Name: Een All-laser Endothelial Transplant (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Leer een volledig lasergebaseerde endotheeltransplantatie met femtoseconde laser voor minimaal invasieve hoornvlieschirurgie. Deze techniek verbetert de hechting van donorweefsel en vermindert het risico op flapdislocatie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs willen FORTE Project, gefinancierd door de regio Toscane (POR Creo FESR 2007-2013 Bando Unico R &amp; S 2012), de EU FP7 ECHORD ++ Experiment LA-ROSES dat gedeeltelijk ondersteund de onderzoeksactiviteiten, en het KP7 BiophotonicPlus Project &quot;LITE&quot; verleend bedanken door regio Toscane.

De studie werd uitgevoerd bij de prospectief goedkeuring van het ziekenhuis ethische commissie; geïnformeerde toestemming werd verkregen. De studie was in het vasthouden aan de principes van de Verklaring van Helsinki. 1. Donor Endotheel Voorbereiding <ol><li> Gebruik een donor hoornvlies zoals opgemaakt door de plaatselijke oog bank bij kamertemperatuur. </li><li> In de operatie kamer, trek de donor hoornvlies uit de aflevering container en apart gezet van de oplossing voor het weefsel behoud en voeding die wordt gebruikt voor het transport van het hoornvlies. </li><li> Plaats de donor corneo-sclerale velg meer dan een kunstmatige voorste kamer, waarin een vloeistof kan stromen en het creëren van een variabele druk; bedekken het hoornvlies met het weefsel behoud hoofd. </li><li> Sluit de kunstmatige voorste kamer (AAC) via een 3-weg verbinding naar een injectiespuit gevuld met de cornea behoud en voedingsvloeistof. </li><li> Gebruik de compressie ring om de houder stevig op zijn plaats houden. </li><li> Gebruik de Syringe verbonden met de AAC aan de intracamerale druk te handhaven: vul de voorste kamer met het weefsel behoud oplossing tot de optimale druk (zie 1.7) te bereiken. Sluit de connector. </li><li> Test de druk in de voorste kamer met een vinger. Verander de binnendruk tot aan de juiste inwendige druk (in het bereik 60-70 mmHg). Sluit de 3-weg connector. </li><li> Meet de dikte van de donor hoornvlies met Optical Coherence Thomography (oktober). Handhaving van de voorste kamer met die cornea in een vaste positie in de voorkant van het instrument optica en neem dan een volledige dikte-oktober overname. </li></ol> 2. Femtoseconde Laser Voorbereiding van de Donor endotheel <ol><li> Voer applanatie van de donor hoornvlies onder de femtoseconde laserinrichting. Gebruik de femtosec laser om het donorweefsel gesneden met drie opeenvolgende bezuinigingen: posterior side cut, vol gelamelleerde en de voorste kant cut. Stel de volgende parameters voor de drie bezuinigingen.<ol><li> Voor de volledige lamellaire snede (rasterpatroon, beginnen), zet de cut diepte overeenkomt met het dunste punt van de donor hoornvlies (gemeten met de LGO, zoals beschreven in 1.8), altijd af te trekken 95 micrometer. Stel de pulsenergie in het bereik 0,8-0,9 uJ (afhankelijk van de werkdiepte). Stel de diameter tot 8,7 mm. Stel de tangentiële plaatse scheiding 2 urn. Stel de radiale plaatse scheiding 2 urn. </li><li> Voor de voorste kant cut, stel de achterste diepte 30 micrometer dieper dan de vorige volledige gelamelleerde cut. Stel de puls energie om 2.10 uJ; de diameter 8,6 mm; Ter plaatse scheiding 3 urn, terwijl de laag scheiding 3 urn. </li><li> Voor de achterste kant cut, zoekt de voorste diepte van de achterste zijde gesneden 30 micrometer naar voren dan de volledige gelamelleerde cut. Stel het achterste diepte 900 pm. Stel de puls energie om 2.10 uJ; de diameter 8,3 mm; Ter plaatse scheiding 2 micrometer; de laag scheiding 2 urn. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Ontvanger Eye Voorbereiding <ol><li> Bereid de patiënt voor de operatie. Maak een 4.00 mm hoornvlies incisie om 12 uur met een 4,0 mm voorgekalibreerd mes. Maak een limbale paracentese met een 1,2 mm voorgekalibreerd mes, geplaatst op 2:00. Maak nog een limbale paracentesis om 6 uur met een 30 ° stab mes. </li><li> Plaats een voorste oogkamer handhaver in de voorste kamer van de patiënt, door het 02:00 paracentese. </li><li> Voer een 8.2 mm diameter ronde descemetorexis met de speciale haak. </li><li> Strip de Descemet membraan en endotheel van de achterste stroma en verwijder de weefsels met een Descemet haak. </li></ol> 4. chromofoor Voorbereiding <ol><li> Doe 1 mg Indocyanine Green poeder in een 1,5 ml microcentrifugebuis. </li><li> Voeg 9 mg steriel water (het water ICG oplossing 10% w / w). </li><li> Handmatig meng de ICG poeder en het water met een metalen roerder. </li&gt; </ol> 5. kleuring van Donor endotheel <ol><li> Plaats de donor endotheel op het verwijde deel van een Busin-injector, waarbij de binnenzijde in contact met het oppervlak injector. </li><li> Vlekken op de binnenzijde van donor endotheel met de chromofoor oplossing, in het randdeel, met een spatel. Het correct gekleurd weefsel heeft een homogene groenachtige kleur. Wacht 3 minuten voordat u begint met stap 5.3. </li><li> Trek de donor endotheel op het voorste deel van de Busin-injector, gerold. </li></ol> 6. Plaatsen van de Donor endotheel <ol><li> Pak en steek de gevouwen donor endotheel gebruik van een atraumatische coaxiale tang voor endotheliale lenticule. </li><li> Verwijder de voorste oogkamer beheerder. </li><li> Hecht het hoornvlies incisie en de paracentese (uitgevoerd in stap 3.1) met een Nylon 10,0 enkele stich. </li><li> Injecteren van een luchtbel aan het donorweefsel ontvouwen en te drukken tegen de ontvanger hoornvlies. De luchtbel moet compom- geven vul de voorste oogkamer ruimte. </li></ol> 7. Laser Welding <ol><li> Plaats de donor lenticule in het midden van de cornea ontvanger, vanuit een haak of bewegen van de luchtbel uit de buitenkant van het hoornvlies met een spatel. </li><li> Gebruik een diodelaser die uitzendt bij 810 nm, uitgerust met een 300 urn kerndiameter steriele glasvezel, met 0,22 als numerieke apertuur (NA). </li><li> Houd de vezelpunt buiten de oogbol en levert de laser licht vanaf de bevlekte endotheel via de transparante hoornvliesweefsel. De vezel tip is in non-contact-configuratie. </li><li> Gebruik de volgende instellingen voor de laser: enkele spot emissie-modus, 70-80 msec pulsduur, 35-40 mJ per puls. He-Ne richtstraal op. </li><li> Lever enkele laser plekjes aan de gebrandschilderde periferie van de donor endotheel. Lever de spots achtereenvolgens: het laatste aspect is een ring van vlekken in de omtrek van de donor lenticule. De afstand tussen twee Adjacent plekken centrum is het dubbele van een spot diameter. </li><li> Breng een contactlens op het oog patiënt, samen met 0,3% en 0,1% tobramycine oftalmische suspensie dexamethasone. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
<li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XVIII%22%5BJournal%5D)">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
<li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.

De &quot;all laser&quot; endotheliale transplantatie is een originele benadering van minimaal invasieve hoornvliestransplantatie. Alle in het protocol beschreven procedures werden uitgevoerd in de operatiekamer, het observeren van de hygiëne en sterilisatie procedure die gemeenschappelijke praktijken tijdens operaties, zoals het gebruik van gesteriliseerde handschoenen, toga, masker en cap zijn. De ICG oplossing werd bereid in de operatiekamer, kort voor de toepassing in kleuren van de donor...

