Name: Heterotope Renal Autotransplantatie in een Varkens Model: A Step-by-Step Protocol (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: Leer heterotopische nierautotransplantatie in een varkensmodel voor niertransplantatieonderzoek. Dit protocol toont chirurgische technieken voor optimale nierfunctie en orgaanpreservatie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Wij danken de Sorin Group (Milaan, Italië), XVIVO Perfusion Inc. (Goteborg, Zweden) en Braun AG (Melsungen, Duitsland) voor hun steun. We waarderen de steun van de John David en Signy Eaton Foundation zeer hoog.

Alle dieren kregen humane zorg en alle onderzoeken we in overeenstemming met het beleid en de richtlijnen van de Canadian Council on Animal Care uitgevoerd. Alle procedures werden uitgevoerd onder Animal Met protocollen die door de Universiteit Health Network Institutional Animal Care Committee goedgekeurd uitgevoerd. Opmerking: Een schematisch overzicht van het studieprotocol is weergegeven in figuur 1. <img alt="Figuur 1" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig1.jpg" /> Figuur 1. Studie protocol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> 1. Dieren <ol><li> Gebruik mannelijke Yorkshire varkens (30 kg) in dit protocol. </li></ol> 2. nier Graft Retrieval <ol><li> preoperatieve Procedure <ol><li> Het huis van de man Yorkshire varkens in een onderzoeksfaciliteit minstens een week acclimatiseren aan hen. Gebruik intramusculaire injectie van de derde generatie cefalosporine, zoals ceftiofur, gedurende 3 dagen om het potentiële risico van infecties met Streptococcus suis en Salmonella verminderen. Snel de varkens minimaal 6 uur voor inductie van anesthesie aspiratie te voorkomen. </li><li> Initiëren verdoving van het varken door een intramusculaire injectie van ketamine (20 mg / kg), atropine (0,04 mg / kg), en midazolam (0,3 mg / kg). Vervolgens transporteren dier uit de behuizing mogelijk om de operatiekamer (OK). </li><li> Plaats het varken in een liggende positie op de OR tafel. Laat het varken tot 2 liter zuurstof te ademen met 5% van isofluraan spontaan. Expose de stembanden met een laryngoscoop en spuit ze met 2% lidocaïne actueel oplossing to-intubatie geïnduceerde laryngospasm voorkomen. Na intubatie met een 6,5 mm buis, blokkeren de manchet met 3-5 ml lucht. Opmerking: Capnometrie bevestigt de juiste position van de tracheale buis. </li><li> Verlaag de isofluraan gas naar 2,5%. Stel het beademingsapparaat 14-16 ademhalingen / min en het ademvolume tot 10-15 ml / kg lichaamsgewicht. Bewaak het varken op de voet. Hartslag en zuurstofverzadiging worden geregistreerd door puls oxymetrie. Bevestig juiste verdoving door vertraagde hartslag (minder dan 150 slagen / min) en de bloeddruk (systolische waarden onder 100 mmHg) en afwezigheid van varkens bewegingen (zonder gebruik van spierverslappers). </li><li> Onder steriele omstandigheden, introduceren een 9,5 Fr. enkel lumen permanente katheter in de interne halsader behulp seldingertechniek 27. In het kort, gebruik dan een naald om de ader te prikken. Na de introductie van de gids-draads, vervang de naald met de peel-away introducer, gevolgd door vervanging van de draad met de vasculaire katheter. Bevestig de katheter aan de huid met een 3-0 zijde of niet-absorbeerbaar monofilament hechtmateriaal. <ol><li> Dien 500 mg metronidazol, 1 g cefazoline en 20 mg pantoprazol. Advertentieminister 200 ml lactaat Ringer&#39;s oplossing met een 5% dextrose (D5W) en 1 ml fentanyl citraat per uur intraveneus gedurende de operatie. Toepassen veterinaire oogzalf op de ogen te voorkomen droogheid terwijl onder verdoving. </li></ol></li></ol></li><li> chirurgische Procedure <ol><li> Na steriele desinfectie en dekking van het operatiegebied, het uitvoeren van een incisie van 25 cm lengte. Steek een retractor. Bedek grote en kleine darmen met een handdoek en plaats ze aan de linker kant voor een optimale toegang tot de rechter nier. </li><li> Bevrijd de urineleider en de rechter nier zich van alle aanhangend weefsel met behulp van de cauterisatie. </li><li> Ontleden rechts renale ader en slagader met de cauterisatie tot de oorsprong van de onderste vena cava en de aorta respectievelijk vrij. Om arterieel vasospasme te voorkomen, dient de toediening van 30-65 mg papaverine worden overwogen. </li><li> Na volledige renale dissectie, stropdas (zijde, 3-0) en snijd de