Name: Normotherme Ex Vivo Nier Perfusie voor het Behoud van de Nier transplantaten voorafgaand aan de transplantatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 12 s
Description: Leer normotherme ex vivo nierperfusie voor het behoud van niertransplantaten voorafgaand aan transplantatie. Deze methode vermindert koude ischemische schade en behoudt fysiologische omstandigheden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

We willen Sorin Group (Milaan, Italië) bedanken voor het verstrekken van ons met op maat gemaakte nier perfusie circuits. Verder danken wij XVIVO perfusie Inc. (Goteborg, Zweden) voor het verstrekken van ons met Steen oplossing, B Braun AG (Melsungen, Duitsland) voor de levering met spuitpompen en Rieber GmbH &amp; Co KG (Reutlingen, Duitsland).

Opmerking: Een schematisch overzicht van het studieprotocol is weergegeven in figuur 1. <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig1.jpg" /> Figuur 1. Studie protocol. Deze studie protocol van normotherme ex vivo nier perfusie is gebaseerd op een varken model. Na chirurgische dissectie van de vaten van de nier transplantaat en spoelen met 500 ml van histidine-tryptofaan-ketoglutaraat (HTK), kan het transplantaat worden teruggehaald. Na koude opslag (SCS) voor 3 uur, wordt het niertransplantaat geperfuseerde normotherme ex vivo (NEVKP) voor meerdere uren tot de aangewezen transplantatie. Alle dieren kregen humane zorg in overeenstemming met de &#39;Principles of Laboratory Animal Care&#39; &#39;door de National Society geformuleerd voor Medisch Onderzoek en de&#39; Gids voor de verzorging van proefdieren &#39;&#39;, gepubliceerd door de National Institutes of Health,Ontario, Canada. Het Animal Care Committee van de Toronto General Research Institute goedgekeurd alle studies. 1. Dieren <ol><li> Gebruik mannelijke Yorkshire varkens (27-33 kg) in dit protocol. </li></ol> 2. Organ Retrieval <ol><li> Preoperatieve Procedure <ol><li> Huis mannelijke Yorkshire varkens in een onderzoeksfaciliteit voor ten minste een week om hun stressniveau te verminderen. Fast de varkens minimaal 6 uur voor de inductie van de anesthesie. </li><li> Initiëren verdoving van het varken door een intramusculaire injectie van ketamine (25 mg / kg), atropine (0,04 mg / kg), en midazolam (0,15 mg / kg). Vervolgens transporteren dier uit de behuizing mogelijk om de operatiekamer (OK). </li><li> Plaats het varken in een liggende positie op de OR tafel. Laat het ademen 2 L van zuurstof met 5% van de isofluraan spontaan. Na ontspanning, bloot de stembanden met een laryngoscoop en spuiten ze met 2% lidocaïne een spasme veroorzaakt door intubatie te voorkomen. AfTer intubatie met een 6,5 mm buis, blokkeren de manchet met 3-5 ml lucht. Opmerking: Capnometrie onthult de juiste positie van de tracheale buis. </li><li> Laat de isofluraan gas naar 2,5%. Zet het beademingsapparaat 14-16 ademhalingen / minuut en ademvolume tot 10-15 ml / kg lichaamsgewicht. Monitor het varken nauw. Hartslag en zuurstofverzadiging worden geregistreerd door puls oxymetrie. </li><li> Onder steriele omstandigheden, introduceren een 8,5 Fr. x 10 cm katheter in de halsader in Seldinger techniek 13. Gebruik daarom een ​​naald om de veneuze schip doorboren. Na de introductie van een draad, vervang de naald met een katheter. Elimineer de draad en bevestig de katheter aan de huid. Dien 200 ml Ringer-lactaat per uur gedurende de operatie. </li></ol></li><li> Chirurgische Procedure <ol><li> Na desinfectie en de dekking van het chirurgische veld, het uitvoeren van een middellijn incisie van xyphoid tot symfyse. Om de belichting te verbeteren, uitbreiden van de chirurgische aanpak meteen linker laterale incisie. Bedek de grote en kleine darmen met een handdoek en plaats ze aan de linker kant voor een optimale toegang tot de rechter nier. </li><li> Scheid de inferior vena cava (IVC) van de abdominale aorta. Ligeer aorta takken van de achterkant van de aorta. </li><li> Na volledige aortadissectie naar achteren langs een ligatuur rond de aorta craniaal van de renale takken. Bovendien, plaats twee ligaturen craniale van de darmbeenvertakking. Plaats een band rond de linker nierslagader. </li><li> Bevrijd de rechter nier van zijn aanhangende weefsels. Ontleden de renale ader, slagader, en urineleider. </li><li> Open het diafragma en het beheer van 1.000 IE heparine per kg donor gewicht in het hart. Voor een DCD model, injecteren 40 Mval van KCl intracardiaal 3 min na systemische heparinisatie aan een hartstilstand veroorzaken. De hartstilstand wordt gewaardeerd als het beginpunt van warme ischemie. </li><li> Ondertussen, voor het verzamelen van bloed, sluit u de lijnen van CPDA zakken (citraat, fosfaat, dextrose, eendenosine) aan de katheter ingebracht om de linker jugulaire ader. Voer een zachte draai (1500 x g zonder rem). Verwijder plasma en buffy coat onder steriele voorwaarde (bioveiligheid kast klasse II) en bewaar de erytrocyten voor transfusie. </li><li> Canule de aorta met een orgel flush lijn boven de darmbeenvertakking. Bind de ligaturen aan de aorta en de linker nierslagader. </li><li> Spoel de nieren histidine-tryptofaan-ketoglutaraat (HTK) oplossing bij een druk van 100 cm H 2 O. Klem de thoracale cava en het bloed te verzamelen via de halsader katheter. Snijd de buik cava onder de nierader om een ​​optimale spoeling van de nier te beveiligen. </li><li> Na een volledige spoeling van de rechter nier, ophalen het transplantaat met een segment van de aorta. Snijd de nierader en laat de urineleider lang. </li></ol></li><li> Terug Tabel Bereiding van de nier Graft de Perfusion <ol><li> Bevrijd de nier van aanhangende weefsels. Sluit het craniale deel van de aorta met een stropdas eennd canule het onderste deel met een 1/4 &quot;x 3/8&quot; verloopstuk. Bind off kleinere arteriële takken afkomstig van de aorta. </li><li> Canule de renale ader met een 1/4 &quot;x 3/8&quot; verloopstuk direct. Intuberen de urineleider met een 8 Fr. voeden buis. </li><li> Plaats de nier op ijs tot de start van de NEVKP. </li></ol></li></ol> 3. normotherme Ex vivo Nier Perfusie (NEVKP) <ol><li> Bereiding van het perfusiecircuit De perfusie circuit bestaat uit neonatale cardiopulmonale bypass materiaal (figuur 2). <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig2.jpg" /> Figuur 2. Schematische weergave van de perfusie circuit. Het circuit bestaat uit neonatale cardiopulmonale bypass techniek. De perfusievloeistof wordt opgevangen in het veneuze reservoir. Centrifugaalpomp stuwt de oplossing in de oxygenator, waar het wordt verrijkt met zuurstof en verwarmd tot 37 ° C. Na passing de arteriële bubble filter, wordt het perfusaat aangedreven met een druk van 60-80 mmHg via de nierslagader in de nier. De aderlijke uitstroming (0-3 mmHg) voert de perfusievloeistof terug de aderlijke reservoir. Spuit en infuuspompen zet de voeding met extra verbindingen. De urine verzameld gedurende de perfusie. Perfusiecircuit kenmerken worden continu geregistreerd. Per uur veneuze en arteriële bloed gas monsters, en nierschade markers worden geanalyseerd. <ol> <li> Verbind de op maat gemaakte perfusiecircuit aan de nieren perfusie apparaat. </li><li> Sluit de slang aan het veneuze reservoir en oxygenator. Sluit de arteriële lijn slang aan op de arteriële uitstroom van de oxygenator en plaats de bubble filter in de houder. Sluit de spoelleiding. Sluit de veneuze lijn slang aan op de inlaat van het veneuze reservoir. </li><li> Voor de beoordeling tijdens de perfusie, sluit de temperatuur sonde in de arteriële stopcontact, sluit de stroom meter en de buBble sensor om de arteriële lijn slangen en sluit de drukleidingen. Sluit het niveau sensor. </li><li> Sluit de veneuze en arteriële monsterslangen de veneuze en arteriële monsterpoorten. </li><li> Plaats de orgaankamer op een stand en de invoering van de veneuze en arteriële slang door de voorbereide gaten. Bevestig de slang aan op de tafel en de kamer goed. </li><li> Steek de zuigkracht slang in de roller pomp en plaats het ene uiteinde in de kamer om de vloeistoffen te verzamelen. </li><li> Sluit de zuurstof slang aan de gastank met 95% O2 / 5% CO 2 en de oxygenator. Sluit de verwarming slang aan op de oxygenator en het orgel kamer. </li><li> Gebruik slangklemmen om de veneuze en arteriële uitstroom lijnen sluiten. Breng een slangklem om de uitstroom van het veneuze reservoir. </li></ol></li><li> Voorbereiding van de perfusie-oplossing, extra toeslagen en Priming het Circuit <ol><li> Gebruik een infusiepomp de geproduceerde urine vervangenLactaat Ringer&#39;s. </li><li> Gebruik een spuitpomp voeding dienen (glucose 0,5 ml / h, aminozuren 0,5 ml / uur) en insuline (5 IU / uur) in het veneuze reservoir. Gebruik maken van een tweede spuit pomp naar een vaatverwijdende (verapamil, 0,25 mg / uur) trekken direct in de arteriële lijn. </li><li> Vul het veneuze reservoir met de perfusievloeistof. Daarom pour Ringer&#39;s lactaat (175 ml), STEEN oplossing (200 ml), DRO (27 ml), heparine (1000 IU), natriumbicarbonaat om de pH en calciumgluconaat in het veneuze reservoir. Voeg tenslotte gewassen erytrocyten (125 ml). </li><li> Schakel op het hart long machine (HLM). Activeer de druk, temperatuur, niveau, en bubble sensor panelen. Activeer het Data Management System (DMS) om de gegevens gedurende de perfusie te nemen. Activeer de verwarmingseenheid naar de perfusievloeistof en orgaankamer tot 37 ° C opwarmen. Open de O2 levering. </li><li> Open de slangklem achter de veneuze reservoir en bevrijden de centrifugal pompkop uit de lucht volledig. Start de centrifugaalpomp bij 1000 rpm en laat de oplossing gedurende de schakeling worden voortbewogen. Klem de slang het omzeilen van de arteriële filter en laat lucht uit de arteriële filter. </li><li> Nul de drukleidingen. Activeer de spuit en infuuspompen. </li></ol></li><li> Nier Graft Perfusie <ol><li> Verwijder de nier van het ijs, en de positie van de nieren op beddengoed in de orgaankamer. Plaats de urine katheter in de urine collector. Na ervoor te zorgen dat de veneuze en arteriële slangen vrij zijn van lucht, sluit de connectoren aan de slang. </li><li> Sluit de snelkoppeling tussen de arteriële en veneuze leidingen lijnen. Stel de arteriële druk 75 mmHg door het reguleren van de snelheid van de centrifugaalpomp. </li><li> Druk Record, arteriële druk, temperatuur en de aanwezigheid van bellen continu met DMS. Let op de waarden zorgvuldig gedurende de perfusie. Tijdens de perfusie, bloed lekken in de kamer is collected via de zuig slang terug in het veneuze reservoir. </li><li> Noteer de hoeveelheid geproduceerde urine. Verzamel veneuze bloed en urine monsters per uur. Bewaken van de perfusie door het nemen van veneuze en arteriële bloed gas monsters en aspartaataminotransferase (AST), en lactaat analyse. </li><li> Aan het einde van de perfusie, koppelt u de slang van de nierslagader en ader, spoelt het transplantaat met koud HTK, en op te slaan op het ijs in een steriele zak orgel tot transplantatie. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Wolfe, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+in+all+patients+on+dialysis%2C+patients+on+dialysis+awaiting+transplantation%2C+and+recipients+of+a+first+cadaveric+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+journal+of+medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality in all patients on dialysis, patients on dialysis awaiting transplantation, and recipients of a first cadaveric transplant.</a> The New England journal of medicine. 341 (23), 1725-1730 (1999).</li>