In dit werk stellen we een originele benadering endotheliale keratoplasty, gebaseerd op het gebruik van een femtoseconde laser om donorweefsel en een nabij infrarood diodelaser te lassen op de ontvangende laag te bereiden. Intraoperatieve meting van de donor hoornvlies moeten de afmetingen donorweefsel kunnen ontwerpen. Endotheliale keratoplastiek is in de laatste jaren voorgesteld penetrerende keratoplastie vervangen behandelen ziekte endotheliale 1,2. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is sneller visueel herstel met betrekking tot penetrerende keratoplastie, verminderde anesthesie tijdens de operatie, een verminderd risico van afstoting van het transplantaat en het behoud van integriteit oog. De belangrijkste risicofactor is postoperatieve donor lenticule dislocatie. De standaardtechniek wordt uitgevoerd door het inbrengen van de donor endotheel in zijn eindpositie waar het wordt gehandhaafd door de injectie van een luchtbel: geen hechtingen worden gebruikt vanwege de mechanische, biofysische en dimensionele characteristics van het endotheel. Bovendien kan gezichtsscherpte herstel beperkt vooral door een mismatch tussen donor en ontvanger weefsel door een dikke getransplanteerde weefsel. Hier presenteren we een procedure uitvoeren endothelial keratoplasty dat de belangrijkste problemen kan overwinnen. De donor endothelium kan in zijn eindpositie worden gewaarborgd door het gebruik van de laser lastechniek. Dit is een gecontroleerde en gelokaliseerde fotothermische proces: het kan worden geïnduceerd bij de donor / ontvanger-interface. Er is onderzocht in de afgelopen tien jaar en in indringende keratoplasty en in de transplantatie van endotheel 3-5 voorgesteld. De nabije infrarood licht (golflengte: 810 nm) uitgezonden door een laag vermogen diodelaser is geboekt met het biologische weefsel op de wond. Het hoornvlies is uiteraard transparant voor deze golflengte: om dit weefsel te brengen in het laserlicht te absorberen, dient te kleuren met een chromofoor. De voorgestelde kleurstof een steriel verzadigdd water oplossing van indocyaninegroen (ICG). We hebben aangetoond dat wanneer hoornvliesweefsel goed is gekleurd met dit ICG voorbereiding, het toont een absorptiepiek bij 810 nm 6. Bovendien wordt ICG veel gebruikt in de klinische diagnostiek en de veiligheid ervan reeds aangetoond bij mensen. De gebrandschilderde hoornvlies absorbeert de diodelaser licht energie en de belangrijkste uiteindelijke effect is een gecontroleerde temperatuur stijging bij het lassen website. Geen thermische effecten veroorzaakt in het ongekleurde weefsel. De versterking temperatuur veroorzaakt reversibele thermische denaturatie in de stromale collageen, met een onmiddellijke closuring van de wond wanden bij afkoeling. Dit laserlassen effect werd eerst aangetoond in staaroperaties 7,8 en doordringend keratoplastie 9,10. Een geoptimaliseerde benadering die we presenteren in dit document is onderzocht voor toepassing in endotheliale keratoplasty. In de voorgestelde operatie, enkele laser vlekken (blijvende tientallen msec) are afgeleverd aan het weefsel, hetgeen resulteert in een fotothermische effect gelokaliseerd binnen de spot afmeting (enkele honderden micrometer in diameter): de geïnduceerde effect is een harde laserlassen, bestaande uit een fotocoagulatie van het collageen afgezonderd donor / hostinterface. Het resultaat van het collageen denaturatie bij de gelaste plaats een sterke hechting tussen de donor en gastheer weefsels, waardoor een effect hechten die onmogelijk te verkrijgen met standaardtechniek (st). Het weefsel herwint zijn natuurlijke uitstraling in een korte follow-up (1 maand) en de hechting tussen donor / gastheerweefsels wordt verbeterd door de lassen aangebracht in een zeer vroeg stadium van de genezing fase. Om de andere belangrijke risico van endotheliale keratoplastiek, namelijk de transplantatie van een dikke donorweefsel voorkomen wordt intrasurgical optical coherence tomography (OCT) gebruikt: een commercieel toestel meet de dikte van donor hoornvlies, waardoor een correcte snede profiel worden ontworpen defemtosec laser. De voorgestelde &quot;all laser&quot; endotheliale transplantatie lijkt dus de klinische resultaten van deze minimaal invasieve chirurgie verbeterd.

