Name: Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 16 s
Description: Leer ultrasone vocalisatiepreferenties in muizen bepalen met een twee-keuze afspeeltest. Deze methode onthult gedragsreacties op verschillende USV-kenmerken en helpt communicatiedynamiek te begrijpen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door een Grant-in-Steun voor JSPS Fellows AA; door Grants-in-Steun voor Wetenschappelijk Onderzoek inzake innovatieve gebieden voor JSPS Fellows (nr 4501 en nr 25132712) naar TK; en door een onderzoek subsidie ​​van Azabu University. Figuur 2 is overgenomen uit Kihara, T., Harada, T., &amp; Koshida, N. Wafer-compatibele fabricage en eigenschappen van nanokristallijne silicium thermisch geïnduceerde ultrasone emitters. In: sensoren en actuatoren A: Fysiek, volume 125, Elsevier, p. 426, (2006), met toestemming van Elsevier.

<html> Alle procedures werden goedgekeurd door de ethische commissie van Azabu University. Alle experimenten werden uitgevoerd in een geluiddichte kamer uitgevoerd. 1. Dierlijke Voorbereiding <ol><li> Mannetjes voor opname <ol><li> Verkrijgen geslachtsrijpe mannelijke muizen ervaren in paring. </li></ol></li><li> Vrouwelijke proefpersonen <ol><li> Verkrijgen maagdelijke vrouwelijke muizen die werden ondergebracht met 2-5 nestgenoten per kooi (meestal 8-12 weken oud). </li><li> Verkrijgen vaginale uitstrijkjes dagelijks aan de fase van de loopsheid voor de test te bepalen, volgens McLean 21. Zorg moet worden genomen om de vaginale stimulatie minimaliseren schijndracht voorkomen. </li><li> Vlekken de uitstrijkjes met Giemsa en bepalen fase van de loopsheid gebaseerd op de aanwezigheid of afwezigheid van leukocyten, verhoornde epitheelcellen en kernhoudende epitheelcellen volgens Nelson 22. </li></ol></li></ol> 2. Devices (figuur 1) _content &quot;&gt; <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/53074/53074fig1.jpg" /> Figuur 1. Schematische voorstelling van de twee-keuze testbox en apparaten. Muizen toegang kamers A en B door de kleine poort tussen hen en de neutrale zone. De twee keuze doos en twee ultrasone emitters op de vloer van een geluiddichte kamer geplaatst. De microfoon is opgehangen in de geluiddichte kamer. Afkorting:. PC, personal computer <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53074/53074fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <ol><li> Voor opname <ol><li> Sluit een ultrasone condensatormicrofoon op een pc met een USB A / D converter. </li><li> Stel de winst niveau van de A / D converter op &quot;7&quot;. </li><li> Record akoestische gegevens in 16-bit-bestanden met een sampling rate van 400 kHz met behulp van audio-opname software. </li></ol></li><li> Voor het afspelen <ol><li> Sluit een D / A converter aan de PC viaeen USB-interface. </li><li> Verbind twee versterkers aan de D / A-omzetter via een verzwakker. (Deze inrichting dient overbelasting te voorkomen.) </li><li> Sluit een echo emitter aan elke versterker. </li></ol></li></ol> 3. USV Opname <ol><li> Plaats een mannelijke muis in een kleine (17 x 10 x 11 cm) en middelgrote (21 x 14 x 13 cm) kooi met een gat van 6 cm diameter in de zijwand en het gat afgedekt met een 0,5 cm gaas. Bij gebruik van een middelgrote kooi construct een scheidingswand over het midden van de kooi naar het gebied te verlagen. </li><li> Gebruik geen beddengoed in de kooi te ruisen geluiden die de opnames kunnen besmetten te voorkomen. </li><li> Plaats een microfoon naast de maas. </li><li> Begin ultrasone vocalisatie controle met de opname setup getoond in stap 2.1. </li><li> Plaats een geslachtsrijpe vrouwelijke muis in beide metestrus of diestrus in de kooi met de mannelijke muizen. </li><li> Record USVs voor 3-5 min. </li></ol> 4. Test Box <ol><li> Bouw de test box met acryl boord (figuur 1). Opmerking: De testbox (35 x 20 en x 20 cm hoog) is onderverdeeld in drie compartimenten: een neutrale zone (15 x 20 cm), en de kamers A en B (20 x 10 cm, elk). De kamers A en B elk een 4 cm diameter gat dat is bedekt met een 0,5 cm gaas. De gaten en gaas bevinden zich aan elk uiteinde van de kamers A en B. Maak poorten (5 x 5 cm elk) tussen de neutrale zone en kamers A en B. </li><li> Om