Name: Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-12-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Leer het onvoorspelbare chronische milde stressprotocol toe te passen bij knaagdieren om depressieve symptomen en gedragsveranderingen te induceren. Deze methode helpt onderzoekers chronische stress en gezondheidsuitkomsten bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd ondersteund door de American Heart Association (IRG 14330015, PRE 16850005, PRE 20380386, EIA 0740129N), en de National Institutes of Health (RR 2865AR; P20 RR 016477).

Alle procedures hieronder beschreven zijn beoordeeld en door de Institutional Animal Care en gebruik Comite aan de West Virginia University Health Sciences Center goedgekeurd. 1. Selectie van Animal Model LET OP: De meeste gangbare soorten in de UCMS model onder Sprague Dawley en Wistar ratten en de BALB / cJ muis; andere muizenmodellen gebleken beperkte werkzaamheid (DBA / 2, C57BL / 6). Toch dienen zorgvuldig aandacht worden geschonken aan de specifieke muis of rat stam naar keuze, als genetische achtergrond en gevoeligheid voor omgevingsinvloeden variëren sterk tussen soorten en is aangetoond als kritieke factoren die de uitkomsten van het onderzoek 11,14,15, 19. <ol><li> Gebruik dieren van de geschikte leeftijd (bijvoorbeeld wanneer het gewenst eindpunt in een 17-weken oude ratten te evalueren, dan de ratten moet UCMS protocol vanaf ~ 9 weken oud) aangezien dit protocol duurt least 7-9 weken volledig induceren depressieve symptomen. </li><li> Single-huis dieren ondergaan UCMS in IACUC goedgekeurde kooien en faciliteiten, met eten en standaard chow ad libitum beschikbaar (tenzij anders vereist door specifiek protocol). </li><li> Wees extra voorzichtig om ervoor te zorgen controles zijn ondergebracht in een rustige kamer met een minimale activiteit om de effecten van een eventuele onbekende milieu-invloeden te beperken. </li></ol> 2. Onvoorspelbaar Chronische Stress Mild Protocol OPMERKING: Dieren ondergaan UCMS worden dagelijks vervoerd (&gt; 5 dagen per week) om een ​​schone ruimte gebruikt voor UCMS manipulaties. De dieren worden blootgesteld aan 1 of 2 van de volgende dagelijks genoemde stressoren. Stressoren worden uitgevoerd op een willekeurig schema en elke spanning wordt toegediend gedurende ten minste 3-4 uur (zie tabel 1). <ol><li> Het beddengoed temperen door het gieten van 10-20 oz. schoon water in elke standaard kooi. Pas de hoeveelheid water dienovereenkomstig de grootte van hetkooi om volledig te temperen het beddengoed maar niet voor bundeling van water veroorzaken. Verblijven de dieren in vochtige kooi voor 3-4 uur. </li><li> Verwijder beddengoed uit elke kooi voor 3-4 uur, waarna de dieren worden overgegaan naar een andere stressor die een lege kooi (ondiepe bad, kooi tilt) of geplaatst in een schone kooi met fris beddengoed. </li><li> Tilt kooien tot ongeveer 45 ° (niet aanwezige) voor 3-4 uur. Kooien kantelbaar met een stevige object dat in plaats blijft als het dier beweegt in de kooi. </li><li> Alter normaal 12 uur / 12 uur licht / donker cycli in opeenvolgingen van 30 min perioden voor de duur van 8 uur. Na terug dieren naar de normale cyclus. </li><li> Overdracht elk dier uit de kooi aan die van de kooi van een naburig dier dat is verwijderd 3 uur. </li><li> Verwijderen lagering aan elke kooi en voeg water tot een diepte van ~ 0,25 inch voor muizen of ~ 0,5 inch voor ratten gedurende ongeveer 4 uur. Gebruik water dat warmer is dan RT (~ 30 ° C) tot een minimum te beperken hypothermia potentieel. Kort droog dieren met een zachte handdoek aan het einde van het water blootstelling voorafgaand aan plaatsing in schone kooien. </li><li> Expose dieren roofdier ruikt / klinkt door het toevoegen van willekeurig verdeeld steekproef plukjes bont of urine (10-20 ml) uit een natuurlijke predator soorten in de kooi voor 3-4 uur. Als alternatief, speel grommen of roofzuchtige geluiden van natuurlijke predator soorten in de nabijheid van de kooien gedurende 3 uur. </li><li> Aan het einde van elke dagelijkse stress periode eerst alle dieren in schone kooien en ze terug naar het huis faciliteit. </li></ol> 3. Animal Monitoring / Grooming Scores <ol><li> Inspecteer elk dier per dag voor de ontwikkeling van wonden of zweren die diergeneeskundige behandeling kan vereisen. Dieren die lichte verwondingen kan worden voortgezet in de UCMS protocol over de toestemming van de dierenarts te ontwikkelen. <ol><li> Twee onderzoekers opgeleid in het evalueren vacht verzorgen inspecteren