urineleider distaal. preparea kom van ijs en een steriele zak orgel. </li><li> Ten eerste, klem de nierslagader in de buurt van de aorta en de tweede, klem de renale ader dicht bij de vena cava met behulp vaartuig klemmen. Vervolgens resect de nier transplantaat en meteen canule de nierslagader met een nierslagader canule. Gebruik 500 ml ijskoude histidine-tryptofaan-ketoglutaraat (HTK) oplossing voor het spoelen van het bloed. Bewaar de nier op ijs tot transplantatie. </li><li> In situ, sluit de resterende nierslagader met een ligatuur (zijde, 2-0) en de renale ader met een lopende hechting (prolene, 6-0). </li><li> Na controle van het uitgesneden gebied voor bloeden, sluit de buikwand met een doorlopende draad (monofil, 1) en de huid met 3-0 zijde of niet-absorbeerbaar monofilament hechtmateriaal .. </li></ol></li><li> postoperatieve Procedure <ol><li> Bevestig de veneuze katheter subcutaan met een hechtdraad (zijde, 3-0) en de tunnel is terug van het varken om ongewenste manipulatie te voorkomen. Na het plaatsen van het varken gevoelig, sOEKOMSTIGE (zijde, 3-0) de catheter stevig op de huid. </li><li> Spenen het varken uit de ventilator en laat het herstellen in zijn behuizing gebied na extubatie. Dien Ringer&#39;s lactaat intraveneus voor volume-uitbreiding en het beheer van 0,3 mg buprenorfine voor analgesie. Heeft een dier niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven. </li></ol></li></ol> 3. nier Graft Transplantation <ol><li> preoperatieve Procedure <ol><li> Verdoven het varken via intraveneuze injectie van propofol (1-2 mg / kg lichaamsgewicht) gevolgd door een continue infusie van propofol met een snelheid van 50-100 mg / uur. Re-intuberen het varken zoals beschreven in stap 2.1.3 en 2.1.4 en stel de isofluraan gas tot 3-4%. </li><li> Dien 1 g cefazoline en 20 mg pantoprazol iv Tijdens de operatie, maken gebruik van dezelfde verdoving protocol zoals beschreven in 2.1.4. </li><li> Na steriel desinfectie, maak een bezuiniging van 4 cm naast de luchtpijp. Ontleden de tissue de halsslagader bloot. Pass over-holt pincet en een zijden stropdas (2-0) rond de slagader. Gebruik de seldingertechniek een plastic katheter te introduceren voor het continu meten van de bloeddruk tijdens de operatie. Als alternatief kunnen niet-invasieve bloeddrukmeting technieken worden toegepast. </li></ol></li><li> chirurgische Procedure <ol><li> Na steriel desinfectie, heropening van de buikholte door het snijden van de steken van de huid en fascia hechtingen, opnieuw de chirurgische retractor aan de buikholte bloot te leggen, en de positie van de darm naar de linkerkant een betere toegang tot de infrarenale schepen mogelijk te maken. </li><li> Transplant de bewaarde niertransplantaat end-to-side de infrarenale aorta en vena cava. Daarom ontleden vena cava en aorta meer dan 5-8 cm boven de darmbeenvertakking met behulp van pick-ups en cauterisatie. Indien mogelijk, niet de lymfevaten verstoren; Indien dit niet mogelijk is, sluit ze met 5-0 Prolene hechtingen. </li><li> Na het voltooien van de dissectie, check for bloeden en verwijder de resterende weefsel van de schepen. Zorg ervoor dat volledige inklemming van de vena cava en de aorta met een Satinsky klem haalbaar is. </li><li> Vervolgens resectie de contralaterale (linker) nier. Om dit te doen, plaatst u de darm naar rechts; ontleden de urineleider, de nier zelf, de renale ader, en de nierslagader van aanhangende weefsels. Bind de urineleider en bloedvaten en resect de nieren. Controleer voor bloeden. </li><li> Plaats de darm naar links om de infrarenale aorta en vena cava bloot te leggen. Injecteren heparine (100 IE / kg lichaamsgewicht) en wacht minstens 2 min. </li><li> Veneuze Anastomosis: <ol><li> Gebruik een Satinsky klem volledig klem de vena cava en een spleet incisie die overeenkomt met de grootte van de opening van de renale ader, met een 11 mes. Pott schaar kan worden gebruikt om de spleet verder uit te breiden. </li><li> Na het verpakken van de nier in een doek met steriel ijs, verwijderen uit het ijs en plaats het in het chirurgische veld. Gebruik twee double-gewapend 6-0Prolene hechtingen om een ​​craniale en caudale hoek steek te voeren. </li><li> Geschatte de nier, bind de bovenhoek en het uitvoeren van een lopende hechting met behulp van 6-0 prolene, te beginnen met de achterwand. Na het afronden 2/3, gebruik het andere einde van de band