Name: Weefsel karakterisering na een New Uitsplitsing Methode voor de huid Micro-Enten Generation (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Leer een nieuwe chirurgische methode om autologe huidmicro-transplantaten te maken voor directe wondgenezing. Deze techniek behoudt celviabiliteit en biedt een betaalbare oplossing voor chronische wonden en brandwonden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs willen bedanken Dr. Federica Zanzottera om bij te dragen aan de studie uitvoeren van flowcytometrie-analyse.

Ethiek statement: sinds de klinische toepassing van het protocol het gebruik van cutane autoloog weefsel van de patiënt vereist, de karakterisering in vitro werd uitgevoerd voor klinisch gebruik op homologe huidweefsel in Emilia Romagna Regionale Skin Bank volgens de richtlijnen van de nationale regels inzake de oogst, verwerking en distribueren van weefsels voor transplantatie (CNT 2013). 1. Bio-complex Building for Clinical Application Opmerking: Dit protocol is klinisch gebaseerd op het gebruik van Rigeneracons (weefsel verbreker) en Rigenera Machine (weefsel verbreker systeem) (figuur 1A). Het weefsel verbreker is een biologisch medische disruptor van menselijke weefsels kunnen kleine stukjes weefsel gebruik van een matrix door hexagonale bladen en filtering cellen en componenten van de extracellulaire matrix met een cut-off van ongeveer 50 micron verstoren. <ol><li> Verzamel skinsamples van de patiënt door een biopsy punch (Figuur 1B) en splitsen het toevoegen van 1 ml zoutoplossing voor elk stuk op autologe micro-transplantaten 6,7,9 te verkrijgen (of zie stap 2.1). </li><li> Plaats 1 ml micro-grafts collageensponzen (figuur 1C) toform bio-complexen gebruikt voor klinische toepassing. </li><li> Cultuur nog 1 ml van micro-grafts collageensponzen in aanwezigheid van 6 ml DMEM medium aangevuld met 10% foetaal runderserum bij 37 ° C in een 5% CO2 bevochtigde atmosfeer. </li><li> Na 3 dagen kweken, bevestig de bio-complexen met 0,3% paraformaldehyde gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Giet de paraffine met een specifieke dispenser direct op het monster. Verkrijgen plakjes met een microtoom met een dikte van 5 urn en zet direct in een glazen dia. </li><li> Dompel paraffine plakjes 5 urn in een glas voor histologische analyse, die 15 - 20 ml xyleen (in de handel verkrijgbaar - een mengsel van m-xyleen (40-65%), p-xyleen (20%), o-xyleen (20% ) en ethyl benzeen (6-20%) en sporen tolueen, trimethylbenzeen, fenol, thiofeen, pyridine en waterstofsulfide) gedurende 3 min elk. </li><li> Dompel de plakjes afnemende graden (100% tot 70%) van ethanol (100% ethanol gedurende 1 uur, 95% ethanol gedurende 1 uur, 80% ethanol gedurende 1 uur, 70% ethanol gedurende 1 uur) en daarna gedeïoniseerd water voor de-paraffinizing en hydrateren de secties. </li><li> Vlekken op de secties met 1-2 ml van 1 g / L Ematoxylin voor 1-2 min en vervolgens spoelen met water om eventuele Ematoxylin overschot te verwijderen. </li><li> Vlekken op de afdelingen 4-5 min met Eosine Y alcoholische oplossing met 1% concentratie gemengd met ethanol 70% en verdund in water. </li><li> Gebruik 1-2 ml Eosine Y voor elke dia sectie en onder stromend water uit de kraan. </li><li> Dompelen secties in toenemende graden van ethanol (zie stap 1,6) en tenslotte, na een passage in xyleen gedurende 1 uur, met een dekglaasje gebaseerde montage op middellange en waarnemen onder een lichtmicroscoop bij 100x vergroting (figuur 1D). </li> &lt;/ Ol&gt; 2. Collection, Uitsplitsing en in vitro analyse van de weefsels <ol><li> Met een dermatoom, neem onafhankelijk huidweefsel, papillaire dermis-de epidermized (DED) of reticulaire dermis (lederhuid) respectievelijk 0,6 mm, 1 mm of 2 mm in dikte van de bagageruimte van 4 verschillende meerdere organen en / of multi- weefsel donoren in een range 