Name: Long-Term catheterisatie van de intestinale Lymfe Stam en verzamelen van lymfe in Neonatale Pigs (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 25 s
Description: Leer de chirurgische techniek voor langdurige catheterisatie van de intestinale lymfestam bij neonatale varkens. Deze methode maakt verzameling van lymfe mogelijk voor onderzoek naar lipidenmetabolisme en geneesmiddelverwerking.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Het werk werd gedeeltelijk ondersteund door financiering van Alberta Livestock and Meat Agency en Natural Science and Research Council Discovery-subsidie aan S. D. Proctor.

Alle procedures op in zowel de video en manuscript beschreven proefdieren werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care en gebruik Comite en volgde de door de Canadese Raad van Animal Care vastgestelde richtlijnen. 1. Chirurgische anesthesie en chirurgische Voorbereiding van de Neonatale Pigs <ol><li> In een aparte hal, premedicate 25 kg varkens nabij de basis van de hals met een intramusculaire sedatieve anestheticum cocktail bevattende: azaperon (0,3 mg / kg), ketamine hydrochloride (10 mg / kg), dexmedetomidine (15 ug / kg). Opmerking: buprenorfine (0,005-0,02 mg / kg) plaatsen in de pre-anestheticum cocktail voor verhoogde intra-operatieve pijnbestrijding. </li><li> Verdoven de varkens met geïnhaleerde isofluraan inademing gas (4-5% isofluraan bij 500 ml-1000 ml / min O 2) met behulp van een gezichtsmasker. Visualiseer de stembanden met behulp van een veterinaire laryngeal scope (17-25 cm lange rechte mes), en toe te passen actueel 10% lidocaïne spay aan de vocalekoorden. Laat de lidocaïne spray 30-60 sec vooraf contact op met de stembanden om intubatie om de mogelijkheid van stembanden spasmen en obstructie van de luchtwegen te verminderen. </li><li> Intuberen de varkens door het passeren van een cuff endotracheale tube (5,0-7,0 mm Interne diameter (ID)) tussen de stembanden en onderhouden van de anesthesie met isofluraan gas (0,5-2,0% isofluraan bij 1.000-2.000 ml / min O 2) met behulp van een gesloten circuit rebreathing verdoving systeem in het hele operatie. Beoordelen van het niveau van de anesthesie door kaak toon, en beide pedaal en ooglidreflex reacties. Verlopen verdoving gas wordt opgeruimd en afgevoerd buiten de chirurgische suite. </li><li> Reinig het buitenoppervlak van het oor met 2,0% chloorhexidine chirurgische scrub oplossing gevolgd door een 70% isopropylalcohol spoelen. Met een 20 G intraveneuze katheter katheteriseren een ader oor tot intraveneuze vloeistoffen (lactaat Ringer&#39;s oplossing; 5-10 ml / kg / uur) te bieden tijdens de operatie. Bevestig een pulsoximeter voor het mucosale oppervlak van de tong met medical tape om de hartslag en de verzadiging van perifere bloedoxygenatie (SpO 2) te bewaken. </li><li> Plaats de verdoofde kat in de rug liggende positie en scheer het ventrale abdomen uit het midden van de thorax caudaal naar het ventrale aspect van het schaambeen. Reinig dit gebied met twee afwisselende 2,0% chloorhexidine chirurgische scrubs en steriel water wast. </li><li> Breng de verdoofde varkens op de chirurgische suite en breng de definitieve chirurgische scrub van 70% isopropylalcohol spoeling, laat ze drogen en vervolgens draperen het dier. </li><li> Plaats een rectale temperatuursensor circa 2-4 cm in het rectum om de lichaamstemperatuur te controleren. Plaats de varkens op een water recirculatie verwarming pad om de normale lichaamstemperatuur (38-40 ° C) tijdens chirurgische procedure te handhaven. </li><li> Drapeer het varken met vier handdoeken gordijnen geplaatst in een bovenliggende kwadrant patroon rond de buik. Leg de eerste laken over xiphisternum, de tweede laken langs de laterale aspect van de buik ongeveer 5 cm lateraal van de buik middellijn. Daarna de laken over de dunne kam van het bekken en de vierde draperen, zoals de tweede laken (hoewel aan de andere kant), geplaatst langs de laterale zijde van het abdomen ongeveer 5 cm lateraal van de buik middellijn. </li><li> Zet een grote tafel laken, met een split-opening die toegang geeft tot de chirurgische plaats, over de onderliggende handdoek gordijnen en bedek het varken en de hele chirurgische tafel. De laatste laken is een wegwerp Steri-laken geplaatst over de grote tafel laken. </li></ol> 2. Abdominale Chirurgie en catheterisatie van de intestinale Lymfatische Trunk <ol><li> Wordt 20 cm incisie met een scalpel om de onderliggende buikspieren bloot. Incise de buikspier lagen met mono-polaire electrocautery (20 Watt instelling) aan de pariëtale buikvlies bloot te leggen. Open een 20 cm lineaire segment van de pariëtale peritoneum met Metzenbaum schaar om toegang te krijgen tot de abdominale ingewanden en lymfevaten. </li><li&gt; Plaats een oprolmechanisme aan de craniale aspect van de chirurgische incisie de buikholte geopend gedurende de duur van de operatie te houden. </li><li> Bevochtig alle weefsels met warm (37 ° C) steriele zoutoplossing voor de gehele chirurgische procedure. Til een groot deel van de darm zoals de dikke darm, blindedarm, ileum en jejunum van de buikholte en exterioriseren aan de linkerflank van het varken om de bovenbuik, lever en lymfevaten. Zet de exteriorized darm in stand met extra handdoek gordijnen aan een strop om voorzichtig te ondersteunen de darm te vormen. </li><li> Zoek de lymfatische vat, het