20 oktober 2015
Het doel van dit manuscript is om de stappen te beschrijven die nodig zijn om een niertransplantatie uit te voeren bij een muis, met bijzondere aandacht voor de details van de arteriële anastomose.
Het algemene doel van deze procedure is om een gemodificeerde arteriële anastomosetechniek voor niertransplantaties bij muizen te demonstreren. Dit wordt bereikt door eerst zorgvuldig de relevante vaten bij de donor te disseceren. De tweede stap is om een hiel- en teenmanchet van de donor buikslagader naast de nierarterie te creëren.
Vervolgens wordt deze hiel- en teenmanchet gebruikt om de arteriële anastomose bij de ontvanger te vormen. Uiteindelijk zou deze techniek moeten resulteren in zeer lage incidentie van arteriële trombose. Deze video laat je zien hoe je een arteriële hiel- en teenmanchet kunt maken om niertransplantaties in de mond te vergemakkelijken.
Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van weerstandsmethoden is dat de bloedstroom van de ontvanger aorta naar de donor nierarterie wordt rechtgetrokken, wat resulteert in een vermindering van bloedplaatjesactivatie en trombosevorming. Gebruik steriele techniek onder een operatiemicroscoop, verzamel de nier van de donor, voer deze goed uit. De verzameltijd is 15 tot 20 minuten. Verwijder het pels en houd het dier vast.
Bereid de operatieplaats voor door de huid te wassen met povidonjodium, drapeer de muis en begin de operatie met een twee centimeter lange buiksnede op de middellijn. Trek de darm terug naar de borstkas en wikkel deze in vochtige gaas. Houd het gaas gedurende de procedure vochtig.
Zoek nu de grote buikvaten en mobiliseer ze. Eventuele lenden takken moeten worden gecoaguleerd of gebonden met 10 nul nylonnaald. Dissecteer vervolgens op een stompe manier een tweede millimeter van de onderste holle ader en de aorta distaal van de linkerniervaten.
Vervolgens moeten enkele kleine arteriële en veneuze takken die aan de niervaten zijn bevestigd worden gebonden en doorgesneden. Ga door met de stompe dissectie om de nierader te scheiden van de nierarterie, waardoor de latere creatie van een Carroll-patch aan het proximale uiteinde van de nierader mogelijk wordt, deze patch zal worden gebruikt voor de vorming van de veneuze anastomose. Verbind en verdeel vervolgens de linker bijniervaten om de suprarenale aorta te bereiken.
Eenmaal toegang verkregen, lus zes nulzijde zijde. Naai rond de suprarenale aorta voor later gebruik. Mobiliseer nu de niervaten en de urineleider vanuit het omringende fascia.
Draai de nier naar rechts op de achterste zijde, bind en snijd eventuele vasculaire takken die zich op de urineleider concentreren. Bevrijd voorzichtig de urineleider van het omringende fascia. Verontrust het nierhilum niet en behoud de eretieke vaten.
Snijd vervolgens de urineleider op het niveau van de ductus deens door. De nier kan nu worden teruggewonnen. Injecteer eerst langzaam 300 eenheden heparine in de distale VCI om de donor te hepariniseren.
Verbind vervolgens de zes nulnaald rond de suprarenale aa. Perfuseer vervolgens de linker nier vanuit de buikslagader, door 0,8 milliliter heparine-zoutoplossing te injecteren bij 100 eenheden per milliliter. Maak na de perfusie onmiddellijk de veneuze caryl-patch, waardoor terugstroming in de nier wordt vermeden.
Trek de nierader richting de nier om de AA en nierarterie te onthullen. Verdeel nu de aorta naast de nierarterie. Maak een hiel- en teenmanchet.