<li>Rabbat, C. G., Thorpe, K. E., Russell, J. D., Churchill, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+risk+for+dialysis+patients+and+cadaveric+first+renal+transplant+recipients+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology+%3A+JASN%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality risk for dialysis patients and cadaveric first renal transplant recipients in Ontario, Canada.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 11 (5), 917-922 (2000).</li>
<li>Fuquay, R., Teitelbaum, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplant+outcomes+and+dialysis+modality%5BTitle%5D)+AND+%22Contributions+to+nephrology%22%5BJournal%5D)">Transplant outcomes and dialysis modality.</a> Contributions to nephrology. 178, 251-257 (2012).</li>
<li>Ingsathit, A., Kamanamool, N., Thakkinstian, A., Sumethkul, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+advantage+of+kidney+transplantation+over+dialysis+in+patients+with+hepatitis+C%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Survival advantage of kidney transplantation over dialysis in patients with hepatitis C: a systematic review and meta-analysis.</a> Transplantation. 95 (7), 943-948 (2013).</li>
<li>Davis, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+extent+and+predictors+of+waiting+time+geographic+disparity+in+kidney+transplantation+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The extent and predictors of waiting time geographic disparity in kidney transplantation in the United States.</a> Transplantation. 97 (10), 1049-1057 (2014).</li>
<li>Perico, N., Cattaneo, D., Sayegh, M. H., Remuzzi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+graft+function+in+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Delayed graft function in kidney transplantation.</a> Lancet. 364 (9447), 1814-1827 (2004).</li>
<li>Maggiore, U., Cravedi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+marginal+kidney+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Current+opinion+in+organ+transplantation%22%5BJournal%5D)">The marginal kidney donor.</a> Current opinion in organ transplantation. 19 (4), 372-380 (2014).</li>
<li>Dittrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+cold+storage+on+renal+ischemia+reperfusion+injury+after+non-heart-beating+donor+explantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nephron.+Experimental+nephrology%22%5BJournal%5D)">Influence of cold storage on renal ischemia reperfusion injury after non-heart-beating donor explantation.</a> Nephron. Experimental nephrology. 96 (3), e97-e102 (2004).</li>
<li>Summers, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+donor+age+and+cold+storage+time+on+outcome+in+recipients+of+kidneys+donated+after+circulatory+death+in+the+UK%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Effect of donor age and cold storage time on outcome in recipients of kidneys donated after circulatory death in the UK: a cohort study.</a> Lancet. 381 (9868), 727-734 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((et+al.+pilot+study+assessing+the+feasibility+of+a+short+period+of+normothermic+preservation+in+an+experimental+model+of+non+heart+beating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">et al. pilot study assessing the feasibility of a short period of normothermic preservation in an experimental model of non heart beating donor kidneys.</a> The Journal of surgical research. 171 (1), 283-290 (2011).</li>
<li>Hosgood, S. A., Patel, M., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+conditioning+effect+of+ex+normothermic+perfusion+in+an+experimental+kidney+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">The conditioning effect of ex normothermic perfusion in an experimental kidney model.</a> The Journal of surgical research. 182 (1), 153-160 (2013).</li>
<li>Nicholson, M. L., Hosgood, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+transplantation+after+ex+vivo+normothermic+perfusion%3A+the+first+clinical+study.+American+journal+of+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Renal transplantation after ex vivo normothermic perfusion: the first clinical study. American journal of transplantation.</a> official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1246-1252 (2013).</li>
<li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography%3B+a+new+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+radiologica%22%5BJournal%5D)">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography; a new technique.</a> Acta radiologica. 39 (5), 368-376 (1953).</li>
<li>Stubenitsky, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exsanguinous+metabolic+support+perfusion--a+new+strategy+to+improve+graft+function+after+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Exsanguinous metabolic support perfusion--a new strategy to improve graft function after kidney transplantation.</a> Transplantation. 70 (8), 1254-1258 (2000).</li>
<li>Delpech, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+ischaemia+combined+with+cold+preservation+on+the+hypoxia-inducible+factor+1%CE%B1+pathway+in+an+experimental+renal+autotransplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+journal+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Effects of warm ischaemia combined with cold preservation on the hypoxia-inducible factor 1α pathway in an experimental renal autotransplantation model.</a> The British journal of surgery. , (1002).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+journal+of+medicine%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England journal of medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li>
<li>Knaak, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subnormothermic+Ex+vivo+liver+perfusion+reduces+endothelial+cell+and+bile+duct+injury+after+DCD+pig+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+transplantation+%3A+official+publication+of+the+American+Association+for+the+Study+of+Liver+Diseases+and+the+International+Liver+Transplantation+Society%22%5BJournal%5D)">Subnormothermic Ex vivo liver perfusion reduces endothelial cell and bile duct injury after DCD pig liver transplantation.</a> Liver transplantation : official publication of the American Association for the Study of Liver Diseases and the International Liver Transplantation Society. , (2014).</li>
<li>Hosgood, S. A., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+normothermic+perfusion+of+declined+human+kidneys+after+inadequate+in+situ+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+transplantation+official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Ex vivo normothermic perfusion of declined human kidneys after inadequate in situ perfusion.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 14 (2), 490-491 (2014).</li>
<li>Op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+normothermic+machine+perfusion+and+viability+testing+of+discarded+human+donor+livers%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+transplantation+official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Ex vivo normothermic machine perfusion and viability testing of discarded human donor livers.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1327-1335 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Deze studie toont aan dat NEVKP een erytrocyt-gebaseerde oplossing kan worden uitgevoerd met uitstekende resultaten gedurende langere tijd in een varkensmodel. Tijdens de 10 uur ex vivo perfusie aangetoond dat de nieren stabiele perfusie parameters, actieve renale metabolisme, homeostase, en minimale schade aan de nieren. Urineproductie en nierschade afhangen van de samenstelling van de perfusievloeistof. Het is belangrijk om oncotische druk en osmolariteit van het perfusaat in een fysiologische bereik te houden. In het bijzonder zal een lage oncotische druk tot een onfysiologisch hoge urineproductie met significante nier oedeem en verhogen merkers van nierschade. STEEN oplossing met albumine wordt gekozen in dit model de oncotische druk te regelen en te simuleren fysiologische omstandigheden voor de nier. Natriumbicarbonaat en calciumgluconaat worden toegevoegd aan het systeem om fysiologische pH waarden bereiken, HCO 3 </sub&gt;, natrium, kalium, calcium en chloride. De selectie en dosering van de vasodilator is belangrijk voldoende bloedstroom en zuurstof veilig. De techniek van normotherme ex vivo perfusie nier heeft verschillende beperkingen. Ex vivo perfusie is niet geassocieerd met hormonale ondersteuning van de nier, die een negatieve invloed zouden kunnen hebben langere perfusie. Daarnaast is de nieuwe technologie op dit moment is geassocieerd met verhoogde kosten. Toekomstige verbeteringen kunnen de technologie vereenvoudigen en de kosten te verlagen. De ontwikkeling van een draagbare nier perfusie apparaat zou kunnen stellen aan koude nier opslag in de toekomst volledig te vermijden. De ernstige en aanhoudende tekort aan organen leidt tot een verhoogd gebruik van marginale organen (ECD of DCD nieren enten) 7. Momenteel wordt orgel behoud gebaseerd op statische koude opslag of hypothermie machine perfusie. Als een langdurige koude ischemische tijd heeft een belangrijke imphandelen op de uitkomst van de nierfunctie van de standaard criteria 15 en marginale enten 8,9, nieuwe conserveringstechnieken minimaliseren koude opslag zijn van bijzonder belang 16-19. Een belangrijk obstakel voor marginale grafts intensiever gebruik is het onvermogen om de kwaliteit en de houdbaarheid van organen voorafgaand aan transplantatie beoordelen. Momenteel zijn alleen klinische parameters zoals donorleeftijd, donor ziekten en warme ischemie tijd van de enten worden gebruikt voor de beslissing of een orgaan wordt geaccepteerd of afgewezen voor transplantatie. Door het behoud van het transplantaat onder normothermische omstandigheden, graft evaluatie op basis van perfusie karakteristieken en data is mogelijk. Real-time parameters zoals renale vasculaire stroom, druk, intrarenale weerstand, urineproductie, zuurstofverbruik en nierschade parameters (zoals AST en lactaat) worden verondersteld nuttig parameters om de levensvatbaarheid van het transplantaat te beoordelen. In Addition, de actieve stofwisseling tijdens NEVKP laat de toepassing van de reparatie strategieën om marginale nieren grafts voorafgaand aan de transplantatie te verbeteren. Zo kan de remming van pro-inflammatoire pathways, immunomodulatie, genoverdracht, en stamcellen toediening toekomstige technieken nieren grafts passen gedurende de bewaartijd en verbetering ontvanger resultaat.