legt ongeveer 4 cm craniaal-mediaal van de rechter nier ader, 6 cm caudaal-medial- ventrale van de caval voormannen en onder de viscerale aspect van de juiste lever kwab in de buurt van de alvleesklier 22,36,37. Identificeer de lymfatische vat als een doorzichtige structuur naast elkaar rechts ventrale segment van de poortader 36,37. </li><li> Scheid de lymfatische Vessel uit de omliggende fascia door voorzichtig plagen weg de bijgevoegde weefsel met Q-tip applicators. Zodra de laterale aspecten van het vaartuig worden gescheiden van het omliggende weefsel, een &quot;tunnel&quot; opening onderaan het vat met fijne stompe getipt tang. </li><li> Pass drie 2-0 zijde hechtingen onder de lymfatische vat met fijne tang. Afbinden de meest caudale hechtdraad eerste om af te sluiten, verwijden en vul het vat met lymfe. Doelbewust laat de einden van de hechtdraad relatief lange (4 cm) aan de katheter te bevestigen aan het lymfevatensysteem. Plaats twee hechtingen gescheiden 1,0 cm van elkaar en zijn ongeveer 1,0-1,5 cm craniaal naar caudaal beveiligde hechtdraad. Laat deze twee hechtingen met een &#39;single losse ligatuur tie&#39; mogelijk te maken voor een snellere bevestiging van de katheter in het vat. Opmerking: Het segment van het lymfevatensysteem tussen de caudale ligeren hechtdraad en midden hechtdraad (van de twee craniale hechtingen) is de site voor katheterisatie. Ten aanzien van sutuur materiaal kan polyglactine 2-0 hechtdraad vervangen 2-0 zijden hechtdraden indien nodig. </li><li> Snij een klein gaatje in het vat met iris schaar en verwijden het schip met fijne stompe pincet. Plaats ongeveer 1,0-1,5 cm gespecialiseerde katheter buis (4,06 buitendiameter (OD) x 2,31 mm ID) met een afgeschuind uiteinde in het vat en bind de twee schedelnaden om de katheter vast te zetten. Gebruik de lange hechtdraad uiteinden van de caudale hechting aan de katheter te bevestigen aan het vat. </li><li> Was de exteriorized darm met een ruime hoeveelheid warm zout en voorzichtig terug te sturen naar de buikholte correcte anatomische positionering van de darm. </li><li> Exterioriseren de katheter aan de linkerkant halverwege de flank (5-10 cm ventraal van de pensgroeve). Wordt huidincisie met een scalpel en langs een trocar van de buikholte op het huidoppervlak van een opening voor de uittreding van de katheter te maken. Gebruik een grote Kelly tang om de katheter exterioriseren van de abdominale CAVITY door de trocart opening. </li><li> Sluit de pariëtale peritoneum met een eenvoudige doorlopende hechting patroon van 2-0 polyglactine hechtdraad met een ronde (taps) naald. Sluit de buikspier lagen met een eenvoudige onderbroken hechtdraad patroon met een 2-0 polyglactine hechtdraad op een ronde naald. </li><li> Sluit de huid in een subcutane patroon met 2-0 polyglactine hechtdraad op een scherpe naald. Bevestig de geëxterioriseerde katheter aan de huid met een beurs-string hechtdraad patroon en een 2-0 nylon hechting op een scherpe naald. </li><li> Plaats een gespecialiseerde mantel op het varken terwijl verdoofd zijn plek te vergemakkelijken en de stress van het varken te verminderen tijdens het herstel. </li></ol> 3. Post-operatieve herstel en lymfe Collection <ol><li> Ongeveer 10 minuten voorafgaand aan de stopzetting van inhalatie-anesthesie, beheren bupenorphine (0,1 mg / kg) intramusculair om onmiddellijk na de ingreep analgesie. Verder bupenorphine (0,1 mg / kg) elke 12 uur gedurende 24-48 uur te handhavenpostoperatieve analgesie. </li><li> Bewaken van de varkens voor post-operatieve complicaties elke 8-12 uur voor een periode van 7 dagen. </li><li> Verzamel de lymfe in 500 ml polypropyleen wasflessen, bekleed met ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA), en aangevuld met antibiotica; penicilline (6000 IU), streptomycine (6 mg) en amfotericine B (3 mg) elke 12 uur gedurende een periode van 7 dagen. </li></ol> 4. Kwantificering van Lipoprotein ApoB48, Triglyceride, Cholesterol en Total Protein verzameld van de lymfe <ol><li> Centrifugeer de lymfe monster bij 1800 xg gedurende 5 minuten bij 4 ° C. Verzamel de supernatant en gebruiken voor het kwantificeren van triglyceriden, cholesterol en totaal eiwit. </li><li> Verdeel de bovenstaande vloeistof in drie monsters: een onverdund monster, een monster 1:20 verdund gedestilleerd water en een laatste monster 1: 100 verdund met gedestilleerd water. </li><li> Gebruik het onverdund supernatant om het cholesterolgehalte te meten, met een in de handel verkrijgbare kit. </li><li> Gebruik de 1:20 en 1:100 verdunde monsters triglyceride en totaal eiwit te meten met een commercieel verkrijgbare kit en de bicinchoninezuur-totaal eiwit assay respectievelijk. </li></ol> 5. Kwantificering van Lipoprotein ApoB48, verzameld uit de lymfe 38 <ol><li> Het gehalte aan lipoproteïne ApoB48 met een aangepaste immune Western Blotting methode 38. Aparte totale lymfe met 3-8% tris-acetaat natriumdodecylsulfaat polyacrylamide gelelektroforese (SDS-PAGE). </li><li> Breng de gescheiden eiwitten naar een polyvinylideen fluoride membraan (0,45 urn) en incubeer ze een geiten polyklonaal antilichaam tegen ApoB (1: 4000) en vervolgens binden met anti-geit secundair antilichaam. </li><li> Kwantificeren van de lipoproteïne ApoB48 met chemiluminescentie met een lineaire densitometrische vergelijking met gezuiverd knaagdieren ApoB48 eiwit standaard. </li></ol>

