Name: Protocollen voor Robuuste herbicideresistentie testen in verschillende Weed Species (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-02T11:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 52 s
Description: Leer robuuste herbicideresistentietesten voor onkruidbeheer in landbouw met dit flexibele protocol. De methode bevestigt resistentieniveaus bij diverse onkruidsoorten door kiemrustbreking en nauwkeurige dosering.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Het onderzoek werd ondersteund door de National Research Council (CNR) van Italië. De auteurs bedanken de leden van GIRE voor het verzamelen van zaadmonsters en zijn Alison Garside dankbaar voor het reviseren van het Engels.

1. Zaad Sampling en opslag <ol><li> Monitor akkers voor ongerechtvaardigde slechte herbicide, dwz niet te wijten aan ongunstige klimatologische omstandigheden of lage kwaliteit herbicide behandelingen. </li><li> Verzamel een zaadmonster van één soort in een tijd en wijs een unieke code. Rijpe zaden worden meestal verzameld voordat gewassen oogsten van planten die het herbicide behandeling (s) had overleefd. Tijdige-monitor om te zien of de zaden worden vergoten door de moederplant wanneer rijp. </li><li> Vul een formulier voor elk monster met vermelding van de toegekende unieke code, naam van de soort, de collectie datum, GPS-coördinaten, de gemeente, de naam van de landbouwer, veldgrootte, besmetting niveau, gewas, herbicide (s) gebruikt tijdens het seizoen en historische verslagen van het veld . </li><li> Verzamel zaden van ten minste 30 willekeurig geselecteerde planten die representatief zijn voor het veld besmetting zijn. Zorg ervoor dat het zaad sample bevat ten minste 5000 rijpe zaden. Voor een obligaat uitkruising onkruidsoorten(Bijvoorbeeld Lolium spp. En Amaranthus spp.), Vermindering van het aantal planten 10-15, waarbij het ​​totale aantal zaden ongeveer 5000 11. </li><li> Sub-proeven van het veld als flarden van onkruid zijn verspreid over grote gebieden (meer dan een hectare) als verschillende herbicide resistente biotypen worden geselecteerd. </li><li> Store zaden in niet-gesloten papieren zakken gelabeld met de unieke code toegewezen. </li><li> Laat vocht verdampen maar zaden niet bloot aan hoge temperaturen (dat wil zeggen, voorkomen dat ze in een auto in de zon) of voor extreme temperatuurschommelingen de inductie van secundaire slaaptoestand te voorkomen. </li><li> Clean (verwijderen kaf, de romp seeds, etc.) en opgeslagen bij omgevingstemperatuur in een droge ruimte. Na het uitvoeren van de eerste resistentietoetsen, slaan de zaden gedurende langere tijd in een donkere kamer bij 4 ° C, bij voorkeur in vacuum afgesloten plastic zakken. Op deze manier zaden hun levensvatbaarheid te behouden voor een aanzienlijk langere tijd. </li></ol> OPMERKING: kiemrust biedt een flexibele en efficiënte mechanisme dat onkruid staat stelt zich aan te passen en volharden in agro-ecosystemen. Om kiemrust verbreken en laten ontkiemen van zaden, verschillende protocollen moeten worden gebruikt afhankelijk van onkruidsoorten, bijvoorbeeld, het type kiemrust 16. Er zijn drie belangrijke manieren om slaaptoestand te verwijderen: <ol><li> Vernalisatie OPMERKING: Om gelijktijdige kieming en zaailing opkomst, een periode van zaad vernalisatie variërend van een paar dagen tot een week te verkrijgen is vereist om fysiologische slaaptoestand van vele soorten te verwijderen:. Bv papegaaienkruid, Chenopodium album, Lolium spp, Avena fatua, Polygonum Persicaria , Phalaris paradoxa 17-19. Een langere periode van maximaal 15 dagen is vereist Papaver rhoeas, Cyperus difformis en Ammania coccinea en tot 30 dagen Schoenoplectus mucronatus <sup&gt; 20. <ol><li> Doe wat gedemineraliseerd water in plastic schaaltjes. Snij twee lagen filterpapier en genieten ze in het water, verwijder overtollige hoeveelheden. Plaats de zaden luchtgedroogd op het papier. Breng de plastic schaaltjes een koelkast bij 4 ° C gedurende de vereiste tijdsperiode. </li></ol></li><li> Insnijding OPMERKING: sommige onkruidsoorten zijn recalcitrant kieming dan anderen door mechanische slaaptoestand, namelijk zaadhuid kenmerken en de aanwending van een chemische scarification gebruiken zwavelzuur ontkiemen 21. <ol><li> Bereid een bekerglas met geconcentreerd zwavelzuur (95-98%). Bereid een beker vol water. De zaden in een omhulsel van niet-geweven stof. </li><li> Geniet bijvoorbeeld Echinochloa spp. Of Sorghum halepense zaad voor 20 min of 5 min, respectievelijk in geconcentreerd zwavelzuur. </li><li> Neem de envelop uit de beker met behulp van een pincet en zet het in de beker vol met water. Open deenvelop, zet de zaden in een klein vergiet en spoel ze grondig onder stromend water. </li></ol> Variant: A. plantago-aquatica heeft een ander protocol 22, 23 <ol><li> Week de zaden gedurende 2 minuten in chloroform. Spoel de zaden met gedemineraliseerd