Name: Scleral Cross-linking Met behulp van riboflavine en UV-A straling voor de preventie van Axial Bijziendheid in een konijn Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 56 s
Description: Leer scleraal cross-linken met riboflavine en UV-A straling voor axiale bijziendheid bij New Zealand konijnen. Deze methode richt UVA-straling op specifieke scleraale gebieden en draagt bij aan myopiebehandeling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs zijn dankbaar aan mevrouw Dalia Sela en de heer Emi Sharon voor hun professionele en uitstekende technische werkzaamheden in het laboratorium.

Dieren werden volgens de ARVO-resolutie over het gebruik van dieren bij onderzoek behandeld. De studie protocol werd goedgekeurd door de institutionele Comité voor Laboratory Animal Research (goedkeuring geen 022-4598-2;. 021211). 1. voorbereiding op een operatie # 1 <ol><li> Weeg en verdoven een 13 dagen oude Nieuw-Zeelandse witte konijnen met een intramusculaire injectie van ketamine hydrochloride 100 mg / ml (100 mg / kg) en xylazine hydrochloride 25 mg / ml (12,5 mg / kg). Die doses worden gebruikt door de lengte van de chirurgische procedure. Verzeker juiste niveau van de anesthesie door het ontbreken van een pijn reflex. </li><li> Met een steriel wattenstaafje, een kleine hoeveelheid oogzalf de niet-geopereerde oog te voorkomen dat het hoornvlies uitdroogt. Toepassen 0,9% fysiologische zoutoplossing valt op het geopereerde oog hoornvlies tijdens de operatie te voorkomen dat de hoornvliezen uitdroogt. </li><li> Voer drie axiale lengte metingen in elk oog na lokale verdoving (oxybuprocaine hydrochloride 0,4%) met behulp van een echo-A scanner en vervolgens het gemiddelde van de metingen. Breng de sonde loodrecht op de centrale cornea. </li></ol> 2. Chirurgie # 1 - Pre verknoping Step <ol><li> Met behulp van chirurgische oogheelkundige pincet en een schaar in het kader van een oogheelkundig operationele microscoop, maak een 360 ° conjunctivale peritomy met chirurgische oogheelkundige pincet en een schaar. </li><li> Behulp van een schuine tang of een spier haak identificeren vier oculaire rectus spieren en isoleer ze met een 2-0 gevlochten zijden hechtdraden zonder naalden. NB: De zijden hechtingen zal helpen met het verplaatsen van de hele wereld in de gewenste richting. De oogbol is verdeeld in kwadranten tussen de vier rectus spieren (vier kwadranten). <ol><li> Mark met een huid marker twee zones in elk kwadrant, een aan het equatoriale sclera en een aan het achterste sclera. Dit zijn de bestraling zones. </li></ol></li><li> Bereid een 3 ml tot 5 ml spuit met 0,1% dextran-vrij riboflavine-5-Fosfaate. Sluit de spuit aan een 26 G traan canule of 25 G taps toelopende hydrodelineator. </li><li> Bereid de bestraling inrichting die een UV-A (370 nm) lichtbron is aangesloten op een afgeschuinde down-custom-made glasvezel omvat. Na de meting van energie macht en kalibratie (zie opmerking hieronder), zet het apparaat in 57 mW / cm². LET OP: kalibratie werd de handel door de fabrikant uitgevoerd. Deze methode zorgt voor een totale dosis UVA-licht van 57 J / cm². (57 mW / cm2 op 0,2 cm 2 is 11,4 mW / cm 2 0,2 behulp 11,4 mW / 0,2 cm2 gedurende 200 sec een cumulatieve belasting van 2,2 J per 0,2 cm 2 spot) </li></ol> 3. Chirurgie # 1 - Cross Linking <ol><li> Verplaats de oogbol door aan de zijden hechtdraden in de tegenovergestelde richting van de gekozen kwadrant te behandelen (bijv Trek en nasale bij het ​​behandelen van onderste temporale kwadrant). Voer de oogbol beweging met behulp van een 2-0 gevlochten zijden niet-genaaide hechtdraad die isolates elke rechte spier. </li><li> Toepassen fotosensibilisatoroplossing bevattende 0,1% dextran-vrij riboflavine-5- fosfaat op de bestralingszone 20 sec voor de bestraling begint. </li><li> Bestralen de bestraling zone met behulp van een schuine naar beneden op maat gemaakt glasvezel voor een bestraling periode van 200 sec. Meet het oppervlak van elke zone als 0,2 cm² met een straal van 4 mm. </li><li> Toepassen fotosensibilisatoroplossing bevattende 0,1% dextran-vrij riboflavine-5- fosfaat op de bestralingszone elke 20 sec gedurende de 200 seconden bestralingsduur. OPMERKING: Voer de bestraling en het laten vallen van de gelijktijdig riboflavine door twee chirurgen. </li><li> Herhaal stap 3,1-3,4 voor elk van de vier kwadranten oogbol. </li></ol> 4. Chirurgie # 1 - Bericht verknoping Step <ol><li> Scheer de vacht rond het oog. Snijd de deksel marges met behulp van chirurgische oogheelkundige schaar en vervolgens voorzichtig hechtdraad de bovenste en de onderste oogleden met behulp van 4-0 gevlochten zijden ivoorkleur - 3/8 cirkel revers snij- 13 mm lengte C-3 naald (tarsorrhaphy). Breng een kleine hoeveelheid oogzalf op het ooglid aan het einde van de procedure (chlooramfenicol 5%). </li></ol> 5. Chirurgie # 1 - Post-operatieve zorg <ol><li> Houd de dieren onder een warmtelamp tijdens het herstel. Heeft een dier niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven. </li><li> Plaats het dier in een schone kooi met nieuwe bedden totdat deze volledig is hersteld. Na herstel, zal het dier teruggebracht naar de dierkamer. Breng het dier aan zijn moeder alleen wanneer wakker. </li><li> Tijdens de eerste 48 uur, onderzoekt de dieren over de algemene conditie en symptomen van ziekte of infectie. Dien analgesie zoals in Sectie 1. Dien analgesie indien nodig indien een wijziging in het konijn gedrag waargenomen. (Metamizool daalt 50 mg / kg om de 6 uur). </li></ol> 6. Chirurgie # 2 <ol><li> Fifty-vijf dagen na surgery # 1, wegen en verdoven het konijn met een intramusculaire injectie van ketamine hydrochloride 100 mg / ml (100 mg / kg) en xylazine hydrochloride 25 mg / ml (12,5 mg / kg). </li><li> Met behulp van chirurgische oogheelkundige schaar onder een oogheelkundige operationele microscoop, verwijder de tarsorrhaphy. Voer drie axiale lengte metingen van elk oog na lokale verdoving (oxybuprocaïne hydrochloride 0,4%) met behulp van een echo-A scanner en vervolgens het gemiddelde van de metingen. Breng de sonde loodrecht op de centrale cornea. </li><li> Euthanaseren de konijnen met intraperitoneale fenobarbital natrium (200 mg / 1,5 kg lichaamsgewicht). </li></ol>