om de hechting te voltooien aan de voorzijde. Na het binden van de craniale steken, bind de steken aan de caudale hoek. </li><li> Plaats een bulldog klem op de renale ader en open de Satinsky klem. Controleer de anastomose voor bloeden. </li></ol></li><li> Arteriële Anastomosis: <ol><li> Gebruik de Satinsky klem weer naar de aorta volledig klem. Met een mes 11 een spleet incisie, passend bij de opening van de nierslagader. Gebruik een 4,0 mm rond punch om een ​​schone opening te beveiligen. </li><li> Gebruik een 6-0 Prolene hechtdraad aan de arteriële anastomose uit te voeren, te beginnen bij de ontvangende kant. Controleer of de arteriële endotheel is in elk hechtdraad een dissectie voorkomen. Ondertussen start een continue infuus van 10 ml norepinephrine (16 mg / 250 ml) verdund in 500 ml lactaat Ringer&#39;s en titreer de systolische druk boven 100 mmHg te houden. </li><li> Injecteer verapamil intra-arterieel is vóór de arteriële anastomose en papaverine topisch toedienen aan de buitenzijde van het vaartuig vasospasme te verhinderen. </li><li> Plaats een bulldog klem op de nierslagader en open de Satinksy klem. Controleer de anastomosen voor bloeden. </li><li> Uitpakken van de nier van de doek en verwijder het ijs. Open de veneuze bulldog klem eerst, gevolgd door de arteriële bulldog klem. Na reperfusie moet de urineproductie onmiddellijk beginnen. </li><li> Gebruik doek om een ​​gunstige positie voor de getransplanteerde graft veilig te stellen en handhaven van een homogene reperfusie. </li></ol></li><li> Ureteral Anastomosis: <ol><li> Gebruik Pott schaar om de ureter van het transplantaat en de ontvanger over een longitudinale lengte van 0,5 cm te openen. </li><li> Gebruik twee 6,0 polyester, poly (p-dioxanon) hechtingen voor side-to-side ureterale anastomose. Voer een hoek stich aan elke zijde, vervolgens de achterwand eerst een continue wijze, gevolgd door de voorwand. </li><li> Na het inchecken voor bloeden, verwijder de doek en wikkel een deel van de dunne darm rond de nieren om het in positie te houden. Sluit de buikwand met twee monofil 1 hechtingen. Sluit de huid met 3-0 zijde of niet-absorbeerbaar monofilament hechtmateriaal. </li><li> Handhaving van de systolische druk boven 100 mmHg continu door voorzichtig titreren van de noradrenaline infuus totdat het varken is in buikligging is geplaatst. </li></ol></li></ol></li><li> postoperatieve Procedure <ol><li> Na sluiting van de buik zoals hierboven vermeld, houdt het varken te verwarmen met behulp van een verwarmingselement en warmte-circulerende deken. Verwijder de arteriële lijn, sluit de punctie gat in de slagader met een 6-0 prolene stich en sluit de incisie. </li><li> Draai het varken naar buikligging, stop de noradrenaline infuus en spenen het varken uit de ventilator. Allaag het varken te herstellen in het gebied van huisvesting en bewaken het nauw om zijn vlotte herstel van de procedure te waarborgen. Neem bloed gas monsters elk uur via het geïmplanteerde halsader katheter. Zorg voor Ringer&#39;s lactaat vervangende volume en beheren van 0,3 mg buprenorfine voor analgesie. </li><li> Na de extubatie, volgen het varken voet totdat deze spontaan kunnen drinken. Heeft een dier niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven. Heeft een dier dat een operatie heeft ondergaan om het gezelschap van andere dieren tot volledig hersteld niet meer terug. </li></ol></li></ol> 4. Operatieve Follow Up <ol><li> Dien 0,3 mg buprenorfine iv iedere 8 uur gedurende minstens 2 dagen na de operatie of langer indien nodig. Routinematig een enkele profylactische dosis antibiotica toe te dienen tijdens de operatie. Bij tekenen van infectie, toedienen cefazoline 1 g iv tweemaal per dag en metronidazol iv eenmaal per dag totklinische verbetering optreedt. Dien Ringer&#39;s lactaat tot het varken voldoende water drinkt. 1000 IU heparine kan worden gebruikt om de katheter om stolling te voorkomen vergrendelen. </li><li> Verzamel veneuze bloedmonsters via de halsader katheter en urine monsters naar de klinische toestand van het varken en de nierfunctie te beoordelen. </li><li> Voor euthanasie, induceren anesthesie van het varken met propofol iv (5-10 ml) en te onderhouden met isofluraan 5%. Intuberen het varken zoals hierboven beschreven. Na relaparatomy en nierweefsel monstername, veroorzaken hartstilstand door intraveneuze injectie van 40 Mval KCl. </li></ol>