40-55 jaar, naar aanleiding van de nationale regels inzake de oogst, verwerking en distributie van weefsels voor transplantatie (CNT 2013). <ol><li> Voorzichtig spoelen alle monsters in 0,9% NaCl-oplossing ze in een schotel op een orbitale schudder gedurende 5 min. </li><li> Met behulp van de 5-mm biopsie punch, steekproeven die uniform zijn in diameter van het huidweefsel, Ded en Dermis en wegen alle weefselmonsters voor de opsplitsing. </li><li> Invoegen acht, drie of vier gelijkmatige monsters van huidweefsel, Ded respectievelijk Dermis in het weefsel verstorende voegen 1,5 ml zoutoplossing voor de disaggregatie. </li><li> uitvoeren van verschillendetijden van uitsplitsing voor weefselmonsters zoals aangegeven in tabel 1. </li><li> Gebruik een correspondent aantal punch biopten afkomstig uit intacte weefselmonsters als controles. </li><li> Na mechanische disaggregatie, zuigen de zoutoplossing die micro-grafts en apart plaats elk monster in een enkel putje van een 12-wells plaat. Voer dezelfde protocol voor intact controle punch biopsieën. </li><li> 1 ml RPMI 1640 medium aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS) en antibiotica aan elk monster toegevoegd. </li><li> Evalueer de levensvatbaarheid cel onmiddellijk. Aan elk putje met een micro-graft (respectievelijk verkregen door de gelijktijdige onderverdeling van acht, drie of vier gelijkmatige monsters van huidweefsel, Ded of Dermis) voeg 1 ml medium bevattende 0,5 mg / ml MTT (3- [4,5- dimethylthiazol-2-yl] -2,5- difenyltetrazoliumbromide) oplossing en incubeer gedurende 3 uur bij 37 ° C in een atmosfeer van 5% CO2 / lucht. Voer dezelfde protocol voor intact controlepunch biopsieën. </li><li> Na incubatie, verwijder alle medium dat MTT en toe te voegen aan elk monster 1 ml dimethylsulfoxide (DMSO) gedurende 10 min. </li><li> Transfer elk monster en DMSO in een cuvet en afgelezen bij optische dichtheid (OD) bij 570 nm met een spectrofotometer. Bereken cellevensvatbaarheid als de verhouding van de absorptie bij 570 nm en het gewicht in grammen (g) weefsel gebruikt voor disaggregatie. Voer dezelfde protocol voor intact controle punch biopsieën. </li></ol></li><li> Na mechanische disaggregatie, zuigen de zoutoplossing die micro-graft afgeleid van huidweefsel, Ded en Dermis monsters van een enkele donor. <ol><li> Plaats elk monster afzonderlijk in een enkel putje van een 12-well plaat of in een kolf voor cellevensvatbaarheid testen en morfologische analyse resp. </li><li> Cultuur micro-grafts toevoegen van 1 ml (12-well plaat) of 5 ml (kolf) RPMI 1640 medium aangevuld met 10% FBS en antibiotica bij 37 ° C in een atmosfeer van 5% CO2 / air 24 uur en 7 dagen. </li><li> Evalueer de levensvatbaarheid van de cellen na 24 uur of 7 dagen (herhaal stappen 2.1.8-2.1.10). </li><li> Uitvoeren morfologische analyse evalueren van de aanwezigheid van de celsuspensie met lichtmicroscopie na 24 h en 7 dagen kweken in kolf. </li><li> Analyseer de monsters Dermis positiviteit voor de mesenchymale en hematopoietische cel markers, zoals CD146, CD34 en CD45 antigenen door FACS analyse 6. </li><li> Onder laminaire stroming kap zaad elk micro-graft (verkregen door de gelijktijdige onderverdeling van acht, drie of vier gelijkmatige monsters van huidweefsel, respectievelijk Ded of dermis) en een correspondent kleine fragment van elk weefselmonster niet volledig uitgesplitste (&gt; 50 micron na het uiteenvallen proces) op Columbia agar plaat die 5% schapen bloed bouillon 100 pl. </li><li> Incubeer de plaat bij 37 ° C gedurende drie dagen en microbiologische analyses uitgevoerd op Columbia agar plaat om de steriliteit te beoordelen 11. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skin+wounds%3A+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair Regen. 17, 763-771 (2009).</li>