te voorkomen geluidverlies isoleren elke ultrasone emitter, met uitzondering van de kant van het netwerk, via rubber platen verzegeling aan de doos rond de omtrek van een maas. </li><li> Plaats lead afdichtingen aan beide zijden van de wand tussen de kamers A en B voor geluidsisolatie. </li></ol> 5. Voorbereiden voor Beeld afspelen <ol><li> Creatie van Playback Sounds <ol><li> Het veroveren van een 20 sec segment van USV uit het opgenomen bestand met behulp van digitale audio-editing software. </li><li> Selecteer en geen vangen achtergrondise (0.35 sec) van de 20 sec USV segment bestand. Maak een 20 sec achtergrondgeluid bestand door het herhalen van het lawaai segment. </li><li> Om gelijktijdig af te spelen de twee geluidsbestanden, ze exporteren als een enkel stereo geluidsbestand, met een bestand voor de &quot;linkeroor&quot; en het andere bestand voor de &quot;rechteroor.&quot; </li><li> Filter de geluidsbestanden met als high-pass filter met een cut-off van 40 kHz. </li><li> Vermindering van het geluid met behulp van de ruisonderdrukking functie in post-processing software. Selecteren en het veroveren van een deel van het bestand dat geen USVs als ruisonderdrukking profiel bevat, en lopen ruisonderdrukking met level 40. </li></ol></li><li> Kalibratie van Playback Sounds <ol><li> Zorg ervoor dat de ruimte tussen ultrasone emitters en microfoon is 10 cm. </li><li> Aan geluidsdruk van de ultrasone zenders te kalibreren, voert ultrasone controle met behulp van de in stap 2.1 beschreven configuratie. Meet het geluidsdrukniveau van de microfoon in decibels (dB). </li><li> Using de demper en versterkers, stel het volume van de door de ultrasone zenders op hetzelfde geluidsniveau als de mannelijke USVs opgenomen in stap 3 USVs. </li><li> Bij gebruik van de twee ultrasone zenders en een geluidsbestand bestaat uit USVs en achtergrondgeluiden, bevestigen dat de twee ultrasone emitters vertonen hetzelfde geluidsdrukniveau met behulp van een kalibratie-geluid (bijvoorbeeld een 75-kHz zuivere toon) voor het uitvoeren van de gedragstest. </li><li> Bij het reproduceren van een geluidsbestand uit twee stromen USVs, passen de twee gegenereerde geluidsdruk op hetzelfde niveau voor het testen. </li></ol></li></ol> 6. Twee-choice test <ol><li> Plaats de ultrasone emitters achter de mazen van de test box. </li><li> Sluit de poorten naar kamers A en B met een acryl board en wennen de vrouwelijke onder de neutrale zone 30 min. Bedek de doos met acryl boord te voorkomen dat de muis kan ontsnappen. </li><li> Start video-opname met een CC-D camera boven het vak gemonteerd. De camera (niet in figuur 1 getoond) omvat het gebied van de drie compartimenten. </li><li> Verwijder de poort en deksel boord en laat de vrouwelijke vrij de test box, met inbegrip van het geluid zones te verkennen. </li><li> Nadat het vrouwtje heeft onderzocht zowel mazen en is teruggekeerd naar de neutrale zone, start een 20 sec geluidsbestand afspelen herhaald gedurende 5 of 10 minuten. </li><li> Gedrag gedrags controle voor 5 of 10 minuten. </li><li> Om ongewenste olfactorische signalen afgezet uit het vorige onderwerp verminderen, reinigen proefkooien tussen de tests met 70% ethanol. </li><li> Schakel de plaats van ultrageluid emitters A en B willekeurige inherente vooroordeel effect richting kamers A of B voorkomen </li></ol> 7. Statistische analyses <ol><li> Met behulp van gedragsmatige event-scoring software, analyseert de volgende parameters: totale aantal vermeldingen in elke kamer; totale duur van het verblijf in elk middelste zone; totale duur van het verblijf in elk geluid zone; entotale duur van het zoeken van een maas voor ultrasone zender. Figuur 1 laat zien wat wordt bedoeld met &quot;middenzone&quot; en &quot;sound zone.&quot; Opmerking: Wanneer de muis blijft op de scheidingslijn tussen de twee zones (Figuur 1, stippellijn) beslissen over de locatie door de richting van het hoofd. Wanneer het hoofd ziet het gaas kant wordt gescoord als een verblijf in de geluidszone. </li><li> Voor elke gedrags parameter, vergelijk antwoorden voor kamers A en B met een rangtekentoets of gepaarde t -testen met een significantie niveau van 0,05. </li></ol>