elk dier en wijs een wekelijkse jas score op een schaal van 0-1. Deze score is af te schrikkenbepaald door de individuele scores toekennen (0- schoon, 1-dirty) aan elk van de 8 lichaam Regio&#39;s- hoofd, nek, rug jas, ventrale vacht, staart, voorpoten, achterpoten, en genitale regio. Dezelfde onderzoekers zijn om deze taak uit te voeren in de hele UCMS protocol om de consistentie in de jas scores toekennen handhaven. </li><li> Alle dieren die een sterke vermindering van het lichaamsgewicht (dwz,&gt; 15%) ervaart moet worden gemeld aan het veterinaire personeel en moet uit het protocol worden verwijderd. </li></ol></li></ol> 4. Behavioral Testen en uitkomstmaten OPMERKING: Verschillende evaluatiemethoden kan worden gebruikt om gedragsveranderingen de UCMS protocol bij knaagdieren kwantificeren. <ol><li> Cumulatieve Coat Grooming Score. <ol><li> Zoals hierboven beschreven, is wekelijks laag verzorging score toegekend voor elk dier. </li></ol></li><li> Sucrose Splash Test: <ol><li> Plaats het dier in een schone kooi gevoerd met een wattenschijfje of een handdoek om beddengoed te voorkomenvan vast te houden aan zijn vacht. Spray een 10% sucrose oplossing op het hoofd en de dorsale vacht van elk dier en noteer de totale verzorging gedrag gedurende 5 minuten. </li><li> Grooming activiteit (gedefinieerd als het reinigen van de vacht door het likken of krabben) wordt gemeten door latency (inactieve tijd tussen de eerste spray en de start van verzorging) en de frequentie (aantal keren dat het verzorgen van een bepaald lichaamsdeel). </li></ol></li><li> Sucrose Voorkeur Test: <ol><li> Wennen dieren drinken 1% sucrose-oplossing (w / v) 72 uur voor de test en geef blootstelling aan twee flessen (1% sacharoseoplossing versus kraanwater in verschillende flessen). Na gewenning, bieden dieren met ad libitum toegang tot sucrose-oplossing en leidingwater gedurende 3 uur. Na 3 uur staat de consumptie volumes sucrose-oplossing en leidingwater en bereken sucrose voorkeur als: [(sucrose consumptie) / (water verbruik + sucrose consumptie)] × 100. </li></ol></li><li> Staart Suspension Test (Muizen Only): <ol><li> Subreng muizen door de staart van een stabiele staaf (20 cm van de grond) met plakband (2 cm van staartpunt). Record immobiliteit tijd meer dan 5 min. Muizen worden immobiel beschouwd alleen als ze passief en volkomen roerloos hangen. </li></ol></li><li> De Gedwongen Swim Test: <ol><li> Plaats dieren in een houder (~ 15-20 cm diameter muizen; ~ 55-60 cm diameter voor ratten) gevuld met water met een temperatuur van 26 ± 0,5 ° C. Noteer de latentie om de eerste aanval van de mobiliteit en de tijd immobiel gedurende de 5-minuten testperiode. Aan het eind van een test, plaats de natte dier in een bedrijf kooi op een verwarmingselement (30-35 ° C) met een normaal aanwezige waarvoor een absorberend keukenpapier tot droog. </li></ol></li><li> Verhoogde Plus Doolhof: <ol><li> Laat elk dier het doolhof vrij exploratie 5 min. Recordbedrag inzendingen in elke arm, en de totale tijd doorgebracht in elke arm, volgens a priori criteria 20. </li></ol></li><li> Locomotor Activiteit: <ol><li> Record activiteit, gedefinieerd als de totale beweging, fijne bewegingen, het grootbrengen bewegingen, en inactiviteit, voor zowel acute (30 min) en / of chronische (12 uur) perioden. Doe dit met behulp van de kooi of een nieuwe omgeving, afhankelijk van de individuele omgeving (hoewel de consistentie moet worden gehandhaafd) in real time door een waarnemer of post-hoc door herhalen en analyseren van camerabeelden. </li></ol></li></ol> 5. Uitbreiding / Variatie van UCMS Protocol <ol><li> Dien geschikte therapeutische middelen of uitdagingen van hun vermogen om zowel stomp de ontwikkeling van UCMS geïnduceerde uitkomsten (indien vroeg gestart) of om de ernst van de gevestigde UCMS geïnduceerde uitkomsten achteruit (indien te laat gestart) te bestuderen. Dit is afhankelijk van het betreffende laboratorium of protocol 11. </li></ol> 6. eindresultaat Assessments <ol><li> Naar aanleiding van de sluiting van UCMS protocollen en gedrags- testen, gebruik maken van dieren in de daaropvolgende experiments op een wijze die de specifieke hypotheses, doelen en doelstellingen van de betreffende laboratorium richt. Opmerking: Als voorbeelden, kunnen deze ook cardiovasculaire, inflammatoire of endocriene responsen op chronische stress. Als alternatief kunnen therapeutische interventies worden ingevoerd op dit punt om hun effectiviteit en mechanistische onderbouwing te evalueren. </li></ol>