Nieren zijn de meest getransplanteerde solide organen. Voor patiënten met eindstadium nierziekte, niertransplantatie biedt betere levensverwachting, en een betere kwaliteit van leven in vergelijking met dialyse 1-4. De aanhoudende organentekort brengt ernstige problemen op het gebied van transplantatiegeneeskunde (tabel 1) 5. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> Verenigde Staten * </td><td> Eurotransplant regio ** </td></tr><tr><td> Patiënten op niertransplantatie wachtlijst </td><td> 101.563 (februari 2015) </td><td> 10.689 (december 2014) </td></tr><tr><td> Overleden donor nieren getransplanteerd in 2014 </td><td> 10.650 </td><td> 3119 </td></tr><tr><td> De mediane wachttijd aan overleden donor niertransplantatie (in jaren) </td><td> Tot 5 jaar * </td><td> Tot 4 jaar ** </td></tr></tbody></table> Tabel 1. NierGraft Tekort in de VS en Eurotransplant Gewest. Het resultaat van niertransplantatie wordt negatief beïnvloed door de wachttijd, met slechtere resultaten voor patiënten hij langdurig gedialyseerd 6. Dit belangstelling marginale nieren grafts als extra donor bron, zoals nieren van oudere donors, donors met meerdere comorbiditeiten (verlengde criteria donoren (ECD) en nieren gedoneerd na hartdood (DCD) geactiveerd. Marginale donornieren hadden we wel daalde in het verleden worden nu beschouwd voor transplantatie 7. Een belangrijk obstakel voor het gebruik van marginale nieren grafts is bewaartechniek koude anoxische opslag. Momenteel, zijn nieren grafts statisch opgeslagen op ijs of geperfuseerd bij 4 ° C zonder zuurstof. De koude anoxische bewaartechniek geassocieerd met de lopende graft schade tijdens nierpreservatie en staat ook graft beoordeling vanwege het gebrek aan Metabolism en urineproductie. In het bijzonder, marginale nieren enten tolereren koude opslag slecht, wat resulteert in aanzienlijke nierschade en hoge prijzen van vertraagde graft function (DGF) 8,9. DGF is een voorspellende factor voor arme lange termijn transplantaat functie. Extracorporale nier perfusie vertegenwoordigt een alternatieve methode voor het behoud, evaluatie en reparatie van organen. In een varken model werden gunstige resultaten gepresenteerd voor nieren doorbloed ex vivo onder normothermische voorwaarden 10,11. De eerste klinische studie uitgevoerd in 2013 toonde een lager tarief van vertraagde graft functie wanneer nieren opgehaald uit uitgebreide criteria donoren werden perfusie gedurende 1 uur onmiddellijk voorafgaand aan de transplantatie 12. Dit artikel presenteert een model van normotherme ex vivo nieren perfusie (NEVKP). Het doel van deze studie is om de toegepaste koude ischemie tijd tot een minimum beperken en de duur van NEVKP verlengen. NEVKPis een andere bewaarmethode die is gericht op de schade die kan worden veroorzaakt door koudeopslag verminderen.