<ol><li>Wolfe, R. A., Ashby, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+in+all+patients+on+dialysis%2C+patients+on+dialysis+awaiting+transplantation%2C+and+recipients+of+a+first+cadaveric+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality in all patients on dialysis, patients on dialysis awaiting transplantation, and recipients of a first cadaveric transplant.</a> N Engl J Med. 341 (23), 1725-1730 (1999).</li>
<li>Ingsathit, A., Kamanamool, N., Thakkinstian, A., Sumethkul, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+advantage+of+kidney+transplantation+over+dialysis+in+patients+with+hepatitis+C%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Survival advantage of kidney transplantation over dialysis in patients with hepatitis C: a systematic review and meta-analysis.</a> Transplantation. 95 (7), 943-948 (2013).</li>
<li>Tonelli, M., Wiebe, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review%3A+kidney+transplantation+compared+with+dialysis+in+clinically+relevant+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Systematic review: kidney transplantation compared with dialysis in clinically relevant outcomes.</a> Am J Transplant. 11 (10), 2093-2109 (2011).</li>
<li>Global Observatory on Donation & Transplantation. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.transplant-observatory.org/Pages/home.aspx">http://www.transplant-observatory.org/Pages/home.aspx</a> (2014).</li>
<li>Matas, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+Annual+Data+Report+2012%3A+Kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR Annual Data Report 2012: Kidney.</a> Am J Transplant. 14, Suppl 1. (2014).</li>
<li>Rahmel, A. Annual Report 2013 - Eurotransplant International Foundation. . , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.eurotransplant.org/cms/mediaobject.php?file=AR20135.pdf">https://www.eurotransplant.org/cms/mediaobject.php?file=AR20135.pdf</a> (2013).</li>
<li>Morrissey, P. E., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%3A+current+practices%2C+ongoing+challenges%2C+and+potential+improvements%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death: current practices, ongoing challenges, and potential improvements.</a> Transplantation. 97 (3), 258-264 (2014).</li>
<li>Maggiore, U., Oberbauer, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+to+increase+the+donor+pool+and+access+to+kidney+transplantation%3A+an+international+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Strategies to increase the donor pool and access to kidney transplantation: an international perspective.</a> Nephrol Dial Transplant. 30 (2), 217-222 (2014).</li>
<li>Summers, D. M., Johnson, R. J., Hudson, A., Collett, D., Watson, C. J., Bradley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+donor+age+and+cold+storage+time+on+outcome+in+recipients+of+kidneys+donated+after+circulatory+death+in+the+UK%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Effect of donor age and cold storage time on outcome in recipients of kidneys donated after circulatory death in the UK: a cohort study.</a> Lancet. 381 (9868), 727-734 (2013).</li>
<li>Wadei, H. M., Heckman, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+kidney+function+between+donation+after+cardiac+death+and+donation+after+brain+death+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Comparison of kidney function between donation after cardiac death and donation after brain death kidney transplantation.</a> Transplantation. 96 (3), 274-281 (2013).</li>
<li>Moers, C., Smits, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+perfusion+or+cold+storage+in+deceased-donor+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Machine perfusion or cold storage in deceased-donor kidney transplantation.</a> N Engl J Med. 360 (1), 7-19 (2009).</li>
<li>Pereira-Sampaio, M. A., Favorito, L. A., Sampaio, F. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney%3A+anatomical+relationships+between+the+intrarenal+arteries+and+the+kidney+collecting+system.+Applied+study+for+urological+research+and+surgical+training%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Pig kidney: anatomical relationships between the intrarenal arteries and the kidney collecting system. Applied study for urological research and surgical training.</a> J Urol. 172 (5 Pt 1), 2077-2081 (2004).</li>