water en droog ze met absorberend papier. Dompel de zaden in 80% zwavelzuur gedurende 5 min. </li><li> Doe de zaadjes in een klein vergiet en spoel ze grondig onder stromend water. </li></ol></li><li> Post-zaaizaad rijping OPMERKING: Zaden van andere onkruidsoorten helemaal niet ontkiemen voor een paar maanden na de vervaldag, ongeacht de gebruikte methode om kiemrust te breken. <ol><li> Bewaar de zaden voor een periode van ten minste 3-4 maanden bij RT en een lage luchtvochtigheid en volg de bovenstaande protocollen voor kiemrust verbreken (bijvoorbeeld, Oryza sativa var. Sylvatica of P. rhoeas). </li></ol></li></ol> 3. zaadontkieming <ol><li> Place zaden worden ontkiemd in plastic platen met 0,6% (m / v) agar met 0,1% kaliumnitraat (KNO 3) toegevoegd: <ol><li> Bereid een oplossing van agar bij 0,6% + 0,1% KNO 3 via gedeïoniseerd water. Los de agar in een magnetronoven. </li><li> Giet de agar oplossing in plastic schaaltjes. Koel de substraat en vervolgens in de zaden. </li></ol> Variant: Grond kan ook worden gebruikt als een substraat in plastic schaaltjes. Deze praktijk is bijzonder efficiënt voor Echinochloa spp., S. halepense en Lolium spp. </li><li> Plaats plastic schotels in een kiemkast voor ongeveer een week met licht en temperatuur afhankelijk van de optimale omstandigheden voor elk onkruidsoorten. Voor de meeste soorten winter, is het temperatuurbereik 15/25 ° C nacht / dag en 12 uur fotoperiode met neonbuizen die een fotosynthetische Photon Flux Density (PPFD) van 15-30 umol m -2 sec -1. Voor veel soorten zomer, is het temperatuurbereik 15/30 ° C nacht / dag. Variant: Some species, zoals S. halepense, moet een warmtebehandeling. Dus na de scarification, zaden van S. halepense worden onderworpen aan de volgende voorwaarden: cycli van 4 uur bij 45 ° C en 20 uur bij 24 ° C gedurende drie dagen in de kiemkast en vervolgens drie dagen onder normale omstandigheden. </li></ol> 4. Seedling transplanteren en groei <ol><li> Transplant vijftien tot twintig zaailingen in plastic bakjes (325 x 265 x 95 mm) gevuld met een standaard potgrond (60% slibrijke leemgrond, 15% zand, 15% en 10% agriperlite veen - in volume). OPMERKING: Verplanten plaats van direct inzaaien, kan een uniforme stand van planten in hetzelfde groeistadium te verkrijgen, hetgeen een belangrijke voorwaarde voor de uitvoering van de herbicide behandeling optimaliseren. </li><li> Identificeer elke lade met een barcode met alle informatie voor de unieke identificatie: bevolking code, herbicide wordt getest, repliceren nummer en progressieve lade nummer &lt;./ Li&gt; <li> Plaats trays in een verwarmde kas en waterplanten als nodig is om het substraat op of nabij veld te handhaven. OPMERKING: De groei varieert, afhankelijk van de onkruidsoorten. Vaak tests worden uitgevoerd in de herfst / winter / voorjaar, zo licht wordt aangevuld met 400 W metaalhalogeenlampen, die een PPFD voorzien van ongeveer 150 umol m -2 s -1 en een 12 uur fotoperiode 24, 19. Zomer wiet soorten met C 4 fotosynthetische cyclus vereisen doorgaans een hogere lichtsterkte en dus tests worden gedaan in de late lente-zomer of de aangevuld lichtintensiteit is ongeveer 400 umol m -2 sec -1 met een 14 uur fotoperiode. </li><li> Gebruik een ander protocol voor sommige onkruidsoorten geïnfecteerd padie, bijvoorbeeld, A. plantago-aquatica, S. mucronatus en C. difformis zoals beschreven in 22. <ol><li> Transplantatie de zaailingen in polystyreen trays met 24 round-cellen (55 mm, 64 mm diep) filled met 60% siltig leemgrond, 30% zand en 10% turf (volumeprocent). </li><li> Zet de trays in 12 cm diep plastic containers gevuld met water en battened door geschroefd roestvrij stalen staven om te voorkomen dat ze te drijven (figuur 1). </li><li> Behoud waterniveau in de containers op 1-2 cm onder het niveau van het bodemoppervlak en voeg 1,5 g kopersulfaat om elke container de algengroei te voorkomen (die 10-12 liter water bevat). </li></ol></li></ol> 5. Herbicide Behandelingen <ol><li> Behandelingen met pre-herbiciden: <ol><li> Na ongeveer drie dagen in de kiemkast zoals beschreven in paragraaf 3, verplanten de kiemende zaden in plastic bakjes met de hierboven beschreven substraat en bedekken met een laag van de bodem (ongeveer 1 cm). Dit is een kritieke stap in zodat zaailingen niet zal ontstaan ​​vanwege het herbicide effect dan een buitensporig ingraafdiepte. </li><li> Neem het substraat veld Capaplaats door het plaatsen van de bakken, die enkele gaten aan de onderzijde, op schotels gevuld met water. </li><li> Eén dag na het uitplanten, behandel het laden met de pre-totstandkomingsherbicide 25. </li><li> Houd het substraat bij of nabij veldcapaciteit door toevoeging van water indien nodig zowel boven als onder door capillariteit van de schotel. Deze werkwijze bevordert de duurzaamheid van het herbicide op de juiste diepte (waarbij de kiemende zaden) van een