<ol><li>NIMH Statistical Pages (Depression; Prevalence). , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.nimh.nih.gov/health/statistics/prevalence/major-depression-among-adults.shtml">http://www.nimh.nih.gov/health/statistics/prevalence/major-depression-among-adults.shtml</a> (2014).</li>
<li>NIMH Statistical Pages (Depression; Costs). , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.nimh.nih.gov/health/statistics/cost/index.shtml">http://www.nimh.nih.gov/health/statistics/cost/index.shtml</a> (2014).</li>
<li>Lett, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression+as+a+risk+factor+for+coronary+artery+disease%3A+evidence%2C+mechanisms%2C+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosom+Med%22%5BJournal%5D)">Depression as a risk factor for coronary artery disease: evidence, mechanisms, and treatment.</a> Psychosom Med. 66 (3), 305-315 (2004).</li>
<li>Plante, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression+and+cardiovascular+disease%3A+a+reciprocal+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">Depression and cardiovascular disease: a reciprocal relationship.</a> Metabolism. 54, 45-48 (2005).</li>
<li>Pizzi, C., Manzoli, L., Mancini, S., Bedetti, G., Fontana, F., Costa, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+nervous+system%2C+inflammation+and+preclinical+carotid+atherosclerosis+in+depressed+subjects+with+coronary+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Autonomic nervous system, inflammation and preclinical carotid atherosclerosis in depressed subjects with coronary risk factors.</a> Atherosclerosis. 212 (1), 292-298 (2010).</li>
<li>Barden, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implication+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+in+the+physiopathology+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychiatry+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Implication of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in the physiopathology of depression.</a> J Psychiatry Neurosci. 29 (3), 185-193 (2004).</li>
<li>Bowman, R. E., Beck, K. D., Luine, V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+stress+effects+on+memory%3A+sex+differences+in+performance+and+monoaminergic+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic stress effects on memory: sex differences in performance and monoaminergic activity.</a> Horm Behav. 43, 48-59 (2003).</li>
<li>Baune, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+subtypes+of+depression+and+cardiovascular+disease%3A+a+systematic+review+of+biological+models%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The relationship between subtypes of depression and cardiovascular disease: a systematic review of biological models.</a> Transl Psychiatry. 2, e92(2012).</li>
<li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+translational+rodent+models+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Towards translational rodent models of depression.</a> Cell Tissue Res. 354 (1), 141-153 (2013).</li>
<li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav Brain Res. 175 (1), 43-50 (2006).</li>
<li>Yalcin, I., Belzung, I., Surget, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress%3A+a+four-antidepressant+survey%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in the unpredictable chronic mild stress: a four-antidepressant survey.</a> Behav Brain Res. 193 (1), 140-143 (2008).</li>
<li>d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Stapleton, P. A., Goodwill, A. G., Isingrini, E., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depressive+behavior+and+vascular+dysfunction%3A+a+link+between+clinical+depression+and+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Depressive behavior and vascular dysfunction: a link between clinical depression and vascular disease.</a> J Appl Physiol. 108 (5), 1041-1051 (2010).</li>
<li>Stanley, S. C., Brooks, S. D., Butcher, J. T., d'Audiffret, A. C., Frisbee, S. J., Frisbee, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+sex+on+chronic+stress-+and+depressive+behavior-induced+vascular+dysfunction+in+BALB%2FcJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Protective effect of sex on chronic stress- and depressive behavior-induced vascular dysfunction in BALB/cJ mice.</a> J Appl Physiol. 117 (9), 959-970 (2014).</li>
<li>Ibarguen-Vargas, Y., Surget, A., Touma, C., Palme, R., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifaceted+strain-specific+effects+in+a+mouse+model+of+depression+and+of+antidepressant+reversal%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Multifaceted strain-specific effects in a mouse model of depression and of antidepressant reversal.</a> Psychoneuroendocrinology. 33 (10), 1357-1368 (2008).</li>
<li>Dalla, C., Pitychoutis, P. M., Kokras, N., Papadopoulou-Daifoti, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+animal+models+of+depression+and+antidepressant+response%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Sex differences in animal models of depression and antidepressant response.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 106 (3), 226-233 (2010).</li>
<li>Mutlu, O., Gumuslu, E., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Kokturk, S., Kır, H. M., Akar, F., Erden, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+fluoxetine%2C+tianeptine+and+olanzapine+on+unpredictable+chronic+mild+stress-induced+depression-like+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of fluoxetine, tianeptine and olanzapine on unpredictable chronic mild stress-induced depression-like behavior in mice.</a> Life Sci. 91 (25-26), 1252-1262 (2012).</li>
<li>Gumuslu, E., Mutlu, O., Sunnetci, D., Ulak, G., Celikyurt, I. K., Cine, N., Akar, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+tianeptine%2C+olanzapine+and+fluoxetine+on+the+cognitive+behaviors+of+unpredictable+chronic+mild+stress-exposed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Res+%28Stuttg%29%22%5BJournal%5D)">The effects of tianeptine, olanzapine and fluoxetine on the cognitive behaviors of unpredictable chronic mild stress-exposed mice.</a> Drug Res (Stuttg). 63 (10), 532-539 (2013).</li>
<li>Isingrini, E., Belzung, C., Freslon, J. L., Machet, M. C., Camus, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluoxetine+effect+on+aortic+nitric+oxide-dependent+vasorelaxation+in+the+unpredictable+chronic+mild+stress+model+of+depression+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosom+Med%22%5BJournal%5D)">Fluoxetine effect on aortic nitric oxide-dependent vasorelaxation in the unpredictable chronic mild stress model of depression in mice.</a> Psychosom Med. 74 (1), 63-72 (2012).</li>
<li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hascoët, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test.</a> Behav Brain Res. 143, 193-200 (2003).</li>
<li>Komada, M., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+plus+maze+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Elevated plus maze for mice.</a> J Vis Exp. (22), 1088(2008).</li>
<li>Golbidi, S., Frisbee, J. C., Laher, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+stress+impacts+the+cardiovascular+system%3A+animal+models+and+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic stress impacts the cardiovascular system: animal models and clinical outcomes.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2015).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Uitgebreid klinisch en epidemiologisch bewijs heeft aangetoond dat chronische stress een van de krachtigste precipiterende factoren is voor depressie. Herhaalde blootstelling aan stressoren kan de individuele kwetsbaarheid voor depressie en andere neuropsychiatrische stoornissen versterken als gevolg van de psychologische en fysieke eisen in het lichaam die zich na verloop van tijd ophopen. Het gebruik van gevalideerde preklinische diermodellen biedt een waardevol translationeel hulpmiddel voor het bestuderen van depress...

