Name: Ontcijferen en Imaging Pathogenese en Cording van Mycobacterium abscessus In zebravis embryos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: Leer de pathogenese van Mycobacterium abscessus bestuderen in zebravis embryo's met fluorescentiebeeldvorming. Deze methode maakt real-time observatie van infectiedynamiek en immuunrespons mogelijk voor microbiologisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zijn dankbaar K. Kissa voor nuttige discussies en voor het verstrekken van lipo-clodronaat en L. Ramakrishnan voor de gulle gift van pTEC27 en pTEC15 dat de expressie van tdTomato en Wasabi toe, respectievelijk. Dit werk maakt deel uit van de projecten van de Franse Nationale Research Agency (ZebraFlam ANR-10-MIDI-009 en DIMYVIR ANR-13-BSV3-007-01) en de Europese Gemeenschap Zevende Kaderprogramma (FP7-PEOPLE-2011-ITN) onder subsidieovereenkomst nr. PITN-GA-2011-289209 voor de Marie Curie Initial Training Network FishForPharma. We willen ook de Vereniging Gregory Lemarchal en Vaincre La Mucoviscidose (RF20130500835) bedanken voor de financiering van CM Dupont.

<ol><li>Brown-Elliott, B. A., Wallace, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+taxonomic+status+of+pathogenic+nonpigmented+or+late-pigmenting+rapidly+growing+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Clinical and taxonomic status of pathogenic nonpigmented or late-pigmenting rapidly growing mycobacteria.</a> Clinical Microbiology Reviews. 15 (4), 716-746 (2002).</li>
<li>Aitken, M. L., Limaye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+outbreak+of+Mycobacterium+abscessus+subspecies+massiliense+in+a+lung+transplant+and+cystic+fibrosis+center%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Respiratory outbreak of Mycobacterium abscessus subspecies massiliense in a lung transplant and cystic fibrosis center.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 185 (2), 231-232 (2012).</li>
<li>Gilljam, M., Lindblad, A., Ridell, M., Wold, A. E., Welinder-Olsson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+epidemiology+of+Mycobacterium+abscessus%2C+with+focus+on+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Molecular epidemiology of Mycobacterium abscessus, with focus on cystic fibrosis.</a> Journal of Clinical Microbiology. 45 (5), 1497-1504 (2007).</li>
<li>Roux, A. -L., Catherinot, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicenter+study+of+prevalence+of+nontuberculous+mycobacteria+in+patients+with+cystic+fibrosis+in+France%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Multicenter study of prevalence of nontuberculous mycobacteria in patients with cystic fibrosis in France.</a> Journal of Clinical Microbiology. 47 (12), 4124-4128 (2009).</li>
<li>Lee, M. -R., Cheng, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+infections+caused+by+Mycobacterium+abscessus+complex%3A+clinical+features+and+antimicrobial+susceptibilities+of+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">CNS infections caused by Mycobacterium abscessus complex: clinical features and antimicrobial susceptibilities of isolates.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 67 (1), 222-225 (2012).</li>
<li>Talati, N. J., Rouphael, N., Kuppalli, K., Franco-Paredes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectrum+of+CNS+disease+caused+by+rapidly+growing+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Spectrum of CNS disease caused by rapidly growing mycobacteria.</a> The Lancet Infectious Diseases. 8 (6), 390-398 (2008).</li>
<li>Medjahed, H., Gaillard, J. -L., Reyrat, J. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus%3A+a+new+player+in+the+mycobacterial+field%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus: a new player in the mycobacterial field.</a> Trends in Microbiology. 18 (3), 117-123 (2010).</li>
<li>Griffith, D. E., Girard, W. M., Wallace, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+features+of+pulmonary+disease+caused+by+rapidly+growing+mycobacteria.+An+analysis+of+154+patients%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Review+of+Respiratory+Disease%22%5BJournal%5D)">Clinical features of pulmonary disease caused by rapidly growing mycobacteria. An analysis of 154 patients.</a> The American Review of Respiratory Disease. 147 (5), 1271-1278 (1993).</li>
<li>Nessar, R., Cambau, E., Reyrat, J. M., Murray, A., Gicquel, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus%3A+a+new+antibiotic+nightmare%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus: a new antibiotic nightmare.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 67 (4), 810-818 (2012).</li>
<li>Sanguinetti, M., Ardito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+pulmonary+infection+due+to+multidrug-resistant+Mycobacterium+abscessus+a+patient+with+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Fatal pulmonary infection due to multidrug-resistant Mycobacterium abscessus a patient with cystic fibrosis.</a> Journal of Clinical Microbiology. 39 (2), 816-819 (2001).</li>
<li>Griffith, D. E., Aksamit, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+official+ATS%2FIDSA+statement%3A+diagnosis%2C+treatment%2C+and+prevention+of+nontuberculous+mycobacterial+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">An official ATS/IDSA statement: diagnosis, treatment, and prevention of nontuberculous mycobacterial diseases.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 175 (4), 367-416 (2007).</li>
<li>Howard, S. T., Rhoades, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+reversion+of+Mycobacterium+abscessus+a+smooth+to+a+rough+morphotype+is+associated+with+reduced+expression+of+glycopeptidolipid+and+reacquisition+of+an+invasive+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+%28Reading%2C+England%29%22%5BJournal%5D)">Spontaneous reversion of Mycobacterium abscessus a smooth to a rough morphotype is associated with reduced expression of glycopeptidolipid and reacquisition of an invasive phenotype.</a> Microbiology (Reading, England). 152 (Pt 6), 1581-1590 (2006).</li>