behandelingseffectiviteit. </li></ol></li><li> Behandelingen met post-opkomst herbiciden: <ol><li> Spray planten toen ze de 2-3 bladstadium te bereiken (dat wil zeggen, groeistadium 12-13 van de Extended BBCH groei schaal 26). </li><li> Vanaf de dag na de behandeling, stel het irrigatiesysteem volgens de waterbehoefte van de onkruidsoorten en het seizoen (bijvoorbeeld voor Echinochloa spp. Het levert water voor 3 min 4 keer per dag, met regelmatige tussenpozen van 9 uur tot 9 pm). Water is disbijgedragen door middel van een automatische beregening systeem. Variant: glyfosaat wordt toegepast in de fabriek fase BBCH 14-21. </li></ol></li><li> Herbicide bereiding en distributie. Opmerking: Alle herbiciden (voor en na opkomst) toegepast als commerciële bereidingen met aanbevolen oppervlakte op twee doses aanbevolen dosis veld (1x) en drievoudige (3x). <ol><li> Indien nodig, de voorbereiding van de oppervlakte-actieve oplossing in bulk volgens de instructies op het etiket; de eindconcentratie wordt gewoonlijk uitgedrukt als een percentage van het uiteindelijke volume (bijvoorbeeld 0,3%) of volume te verdelen per oppervlakte-eenheid (bijvoorbeeld 1 L ha -1). </li><li> Gebruik surfactansoplossing als oplosmiddel voor het herbicide (opgeloste) oplossing om de juiste concentratie van het werkzame bestanddeel houden. Bereid de meest geconcentreerde herbicide oplossing eerst (3x). Bereken de hoeveelheid handelsproduct te worden opgelost in de oplossing van oppervlakteactieve stof (of gedeïoniseerd water als eensurfactant is niet nodig) met behulp van de volgende vergelijking: Dosis kruid = [(Dosis veld x Dosis max) x V fin] / V del Waar: Dosis herb = herbicide dosis (ml), dosis field = herbicide veld dosis (ml ha -1), max = maximum dosis toegediende, fin V = eindvolume van de oplossing (L), V = volume del van het geleverde bench spuit (L ha -1). </li><li> Verdun (2: 1, v / v) van de herbicide oplossing 3x de minder geconcentreerde ene (1x) bereiden. Deze procedure reduceert de kans op fouten bij het afwegen of pipetteren herbiciden. Herbicide Concentratie wordt uitgedrukt als volume te verdelen per oppervlakte-eenheid (L ha -1). </li><li> Start de sequentie van behandeling met het herbicide lagere dosis (1x). Op deze wijze behoeft de sproei kast wassen tussen twee behandelingen met dezelfde herbicide. </li><li> Verdeel de herbicide solution met een precisie bench spuit levert 300 L ha -1 (± 1%), bij een druk van 215 kPa en een snelheid van 0,75 m sec -1, een arm voorzien van drie platte ventilator (extended range) hydraulische nozzles . </li><li> Was het spuiten kabinet twee keer wanneer het herbicide wordt gewijzigd met bleekwater 1% (v / v) en spoel. Variant: glyfosaat wordt met een sproeivolume van 200 l ha -1 27. OPMERKING: Bijzondere aandacht moet worden besteed bij zeer biologische bestrijdingsmiddelen, zoals de sulfonylureas sulfometuron of flazasulfuron, worden gebruikt. In het laatste geval doet een wassing met een bleekmiddeloplossing en andere met ammonia (2,5% v / v), gevolgd door zorgvuldig spoelen met water. </li></ol></li></ol> 6. Verzameling en analyse van de gegevens <ol><li> Door middel van een barcode-lezer, die automatisch herkent elke lade, nemen het aantal planten dat de behandeling als de Visual Geschatte Biomassa (VEB) heeft overleefd. Planten zijn kontgineel zo dood als ze tonen geen actieve groei ongeacht kleur of ander uiterlijk. <ol><li> Maak de beoordeling drie of vier weken na behandeling (WAT) afhankelijk van de geteste herbiciden (bijvoorbeeld drie WAT voor ACCase remmers en vier WAT voor ALS-remmers of glyfosaat). </li><li> Evalueer de algemene werkzaamheid van de behandeling door het opnemen van een vatbare populatie (check S) in alle experimenten, dat wil zeggen, een populatie in een site die nooit of zelden behandeld met herbiciden was verzameld. </li><li> Express planten overleven als percentage van het aantal behandelde planten, telde net voor het herbicide behandeling, en het berekenen van de standaardfout (SE) per gemiddelde waarde (gemiddelde waarde van de twee herhalingen). </li><li> De VEB wordt verkregen door een visuele vergelijking van plantenbiomassa tussen behandelde en niet-behandelde controle van dezelfde populatie 25, 28. Een score, van 10 naar planten niet beïnvloed door het herbicide (vergeleken met de onbehandelde controle) tot 0 wanneerde planten duidelijk dood, wordt aan elke behandelde bak. </li></ol></li><li> Geeft populaties vier categorieën op basis van de resultaten van behandeling met twee doses herbicide resultaten: S wanneer minder dan 5% van planten overleefden de herbicide dosis 1x, SR bij overlevenden varieerden van 5% tot 20% bij herbicide dosis 1x, R wanneer meer dan 20% van de planten overleefden de herbicide dosering 1x en RR als overlevenden meer dan 20% bij herbicide dosis 1x en meer dan 10% bij herbicide dosering 3x 17. </li></ol>