<ol><li>McBrien, N. A., Gentle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+sclera+in+the+development+and+pathological+complications+of+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Role of the sclera in the development and pathological complications of myopia.</a> Prog. Retin. Eye Res. 22, 307-338 (2003).</li>
<li>Saw, S. M., Gazzard, G., Au Eong, K. -G., Tan, D. T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myopia%3A+attempts+to+arrest+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Myopia: attempts to arrest progression.</a> Br. J. Ophthalmol. 86, 1306-1311 (2002).</li>
<li>Bullimore, M. A., Jones, L. A., Moeschberger, M. L., Zadnik, K., Payor, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+retrospective+study+of+myopia+progression+in+adult+contact+lens+wearers%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">A retrospective study of myopia progression in adult contact lens wearers.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 43, 2110-2113 (2002).</li>
<li>Rose, K., Smith, W. E., Morgan, I., Mitchell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+increasing+prevalence+of+myopia%3A+implications+for+Australia%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The increasing prevalence of myopia: implications for Australia.</a> Clin. Exp. Ophthalmol. 29, 116-120 (2001).</li>
<li>Saw, S. M., Gazzard, G., Shih-Yen, E. C., Chua, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myopia+and+associated+pathological+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthal.+Physiol.+Opt%22%5BJournal%5D)">Myopia and associated pathological complications.</a> Ophthal. Physiol. Opt. 25, 381-391 (2005).</li>
<li>Tano, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathologic+myopia+-+where+are+we+now%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Pathologic myopia - where are we now.</a> Am. J. Ophthalmol. 134, 645-660 (2002).</li>
<li>Greene, P. R., Guyton, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+rhesus+lid-suture+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Time course of rhesus lid-suture myopia.</a> Exp. Eye Res. 42, 529-534 (1986).</li>
<li>McBrien, N. A., Norton, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+experimental+myopia+and+ocular+component+dimensions+in+monocularly+lid-sutured+tree+shrews+%28Tupaia+belangeri%29%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The development of experimental myopia and ocular component dimensions in monocularly lid-sutured tree shrews (Tupaia belangeri).</a> Vision Res. 32, 843-852 (1992).</li>
<li>McKanna, J. A., Casagrande, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+lens+development+in+lid-suture+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Reduced lens development in lid-suture myopia.</a> Exp. Eye Res. 26, 715-723 (1978).</li>
<li>Shapiro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+visual+deprivation+and+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Doc.+Ophthalmol.+Proc.+Ser%22%5BJournal%5D)">Experimental visual deprivation and myopia.</a> Doc. Ophthalmol. Proc. Ser. 28, 193-195 (1981).</li>
<li>Wiesel, T. N., Raviola, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+in+axial+length+of+the+macaque+monkey+eye+after+corneal+opacification%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Increase in axial length of the macaque monkey eye after corneal opacification.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 18, 1232-1236 (1979).</li>
<li>Weiss, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+high+myopia%3A+optical+components%2C+associated+factors+and+visual+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Unilateral high myopia: optical components, associated factors and visual outcomes.</a> Br J Ophthalmol. 87, 1025-1031 (2003).</li>
<li>Mechanic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crosslinking+of+collagen+in+a+heritable+disorder+of+connective+tissue%3A+Ehlers-Danlos+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Com%22%5BJournal%5D)">Crosslinking of collagen in a heritable disorder of connective tissue: Ehlers-Danlos syndrome.</a> Biochem. Biophys. Res. Com. 47, 267-272 (1972).</li>
<li>Curtin, B. J., Iwamoto, T., Renaldo, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normal+and+staphylomatous+sclera+of+high+myopia.+An+electron+microscopic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Normal and staphylomatous sclera of high myopia. An electron microscopic study.</a> Arch. Ophthalmol. 97, 912-915 (1979).</li>
