. D., Steinsvag, S., Bjerkvig, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+and+tissue+culture+of+the+central+nervous+system%3A+recent+developments+and+current+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Cell and tissue culture of the central nervous system: recent developments and current applications.</a> Acta Neurol. Scand. 72 (6), 529-549 (1985).</li>
<li>Schroyens, W., Mareel, M. M., Dragonetti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+invasiveness+of+human+bladder+cancer+from+cell+lines+and+biopsy+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metastasis%22%5BJournal%5D)">In vitro invasiveness of human bladder cancer from cell lines and biopsy specimens.</a> Clin. Exp. Metastasis. 1 (2), 153-162 (1983).</li>
<li>Mareel, M. M., De Bruyne, G. K., Vandesande, F., Dragonetti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+study+of+embryonic+chick+heart+invaded+by+malignant+cells+in+three+dimensional+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Invasion+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical study of embryonic chick heart invaded by malignant cells in three dimensional culture.</a> Invasion Metastasis. 1 (3), 195-204 (1981).</li>
<li>Bjerkvig, R., Laerum, O. D., Mella, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioma+cell+interactions+with+fetal+rat+brain+aggregates+in+vitro+and+with+brain+tissue+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Glioma cell interactions with fetal rat brain aggregates in vitro and with brain tissue in vivo.</a> Cancer Res. 46 (8), 4071-4079 (1986).</li>
<li>Bracke, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confrontation+of+an+invasive+%28MO4%29+and+a+non-invasive+%28MDCK%29+cell+line+with+embryonic+chick+heart+fragments+in+serum-free+culture+media%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Confrontation of an invasive (MO4) and a non-invasive (MDCK) cell line with embryonic chick heart fragments in serum-free culture media.</a> In Vitro Cell Dev. Biol. 22 (9), 508-514 (1986).</li>
<li>Mareel, M. M., Bracke, M. E., Storme, G. A. Mechanisms of tumor spread: a brief overview. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMareel%2C+MM+%22Cancer+Campaign.+9%3A+The+Cancer+Patient%22">Cancer Campaign. 9: The Cancer Patient</a>. Grundmann, E. , Gustav Fisher Verlag. Stuttgart and New York. 59-64 (1985).</li>
<li>De Neve, W. J., Storme, G. A., De Bruyne, G. K., Mareel, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+image+analysis+system+for+the+quantification+of+invasion+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metast%22%5BJournal%5D)">An image analysis system for the quantification of invasion in vitro.</a> Clin. Exp. Metast. 3 (2), 87-101 (1985).</li>
<li>Smolle, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+evaluation+of+melanoma+cell+invasion+in+three-dimensional+confrontation+cultures+in+vitro+using+automated+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Invest.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Quantitative evaluation of melanoma cell invasion in three-dimensional confrontation cultures in vitro using automated image analysis.</a> J. Invest. Dermatol. 94 (1), 114-119 (1990).</li>
<li>Bracke, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((flavonoid+effect+on+tumor+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Technol%22%5BJournal%5D)">flavonoid effect on tumor invasion and metastasis.</a> Food Technol. 48 (11), 121-124 (1994).</li>
<li>Bracke, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+tangeretin+on+tamoxifen%E2%80%99s+therapeutic+benefit+in+mammary+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Natl.+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">The influence of tangeretin on tamoxifen’s therapeutic benefit in mammary cancer.</a> J. Natl. Cancer Inst. 91 (4), 354-359 (1999).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen hebben.

Tijdens de voorbereiding van PHF&#39;s, kunnen de fragmenten niet blijven in suspensie, maar houden aan de vaatwand; Dit kan worden ondervangen door het volume van het kweekmedium. Als het aantal PHFs is te laag en hun grootte is te groot, te verlagen van het volume van het kweekmedium. Falen van de testcellen om te aggregeren kan te wijten zijn aan schommelingen in de temperatuur of microbiële infectie. Als alternatief kan een onvermogen om te aggregeren een intrinsieke eigenschap van de cellen. Bij bevestiging van de ...