Als er nul minuten koude ischemische tijd vereist is, breng dan de teruggewonnen nier over naar een voorbereide ontvanger. Als alternatief kunt u de organen overbrengen naar een opslagkamer van vier graden Celsius en vervolgens de donoren euthanaseren zoals aangegeven in het tekstprotocol. Deze procedure duurt 35 tot 45 minuten zoals bij de donoranesthesie.
De ontvanger vult ook de initiële bolus aan als dat nodig is. Geef de ontvanger oogzalf. Geef het dier vervolgens een injectie van buprenorfine en zet deze na de procedure voort, na het maken van de initiële insnijding en het verplaatsen van de darm zoals bij de donor, ga door met een rechter nefrectomie, bind de nierarterie en -ader af met zes nulnaald en verdeel de urineleider proximaal van de nier met zes nulnaald.
Vervolgens verwijdert u de nier distaal van de vasculaire naald. Isoleer nu onder de niervaten de AA en VCI dan superieur aan de anastomoseringsplaats. Plaats een vier nul katoennaald rond de aorta en VCI, doe hetzelfde inferieur aan de plaats.
Eventuele lendenvaten die in het gebied worden gevonden, moeten worden gecoaguleerd of gebonden met 10 nul nylonnaald, niet de naald die inferieur is en vervolgens niet de naald die superieur is. Dit zal wat bloed in de aorta behouden, wat de AOR-autotomie vergemakkelijkt. Voer de atomy uit met een 30 gauge naald, verleng vervolgens de incisie tot ongeveer twee millimeter lang met behulp van een fijne microschaartje.
De volgende stap is om een endo-anastomose te maken van de donor hiel- en teenmanchet naar de aorta van de ontvanger. Plaats eerst een blijspelnaald in de hiel van de donor aorta met 10 nulnaald. Ga hiermee door tot aan het inferieure uiteinde van de incisie in de aorta van de ontvanger en bind af.
Plaats vervolgens een 10 nulnaald in het superieure uiteinde van de aorta-incisie en ga hiermee door tot aan het uiteinde van de donormanchet en bind af. Ten derde, beginnend bij het superieure uiteinde, maak een lopende naald in de laterale wand van de aorta en bind af tegen de eerder geplaatste inferieure blijspelnaald. Draai vervolgens de nier en ga door met een lopende naald langs de mediale wand en bind af tegen de superieure blijspelnaald.
Voltooi de veneuze anastomose door de VCI te prikken met de naald en vervolgens de incisie te verlengen met een fijn microschaartje. Bind met 10 nul nylon de donornierader aan de inferieure hoek van de VCI. Plaats een andere 10 nulnaald aan het superieure uiteinde van de VCI en donorader en maak een lopende naald langs beide zijden.
Net als bij de arteriële anastomose helpt afkeer van de weefselranden bij het verzegelen en genezen. Controleer nu uw werk. Tegenoverliggende wanden mogen niet worden vastgepakt door de naalden of het bloed zal te beper
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit artikel beschrijft een gemodificeerde techniek voor arteriële anastomose bij niertransplantaties in muizen. Er wordt nadruk gelegd op de zorgvuldige dissectie van vaten en het creëren van een hiel- en teenmanchet uit de abdominale aorta van de donor.
Arteriële trombose blijft een kritiek faalpunt in preklinische transplantatiemodellen, wat een directe impact heeft op de betrouwbaarheid van gegevens en de tijdlijnen voor de evaluatie van verbindingen. Deze techniek pakt een belangrijke mechanistische uitdaging bij het verminderen van risico's aan door de consistentie van de graftperfusie te verbeteren via hemodynamische optimalisatie. Een verbeterde voorspelbaarheid van het model ondersteunt eerdere go/no-go-beslissingen bij de ontwikkeling van transplantatierelateerde therapieën.
De methode past binnen het continuüm van ontdekking tot preklinisch onderzoek, in het bijzonder wanneer renale veiligheid of effectiviteit een primair eindpunt is, door een betrouwbaar chirurgisch platform te bieden voor downstream-analyse.