<table><tbody><tr><td>Indocyanine Green</td><td>Pulsion Medical Systems, Germany</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>Alternatief product: IC-GREEN, Akorn&nbsp; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Femtosecond Laser&nbsp;</td><td>Abbott Medical Optics,&nbsp; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, USA</td><td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Optical Coherence Tomography (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, California- US (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Visante</td><td></td></tr><tr><td>Diode Laser</td><td>E.l.En. Group s.pa., Calenzano-FI, Italy (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. WELD 800</td><td></td></tr><tr><td>Artificial Anterior Chamber</td><td>CORONET, corneal graft products. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, UK</td><td>Artificial Anterior Chamber (A.A.C.) met grote en kleine weefselbehoudkoppen. Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>Oplossing voor weefselbehoud en voeding&nbsp;&nbsp;</td><td>AL.CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&ograve; - PD &nbsp;ITALY</td><td>Carry-C media voor cornea deturgescentie en transport bij kamertemperatuur - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

een &quot;all-laser&quot; endothelial transplant

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

De "alleen laser" geassisteerde endotheelkeratoplastika is een procedure die wordt uitgevoerd met een femtosecondelaser die wordt gebruikt om het donorweefsel op een bepaalde diepte te snijden, en een nabij infrarood diodelaser om het hoornvliesweefsel te lassen. De voorgestelde techniek maakt het mogelijk om de drie belangrijkste doelen in endotheelkeratoplastika te bereiken: een nauwkeurige controle over de dikte van het donorweefsel; zijn gemakkelijke inbreng in het ontvangende bed en een verminderd risico op dislocatie van de donorlenticel. De dikte van het donorhoornvlies wordt gemeten in de operatiekamer met optische coherentietomografie (OCT), om de afmetingen van het donorweefsel correct te ontwerpen. Een femtosecondelaser wordt gebruikt om het donorhoornvlies te snijden. Het ontvangende oog wordt voorbereid door manuele striping van het descemetmembraan. Het donorendotheel wordt in een Busin-injector geplaatst, de perifere binnenkant wordt gekleurd met een geschikte chromofoor (een wateroplossing van Indocyanine Green) en vervolgens wordt het in de voorste kamer getrokken. Het getransplanteerde weefsel wordt op de juiste en uiteindelijke locatie geplaatst en vervolgens wordt diodelaserlassen van buitenaf op het oogbol geïnduceerd. De procedure is uitgevoerd op meer dan 15 patiënten, wat een verbetering in chirurgische prestaties aantoont, met een goede herstel van de gezichtsscherpte en een verminderd voorval van dislocatie van de donorlenticel.

The &quot;all laser&quot; surgical procedure voorgesteld minimaal invasieve hoornvliestransplantatie voeren. De procedure is eenvoudig uit te voeren (zie figuur 1) ten opzichte van een standaard endotheliale transplantatie alleen de stappen van het meten van de hoornvliesdikte, kleuren van de donorweefsel en leveren het laserlicht worden toegevoegd. De behaalde voordelen grotendeels compenseren een verhoogde chirurgische tijd van een paar minuten. Het gebruik van intraoperatieve oktober de donor hoornvl...

Er wordt een volledig laserprocedure voorgesteld in de endotheeltransplantatie. De chirurgische techniek is gebaseerd op het gebruik van een femtosecondelaser om het donorweefsel voor te bereiden. Vervolgens wordt de laserlastechniek gebruikt om het donorendotheel op de juiste positie te bevestigen.