<li>Chardi, A., Olivares, F., Byrd, T. F., Julián, E., Brambilla, C., Luquin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstration+of+cord+formation+by+rough+Mycobacterium+abscessus+variants%3A+implications+for+the+clinical+microbiology+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Demonstration of cord formation by rough Mycobacterium abscessus variants: implications for the clinical microbiology laboratory.</a> Journal of Clinical Microbiology. 49 (6), 2293-2295 (2011).</li>
<li>Byrd, T. F., Lyons, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+characterization+of+a+Mycobacterium+abscessus+mutant+in+human+and+murine+models+of+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Preliminary characterization of a Mycobacterium abscessus mutant in human and murine models of infection.</a> Infection and Immunity. 67 (9), 4700-4707 (1999).</li>
<li>Catherinot, E., Clarissou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypervariance+of+a+rough+variant+of+the+Mycobacterium+abscessus+type+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Hypervariance of a rough variant of the Mycobacterium abscessus type strain.</a> Infection and Immunity. 75 (2), 1055-1058 (2007).</li>
<li>Catherinot, E., Roux, A. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+failure+involving+an+R+variant+of+Mycobacterium+abscessus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory failure involving an R variant of Mycobacterium abscessus.</a> Journal of Clinical Microbiology. 47 (1), 271-274 (2009).</li>
<li>Bernut, A., Le Moigne, V., Lesne, T., Lutfalla, G., Herrmann, J. -L., Kremer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+assessment+of+drug+efficacy+against+Mycobacterium+abscessus+using+the+embryonic+zebrafish+test+system%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">In vivo assessment of drug efficacy against Mycobacterium abscessus using the embryonic zebrafish test system.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 58 (7), 4054-4063 (2014).</li>
<li>Oh, C. -T., Moon, C., Jeong, M. S., Kwon, S. -H., Jang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+melanogaster+for+Mycobacterium+abscessus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+and+Infection+%2F+Institut+Pasteur%22%5BJournal%5D)">Drosophila melanogaster for Mycobacterium abscessus infection.</a> Microbes and Infection / Institut Pasteur. 15 (12), 788-795 (2013).</li>
<li>Bernut, A., Herrmann, J. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus+cording+prevents+phagocytosis+and+promotes+abscess+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus cording prevents phagocytosis and promotes abscess formation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (10), E943-E952 (2014).</li>
<li>Dubée, V., Bernut, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Lactamase+inhibition+by+avibactam+in+Mycobacterium+abscessus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">β-Lactamase inhibition by avibactam in Mycobacterium abscessus.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 70 (4), 1051-1058 (2015).</li>
<li>Torraca, V., Masud, S., Spaink, H. P., Meijer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-pathogen+interactions+in+infectious+diseases%3A+new+therapeutic+insights+from+the+zebrafish+host+model%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Macrophage-pathogen interactions in infectious diseases: new therapeutic insights from the zebrafish host model.</a> Disease Models Mechanisms. 7 (7), 785-797 (2014).</li>
<li>Alibaud, L., Rombouts, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mycobacterium+marinum+TesA+mutant+defective+for+major+cell+wall-associated+lipids+is+highly+attenuated+in+Dictyostelium+discoideum+and+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A Mycobacterium marinum TesA mutant defective for major cell wall-associated lipids is highly attenuated in Dictyostelium discoideum and zebrafish embryos.</a> Molecular Microbiology. 80 (4), 919-934 (2011).</li>
<li>Clay, H., Volkman, H. E., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+necrosis+factor+signaling+mediates+resistance+to+mycobacteria+by+inhibiting+bacterial+growth+and+macrophage+death%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Tumor necrosis factor signaling mediates resistance to mycobacteria by inhibiting bacterial growth and macrophage death.</a> Immunity. 29 (2), 283-294 (2008).</li>
<li>Palha, N., Guivel-Benhassine, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+whole-body+visualization+of+Chikungunya+Virus+infection+and+host+interferon+response+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+pathogens%22%5BJournal%5D)">Real-time whole-body visualization of Chikungunya Virus infection and host interferon response in zebrafish.</a> PLoS pathogens. 9 (9), e1003619(2013).</li>
<li>Mostowy, S., Boucontet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+as+a+new+model+for+the+in+vivo+study+of+Shigella+flexneri+with+phagocytes+and+bacterial+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+pathogens%22%5BJournal%5D)">The zebrafish as a new model for the in vivo study of Shigella flexneri with phagocytes and bacterial autophagy.</a> PLoS pathogens. 9 (9), e1003588(2013).</li>
<li>Prajsnar, T. K., Cunliffe, V. T., Foster, S. J., Renshaw, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+vertebrate+model+of+Staphylococcus+aureus+reveals+phagocyte-dependent+resistance+of+zebrafish+to+non-host+specialized+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A novel vertebrate model of Staphylococcus aureus reveals phagocyte-dependent resistance of zebrafish to non-host specialized pathogens.</a> Cellular Microbiology. 10 (11), 2312-2325 (2008).</li>