<li>Bagetti Filho, H. J. S., Pereira-Sampaio, M. A., Favorito, L. A., Sampaio, F. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney%3A+anatomical+relationships+between+the+renal+venous+arrangement+and+the+kidney+collecting+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Pig kidney: anatomical relationships between the renal venous arrangement and the kidney collecting system.</a> J Urol. 179 (4), 1627-1630 (2008).</li>
<li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies%3A+the+preclinical+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: the preclinical model.</a> J Biomed Biotechnol. 2011 (21), 532127(2011).</li>
<li>Gallinat, A., Paul, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+oxygenation+in+hypothermic+machine+perfusion+of+kidneys+from+heart+beating+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Role of oxygenation in hypothermic machine perfusion of kidneys from heart beating donors.</a> Transplantation. 94 (8), 809-813 (2012).</li>
<li>Thuillier, R., Allain, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Benefits+of+active+oxygenation+during+hypothermic+machine+perfusion+of+kidneys+in+a+preclinical+model+of+deceased+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Benefits of active oxygenation during hypothermic machine perfusion of kidneys in a preclinical model of deceased after cardiac death donors.</a> J Surg Res. 184 (2), 1174-1181 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., Barlow, A. D., Yates, P. J., Snoeijs, M. G. J., van Heurn, E. L. W., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+study+assessing+the+feasibility+of+a+short+period+of+normothermic+preservation+in+an+experimental+model+of+non+heart+beating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A pilot study assessing the feasibility of a short period of normothermic preservation in an experimental model of non heart beating donor kidneys.</a> J Surg Res. 171 (1), 283-290 (2011).</li>
<li>Delpech, P. O., Thuillier, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+ischaemia+combined+with+cold+preservation+on+the+hypoxia-inducible+factor+1%CE%B1+pathway+in+an+experimental+renal+autotransplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Effects of warm ischaemia combined with cold preservation on the hypoxia-inducible factor 1α pathway in an experimental renal autotransplantation model.</a> Br J Surg. 101 (13), 1739-1750 (2014).</li>
<li>Kirk, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crossing+the+bridge%3A+large+animal+models+in+translational+transplantation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Rev%22%5BJournal%5D)">Crossing the bridge: large animal models in translational transplantation research.</a> Immunol Rev. 196, 176-196 (2003).</li>
<li>Golriz, M., Hafezi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+we+need+animal+hands-on+courses+for+transplantation+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">Do we need animal hands-on courses for transplantation surgery.</a> Clin Transplant. 27, Suppl 25. 6-15 (2013).</li>
<li>He, B., Musk, G. C., Mou, L., Waneck, G. L., Delriviere, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+surgery+for+kidney+orthotopic+transplant+in+the+pig+model%5BTitle%5D)+AND+%22JSLS%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic surgery for kidney orthotopic transplant in the pig model.</a> JSLS. 17 (1), 126-131 (2013).</li>
<li>Faure, A., Maurin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+porcine+model+of+heterotopic+renal+autotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">An experimental porcine model of heterotopic renal autotransplantation.</a> Transplant Proc. 45 (2), 672-676 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., Yates, P. J., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1400W+reduces+ischemia+reperfusion+injury+in+an+ex-vivo+porcine+model+of+the+donation+after+circulatory+death+kidney+donor%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">1400W reduces ischemia reperfusion injury in an ex-vivo porcine model of the donation after circulatory death kidney donor.</a> World J Transplant. 4 (4), 299-305 (2014).</li>
<li>Ghanekar, A., Mendicino, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+induction+of+fgl2+contributes+to+thrombosis+during+acute+vascular+xenograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Endothelial induction of fgl2 contributes to thrombosis during acute vascular xenograft rejection.</a> J Immunol. 172 (9), 5693-5701 (2004).</li>