<li>Ellis, E. III, Sinn, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+homologous+bone+grafts+in+maxillofacial+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Maxillofac+Surg%22%5BJournal%5D)">Use of homologous bone grafts in maxillofacial surgery.</a> J Oral Maxillofac Surg. 51, 1181-1193 (1993).</li>
<li>Nguyen, A., Pasyk, K. A., Bouvier, T. N., Hassett, C. A., Argenta, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+survival+of+autologous+adipose+tissue+taken+and+transplanted+by+different+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Sur%22%5BJournal%5D)">Comparative study of survival of autologous adipose tissue taken and transplanted by different techniques.</a> Plast Reconstr Sur. 85, 378-389 (1990).</li>
<li>Abuzeni, P. Z., Alexander, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+Autologous+Fat+Transplantation+With+Platelet+Rich+Plasma%5BTitle%5D)+AND+%22AJCS%22%5BJournal%5D)">Enhancement of Autologous Fat Transplantation With Platelet Rich Plasma.</a> AJCS. 18 (2), 59-70 (2001).</li>
<li>Trovato, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+Medical+Device+Rigeneracons+Allows+to+Obtain+Viable+Micro-Grafts+from+Mechanical+Disaggregation+of+Human+Tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">A New Medical Device Rigeneracons Allows to Obtain Viable Micro-Grafts from Mechanical Disaggregation of Human Tissues.</a> J Cell Physiol. , (2015).</li>
<li>Zanzottera, F., Lavezzari, E., Trovato, L., Icardi, A., Graziano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+Derived+Stem+Cells+and+Growth+Factors+Applied+on+Hair+Transplantation+Follow-Up+of+Clinical+Outcome%5BTitle%5D)+AND+%22JCDSA%22%5BJournal%5D)">Adipose Derived Stem Cells and Growth Factors Applied on Hair Transplantation Follow-Up of Clinical Outcome.</a> JCDSA. 4 (4), 268-274 (2014).</li>
<li>Giaccone, M., Brunetti, M., Camandona, M., Trovato, L., Graziano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+Medical+Device%2C+Based+on+Rigenera+Protocol+in+the+Management+of+Complex+Wounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Stem+Cells+Res%2C+Rev+%26+Rep%22%5BJournal%5D)">A New Medical Device, Based on Rigenera Protocol in the Management of Complex Wounds.</a> J Stem Cells Res, Rev & Rep. 1 (3), 3(2014).</li>
<li>Aimetti, M., Ferrarotti, F., Cricenti, L., Mariani, G. M., Romano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+dental+pulp+stem+cells+in+periodontal+regeneration%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Periodontics+Restorative+Dent%22%5BJournal%5D)">Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report.</a> Int J Periodontics Restorative Dent. 34 (3), s27-s33 (2014).</li>
<li>Graziano, A., Carinci, F., Scolaro, S., D'Aquino, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodontal+tissue+generation+using+autologous+dental+ligament+micro-grafts%3A+case+report+with+6+months+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22AOMS%22%5BJournal%5D)">Periodontal tissue generation using autologous dental ligament micro-grafts: case report with 6 months follow-up.</a> AOMS. 1 (2), 20(2013).</li>
<li>Brunelli, G., Motroni, A., Graziano, A., D'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sinus+lift+tissue+engineering+using+autologous+pulp+micro-grafts%3A+A+case+report+of+bone+density+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Soc+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Sinus lift tissue engineering using autologous pulp micro-grafts: A case report of bone density evaluation.</a> J Indian Soc Periodontol. 17 (5), 644-647 (2013).</li>
<li>Ellner, P. D., Stoessel, C. J., Drakeford, E., Vasi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+culture+medium+for+medical+bacteriology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">A new culture medium for medical bacteriology.</a> Am J Clin Pathol. 45, 502-504 (1966).</li>
</ol>