<table><tbody><tr><td>Neonatal cardiopulmonaire bypass-technologie</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Canada)</td><td>Op maat gemaakt</td><td>Neonatal veneuze reservoir D100 (500 ml, 1/16" in- en uitstroom), neonatale oxygenator D100, centrifugale pompkop (Revolution), arteriële luchtbellenfilter (D130)</td></tr><tr><td>Hart-longmachine, Stöckert S3</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Canada)</td><td>Op maat gemaakt</td><td>Centrifugale pomp, rolpomp, bedieningspaneel (sensoren voor druk, stroom, temperatuur, bubbels en niveau), zuurstofmixer, verwarmingseenheid</td></tr><tr><td>Slangen</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Canada)</td><td>01906BPC SG XS</td><td>3/16" x 1/16"</td></tr><tr><td></td><td></td><td>019071PC SG XS</td><td>1/4" x 1/16"</td></tr><tr><td></td><td></td><td>019060PC SG XH</td><td>3/8" x 1/16"</td></tr><tr><td>Tubing connectors</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Canada)</td><td></td><td>Verschillende maten</td></tr><tr><td>STEEN-oplossing</td><td>XVIVO (Göteborg, SWE)</td><td>19004</td><td>200 ml</td></tr><tr><td>Ringer's lactate</td><td>Baxter (Mississauga, ON, CAN)</td><td>JB2324</td><td>175 ml</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonaat</td><td>Hospira (Montréal, QC, CAN)</td><td>6625050</td><td>pH-afhankelijk</td></tr><tr><td>Calciumgluconaat</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada (Richmond Hill, ON)</td><td>C31110</td><td>Calcium-afhankelijk</td></tr><tr><td>Heparine</td><td>Sandoz Canada Inc (Toronto, ON, CAN)</td><td>10750</td><td>1.000 IE</td></tr><tr><td>Aminozuur en glucose, Travasol 10%</td><td>Baxter (Mississauga, ON, CAN)</td><td>JB6760</td><td>1 ml/uur</td></tr><tr><td>Snelwerkende insuline, Novorapid</td><td>Novo Nordisk Canada Inc (Mississauga, ON, CAN)</td><td>DS6H748</td><td>5 IE/uur</td></tr><tr><td>Verapamil</td><td>Sandoz Canada Inc (Quebec, QC, CAN)</td><td>52216</td><td>0,25 mg/uur</td></tr></tbody></table>