<li>Van der Sar, A. M., Appelmelk, B. J., Vandenbroucke-Grauls, C. M. J. E., Bitter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+star+with+stripes%3A+zebrafish+as+an+infection+model%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A star with stripes: zebrafish as an infection model.</a> Trends in Microbiology. 12 (10), 451-457 (2004).</li>
<li>Vergunst, A. C., Meijer, A. H., Renshaw, S. A., O’Callaghan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Burkholderia+cenocepacia+creates+an+intramacrophage+replication+niche+in+zebrafish+embryos%2C+followed+by+bacterial+dissemination+and+establishment+of+systemic+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Burkholderia cenocepacia creates an intramacrophage replication niche in zebrafish embryos, followed by bacterial dissemination and establishment of systemic infection.</a> Infection and Immunity. 78 (4), 1495-1508 (2010).</li>
<li>Levraud, J. -P., Disson, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+observation+of+Listeria+monocytogenes-phagocyte+interactions+in+living+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time observation of Listeria monocytogenes-phagocyte interactions in living zebrafish larvae.</a> Infection and Immunity. 77 (9), 3651-3660 (2009).</li>
<li>Meijer, A. H., Spaink, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host-pathogen+interactions+made+transparent+with+the+zebrafish+model%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.</a> Current Drug Targets. 12 (7), 1000-1017 (2011).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterfield%2C+M+%22The+Zebrafish+Book%3A+A+Guide+for+the+Laboratory+Use+of+Zebrafish+%28Danio+Rerio%29%22">The Zebrafish Book: A Guide for the Laboratory Use of Zebrafish (Danio Rerio)</a>. , (2007).</li>
<li>Benard, E. L., van der Sar, A. M., Ellett, F., Lieschke, G. J., Spaink, H. P., Meijer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection+of+zebrafish+embryos+with+intracellular+bacterial+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens.</a> Journal of Visualized Experiments. (61), e3781(2012).</li>
<li>Van Rooijen, N., Sanders, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liposome+mediated+depletion+of+macrophages%3A+mechanism+of+action%2C+preparation+of+liposomes+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Liposome mediated depletion of macrophages: mechanism of action, preparation of liposomes and applications.</a> Journal of Immunological Methods. 174 (1-2), 83-93 (1994).</li>
<li>Adams, K. N., Takaki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+tolerance+in+replicating+mycobacteria+mediated+by+a+macrophage-induced+efflux+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Drug tolerance in replicating mycobacteria mediated by a macrophage-induced efflux mechanism.</a> Cell. 145 (1), 39-53 (2011).</li>
<li>Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+within+the+zebrafish+to+understand+the+tuberculous+granuloma%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Experimental+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Looking within the zebrafish to understand the tuberculous granuloma.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 783, 251-266 (2013).</li>
<li>Davis, J. M., Clay, H., Lewis, J. L., Ghori, N., Herbomel, P., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+visualization+of+Mycobacterium-macrophage+interactions+leading+to+initiation+of+granuloma+formation+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time visualization of Mycobacterium-macrophage interactions leading to initiation of granuloma formation in zebrafish embryos.</a> Immunity. 17 (6), 693-702 (2002).</li>
<li>Lamason, R. L., Mohideen, M. -A. P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SLC24A5%2C+a+putative+cation+exchanger%2C+affects+pigmentation+in+zebrafish+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%28New+York%2C+NY%29%22%5BJournal%5D)">SLC24A5, a putative cation exchanger, affects pigmentation in zebrafish and humans.</a> Science (New York, NY). 310 (5755), 1782-1786 (2005).</li>
<li>Renshaw, S. A., Loynes, C. A., Trushell, D. M. I., Elworthy, S., Ingham, P. W., Whyte, M. K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transgenic+zebrafish+model+of+neutrophilic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A transgenic zebrafish model of neutrophilic inflammation.</a> Blood. 108 (13), 3976-3978 (2006).</li>
<li>Hall, C., Flores, M. V., Storm, T., Crosier, K., Crosier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+lysozyme+C+promoter+drives+myeloid-specific+expression+in+transgenic+fish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+developmental+biology%22%5BJournal%5D)">The zebrafish lysozyme C promoter drives myeloid-specific expression in transgenic fish.</a> BMC developmental biology. 7, 42(2007).</li>
<li>Takaki, K., Davis, J. M., Winglee, K., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+pathogenesis+and+treatment+of+Mycobacterium+marinum+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the pathogenesis and treatment of Mycobacterium marinum in zebrafish.</a> Nature Protocols. 8 (6), 1114-1124 (2013).</li>
<li>Stoop, E. J. M., Schipper, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+embryo+screen+for+mycobacterial+genes+involved+in+the+initiation+of+granuloma+formation+reveals+a+newly+identified+ESX-1+component%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component.</a> Disease Models Mechanisms. 4 (4), 526-536 (2011).</li>
<li>Carvalho, R., de Sonneville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+screen+for+tuberculosis+progression%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">A high-throughput screen for tuberculosis progression.</a> PloS One. 6 (2), e16779(2011).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