<ol><li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+behavior%2C+ultrasonic+communication+and+social+reward+are+influenced+by+genetic+variation+in+adolescent+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice.</a> PLoS One. 2 (4), e351(2007).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+usage+of+female+and+male+mouse+ultrasonic+vocalizations+reveal+only+minor+differences%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences.</a> PLoS One. 7 (7), e41133(2012).</li>
<li>Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+ultrasonic+vocalisation+in+social+communication+and+divergence+of+natural+populations+of+the+house+mouse+%28Mus+musculus+domesticus%29%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus).</a> PLoS One. 9 (5), e97244(2014).</li>
<li>Amato, F. R., Moles, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+as+an+index+of+social+memory+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice.</a> Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+male+mice+emit+context-specific+ultrasonic+vocalizations+that+are+modulated+by+prior+isolation+or+group+rearing+environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment.</a> PLoS One. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Ehret, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+rodent+ultrasounds%E2%80%93a+gate+to+the+understanding+of+sound+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication.</a> Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLoS Biol. 3 (1), e386(2005).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).</li>
<li>Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+partial+from+whole+ultrasonic+vocalizations+using+a+go%2Fno-go+task+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Acoust.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice.</a> J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401(2014).</li>
<li>Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrimination+of+ultrasonic+vocalizations+by+CBA%2FCaJ+mice+%28Mus+musculus%29+is+related+to+spectrotemporal+dissimilarity+of+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations.</a> PLoS One. 9 (1), e85405(2014).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%E2%80%98songs%E2%80%99+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).</li>
<li>Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+courtship+vocalizations+in+wild+house+mice%2C+Mus+musculus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus.</a> Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).</li>
<li>Asaba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+social+environment+imprints+female+preference+for+male+song+in+iice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Developmental social environment imprints female preference for male song in iice.</a> PloS one. 9 (2), e87186(2014).</li>
<li>Uematsu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+approaches+to+pup+ultrasonic+vocalizations+produced+by+a+nanocrystalline+silicon+thermo-acoustic+emitter%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter.</a> Brain Res. 1163, 91-99 (2007).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+social+experience+and+gonadal+hormones+on+retrieving+behavior+of+mice+and+their+responses+to+pup+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Zoolog.+Sci%22%5BJournal%5D)">The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations.</a> Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).</li>
<li>Okabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pup+odor+and+ultrasonic+vocalizations+synergistically+stimulate+maternal+attention+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice.</a> Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).</li>
<li>Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermally+induced+ultrasonic+emission+from+porous+silicon%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon.</a> Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).</li>
<li>Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wafer-compatible+fabrication+and+characteristics+of+nanocrystalline+silicon+thermally+induced+ultrasound+emitters%5BTitle%5D)+AND+%22Sensor.+Actuat.+A-Phys%22%5BJournal%5D)">Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters.</a> Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).</li>
<li>Kikusui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross+fostering+experiments+suggest+that+mice+songs+are+innate%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate.</a> PloS One. 6 (3), e17721(2011).</li>
<li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Vaginal+Lavage%2C+Crystal+Violet+Staining%2C+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> J. Vis. Exp. (67), e4389(2012).</li>
<li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL%2F6J+mice%3A+I.+Cycle+frequency%2C+length+and+vaginal+cytology%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).</li>
<li>Tomihara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+ER-beta+gene+disruption+on+estrogenic+regulation+of+anxiety+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice.</a> Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).</li>
<li>Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+associated+with+the+modifier+of+deaf+waddler+%28mdfw%29+locus+corresponds+with+age-related+hearing+loss+in+12+inbred+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear.+Res%22%5BJournal%5D)">Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice.</a> Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).</li>
<li>Haga, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+male+mouse+pheromone+ESP1+enhances+female+sexual+receptive+behaviour+through+a+specific+vomeronasal+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor.</a> Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).</li>
<li>Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+social+vocalizations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development of social vocalizations in mice.</a> PLoS One. 6 (3), e17460(2011).</li>
<li>Sugimoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+strain+differences+in+waveforms+of+ultrasonic+vocalizations+during+male-female+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction.</a> PLoS ONE. 6 (7), (2011).</li>
<li>Hanson, J. L., Hurley, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+presence+and+estrous+state+influence+mouse+ultrasonic+courtship+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations.</a> PLoS One. 7 (7), e40782(2012).</li>
<li>Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations+induced+by+sex+and+amphetamine+in+M2%2C+M4%2C+M5+muscarinic+and+D2+dopamine+receptor+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice.</a> PLoS One. 3 (4), (2008).</li>
<li>Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficit+in+attachment+behavior+in+mice+lacking+the+mu-opioid+receptor+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene.</a> Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).</li>
<li>Hiramoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tbx1%3A+identification+of+a+22q11.2+gene+as+a+risk+factor+for+autism+spectrum+disorder+in+a+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse.</a> Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+deficits+in+social+behaviors+and+ultrasonic+vocalizations+in+later+generations+of+mice+lacking+neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. , (2012).</li>
<li>Roy, S., Watkins, N., Heck, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+analysis+of+ultrasonic+vocalizations+in+a+mouse+model+of+fragile+X+syndrome+reveals+limited%2C+call+type+specific+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits.</a> PLoS One. 7 (9), e44816(2012).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen belangenconflicten hebben.