normotherme<em&gt; ex vivo</em&gt; nier perfusie voor het behoud van de nier transplantaten voorafgaand aan de transplantatie

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Nieratransplantatie is een goed gevestigde behandelingsoptie geworden voor patiënten met eindstadium nierfalen. Het aanhoudende tekort aan organen blijft een ernstig probleem. Daarom zijn de acceptatiecriteria voor orgaandonoren uitgebreid, wat leidt tot het gebruik van marginale niertransplantaten. Deze marginale organen verdragen koude opslag slecht, wat resulteert in verhoogde bewaarschade en hogere percentages van vertraagde nierfunctie. Om de beperkingen van koude opslag te overwinnen, is er uitgebreid onderzoek gericht op alternatieve normotherme bewaarmethoden.
Ex vivo normotherme orgaanperfusie is een innovatieve bewaartechniek. De eerste experimentele en klinische onderzoeken voor ex vivo long-, lever- en nierperfusie hebben gunstige resultaten aangetoond.
Naast de vermindering van koude ischemische schade biedt de methode van normotherme nieropslag de mogelijkheid voor orgaanbeoordeling en reparatie. Dit manuscript geeft informatie over nierretrieval, orgaanbewaartechnieken en geïsoleerde ex vivo normotherme nierperfusie (NEVKP) in een varkensmodel. Chirurgische technieken, instellingen voor de perfusieoplossing en het circuit, mogelijke beoordelingsopties en representatieve resultaten worden gedemonstreerd.