De zebravis is recentelijk naar voren gekomen als een uitstekend vertebrate modelsysteem voor het bestuderen van de dynamica van bacteriële infectie met behulp van groot veld en confocale beeldvorming in real-time 36. De combinatie van verspreide mycobacteriële schorsingen (protocol 2.2) samen met micro-injectie methoden (protocol 4) maakt reproduceerbare systemische infecties, en de daaropvolgende monitoring en visualisatie van de progressie van de infectie met een speciale focus op de bacteriële interacties...

Mycobacterium abscessus is een opkomende ziekteverwekker die een breed spectrum van klinische ziektebeelden bij de mens veroorzaakt. Deze omvatten cutane infecties alsook ernstige chronische longinfecties, meestal aangetroffen in een verzwakt immuunsysteem en bij patiënten met cystische fibrose 1,2,3,4. M. abscessus wordt ook beschouwd als een belangrijke snelgroeiende mycobacteriële species belast en iatrogene nosocomiale infecties bij mensen. Bovendien is een aantal recente rapporten gewezen op de mogelijkheid dat M. abscessus kan de bloed-hersenbarrière en induceert belangrijke laesies in het centrale zenuwstelsel (CZS) 5,6. Ondanks dat het een snelle groeier, M. abscessus vertoont ook verschillende pathogene functies die samenhangen met die van Mycobacterium tuberculosis, zoals het vermogen om te zwijgen jaren binnen granulomateuze structuren en kaasachtige laesies in de longen 7 genereren. Meer verontrustend is de lage senligheid van M. abscessus antibiotica, waardoor deze infecties zeer moeilijk te behandelen leidt tot een significant therapeutisch uitvalpercentage 8,9. Het belangrijkste gevaar van deze soort is vooral de intrinsieke resistentie tegen antibiotica, die van groot belang in openbare gezondheidsinstellingen 10 en een contra longtransplantatie 11. M. abscessus displays glad (S) of ruwe (R) kolonie morfotypen die leiden tot verschillende klinische resultaten. In tegenstelling tot de stam S, R bacteriën de neiging om begin tot eind groeien, waardoor een touw of koord structuur 12,13. Verschillende onafhankelijke studies op basis van hetzij cellen of diermodellen bleek de hyper-virulentie fenotype van de R morfotype 14,15. Uit epidemiologische studies, de ernstigste gevallen van M. abscessus longinfecties lijken geassocieerd te zijn met R varianten 16 de enige variant dieis gezien te blijven voor de komende jaren in een geïnfecteerde gastheer 3. De morfotype verschil is gebaseerd op de aanwezigheid (in S) of verlies (in R) van oppervlakte geassocieerd glycopeptidolipids (GPL) 12. Vanwege de inherente beperkingen van de momenteel beschikbare cellulaire / diermodellen gebruikt om M. studeren abscessus infectie, onze kennis over de pathofysiologische gebeurtenissen van de R- of S-varianten blijft onduidelijk. Infectie van immuno-competente muizen via een intraveneuze of aerosol routes leidt tot kortstondige kolonisatie, belemmeren het gebruik van muizen om hardnekkige infecties en voor in vivo drug gevoeligheid testen 17 bestuderen. Daarom ontwikkelen diermodellen vatbaar voor de manipulatie van de gastheer respons is een grote uitdaging. In deze context, niet- zoogdierlijke modellen van infectie zijn recent ontwikkeld, inclusief Drosophila melanogaster 18 dat verscheidene voordelen zoals kosten, snelheid en ethische aanvaardbaarheid o aanbiedingenVER de muismodel. De zebravis (Danio rerio) model van de infectie is ook onderzocht om te visualiseren, door niet-invasieve beeldvorming, de voortgang en de chronologie van M. abscessus infectie bij een levend dier 19. Belangrijk is dat een proof of concept ook opgericht om de geschiktheid te tonen voor in vivo antibiotica assessments tegen M. abscessus 17,20. De zebravis zijn op grote schaal gebruikt in de laatste twee decennia de interacties tussen verschillende pathogenen en immuunsysteem van de gastheer 21 bestuderen. Het toenemende succes van deze alternatieve gewervelde model is gebaseerd op de grote en unieke mogelijkheden die gemotiveerd en gevalideerd het gebruik ervan voor een beter begrip van een groot aantal virale en bacteriële infecties 19,22,23,24,25,26,27,28,29. In tegenstelling tot de meeste andere diermodellen zebravis embryo&#39;s optisch transparant, zodat niet-invasieve fluorescentiebeeldvorming 30. Deze has leidde tot M. studeren abscessus besmet zebravis embryo&#39;s met een ongekende gegevens, met als hoogtepunt de beschrijving van extracellulaire cording, dat een voorbeeld van bacteriële morfologische plasticiteit vertegenwoordigen. Cording vertegenwoordigt een nieuw mechanisme van ondermijning van het immuunsysteem en een sleutelmechanisme bevorderen pathogenese van acute M. abscessus infectie 19. Dit rapport beschrijft de nieuwe instrumenten en methoden met behulp van de zebravis embryo naar de pathofysiologische eigenschappen van M. ontcijferen abscessus infectie en de intieme interactie tussen de bacillen en het aangeboren immuunsysteem bestuderen. Eerst wordt een gedetailleerde micro-injectie protocol dat de verwerking van het bacteriële inoculum, embryo voorbereiding en besmetting zodanig omvat, wordt gepresenteerd. Methoden specifiek aangepast aan M. beoordelen abscessus virulentie door het meten van diverse parameters, zoals de gastheer overleving en bacteriële belasting, worden gepresenteerd. Speciale aandacht wordt gegeven over hoete controleren, op een tijdruimtelijke niveau, het lot en de progressie van de infectie en de gastheer immuunrespons op M. abscessus met behulp van video-microscopie. Bovendien is de bijdrage en de rol van macrofagen tijdens M. onderzoeken abscessus infectie werkwijzen macrofagen-verarmde embryo (via genetically- of chemisch-gebaseerde aanpak) worden beschreven genereren. Tenslotte protocollen bij de specifieke interacties met macrofagen of neutrofielen met behulp van een vaste of levende embryo&#39;s worden gedocumenteerd visualiseren. Het doel van dit rapport is om verder onderzoek te stimuleren om nieuw licht te werpen in M. abscessus virulentie mechanismen en met name de rol van cording in de oprichting van een acute en ongecontroleerde infectie proces.