<li>Liu, K. R., Chen, M. S., Ko, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+microscopic+studies+of+the+scleral+collagen+fibre+in+excessively+high+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Formosan+Med.+Assoc%22%5BJournal%5D)">Electron microscopic studies of the scleral collagen fibre in excessively high myopia.</a> J. Formosan Med. Assoc. 85, 1032-1038 (1986).</li>
<li>Funata, M., Tokoro, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scleral+change+in+experimentally+myopic+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch.+Clin.+Exp.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Scleral change in experimentally myopic monkeys.</a> Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 228, 174-179 (1990).</li>
<li>McBrien, N. A., Norton, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+collagen+cross-linking+increases+form+deprivation+myopia+in+tree+shrew%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Prevention of collagen cross-linking increases form deprivation myopia in tree shrew.</a> Exp. Eye Res. 59, 475-486 (1994).</li>
<li>Iomdina, E. N., Daragan, V. A., Ilyina, E. E. Certain biomechanical properties and cross linking of the scleral shell of the eye in progressive myopia. Proceedings of XIVth Congress on Biomechanics. Paris: International Society of Biomechanics. , 616-617 (1993).</li>
<li>Wollensak, G., Spörl, E., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Riboflavin+%2F+ultraviolet-A-induced+collagen+crosslinking+for+the+treatment+of+keratoconus%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Riboflavin / ultraviolet-A-induced collagen crosslinking for the treatment of keratoconus.</a> Am. J. Ophthalmol. 135, 620-627 (2003).</li>
<li>Wollensak, G., Spörl, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagencrosslinking+of+human+and+porcine+sclera%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cataract+Refract.+Surg%22%5BJournal%5D)">Collagencrosslinking of human and porcine sclera.</a> J. Cataract Refract. Surg. 30, 689-695 (2004).</li>
<li>Wollensak, G., Iomdina, E., Dittert, D. -D., Salamatina, O., Stoltenburg, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-linking+of+scleral+collagen+in+the+rabbit+using+riboflavin+and+UVA%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Cross-linking of scleral collagen in the rabbit using riboflavin and UVA.</a> Acta Ophthalmol. Scand. 83, 477-482 (2005).</li>
<li>Wollensak, G., Iomdina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+biomechanical+properties+of+rabbit+sclera+after+collagen+crosslinking+using+riboflavin+and+ultraviolet+%28UVA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Long-term biomechanical properties of rabbit sclera after collagen crosslinking using riboflavin and ultraviolet (UVA).</a> Acta Ophthalmol. 87, 193-198 (2009).</li>
<li>Wildsoet, C. F., Norton, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+controlling+myopia+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Optom.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Toward controlling myopia progression.</a> Optom. Vis. Sci. 76, 341-342 (1999).</li>
<li>Avetisov, E. S., Tarutta, E. P., Iomdina, E. N., Vinetskaya, M. I., Andreyeva, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsurgical+and+surgical+methods+of+sclera+reinforcement+in+progressive+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Nonsurgical and surgical methods of sclera reinforcement in progressive myopia.</a> Acta Ophthalmol. Scand. 75, 618-623 (1997).</li>
<li>Thompson, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+sclera+reinforcement+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">A simplified sclera reinforcement technique.</a> Am. J. Ophthalmol. 86, 782-790 (1978).</li>
<li>Whitmore, W. G., Curtin, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scleral+reinforcement%3A+two+case+reports%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Surg%22%5BJournal%5D)">Scleral reinforcement: two case reports.</a> Ophthalmic Surg. 18, 503-505 (1987).</li>
<li>Dotan, A., Kremer, I., Livnat, T., Zigler, A., Weinberger, D., Bourla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scleral+cross-linking+using+riboflavin+and+ultraviolet-A+radiation+for+prevention+of+progressive+myopia+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Scleral cross-linking using riboflavin and ultraviolet-A radiation for prevention of progressive myopia in a rabbit model.</a> Exp Eye Res. 127, 190-195 (2014).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen.