Hier toonden de resultaten van een representatief experiment aan dat vrouwelijke muizen kunnen onderscheid maken tussen kunstmatige mannelijke USV's en achtergrondgeluid (Figuur 3). De conclusie die uit deze resultaten kan worden getrokken is dat het onderscheidsvermogen wordt weerspiegeld in de duur van het verblijf in de kamer en geluidszone, en in de duur van het zoeken naar het gaas in de eerste 5 minuten van het testen, maar niet in de tweede 5 minuten (Figuur 3C, E en F). Deze gege...

Veel dieren gebruiken geluiden voor intraspecifieke communicatie. In de muis Mus musculus, een belangrijke vorm van communicatie signaal ultrasone geluiden (USVs), welke frequenties hoger dan 20 kHz. USVs uitgezonden door muizen worden beschouwd als een onderdeel van de sociale erkenning in man-vrouw 1-4, female-female 1, 5, en man-man 1, 6 interacties. USVs worden ook uitgestoten door pups wanneer ze geïsoleerd van hun moeder, die haar-pup ophalen gedrag toeneemt, en dus overleving van de jongen 7. Hoewel veel rapporten hebben geanalyseerd en gecategoriseerd muis USVs 8, 9, de gedragsreacties en neurale mechanismen van de ontvangende dieren zijn minder gedocumenteerd 10, 11. Dit laatste is noodzakelijk om de biologische significantie van de verschillende kenmerken van USVs verduidelijken. Om deze mechanismen onthullen de weergave experiment is een efficiënte methode. Recente afspelen studies hebben aangetoond dat vrouwelijkemuizen worden aangetrokken USVs 12, en dat ze liever USVs van mannetjes die verschillen van hun ouders 13, 14. Dit artikel legt de playback-test gebruikt om USV voorkeur in muizen te evalueren. Een twee-choice test box ontwikkeld waarbij twee verschillende USVs weer tegelijk kunnen worden gespeeld in twee compartimenten van een test behuizing, zoals weergegeven in figuur 1. Dit type test box voorkomt geluid besmetting door het testgebied verdelen in drie sub-kamers gebruik lead wanden. De ultrasone emitters bevinden zich buiten elke kamer. In de wand tussen de kamers en de ultrasone emitters gaten bedekt met gaas. Muizen kunnen vrij bewegen in de drie kamers, en tonen een &quot;zoeken de mazen&quot; gedrag, als om te reageren op USVs afgespeeld door de ultrasone emitters. In deze test muizen verblijven perioden van verschillende duur dichtbij een geluid emitter of andere. Deze parameters kunnen worden ingelogd zijn om een ​​gevoelige measu verkrijgen<html> re van geluid voorkeur. Om de USVs afspelen, nanokristallijne silicium thermo-akoestische zenders (dwz &quot;nc-Si emitter&quot;) werden gebruikt als in eerdere studies 15-17. Deze apparaten bestaan ​​uit een dunne-film verwarmer elektrode, een nanoporeuze siliciumlaag, en een kristallijne siliciumwafel. De digitaal geluidsbestand wordt geconverteerd naar een analoog signaal en vervolgens door de verwarmingselektrode. Het apparaat zet de resulterende voltage-afhankelijke thermische signalen in aanzienlijke geluidsdruk met een lage vervorming. Deze inrichting is uniek doordat, anders dan gewone geluidsgeneratoren die afhankelijk zijn van mechanische trillingen, kan het geluid reproduceren zonder de noodzaak van een diafragma. De zender vertoont een vlak geluidsdrukniveau bij frequenties 20-160 kHz (figuur 2), en kan digitaal opgenomen muizen USVs reproduceren zeer nauwkeurig in termen van duur, frequentie en geluidsdrukniveau 15, 18, ​​19. ve_content &quot;&gt; In een representatief experiment is getoond in figuur 3, werden C57BL / 6 (B6) vrouwtjes kunnen kiezen tussen BALB / c (BALB) mannelijke USVs en achtergrondruis. Bovendien Figuur 4 toont de keuze van B6 en BALB vrouwen tussen gelijktijdige USV playback van een BALB en B6 mannelijke, zoals gerapporteerd in een eerdere studie 14. De kenmerken van de mannelijke USVs verschillen tussen B6 en BALB stammen 20. Zoals blijkt uit deze resultaten, kan de aantrekkelijkheid van USVs worden beoordeeld met het huidige protocol, waarin geluiden worden opgenomen van een live individu, akoestisch geanalyseerd, en afgespeeld met andere individuen.