<table><tbody><tr><td>BBL MGIT PANTA</td><td>BD Biosciences</td><td>245114</td><td></td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin&nbsp;</td><td>Euromedex</td><td>04-100-811-E</td><td></td></tr><tr><td>Catalase from Bovine Liver&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C40</td><td></td></tr><tr><td>Difco Middlebrook 7H10 Agar</td><td>BD Biosciences</td><td>262710</td><td></td></tr><tr><td>Difco Middlebrook 7H9 Broth</td><td>BD Biosciences</td><td>271310</td><td></td></tr><tr><td>Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt (Tricaine)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5040</td><td></td></tr><tr><td>Oleic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O1008</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Delta Microscopie</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>Phenol Red</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>319244</td><td></td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4780</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Gibco Life Technologie</td><td>30391-023</td><td></td></tr><tr><td>Low melting agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Instant Ocean Sea Salts&nbsp;</td><td>Aquarium Systems Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Borosilicate glass capillaries&nbsp;</td><td>Sutter instrument Inc</td><td>BF100-78-10</td><td>1 mm O.D. X 0.78 mm I.D.</td></tr><tr><td>Micropipette puller device&nbsp;</td><td>Sutter Instrument Inc</td><td></td><td>Flamming/Brown Micropipette Puller p-87</td></tr><tr><td>Microinjector</td><td>Tritech Research&nbsp;</td><td></td><td>Digital microINJECTOR, MINJ-D</td></tr><tr><td>Tweezers</td><td>Sciences Tools inc</td><td></td><td>Dumont # M5S&nbsp;</td></tr><tr><td>Microloader Tips</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ontcijferen en imaging pathogenese en cording van<em&gt; mycobacterium abscessus</em&gt; in zebravis embryo&#39;s

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Zebrafish (Danio rerio) embryo's worden steeds vaker gebruikt als infectiemodel om de functie van het aangeboren immuunsysteem van gewervelde dieren in host-pathogeen interacties te bestuderen. De eenvoud van het verkrijgen van grote aantallen embryo's, hun toegankelijkheid door externe ontwikkeling, hun optische transparantie, evenals de beschikbaarheid van een breed scala aan genetische/immunologische hulpmiddelen en collecties van transgene reporter lijnen, dragen bij aan de veelzijdigheid van dit model. In dit opzicht beschrijft het huidige manuscript het gebruik van zebrafish als een in vivo modelsysteem om de chronologie van Mycobacterium abscessus infectie te onderzoeken. Deze humane ziekteverwekker kan bestaan als gladde (S) of ruwe (R) varianten, afhankelijk van de samenstelling van de celwand, en hun respectieve virulentie kan worden afgebeeld en vergeleken in zebrafish embryo's en larven. Micro-injectie van gladde of ruwe fluorescente varianten rechtstreeks in de bloedcirculatie via de caudale ader, leidt respectievelijk tot chronische of acute/dodelijke infecties. Dit biologische systeem maakt hoge resolutie visualisatie en analyse mogelijk van de rol van mycobacteriële koordvorming bij het bevorderen van abscessvorming. Bovendien biedt het gebruik van fluorescente bacteriën samen met transgene zebravislijnen die fluorescente macrofagen bevatten, een unieke gelegenheid voor multi-kleurige beeldvorming van host-pathogeen interacties. Dit artikel beschrijft gedetailleerde protocollen voor de bereiding van homogeen M. abscessus inoculum en voor intraveneuze injectie van zebravis embryo's voor daaropvolgende fluoresceine beeldvorming van de interactie met macrofagen. Deze technieken openen de weg naar toekomstig onderzoek met mutanten die defect zijn in koordvorming en zijn gewijd aan het begrijpen hoe dit de M. abscessus pathogeniteit in een volledig gewervelde dier beïnvloedt.

Hoewel verschillende anatomische sites kunnen worden geïnjecteerd 32 worden staartader injecties vaak gebruikt om systemische infectie voor latere analyses, waaronder de overleving experimenten, bacteriële last vastberadenheid, fagocytose activiteit of koord formatie genereren. Injecties in de staart spieren worden gebruikt om de rekrutering van macrofagen beoordeeld op de plaats van injectie (figuur 3A). Onderzoeken en vergelijk de virulentie van R- en S varianten van M. abscessus w...

