Name: Chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie en beoordeling van rechter ventrikel functie in de Piglet (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: Ontdek een biggenmodel voor chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie om rechterventrikeldisfunctie te bestuderen. Deze methode omvat pulmonale arterie-ligatie en echocardiografie voor cardiovasculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs danken het team van het Laboratorium voor Surgical Research, Marie Lannelongue Ziekenhuis, voor technische bijstand en verzorging van dieren. De VividE9 cardiale ultrasound systeem (General Electric Medical System) werd gefinancierd door een subsidie ​​van de cardio-vasculaire-Obésité Domaine D&#39;Intérêt Majeur (CODDIM kabeljauw 100.158, RégionIle-de-France, Frankrijk).

Dit protocol werd goedgekeurd door de lokale ethische commissie op de dierproeven en de Institutionele Commissie Dierenwelzijn van onze instelling. Alle dieren kregen humane zorg in overeenstemming met de &quot;Principles of Laboratory Animal Care&quot; opgesteld door de National Society for Medical Research en de &quot;Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren&quot; opgesteld door het Institute of Laboratory Animal Resources en gepubliceerd door de National Institutes of Health (NIH Publication No. 86-23, herzien 1996). Algemene beschouwingen: Alle dieren moeten met respect worden behandeld, volgens de 3 V&#39;s regels (Nationaal Centrum voor vervanging verfijning en vermindering van de dieren in het onderzoek). Chirurgische procedures moeten worden uitgevoerd met een streng steriliteit en op dezelfde manier als voor de mens. Alle medische hulpmiddelen moeten steriel zijn. 1. Anesthesie Protocol OPMERKING: Grote White biggen met een gewicht van 20 kg (3 weken oud) werden gebruikt. Pulmonale Hypertensie werd progressief geïnduceerd. De eerste stap die betrokken zijn een linker longslagader (PA) ligatie door middel van een linker thoracotomie. Volgende stappen bestond uit het uitvoeren van de wekelijkse PA embolisaties gedurende 5 weken. Alle procedures werden uitgevoerd onder algemene verdoving. <ol><li> Niet voeren van de dieren 12 uur voor de procedure. </li><li> Doe een premedicatie van de biggen, voeren een intramusculaire injectie via 30 mg / kg ketamine hydrochloride en aropine 0,05 mg / kg in de nekspieren, 30 min vóór de procedure. 8 </li><li> Wanneer het varken wordt verdoofd, plaatst u een katheter in het oor ader. </li><li> Voer een intraveneuze bolus van fentanyl (0,005 mg / kg) en propofol (2 mg / kg) voor intubatie. Injecteer intraveneus in de oorader Cisatracurium (0,3 mg / kg) en intuberen het varken (niet-selectieve intubatie met een 7 French probe) 9. </li><li> Plaats continue monitoring apparaten op de big: continue EKG, Expiratoire CO 2 en oxymetrie 8,9. Plaats een fluïdum veld arteriële katheter door de halsslagader echografie onder begeleiding van de systemische arteriële druk 10/08 controleren. </li><li> Neem algemene anesthesie met isofluraan (2%) bij 100% zuurstof supplement, continue intraveneuze infusie van fentanyl (0,004 mg / kg) en propofol (3 mg / kg). </li><li> Voeg een antibioprophylaxy een injectie met Cefatoxine (1 g) en gentamycine (80 mg). </li><li> Voorkom intra operatieve en post-operatieve pijn bij injectie van nalbufine (0,01 mg / kg) tid </li><li> Controleer elke 15 min de volledigheid van de anesthesie: gebrek aan beweging, stabiele hartslag, bloeddruk, zuurstof. </li><li> Het gebruik van vet zalf op ogen drooggedampt terwijl onder narcose voorkomen. </li></ol> 2. Ligatie van de Linkse longslagader <ol><li> Installeer de biggen in de linker kant liggende positie, scheren de operatieve gebied en desinfecteren van de huid