<ol><li>Lindsay, F. E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cisterna+chyli+as+a+source+of+lymph+samples+in+the+cat+and+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Res.+Vet.+Sci%22%5BJournal%5D)">The cisterna chyli as a source of lymph samples in the cat and dog.</a> Res. Vet. Sci. 17, 256-258 (1974).</li>
<li>Kohan, A. B., Howles, P. N., Tso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+studying+rodent+intestinal+lipoprotein+production+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods for studying rodent intestinal lipoprotein production and metabolism.</a> Curr. Protoc. Mouse Biol. 2, 219-230 (2012).</li>
<li>Wang, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+uptake+and+lymphatic+absorption+of+beta-carotene+in+ferrets%3A+a+model+for+human+beta-carotene+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Intestinal uptake and lymphatic absorption of beta-carotene in ferrets: a model for human beta-carotene metabolism.</a> Am. J. Physiol. 263 (4 Pt 1), G480-G486 (1992).</li>
<li>Hein, W. R., Barber, T., Cole, S. A., Morrison, L., Pernthaner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+collection+and+characterization+of+afferent+lymph+from+the+ovine+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J.Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term collection and characterization of afferent lymph from the ovine small intestine.</a> J.Immunol. Methods. 293 (1-2), 153-168 (2004).</li>
<li>Hartmann, P. E., Lascelles, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+flow+and+lipid+composition+of+thoracic+duct+lymph+in+the+grazing+cow%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The flow and lipid composition of thoracic duct lymph in the grazing cow.</a> J. Physiol. 184 (1), 193-202 (1966).</li>
<li>Redgrave, T. G., Dunne, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chylomicron+formation+and+composition+in+unanaesthetised+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Chylomicron formation and composition in unanaesthetised rabbits.</a> Atherosclerosis. 22 (3), 389-400 (1975).</li>
<li>Binns, R. M., Hall, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+paucity+of+lymphocytes+in+the+lymph+of+unanaesthetised+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">The paucity of lymphocytes in the lymph of unanaesthetised pigs.</a> Br. J. Exp. Pathol. 47 (3), 275-280 (1966).</li>
<li>Ohlsson, L., Kohan, A. B., Tso, P., Ahren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GLP-1+released+to+the+mesenteric+lymph+duct+in+mice%3A+Effects+of+glucose+and+fat%5BTitle%5D)+AND+%22Regul.+Pept%22%5BJournal%5D)">GLP-1 released to the mesenteric lymph duct in mice: Effects of glucose and fat.</a> Regul. Pept. 189, 40-45 (2014).</li>
<li>Ho, H. T., Kim, D. N., Lee, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+apolipoprotein+B-48+synthesis+and+lymphatic+cholesterol+transport+are+lower+in+swine+fed+high+fat%2C+high+cholesterol+diet+with+soy+protein+than+with+casein%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Intestinal apolipoprotein B-48 synthesis and lymphatic cholesterol transport are lower in swine fed high fat, high cholesterol diet with soy protein than with casein.</a> Atherosclerosis. 77 (1), 15-23 (1989).</li>
<li>Arnold, M., Dai, Y., Tso, P., Langhans, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meal-contingent+intestinal+lymph+sampling+from+awake%2C+unrestrained+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Meal-contingent intestinal lymph sampling from awake, unrestrained rats.</a> Am. J. Physiol. Integr. Comp. Physiol. 302 (12), R1365-R1371 (2012).</li>
<li>Nguyen, T. M., Sawyer, J. K., Kelley, K. L., Davis, M. A., Kent, C. R., Rudel, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACAT2+and+ABCG5%2FG8+are+both+required+for+efficient+cholesterol+absorption+in+mice%3A+evidence+from+thoracic+lymph+duct+cannulation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">ACAT2 and ABCG5/G8 are both required for efficient cholesterol absorption in mice: evidence from thoracic lymph duct cannulation.</a> J. Lipid Res. 53 (8), 1598-1609 (2012).</li>
<li>Sato, M., Kawata, Y., Erami, K., Ikeda, I., Imaizumi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LXR+agonist+increases+the+lymph+HDL+transport+in+rats+by+promoting+reciprocally+intestinal+ABCA1+and+apo+A-I+mRNA+levels%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">LXR agonist increases the lymph HDL transport in rats by promoting reciprocally intestinal ABCA1 and apo A-I mRNA levels.</a> Lipids. 43 (2), 125-131 (2008).</li>
<li>Boyd, M., Risovic, V., Jull, P., Choo, E., Wasan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stepwise+surgical+procedure+to+investigate+the+lymphatic+transport+of+lipid-based+oral+drug+formulations%3A+Cannulation+of+the+mesenteric+and+thoracic+lymph+ducts+within+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Toxicol.+Methods%22%5BJournal%5D)">A stepwise surgical procedure to investigate the lymphatic transport of lipid-based oral drug formulations: Cannulation of the mesenteric and thoracic lymph ducts within the rat.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 49 (2), 115-120 (2004).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+absorption+of+dietary+maize+glucosylceramide+in+lymphatic+duct+cannulated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Intestinal absorption of dietary maize glucosylceramide in lymphatic duct cannulated rats.</a> J. Lipid Res. 51 (7), 1761-1769 (2010).</li>
<li>Shackleford, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+lymphatically+transported+testosterone+undecanoate+to+the+systemic+exposure+of+testosterone+after+oral+administration+of+two+andriol+formulations+in+conscious+lymph+duct-cannulated+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">Contribution of lymphatically transported testosterone undecanoate to the systemic exposure of testosterone after oral administration of two andriol formulations in conscious lymph duct-cannulated dogs.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 306 (3), 925-933 (2003).</li>
<li>Lespine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+lymphatic+transport+to+the+systemic+exposure+of+orally+administered+moxidectin+in+conscious+lymph+duct-cannulated+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharm.+Sci%22%5BJournal%5D)">Contribution of lymphatic transport to the systemic exposure of orally administered moxidectin in conscious lymph duct-cannulated dogs.</a> Eur. J. Pharm. Sci. 27 (1), 37-43 (2006).</li>
<li>Carr, J., Carr, I., Dreher, B., Betts, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+metastasis%3A+invasion+of+lymphatic+vessels+and+efflux+of+tumour+cells+in+the+afferent+popliteal+lymph+as+seen+in+the+Walker+rat+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Lymphatic metastasis: invasion of lymphatic vessels and efflux of tumour cells in the afferent popliteal lymph as seen in the Walker rat carcinoma.</a> J. Pathol. 132 (4), 287-305 (1980).</li>
<li>Bennell, M. A., Husband, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Route+of+lymphocyte+migration+in+pigs.+I.+Lymphocyte+circulation+in+gut-associated+lymphoid+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Route of lymphocyte migration in pigs. I. Lymphocyte circulation in gut-associated lymphoid tissue.</a> Immunology. 42 (3), 469-474 (1981).</li>
<li>Knight, J. S., Baird, D. B., Hein, W. R., Pernthaner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gastrointestinal+nematode+Trichostrongylus+colubriformis+down-regulates+immune+gene+expression+in+migratory+cells+in+afferent+lymph%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">The gastrointestinal nematode Trichostrongylus colubriformis down-regulates immune gene expression in migratory cells in afferent lymph.</a> BMC Immunol. 11, 51(2010).</li>
<li>Milling, S. W., Jenkins, C., MacPherson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection+of+lymph-borne+dendritic+cells+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Collection of lymph-borne dendritic cells in the rat.</a> Nat. Protoc. 1 (5), 2263-2270 (2006).</li>
<li>Pernthaner, A., Cole, S. A., Gatehouse, T., Hein, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+diversity+of+antigen-presenting+cells+in+ovine-afferent+intestinal+lymph%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Med.+Res%22%5BJournal%5D)">Phenotypic diversity of antigen-presenting cells in ovine-afferent intestinal lymph.</a> Arch. Med. Res. 33 (4), 405-412 (2002).</li>
<li>Thielke, K. H., Pabst, R., Rothkotter, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+proliferating+lymphocyte+subsets+appearing+in+the+intestinal+lymph+and+the+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Quantification of proliferating lymphocyte subsets appearing in the intestinal lymph and the blood.</a> Clin. Exp. Immunol. 117 (2), 277-284 (1999).</li>