We presenteren de eerste in vivo studie van het voorkomen van axiale bijziendheid in een konijnenmodel middels crosslinking technologie riboflavine en UV-bestraling. Hoewel verschillende proefdieren kan worden gebruikt in dit type onderzoek, kozen we konijnen vooral door de grootte van de ogen en de noodzaak om verknoping te voeren op het sclerale oppervlak. We vonden dat het blootstellen van het konijn sclera en het hechten van de bovenste en onderste oogleden procedures toegepast ...

Bijziendheid is de meest voorkomende van de refractieafwijkingen. De prevalentie van bijziendheid in de USA en Europa is naar verluidt ongeveer 30% en in Aziatische landen treft tot 60% van de bevolking 1,2. Bijziend progressie optreedt in tot 50% van de bijzienden, meestal met een snelheid van ongeveer -0,5 dioptrie over een periode van twee jaar 3. De kosten voor de gezondheidszorg opgelegd door bijziendheid zijn aanzienlijk, met inbegrip van de kosten voor brillen, contactlenzen en refractieve chirurgie en kosten in verband met de verhoogde gezondheidsrisico&#39;s van glaucoom, cataract, netvliesloslating en visuele handicap 4-6. In dierstudies van bijziendheid, wordt het zicht vermindering geïnduceerd door ooglid hechten 7-10, plaatsing van een occlusie op korte afstand van de oog- en hoornvlies 11 tatoeëren. Voor kunstmatige bijziendheid te komen in deze studies het occlusie proces moet worden uitgevoerd op zeer jonge dieren, omdat er geen zicht deprivatie experimenten Carried op volwassen exemplaren zijn succesvol gebleken. Een van de belangrijke kenmerken van ernstige myopie is een pathologische verandering van de sclera met geleidelijke verdunning van de sclera, waarschijnlijk als gevolg van een verstoorde terugkoppelingsmechanisme van emmetropization na visuele deprivatie 12 of door bepaalde stofwisselingsziekte van de sclera, zoals in Ehlers Danlos 13. Uiteindelijk beide mechanismen leiden tot rekken en dunner worden van de sclera, netvlies en choroidea te wijten aan structurele afwijkingen van de kortzichtige sclera, zoals een verminderde collageen vezeldiameter 14,15 en ongeregeldheden fibrillogenese 16. Verschillende studies hebben aangetoond dat een verminderde collageen verknoping is een belangrijke factor in het verzwakken werkwijze volgens de bijziende sclera 17-18. Wollensak et al. 19-21 geïnduceerd collageen verknoping door toepassing van de fotosensibilisator riboflavine en ultraviolet A (UVA) straling (370 nm)en merkte een belangrijke, 157% verhoging van de stijfheid van varkens en menselijke sclera in vitro 19 en een stijging van 465% in konijn sclerale rigiditeit in vivo (Young&#39;s modulus) 20. Verknoping had ook een langdurig effect op konijn sclera in vivo: stijfheid toe met 320,4% na 3 dagen, 277,6% na 4 maanden en 502% na 8 maanden (Young&#39;s modulus) 22. Therapeutische pogingen om bijziende progressie te arresteren zijn gepubliceerd 23-26 maar het succes van deze methoden is omstreden. Geen efficiënte middelen ter voorkoming van progressieve bijziendheid is gevonden tot nu toe. Het ontstaan ​​van bijziendheid is nog steeds controversieel, en de behandeling ervan vormt een uitdaging. Op basis van deze bevindingen wordt verondersteld dat sclerale verknoping als middel voor sclera gebaseerde behandeling van bijziendheid progressie kan dienen. Het doel van deze studie is om de sclerale collageen crosslinki onderzoekenng effect op de ontwikkeling van axiale bijziendheid geïnduceerd door occlusie zichtas.