<table><tbody><tr><td>Soundproof chamber</td><td>Muromachi Kikai</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Small cage</td><td>CLEA Japan</td><td>CL-0113-1</td><td></td></tr><tr><td>Middle cage</td><td>CLEA Japan</td><td>CL-0103-1</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound condenser microphones</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>CM16/CMPA</td><td></td></tr><tr><td>A/D converter</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>UltraSoundGate116H</td><td></td></tr><tr><td>Audio software</td><td>Avisoft Bioacoustics</td><td>RECORDER USGH</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Audition 3.0 / Audio editing software</td><td>Adobe Systems</td><td>Adobe Audition 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Nc-Si emitter</td><td>Original</td><td></td><td>niet commercieel verkrijgbaar, maar het is de bedoeling om dat in de nabije toekomst wel te doen</td></tr><tr><td>D/A converter</td><td>National Instruments</td><td>NI USB-6251 BNC</td><td></td></tr><tr><td>Attenuator</td><td>Original</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Amplifier</td><td>Yamatake</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PC</td><td>Windows 7 professional</td><td></td><td>Intel&reg; core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, 64-bit besturingssysteem</td></tr><tr><td>Event recorder Excel-macro / Event-scoring software</td><td>original</td><td></td><td>Geprogrammeerd door Naoto Akagawa & Takeru Yamamoto</td></tr><tr><td>CCD Camera</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rubber plates (made of elastomer resin)</td><td>Tokyo bouon</td><td>TI-75BK B4</td><td>Snij ze naar de juiste maat http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&amp;ca=6&amp;p=3</td></tr><tr><td>Giemsa's azur eosin methyleenblauw oplossing</td><td>Merck Millipore</td><td>1.09204.0500</td><td></td></tr></tbody></table>

het bepalen van ultrasonic vocalisatie voorkeuren in muizen met behulp van een twee-keuze afspelen test

Determining Ultrasonic Vocalization Preferences in Mice using a Two-choice Playback Test

Muizen zenden ultrasone vocalisaties (USV's) uit onder verschillende omstandigheden, zoals het isoleren van pups en sociale interacties bij volwassenen. Deze USV's verschillen met leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond van het uitzendende dier. Hoewel veel studies deze verschillen hebben gekarakteriseerd, blijft het nog onduidelijk of ontvangende muizen verschillen kunnen onderscheiden tussen objectief verschillende USV's en voorkeuren kunnen tonen voor bepaalde geluidseigenschappen. Om te bepalen of muizen kunnen onderscheiden tussen verschillende kenmerken van USV's, is onlangs een afspeelexperiment ontwikkeld, waarin voorkeurreacties van muizen op twee verschillende USV's konden worden geëvalueerd in de vorm van een plaatsvoorkeur.
Eerst werden USV's van muizen opgenomen. Vervolgens werden de opgenomen USV's bewerkt, overeenkomstig bijgesneden en geëxporteerd als stereofone geluidsbestanden. Vervolgens werden de USV-amplitudes die werden gegenereerd door de twee ultrasone zenders die in het experiment werden gebruikt, aangepast naar hetzelfde geluidsdrukniveau. Nanokristallijne siliciumthermo-akoestische zenders werden gebruikt om de USV's af te spelen. Ten slotte, om de voorkeur van proefmuizen voor geselecteerde USV's te onderzoeken, werden paren van twee verschillende USV-signalen gelijktijdig afgespeeld in een tweekeuzetestbox. Door herhaaldelijk een gedefinieerde zone nabij een ultrasone zender binnen te gaan en het gaas voor de zender te doorzoeken, geeft de muis zijn voorkeur voor het ene geluid boven het andere. Dit model maakt het mogelijk om de aantrekkelijkheid van de verschillende kenmerken van muizen-USV's te vergelijken, in verschillende contexten.