Een &quot;All-laser&quot; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Het algemene doel van deze procedure is om een volledig laser, minimaal invasieve chirurgie uit te voeren voor het transplanteren van dunne cornea-enten. Dit wordt bereikt door eerst de donor-hoornvlies te meten en deze met een Femto seconde laser te snijden. Vervolgens worden incisies gemaakt in het corneabed van de ontvanger en wordt het desme-membraan en endotheel verwijderd ter voorbereiding op het donorweefsel.Vervolgens wordt de donorflap gekleurd en in zijn uiteindelijke positie geplaatst. Ten slotte wordt de donor lens scherp gelaserd aan het hoornvlies van de ontvanger. Uiteindelijk kan donorgehechtheid één dag na de operatie worden gezien.De belangrijkste verbetering van deze techniek ten opzichte van bestaande methoden zoals standaard is dat met laserlassen het risico op flapdislocatie na de operatie wordt verminderd. De implicaties van deze techniek strekken zich uit tot de chirurgie van het hoornvliestransplantaat omdat de toepassing van de laserlasprocedure ook is bestudeerd in neurochirurgie en KNO. Over het algemeen zullen mensen die nieuw zijn voor deze methode het niet moeilijk vinden omdat het erg gemakkelijk is om uit te voeren.Om te beginnen in de operatiekamer, verwijder de donorhoornvlies uit de leveringscontainer bij kamertemperatuur en zet de corneatransportoplossing opzij. Verbind de kunstmatige voorste kamer of een C via een driewegconnector naar een spuit gevuld met corneabehoud en voeding. Vloeistof. Plaats de donsclerotische rand van de donorhoornvlies over een kunstmatige kamer waarin een vloeistof kan stromen en variabele druk kan creëren.Bedek vervolgens de hoornvlies met het weefselbehoudshoofd. Gebruik vervolgens een compressiering om de houder stevig op zijn plaats te houden. Vervolgens, met de spuit verbonden aan de A A C, om de intracamerale druk te handhaven, gebruik weefselbehoudsoplossing om de voorste kamer te vullen tot de optimale druk wordt bereikt.Sluit vervolgens de driewegconnector met een vinger. Test de druk in de voorste kamer en pas deze aan tot de juiste interne druk wordt bereikt. Om de dikte van het donorhoornvlies te meten, houd de voorste kamer met een hoornvlies op een vaste positie en met optische coherentietomografie of OCT.Neem een ​​OCT-meting van volledige dikte om het donorweefsel te snijden. Begin met een volledige lam of snede door de snedediepte in te stellen op het dunste punt van het donorhoornvlies minus 95 microns. Stel de pulsenergie in het bereik van 0,8 tot 0,9 microjoules. Stel de diameter in op 8,7 millimeter.Stel de tangentiale spotseparering in op twee micrometer en stel de radiale spotseparering in op twee micrometer waar de anterieure zijsnede. Stel de achterste diepte in, 30 micrometer dieper dan de vorige volledige lam.Snede. Stel de pulsenergie in op 2,10 microjoules, de diameter op 8,6 millimeter voor de achterste zijsnede.Snede.Locateer de anterieure diepte van de achterste zijkant en snij 30 micrometer anterieurelijk naar de volledige lam of snede. Stel de achterste diepte in op 900 micrometer. Stel de pulsenergie in op 2,10 microjoules.De diameter tot 8,3 millimeter, de spotseparering tot twee micrometer en de laagseparering tot twee micrometer. Maak vervolgens de snede om de patiënt voor te bereiden op de operatie met een voorgekalibreerd mes van 1,2 millimeter. Maak een limbale paracentese om twee uur door de om twee uur paracentese.Plaats een voorste kameronderhouder in de voorste kamer van de patiënt. Gebruik vervolgens een 30-graads mes. Maak een tweede limbale paracentese om zes uur.Gebruik een voorgekalibreerd mes van 2,0 millimeter om een ​​2,00-hoornvliessnede om 12 uur te maken. Vervolgens, met een speciale haak, voer een 8,2 millimeter diameter cirkelvormige desme of as uit. Strip het desme-membraan en endotheel van het achterste stroma en gebruik een desme-haak om de weefsels te verwijderen.Om de chromofoor voor het kleuren van het donorweefsel voor te bereiden, voegt u één milligram indocyanine groen of ICG-poeder toe aan een microcentrifugebuis van 1,5 milliliter. Voeg vervolgens negen milligram steriele water toe met een metalen roerder. Meng de ICG-oplossing handmatig om het poeder te suspenderen.Plaats de donorendothelium op het bredere deel van een gebruik en injector met de binnenkant in contact met het oppervlak van de injector. Gebruik een spatel om chromo vier-oplossing toe te voegen aan de binnenkant van het donorendothelium om het een homogene groene kleur te geven. Wacht drie minuten en rol het endothelium en breng het in het voorste gedeelte van de busin-injector.Gebruik een atraumatisch coaxiaal pincet om het gevouwen donorendothelium vast te grijpen en in te brengen met een enkele 10,0 nylonsteek. Naai de corneasnede en de paracentese. Injecteer een luchtbel die de voorste kamerruimte volledig vult om het donorweefsel te ontvouwen en tegen het cornea van de ontvanger te drukken.Verwijder vervolgens de voorste kameronderhouder van binnenuit met een haak of door een spatel te gebruiken om de luchtbel van buitenaf te verplaatsen. Plaats de donorlenti in het midden van het hoornvlies van de ontvanger. Stel een DDE-laser in met een emissie van 810 nanometer met een 300 micrometer kerndiameter, steriele glasvezel en een 0,22 numerieke opening, met behulp van de hier vermelde instellingen voor de laser en terwijl de glasvezel buiten het oogbal wordt gehouden en in niet-contactconfiguratie, sequentieel enkele laserstippen langs de rand van het gekleurde endotheel door het transparante corneaweefsel leveren.Het laatste aspect is een ring van stippen in de rand van de donorlenti. De afstand tussen de centra van twee aangrenzende stippen is twee keer de diameter van een spot. Wanneer het laserlassen voltooid is, brengt u 0,3% tobramycine en 0,1% dexamethason oogdruppels aan op het oog van de patiënt.Breng vervolgens een contactlens aan. Deze volledig laserchirurgische procedure voert een minimaal invasieve corneatransplantatie uit met betrekking tot een