<table><tbody><tr><td>2-0 braided silk non-needled sutures&nbsp;</td><td>ETHICON</td><td>W193</td><td></td></tr><tr><td>4-0 braided silk ivory color&nbsp;</td><td>ETHICON</td><td>W816</td><td></td></tr><tr><td>0.1% dextran-free riboflavin-5-phosphate 1 mg:1 ml</td><td>Concept for Pharmacy Ltd</td><td>D2-5025</td><td></td></tr><tr><td>UV A (370 nm) light source&nbsp;</td><td>O/E LAND Inc</td><td>NCSU033B</td><td></td></tr><tr><td>Beveled down custom made fiber optic&nbsp;</td><td>Prizmatix Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>26 G lacrimal cannula&nbsp;</td><td>Beaver-visitec International Ltd.&nbsp;</td><td>REF581276</td><td></td></tr><tr><td>25 G tapered hydrodelineator [Blumenthal]&nbsp;</td><td>Beaver-visitec International Ltd.&nbsp;</td><td>REF585107</td><td></td></tr><tr><td>13 days old rabbits</td><td>Harlan&nbsp;</td><td>1NZWR40</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonic biometer</td><td>Allergan-Humphrey</td><td>820-519</td><td></td></tr><tr><td>Skin marker</td><td>Devon</td><td>4237101664X</td><td></td></tr></tbody></table>

scleral cross-linking met behulp van riboflavine en uv-a straling voor de preventie van axial bijziendheid in een konijn model

Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model

Kortzichtige mensen, vooral die met een ernstige bijziendheid, hebben een hoger dan normaal risico op cataract, glaucoom, netvliesloslating en chorioretinale afwijkingen. Bovendien, pathologische myopie is een veel voorkomende onomkeerbare oorzaak van slechtziendheid en blindheid 1-3. Onze studie toont het effect van verknoping sclerale gebruik riboflavine en UV-A straling op de ontwikkeling van axiale bijziendheid in een konijnenmodel. De axiale lengte van de oogbol werd gemeten door A-scan ultrasound in Nieuw-Zeelandse witte konijnen van 13 dagen (mannelijk en vrouwelijk). Het oog Vervolgens onderging 360 ° conjunctivale peritomy met sclerale verknoping, gevolgd door tarsorrhaphy. Axiale verlenging werd in 13 dagen oude Nieuw-Zeeland konijnen geïnduceerd door het hechten van hun rechter oog oogleden (tarsorrhaphy). De ogen werden onderverdeeld in kwadranten en elk kwadrant hadden twee sclerale bestraling zones, elk met een oppervlakte van 0,2 cm² en een straal van 4 mm. Verknoping werd uitgevoerd druppelsgewijs 0,1%dextran-vrij riboflavine-5- fosfaat op de bestraling zones 20 seconden voordat UV-A straling en elke 20 sec gedurende de 200 seconden bestralingstijd. UVA-straling (370 nm) werd toegepast loodrecht op de sclera op 57 mW / cm² (totaal UVA lichte dosis, 57 J / cm²). Tarsorrhaphies werden verwijderd op dag 55, gevolgd door herhaalde axiale lengte metingen. Deze studie toont aan dat sclerale verknoping met riboflavine en UV-A straling effectief voorkomt occlusie veroorzaakte axiale verlenging in een konijn model.

Figuren 1 en 2 tonen grafisch de axiale lengte meten van twee groepen. Groep 1 konijnen onderging sclerale verknoping en tarsorrhaphy rechts oog terwijl het linkeroog werd niet geopereerd (figuur 1). Groep 2 konijnen onderging slechts peritomy en tarsorrhaphy rechts oog terwijl het linkeroog werd niet geopereerd (figuur 2). In groep 1, die sclerale verknoping ...

We tonen het effect van de sclerale verknoping met riboflavine en UVA op een axiale verlenging konijn oog. Axiale verlenging werd geïnduceerd in 13 dagen oude New Zealand konijnen (mannen en vrouwen) door hechten hun rechter oog oogleden (tarsorrhaphy).

Scleral Cross-linking Met behulp van riboflavine en UV-A straling voor de preventie van Axial Bijziendheid in een konijn Model

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal ...