<li>Ghanekar, A., Lajoie, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+rejection+of+human+decay+accelerating+factor+transgenic+pig-to-primate+renal+xenografts+with+administration+of+rabbit+antithymocyte+serum%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improvement in rejection of human decay accelerating factor transgenic pig-to-primate renal xenografts with administration of rabbit antithymocyte serum.</a> Transplantation. 74 (1), 28-35 (2002).</li>
<li>Cowan, P. J., Cooper, D. K. C., d'Apice, A. J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Kidney xenotransplantation.</a> Kidney Int. 85 (2), 265-275 (2014).</li>
<li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography%3B+a+new+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+radiol%22%5BJournal%5D)">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography; a new technique.</a> Acta radiol. 39 (5), 368-376 (1953).</li>
<li>Hanto, D. W., Maki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+administration+of+inhaled+carbon+monoxide+reduces+delayed+graft+function+in+kidney+allografts+in+Swine%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Intraoperative administration of inhaled carbon monoxide reduces delayed graft function in kidney allografts in Swine.</a> Am J Transplant. 10 (11), 2421-2430 (2010).</li>
<li>Maathuis, M. -H. J., Manekeller, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+kidney+graft+function+after+preservation+using+a+novel+hypothermic+machine+perfusion+device%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved kidney graft function after preservation using a novel hypothermic machine perfusion device.</a> Ann Surg. 246 (6), 982-991 (2007).</li>
<li>Gallinat, A., Paul, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+reconditioning+of+porcine+kidney+grafts+by+short-term+preimplantation+machine+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hypothermic reconditioning of porcine kidney grafts by short-term preimplantation machine perfusion.</a> Transplantation. 93 (8), 787-793 (2012).</li>
<li>Snoeijs, M. G., Matthijsen, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+transplantation+of+ischemically+injured+kidneys+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Autologous transplantation of ischemically injured kidneys in pigs.</a> J Surg Res. 171 (2), 844-850 (2011).</li>
<li>Golriz, M., Fonouni, H., Nickkholgh, A., Hafezi, M., Garoussi, C., Mehrabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney+transplantation%3A+an+up-to-date+guideline%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Pig kidney transplantation: an up-to-date guideline.</a> Eur Surg Res. 49 (3-4), 121-129 (2012).</li>
<li>Hosgood, S. A., Bagul, A., Yang, B., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relative+effects+of+warm+and+cold+ischemic+injury+in+an+experimental+model+of+nonheartbeating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The relative effects of warm and cold ischemic injury in an experimental model of nonheartbeating donor kidneys.</a> Transplantation. 85 (1), 88-92 (2008).</li>
<li>Hoyer, D. P., Gallinat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+oxygen+concentration+during+hypothermic+machine+perfusion+on+porcine+kidneys+from+donation+after+circulatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Influence of oxygen concentration during hypothermic machine perfusion on porcine kidneys from donation after circulatory death.</a> Transplantation. 98 (9), 944-950 (2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het model van varkens niertransplantatie biedt een unieke kans om het gebied van menselijke transplantatie te bevorderen als gevolg van overeenkomsten in de chirurgische aspecten, fysiologie, biochemie, en immunologie 14. Afhankelijk van het doel van de experimentele studie, het model van renale autotransplantatie heeft verscheidene voordelen tegenover allotransplantatiemodel. Hoewel verschillende groepen rapporteren goede niertransplantaatfunctie na allotransplantatie 28, immunosuppressie bij varkens is een uitdaging, vooral in niertransplantatie. Preoperatieve bloedmonster analyseert om de compatibiliteit voor varkens leukocyten antigeen (SLA) zorgen ervoor haalbaar zijn, maar duur en onpraktisch 