<li>Mayrhofer, G., Fisher, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA-containing+plasma+cells+in+the+lamina+propria+of+the+gut%3A+failure+of+a+thoracic+duct+fistula+to+deplete+the+numbers+in+rat+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">IgA-containing plasma cells in the lamina propria of the gut: failure of a thoracic duct fistula to deplete the numbers in rat small intestine.</a> Eur. J. Immunol. 9 (1), 85-91 (1979).</li>
<li>Beh, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+IgA-containing+cells+in+intestinal+lymph+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Aust.+J.+Exp.+Biol.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The origin of IgA-containing cells in intestinal lymph of sheep.</a> Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 55 (3), 263-274 (1977).</li>
<li>Bennell, M. A., Husband, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Route+of+lymphocyte+migration+in+pigs.+II.+Migration+to+the+intestinal+lamina+propria+of+antigen-specific+cells+generated+in+response+to+intestinal+immunization+in+the+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Route of lymphocyte migration in pigs. II. Migration to the intestinal lamina propria of antigen-specific cells generated in response to intestinal immunization in the pig.</a> Immunology. 42 (3), 475-479 (1981).</li>
<li>Rothkotter, H. J., Huber, T., Barman, N. N., Pabst, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphoid+cells+in+afferent+and+efferent+intestinal+lymph%3A+lymphocyte+subpopulations+and+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Lymphoid cells in afferent and efferent intestinal lymph: lymphocyte subpopulations and cell migration.</a> Clin. Exp. Immunol. 92 (2), 317-322 (1993).</li>
<li>Vilahur, G., Padro, T., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis+and+thrombosis%3A+insights+from+large+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis and thrombosis: insights from large animal models.</a> J. Biomed. Biotechnol. 1, (2011).</li>
<li>Getz, G. S., Reardon, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb.+Vasc.+Biol%22%5BJournal%5D)">Animal models of atherosclerosis.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 32 (5), 1104-1115 (2012).</li>
<li>Skold, B. H., Getty, R., Ramsey, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+atherosclerosis+in+the+arterial+system+of+aging+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Spontaneous atherosclerosis in the arterial system of aging swine.</a> Am. J. Vet. Res. 27 (116), 257-273 (1966).</li>
<li>Reiser, R., Sorrels, M. F., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+high+levels+of+dietary+fats+and+cholesterol+on+atherosclerosis+and+lipid+distribution+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of high levels of dietary fats and cholesterol on atherosclerosis and lipid distribution in swine.</a> Circ. Res. 7, 833-846 (1959).</li>
<li>Casani, L., Sanchez-Gomez, S., Vilahur, G., Badimon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pravastatin+reduces+thrombogenicity+by+mechanisms+beyond+plasma+cholesterol+lowering%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb.+Haemost%22%5BJournal%5D)">Pravastatin reduces thrombogenicity by mechanisms beyond plasma cholesterol lowering.</a> Thromb. Haemost. 94 (5), 1035-1041 (2005).</li>
<li>Romosos, D. R., McGilliard, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+thoracic+and+intestinal+lymph+duct+shunts+in+calves%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Dairy+Sci%22%5BJournal%5D)">Preparation of thoracic and intestinal lymph duct shunts in calves.</a> J. Dairy Sci. 53 (9), 1275-1278 (1970).</li>
<li>Shannon, A. D., Lascelles, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intestinal+and+hepatic+contributions+to+the+flow+and+composition+of+thoracic+duct+lymph+in+young+milk-fed+calves%5BTitle%5D)+AND+%22Q.J.+Exp.+Physiol.+Cogn.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">The intestinal and hepatic contributions to the flow and composition of thoracic duct lymph in young milk-fed calves.</a> Q.J. Exp. Physiol. Cogn. Med. Sci. 5 (2), 194-205 (1968).</li>
<li>Aliev, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+lymph+of+ruminants.+I.+Operative+techniques+for+collecting+intestinal+lymph+from+ruminants%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet.Hung%22%5BJournal%5D)">Intestinal lymph of ruminants. I. Operative techniques for collecting intestinal lymph from ruminants.</a> Acta Vet.Hung. 38 (1-2), 105-120 (1990).</li>
<li>Butterfield, A. B., Lumb, W. V., Litwak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+preparation+of+miniature+swine+for+atherosclerosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Surgical preparation of miniature swine for atherosclerosis research.</a> Am. J. Vet. Res. 37 (12), 1519-1523 (1976).</li>
<li>Saar, L. I., Getty, R. Lymphatic system. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSaar%2C+LI+%22Sisson+and+Grossman%27s%3A+The+anatomy+of+domestic+animals%22">Sisson and Grossman's: The anatomy of domestic animals</a>. 2, W. B. Saunders Company. Philadelphia PA. 1343-1358 (1975).</li>
<li>Zanchet, D. J., de Souza Montero, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+liver+sectorization+and+segmentation+and+virtual+reality+depiction%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Cirurgica.+Basilera%22%5BJournal%5D)">Pig liver sectorization and segmentation and virtual reality depiction.</a> Acta. Cirurgica. Basilera. 17 (6), 382-387 (2002).</li>
<li>Vine, D. F., Takechi, R., Russell, J. C., Proctor, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+postprandial+apolipoprotein-B48+metabolism+in+the+obese%2C+insulin-resistant+JCR%3ALA-cp+rat%3A+increased+atherogenicity+for+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Impaired postprandial apolipoprotein-B48 metabolism in the obese, insulin-resistant JCR:LA-cp rat: increased atherogenicity for the metabolic syndrome.</a> Atherosclerosis. 190 (2), 282-290 (2007).</li>
<li>Li, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+properties+of+ascending+aorta+and+pulmonary+trunk+in+pigs+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">Biomechanical properties of ascending aorta and pulmonary trunk in pigs and humans.</a> Xenotransplantation. 15 (6), 384-389 (2008).</li>
<li>Arkill, K. P., Moger, J., Winlove, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+mechanical+properties+of+collecting+lymphatic+vessels%3A+an+investigation+using+multimodal+nonlinear+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">The structure and mechanical properties of collecting lymphatic vessels: an investigation using multimodal nonlinear microscopy.</a> J. Anat. 216 (5), 547-555 (2010).</li>
<li>Uwiera, R. R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmid+DNA+induces+increased+lymphocyte+trafficking%3A+a+specific+role+for+CpG+motifs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Plasmid DNA induces increased lymphocyte trafficking: a specific role for CpG motifs.</a> Cell. Immunol. 214 (2), 155-164 (2001).</li>
<li>Black, D. D., Davidson, N. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+apolipoprotein+synthesis+and+secretion+in+the+suckling+pig%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Intestinal apolipoprotein synthesis and secretion in the suckling pig.</a> J. Lipid Res. 30 (2), 207-218 (1989).</li>
<li>Heider, J. G., Pickens, C. E., Lawrence, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+acyl+CoA%3Acholesterol+acyltransferase+in+cholesterol+absorption+and+its+inhibition+by+57-118+in+the+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Role of acyl CoA:cholesterol acyltransferase in cholesterol absorption and its inhibition by 57-118 in the rabbit.</a> J. Lipid Res. 24, 1127-1134 (1983).</li>
<li>Noh, S. K., Koo, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+sphingomyelin+is+more+effective+than+egg+sphingomyelin+in+inhibiting+intestinal+absorption+of+cholesterol+and+fat+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Milk sphingomyelin is more effective than egg sphingomyelin in inhibiting intestinal absorption of cholesterol and fat in rats.</a> J. Nutr. 134, 2611-2616 (2004).</li>
<li>Brunham, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+ABCA1+directly+contributes+to+HDL+biogenesis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Intestinal ABCA1 directly contributes to HDL biogenesis in vivo.</a> J. Clin. Invest. 116 (4), 1052-1062 (2006).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het verzamelen van intestinale lymfe is een uitstekende methode om de mechanismen die betrokken zijn bij lipiden 8-12 en drugs 13-15 stofwisseling, kanker metastase 16,17, mobiele handel en het immuunsysteem 18-26, in verschillende experimentele diermodellen onderzoeken. Inderdaad, de mogelijkheid om grote hoeveelheden hetzij perifere (afferente) en centrale (efferente vaten en grote koffer) lymfe oogsten gedurende langere bijzonder belang zijn voor het begrijpen van tijdelijk...