Depressieve psychische aandoening is een complexe neurologische aandoening die momenteel wordt erkend als een belangrijke oorzaak van invaliditeit en ziektelast wereldwijd. De NIMH meldt dat ongeveer 12% van de Amerikanen lijden aan klinische depressie, met twee keer zoveel vrouwen getroffen versus mannen 1. In de VS alleen, depressie is goed voor miljarden dollars de directe kosten van de gezondheidszorg en een geschatte $ 193.000.000.000 meer in de indirecte kosten (verlaagde winst en verlies van productiviteit) 2. Symptomen van depressie omvatten anhedonie, gewichtsveranderingen en slaap cycli verlaagde lichaamsbeweging en persoonlijke hygiëne, gevoelens van wanhoop of schuld en / of terugkerende gedachten aan de dood of zelfmoord. Gedurende het laatste decennium, epidemiologische en klinische studies hebben aangetoond dat depressie een onafhankelijke risicofactor voor cardiovasculaire ziekte (CVD) morbiditeit en mortaliteit 3 en voorspellend is ernstiger prognose cardiovasculaire pathologieën, waaronder eentherosclerosis, hypertensie, myocardiaal infarct en coronaire hartziekte, ongeacht voorgeschiedenis van openlijke CVD 4. Ondanks de toenemende prevalentie en nadelige gevolgen voor de volksgezondheid van depressie, is de etiologie en verwante pathofysiologie van deze ziekte slecht begrepen en de heterogeniteit van de aandoening als gevolg van diverse factoren (bijvoorbeeld, genetische, biologische, en omgevingscomponenten) heeft klinische diagnose moeilijk maakte bepalen. Bewijsmateriaal wijst erop dat onoplosbare psychologische stress is een belangrijke bijdragende factor voor het ontwikkelen van depressieve ziekten en kan ook een krachtige pathogene factor het koppelen van depressie en HVZ, deels als gevolg van verstoring en ontregeling van de hypothalamus-hypofyse-bijnier (HPA) as 5,6 zijn. Disfunctie van de HPA-as is een belangrijk mechanisme dat is gekoppeld aan de gedrags- en fysiologische veranderingen waargenomen in depressie en de ontwikkeling van verschillende CVD risicofactoren, inclusiefdyslipidemie, obesitas en diabetes 7. Meerdere preklinische modellen van depressie zijn ontwikkeld in een poging om het mechanisme van veranderde HPA werking eigen klinische depressie repliceren; dergelijke modellen verschaffen een gevalideerde methoden voor het onderzoeken van de gedragsmatige, neurologische en fysiologische veranderingen die met chronische en acute stress bij dieren. De geldigheid van een diermodel van de ziekte is gebaseerd op de relevantie van het ontstaan ​​en de progressie van het model vormgeving en de mogelijkheid om anatomische, neurofysiologische recapituleren en gedragskenmerken waargenomen bij menselijke ziekte. Daarnaast moet preklinische respons op behandelingen (bijvoorbeeld SSRI&#39;s) vergelijkbare resultaten met die waargenomen in klinische settings opleveren. Verschillende diermodellen van door stress veroorzaakte depressie worden momenteel gebruikt in onderzoek, zoals aangeleerde hulpeloosheid, vroege leven stress en sociale nederlaag stress. Echter, elk van deze modellen heeft inherente nadelendat het verminderen van hun translationele werkzaamheid 8. In de afgelopen decennia is het onvoorspelbare chronische milde stress (UCMS) protocol ontpopt als een van de meest translationeel relevante modellen voor het bestuderen van de pathofysiologie van depressie bij knaagdieren 9. Dit model is gebaseerd op het fundamentele concept dat chronische blootstelling aan stressoren verstoort stressrespons systemen en uiteindelijk leidt tot de ontwikkeling van depressieve stoornissen. Tijdens de UCMS protocol worden de dieren blootgesteld aan een willekeurig aantal milde milieu- en sociale stressfactoren op een dagelijkse basis. Een belangrijke factor die de relevantie van dit model voor menselijke situaties verbetert ligt in de hoge mate van onvoorspelbaarheid en onbeheersbaarheid van de stressoren, alsmede het tijdstip waarop zij worden ingebracht. Daarnaast is de UCMS protocol gebruikt slechts milde stressoren, in plaats van te vertrouwen op het vroege leven of agressieve fysieke stimuli. Gedurende UCMS blootstelling depressief gedrag ontwikkelen en zijn vergelijkbaar met CLINical symptomen, waaronder verminderde gevoeligheid voor beloningen (anhedonie), veranderingen in de fysieke activiteit en onderzoekend gedrag (hulpeloosheid en wanhoop), verslechtering van de vacht staat en veranderde seksuele activiteit 10. Bijna alle aantoonbare symptomen van depressie gemeld middels dit model, en studies hebben aangetoond dat deze gedragingen enkele weken aanhouden na beëindiging van stress. Bovendien kunnen deze UCMS geïnduceerde depressieve gedrag geleidelijk worden gerespecteerd door chronische, maar niet acute behandeling met name antidepressiva, wat suggereert soortgelijke neurologische effecten van therapeutische verbetering die nauw weerspiegelt de klinische werking en variabele effectiviteit van deze middelen bij mensen 11,14- 18. Hier melden wij een gedetailleerde beschrijving van de UCMS protocol en beschrijven typische gedrags- en vasculaire resultaten bij muizen.