Optisch transparante zebravis embryo's worden veel gebruikt om in realtime de interacties tussen pathogene micro-organismen en de aangeboren immuuncellen te bestuderen en te visualiseren. Micro-injectie van Mycobacterium abscessus, gecombineerd met fluorescentiebeeldvorming, wordt gebruikt om essentiële pathogene kenmerken zoals koordvorming in zebravis embryo's te onderzoeken.

Ontcijferen en Imaging Pathogenese en Cording van<em&gt; Mycobacterium abscessus</em&gt; In zebravis embryo&#39;s

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as an infection model to study the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Het algemene doel van deze procedure is om de virulentie van Mycobacterium abscessus-stammen te bestuderen en te vergelijken, en om de interacties tussen deze bacteriën en het aangeborene immuunsysteem van de gastheer in vivo te beschrijven met behulp van transparante zebravissenembryo's. Dit wordt bereikt door eerst een homogeen bacterieel inoculum voor te bereiden. Vervolgens worden de embryo's 30 uur na bevruchting intraveneus geïnjecteerd met de bacteriële suspensies.Daarnaast wordt, om de rol van macrofagen bij de infectiebeheersing preciezer te bestuderen, een injectieprocedure op basis van lipochoaat gebruikt om embryo's te genereren die ontdaan zijn van macrofagen. Ten slotte worden de geïnfecteerde embryo's geprepareerd en afgebeeld met behulp van fluorescentie- en confocale microscopie om de progressie van de infectie te monitoren. De resultaten die hiermee behaald kunnen worden, tonen de specifieke interacties tussen de fluorescente fagocytaire cellen en M abscessus, zowel als individuele bacilli als in serpentijnvormige koorden binnen een transparant embryo.Het belangrijkste voordeel van het gebruik van zebravissen boven andere diermodellen zoals muizen is dat het mogelijk maakt om het infectieproces specifiek in real-time te onderzoeken en de specifieke interacties tussen Mycobacterium abscessus en macrofagen of neutrofielen in beeld te brengen. Deze stap is een kritiek punt voor de daaropvolgende injectiedruk in zebravissen. Vanwege de hoge neiging van Mycobacterium abscessus om grote aggregaten te vormen en biofilms te produceren, is daarom een specifieke behandeling noodzakelijk om homogene en kwantitatief gecontroleerde inocula voor te bereiden voorafgaand aan de micro-injectie.Om m abscessus voor te bereiden, inoculeer oogst exponentieel groeiende culturen uit weefselkweekflesjes van 150 vierkante centimeter in steriele plastic buizen van 50 milliliter en centrifugeer deze bij 4.000 ×g en kamertemperatuur gedurende 15 minuten. Gebruik één milliliter Middlebrook 7H9, aangevuld met OADC-verrijking plus tween 80, hierna aangeduid als 7H9-medium, om de pellet te resuspenderen en aliquotten te maken. Verdeel 200 µL van de bacteriële suspensies in 1,5 milliliter buizen met een naald van 26 gauge; homogeniseer elke aliquot van de bacteriële suspensie 15 keer.Soniceren vervolgens drie keer gedurende 10 seconden met tussenpauzes van tien seconden in een waterbad. Voeg tussentijds één milliliter 7H9-medium toe, vortex kort en centrifugeer vervolgens bij 100 ×g gedurende drie minuten. Verzamel zorgvuldig de supernatants die mycobacteriën bevatten om klontvorming te vermijden en breng de homogene suspensies over in een steriele plastic buis van 50 milliliter.Centrifugeer de suspensie bij 4.000 ×g gedurende vijf minuten en gebruik 200 µL 7H9-medium om het pellet te resuspenderen en bepaal de uiteindelijke bacteriële inoculum. Volgens het tekstprotocol is de visuele demonstratie van deze methode essentieel, aangezien de stappen moeilijk aan te leren zijn omdat de nauwkeurige, voorzichtige manipulatie van de injectie in zebravissenembryo's onder de microscoop, evenals het beheersen van de microinjectietechniek, tijd vereist. Om microinjectie van M. abscessus uit te voeren op ongeveer 24 uur post-fertilisatie (hpf), gebruik dan een pincet om de embryo's in een 100 mm petrischaal te plaatsen en houd deze op 28,5 °C.Breng 30 embryo's van 48 HPF over naar een V-vormige positioneringskamer gevuld met 25 milliliter viswater met 270 milligram per liter trica met behulp van een ingeknipte micro loader-tip. Plaats de embryo's correct in de kanalen voor een eenvoudigere manipulatie. Gebruik PBST met 0,05% tussen 80 om het microbiële inoculum te verdunnen tot de gewenste CFU die moet worden toegediend, en voeg 10% fenolrood toe om de correcte injectie met een micro loader-tip te controleren.Vul een microinjectienaald met vijf tot 10 µL van het bacteriële inoculum. Bevestig de microinjectienaald in de houder van een micromanipulator die is aangesloten op de injector, en gebruik een fijne pincet om de top van de naald af te breken om een openingsdiameter van vijf tot 10 µm te verkrijgen.Kalibreer het injectievolume door de micro-injectiedruk en de tijd aan te passen. Meet vervolgens de diameter van een druppel die in het eigeel van één embryo wordt gespoten om het vereiste injectievolume te bepalen voor micro-injectie in de ductus caudalis. Positioneer het embryo met de ventrale zijde naar de naald toe en plaats de naaldpunt dicht bij de urogenitale opening.Duw de naaldpunt voorzichtig in het embryo tot