Het lymfestelsel is een weinig bestudeerd gebied van fysiologie. Preklinische modellen van lymfatische catheterisatie voorkomen in verschillende diersoorten 1-8 en worden gebruikt door de farmaceutische industrie en onderzoeksinstellingen om de mechanismen die betrokken zijn bij lipiden 8-12 en drugs metabolisme 13-15, kanker metastase 16 met experimentele behandeling 17 te onderzoeken, en het immuunsysteem 18 -26. Deze studie onderzoekt het gebruik van intestinale lymfe trunk catheterisatie in een binnenlandse varken model van onderdelen van lipoproteïne metabolisme te meten. Lipoproteïnemetabolisme is betrokken bij de productie en uitscheiding van chylomicronen, evenals veranderingen in geassocieerde lipiden en totaal eiwit. Dit zijn belangrijke overwegingen zijn er grote verschillen tussen vetmetabolisme gebruikte diermodellen en mensen en als zodanig dienst varkens modellen voor intestinale lymfe verzamelen kon meer vergelijkbare informatie voor het bestuderen lipide metabolism bij mensen 27-31. Verschillende chirurgische technieken worden gebruikt om de intestinale lymfe in grote diersoorten verzamelen: craniaal schouder aanpak (ductus thoracicus catheterisatie) 5, een zijdelingse bovenste flank benadering 32-34 en een ventrale middellijn of paramediane benadering 22,35. Deze video beschrijft in detail de chirurgische procedure bij varkens met een ventrale middellijn chirurgische benadering voor de katheterisatie van de intestinale lymfe stam. Zorgvuldige chirurgische techniek toelaat Werkwijze lymfatische katheterisatie grote hoeveelheden lymfe en de bestanddelen laat gedurende langere tijdsperioden. Deze techniek opent een groot aantal toepassingen voor vele disciplines onderzoekt verschillende fysiologische functies. Toepassingen kunnen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, hele lichaam lipoproteïne en lipidemetabolisme, immunosurveillance, tumor- genese en metastase, darmfunctie, en ontwikkeent en progressie van intestinale ontstekingsziekte.