<table><tbody><tr><td>Tijdelijke dierenkooien met deksels</td><td></td><td></td><td>Verstrekt door uw dierenverzorgingsvoorziening</td></tr><tr><td>Rodentenbed</td><td></td><td></td><td>Verstrekt door uw dierenverzorgingsvoorziening</td></tr><tr><td>Predator vacht of urine</td><td></td><td></td><td>Verstrekt door uw dierenverzorgingsvoorziening</td></tr><tr><td>Drinkflessen voor knaagdierenkooi</td><td></td><td></td><td>Verstrekt door uw dierenverzorgingsvoorziening</td></tr><tr><td>1.000 ml maatcilinder</td><td>variabel</td><td>variabel</td><td>Dit is optioneel.  Elke container waaruit een bekende hoeveelheid water kan worden gegoten, zal geschikt zijn</td></tr><tr><td>Houtsblokken gesneden uit 2x4</td><td>variabel</td><td>variabel</td><td>8-duimsecties worden gesneden om kooi-kantelprocédés te vergemakkelijken</td></tr><tr><td>Zachte papieren handdoeken</td><td></td><td></td><td>Verstrekt door uw instelling</td></tr><tr><td>Kleine spuitfles&nbsp;</td><td>Walmart</td><td></td><td>100-200 ml volume is voldoende, gebruikt voor sucrose splash-test</td></tr><tr><td>Medium (muizen) of grote (ratten) plastic kuipen voor zwemtest</td><td>Walmart</td><td>variabel</td><td>Moet van voldoende diepte zijn dat de dieren de bodem niet kunnen aanraken (bijv., 2 voet)</td></tr></tbody></table>

een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en negatieve health outcomes in knaagdieren