Invasion is het kenmerk van kwaadaardige tumoren. Deze activiteit leidt niet alleen tot de vernietiging van de omringende weefsels, maar is ook betrokken bij metastasevorming. Aangezien patiënten sterven aan kanker en metastase, en efficiënt anti-invasieve behandelingen zijn nog schaars, laboratoriumtesten die bootsen de invasie van tumorcellen ontwikkeld. Het doel van de kippehart assay is een relevant orgaan kweekmethode op tumorinvasie bestuderen bij drie dimensies bieden. De test kan onderscheid maken tussen invasieve en niet-invasieve cellen, en laat de effecten van testverbindingen op tumorinvasie te bestuderen. De rationale achter het gebruik van de test is het idee dat tumoren ecosystemen waarbij de neoplastische cellen continu communiceren met hun stroma (gastheercellen en de extracellulaire matrix), en die door deze moleculaire interacties invasie verfijnd 1. Dus, in de assay tumorcellen worden geconfronteerd living embryonale kippehart 2 fragmenten, die niet alleen dienen als substraten voor invasie van de tumorcellen, maar ook als bron van verschillende bindweefselcellen en matrixelementen. De kippehart bevat myocyten, fibroblasten en endotheliale cellen en de extracellulaire matrix is ​​samengesteld uit laminine, fibronectine en verschillende soorten collageen. Op deze manier wordt de driedimensionale orgaankweek techniek omvat vele cellulaire en moleculaire interacties betrokken zijn bij de invasie van tumoren van patiënten. Het belangrijkste voordeel van het kippehart assay is de implementatie van stromale effecten. Dit aspect is vollediger dan in andere invasie in vitro assays die zijn gebaseerd op tumorcel invasie in niet-levende gels bestaande uit basaalmembraan 3 of 4 interstitiële matrix moleculen. Het concept van confrontatie tussen tumorcellen en normale leven gastheerweefsel zoals in orgaankweek experimenten werd door verscheidene ingevoerdauteurs waaronder Wolff en Schneider in Frankrijk 5, Easty en Easty in het Verenigd Koninkrijk 6 en Schleich in Duitsland 7. Twee technische voordelen van het kippehart invasie assay via genoemde werkwijzen is dat het volume van de fragmenten gemakkelijk gestandaardiseerd kan zijn, en dat deze documenten contractiele die functionele integriteit controle toelaat tijdens orgaankweek. Bovendien worden vogelembryo&#39;s de voorkeur, omdat zij gemakkelijk kunnen worden ontleed uit de steriele inhoud van het ei. De test moet conceptuele gelijkenis met het kuiken chorioallantois membraan assay 8 door het aanbieden van een complex stromale rondom de tumorcellen. De test is met succes toegepast om onderscheid te maken tussen invasieve en niet-invasieve cellen varianten van dezelfde menselijke tumoren zoals in de MCF-7 (borstklier) 9 en HCT-8 (colon) 10 cellijn families. De techniek is nuttig om potentieel anti-invasieve testverbindingen en <sup&gt; 11,12. Zoals verder uitgelegd, kan het worden gebruikt voor de vaststelling van structuur-activiteit relaties van kleine organische moleculen. De test maakt echter geen rekening gehouden met de bijdrage van immunologische cellen kankerinvasie. Er zij op gewezen dat de techniek niet kan worden beschouwd als een high-throughput analysesysteem, vanwege het grote aantal manipulaties, het beperkte aantal test runs (maximum 30 culturen) en de lange doorlooptijd (ongeveer 1 maand).