deze net de regio van de ductus sinus pericardii doorboort. Dien vervolgens het gewenste volume bacteriële suspensie toe, gewoonlijk één tot drie nanoliter met ongeveer 100 CFU per nanoliter. Incubeer en monitor de embryo's volgens het tekstprotocol om lipo Choate uit te voeren, macrofagen te depleteren en embryo's na 24 hpf te beoordelen. Haal de embryo's eruit en breng ze over naar een injectieschaaltje gevuld met viswater met tricaine.Richt ze vervolgens zo dat de dorsale zijde naar beneden wijst. Nadat de liposoom-ingekapselde clodronaatoplossing is gevortext, vult u de microcapillaire naald en kalibreert u het injectievolume. Doorboor het gebied van de vena caudalis zoals eerder gedemonstreerd en injecteer twee tot drie microliters van de oplossing.Herhaal de injectie drie keer. Incubeer de embryo's bij 28,5 °C en gebruik fluorescentiemicroscopie om de correcte deplete van macrofagen te controleren vóór de infectie. Zoals eerder in deze video gedemonstreerd, om colony forming units of CFU's te tellen op het gewenste tijdstip.Verzamel vijf embryo's per infectieconditie en breng elk embryo over naar een microcentrifugebuisje van 1,5 milliliter. Cryo-anestheseer de embryo's door ze 10 minuten op ijs te incuberen, nadat de embryo's zijn geëuthanaseerd met 300 tot 500 milligram per liter Trica. Gebruik steriel water om de embryo's tweemaal te wassen in een nieuw buisje.Verwijder vervolgens het water met 2% Triton X 100 in 1X PBS uit elk embryo en gebruik een naald van 26 gauge om het weefsel te homogeniseren voor een volledige lysis. Resuspendeer na centrifugatie van de suspensie de pellet in 1X PBST. Plaat daarna seriële verdunningen van het homogenisaat op Middlebrook 7H10 OADC.Suppleer met B-B-L-M-G-I-T Panta en incubeer de platen gedurende vier dagen bij 30 °C voordat de kolonies worden geteld voor live imaging van M abscessus-infectie; monteer getrica-geanestheseerde embryo's in 1% low melting point agarose in een glazen Petri-schaal van 35 millimeter met een glazen bodem voor een omgekeerde microscoop of op een single cavity depression slide voor rechtopstaande confocale microscopie. Orienteer het embryo in de gewenste positie en bedek de gestolde agarose met viswater met trica voor fixed imaging van M abscessus-infectie. Na het euthanaseren van de embryo's worden deze overgebracht naar 1,5 milliliter microcentrifugebuisjes en gefixeerd in 4% paraformaldehyde in 1X PBS-T gedurende twee uur.Verwijder bij kamertemperatuur het paraformaldehyde door de embryo's tweemaal 10 minuten te wassen met 1X PBST om de integriteit van de weefsels en de fluorescentie opeenvolgend te behouden. Incubeer de embryo's gedurende 10 minuten per conditie in glyceroloplossingen met een toenemende concentratie. Plaats het embryo, ingebed in 50% glycerol, in een observatiekamer.Gebruik tenslotte een fluorescentiemicroscoop met een 10x objectief of een confocale fluorescentiemicroscoop met 40x of 63x objectieven voor sequentiële fluorescentieacquisitie en transmissiebeeldvorming van het embryo. Om de virulentie van ruwe en gladde M. abscessus-varianten te onderzoeken en te vergelijken, werden fluorescente bacteriën intraveneus geïnjecteerd in 30 HPFC-competente embryo's. In tegenstelling tot de gladde variant induceert de ruwe variant een robuustere en dodelijkere infectie met de ontwikkeling van abcessen binnen het centraal zenuwstelsel.Verschillen in virulentie werden gekwantificeerd door ofwel de CFU te tellen, of door het bepalen van de fluorescente pixelcounts, die met elkaar correleren. Dit wijst op hogere bacteriële ladingen voor de ruwe variant. Zoals in deze figuur te zien is, kunnen de kinetieken van koordvorming op een niet-invasieve manier worden gemonitord en vastgelegd via videomicroscopie, wat de neiging van de ruwe variant tot extracellulaire replicatie aantoont, zoals hier wordt getoond. Infectie van embryo's die ontdaan zijn van macrofagen met de ruwe M. abscessus leidt tot een massale toename van de bacteriële ladingen en koordproductie en tot een snelle sterfte van de larven.Dit geeft duidelijk aan dat macrofagen nodig zijn om de M. abscessus-infectie te beheersen en om de interacties tussen macrofagen en M. abscessus in real-time te observeren. De EG one M cherry transgene lijn, die rode fluorescerende macrofagen produceert, kan hiervoor worden gebruikt. Infecties induceren een duidelijke rekrutering van macrofagen met efficiënte fagocytose van individuele bacteriën, terwijl mycobacteriële koorden een strategie vormen die door M. abscessus is ontwikkeld om fagocytose na hun ontwikkeling te vermijden.Deze techniek maakte de weg vrij om de belangrijke rol van codering als een nieuw mechanisme van immuunontwijking te onderzoeken. Dankzij het zebravissenmodel voor infectie is het nu mogelijk om de in vivo bijdrage van codes aan de pathogenese van Mycobacterium abscessus te observeren en te beschrijven.

deciphering-imaging-pathogenesis-cording-mycobacterium-abscessus

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Transparante zebravis embryo's hebben hun nut bewezen model hosts te visualiseren en functioneel onderzoek naar interacties tussen aangeboren immuunsysteem cellen en intracellulaire bacteriële pathogenen,...