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

This video demonstrates a non-invasive laser-assisted procedure to selectively damage the corneal endothelial cells in the porcine eye. The developed ex vivo model of endothelial cell damage can be used to study diseases of the corneal endothelium.

Laser-assisted Selective Ablation of Porcine Corneal Endothelial Cells: A Technique to Induce Focused Porcine Corneal Endothelial Injury for Ex Vivo Studies

Gevasculariseerde Composite Allotransplantations (VCA) hebben een klinische realiteit. Echter, brede klinische toepassing van VCA beperkt door chronische multi-drug immunosuppressie. De auteurs presenteren een betrouwbare en reproduceerbare grote diermodel om immunomodulerende strategieën die kunnen minimaliseren of potentieel elimineren de noodzaak van immunosuppressie in VCA vertalen.

Een Gemodificeerde Heterotope Varkens Hind Limb Transplant Model for Translational Gevasculariseerd Composite allotransplantatie (VCA) Onderzoek

Auxiliary levertransplantatie biedt een tijdelijke ondersteuning in acuut leverfalen, tot de regeneratie van het falende lever. Heterotopisch extra levertransplantatie (HALT) met poortader arterialization (PVA) maakt voldoende leverfunctie. We ontwikkelden een analoge techniek in de rat, de invloed van de poortader arterialization de morfologie en functie van het transplantaat te onderzoeken.