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Chronische onopgeloste stress een belangrijke risicofactor voor het ontwikkelen van klinische depressie. Terwijl veel preklinische modellen van stress veroorzaakte depressie zijn gemeld, de onvoorspelbare chronische milde stress (UCMS) protocol is een gevestigde translationeel relevante model voor het induceren van gedragsproblemen symptomen vaak geassocieerd met klinische depressie, bijvoorbeeld anhedonie, veranderde verzorging gedrag en aangeleerde hulpeloosheid bij knaagdieren. De UCMS protocol veroorzaakt ook fysiologische (e .g., Hypercortisolemie, hypertensie) en neurologische (bijvoorbeeld anhedonie, aangeleerde hulpeloosheid) veranderingen die klinisch worden geassocieerd met depressie. Belangrijker is, kan UCMS veroorzaakte depressieve symptomen worden verbeterd door middel van een chronische, maar niet acute behandeling met gemeenschappelijke SSRI&#39;s. Als zodanig, de UCMS protocol biedt vele voordelen boven acute stress protocollen of protocollen die meer extreme stressoren benutten. Ons protocol gaat gerandomiseerde, dagelijkse blootstelling tot 7 verschillende stressors: vochtige beddengoed, verwijdering van beddengoed, kooi tilt, verandering van licht / donker cycli, sociale spanningen, ondiep water bad, en predator geluiden / geuren. Door het onderwerpen knaagdieren 3-4 uur per dag om deze milde stressoren gedurende 8 weken, tonen we allebei significante gedragsveranderingen en slechte gezondheid resultaten op het cardiovasculaire systeem. Deze benadering maakt grondige ondervraging van de neurologische, gedrags- en fysiologische veranderingen geassocieerd met chronische stress geïnduceerde depressie, en voor het testen van nieuwe potentiële therapeutische middelen of interventiestrategieën.

Een voorbeeld van het schema voor een week na de UCMS procedure is weergegeven in tabel 1. Elke week werden stressoren gerandomiseerd acclamation voorkomen en onvoorspelbaarheid van de stress challenge per dag te garanderen. Maatregelen van Depressieve achtig gedrag Na 8 weken van UCMS, waren er significante veranderingen in zowel gedrags-en fysiologische uitkomsten bij chronisch benadrukt knaagdieren ten opzichte van hun niet-benadrukte controle...

Het onvoorspelbare chronische milde stress (UCMS) protocol is een gevalideerde methode voor het bestuderen van gedrags- en fysiologische veranderingen geassocieerd met chronische stress en depressieve symptomen. Acht weken van het opleggen van het UCMS-protocol induceert gedragsveranderingen en slechte gezondheidsuitkomsten bij knaagdieren van beide geslachten.

Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

Het algemene doel van het volgende experiment is om een knaagdierstam bloot te stellen aan een reeks chronische, onvoorspelbare stressoren die willekeurig worden bepaald, zodat het dier niet effectief kan compenseren terwijl de ernst van de depressieve symptomen toeneemt. Dit wordt bereikt door dagelijkse blootstelling aan één van een lijst met mogelijke stimuli die ontworpen zijn om stressvol te zijn, maar niet schadelijk of letselverwekkend voor het dier. De dieren worden vijf tot zes dagen per week gedurende acht weken met regelmatige tussenpozen aan de stressoren blootgesteld; de dieren worden gemonitord op de ontwikkeling van depressieve symptomen door het beoordelen van de status en de reacties van het dier op opgelegde stimuli, zoals een sucrose-spraytest.De resultaten laten zien dat het opleggen van chronische gerandomiseerde onoplosbare stressfactoren in de omgeving van het dier het vermogen van het dier om zich aan te passen verhindert en leidt tot de ontwikkeling van depressieve symptomen gedurende meerdere weken. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen in het veld van chronische ziekten, zoals de vraag hoe chronische depressieve symptomen kunnen leiden tot negatieve gezondheidsuitkomsten in andere weefsels of organsystemen. We kregen voor het eerst het idee om deze methode toe te passen toen we leerden over de diepgaande comorbide relaties tussen gevorderde cardiovasculaire aandoeningen en ziekterisico's in onze klinische populaties, samen met de gelijktijdige presentatie van ernstige depressieve stoornissen.Deze procedure zal worden gedemonstreerd door dhr. Steven Brooks en mw. Kayla Brannon, promovendi uit onze laboratoria. Om milde stress bij huismuizen in afzonderlijke kooien op te wekken en de muizen dagelijks aan één of twee stressoren bloot te stellen gedurende minimaal drie tot vier uur per stressor, moet de volgende lijst met stressoren volgens een gerandomiseerd schema worden uitgevoerd voor de stressor met vochtig strooisel. Maak het strooisel nat door 10 tot 20 ounces schoon water in een standaardkooi te gieten.Houd de muis drie tot vier uur in de vochtige kooi. Verwijder drie tot vier uur lang de bodembedekking uit de kooi, waarna de muis wordt overgebracht naar een andere stressfactor die een lege kooi vereist, of plaats de muis in een schone kooi met verse bodembedekking. Kantel kooien zonder bodembedekking gedurende drie tot vier uur onder een hoek van ongeveer 45 graden met behulp van een stevig object dat op zijn plaats blijft terwijl de muis zich in de kooi beweegt. Wijzig voor deze stressfactor de normale cyclus van 12 uur licht en 12 uur donker in opeenvolgende perioden van 30 minuten, met een totale duur van acht uur.Verplaats de muis vanuit de thuiskooi naar de kooi van een naburige muis die is weggehaald voor de stressperiode van drie uur. Verwijder de bodembedekking uit de kooi en voeg water toe tot een diepte van ongeveer 0,25 inches voor muizen, en laat de muis daar ongeveer vier uur in. Droog de muis aan het einde van de waterblootstelling kort af met een zachte handdoek.Stel muizen bloot aan roofdieren, geuren of geluiden door willekeurig verdeelde plukken haar of 10 tot 20 milliliters urine van een natuurlijke roofdiersoort in de kooi toe te voegen, en laat de muis drie tot vier uur lang achter. Speel alternatief grommende of roofdiergeluiden van natuurlijke roofdiersoorten in de nabijheid van de kooien af gedurende drie uur aan het einde van elke dagelijkse stressperiode. Plaats de muizen in schone kooien en breng ze dagelijks terug naar de huisvestingsfaciliteit.Inspecteer elk dier eenmaal per week op de ontwikkeling van wonden of zweren die veterinaire behandeling kunnen vereisen; zorg dat twee onderzoekers zijn getraind in het evalueren van de verzorgingscode. Inspecteer elk dier en ken een wekelijkse codescore toe op een schaal van nul tot één. Bereken de totale score per individu door scores van nul (voor schoon) of één (voor vuil) toe te kennen aan elk van de acht lichaamsregio's.De kop, de nek, de rugzijde, de buikzijde, de staart, de vier ledematen, de achterpoten en de genitale regio. Plaats het dier in een schone kooi met een wattenstaafje of handdoek om te voorkomen dat strooisel aan de vacht kleeft. Spuit vervolgens een 10% sucrose-oplossing op de kop en de rugzijde van elk dier en registreer het totale verzorgingsgedrag gedurende vijf minuten.Meet de latentietijd en de frequentie van het gezichtverzorgingsgedrag gedurende deze periode. De latentietijd is de tijd tussen de eerste spray en het begin van het gezichtverzorgingsgedrag, en de frequentie wordt gemeten als het aantal keren dat het gezicht wordt verzorgd. Na acht weken van onvoorspelbare chronische milde stress waren er significante veranderingen in zowel de gedragsmatige als fysiologische resultaten bij chronisch gestreste knaagdieren in vergelijking met hun niet-gestreste controlelijnen.Muizen ontwikkelden depressie-achtige symptomen na onvoorspelbare chronische milde stress en vertoonden een progressieve afname in de scores voor vachtverzorging. Deze duidelijke verslechtering van de fysieke staat van de vacht suggereert een verminderde verzorgingsactiviteit en kan parallel lopen aan een gebrek aan motivatie. Recent bewijs heeft gesuggereerd dat er een aanzienlijk kwantitatief verschil is in de reacties op onvoorspelbare chronische milde stress tussen mannelijke en vrouwelijke muizen.Specifiek suggereren gegevens dat vrouwelijke muizen die aan hetzelfde stressprotocol worden blootgesteld als leeftijdgenootjes van het mannelijke geslacht, ernstigere gedragsreacties op het protocol ontwikkelen dan mannetjes. Na deze procedure kunnen andere methoden die geschikt zijn voor orgaanspecifieke functies gemakkelijk worden uitgevoerd om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals hoe de aanwezigheid van chronische depressieve symptomen de normale functie in het betreffende organsysteem kan beïnvloeden. Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u de verschillende stappen en procedures in het UCMS-protocol kunt gebruiken om stapsgewijs de condities voor toenemende depressieve symptomen in uw knaagdiermodel te creëren.

an-unpredictable-chronic-mild-stress-protocol-for-instigating

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

This video demonstrates the method of inducing chronic stress in a mouse through repeated immobilization, leading to corticosterone release and reduced glutamate receptor activity in neurons, which results in depression-like behavior.