Infectie van zebravis embryo&#39;s met intracellulaire bacteriële pathogenen

De snelle ontwikkeling, de kleine oppervlakte en de transparantie van de zebravis zijn enorme voordelen voor de studie van aangeboren immuunsysteem controle op...

Niet-invasieve beeldvorming van gedissemineerde candidiasis in de zebravis Larven

Deze video beschrijft een micro-injection methode voor de levering van borstkankercellen in de perivitelline ruimte van transgene zebravis embryo's. Na incubatie visualiseren we het embryo onder een fluorescerende microscoop om kankercelinvasie, verspreiding en metastase te observeren.

zPDX-analyse van invasiviteit: onderzoek naar invasief gedrag van gemetastaseerde kankercellen in zebravisembryo xenografts

Source: Zhang, X., et al. A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates fluorescence imaging of zebrafish embryos injected with Staphylococcus aureus, enabling quantification of infection progression and bacterial distribution to assess the impact of biomaterial microspheres on host-pathogen interactions in vivo.

 Fluorescence Imaging of Biomaterial-Associated Bacterial Infection in Zebrafish Embryos

Source: Niu, L., et al. Visualization of Macrophage Lytic Cell Death During Mycobacterial Infection in Zebrafish Embryos via Intravital Microscopy. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates the use of intravital confocal microscopy to visualize macrophage lytic cell death in zebrafish embryos following Mycobacterium marinum infection.

Live Imaging of Macrophage Cell Death During Mycobacterial Infection in Zebrafish Embryos

Source: Bernut, A., et al., Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates a protocol for isolating and quantifying Mycobacterium abscessus from an infected zebrafish embryo. The procedure involves embryo euthanasia, tissue lysis, and homogenization to release the bacteria, followed by centrifugation and resuspension in a surfactant buffer. Finally, the bacterial suspension is serially diluted, plated...

Isolation and Cultivation of Bacteria from Zebrafish Embryos to Assess Infection Load

Source: Bernut, A., et al. Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos. J. Vis. Exp. (2015)This video demonstrates a protocol that uses transgenic zebrafish embryos expressing fluorescent macrophages and infected with fluorescent Mycobacterium abscessus rough strain to visualize host-pathogen interactions. It reveals how extracellular cording enables immune evasion, promoting bacterial survival and host cell damage.

Live Imaging of Host-Pathogen Interactions in Zebrafish Embryos Infected with Mycobacterium abscessus

Beeldvorming van cerebrovasculaire ontwikkeling in larvale zebravis wordt beschreven. Technieken om 3D-beeldvorming te vergemakkelijken en het gebruik van chemische behandelingen cerebrovasculaire ontwikkeling passen zijn ook aanwezig.

Imaging en 3D Reconstructie van cerebrovasculair Structuren in embryonale zebravis

Het in beeld brengen van het dynamisch gedrag van organellen en andere subcellulaire structuren in vivo kan licht werpen op hun functie in fysiologische en ziektecondities. Hier presenteren we methoden voor het genetisch markeren van twee organellen, centrosomen en mitochondriën, en het in beeld brengen van hun dynamiek in levende zebravis-embryo's met behulp van breedveld- en confocale microscopie.

Beeldvorming Subcellulaire Structuren in het Living zebravis embryo

De huidige studie beschrijft een zebravis embryo model voor in vivo visualisatie en intravital analyse van biomaterial-geassocieerde infectie na verloop van tijd op basis van fluorescentie microscopie. Dit model is een veelbelovende aanvulling op zoogdieren dierlijke modellen zoals Muismodellen voor het bestuderen van de biomaterial-geassocieerde infecties in vivo.

Een zebravis Embryo Model voor In Vivo visualisatie en Intravital analyse van Biomaterial-geassocieerde goudhoudende Stafylokok infectie

Dit protocol beschrijft een techniek voor het visualiseren van macrofaag gedrag en overlijden in embryonale zebravis tijdens infectie met Mycobacterium de . Stappen voor de bereiding van bacteriën, infectie van de embryo's, en intravital microscopie zijn opgenomen. Deze techniek kan worden toegepast op de observatie van cellulaire gedrag en overlijden in soortgelijke scenario's met betrekking tot infectie of steriele ontsteking.

Visualisatie van macrofaag lytische celdood tijdens mycobacteriële infectie in zebravis-embryo's via Intravital microscopie

Leer de pathogenese van Mycobacterium abscessus bestuderen in zebravis embryo's met fluorescentiebeeldvorming. Deze methode maakt real-time observatie van infectiedynamiek en immuunrespons mogelijk voor microbiologisch onderzoek.

Ontcijferen en Imaging Pathogenese en Cording van

Meer video's verkennen