met een Alcoholic oplossing. Gebruik een plaatselijk steriel veld. </li><li> Open de kist door een kleine linker laterale thoracotomie (5-10 cm) in de ruimte de 4 e intercostals &#39;. Ga niet naar achter het uiteinde van het schouderblad. Trekken de long in de richting van het membraan voorzichtig. </li><li> Zodra ideale chirurgische venster ligt, trek de linker azygos ader en ontleden de belangrijkste linker longslagader voordat koppelverkoop met een niet-absorbeerbare 2/0 zijde. NB: Het is zeer belangrijk het hartzakje niet te openen. </li><li> Sluit de borst laag na laag met absorbeerbare hechtingen. Gebruik een kist buis naar de postoperatieve pneumothorax verwijderen. Verwijder de borst buis net na de big extubatie. </li></ol> 3. embolisatie van de rechter onderste Lobe longslagader <ol><li> Na de algemene anesthesie, zet de biggen in een liggende positie. Het uitvoeren van een continue monitoring van de oxymetrie, expiratoire CO 2, EKG, bedoel systemische bloeddruk (MPA) en de gemiddelde pulmonale arteriële druk (mPAP) Tijdens de gehele procedure. </li><li> Plaats alle katheters percutane met echografische begeleiding. Plaats een arteriële 6 French katheter in de halsslagader voor bloeddrukmeting en een 8 French sheath in de superior vena cava via de halsader (Voer de punctie 2 cm boven de suprasternal inkeping met een 45 ° hoek richting). </li><li> Onder fluoroscopische begeleiding, plaatst, via de 8 Fr mantel, een 5 Franse angiografiekatheter in de rechter longslagader. Het uiteinde van de katheter moet in een gesegmenteerde onderkwab longslagader. </li><li> Bereid het materiaal voor pulmonaire embolisatie: 1 ml van zacht weefsel lijm die N-butyl-2-cyanoacrylaat wordt toegevoegd aan 2 ml van een lipide contrastvloeistof. LET OP: Vermijd huid of ogen contact met de N-butyl-2-cyanoacrylaat. </li><li> Wanneer de angiografiekatheter goed gepositioneerd, injecteer 0,2 ml tot 0,4 ml van het preparaat in de longslagader. Beoordeel de tolerantie van de embolisatie door het meten van demPAP / MPA verhouding die niet hoger mag zijn dan 0,5. Stop embolisatie als zuurstofverzadiging was &lt;90% en / of MPA daalde onder 60 mm Hg en / of hartdebiet was tot 2 l / min. </li><li> Verwijder de angiografiekatheter en mantels en het uitvoeren van digitale compressie van de prikplaats. </li></ol> 4. Hemodynamische Assessment <ol><li> Na de algemene anesthesie, de positie van de biggen in een liggende positie. Het uitvoeren van een continue monitoring van de oxymetrie, expiratoire CO 2, EKG, systemische bloeddruk (MPA) en pulmonale bloeddruk (mPAP) tijdens de gehele procedure. </li><li> Ventileren biggen met de laagste FiO 2 mogelijk volgens de zuurstofverzadiging (&gt; 95%). </li><li> Plaats alle katheter percutaan onder echografische begeleiding. Een arteriële 6 French katheter in de halsslagader ingebracht en een 8 French sheath wordt in de superior vena cava (Voer de punctie 2 cm boven de suprasternal inkeping met een 45 °hoekrichting). </li><li> Plaats een 7 Frans Swan-Ganz katheter in de longslagader koffer. Beoordelen van het hartminuutvolume van het thermo verdunningstechniek met injectie van 10 ml zoutoplossing bij 4 ° C. </li><li> Noteer de volgende parameters: de systolische, diastolische en gemiddelde systemische en pulmonale arteriële druk, hartslag, zuurstofverzadiging, rechter atrium druk hartminuutvolume. </li></ol> 5. Echocardiografische Beoordeling van de rechter ventrikel <ol><li> Na de algemene anesthesie, installeer de biggen in rugligging en het uitvoeren van een trans-thoracale echocardiografie volgens menselijke richtlijnen voor RV screening. Video opnemen loops tijdens een eindexpiratoire pauze. </li></ol> 6. Pressure-Volume Loops Assessment met de Conductance Method <ol><li> Na de algemene anesthesie, installeer de biggen in een liggende positie. Het uitvoeren van een continue monitoring van de oxymetrie, expiratoire CO 2, EKG, systemische bloeddruk (MPA) enpulmonale bloeddruk (mPAP) tijdens de gehele procedure. </li><li> Plaats een arteriële 6 French katheter in de rechter of linker halsslagader en een angiografische katheter in de linkerventrikel. Plaats een 9 French sheath in de superior vena cava, een 8 Franse in de rechter of linker femorale ader en een arteriële PiCCO catheter in de rechter of linker femorale arterie. Plaats alle katheters percutane onder echografische begeleiding. </li><li> Voer de druk en het volume kalibratie van de geleidbaarheid probe volgens de aanbevelingen van de fabrikant. Meet het bloed weerstand (Rho) door bemonstering van 5 ml van de arteriële bloed. Harvest 5 ml arterieel bloed, de-lucht de spuit en vul de probe voor het meten van het bloed weerstand. 10-13. </li><li> Steek de conductantiecatheter in de rechter ventrikel via de 9FR omhulsel in de superior veina cava. Plaats het juiste uiteinde van de catheter met fluoroscopie. Het uiteinde van de katheter in de apex van de right ventrikel en voeren alle lang mogelijk in de ventrikel. </li><li> Controle van de kwaliteit van de lussen. (Figuur 6) </li><li> Plaats een ballon eenmalig in de inferieure veina cava via de lies. Plaats het uiteinde net onder het rechter atrium. Gebruik fluoroscopische begeleiding. </li><li> Record druk-volume lussen van de rechter hartkamer op basale staat en tijdens de vena cava inferior occlusie zoals eerder beschreven 10-12. (Figuur 7) </li></ol> 7. endomyocardiale biopten van de rechter ventrikel <ol><li> Na de algemene anesthesie, de positie van de biggen in een liggende positie. Het uitvoeren van een continue monitoring van de oxymetrie, expiratoire CO 2, EKG, systemische bloeddruk (MPA) en pulmonale bloeddruk (mPAP) tijdens de gehele procedure. </li><li> Plaats percutaan een 10 Franse omhulsel in de superieure vena cava. Plaats een 7 Frans Swan-Ganz (SG) sonde en een lange 7,5 Franse katheterhuls in de juiste atrium. Wanneer de punt van de SG sondebasis wordt geplaatst in de rechter ventrikel (RV), blaas de ballon van de SG sonde duwt de lange mantel katheter in de RV tegen de ballon. Leeglopen van de ballon en verwijder de sonde SG verlaten van de lange-schede katheter in de camper. De goede positie van de tip van de lange mantel wordt gecontroleerd door fluoroscopie en echocardiografie. </li><li> Steek de biotome op de lange mantel en voer endomyocardiale biopsies onder echografische, fluoroscopische en ECG controle. </li></ol> 8. Algemene Post-operatie Care Overwegingen <ol><li> Na de operatie, extuberen de biggen pas na herstel van de spontane respiratoire functies. </li><li> Voor postoperatieve medicatie, het uitvoeren van een intramusculaire injectie van Cefatoxine (1 g) Die voor 5 dagen en leveren appropieted analgesie (Buprenorfine, intramusculair injectie 0,01 mg / kg Bid voor 10 dagen. </li><li> Heeft een dier dat een operatie heeft ondergaan om het gezelschap van andere dieren tot het volledig rec niet vertrekkenovered. </li></ol> 9. Euthanasie Methode <ol><li> Euthanaseren van de dieren in de gevolgde situaties; Einde van experimenteren, verloren gewicht 15% of meer in een week, unibability om zich adequaat te voeden, anorexia, niet behandelbare infecties, pijn of andere didease, desease te streng: cyanose, grote ademnood </li><li> Tijdens narcose met sevoluorane 8%, injecteert een hoge dosis propofol (0,5 mg / kg) geassocieerd met een letale dosis kaliumchloride (0,2 g / kg). Wanneer het hart in diastole gestopt, harveste het hart en de longen blok teneinde een histologische en moleculaire studie doen. </li></ol>