14. Postoperatief, voorgesteld immunosuppressiva zoals tacrolimus en cyclosporine (calcineurineremmers, CNI) oraal of iv 28. Orale toediening is onpraktisch, zoals varkens meestal weigeren om mondelinge medica slikkentie. Bovendien zou darmobstructies voldoende absorptie van immunosuppressiva en onderhouden therapeutische geneesmiddelniveaus ondervangen. De continue infusie van iv CNI in actieve dieren is technisch veeleisend. Iv bolus toediening leidt tot hoge piekwaarden, waarbij toxiciteit veroorzaken. Aldus voor het onderzoeken van nieuwe conserveringstechnieken, het model van renale autotransplantatie heeft verschillende voordelen. In de representatieve resultaten van de allotransplantated nier transplantaat boven gedemonstreerd, een vertraagde en een grotere piek van creatinine en BUN aangeven afwijzing, die werd aangetoond door histologische evaluatie. De varkens model van autotransplantatie is eerder gebruikt om nieuwe conserveringstechnieken 14,18,29 onderzoeken. Echter, variëren de gerapporteerde postoperatieve serumcreatinine en BUN-waarden van getransplanteerd varkens in een heart-beating scenario aanzienlijk afhankelijk van het experimentele systeem 22,30 </sup&gt;. Het-heart-beating donoren protocol we hier presenteren resulteert in een lage postoperatieve serumcreatinine piek van 2,8 mg / dl (± 0,7) en BUN piek van 25,3 mg / dl (± 7,4). Deze resultaten zijn vergelijkbaar met de lage piekwaarden door Hanto en collega&#39;s 28 en 31 Snoeijs en collega&#39;s. Om een ​​succesvolle uitkomst na niertransplantatie in een varkens autotransplantatie model te waarborgen, hebben we een aantal belangrijke technische factoren die de snelheid van bepaalde complicaties te beperken geïdentificeerd. Het gebruik van histidine-tryptofaan-ketoglutaraat oplossing (HTK) vermindert het risico van vasospasme vanwege het lagere gehalte aan kalium in vergelijking met University of Wisconsin (UW) oplossing. Om het risico van vasospasme verder afnemen op het moment van reperfusie, verapamil kan worden geïnjecteerd in de nierslagader en papaverine kunnen topisch worden toegediend tijdens het ophalen en na reperfusie. Bovendien, een continue infuus van noradrenaline getitreerd te handhavende systolische bloeddruk boven 100 mmHg zorgt voor een homogene reperfusie. Het is nuttig om deze bloeddrukmeter ten minste tot de varkens vatbaar is gepositioneerd houden. Bovendien is de positie van de getransplanteerde graft is belangrijk om knikken van de anastomose nieuwe bloedvaten te voorkomen. Daarom is het nuttig om de contralaterale linker nier resectie vóór het naaien van de anastomosen van het transplantaat uitgebreide mechanische manipulatie te vermijden. Na het afronden van de ureteral anastomose, het verpakken dunne darm rond de getransplanteerde graft beveiligt haar positie na sluiting van de buikwand. Complicaties zoals Darmobstructie door knikken van de darm worden zelden waargenomen, maar kan leiden tot ernstige complicaties, waaronder ileus, darmperforatie en de dood. Over het algemeen, nauwkeurige chirurgische techniek, attente anesthesie en nauwgezette controle tijdens de follow-up zorgen voor een goede klinische uitkomst en graft function. Arteriële en veneuze anastomose kan worden performed met verschillende technieken. Orthotope plaatsing van het implantaat maakt end-to-end anastomose van de nierslagader en ader. Bij heterotopische transplantatie, kan het implantaat worden geplaatst in de contralaterale nier fossa voor end-to-end anastomose, op de darmbeenvaten of het distale aorta direct. Heterotopische transplantatie met anastomosen aorta en cava direct end-to-side techniek de voorkeur in dit model omdat het risico op trombose en vasospasme 32 kan verminderen. Anatomische variaties met een zeer vroege veneuze vertakkingen zou kunnen leiden tot de noodzaak van het naaien van twee aparte veneuze anastomoses. Als de slagader of ader relatief kort, kan het transplantaat worden gedraaid 180 ° lengte van de schepen te verkrijgen. Ureterale side-to-side anastomose kan goede experimentele resultaten te bereiken zonder complicerende vernauwingen of urine lekken. In het algemeen, het varkensmodel van niertransplantatie biedt voordelen ten opzichte van andere dierlijke modellen. zoals described boven, bepaalde overeenkomsten bestaan ​​tussen de varkens en de menselijke instelling, die relatief snel vertalen van nieuwe technieken