<ol><li>Massa, D., Kaiser, Y. I., Andújar-Sánchez, D., Carmona-Alférez, R., Mehrtens, J., Gerhards, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+geo-referenced+database+for+weed+mapping+and+analysis+of+agronomic+factors+affecting+herbicide+resistance+in+Apera+spica-venti+L.+Beauv.+%28Silky+Windgrass%29%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomy%22%5BJournal%5D)">Development of a geo-referenced database for weed mapping and analysis of agronomic factors affecting herbicide resistance in Apera spica-venti L. Beauv. (Silky Windgrass).</a> Agronomy. 3 (1), 13-27 (2013).</li>
<li>Powles, S. B., Shaner, D. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPowles%2C+SB+%22Herbicides+Resistance+and+World+Grains%22">Herbicides Resistance and World Grains</a>. , CRC Press LLC. Raton, FL. 308(2001).</li>
<li>Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbicide+resistance+in+Europe%3A+an+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+BCPC+International+Congress%22%5BJournal%5D)">Herbicide resistance in Europe: an overview.</a> Proc. BCPC International Congress. , Crop Science & Technology. UK. 131-138 (2005).</li>
<li>Heap, I. M. International Survey of Herbicide Resistant Weeds. , Available from:
	 
 <a target="_blank" href="http://www.weedscience.org">http://www.weedscience.org</a> (2015).</li>
<li>Jasieniuk, M., Le Corre, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+evolution+of+herbicide+resistance+in+weeds%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Genet%22%5BJournal%5D)">Deciphering the evolution of herbicide resistance in weeds.</a> Trends Genet. 29 (11), 649-658 (2013).</li>
<li>Heap, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+documentation+of+herbicide+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytoprotection%22%5BJournal%5D)">Identification and documentation of herbicide resistance.</a> Phytoprotection. 75 (4), 85-90 (1994).</li>
<li>Beckie, H. J., Heap, I. M., Smeda, R. J., Hall, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+for+herbicide+resistance+in+weeds%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Technol%22%5BJournal%5D)">Screening for herbicide resistance in weeds.</a> Weed Technol. 14 (2), 428-445 (2000).</li>
<li>Tal, A., Kotoula-Syka, E., Rubin, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed-bioassay+to+detect+grass+weeds+resistant+to+acetyl+coenzyme+A+carboxylase+inhibiting+herbicides%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Prot%22%5BJournal%5D)">Seed-bioassay to detect grass weeds resistant to acetyl coenzyme A carboxylase inhibiting herbicides.</a> Crop Prot. 19, 467-472 (2000).</li>
<li>Boutsalis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syngenta+Quick-Test%3A+a+rapid+whole-plant+test+for+herbicide+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Technol%22%5BJournal%5D)">Syngenta Quick-Test: a rapid whole-plant test for herbicide resistance.</a> Weed Technol. 15 (2), 257-263 (2001).</li>
<li>Menchari, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weed+response+to+herbicides%3A+regional-scale+distribution+of+herbicide+resistance+alleles+in+the+grass+weed+Alopecurus+myosuroides%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Weed response to herbicides: regional-scale distribution of herbicide resistance alleles in the grass weed Alopecurus myosuroides.</a> New Phytol. 171 (4), 861-874 (2006).</li>
<li>Burgos, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review%3A+confirmation+of+resistance+to+herbicides+and+evaluation+of+resistance+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Sci%22%5BJournal%5D)">Review: confirmation of resistance to herbicides and evaluation of resistance levels.</a> Weed Sci. 61 (1), 4-20 (2013).</li>
<li>Owen, M. J., Martinez, N. J., Powles, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+herbicide-resistant+Lolium+rigidum.+%28annual+ryegrass%29+now+dominates+across+the+Western+Australian+grain+belt%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Res%22%5BJournal%5D)">Multiple herbicide-resistant Lolium rigidum. (annual ryegrass) now dominates across the Western Australian grain belt.</a> Weed Res. 54 (3), 314-324 (2014).</li>
<li>Herbicide Resistance Action Committee. Classification of herbicides according to site of action. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.hracglobal.com/Education/ClassificationofHerbicideSiteofAction.aspx">http://www.hracglobal.com/Education/ClassificationofHerbicideSiteofAction.aspx</a> (2015).</li>
<li>Beckie, H. J., Tardif, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbicide+cross+resistance+in+weeds%29%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Prot%22%5BJournal%5D)">Herbicide cross resistance in weeds).</a> Crop Prot. 35, 15-28 (2012).</li>
<li>Moss, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+occurrence+of+herbicide-resistant+grass-weeds+in+the+United+Kingdom+and+a+new+system+for+designating+resistance+in+screening+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+BCPC+Weeds%22%5BJournal%5D)">The occurrence of herbicide-resistant grass-weeds in the United Kingdom and a new system for designating resistance in screening assays.</a> Proc. BCPC Weeds. , Brighton. 179-184 (1999).</li>
<li>Baskin, C. C., Baskin, J. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaskin%2C+CC+%22Seeds%2C+Ecology%2C+Biogeography+and+Evolution+of+dormancy+and+Germination%22">Seeds, Ecology, Biogeography and Evolution of dormancy and Germination</a>. , Academic Press. San Diego, USA. 27-42 (1998).</li>