Inducing Depression-like Behavior in a Mouse via Immobilization Stress

Source: Yan, Z., et al. Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice. J. Vis. Exp. (2019).The video demonstrates the process of establishing a mouse model of chronic stress-induced depression and assessing depressive behaviors. The chronic application of various stressors triggers the release of corticosterone, leading to neuronal over-excitation and eventual neuronal death, which results in depression-like symptoms in the mice.

Induction and Evaluation of Depression in Mice Through Chronic Stress Exposure

Dit artikel beschrijft het gebruik van chronische inwoner indringer sociale spanning als een ethologically relevante paradigma naar model postpartum depressie en angst bij lacterende knaagdieren.

Met behulp van Chronische Sociale Stress om model postnatale depressie bij zogende Knaagdieren

Hier, werkwijzen voor het ontwikkelen van een muismodel van subchronische en milde sociale verslaan spanning beschreven en gebruikt om de pathogène kenmerken van depressie waaronder hyperphagia- en polydipsie-achtige symptomen volgende uitgebreide lichaamsgewicht onderzoeken.

Een muismodel van Subchronische en Mild Sociale Nederlaag Stress voor het begrijpen van stress geïnduceerde Behavioral en Fysiologische Tekorten

Hier presenteren we het onvoorspelbare chronische milde stress-protocol in muizen. Dit protocol induceert een langdurig depressieve-achtige fenotype en kan beoordelen van de werkzaamheid van vermeende antidepressiva in het omkeren van de gedrags- en neuromolecular depressieve-achtige tekorten.

Het Protocol van de onvoorspelbare chronische milde Stress voor inducerende Anhedonie in muizen

Dit artikel biedt een vereenvoudigd en gestandaardiseerd protocol voor inductie van depressief-achtig gedrag in chronisch geïmmobiliseerde muizen met behulp van een fixator. Bovendien, gedrag en fysiologische technieken om te controleren of de inductie van depressie worden uitgelegd.

Een chronisch immobilisatie stress protocol voor het induceren van depressie-achtig gedrag bij muizen

De Y-doolhof barrière taak is een gedragstest die motivatie onderzoekt om inspanning te besteden voor beloning. Hier bespreken we het testen van meerdere goed gevalideerde chronische stressoren, waaronder chronische corticosteron en sociale nederlaag stress met dit gedrag, evenals de nieuwe chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress (CNSDS), die effectief is bij vrouwen.

Chronische stress verschuivingen inspanning-gerelateerde keuze gedrag in een Y-Maze Barrier Taak in muizen

Dit protocol schetst een chronisch onvoorspelbaar mild stress (CUMS) model voor depressie op basis van de Mongoolse medische theorie, samen met methoden voor het valideren van gedragstests.

Chronische onvoorspelbare milde stress bij ratten op basis van de Mongoolse geneeskunde

Dit protocol beschrijft hoe 10 dagen chronische sociale nederlaagstress bij mannelijke muizen in de vroege adolescentie kan worden uitgevoerd om langdurige sociale vermijding op volwassen leeftijd te produceren bij meer dan 60% van de muizen.

Chronische sociale nederlaagstress bij mannelijke muizen in de vroege adolescentie

Door vier dagelijkse sociale stressoren te integreren, beschrijft de huidige studie een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel (MISS) voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen. Na tien dagen van herhaalde blootstelling aan MISS ontwikkelden de muizen depressieve en angstachtige fenotypes, waardoor een natuurlijk, op etiologie gebaseerd diermodel werd geboden voor het bestuderen van psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke proefpersonen.

Een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen

Dit artikel behandelt de procedures om stressreacties op te wekken met behulp van fysieke fixatiestress bij muizen en ratten. Aanvullende overwegingen die in acht moeten worden genomen bij het selecteren en gebruiken van fixatiestress in knaagdiermodellen worden besproken.

Terughoudendheid om stress op te wekken bij muizen en ratten

Leer het onvoorspelbare chronische milde stressprotocol toe te passen bij knaagdieren om depressieve symptomen en gedragsveranderingen te induceren. Deze methode helpt onderzoekers chronische stress en gezondheidsuitkomsten bestuderen.

Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren (Video) | JoVE Journal

Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren

Meer video's verkennen