Heterotopische Auxiliary Rat Liver Transplantation Met Flow-gereguleerd poortader Arterialization in acuut leverfalen

Voor sommige patiënten is de enige optie voor behoud van de vruchtbaarheid cryopreservatie van eierstokweefsel. Helaas ondermijnt vertraagde revascularisatie folliculaire levensvatbaarheid. Hier presenteren we een protocol om mede de transplantatie van menselijke eierstokweefsel met endotheliale cellen voor gebruik als een cel-gebaseerde strategie combineren versnelde perfusie met een directe paracrine levering van biologische actieve moleculen.

Co transplantatie van menselijke eierstokweefsel met gemanipuleerde endotheliale cellen: een combinatie van cel-gebaseerde strategie versneld perfusie met directe Paracrine levering

Descemet's Stripping Only is een experimentele procedure waarbij patiënten met centrale cornea guttae als gevolg van Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy het membraan van Descemet laten strippen voor perifere cellen om de endotheellaag te regenereren. We presenteren een nieuwe methodologie die DSO simuleert in dystrofische menselijke hoornvliezen ex vivo met versnelde genezing gestimuleerd door eFGF1 (NM141).

Een menselijk hoornvliesorgaancultuurmodel van Descemet's strippen alleen met versnelde genezing gestimuleerd door gemanipuleerde fibroblastgroeifactor 1

Hier beschrijven we een platform dat niet-invasieve in vivo beeldvorming mogelijk maakt van leversferoïden die zijn geënt in de voorste oogkamer van het oog van de muis. De workflow strekt zich uit van het genereren van sferoïden van primaire levercellen tot transplantatie in het oog van de muis en in vivo beeldvorming met cellulaire resolutie door confocale microscopie.

In vivo beeldvorming van leversferoïden geënt in de voorste oogkamer van het muizenoog

Dit protocol beschrijft een op ratten gebaseerd darmtransplantatiemodel met ileostoma voor tijdsverloopbeoordeling van geneesmiddelinterventie op transplantaatafstoting.

Een afstotingsmodel voor rattentransplantaat van darmtransplantatie met geëxterioriseerde ileostoma voor beoordeling van de longitudinale prognose

Dit artikel presenteert een protocol voor de nauwkeurige echogeleide afgifte van vasculaire stamcellen aan de aortavaatwand. De techniek richt zich effectief op de vaatwand en bevordert vasculair herstel bij aorta-aneurysma's en dissecties.

Precisie-echogeleide stamcelafgifte voor vasculair herstel bij aortaaandoeningen

We presenteren een reproduceerbaar muismodel van heterotopische vascularisatie allotransplantatie van achterpoot tot hals. Dit supermicrochirurgisch protocol, waarbij 0,3-0,5 mm vatenanastomosen worden gebruikt, integreert nylonfilamentgeleiding en veneuze manchetten. Het biedt een betrouwbaar platform voor translationele studies naar tolerantie, ischemie-reperfusieschade en immunologische mechanismen bij vasculariseerde samengestelde allotransplantatie.

Heterotopische achterpoot-naar-nek transplantatie bij de muis: een supermicrochirurgisch model van vasculariseerde composietallotransplantatie

Het bepalen van donorcel innesteling vormt een uitdaging in de muis beenmerg transplantatie modellen die goed gedefinieerde fenotypische merkers missen. We beschreven een methode om mannelijke donor cel innesteling te kwantificeren in vrouwelijke transplantatie ontvangende muizen. Deze methode kan worden gebruikt in alle muizenstammen voor de studie van HSC functies.

Met behulp van kwantitatieve real-time PCR voor donorcel Engraftment bepalen in een concurrerende Murine beenmergtransplantatie Model

Leer een volledig lasergebaseerde endotheeltransplantatie met femtoseconde laser voor minimaal invasieve hoornvlieschirurgie. Deze techniek verbetert de hechting van donorweefsel en vermindert het risico op flapdislocatie.

Een "All-laser" Endothelial Transplant

Meer video's verkennen