<li>Sattin, M., Gasparetto, M. A., Campagna, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Situation+and+management+of+Avena+sterilis.+ssp.+ludoviciana.+and+Phalaris+paradoxa.+resistant+to+ACCase+inhibitors+in+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+BCPC+-+Weeds%22%5BJournal%5D)">Situation and management of Avena sterilis. ssp. ludoviciana. and Phalaris paradoxa. resistant to ACCase inhibitors in Italy.</a> Proc. BCPC - Weeds. , Brighton, UK. 755-762 (2001).</li>
<li>Scarabel, L., Varotto, S., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+European+biotype+of+Amaranthus+retroflexus.+cross-resistant+to+ALS+inhibitors+and+response+to+alternative+herbicides%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Res%22%5BJournal%5D)">A European biotype of Amaranthus retroflexus. cross-resistant to ALS inhibitors and response to alternative herbicides.</a> Weed Res. 47 (6), 527-533 (2007).</li>
<li>Collavo, A., Panozzo, S., Lucchesi, G., Scarabel, L., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+and+management+of+Phalaris+paradoxa.+resistant+to+ACCase-inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Prot%22%5BJournal%5D)">Characterisation and management of Phalaris paradoxa. resistant to ACCase-inhibitors.</a> Crop Prot. 30 (3), 293-299 (2011).</li>
<li>Scarabel, L., Carraro, N., Sattin, M., Varotto, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+basis+and+genetic+characterisation+of+evolved+resistance+to+ALS-inhibitors+in+Papaver+rhoeas%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Molecular basis and genetic characterisation of evolved resistance to ALS-inhibitors in Papaver rhoeas.</a> Plant Sci. 166 (3), 703-709 (2004).</li>
<li>Panozzo, S., Scarabel, L., Tranel, P. J., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target-site+resistance+to+ALS+inhibitors+in+the+polyploid+species+Echinochloa+crus-galli%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic.+Biochem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Target-site resistance to ALS inhibitors in the polyploid species Echinochloa crus-galli.</a> Pestic. Biochem. Phys. 105 (2), 93-101 (2013).</li>
<li>Sattin, M., Berto, D., Zanin, G., Tabacchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+ALS+inhibitors+in+rice+in+north-western+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+BCPC.+Weeds%22%5BJournal%5D)">Resistance to ALS inhibitors in rice in north-western Italy.</a> Proc. BCPC. Weeds. , Brighton. 783-790 (1999).</li>
<li>Scarabel, L., Berto, D., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dormancy+breaking+and+germination+of+Alisma+plantago-aquatica.+and+Scirpus+mucronatus%5BTitle%5D)+AND+%22Aspects+of+Applied+Biology%22%5BJournal%5D)">Dormancy breaking and germination of Alisma plantago-aquatica. and Scirpus mucronatus.</a> Aspects of Applied Biology. 69, Wellesbourne, UK. 285-292 (2003).</li>
<li>Collavo, A., Strek, H., Beffa, R., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+an+ACCase-inhibitor-resistant+Lolium+rigidum.+population+based+on+the+use+of+ALS+inhibitors%3A+weed+population+evolution+observed+over+a+7+years+field-scale+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag.+Sci%22%5BJournal%5D)">Management of an ACCase-inhibitor-resistant Lolium rigidum. population based on the use of ALS inhibitors: weed population evolution observed over a 7 years field-scale investigation.</a> Pest Manag. Sci. 69 (2), 200-208 (2013).</li>
<li>Scarabel, L., Panozzo, S., Savoia, W., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target-site+ACCase-resistant+Johnsongrass+%28Sorghum+halepense%29.+selected+in+summer+dicot+crops%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Technol%22%5BJournal%5D)">Target-site ACCase-resistant Johnsongrass (Sorghum halepense). selected in summer dicot crops.</a> Weed Technol. 28 (2), 307-315 (2014).</li>
<li>Hess, M., Barralis, H., Bleiholder, H., Buhur, L., Eggers, T., Hack, H., Strauss, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+extended+BBCH+scale+-+general+for+the+description+of+the+growth+stages+of+mono-+and+dicotyledonous+weed+species%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Res%22%5BJournal%5D)">Use of the extended BBCH scale - general for the description of the growth stages of mono- and dicotyledonous weed species.</a> Weed Res. 37 (6), 433-441 (1997).</li>
<li>Collavo, A., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+glyphosate-resistant+Lolium.+spp.+biotypes+found+in+a+European+annual+arable+cropping+system+also+affected+by+ACCase+and+ALS+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Res%22%5BJournal%5D)">First glyphosate-resistant Lolium. spp. biotypes found in a European annual arable cropping system also affected by ACCase and ALS resistance.</a> Weed Res. 54 (4), 325-334 (2014).</li>
<li>Scarabel, L., Cenghialta, C., Manuello, D., Sattin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+and+management+of+imidazolinone-resistant+red+rice+%28Oryza+sativa.+L.%2C+var.+sylvatica.%29+in+Clearfield%C2%AE+Italian+paddy+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomy%22%5BJournal%5D)">Monitoring and management of imidazolinone-resistant red rice (Oryza sativa. L., var. sylvatica.) in Clearfield® Italian paddy rice.</a> Agronomy. 2 (4), 371-383 (2012).</li>
<li>Zelaya, I. A., Anderson, J. A. H., Owen, M. D. K., Landes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+spectrophotometric+and+HPLC+methods+for+shikimic+acid+determination+in+plants%3A+Models+in+glyphosate-resistant+and-susceptible+crops%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Evaluation of spectrophotometric and HPLC methods for shikimic acid determination in plants: Models in glyphosate-resistant and-susceptible crops.</a> J. Agric. Food Chem. 59 (6), 2202-2212 (2011).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.