<ol><li>Simonneau, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updated+clinical+classification+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Updated clinical classification of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 54, Suppl 1. S43-S54 (2009).</li>
<li>Dartevelle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. 23 (4), 637-648 (2004).</li>
<li>Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Circulation. 113 (16), 2011-2020 (2006).</li>
<li>Galie, N., Kim, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+disease+in+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Am+Thorac+Soc%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).</li>
<li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+in+patients+with+idiopathic%2C+familial%2C+and+anorexigen-associated+pulmonary+arterial+hypertension+in+the+modern+management+era%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era.</a> Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+right+heart+failure%3A+a+window+for+translational+research+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension.</a> Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).</li>
<li>Mercier, O., Fadel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%3A+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models.</a> Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).</li>
<li>Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+handling+and+anesthesia+for+experimental+surgery+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs.</a> J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).</li>
<li>Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+monitoring+equipment+for+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals.</a> Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+reserve+in+a+piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. , (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+plasticity+in+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload.</a> J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+indices+of+right+ventricular+function+are+markers+of+ventricular-arterial+coupling+rather+than+ventricular+contractility%3A+insights+from+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).</li>
<li>Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relationships+by+the+conductance+%28volume%29+catheter+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique.</a> Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).</li>
<li>Mercier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).</li>
<li>Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+the+right+ventricle+under+stress%3A+relation+to+right+coronary+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow.</a> J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).</li>
<li>Boulate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+lesions+regress+in+reperfused+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> J Heart Lung Transplant. , (2014).</li>
</ol>