Het algemene doel van deze procedure is om de effecten van scleral cross-linking met behulp van riboflavine en ultraviolet-A-straling te observeren om axiale myopie op te wekken in een konijnenmodel. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen het vakgebied van scleral cross-linking, zoals de vraag hoe UVA-straling kan worden gericht op specifieke scleral gebieden. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat er gebruik wordt gemaakt van UVA-straling, glasvezeloptiek en chirurgie om de betreffende scleral gebieden te bereiken.Orly Gal-Or, een assistent in opleiding bij de afdeling oogheelkunde van het Rabin Medical Center, zal ondersteuning bieden bij de chirurgische procedure. Bevestig vóór aanvang van de procedure de afwezigheid van een pijnreflex en gebruik een steriel wattenstaafje om een kleine hoeveelheid oogzalf aan te brengen in het niet-geopereerde oog. Breng vervolgens een lokale verdoving aan in elk oog.Plaats de probe loodrecht op het centrale hoornvlies en gebruik een echografie A-scanner om drie axiale lengtemetingen van de ogen uit te voeren. Maak vervolgens, onder een oogheelkundige operatiemicroscoop, met behulp van chirurgische oogheelkundige pincetten en scharen een conjunctivale peritomie van 360 graden. Gebruik een spierhaak om de vier extraoculaire rectusspieren te lokaliseren.Isoleer vervolgens de spieren met twee gevlochten zijden hechtdraden van maat 0 zonder naald om vier kwadranten te creëren. Markeer met een huidmarker één bestralingszone bij de equatoriale sclera en één bestralingszone bij de posterieure sclera in elk kwadrant. Vul daarna een spuit van drie tot vijf milliliter met 0,1% dextranvrije riboflavine-5-fosfaat fotosensitizer-oplossing en bevestig een traanbuiscanule van gauge 26.Zet nu een bestralingsapparaat aan met een 370 nanometer UVA-lichtbron die is verbonden met een op maat gemaakte, schuin afgesneden glasvezel, en stel het apparaat in op 57 milliwatts per vierkante centimeter. Verplaats de oogbol twintig seconden voor aanvang van de bestraling door aan de zijden hechtingen te trekken in de tegenovergestelde richting van het te behandelen kwadrant, en breng een fotosensitiseringsoplossing aan op de bestralingszone. Gebruik vervolgens de op maat gemaakte glasvezel om de geselecteerde zone gedurende 200 seconden te bestralen, waarbij elke 20 seconden opnieuw fotosensitiseringsoplossing op de zone wordt aangebracht.Nadat alle vier de kwadranten zijn bestraald, worden de lidmarges met een schaar bijgetrimd. Gebruik vervolgens vier nul ivoorkleurige gevlochten zijden hechtdraden om de bovenste en onderste oogleden voorzichtig te hechten. Breng een kleine hoeveelheid oogzalf aan op de lidmarge en plaats het konijn onder een warmtelamp.Wanneer het dier volledig is hersteld, plaatst u het in een schone kooi met nieuwe strooisel. Vijfenvijftig dagen na de cross-linking gebruikt u chirurgische oogheelkundige scharen om de tarsorrafie te verwijderen. Voer vervolgens, zoals zojuist gedemonstreerd, drie axiale lengtemetingen uit aan elk oog.Bij dieren die een sclera-crosslinking en tarsorrafie ondergingen, nam de gemiddelde axiale lengte af na het hechten van het ooglid, vergeleken met het niet-geopereerde oog. Bij dieren die echter alleen een peritomie en tarsorrafie ondergingen, nam de gemiddelde axiale lengte in het experimentele oog toe. Inderdaad vertoonden ogen die een sclera-crosslinking ondergingen over het algemeen een geringere toename van de axiale lengte vergeleken met ogen die alleen een peritomie ondergingen.Hoewel het verschil tussen de groepen in de gemiddelde axiale lengte van de ogen die geen operatie ondergingen niet statistisch significant was. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden alle benodigde apparatuur vooraf klaar te zetten. Na de ontwikkeling van deze techniek werd de weg vrijgemaakt voor onderzoekers op het gebied van myopie, die de effecten van riboflavine en UVA-straling op het netvlies, het choroidea en de sclera onderzochten.Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u specifieke sclera-gebieden van belang kunt visualiseren en hoe u gerichte UVA-stralingsbehandelingen kunt toepassen. Vergeet niet dat het uitvoeren van operaties aan dergelijke kleine ogen met delicate rectusspieren uiterst uitdagend kan zijn en dat de leercurve voor het perfectioneren van de techniek in acht moet worden genomen. De implicaties van deze techniek strekken zich uit tot de preventie van pathologische myope complicaties.Hoewel deze methode inzicht kan bieden in de preventie van axiale myopie, kan deze ook worden toegepast op andere aandoeningen, zoals dunne sclera-gebieden.

scleral-cross-linking-using-riboflavin-ultraviolet-radiation-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Corneale collageen cross-linking (CXL) is de enige conservatieve behandeling die momenteel beschikbaar is om de progressie van keratoconus te stoppen door de biomechanische stijfheid van het corneale stroma te verbeteren. Het doel van dit manuscript is om de methoden van drie verschillende protocollen van CXL te benadrukken: conventionele CXL (C-CXL), versnelde CXL (A-CXL) en iontoforese CXL (I-CXL).