Verschillende stappen in de protocollen zijn van cruciaal belang voor een succesvolle evaluatie van herbicideresistentie in een populatie: 1) zaden moeten worden verzameld bij volwassen uit planten die het herbicide behandeling (s) had overleefd. Rijping van de zaden op de moederplant is cruciaal voor problemen bij zaadkieming later voorkomen; 2) de juiste opslag van de zaden wordt aanbevolen om de proliferatie van schimmels die kieming zou voorkomen dat te voorkomen; 3) zaailingen worden behandeld met de juiste groeist...

<html> Herbiciden zijn de meest intensief gebruikt onkruidbestrijding maatregel, goed voor maximaal 50% van de wereldwijde markt van gewasbeschermingsmiddelen 1. Ze zijn relatief goedkoop gereedschap, voorkomen arbeidsintensief en tijdrovend grondbewerking praktijken, en uiteindelijk resulteren in een kosten-effectieve, veilige en winstgevende productie van levensmiddelen 2. Echter, de grote fenologische en genetische variabiliteit aanwezig in veel onkruidsoorten, samen met een over-afhankelijkheid van herbiciden gebruik, vaak resulteert in de selectie van de herbicide-resistente onkruid populaties. De introductie van selectieve herbiciden met een zeer specifieke metabole doelgroep 3-5 is dramatisch toegenomen het aantal gevallen verzet door de jaren heen. Tot op heden zijn 240 onkruidsoorten (140 tweezaadlobbigen en eenzaadlobbigen 100) wereldwijd resistentie tegen verschillende herbicide werkingsplaatsen (SOA) 4 ontstaan. Dit is een grote zorg voor het beheer van onkruid en meer in het algemeen voor de duurzame productie van gewassen. e_content &quot;&gt; Vroege opsporing van resistentie, op basis van betrouwbare tests vaak uitgevoerd in een kas, is een belangrijke stap om herbicide resistente onkruiden te beheren. Verschillende benaderingen zijn ontwikkeld op basis van de doelstellingen, de gewenste mate van nauwkeurigheid, tijd en middelen beschikbaar zijn, zoals Naast de onkruidsoorten als 6-12. Wanneer echter de bevestiging van het resistentieprofiel van nieuwe onkruid biotype is vereist (dat wil zeggen een groep individuen die verschillende fysiologische kenmerken hebben, waaronder het vermogen om één of meer herbiciden behoren tot een overleven bepaalde groep toegepast in een dosis die ze normaal zouden regelen), een robuuste hele plant bioassay heeft in een gecontroleerde omgeving 4, 11 worden uitgevoerd. Een biotype is zelden bestand tegen slechts één herbicide. Elke biotype wordt dus gekenmerkt door een zekere resistentiepatroon, dwz, aantal en type van SoA van herbiciden is het bestand tegen en door een bepaalde weerstandniveau om elke herbicide 13. De vroege en betrouwbare bepaling van het patroon van kruis of meervoudige resistentie 5, 14 is belangrijk voor veldresistentie management. Vermeldenswaardig is dat herbicideresistentie heeft niets te maken met de natuurlijke tolerantie waard dat sommige onkruidsoorten vertonen richting sommige herbiciden, bijvoorbeeld, tweezaadlobbige soorten vs. ACCase-remmende herbiciden, eenzaadlobbige soorten vs. 2,4-D, heermoes vs. glyfosaat. Dit document presenteert een robuuste aanpak voor het testen van vermeende herbicide resistente biotypen bemonsterd op gebieden waar de slechte controle van herbicide (s) had gemeld. Relevant varianten de standaardprotocollen met betrekking tot de onkruidsoorten betrokken worden. De voordelen ten opzichte van alternatieve technieken / protocols gebaseerd op ofwel hele plant bioassays met één herbicide dosis 15 of behandelen zaden in Petrischalen 8 zijn aan de hogere reliabiliteit en kan worden afgeleid van de weerstand door de toevoeging van twee herbicide doses in de experimenten. Voor routine resistentietest, dezelfde werkwijzen kunnen worden toegepast op slechts één herbicide dosis, zodat de kosten verlagen. Evenals waardoor bevestiging van de status van de weerstand, kan de verkregen informatie worden gebruikt voor zowel het optimaliseren van de volgende stappen in het onderzoek en / of het bedenken van geluid weerstand management strategieën.

<table><tbody><tr><td>Paperen zakken</td><td>Celcar SAS</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kunststof servies</td><td>ISI plast S.p.A.</td><td>SO600</td><td>Transparant plastic</td></tr><tr><td>Zwavelzuur 95-98%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320501</td><td></td></tr><tr><td>Vliesstof</td><td>Carretta Tessitura</td><td>Art.TNT17</td><td>Gewicht 17 g m-2</td></tr><tr><td>Chloroform >99,5%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2432</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A1296</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumnitraat >99,0%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8394</td><td></td></tr><tr><td>Kunststof containers</td><td>Giganplast</td><td>1875/M</td><td>600 x 400 x 110 mm</td></tr><tr><td>Kunststof trays</td><td>Piber plast</td><td>G1210A</td><td>325 x 265 x 95 mm</td></tr><tr><td>Polystyreen trays</td><td>Plastisavio</td><td>S24</td><td>537 x 328 x 72 mm, 24 ronde cellen (6x4)</td></tr><tr><td>Kopersulfaat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>451657</td><td></td></tr><tr><td>Agriperliet</td><td>Blu Agroingross sas</td><td>AGRI100</td><td></td></tr><tr><td>Turf</td><td>Blu Agroingross sas</td><td>TORBA250</td><td></td></tr><tr><td>Kiemkast</td><td>KW</td><td>W87R</td><td></td></tr><tr><td>Spuitmonden</td><td>Teejet</td><td>XR11002-VK, TP11001-VH</td><td>Het tweede type spuitmonden worden alleen gebruikt voor glyfosaat</td></tr><tr><td>Streepjescodegenerator</td><td>Toshiba TEC</td><td>SX4</td><td></td></tr><tr><td>Labels met streepjescode</td><td>Felga</td><td>TT20200</td><td>Inlijmlabels met afgeronde hoeken</td></tr><tr><td>Streepjescodelezer</td><td>Cipherlab</td><td>8300-L</td><td>Draagbare dataterminal</td></tr><tr><td>Bankspuit</td><td></td><td></td><td>In eigen beheer gebouwd</td></tr><tr><td colspan="4">Herbiciden inbegrepen in de resultaten:</td></tr><tr><td>Commercieel product</td><td>Actief ingrediënt</td><td>Bedrijf</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Altorex</td><td>imazamox</td><td>BASF</td><td></td></tr><tr><td>Azimut</td><td>florasulam</td><td>Dow AgroSciences</td><td></td></tr><tr><td>Biopower</td><td></td><td>Bayer Crop Science</td><td>Tent te gebruiken met Hussar WG</td></tr><tr><td>Dash</td><td></td><td>BASF</td><td>Tent te gebruiken met Altorex</td></tr><tr><td>Granstar</td><td>tribenuron-methyl</td><td>Dupont</td><td></td></tr><tr><td>Gulliver</td><td>azimsulfuron</td><td>Dupont</td><td></td></tr><tr><td>Hussar WG</td><td>iodosulfuron</td><td>Bayer Crop Science</td><td></td></tr><tr><td>Nominee</td><td>bispyribac-Na</td><td>Bayer Crop Science</td><td></td></tr><tr><td>Roundup</td><td>glyfosaat</td><td>Monsanto</td><td></td></tr><tr><td>Trend</td><td></td><td>Dupont</td><td>Tent te gebruiken met Granstar en Gulliver</td></tr><tr><td>Viper</td><td>penoxsulam</td><td>Dow AgroSciences</td><td></td></tr><tr><td>Weedone LV4</td><td>2,4-D</td><td>Isagro</td><td></td></tr></tbody></table>