Geen belangenconflict bekend te maken.

Zoals in de klinische praktijk, met betrekking tot asepsis regels is verplicht tijdens alle chirurgische procedures. In het oorspronkelijke CTEPH biggen model beschreven door O. Mercier et al., Werd de linker longslagader ligatie uitgevoerd na het openen van het hartzakje, via een mediane sternotomie 14. Omdat het pericard werd geopend gelaten, werd de interactie tussen de rechterkamer en het hartzakje verminderde en rechter hartfalen vertraagd. Negatief effect van RV de uitbreiding op de cardiale ou...

Chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie (CTEPH) is een subtype van pulmonale hypertensie (PH) door chronische pulmonale vaatbed obstructie door aanhoudende en georganiseerde stolsels in verband met één of meer acute longembolieën 1-3. Een combinatie van obstructieve en niet-obstructieve microvasculaire ziekte leidt tot een extra verhoging van longvaatweerstand 4. De rechterkamer eerst aanpassen met gecompenseerde hypertrofie de cardiale output te handhaven. Zonder behandeling, de rechter ventrikel verwijdt en niet in de tijd. In de moderne tijd, PH blijft een progressieve en vaak dodelijke ziekte, ondanks het gebruik van moderne gerichte therapieën 5. Vele studies hebben aangetoond dat de rechter ventrikel (RV) aanpassing aan drukoverbelasting is de belangrijkste determinant van overleving bij patiënten PH. Om die reden is het begrip van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de overgang van adaptieve tot onaangepaste RV remodeling is een hoeksteen voor de behandeling en ontwikpment van nieuwe therapieën. Omdat PH is zeldzaam en weefsel bemonstering is bijna onhaalbaar in deze zwakke patiënten, zijn experimentele studies vereist. Verder preklinische studies zijn verplicht om vast te stellen dat een geneesmiddel met voordeel in de longvaten veroorzaakt geen RV impairment. Al vele jaren hebben verschillende experimentele modellen van PH en RV falen is ontwikkeld met voordelen en beperkingen 6,7. In de farmacologische muismodellen (monocrotaline, SU5416, hypoxie), PH en RV falen optreden secundair aan een massale ontsteking, ischemie of giftige stressor dat verschillende &quot;kanten effecten&quot; en bias in moleculaire pathway-analyse zou veroorzaken. Verder dienen RV endomyocardiale biopsieën in een muismodel zeer uitdagende zonder opofferende het dier. Chirurgische modellen in grotere dieren zijn meer fysiologische, maar hebben geen invloed op de longvaten (longslagader banding, systemische-naar-pulmonale shunt) of induceren acute PH en RVF (acute longembolie). Het doel van dit artikel is om een ​​origineel model van CTEPH beschrijven biggen die meer representatief is voor CTEPH pathofysiologie. Deze grote diermodel maakt herhaalde niet-invasieve en invasieve metingen meestal uitgevoerd in de klinische praktijk (rechts hartkatheterisatie) op veranderingen in pulmonale hemodynamiek en RV-functie volgen.

chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie en beoordeling van rechter ventrikel functie in de piglet

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Een origineel biggetje model van chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie (CTEPH) geassocieerd met chronische rechter ventrikel (RV) disfunctie wordt beschreven. Pulmonale hypertensie (PH) werd geïnduceerd in 3 weken oude biggetjes met een progressieve obstructie van de pulmonaire vaatbed. Een ligatie van de linker longslagader (PA) werd voor het eerst uitgevoerd door middel van een mini-thoracotomie. Ten tweede, wekelijks embolisaties van de rechter onderste long kwab werden uitgevoerd onder fluoroscopische begeleiding met n-butyl-2-cyanoacrylaat gedurende 5 weken. Bedoel Pulmonale arteriële druk (mPAP) gemeten door ritght hart catheterism, steeg geleidelijk, evenals rechter atrium druk en Pulmonale Vasculaire Weerstanden (PVR) na 5 weken in vergelijking met sham dieren. Rechter ventrikel (RV) structurele en functionele verbouwing werden beoordeeld door transthoracale echocardiografie (RV diameters, RV wanddikte, RV systolische functie). RV elasticiteit en RV-pulmonaire koppeling werden beoordeeld door druk-volume Loops(PVL) analyse met geleiding methode. Histologische bestudering van de long en de rechter hartkamer werden ook uitgevoerd. Moleculaire analyses over RV verse weefsels kunnen worden uitgevoerd door middel van herhaalde transcutane endomyocardiale biopsies. Pulmonaire microvasculaire ziekte belemmerd en onbelemmerde gebieden werd bestudeerd vanuit de longen biopten met behulp van moleculaire analyses en pathologie. Bovendien, de betrouwbaarheid en reproduceerbaarheid werd geassocieerd met een reeks PH ernst bij dieren. De meeste aspecten van de menselijke CTEPH ziekte werden opgenomen in dit model, hetgeen nieuwe perspectieven mogelijk maakt voor het begrijpen van de onderliggende mechanismen (mitochondria, ontsteking) en nieuwe therapeutische benaderingen (gerichte cellulaire of gentherapieën) van de overbelaste rechter ventrikel maar pulmonale microvasculaire ziekte.

Haalbaarheid Dit biggetje model van chronische post-embolische pulmonale hypertensie is in ons laboratorium opgericht in 2009-2010. Sinds 2011, gebruikten we 70 biggen en voerden we 63 ingevulde modellen. In onze ervaring, de realisatie van dit model vereist een leercurve. Wat betreft de mortaliteit observeerden we 5 onvoorziene sterfgevallen (7,1%), vooral in het eerste deel van onze ervaring. De twee kritische stappen waren de eerste, de pulmonair...

Chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie (CTEPH) en rechterventrikel (RV) disfunctie werden bij biggen geïnduceerd door progressieve obstructie van de longslagader. De gevolgen waren opmerkelijk vergelijkbaar met die waargenomen bij CTEPH-patiënten. Dit diermodel zou een zeer nuttig hulpmiddel zijn voor pathofysiologische en therapeutische experimenten met CTEPH en RV-falen.

Chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie en beoordeling van rechter ventrikel functie in de Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Het algemene doel van deze procedure is het creëren van een betrouwbaar en reproduceerbaar biggenmodel van chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie om de mechanismen van chronische dysfunctie van de rechterventrikel te bestuderen. Dit wordt bereikt door eerst een ligatie van de linker hoofdlongslagader uit te voeren bij een drie weken oud biggetje. In de tweede stap wordt de gemiddelde pulmonale vasculaire weerstand verhoogd door een progressieve obstructie van het pulmonale vasculaire bed.Vervolgens wordt de functie van de rechterventrikel beoordeeld via echocardiografie, en wordt de nauwe ventriculair-pulmonale arteriële koppeling gemeten met een analyse van de druk-volumeluubs van de rechterventrikel. In de laatste stap wordt vers weefsel van de rechterventrikel geoogst via endomyocardiale biopsieën. Uiteindelijk kan de remodellering van de longen en de rechterventrikel in rust worden beoordeeld door middel van histologische analyse. Dit model kan belangrijke vragen beantwoorden over de onderliggende mechanismen van rechterventrikeldysfuncties, zoals welke factoren een rol spelen bij de metabole of mitochondriale stoornissen van cardiomyocyten.Plaats vóór aanvang van de procedure een apparaat voor continue monitoring op een drie weken oud geanestheseerd biggetje. Plaats een katheter in de oorader van het biggetje en injecteer anesthetica. Plaats vervolgens onder echografische begeleiding een arteriële vloeistofveldkatheter via de arteria carotis om de systemische arteriële druk te monitoren.Scheer vervolgens het operatiegebied en desinfecteer de huid met een alcoholoplossing terwijl het biggetje in zijligging op de linkerzijde ligt. Om vervolgens de linker longslagader af te binden, wordt de borstkas geopend via een linker laterale thoracotomie van vijf tot 10 centimeter in de vierde intercostaalruimte, waarbij erop wordt gelet niet achter de punt van de scapula te komen en de long voorzichtig in de richting van het diafragma wordt teruggetrokken. Zodra het ideale chirurgische venster is gelokaliseerd, wordt de linker vena os teruggetrokken, waarna de hoofdtak van de linker longslagader wordt vrijgelegd, gevolgd door ligatie met niet-absorbeerbare 2.0 zijde.Zorg ervoor dat het pericardium onder fluoroscopische begeleiding niet wordt geopend. Voer een angiografische katheter van vijf French via de acht French sheath in tot aan de rechter longslagader, totdat de punt van de katheter zich in een segmentale longslagader van de onderkwab bevindt. Wanneer de katheters op hun plaats zitten, injecteert u 0,2 tot 0,4 milliliters vers bereid materiaal voor longslagaderembolisatie in de longslagader.Beoordeel vervolgens de tolerantie van de embolisatie door de verhouding tussen de gemiddelde longslagaderdruk en de gemiddelde systemische bloeddruk te meten. Herhaal de embolisatie niet. Indien de zuurstofsaturatie lager is dan 90%, de gemiddelde systemische bloeddruk daalt onder de 60 millimeters kwik en/of het hartminuutvolume onder de twee liters per minuut ligt.De gemiddelde longdruk moet met 10 millimeter kwik stijgen. Om een hemodynamische beoordeling uit te voeren, wordt het biggetje in rugligging geplaatst, wordt continue monitoring ingesteld zoals eerder aangetoond, en wordt het biggetje onder algehele anesthesie gecatheteriseerd. Breng percutaan een 10 French katheter in de vena cava superior in en plaats een zeven French Swan-Ganz-katheter in de truncus pulmonalis.Inject vervolgens 10 milliliters zoutoplossing van vier graden Celsius via de Swan-Ganz-katheter om het hartminuutvolume te bepalen. Beoordeel het rechterventrikel middels echocardiografie. Plaats het biggetje in rugligging.Voer vervolgens een transthoracale echocardiografie uit volgens de humane richtlijnen voor screening van de rechterventrikel. Neem de videoloops op tijdens een end-expiratoire pauze voor de beoordeling van de druk-volumeloop onder algehele anesthesie met continue monitoring. Plaats een arteriële catheter van acht French in de rechter of linker halsslagader en een angiografische catheter in de linkerventrikel.Plaats vervolgens een 12 French schede in de vena cava inferior, een acht French schede in de rechter of linker arteria femoralis en een arteriële pico-katheter in de rechter of linker arteria femoralis. Voer daarna de druk- en volumekalibratie van de conductieprobe uit volgens de aanbevelingen van de fabrikant. Om de bloedresistiviteit te meten, worden vijf milliliters arterieel bloed afgenomen, wordt de spuit ontlucht en wordt de probe gevuld.Voer vervolgens de conductiecatheter via de negen French sheath in de vena cava superior in de rechterventrikel in. Introduceer onder fluoroscopische begeleiding de punt van de catheter in de apex van de rechterventrikel en voer zoveel mogelijk van de catheter in de rest van de ventrikel in. Nadat is bevestigd dat de volumesegmenten van de probe zich in de diastolische en systolische fase bevinden aan de hand van de goede vorm van de loop, wordt een opblaasbare ballon via de vena femoralis in de vena cava inferior ingebracht, waarbij het uiteinde net onder het rechteratrium wordt geplaatst.Registreer vervolgens de druk-volumeloops van de rechterventrikel onder basale omstandigheden en tijdens occlusie van de vena cava inferior voor een percutane endomyocardbiopsie van de rechterventrikel. Plaats een 10 French sheath in de vena cava superior en een seven French Swan-Ganz-sonde en een lange 7,5 French kathetersheath in het rechteratrium. Wanneer de punt van de Swan-Ganz-sonde op zijn plaats in de rechterventrikel is, wordt de ballon van de sonde opgeblazen en wordt de lange sheathkatheter in de rechterventrikel tegen de ballon aangedrukt.Laat vervolgens de ballon leeglopen en verwijder de probe, waarbij de lange sheath-katheter op zijn plaats blijft. Voer ten slotte een biopsie uit via de lange sheath en neem endomyocardiale biopten onder echografische, fluoroscopische en EKG-controle, zoals gedemonstreerd in dit intraoperatieve beeld; een toename van de systemische vasculatuur van de long en hypertrofie van de bronchiale circulatie werden opgemerkt in de geobstrueerde linkerlong, de rechter onderkwab en de mediastinale pleuragebieden. In de geobstrueerde linkerlong en de rechter onderkwab werden tevens grote en talrijke submucose bronchiale kleine arteriën waargenomen.Als weerspiegeling van een toename in angiogenese in deze gebieden, werd na obstructieve pulmonale vasculopathie met mediahypertrofie ook vasculopathie gevonden in de geobstrueerde gebieden van de linkerlong en de rechteronderkwab, waarbij overflow-vasculopathie werd waargenomen in de niet-obstrueerde gebieden van de rechterbovenkwab. Zoals deze afbeeldingen illustreren, was zes weken later ook een chronische obstructie van de rechteronderste longslagader zichtbaar door een niet-opgeloste trombus van butylcyanoacrylaat en fibrine. De oppervlakten van de rechterventrikel en het atrium, de diameters van de rechterventrikel en de wanddiktes van de rechterventrikel waren toegenomen na herhaalde embolisaties.Tijdens de operatie werd een aanzienlijke vergroting van de rechterventrikel vastgesteld in combinatie met rechterventrikelhypertrofie. Deze toename van de rechterventrikelhypertrofie correleerde met een stijging van de gemiddelde pulmonale arteriële druk. Verdere druk-volumeanalyse wees op een verminderde functie van de rechterventrikel met een bijbehorende afname van de ventriculair-arteriële koppeling na de ontwikkeling daarvan.Dit model baant de weg voor onderzoekers op het gebied van neurologische dysfunctie om metabole en mitochondriale stoornissen te onderzoeken, en maakt tevens talrijke klinische therapeutische studies mogelijk.