Hieronder worden de resultaten van zes proeven met een model van hartslag nier retrieval gepresenteerd. Na in situ flush en nieren retrieval werden de transplantaten opgeslagen op ijs gedurende 3 uur (SCS), terwijl de erythrocyten werden bereid. Voor de klinische setting, deze simuleert de tijd die nodig is voor het ophalen en achteraan tabel preparaat. NEVKP werd uitgevoerd gedurende 10 uur. Om fysiologische omstandigheden handhaven en een gesimuleerd in vivo omgeving voor de nier, dient de orgaankamer verwarmd worden afgedicht. Perfusie en urine vervanging oplossing moet fysiologische waarden voor bloed gas analyse, oncotische druk en osmolariteit vertegenwoordigen. Normale waarden (uitgangswaarden) verkregen uit Yorkshire varkens in situ bevinden zich in elke figuurbeschrijving respectievelijk (figuren 3-13). Doel van NEVKP is dat het implantaat wordt voorzien van voldoende zuurstof en voeding. Omdat ischemie cagebruikt vasoconstrictie, waardoor intrarenale weerstand bereiken van een constante stroom met een stabiele druk is een goede indicator voor adequate oxygenatie. Nadat de beoogde transplantaat temperatuur van 37 ° C via opwarmen van het orgaan na SCS wordt bereikt, debietwaarden en intrarenaal weerstand stal met een fysiologische constante druk van ongeveer 60-80 mmHg blijven gedurende de gehele perfusie (figuren 3 en 4). De hoeveelheid urineproductie hangt voornamelijk af van de samenstelling van de perfusievloeistof (Figuur 5). Uurlijkse metingen van veneuze en arteriële pO 2 onthullen de metabole activiteit van de nier. Het zuurstofverbruik werd berekend met de vergelijking ((pO 2 kunst - pO 2 ven) x stroom / gewicht) (Figuur 6) 14. Tijdens de perfusie pH, HCO 3 en elektrolyten zijn stabiel zonder ingrepen (figuren 7-10). Real-time AST en lactaat metingen dienen om cellulaire schade controleren. Geen verhoging van parameters van celschade wordt vastgesteld tijdens de periode NEVKP (figuren 11 en 12). De osmolariteit van de perfusie-oplossing is (Figuur 13). Histologische evaluatie onthult kleine wijzigingen (figuur 14-16). <img alt="Figuur 3" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig3.jpg" /> Figuur 3. Gemiddelde arteriële druk met standaarddeviatie (ml / min). Gedurende de perfusie van de stroom blijft in een fysiologisch bereik. Varkens fysiologische waarden, gemeten in situ: betekenen kunst. stroom: 170 ± 57 ml / min (range 83-325 ml / min). <img alt="Figuur 4" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig4.jpg" /> Figuur 4. intrarenale weerstand (IRR), gemiddelde en standaarddeviatie (mmHg / </strong&gt; Ml / min). De gemiddelde arteriële druk (MAP) blijft constant tussen 60 en 80 mmHg. De intrarenaal weerstand onder 0,5 mmHg / ml / min constant. <img alt="Figuur 5" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig5.jpg" /> Figuur 5. Totaal urinevolume, gemiddelde en standaarddeviatie (ml). Het totale volume urine hangt voornamelijk af van de samenstelling van de perfusievloeistof. Hoe hoger de oncotische druk en de osmolariteit, hoe lager de urineproductie. <img alt="Figuur 6" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig6.jpg" /> Figuur 6. Zuurstof consumptie, gemiddelde en standaardafwijking (ml / min / g). <img alt="Figuur 7" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig7.jpg" /> Figuur 7. pH veneuze, gemiddelde en de standaarddeviatie. De pH Remains constant in een fysiologische bereik zonder toediening van bicarbonaten. Varkens fysiologische waarden, gemeten in situ: pH 7,46 ± 0,06 (range 7,34-7,63). <img alt="Figuur 8" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig8.jpg" /> Figuur 8. HCO 3 veneus gemiddelde en standaarddeviatie (mmol / l). De HCO 3 blijft in een fysiologisch bereik zonder toediening van bicarbonaten. Porcine fysiologische waarden, gemeten in situ: HCO 3 30,3 ± 2,4 mmol / l (tussen 21,6-35,8 mmol / l). <img alt="Figuur 9" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig9.jpg" /> Figuur 9. Veneuze natriumconcentratie, gemiddelde en standaardafwijking (mmol / l). Het natriumgehalte blijft in een fysiologisch bereik. Porcine fysiologische waarden, gemeten in situ: 137,1 &amp;# 177; 3,8 mmol / l (tussen 118,7-140,9 mmol / l). <img alt="Figuur 10" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig10.jpg" /> Figuur 10. Veneuze kaliumconcentratie, gemiddelde en standaardafwijking (mmol / l). De kalium- blijft constant in een fysiologisch bereik. Porcine fysiologische waarden, gemeten in situ: 3,85 ± 0,46 mmol / l (tussen 3,5-5,36 mmol / l). <img alt="Figuur 11" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig11.jpg" /> Figuur 11. Veneuze aspartaataminotransferase, gemiddelde en standaarddeviatie. (AST; U / L) In de ex vivo normotherme nieren perfusie, AST toont een cel letsel marker. AST waarden zijn laag hele perfusie. <img alt="Figuur 12" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig12.jpg" /> Figuur 12: Lactaat<html> , Gemiddelde en standaardafwijking (mmol / l). In de ex vivo normotherme nier perfusie, lactaat is een celschade marker. De waarden zijn gehele perfusie stabiel. <img alt="Figuur 13" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig13.jpg" /> Figuur 13:. Osmolariteit van het serum, gemiddelde en standaarddeviatie (mOsm / L) A constant osmolariteit in de perfusievloeistof beveiligt lage maar constante urineproductie. Porcine fysiologische waarden, gemeten in situ: 282 ± 1,7 mOsm / l (tussen 279-283 mOsm / L). <img alt="Figuur 14" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig14.jpg" /> Figuur 14:. Histologie (H &amp; E) 50X / 200X vergroting van corticomedullaire knooppunt tonen mild buisvormige vacuolisatie. Geen tekenen van necrose.arget = &quot;_ blank&quot;&gt; Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken. <img alt="Figuur 15" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig15.jpg" /> Figuur 15: histologie (PAS) 50X / 200X vergroting van corticomedullaire knooppunt tonen mild buisvormige vacuolisatie.. Geen tekenen van necrose. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig15large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="Figuur 16" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig16.jpg" /> Figuur 16:. Histologie (TUNEL kleuring) 25X / 200X vergroting. Heel af en toe kernen zijn gekleurd demonstreren zeer lage tarieven van apoptose. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig16large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Het ernstige tekort aan organen heeft geleid tot een toename van het gebruik van marginale nieren grafts voor transplantatie. Dit heeft de interesse in alternatieve methoden voor de opslag geactiveerd, omdat marginale enten vooral tolereren koude opslag slecht. De techniek van normotherme ex vivo perfusie nier (NEVKP) een nieuwe bewaarmethode voor nieren grafts voorafgaand aan de transplantatie.