De USVs opgenomen van een BALB-male (161 lettergrepen per 20 sec), en achtergrondgeluid werden als weergave geluiden in de representatief experiment is getoond in figuur 3. In dit experiment werden 7 vrouwelijke B6-muizen gebruikt 9 weken oud . Voor zover duur van het testen van vrouwelijke respons op geluid afspelen bepalen werden de gedragsparameters afzonderlijk geanalyseerd voor de eerste en laatste vijf minuten van het totaal 10 minuten testtijd. Ten eerste, was er geen...

Ultrasone vocalisaties (USV's) bij muizen verschillen afhankelijk van leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond. Door twee ultrasone zenders tegelijkertijd op verschillende locaties uit te zenden, kan deze tweeduidige test muiserkenning en voorkeursreacties op verschillende kenmerken van USV's evalueren.

Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test

Mice emit ultrasonic vocalizations (USVs) during a variety of conditions, such as pup isolation and adult social interactions. These USVs differ with age, ...

Het algemene doel van deze procedure is om de voorkeuren voor ultrasone vocalisaties (USV) bij muizen te bepalen met behulp van een keuze-test met twee playback-opties. Dit wordt bereikt door eerst USV's op te nemen van een levend individu. De tweede stap bestaat uit het bewerken en trimmen van de opgenomen USV's en het genereren van stereofonische geluidsbestanden.Vervolgens worden de ultrasone emitters gekalibreerd en wordt het USV-volume aangepast. Met behulp van de attenuator en de versterkers is de laatste stap het plaatsen van de proefmuis in de testbak en het gelijktijdig afspelen van de twee geluidsbestanden. Uiteindelijk kan gedragsmonitoring uitwijzen of de muis een voorkeur vertoont voor het ene geluid boven het andere.De door ons ontwikkelde USV-emitters kunnen ons helpen bij het beantwoorden van kernvragen over de communicatie van mijn spoke, zoals partijen en de biologische betekenis van verschillende typen USV. Het belangrijkste voordeel van onze caustische emitter ten opzichte van bestaande apparaten zoals piëzo-elektrische transducers is dat de frequentierespons geen resonantiepieken vertoont. De breedbandige vloed in het ultrasone spectrum zonder harmonische vervormingen maakt het mogelijk om de emitter te gebruiken voor het reproduceren van complexe akoestische communicatiecursussen.Met deze methode kan inzicht worden verkregen in de reactie van vrouwtjes op s bs of mannetjes. Het kan ook worden toegepast op andere typen sociale interactie, zoals tussen moeder en nakomelingen, tussen volwassen mannetjes en tussen volwassen vrouwtjes. Begin met het verkrijgen van seksueel ervaren mannelijke muizen en maagdelijke vrouwelijke muizen, en volg de oestruscyclus door dagelijks vaginale uitstrijksels te nemen.Kleur de uitstrijkjes met Giza en bepaal de fase van de oestruscyclus volgens standaardprocedures. Om ultrasone vocalisaties of USV's op te nemen, sluit een ultrasone condensatormicrofoon aan op een pc via een USB-AD-converter.StelHet gain-niveau van de AD-converter in op zeven en registreer akoestische gegevens in 16 bit. Formatteer bestanden met een bemonsteringssnelheid van 400 kilohertz met behulp van audio-opnamesoftware voor geluidsweergave, sluit een DA-converter aan op de PC en verbind vervolgens twee versterkers via een attenuator met de DA-converter; repareer een kleine kooi met een gat in de zijwand met een diameter van 6 centimeter. Dek het gat af met een gaas van 0,5 centimeter.Vermijd het gebruik van strooisel of andere materialen die ritselende geluiden kunnen produceren en de opname kunnen contamineren. Plaats de ultrasoonmicrofoon naast het gat dat met gaas is afgedekt. Wanneer u klaar bent.Plaats een mannelijke muis en een seksueel volwassen vrouwelijke muis samen in een kooi. Registreer het gedrag gedurende drie tot vijf minuten.De testbak is verdeeld in drie compartimenten: een neutrale zone en kamers A en B. Scheid de neutrale zone van de andere kamers. Kamers A en B hebben elk aan het uiteinde een gat van vier centimeter dat is bedekt met gaas.Plaats de ultrasone zender tegen het gaas en omring deze met rubberen platen om geluidslekkage te voorkomen. Plaats loden afdichtingen aan beide zijden van de wand tussen kamer A en B voor geluidsisolatie bij het creëren van de