chronic-thromboembolic-pulmonary-hypertension-assessment-right

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Dit artikel geeft een protocol voor de echocardiografische evaluatie van rechter ventriculaire omvang en pulmonale hypertensie bij muizen. Toepassingen zijn onder andere fenotype vastberadenheid en seriële beoordeling in transgene en toxine-geïnduceerde muismodellen van cardiomyopathie en pulmonale vasculaire ziekte.

Echocardiografische Beoordeling van de rechter hart in Muizen

Rechterventrikel (RV) disfunctie is cruciaal voor het ontstaan ​​van hart-en vaatziekten, maar beperkt voorhanden zijn voor de evaluatie ervan. Recente ontwikkelingen in de echografie zorgen voor een niet-invasieve en accurate optie voor longitudinale RV studie. Hierin hebben we een stap-voor-stap echocardiografische onder toepassing van een muizenmodel van drukoverbelasting detail.

Beoordeling van de rechter ventrikel structuur en functie in een muismodel van longslagader Vernauwing door Transthoracale Echocardiografie

Longontsteking wordt geassocieerd met een significante vermindering van de pulsatiliteit, contractiliteit en elasticiteit van de longslagader, wat bijdraagt aan een toename van de longslagaderdruk en de longweerstand. Met behulp van een hypoxisch varkensmodel heeft dit onderzoek aangetoond dat het verbeteren van de plasticiteit van de longslagader met behulp van een nieuw ontwikkelde pulsatiele katheter, de hypoxische longhypertensie verbetert.

Toenemende longslagader Pulsatiele Flow Verbetert Hypoxische Pulmonale Hypertensie in Biggen

Presenteren we een protocol voor het creëren van rechts ventriculaire dysfunctie in het model van een varken door inducerende ARDS. We tonen invasieve monitoring van links en rechts ventriculaire cardiale output met behulp van stroom sondes rond de aorta en de longslagader, evenals de metingen van de bloeddruk in de aorta en de longslagader.

Invasieve hemodynamische Monitoring van aorta en pulmonaire slagader hemodynamica in een grote diermodel van ARDS

We presenteren een protocol om een acuut rechterhartfalen te induceren en te fenotyperen in een groot diermodel met chronische pulmonale hypertensie. Dit model kan worden gebruikt om therapeutische interventies te testen, om rechterhartmetingen te ontwikkelen of om het begrip van pathofysiologie van acuut rechter hartfalen te verbeteren.

Inductie en fenotypering van acuut rechterhartfalen in een groot diermodel van chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie

Hier presenteren we een gesloten borstbenadering voor op toelating gebaseerde biventriculaire druk-volumelusregistraties bij varkens met acute rechterventrikeldisfunctie.

Closed Chest Biventricular Pressure-Volume Loop Recordings met admittance katheters in een varkensmodel

Dit manuscript beschrijft de chirurgische techniek en experimentele benadering om ernstige overbelasting van de rechterventrikeldruk te ontwikkelen om hun adaptieve en onaangepaste fenotypen te modelleren.

Een groot diermodel voor pulmonale hypertensie en rechterventrikelfalen: linker pulmonale arterieligatie en progressieve hoofdlongslagaderbanding bij schapen

Het huidige protocol beschrijft de echocardiografische karakterisering van de morfologie en functie van de rechterventrikel in een rattenmodel van pulmonale arteriële hypertensie.

Uitgebreide echocardiografische beoordeling van de rechterventrikelfunctie in een ratmodel van pulmonale arteriële hypertensie

De presentatie van gedetailleerde methoden voor de evaluatie van de rechterventrikelfunctie zal de kwaliteit en betrouwbaarheid van onderzoek naar pulmonale hypertensie verbeteren, een robuust kader bieden voor toekomstige studies en de reproduceerbaarheid in verschillende laboratoria verbeteren.

Evaluatie van de rechterventrikelfunctie in experimentele modellen van pulmonale arteriële hypertensie

De mate van vasculaire dysfunctie en bij te dragen fysiologische mechanismen kunnen bij patiënten met chronische nierziekte worden beoordeeld door het meten van de arteria brachialis flow-gemedieerde dilatatie, aorta-pulse wave velocity, en vasculaire endotheliale cel eiwit expressie.

Evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte

Ontdek een biggenmodel voor chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie om rechterventrikeldisfunctie te bestuderen. Deze methode omvat pulmonale arterie-ligatie en echocardiografie voor cardiovasculair onderzoek.

Chronische trombo-embolische pulmonale hypertensie en beoordeling van rechter ventrikel functie in de Piglet

Meer video's verkennen