<table><tbody><tr><td>Ringer's salt solution</td><td>Braun</td><td>CEO123</td><td></td></tr><tr><td>Bacto-agar</td><td>Becton Dickinson</td><td>214010</td><td></td></tr><tr><td>Tris-(hydroxymethyl)-aminomethaan Analar</td><td>VWR</td><td>103157P</td><td></td></tr><tr><td>BSA : albumin van runderserum, cohn V fract.</td><td>Sigma</td><td>A4503-500G</td><td></td></tr><tr><td>MEM-Rega 3</td><td>Life Technologies&nbsp;</td><td>19993013</td><td></td></tr><tr><td>Gyrotory shakers</td><td>New Brunswick Scientific</td><td>G10 en G33</td><td></td></tr><tr><td>Erlenmeyer kolven 50 ml</td><td>Novolab</td><td>92717</td><td></td></tr><tr><td>Glas Petri-schalen</td><td>Novolab</td><td>68516</td><td></td></tr><tr><td>Iridectomieschaar</td><td>Rumex</td><td>11-0625</td><td></td></tr><tr><td>Macroscoop met gekalibreerd oculair raster</td><td>Wild</td><td>157702</td><td></td></tr><tr><td>Paraffinewas</td><td>International Medical products</td><td>8599956</td><td></td></tr><tr><td>Eosine Y</td><td>Sigma</td><td>230251-25g</td><td></td></tr><tr><td>Harris' hematoxylinen</td><td>Sigma</td><td>HHS32-1L</td><td></td></tr><tr><td>Coverslipresin (Tissue-Tek)</td><td>Sakura</td><td>4494</td><td></td></tr><tr><td>Paraffine smeltapparaat</td><td>GFL</td><td>1052</td><td></td></tr><tr><td>Microtoom voor paraffine-sectie</td><td>Reichert</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stoppers voor Erlenmeyer kolven met gas in- en uitlaten</td><td>Novolab</td><td>2602421 en 260243</td><td></td></tr><tr><td>Diaminobenzidine</td><td>Sigma</td><td>D8001</td><td></td></tr><tr><td>REAX slingertafel</td><td>Heidolph</td><td>54131</td><td></td></tr><tr><td>24-well tissue schotels</td><td>VWR</td><td>NUNC142475</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmologische enucleatielepel</td><td>Rumex</td><td>16-060</td><td></td></tr><tr><td>Scherpe forceps</td><td>Rumex</td><td>4-111T</td><td></td></tr><tr><td>Blunt forceps</td><td>Nickel-Electro LTD</td><td>7112</td><td></td></tr><tr><td>Erlenmeyer kolven 5 ml</td><td>Novolab</td><td>211901</td><td></td></tr><tr><td>Microscoopglaasjes gewassen en ontvet</td><td>International Medical products</td><td>8613908</td><td></td></tr></tbody></table>

chick heart invasion assay voor het testen van de invasiviteit van kankercellen en de activiteit van potentieel anti-invasieve verbindingen

Chick Heart Invasion Assay for Testing the Invasiveness of Cancer Cells and the Activity of Potentially Anti-invasive Compounds

Het doel van de kippehart assay is een relevant orgaan kweekmethode op tumorinvasie bestuderen bij drie dimensies bieden. De test kan onderscheid maken tussen invasieve en niet-invasieve cellen, en maakt onderzoek naar de effecten van testverbindingen op tumorinvasie. Kankercellen - hetzij als aggregaten of enkele cellen - geconfronteerd worden met fragmenten van embryonale kuiken hart. Na orgaankweek in suspensie gedurende een paar dagen of weken de tegenover cultures gefixeerd en ingebed in paraffine voor histologische analyse. Het driedimensionale interactie tussen kankercellen en normale weefsel wordt vervolgens gereconstrueerd uit opeenvolgende coupes gekleurd met hematoxyline-eosine of na immunohistochemische kleuring voor epitopen in het hartweefsel of de naar elkaar kankercellen. De assay is consistent met de recent concept dat kankerinvasie het gevolg van moleculaire interacties tussen kankercellen en hun naburige stromale ontvangende elementen (myofibroblasten, endothEliel cellen, extracellulaire matrix componenten, etc.). Hier wordt dit stromale omgeving aangeboden aan de kankercellen als levend weefsel fragment. Ondersteuning aspecten de relevantie van de assay zijn meerdere. Invasie in de test volgens de criteria van kankerinvasie: progressief bezetting en vervanging in tijd en ruimte van het gastheerweefsel en invasiviteit en niet-invasief in vivo van de tegenover cellen doorgaans correleert met de uitkomst van de assay. Bovendien is de invasie patroon van cellen in vivo, zoals bepaald door pathologen, blijkt uit de histologische beelden in de assay. Kwantitatieve structuur-activiteitsrelatie (QSAR) analyse van de met vele mogelijke anti-invasieve organische verbindingen congeneer resultaten kon de studie van structuur-activiteit relaties voor flavonoïden en chalconen en bekende anti-metastatische geneesmiddelen in de kliniek gebruikt (bijvoorbeeld, microtubule remmers ) remt invasie in de test ook. However, de assay geen rekening immunologisch bijdragen kankerinvasie.