De auteur Antonio Graziano is de wetenschappelijk directeur van Human Brain Wave srl, dat produceert en verkoopt het Rigenera systeem. De auteur Letizia Trovato is een medewerker van wetenschappelijke afdeling Human Brain Wave srl

Deze preliminaire studie toonde aan dat micro-transplantaten verkregen door dit protocol kan worden gecombineerd met collageen sponzen, zoals reeds gemeld in andere klinische toepassingen, om de werkzaamheid van micro-grafts implantaten 9, 10 optimaliseren. Vooral dit onderzoek meldde de capaciteit van bio -complexen, gevormd door micro-implantaten en collageensponzen, de wondgenezing van een been letsel adjuvans na 30 dagen klinische toepassing. Verder in vitro resultaten tonen de effectiviteit van ...

In de afgelopen jaren zijn verscheidene methoden ontwikkeld in de biotechnologie autologe cellulaire suspensies tijdens chirurgie verkrijgen om éénfasige behandelingen voor acute en chronische huidletsels. Bovendien is de behandeling van acute maar vooral chronische wonden gevolg van trauma, diabetes, infecties, en andere oorzaken, blijft een uitdaging. Er is steeds meer bewijs dat chronische wonden een ernstige wereldwijde gezondheidsprobleem geworden, waardoor een enorme financiële last voor de gezondheidszorg systemen wereldwijd 1. Om de mate van succes bij de behandeling van huidletsels verhogen, gebrek aan uitgebreide manipulatie (inclusief cellulaire versterking) en het handhaven van steriele omstandigheden essentieel, om een ​​celsuspensie die direct kunnen worden aangebracht op het beschadigde gebied van het creëren patiënten, waardoor een langere verwerking in cleanrooms vermijden, zoals Cell Factories. StArting van kleine huidbiopten, slijpen, centrifugeren en andere scheidingsmethoden (bijvoorbeeld enzymatisch of mechanisch), worden vaak gebruikt om een celsuspensie, die kunnen worden gekweekt in een groeimedium verkrijgen. Al deze werkwijzen vereisen in het algemeen een lange tijd van uitvoering, benadrukt de celstructuren, en leidt tot een vermindering van cellevensvatbaarheid. Een ander belangrijk aspect is een autologe cellulaire suspensie gereed voor gebruik door artsen te verkrijgen, bijvoorbeeld om beschadigingen bij. Bovendien is het bekend dat autoloog weefsel enten overleven de procedures overdracht uiteindelijk overleven in de receptorplaats die de beginselen van inductie en geleiding 2, 3. Moet de ideale implantaat weefsel beschikbaar zijn en lage antigeniteit en donorplaats morbiditeit 4. Op basis van deze bewijzen, was de eerste doelstelling van dit onderzoek om lichaamseigen bio-complexen geschikt voor creërenklinische toepassing in het weefselherstel. Hiervoor beschrijven we een nieuwe werkwijze voor autologe micro-grafts vanaf cutane weefsels die zijn opgesplitst dit protocol verkregen. Een case-presentatie wordt hierin ook beschreven als een klinische toepassing van autologe micro-transplantaten verkregen door dit protocol in combinatie met collageen sponzen. Deze aanpak is reeds gemeld efficiënte mechanische disaggregatie van menselijk weefsel 5 te zijn en het is klinisch gebruikt voor het enten en regeneratie van huidweefsels 6,7 en regeneratieve therapieën bindweefsel in orale kaakchirurgie 8-10 . Daarnaast is het tweede doel van deze studie was de biologische karakterisering van de cutane weefsels na de opsplitsing van dit protocol. Hiertoe verschillende homologe monsters van huidweefsel afgeleid van de bagageruimte van verschillende meerdere organenen / of multi-weefsel donoren werden verwerkt na de nationale regels inzake de oogst, verwerking en distributie van weefsels voor transplantatie (CNT 2013) in Emilia Romagna Regional Skin Bank. CASE PRESENTATIE: Een 35-jarige vrouwelijke patiënt met een complex trauma als gevolg van auto-ongeluk werd toegelaten tot de Intensive Care Unit van Ancona Hospital. De patiënt toonde een besmetting van het been door een open wond en een gecompliceerde breuk gestabiliseerd met externe fixatie. Twee radicale debridement werden uitgevoerd en wanneer de wond werd schoon te maken na de negatieve druk therapie (VAC therapie) en het periost verscheen gezond, we passen het protocol na twee maanden van herstel. Na disaggregatie met dit systeem werden de micro-transplantaten verkregen wordt gebruikt voor bio-complexen met een collageenspons die vervolgens om geïmplanteerd hun doeltreffendheid op de laesie reparatie onderzoeken maken.