protocollen voor robuuste herbicideresistentie testen in verschillende weed species

Protocols for Robust Herbicide Resistance Testing in Different Weed Species

Robuuste protocollen om vermeende herbicideresistente onkruidpopulaties op het niveau van de hele plant te testen, zijn essentieel om de resistentiestatus te bevestigen. De gepresenteerde protocollen, gebaseerd op bioassays met hele planten uitgevoerd in een kas, kunnen gemakkelijk worden aangepast aan een breed scala aan onkruidsoorten en herbiciden door middel van geschikte varianten. Zaadmonsters van planten die een herbicidebehandeling op het veld hebben overleefd, worden verzameld en droog op een lage temperatuur bewaard totdat ze worden gebruikt. De kiemingsmethoden verschillen afhankelijk van de onkruidsoorten en het type zaaddormantie. Zaailingen in een vergelijkbare groeifase worden overgeplant en in de kas onder de juiste omstandigheden gehouden totdat de planten de juiste groeifase hebben bereikt voor herbicidebehandeling. Nauwkeurigheid is vereist om de herbicide-oplossing te bereiden om oncontroleerbare fouten te voorkomen. Andere cruciale stappen zoals het toepassingsvolume en de snelheid van spuiten worden ook geëvalueerd. De voordelen van dit protocol, in vergelijking met andere gebaseerd op bioassays met hele planten met één herbicidedosering, hebben betrekking op de hogere betrouwbaarheid en de mogelijkheid om het resistentieniveau af te leiden. Snellere en goedkopere in vivo of in vitro diagnostische screeningstests zijn voorgesteld (Petrischaal-bioassays, spectrofotometrische tests), maar deze leveren alleen kwalitatieve informatie en het brede gebruik ervan wordt belemmerd door de arbeidsintensieve instelling die sommige soorten mogelijk vereisen. Voor routinematig resistentietesten kan de voorgestelde bioassay met hele planten worden toegepast bij slechts één herbicidedosering, waardoor de kosten worden verlaagd.

Om de weerstand status van een vermeende resistente bevolking te beoordelen, is het van fundamenteel belang voor een vatbare controle in de test omvatten om de herbicide effectiviteit te controleren. De resultaten van een screeningtest uitgevoerd op blz rhoeas populaties, onkruid geïnfecteerd tarwe velden, worden in figuur 2, waarbij de effectiviteit van vier-herbiciden op een gevoelige controle (09-36) en de vermoedelijke resistente één (10-91) worden gepresenteerd. Populatie 09-36 werd volled...

Een robuuste en flexibele aanpak om herbicideresistentie in onkruidpopulaties te bevestigen wordt gepresenteerd. Dit protocol maakt het mogelijk om de niveaus van herbicideresistentie te bepalen en toe te passen op een breed scala aan onkruidsoorten en herbiciden met kleine aanpassingen.

Protocollen voor Robuuste herbicideresistentie testen in verschillende Weed Species

Robust protocols to test putative herbicide resistant weed populations at whole plant level are essential to confirm the resistance status. The presented ...

Het algemene doel van deze procedure is om herbicide-resistentie te testen en te bevestigen bij een breed scala aan onkruidsoorten en herbiciden, alsofmede om de niveaus van herbicide-resistentie af te leiden. Dit wordt bereikt door eerst de dormantie te doorbreken van zaden die zijn verzameld van planten die een herbicidebehandeling hebben overleefd, om zo gelijktijdige kieming en zaailingontwikkeling te verkrijgen. Hiervoor is een periode van vernalisatie van de zaden vereist, variërend van enkele dagen tot meer dan een week.De tweede stap bestaat uit het gieten van een agarmedium met kaliumnitraat in plastic schaaltjes. De Vern-zaden worden vervolgens op de gestolde agar geplaatst en de schaaltjes worden overgebracht naar een kiemkast met de optimale omstandigheden voor elke onkruidsoort. Vervolgens worden 15 tot 20 zaailingen verplant naar plastic trays gevuld met een standaard potgrondmengsel.Aan elk plateau wordt een barcode toegewezen, inclusief alle informatie voor de unieke identificatie, waarna de plateaus in een verwarmde kas worden geplaatst totdat de zaailingen het stadium van twee tot drie bladeren hebben bereikt. De laatste stap is de behandeling met herbiciden met b

protocols-for-robust-herbicide-resistance-testing-different-weed

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

Dit manuscript toont en bespreekt technieken die gebruikt worden om pesticiden gevoeligheid enquête en de weerstand tegen contact-en systemische bestrijdingsmiddelen te detecteren in arthropod ongedierte.