<table><tbody><tr><td>Miller laryngoscope blade</td><td>Welch Allyn</td><td>68044</td><td>182 mm lengte</td></tr><tr><td>Surgivet advisor: Vital signs monitor</td><td>Surgivet</td><td>V9203</td><td></td></tr><tr><td>Rectale temperatuur sonde</td><td>Surgivet</td><td>V3417</td><td></td></tr><tr><td>Mono-polaire elektrochirurgie generator</td><td>Valley Lab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum schaar</td><td>Fine Science</td><td>14518-18</td><td></td></tr><tr><td>Tuffier retractor</td><td>Stevens</td><td>162-11-676</td><td></td></tr><tr><td>Mosquito forceps</td><td>Stevens</td><td>162-7-10</td><td></td></tr><tr><td>Kelly forceps-gebogen (14cm)</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Allis weefsel forceps</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Forceps dressing-eye (10.2cm)</td><td>Stevens</td><td>162-18-780</td><td></td></tr><tr><td>Forceps dressing-Adison (12.1cm)</td><td>Stevens</td><td>162-17-2510</td><td></td></tr><tr><td>Naald drivers</td><td>Stevens</td><td>162-V98-42</td><td></td></tr><tr><td>Iris schaar</td><td>Fine science</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>Circulerende waterpomp</td><td>Jorvet</td><td>J-783X</td><td></td></tr><tr><td>Maxitherm-Vinyl deken</td><td>Jorvet</td><td>J-784C</td><td></td></tr><tr><td>Q tip applicatoren</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-037-960</td><td></td></tr><tr><td>Catheterisatie  slang (4.06 OD X 2.31 ID)</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-160</td><td>Micro-Renethane implantatie slang</td></tr><tr><td>2-0 zijde hechting</td><td>Ethicon</td><td>LA556</td><td></td></tr><tr><td>2-0 polyglactin hechting</td><td>Ethicon</td><td>J443H</td><td>2-0 vicryl</td></tr><tr><td>Grote dieren jas</td><td>Lomir Biomedical Inc.</td><td>SSJ2YC</td><td></td></tr><tr><td>Polypropyleen wasflessen</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-409-22C</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Penicilline-Streptomycine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4333</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma Aldrich</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2411</td><td></td></tr><tr><td>Azaperone</td><td>Elanco Animal Health</td><td></td><td>Stresnil</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>6295</td><td>Dexdomitor</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott Animal&nbsp; Health</td><td>05260-5</td><td>IsoFlo</td></tr><tr><td>Ketamine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>2626</td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>Bupenorfine hydrochloride</td><td>Champion Alstoe Animal Health</td><td></td><td>DIN:02347510</td></tr><tr><td>6 mm Endotracheale buis</td><td>Jorvet</td><td>J-165d</td><td></td></tr><tr><td>10% Lidocaine spray</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>DIN:02003767</td></tr><tr><td>4 % Chlorhexidine chirurgische scrub</td><td>Partnar Animal Health</td><td>PCH-011</td><td>Verdund: 2.0% oplossing</td></tr><tr><td>3M Chirurgische steri- drape</td><td>3M Health Care</td><td>1040</td><td></td></tr><tr><td>SDS page gel</td><td>Invitrogen</td><td>EA0375BOX</td><td>3-8 % tris acetaat</td></tr><tr><td>Polyvinylideenfluoride membraan</td><td>Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>0.45 &mu;m poriegrootte</td></tr><tr><td>ApoB antilichaam&nbsp;</td><td>EMD Millipore</td><td>AB742</td><td>1:4000 verdunning</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat IgG-HRP</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>Sc-2304</td><td></td></tr><tr><td>ECL Prime Western Blotting Reagens</td><td>GE Healthcare LifeSciences</td><td>RPN2232&nbsp;&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Triglyceride Kit</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>998-40391/994-40491</td><td></td></tr><tr><td>Total Cholesterol Kit</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>439-17501</td><td></td></tr><tr><td>Totale Eiwit</td><td>&nbsp;Pierce&nbsp;</td><td>23225</td><td>Bicinchoninic Zuur Assay</td></tr></tbody></table>