<table><tbody><tr><td>Rigenera Machine</td><td>Human Brain Wave</td><td>79210R</td><td></td></tr><tr><td>Rigeneracons</td><td>Human Brain Wave</td><td>79450S</td><td></td></tr><tr><td>MTT</td><td>Roche Diagnostic GmbH</td><td>11465007001</td><td></td></tr><tr><td>RPMI medium</td><td>PBI International</td><td>733-2292</td><td></td></tr><tr><td>DMEM medium</td><td>PBI International</td><td>F 0415</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotics</td><td>Biological Industries PBI</td><td>03-038-1 &nbsp;&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Antibodies for FACS Analysis</td><td>eBiosciences</td><td>code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349&nbsp; for CD34-APC&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Columbia agar</td><td>BioMerieux Company</td><td>43041</td><td></td></tr><tr><td>Condress&reg;</td><td>Abiogen Pharma</td><td></td><td>collageenspons gebruikt voor bio-complexen</td></tr><tr><td>DMSO&nbsp;</td><td>Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl solution</td><td>Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylene&nbsp;</td><td>Carlo Erba</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

weefsel karakterisering na een new uitsplitsing methode voor de huid micro-enten generation

Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation

Verschillende nieuwe werkwijzen ontwikkeld op het gebied van biotechnologie autologe cellulaire suspensies tijdens de operatie te verkrijgen, teneinde een stap behandelingen voor acute en chronische huidletsels. Bovendien is de behandeling van chronische maar ook acute wonden gevolg van trauma, diabetes, infecties en andere oorzaken, blijft een uitdaging. In deze studie beschrijven we een nieuwe methode om autologe micro-transplantaten van huidweefsel van een enkele patiënt en hun klinische toepassing. Bovendien werd in vitro biologische karakterisering van cutane weefsel afkomstig van de huid-de epidermized dermis (Ded) en de dermis van meerdere organen en / of multi-weefsel donoren ook uitgevoerd. Alle weefsels werden uitgesplitst naar dit nieuwe protocol, waardoor we levensvatbare micro-implantaten te verkrijgen. In het bijzonder hebben we gemeld dat deze innovatieve protocol kan bio-complexen bestaande uit autologe micro-transplantaten en collageensponzen klaar om te worden aangebracht op de huid laesies. de clinischappelijke toepassing autologe bio-complexen op een been laesie werd gemeld, dat een verbetering van zowel opnieuw epitalization proces en zachtheid van de laesie. Bovendien, onze in vitro model bleek dat de levensvatbaarheid van de cel na mechanische uitsplitsing met dit systeem voor maximaal zeven (7) dagen van de cultuur in stand wordt gehouden in de tijd. We hebben ook opgemerkt door middel van flowcytometrie-analyse, dat de verzameling van cellen verkregen uit uitsplitsing bestaat uit verschillende celtypen, waaronder mesenchymale stamcellen, dat een sleutelrol speelt bij de processen van weefselregeneratie en herstel uitoefenen, voor hun hoge regeneratieve mogelijkheden. Tenslotte hebben we aangetoond dat in vitro procedure handhaaft de steriliteit van micro-implantaten wanneer gekweekt in Agar gerechten. Samengevat concluderen wij dat deze nieuwe regeneratieve benadering veelbelovend hulpmiddel kan zijn voor clinici te verkrijgen in één stap levensvatbare, steriel en klaar voor micro-grafts die alleen of in combinatie kunnen worden toegepast met de meest voorkomende biologische scaffo gebruikenlds.