De histologische secties zoals aangegeven in figuur 5 tonen het resultaat van een aantal succesvolle assays. Het geluid histologie van de kweken aangeeft levensvatbare cellen en maakt het mogelijk om de interactie tussen tumorcellen en normale weefsels interpreteren. Bovendien kan geen immune reactie van het normale weefsel worden waargenomen, die de correcte leeftijd van het kippenembryo&#39;s bijvoorbeeld gebruikt bevestigt vóór de afstoting systeem ontwikkeld. Er zijn geen zichtbare bacteriën die zo...

Hier presenteren we een protocol om de invasie van tumorcellen bestuderen in levende normaal weefsel fragmenten in drie dimensies. Dit orgelcultuur techniek wordt vooral toegepast om potentieel anti-invasieve drugs testen in vitro.

Chick Heart Invasion Assay voor het testen van de Invasiviteit van kankercellen en de activiteit van potentieel anti-invasieve verbindingen

The goal of the chick heart assay is to offer a relevant organ culture method to study tumor invasion in three dimensions. The assay can distinguish ...

Het algemene doel van deze procedure is om een relevante orgaankweekmethode aan te bieden voor het bestuderen van tumorinvasie in drie dimensies. Dit wordt bereikt door eerst normale weefselfragmenten voor te bereiden die zijn verkregen uit embryonale kippenharten. In de tweede stap worden aggregaten van tumorcellen in suspensie klaargemaakt.De tumorcelaggregaten worden vervolgens individueel geconfronteerd met de normale weefselfragmenten op een semi-solide agarbed voor incubatie in een suspensiecultuur. In de laatste stap worden de geconfronteerde culturen gefixeerd voor paraffine-inbedding en histologische doorsneden. Uiteindelijk kan de invasie van de tumorcellen in de weefselfragmenten worden gevisualiseerd door seriële microscopische analyse van de weefselcoupes.Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden, zoals invasie-assays met gels, is dat tumorcellen bij deze techniek worden blootgesteld aan driedimensionale levende weefselfragmenten. De implicaties van deze techniek strekken zich uit tot de therapie van kanker, aangezien er een onvervulde behoefte is aan anti-invasieve geneesmiddelen. Over het algemeen zullen personen die onbekend zi

chick-heart-invasion-assay-for-testing-invasiveness-cancer-cells

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Deze video laat zien hoe cel invasie te meten door middel van celkweek voegt met behulp van een fluorescentie-gebaseerde methodiek.

Een In vitro FluoroBlok Tumor Invasion Assay

Een real-time elektrische Impedantie Gebaseerd Techniek om invasie van endotheelcellen monolaag meten door Cancer Cells

Interstitiële vloeistof stroom wordt verhoogd in solide tumoren en kan moduleren tumorcel invasie. Hier beschrijven een techniek interstitiële fluïdumstroming toepassing cellen ingebed in een matrix en meet de gevolgen celinvasie. Deze techniek kan gemakkelijk worden aangepast aan andere te bestuderen.

Drie-dimensionale Cultuur van de Cel Model voor het meten van de effecten van het interstitiële vocht Flow op tumorcel invasie

This video describes an invasion assay using a three-chambered array based on electrical impedance. This technique measures the invasive potential of cancer cells under the influence of soluble factors secreted by the resident stromal cells in tumor microenvironments.