Bioassays voor Monitoring Insecticide Resistance

Deze video legt de mechanismen van de waardplant weerstand tegen herbivorie en toont een no-choice test die de relatieve bijdragen van antibiose en tolerantie voor spittlebug weerstand in de...

Karakteriseren Herbivore resistentiemechanismen: Spittlebugs op Brachiaria Spp. als een voorbeeld

Wij bieden een kosteneffectieve en snelle moleculaire genotypering protocol dat ras-specifieke PCR-primers werken die zich richten op DNA-sequentie verschillen binnen de chloroplast trnL-F spacer regio onderscheid te maken tussen...

Een PCR-gebaseerde genotyperingsmethode onderscheid te maken tussen wild-type en Sier Rassen van Imperata cylindrica</em

Geneesmiddelresistentie voor gerichte therapeutica is wijdverbreid en de noodzaak om resistentiemechanismen te identificeren - voor of na de eerste klinische verschijnselen - is essentieel voor het geleiden alternatieve klinische strategieën. Hier presenteren we een protocol te koppelen afleiding van resistente lijnen in vitro sequentiebepaling ontdekking van deze mechanismen te bespoedigen.

Invoer van<em&gt; In Vitro</em&gt; Drug Resistance Testen: maximaliseren van het potentieel voor het blootleggen van klinisch relevante resistentiemechanismen

Dit manuscript beschrijft hoe herbicidemetabolismesnelheden effectief kunnen worden gekwantificeerd met uitgesneden bladeren van een tweezaadlobbig onkruid, waardoor variabiliteit wordt verminderd en alle mogelijke verstorende effecten van herbicideopname of -translocatie, die typisch worden waargenomen in hele-plantassays, worden geëlimineerd.

Meten tarieven herbicide Metabolisme in Dicot Onkruid met een weggesneden Leaf Assay

Overdraagbaar aan residuen van bestrijdingsmiddelen experimenten in turfgrass systemen zijn een integraal onderdeel van de blootstelling risicobeoordelingen mens. Experimentele benaderingen overdraagbare residuen gemeten moet worden aangepast aan de menselijke interactie plaats en turfgrass systeemdynamica. Drie overdraagbaar aan residuen van bestrijdingsmiddelen protocollen worden gepresenteerd en de geschiktheid over drie turfgrass systemen wordt besproken.

Protocollen voor het kwantificeren van Overdraagbare residuen van bestrijdingsmiddelen in Turfgrass Systems

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor de snelle niet-destructieve screening van katoen genotypen voor reniform nematode resistentie. Het protocol omvat het visueel onderzoeken van de wortels van met nematode besmette katoen zaailingen om de infectie respons te bepalen. De vegetatieve shoot van elke plant wordt vervolgens gekweekt om planten voor zaadproductie te herstellen.

Screening van katoen genotypes voor Reniform nematode resistentie

Allelopathie heeft aangetoond belofte als een nuttige aanvullende onkruidbestrijding strategie in bijsnijden systemen. Om het allelopathische potentieel van een gewenst plantmonster te bepalen, wordt een trapstapscreeningsmethode geboden.

Herhaalbare Trap-stap Assay toegang tot de Allelopathische potentieel van weedy rice(Oryza sativa ssp.)

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor de efficiënte en nauwkeurige screening van tabaksgenotypes op Phytophthora nicotianae-resistentie bij zaailingen. Dit is een praktische benadering voor precisieveredeling, evenals onderzoek naar moleculaire mechanismen.

Screening van tabaksgenotypes op Phytophthora nicotianae resistentie

Producten op basis van glyfosaat (GBP) zijn wereldwijd de meest voorkomende breedspectrumherbiciden. In dit artikel introduceren we algemene richtlijnen om het effect van GBP op microbiomen te kwantificeren, van veldexperimenten tot bioinformatica-analyses.

Kwantificering van de potentiële impact van producten op basis van glyfosaat op microbiomen

Hier presenteren we een protocol voor het genereren van chemoresistente cellen met behulp van een dosis-escalatie-methode, gevolgd door een CRISPR/Cas9-gebaseerde screen met een gerichte sgRNA-bibliotheek die epigenetische modifiers gebruikt om regulatoren van verworven chemoresistentie te identificeren. Het protocol biedt ook meerdere optimalisatiepunten die zijn afgestemd op chemoresistente celmodellen, en biedt een robuust kader voor onderzoekers die resistentiemechanismen onderzoeken.

Epigenoom-brede CRISPR-Cas9-gebaseerde knockout-screens op chemoresistente cellen

Leer robuuste herbicideresistentietesten voor onkruidbeheer in landbouw met dit flexibele protocol. De methode bevestigt resistentieniveaus bij diverse onkruidsoorten door kiemrustbreking en nauwkeurige dosering.

Protocollen voor Robuuste herbicideresistentie testen in verschillende Weed Species

Meer video's verkennen