In dit vooronderzoek als eerste doel het vermogen van menselijke autologe micro-transplantaten in combinatie met een biologische drager, zoals collageen, bio-complexen gebruiksklaar produceren onderzoeken. Deze bio-complexen werden geïmplanteerd in een patiënt met een been letsel veroorzaakt door een auto-ongeluk (figuur 2A) en een volledige re-epithelialisatie geassocieerd met weefselherstel na 30 dagen (Figuur 2B) wa...

Het protocol beschrijft een nieuwe methode om menselijke weefsels te splitsen en micro-autologe transplantaten die in combinatie met collageen sponzen, tot menselijk biologisch complexen klaar voor gebruik in de behandeling van huidletsels te maken. Verder dit systeem bewaart cellevensvatbaarheid van micro-grafts op verschillende tijdstippen na mechanische disaggregatie.

Weefsel karakterisering na een New Uitsplitsing Methode voor de huid Micro-Enten Generation

Several new methods have been developed in the field of biotechnology to obtain autologous cellular suspensions during surgery, in order to provide one ...

Het algemene doel van deze chirurgische uitvinding is het produceren van autologe huidmicrotransplantaten die onmiddellijk tijdens dezelfde operatie kunnen worden gebruikt voor wondgenezing. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen in het veld van de regeneratieve geneeskunde en huidweefselengineering over zaken als chronische wondgenezing, brandwonden en posttraumatische ulcera. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat deze zeer eenvoudig kan worden toegepast door artsen zonder gespecialiseerde technieken, en dat het snel en betaalbaar is.Begin met het verzamelen van huidmonsters van een patiënt met behulp van een biopsietpons. Verwijder vervolgens de epitheellaag en gooi deze weg. Combineer elk weefselmonster met 1 milliliter zoutoplossing om autologe microtransplantaten te genereren.Om biocomplexen voor klinische toepassing voor te bereiden, brengt u 1 milliliter van de micro-graft-oplossing over op collageensponzen. Breng het biocomplex onmiddellijk aan op het beschadigde gebied van de patiënt. Test de levensvatbaarheid van het biocomplex in vitro.Giet na drie dagen cultuur 0,3% formaline direct over de biocomplexen en fixeer deze gedurende 10 minu

tissue-characterization-after-new-disaggregation-method-for-skin

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Weefsel-specifieke analyse van een haarfollikel regeneratie model met behulp van lentivirus tot winst-of verlies-van-functie bemiddelen.

Snelle Genetische analyse van epitheliale-mesenchymale signalering tijdens haar regeneratie

This video describes the detailed protocol for generating in vitro 3D organotypic skin reconstructs to study melanoma progression. This skin model mimics both the architecture and multicellular complexity of organs in vivo.