Three-Chambered Array-Based Impedance Assay: A Real-Time Analysis Technique to Assess Invasive Potential of Cancer Cells by Measuring Electrical Impedance

Vaak gebruikt, zijn zeer toegankelijk methoden voor de behandeling van cel migratie en invasie in vitro beschreven. De eerste methode is de cel wondsluiting assay die celmotiliteit meet. De tweede methode is de transwell migratie en invasie assay die de chemotactische en invasieve vermogen van cellen beoordeelt.

In vitro cel-migratie en invasie assays

Dit videoartikel beschrijft een gewijzigde in vitro methode om de rol van hormonen, cytokinen en/of groeifactoren bij het aanjagen van kankercelinvasie te onderzoeken.

Gemodificeerd<em&gt; In vitro</em&gt; Invasion Assay naar de mogelijke rol van hormonen, cytokines en / of groeifactoren in Bemiddelen Cancer Cell Invasion Bepaal

Deze methode evalueert de invasie van kankercellen uit sferoïden in een omringende 3D-matrix.  Sferoïden worden gegenereerd via de hanging drop-kweekmethode en vervolgens ingebed in een matrix bestaande uit basement membraanmaterialen en type I collageen.  Invasie uit de sferoïden wordt vervolgens gemonitord.

Een Cancer Cell Sferoïde Assay om Invasion beoordelen in een 3D-instelling

Dit protocol beschrijft een omgekeerde verticale invasie-bepaling die kan worden gebruikt om het kwantificeren van de mogelijkheden voor migratie en invasie van cellen in een driedimensionale omgeving met behoud van de cel-communicatie. Deze test is geschikt voor zeldzame en/of gevoelige cellen.

Verplaatsen naar boven: Een eenvoudig en flexibel In Vitro driedimensionale invasie Assay Protocol

De in vitro Cell Invasion assay wordt gebruikt om het potentieel van kanker metastasen te meten door het cellulaire potentieel voor invasie en migratie te kwantificeren met behulp van celkweek inserts met eiwit matrix. Cellen worden uitgedaagd om te migreren door de eiwit matrix en een poreus membraan, naar een chemoaantretant, en vervolgens gekwantificeerd door lichte microscopie.

Het gebruik van muizen-borstkanker tumor cellen in een in vitro invasie assay als een maat voor oncogene Celgedrag

Dit is een effectieve methode om te screenen op suppressors of drivers van kankermetastase. Cellen, getransduceerd met een expressiebibliotheek, worden geïnjecteerd in het kippen chorioallantoïsche membraan vasculatuur om gemetastaseerde kolonies te vormen. Kolonies met verminderde of verhoogde invasiviteit worden verwijderd, uitgebreid, opnieuw geïnjecteerd om hun fenotype te bevestigen en ten slotte geanalyseerd met behulp van sequencing met hoge doorvoer.

Ontdekking van gemetastaseerde regulatoren met behulp van een snel en kwantitatief intravital chick chorioallantoic membraanmodel

We beschrijven een aanpak om invasieve celsubpopulaties in realtime te detecteren en vast te leggen. Het experimentele ontwerp maakt gebruik van Real-Time Cellular Analysis door veranderingen in de elektrische impedantie van cellen te monitoren. Invasieve kanker, immuun-, endotheel- of stromale cellen in complexe weefsels kunnen worden vastgelegd en de impact van coculturen kan worden beoordeeld.

Real-time detectie en vastlegging van invasieve celsubpopulaties uit coculturen

Leer een orgaankweekmethode om tumorinvasie in drie dimensies te bestuderen met embryonale kippenhartfragmenten. Deze techniek helpt onderzoekers anti-invasieve geneesmiddelen te testen.

Chick Heart Invasion Assay voor het testen van de Invasiviteit van kankercellen en de activiteit van potentieel anti-invasieve verbindingen (Video) | JoVE Journal

Chick Heart Invasion Assay voor het testen van de Invasiviteit van kankercellen en de activiteit van potentieel anti-invasieve verbindingen

Meer video's verkennen