weergeluiden. Neem een segment van 22 s uit het eerder opgenomen USB-bestand op.Selecteer en neem met behulp van digitale audio-bewerkingssoftware achtergrondruis uit dit segment op en maak een achtergrondruisbestand van 22 seconden door het ruissegment te herhalen om de twee geluidsbestanden af te spelen. Exporteer deze gelijktijdig als één enkel stereogeluidsbestand, met één bestand voor het linkeroor en het andere bestand voor het rechteroor. Filter de geluidsbestanden met een hoogdoorlaatfilter met een afsnijpunt van 40 kilohertz.Verminder de ruis met behulp van de ruisonderdrukkingsfunctie. Selecteer en leg in de software voor nabewerking een segment van het bestand vast dat geen US VS bevat als ruisonderdrukkingsprofiel en voer de ruisonderdrukking uit op niveau 40 om de geluidsniveaus tijdens het afspelen te kalibreren. Plaats de microfoon eerst op 10 centimeter afstand van de ultrasone zenders.Start de weergave en meet het geluidsdrukniveau in decibels. Gebruik de attenuator en versterkers om het volume van de US v's, gegenereerd door de ultrasone emitters, aan te passen naar hetzelfde geluidsdrukniveau als dat van de mannelijke US vs.Eerder opgenomen. Bevestig dat de twee ultrasone zenders hetzelfde geluidsdrukniveau vertonen met behulp van een kalibratiegeluid bij het reproduceren van een geluidsbestand dat bestaat uit twee streams van us vs. Stel de twee gegenereerde geluidsdrukniveaus in op hetzelfde niveau.Om de tweekeuzetest te starten, sluit u de poorten naar kamer A en B en laat u het vrouwelijke proefdier wennen aan de neutrale zone. Bedek de box gedurende 30 minuten met een acrylplaat om ontsnapping te voorkomen. Neem na 30 minuten de gehele procedure op met een videocamera die boven de box is gemonteerd.Verwijder het schuifje en laat het vrouwtje vrij het restant van de testbak verkennen, inclusief de geluidszones. Zodra het vrouwtje beide gaasjes heeft onderzocht en is teruggekeerd naar de neutrale zone, begint u met het afspelen van het eerder voorbereide 22e geluidsbestand. Observeer het gedrag van het dier gedurende vijf tot 10 minuten, terwijl het geluidsbestand herhaaldelijk wordt afgespeeld.Wissel de locatie van de echografie-emitters willekeurig om om te voorkomen dat er een zijdelingse bias ontstaat tussen de twee kamers. Vrouwelijke muizen vertoonden geen voorkeur tussen kamer A en B toen ze de kans kregen de kamers te verkennen vóór het afspelen van het geluid. Het aantal kamerbetredingen was vergelijkbaar tussen kamers met achtergrondruis of mannelijke US.Proefpersonen brachten echter een significant langere tijd door in de kamer waarin 'us' vs 'we' werden geregenereerd. Met name in de eerste vijf minuten. De exploratie van de middelzone werd niet beïnvloed door het afspelen van het geluid.Vrouwtjes brachten significant meer tijd door binnen de geluidszone en met het doorzoeken van het gaas in de kamer waarin een mannetje van de US-stam zat vergeleken met die van B6 en bub. Vooral in de eerste vijf minuten brachten vrouwtjes meer tijd door met het onderzoeken van de zijde die gekoppeld was aan een mannetje van de US-stam vergeleken met een mannetje van een andere stam.Na het bekijken van deze video zou u een goed inzicht moeten hebben in hoe u de voorkeur voor ultrasone vocalisaties (USV) bij muizen bepaalt met behulp van een twee-keuze smaaktest. Na de ontwikkeling van deze techniek konden onderzoekers op het gebied van brandonderzoek de interactie met mensen verder verkennen. USV bij muizen kan variëren afhankelijk van leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond.Na deze procedure kunnen USB-profielen van transgene massa worden gemeten om te bepalen of de verzendende en opslaag-USB's zijn gewijzigd.

determining-ultrasonic-vocalization-preferences-mice-using-two-choice

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Ultrasone vocalisaties van muizen worden gebruikt als proxy's om de genetische basis van vocale communicatiedeficiënties te modelleren in muismodellen voor neuropsychiatrische stoornissen. Het huidige protocol beschrijft drie experimentele contexten die betrouwbaar ultrasone vocalisaties oproepen bij pups (gedurende de ontwikkeling) en volwassen muizen (interacties tussen dieren van hetzelfde geslacht, interacties tussen mannetjes en vrouwtjes in oestrus).

Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer

Muizen produceren een complex multisyllabic repertoire van ultrasone vocalisaties (USV's). Deze USV's worden op grote schaal gebruikt als uitlezingen voor neuropsychiatrische stoornissen. Dit protocol beschrijft enkele van de praktijken die we hebben geleerd en ontwikkeld om consequent de akoestische eigenschappen en syntaxis van muisliedjes te induceren, verzamelen en analyseren.

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

De plus-maze maatregelen angst-achtig gedrag bij knaagdieren. Er zijn twee tegengestelde gesloten en twee tegenoverliggende open armen; angstig knaagdieren te voorkomen dat de open armen. Het centrale gebied is niet volledig open of gesloten, zodat de tijd doorgebracht hier is dubbelzinnig en moeilijk te interpreteren. Hier een modificatie van de plus-maze protocol elimineren van dit gebied beschreven.

De opeenvolgende Steegjes Test van angst bij muizen en ratten

Dit artikel presenteert een protocol voor een contextuele en cued vreesconditionering test met een video-analysesysteem om angst leren en geheugen in muizen te beoordelen.

Contextuele en cued Fear Conditioning Test Met behulp van een video analysesysteem in Muizen

Dit protocol beschrijft de aangepaste gatplaat, een gedragstestopstelling die de kenmerken van een open veld en een traditionele gatplaat combineert. Deze opstelling maakt de differentiële analyse van ongeconditioneerd gedrag van kleine laboratoriumzoogdieren mogelijk, evenals de analyse van cognitieve vaardigheden.

De Modified Hole Board - Het meten van gedrag en cognitieve en sociale interactie bij muizen en ratten

Eerder onderzoek naar de sociale dimensie van stress richtte zich op twee belangrijke variabelen: sociale identiteit en sociale steun. Dit protocol introduceert een effectieve experimentele manipulatie van deze twee sociale variabelen en beschrijft hun implementatie in een standaard stressinductieparadigma (Trier Social Stress Test).

De sociale dimensie van Stress: experimentele manipulaties van maatschappelijke ondersteuning en sociale identiteit in de Trier Social Stress Test

Zwarte smaak heeft een krachtige hedonische aantrekkingskracht bij mensen van alle leeftijden, met name kinderen. Hierin wordt een betrouwbare en geldige methode beschreven die kan worden gebruikt om het niveau van de meest geprefereerde zoetheid te bepalen, waardoor het een waardevol psychofysisch hulpmiddel wordt voor wetenschappers.

Psychofysische Tracking Methode om smaakvoorkeuren bij kinderen en volwassenen Meet

Een rat versie van het menselijk Psychomotorische Waakzaamheid Test (PVT) wordt beschreven dat de aspecten van de aandacht vergelijkbaar met die gemeten met de menselijke PVT, met inbegrip van aspecten van de menselijke waakzaamheid zoals nauwkeurigheid prestaties, snelheid van de motor, voorbarig reageren, en vervalt in de aandacht meet.

De knaagdieren Psychomotorische Waakzaamheid Test (rPVT): Een methode voor het beoordelen van Neurobehavioral bij ratten en muizen

De herkenningstest object (ORT) is een eenvoudige en efficiënte test voor de evaluatie van leren en geheugen in muizen. De methodologie wordt hieronder beschreven.

De herkenningstest roman-Object voor het onderzoek naar leren en geheugen in muizen

Dit protocol beschrijft de geconditioneerd plaats voorkeur (CPP) als een model van instorting. Deze procedure maakt het meten van herval in proefdieren, gelet op de invloed van drug-geassocieerde milieu signalen als verlangen en herval in onthouden verslaafden is momenteel de focus van drugsgebruik behandelingsprogramma's.

Herstel van de Drug-zoekende in muizen met behulp van de geconditioneerde plaats voorkeur paradigma

Leer ultrasone vocalisatiepreferenties in muizen bepalen met een twee-keuze afspeeltest. Deze methode onthult gedragsreacties op verschillende USV-kenmerken en helpt communicatiedynamiek te begrijpen.

Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test

Meer video's verkennen