Generation of Organotypic Full Skin Reconstructs: A Procedure to Establish 3D Skin Model Using Human Skin Samples

Het doel van dit protocol is om een driedimensionaal huidequivalent van volledige dikte op te bouwen, dat lijkt op natuurlijke huid. Met een speciaal geconstrueerd geautomatiseerd wondapparaat kunnen nauwkeurige en reproduceerbare wonden worden gegenereerd onder behoud van steriliteit.

Genereren van een drie-dimensionale volledige dikte huidequivalent en Automated Verwonden

Weefselmanipulatie omvat vaak in vitro expansie om autologe voor weefselregeneratie creëren. Deze studie geeft een werkwijze voor weefselexpansie, regeneratie, reconstructie en in vivo werd ontwikkeld om de verwerking van cellen en biologische materialen buiten het lichaam te minimaliseren.

Gehakt Tissue in Compressed Collageen: A-cel met Biotransplant voor Single-geënsceneerde Reconstructieve Repair

Het doel van dit artikel is om een uitgebreid en gedetailleerd protocol te geven over hoe genetisch gemodificeerde humane organotypische huid te genereren uit epidermale keratinocyten en gedevitaliseerde humane dermis.

Generatie van genetisch gemodificeerde Organotypische Skin Culturen behulp gedevitaliseerde Human Dermis

We presenteren een protocol om cellen afgeleide matrices rijk aan extracellulaire matrix eiwitten te verkrijgen, met behulp van macromoleculaire Crowders (MMC). Bovendien presenteren we een protocol dat MMC in 3D organotypische co-kweek huid generatie, die kweektijd vermindert behoud looptijd construct omvat.

Verbetering van 2D- en 3D-Skin<em&gt; In Vitro</em&gt; Modellen Met behulp van macromoleculaire Crowding

Hier beschrijven we een protocol voor het produceren van oogsten naalden die kunnen worden gebruikt voor het verzamelen van full-dikte huidweefsel zonder donor site littekens. De naalden kunnen worden gecombineerd met een systeem voor het eenvoudig verzamelen om hoogvolume oogsten.

Toestellen voor het oogsten van weefsel Microcolumns

Wij stellen voor een protocol dat laat zien hoe geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige keratinocyten en fibroblasten differentiëren en genereren een 3D huid organoid, met behulp van deze keratinocyten en fibroblasten. Dit protocol bevat een extra stap van het genereren van een gehumaniseerd muizen model. De techniek die hier gepresenteerd zal dermatologische onderzoek verbeteren.

Generatie van 3D huid Organoid van koord bloed afkomstige geïnduceerde pluripotente stamcellen

Het doel van deze studie was om een murine model van burn wound healing te ontwikkelen. Een thermische brandwond werd veroorzaakt op de rughuid van muizen met behulp van een voorverwarmde messing sjabloon. Verbrand weefsel werd gedebrideerd en bedekt met een huidtransplantatie geoogst uit de staart van een genetisch vergelijkbare donormuis.

Een Murine Model van een burn wound gereconstrueerd met een allogene huidtransplantatie

Het huidige protocol beschrijft hoe de menselijke huid kan worden geënt op niet-obese diabetische (NOD) -scid interleukine-2 gammaketen receptor (NSG) muizen. Een gedetailleerde beschrijving van de voorbereiding van de menselijke huid voor transplantatie, de voorbereiding van muizen voor transplantatie, transplantatie van de menselijke huid van gespleten dikte en de herstelprocedure na de transplantatie zijn opgenomen in het rapport.

Xenograft huidmodel om menselijke immuunresponsen in vivo te manipuleren

Leer een nieuwe chirurgische methode om autologe huidmicro-transplantaten te maken voor directe wondgenezing. Deze techniek behoudt celviabiliteit en biedt een betaalbare oplossing voor chronische wonden en brandwonden.

Weefsel karakterisering na een New Uitsplitsing Methode voor de huid Micro-Enten Generation

Meer video's verkennen