long-term catheterisatie van de intestinale lymfe stam en verzamelen van lymfe in neonatale pigs

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

De katheterisatie van de intestinale lymfetrunk bij neonatale varkens is een techniek die de langetermijnverzameling van grote hoeveelheden intestinale (centrale) efferente lymfe mogelijk maakt. Belangrijk is dat de verzameling van centrale lymfe uit het darmkanaal onderzoekers in staat stelt zowel de mechanismen als lipide bestanddelen geassocieerd met lipidemetabolisme, intestinale ontsteking en kankermetastase, evenals cellen betrokken bij immuunfunctie en immuuntoezicht te bestuderen. Een ventrale middenlijn chirurgische aanpak biedt uitstekende chirurgische zichtbaarheid op de cranale buik en relatief gemakkelijke toegang tot de intestinale lymfetrunk vaat die dicht bij de alvleesklier en het rechter ventrale segment van de poortader onder de viscerale kant van de rechter leverkwab ligt. De vaat wordt zorgvuldig gedissecteerd en vrijgemaakt van de omliggende fascia en vervolgens verbreed met hechtingen waardoor het mogelijk is om de katheter in de vaat in te brengen en vervolgens vast te zetten. De katheter wordt geëxterioriseerd en ongeveer 1 L/24 uur aan lymfe wordt verzameld over een periode van 7 dagen. Hoewel deze techniek de verzameling van grote hoeveelheden centrale lymfe over een langere periode mogelijk maakt, hangt het succes af van zorgvuldige chirurgische dissectie, weefselbehandeling en nauwe aandacht voor de juiste chirurgische techniek. Dit is vooral belangrijk bij operaties bij jonge dieren, aangezien de lymfevaten gemakkelijk kunnen scheuren, wat mogelijk leidt tot chirurgisch en experimenteel falen. De video demonstreert een uitstekende chirurgische techniek voor de verzameling van intestinale lymfe.

<html> Lymfatische catheterisatie van de intestinale lymfatische kofferbak van neonatale varkens maakt verzameling van circa 1 l / 24 uur in het centrum van lymfe over een periode van 7 dagen. De gegevens die in deze experimenten lymfe bevatte componenten van vetmetabolisme, namelijk totale lymfe eiwit, lipoproteïne ApoB48, triglyceriden, totaal eiwit en cholesterol. Tabel 1 wat representatieve hoeveelheden van deze lipide bestanddelen uit samengevoegde monsters lymfe drie varkens. Met na...

We presenteren een chirurgische procedure om de intestinale lymfe-lymfeklier bij neonatale varkens te kateteriseren om grote hoeveelheden componenten van het lipidenmetabolisme uit efferente lymfe te verzamelen.

Long-Term catheterisatie van de intestinale Lymfe Stam en verzamelen van lymfe in Neonatale Pigs

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

Lymfatische catheterisatie is een belangrijke techniek die wordt gebruikt om mechanismen te onderzoeken die betrokken zijn bij lipiden- en geneesmiddelenmetabolisme, kankermetastasen en immuunfuncties; het verzamelen van grote hoeveelheden lymfe uit diverse diermodellen stelt onderzoekers in staat om deze processen te bestuderen. De video demonstreert in detail de chirurgische procedure die wordt toegepast om de intestinale lymfatische stam bij pasgeboren varkens te catheteriseren via een ventrale middenlijnbenadering. Alle procedures zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van de University of Alberta.Om toegang te krijgen tot het lymfevat werd de buikholte geopend. Er werd gebruikgemaakt van elektrocoagulatie op de snijstand om de spierlaag te openen. Er werd een retractor geplaatst om de buikwand gedurende de procedure open te houden.Belangrijke abdominale organen worden geïdentificeerd om te helpen bij het lokaliseren van het lymfevat. Voor een betere toegang tot het lymfevat worden segmenten van de dunne darm en het colon naar de linkerkant van het lichaam geëxterioriseerd. Het lymfevat wordt gelokaliseerd door de lever en het rechter ventrale segment van de poortader te identificeren.Bij pasgeboren varkens zijn de lymfevaten fragiel en scheuren ze gemakkelijk, waardoor zorgvuldige dissectie met wattenstaafjes en stompe instrumenten vereist is. Hier is het intestinale lymfevat. Nu wordt de hechtdraad met een stompe pincet onder het lymfevat doorgevoerd.Er zijn nu drie 2-0 zijden hechtingen onder het lymfevat doorgevoerd. De meest caudale hechting wordt gebruikt om het vat te dilateren en de katheter aan het vat te bevestigen. De craniale hechtingen worden gebruikt om de katheter in het vat te fixeren.Een kleine incisie in het lymfevat maakt het mogelijk om het vat met stompe pincetten te dilateren. De katheter wordt in het vat ingebracht. Dit moet voorzichtig gebeuren om te voorkomen dat het lymfevat scheurt.De katheter moet voorbij de meest craniale naad worden voortgestuwd om te garanderen dat deze goed is geplaatst. De drie 2-0 zijden hechtingen fixeren de katheter in het lymfevat. Belangrijk is dat de twee craniale hechtingen eerst worden gebruikt om de katheter in het vat te fixeren en de meest caudale hechting vervolgens wordt gebruikt om de katheter te verankeren, wat voor extra stabiliteit zorgt.Het is belangrijk om te waarborgen dat er een goede lymfestroom is voordat de buikholte wordt gesloten. De katheter wordt geëxterioriseerd op de linker middenflank van het varken. Grote pincetten worden gebruikt om de katheter vanuit de buikholte naar het buitenoppervlak van de flank van het varken te trekken.De spierlagen worden gesloten met 2-0 vicrylhechtdraad op een taps toelopende naald in een enkelvoudig onderbroken hechtingpatroon. De huid wordt gesloten met 2-0 vicrylhechtdraad op een snijnaald in een doorlopend subcuticulair hechtingpatroon. Bij de uitgangincisie gaat de katheter door de huid en wordt deze gesloten met 2-0 nylonhechtdraad op een snijnaald in een purse-string hechtingpatroon.Deze afsluiting helpt te voorkomen dat opstijgende infecties via de katheter naar binnen trekken. Het jasje waarin de flessen voor lymfecollectie zijn geplaatst, wordt om het varken aangebracht terwijl het dier nog onder anesthesie is. De katheter wordt in de collectiefles ingebracht en een goede lymfestroom wordt gewaarborgd voordat het varken wordt wakker gemaakt.De varkens herstellen goed van de procedure en er wordt gedurende het gehele experiment een uitstekende lymfestroom behouden. De tabel toont de componenten van de uit het lymfevat verzamelde lymfe. Deze componenten omvatten Apolipoproteïne B48, triglyceriden en cholesterol.De Western Blot-figuur toont de aanwezigheid van zowel Apolipoproteïne B48 als kleine hoeveelheden plasmagericht Apolipoproteïne B100 binnen het verzamelde lymfemonster. Hoewel lymfecatheterisatie bij jonge varkens technisch uitdagend kan zijn, aangezien de lymfevaten zowel fragiel als broos zijn, demonstreert deze video dat het gebruik van een correcte en zorgvuldige chirurgische techniek bij jonge varkens onderzoekers kan voorzien van een uitstekend model voor het verzamelen van intestinale lymfe.

long-term-catheterization-intestinal-lymph-trunk-collection-lymph

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Beschrijven we een nieuwe chirurgische methode voor catheterizing 'darm loops' in het ileum van schapen. Zodra de dieren hebben zich hersteld van een operatie en hebben opgeruimd antibiotica en pijnstillers, kunnen meerdere behandelingen direct worden gestort in lussen via de katheters.