Normotherme<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Nier Perfusie voor het Behoud van de Nier transplantaten voorafgaand aan de transplantatie

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

Het algemene doel van deze procedure is om een niertransplantaat ex vivo vóór transplantatie te preserveren onder normale thermische fysiologische omstandigheden. Dit wordt bereikt door eerst de niervaten van de donornier te cannuleren. Het transplantaat wordt vervolgens op het circuit aangesloten en geperfuseerd onder normothermische omstandigheden.Uiteindelijk worden functionele parameters van letsel en de histologie van de nier gemonitord om de geschiktheid van het transplantaat voor transplantatie te bepalen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek ten opzichte van bestaande bewaarmethoden, zoals koude bewaring of hypotherme machineperfusie, is dat normotherme ex vivo perfusie koude ischemische schade van transplantaten van donoren met standaard- of uitgebreide criteria vóór de transplantatie voorkomt. Nadat de aorta en de vena cava van de donor volledig zijn gedissecteerd, wordt een ligatuur rond de aorta cranial van de renale takken aangebracht, gevolgd door de plaatsing van twee ligaturen cranial van de iliacabifurcatie.Breng een ligatuur aan rond de vena cava, distaal boven de iliacaalvertakking, en plaats een knoop rond de linker nierslagader. Maak vervolgens de rechter nier vrij van het aanhechtende weefsel en ontleed de nierader, de nierslagader en de ureter. Open daarna het diafragma en dien 1000 internationale eenheden heparine per kilogram donorpeso toe in het hart.Om het bloed te verzamelen, worden de lijnen van de CPDA-zakken aangesloten op de linker bovenste jugulaire venecatheter. Bind ligaturen om de linker nierarterie, de aorta en de vena cava, en plaats een aortacannule boven de iliaca-bifurcatie om door te spoelen. Spoel de nier onmiddellijk met HTK-oplossing bij een druk van 100 centimeters H2O, waarbij de abdominale vena cava onder de niervene wordt doorgesneden om een optimale spoeling te garanderen.Klem gelijktijdig de vena cava thoracica af en vang het bloed op via de jugulaire katheter. Wanneer de nier volledig is gespoeld, wordt het transplantaat samen met een segment van de aorta weggenomen, waarbij de vena renalis wordt doorgesneden en de ureter lang wordt gelaten. Sluit vervolgens het craniale uiteinde van de aorta af met een ligatuur en cannibaliseer het onderste uiteinde met een reducer van een kwart inch bij drie achtste inch.Cannuleer vervolgens direct de niervene met een reducer van een kwart inch bij drie achtste inch. Intubeer de ureter met een sonde van acht millimeter French en plaats de nier op ijs. Sluit vóór aanvang van de perfusie het op maat gemaakte perfusiecircuit aan op het nierperfusieapparaat.Plaats vervolgens de organkamer op een standaard en voer de veneuze en arteriële slang door de voorbereide gaten. Nadat de slang is vastgezet, wordt de zuigslang verbonden met het veneuze reservoir en wordt het andere uiteinde in de kamer geplaatst om de lekkende perfusie-oplossing op te vangen. Sluit met behulp van slangkenners de veneuze en arteriële uitstroomlijnen en de uitstroom van het veneuze reservoir.Gebruik een infusiepomp om de geproduceerde urine te vervangen door Ringer's lactaatoplossing. Gebruik gedurende de perfusie, afhankelijk van de hoeveelheid geproduceerde urine, één spuitpomp om de voeding en insuline in het veneuze reservoir toe te dienen, en een andere om een vaatverwijder direct in de arteriële lijn negen te infuseren. Vul op dit moment ook het veneuze reservoir met de perfusie-oplossing.Schakel vervolgens de hart-longmachine in om het circuit te primen en activeer de panelen voor druk, temperatuurniveau en de bellen-sensor. Activeer het gegevensbeheersysteem om de gegevens gedurende de perfusie vast te leggen, evenals de verwarmingsunit. Verwarm de perfusie-oplossing en de organkamer tot 37 °C.Open de zuurstoftoevoer en de slangklem achter het veneuze reservoir om de centrifugale pompkop volledig van lucht te ontdoen. Start vervolgens de centrifugale pomp op 1000 toeren per minuut en laat de oplossing door het circuit stromen. Klem de slang af en leid de vloeistof langs het arteriële filter om de lucht uit het arteriële filter te verwijderen.Stel tot slot de drukleidingen in op 125 milliliters gewassen erytrocyten en activeer de spuit- en infusiepompen zodra het circuit is geprimed. Verplaats de nier van het ijs naar de ondergrond van de orgaankamer en plaats de urinekatheter in de urineopvanger. Nadat is vastgesteld dat de veneuze en arteriële slangen luchtvrij zijn, worden de connectoren op de slang aangesloten.Sluit vervolgens de shortcut tussen de arteriële en veneuze slanglijnen en stel de arteriële druk in op 75 millimeters.Mercury. Registreer de druk, de arteriële flow, de temperatuur en de aanwezigheid van bellen continu met een datamanagementsysteem, waarbij de waarden gedurende de gehele perfusie nauwkeurig worden geobserveerd. Registreer de hoeveelheid geproduceerde urine en neem elk uur veneus bloed en urine monsters af om de functie van het orgaan tijdens de perfusie te bewaken; neem daarnaast monsters van veneus en arterieel bloed voor gas-, aspartaat-aminotransferase- en lactaatanalyses.Ontkoppel aan het einde van de perfusie de slangetjes van de nierslagader en de nierader. Spoel het transplantaat met koud HTK en bewaar de nier op ijs in een steriele orgaanzak tot de transplantatie. Het doel van normale thermische ex vivo nierperfusie is om ervoor te zorgen dat het transplantaat tijdens de perfusie wordt voorzien van voldoende zuurstof en voeding.Inderdaad, nadat de doeltemperatuur van het transplantaat van 37 graden Celsius is bereikt via het opnieuw opwarmen van het orgaan. Na drie uur bewaring op ijs blijven de stroomwaarden en de intrarenale weerstand stabiel, met een constante fysiologische druk van rond de 70 millimeters kwik gedurende de gehele perfusie. De hoeveelheid urineproductie hangt hoofdzakelijk af van de samenstelling van de perfusie-oplossing.Terwijl de uurlijkse metingen van de veneuze en arteriële zuurstofpartiële druk de metabole activiteit van de nier tijdens de perfusie bevestigen, blijven de pH, het bicarbonaat en de elektrolyten eveneens stabiel en vereisen zij geen interventies. Realtime metingen van aspartaat-aminotransferase en lactaat dienen ter bewaking van de cellulaire schade. Aangezien er geen stijging van deze parameters voor celbeschadiging werd waargenomen tijdens de normale thermische ex vivo nierperfusieperiode, is ook de osmolariteit van de perfusieoplossing stabiel.Verder vertoont de histologie minimale veranderingen in het weefsel met milde ischemie en zeer lage percentages apoptose. Zodra deze techniek onder de knie is, kan deze worden gebruikt als alternatieve methode voor orgaanconservering van niertransplantaten, waardoor er meer opties ontstaan voor de beoordeling en het herstel van organen voorafgaand aan de transplantatie.