Drie verschillende protocollen van hoornvlies Collageen Crosslinking in Keratoconus: Conventioneel, versnelde en Iontoforese

Netvliespigmentepitheel (RPE) vervangende strategieën en gen-gebaseerde therapie in aanmerking komen voor een aantal retinale degeneratieve aandoeningen. Voor klinische toepassing worden grote oog dierlijke modellen moeten chirurgische technieken bij patiënten toepassing bestuderen. Hier presenteren we een konijnenmodel voor subretinale chirurgie gericht RPE transplantatie, die veelzijdig en kostenefficiënt.

Een Step by Step Protocol voor Subretinal Surgery in Rabbits

Dit protocol beschrijft technieken voor de beoordeling van de chemische cross-linking van het konijn sclera met behulp van tweede-harmonische generatie beeldvorming en differentiële scanning calorimetrie.

Tweede harmonische generatie signalen in konijn Sclera als een instrument voor de beoordeling van de therapeutische weefsel dwarsbinding (TXL) voor bijziendheid

Retinale pigment epitheliale cellen kunnen dienen als een cel-vervangende therapie voor de geavanceerde vorm van droge leeftijdsgebonden Macula degeneratie. Dit protocol beschrijft de generatie van een grote-eyed model van geografische atrofie en subretinal transplantatie van menselijke embryonale stamcellen cel afkomstige retinale pigment epitheliale cellen in dit model van ziekte.

Subretinal transplantatie van menselijke embryonale stamcellen afgeleid-retinale Pigment epitheliale cellen in een grote-eyed Model van geografische atrofie

Dit manuscript beschrijft de nieuwe instelling en werkwijze van een photoacoustic microscopie en optische coherentie tomografie dual-modaliteit systeem voor noninvasive, etiket-vrije chorioretinal beeldvorming van grotere dieren, zoals konijnen.

Roman Photoacoustic microscopie en optische coherentie tomografie Dual-modaliteit Chorioretinal Imaging in levende konijn ogen

Dit protocol beschrijft een betrouwbare methode voor het verkrijgen van hoogwaardige cryosecties van hele konijnenogen. Het beschrijft procedures voor dissectie, fixatie, inbedding en secties van konijnenogen, die gemakkelijk kunnen worden aangepast voor gebruik in elk onderzoek waarbij immunohistochemie in grotere ogen wordt gebruikt.

Het verkrijgen van cryosecties van het hele konijnenoog van hoge kwaliteit 

Dit artikel bevat gedetailleerde instructies voor het uitvoeren van oogzenuwverbrijzeling in een konijnenmodel met behulp van standaard oogheelkundige chirurgische technieken.

Een chirurgische benadering voor oogzenuwverbrijzeling in een konijnenmodel

Er wordt een reproduceerbaar protocol gepresenteerd voor de bereiding, verrijking en toepassing van een in situ blauwlicht-crosslinkable gelatine-riboflavine hydrogel voor het herstel van corneale stromale wonden bij konijnen, inclusief procedurele stappen voor chirurgische behandeling, gedeeltelijke tarsorrofie en postoperatieve zorg.

Fabricage en chirurgische toepassing van verrijkte, foto-gekruiste gelatine–riboflavine hydrogels voor herstel van hoornvlieswonden bij konijnen

Bioluminescentie beeldvorming van hypoxie induceerbare factor-1α-activiteit wordt toegepast op intracraniale tumor hypoxie ontwikkeling in een borstkanker hersenmetastasen muismodel te controleren.

In vivo bioluminescentie van Tumor Hypoxie Dynamiek van Borstkanker hersenmetastasen in een muismodel

We beschrijven een geïntegreerde methode voor de exacte, stereotactische implantatie van menselijke glioblastoma multiforme cellen in de hersenen van muizen en vervolgens naakt...

Stereotactische Intracraniale Implantatie en<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescent Imaging van tumorxenograften in een Muis Model Systeem van glioblastoma multiforme

Leer scleraal cross-linken met riboflavine en UV-A straling voor axiale bijziendheid bij New Zealand konijnen. Deze methode richt UVA-straling op specifieke scleraale gebieden en draagt bij aan myopiebehandeling.

Scleral Cross-linking Met behulp van riboflavine en UV-A straling voor de preventie van Axial Bijziendheid in een konijn Model

Meer video's verkennen