Catheterisatie van de intestinale Loops bij herkauwers

This video demonstrates a technique to cannulate the mesenteric lymph duct in rats. This method enables direct access to the entire volume of components present in the lymph fluid.

Mesenteric Lymph Duct Cannulation in a Rat Model to Harvest Lymph Fluid

Hier beschrijven we een techniek om de mesenteriale lymfevat te canuleren bij ratten, wat de kwantificering van lipiden- en geneesmiddeltransport via het lymfestelsel mogelijk maakt na intestinale toediening. De techniek kan worden aangepast om mesenteriale lymfeconcentraties en/of transport van vocht, immuuncellen, peptiden, eiwitten en lipofiele moleculen te beoordelen.

De Mesenteriale Lymfe Duct gecanuleerde Rat Model: Toepassing op de beoordeling van Intestinal Lymfatische Drug Transport

Hier beschrijven we een nauwkeurige methode voor het verzamelen van thoracale kanaallymfocyten en het observeren van de migratie van darm-tropenlymfocyten in de patches van rat Peyer gedurende 3 uur met behulp van time-lapse fotografie. Deze techniek kan verduidelijken hoe de dynamiek van lymfocyten wordt beïnvloed onder inflammatoire omstandigheden.

Microscopische observatie van lymfocytendynamiek in rat Peyer's patches

Het huidige protocol beschrijft een gedetailleerd chirurgisch protocol voor het isoleren van stromende darmlymfe als reactie op intraduodenale voedingsinfusies bij muizen. Dit maakt de fysiologische bepaling van de totale intestinale lipideabsorptie en chylomicronsynthese en -secretie mogelijk als reactie op verschillende experimentele voedingsstoffen.

De isolatie van stromende mesenteriale lymfe bij muizen om in vivo kinetiek van lipideabsorptie in de voeding en chylomicronsecretie te kwantificeren

Er wordt een betrouwbare en reproduceerbare aanpak beschreven voor het inbrengen en onderhouden van een getunnelde Hickman-katheter voor langdurige vasculaire toegang bij varkens. Het plaatsen van een centraal veneuze katheter zorgt voor een gemakkelijke dagelijkse bemonstering van volbloed van wakkere dieren en intraveneuze toediening van medicatie en vloeistoffen.

Hickman-kathetergebruik voor langdurige vasculaire toegang in een preklinisch varkensmodel

Dit protocol beschrijft de ontwikkeling van een neonataal biggenmodel van acuut longletsel dat vroege pathogene gebeurtenissen modelleert die optreden in de premature long, waaronder een subadequate hoeveelheid oppervlakteactieve stoffen, hyperoxie, hogedrukventilatie en ontsteking, om het begrip van moleculaire triggers van bronchopulmonale dysplasie te vergemakkelijken en de therapeutische vertaling te verbeteren.

Ontwikkeling van een model voor acuut longletsel bij neonatale biggen dat de vroege omgeving van te vroeg geboren longen nabootst

Dit experimentele protocol demonstreert een diep cervicaal lymfebuis-canulemodel dat directe en kwantitatieve beoordeling van lymfedrainage vanuit het hoofdgebied mogelijk maakt. Het model faciliteert gedetailleerde analyse van door het centrale zenuwstelsel (CZS) afgeleide opgeloste stoffen, populaties immuuncellen en de distributie en klaring van op het CZS gerichte therapieën.

Cervicale lymfebuis-gecoruleerde rat-model voor het beoordelen van lymfetransport vanuit het hoofd en de hersenen

Dit experimentele protocol beschrijft een leverlymfebuis-gecanuleerd rattenmodel dat directe en kwantitatieve beoordeling van leverlymfatische en vaatdrainage mogelijk maakt. Het model maakt gelijktijdige bemonstering van leverlymfe en systemisch bloed mogelijk om levertransport, metabolisme en immuunsignalering te onderzoeken, ter ondersteuning van studies naar geneesmiddelfarmacokinetiek en leverspecifieke biologie.

Een uitgebreid rattenmodel voor het beoordelen van levertransportroutes door gelijktijdige lymfatische en bloedvaatbemonstering

Fluorescentie beeldvorming is een veelbelovende innovatieve modaliteit voor beeld-geleide operatie in de chirurgische oncologie. In deze video beschrijven we de technische procedure voor de detectie van de schildwachtklier met behulp van fluorescentie beeldvorming als tentoongesteld in gynaecologische oncologicy. Een multispectrale fluorescentie camera-systeem, in combinatie met de fluorescerende stof groene Indocyanine, wordt toegepast.

Multispectrale Real-time Fluorescentie Imaging voor intra-operatief detectie van de schildwachtklier in gynaecologische oncologie

Leer de chirurgische techniek voor langdurige catheterisatie van de intestinale lymfestam bij neonatale varkens. Deze methode maakt verzameling van lymfe mogelijk voor onderzoek naar lipidenmetabolisme en geneesmiddelverwerking.

Long-Term catheterisatie van de intestinale Lymfe Stam en verzamelen van lymfe in Neonatale Pigs

Meer video's verkennen