normothermic-ex-vivo-kidney-perfusion-for-preservation-kidney-grafts

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In this video, we describe a technique to induce preservation injury via the prolonged cold ischemic storage time in porcine donor kidney.

Modeling Preservation Injury in Porcine Donor Kidney: A Procedure to Induce Graft Dysfunction by Subjecting Kidney to Prolonged Cold Ischemia

Onderzoek naar de fysiologie van dierlijke organen kan worden uitgevoerd door een experimenteel ex vivo perfusiesysteem uit te voeren. De toevoeging van een varkensnier, als homeostatisch orgaan aan ons eerder ontwikkelde ex vivo leverperfusiemodel, kan een belangrijke stap zijn om een betere fysiologische omgeving te realiseren.

Stappen voor het autologe Ex vivo geperfundeerde varkenslever-nierexperiment

Marginale enten, zoals vette levers, enten van oudere donoren, of levers teruggehaald na hartdood (DCD) tolereren conventionele, koude statische opslag alleen slecht. We ontwikkelden een nieuw model van subnormothermic ex vivo lever perfusie voor het behoud, de beoordeling, en de reparatie van marginale lever transplantaties voorafgaand aan de transplantatie.

Techniek van Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Leverperfusie voor de opslag, Assessment, en reparatie van Marginal Lever Enten

Hier presenteren we een protocol dat de geoxygeneerde ex situ machineperfusie van donorlevergrafts beschrijft. Dit artikel bevat een stap voor stap protocol om het levergraft voor machineperfusie te verkrijgen en voor te bereiden, de perfusie vloeistof voor te bereiden, de perfusiemachine te primen en de geoxygeneerde normotherme machineperfusie van het levergraft uit te voeren.

Ex Situ normothermische machineperfusie van donorlevers

Er is een belangrijke donor van lever tekort, en criteria voor lever donoren hebben uitgebreid. Normothermic ex vivo lever perfusie (NEVLP) is ontwikkeld om te evalueren en wijzigen van orgaanfunctie. Deze studie toont een model van de rat van NEVLP en test het vermogen van gepegyleerde-katalase, te verzachten lever behoud letsel.

Een kleine diermodel van Ex Vivo Normothermic lever perfusie

Grote diermodellen spelen een essentiële rol in het preklinisch transplantatieonderzoek. Vanwege de gelijkenis met de klinische setup, het varkensmodel van orthotopische nier auto-transplantatie beschreven in dit artikel biedt een uitstekende in vivo setting voor het testen van orgaan behoud technieken en therapeutische interventies.

Orthotopische nier auto-transplantatie in een varkensmodel met behulp van 24 uur orgaanbehoud en continue telemetrie

Normothermische ex vivo machineperfusie (NEVP) is nauwelijks onderzocht voor het behoud van pancreas allografts. We presenteren een innovatieve conserveringstechniek voor pancreas allografts vóór transplantatie.

Normothermic Ex Vivo Pancreas Perfusie voor het behoud van Pancreas allogläts vóór transplantatie

Hier presenteren we een protocol dat een chirurgisch model voor nierverkrijging beschrijft in een preklinisch varkensmodel voor daaropvolgende machineperfusie of transplantatie.

Nierverkrijging in een preklinisch groot diermodel

Het behoud van het hart door donoren is een belangrijke factor voor succes bij harttransplantatie. Technologische vooruitgang heeft geleid tot het optimaliseren van de conserveringsomstandigheden, samen met een nauwkeurigere beoordeling van het donorhart vóór transplantatie. Hierin beschrijven we twee innovatieve technologieën die momenteel worden toegepast voor hartbehoud: uniforme koeling, behoud en normotherme ex-situ hartperfusie.

Innovatieve strategieën voor orgaanbehoud bij harttransplantatie: uniforme koelingsbehoud en ex-situ normamische perfusie

Dit protocol beschrijft de ex vivo normotherme machineperfusie van een rattennier voor latere transplantatie in een ontvangende rat.

Normothermic Machine Perfusie van rattennieren voor transplantatie

Leer normotherme ex vivo nierperfusie voor het behoud van niertransplantaten voorafgaand aan transplantatie. Deze methode vermindert koude ischemische schade en behoudt fysiologische omstandigheden.

Normotherme

Meer video's verkennen