in de klinische praktijk mogelijk maakt. De techniek van transplantatie technisch eenvoudiger in vergelijking met knaagdiermodellen. Daarnaast, door plaatsing van veneuze katheters, perifeer bloedmonsters eenvoudig worden verzameld en verwerkt voor verder onderzoek. De collectie van de urine laat nadere beoordeling van nierschade en functie. Urine monsters te nemen, kan een percutane katheter worden ingebracht in de urineblaas. Manipulatie te vermijden door het varken, moet het distale uiteinde subcutaan getunneld om de rug van het dier. Een andere optie voor urine verzamelen is het gebruik van metabolische kooien, waardoor langere perioden collectie de creatinineklaring en concentratie van extra biomarkers in de urine te schatten. Echografie, CT-scans en MRI-beelden zijn mogelijk. Donatie na overlijden bloedsomloop protocollen kunnen worden nagebootst door het toepassen van warmischemie voorafgaand aan ophalen. Bovendien varkens relatief gemakkelijk te hanteren als gecastreerd hun agressief gedrag beperken. Nadelen zijn de hoge kosten van de aankoop van dieren, huisvesting, chirurgische en andere medische apparatuur en mankracht. Deze factoren betekenen dat het niet mogelijk grote aantallen dieren omvatten in elke onderzoeksgroep. Bovendien in vergelijking met knaagdiermodellen, een beperkt aantal referenties zijn in de literatuur voor varkens normatieve biologische gegevens. Als alternatief voor het beoordelen van nieuwe ontwikkelde technieken, zoals nieuwe conserveringstechnieken zijn andere groepen beschreven normotherme de ex vivo reperfusie als alternatief voor niertransplantatie 33,34. Deze techniek is makkelijker uit te voeren en goedkoper. Echter, gestandaardiseerd niertransplantaat transplantatie een model meer op de klinische praktijk en maakt langere follow-up periode. Derhalve zorgt het voor een realistischer graft beoordelenment. Kortom, de varkens model van heterotope renale autotransplantatie biedt een klinisch belangrijke scenario om innovatieve nieuwe benaderingen voor de verbetering van de nieren graft resultaten te onderzoeken. Vooral dit protocol biedt belangrijke technische details die met succes een een renale autotransplantatie model vergemakkelijkt en maakt de snelle vertaling van nieuwe inzichten klinische proeven.

Nieratransplantatie is de voorkeursbehandeling voor patiënten met eindstadium nierziekte, vanwege de lagere morbiditeit en mortaliteit in vergelijking met dialyse 1-3. Ondanks grote verbeteringen in de resultaten voor patiënten na een niertransplantatie, blijft een tekort aan organen een ernstige wereldwijde uitdaging. Het aantal patiënten dat wacht op een niertransplantatie overschrijdt het aantal beschikbare organen veruit 4-6. Om het aantal nieren beschikbaar voor transplantatie te verhogen en de wachttijden voor patiënten te verkorten, zijn er verdere bronnen van niergrafts nodig. 
Normaal gesproken worden standaard criteria donor (SCD) en uitgebreide criteria donor (ECD) niergrafts uit donatie na hersendood (DBD) evenals nieren die zijn teruggewonnen van levende donoren (LDKT) gebruikt. Sinds de jaren 1990 is er een toenemend aantal niergrafts dat is teruggewonnen in een donatie na circulatoire dood (DCD) scenario, om de donorpool verder uit te breiden 7,8. DCD en ECD niergrafts vertonen echter acceptabele maar verminderde resultaten na transplantatie, afhankelijk van verschillende factoren, zoals donorleeftijd, warme en koude ischemietijden en de gebruikte bewaartechniek 9-11. Daarom is aanvullende onderzoek vereist om het resultaat van patiënten die marginale niergrafts ontvangen te verbeteren en om de donorpool verder te vergroten.
Het varkensmodel van niertransplantatie is goed gevestigd en biedt een klinisch belangrijk scenario om innovatieve benaderingen voor de verbetering van marginale niergraft resultaten te onderzoeken. In tegenstelling tot knaagdier- en hondennieren, die unilobulair zijn, zijn varkens- en menselijke nieren multilobulair en anatomisch vergelijkbaar, vooral wat betreft de arteriële, veneuze en urinecollectiesystemen 12,13. Bovendien vertonen varkens- en menselijke nieren overeenkomsten in de pathofysiologie van ischemie-reperfusie letsel (IRI), biochemie en immunologische parameters 14. Daarom is varkensniertransplantatie goed geschikt om nieuwe orgaanbewaarmethoden voor marginale niergrafts te onderzoeken 15-17, menselijke IRI te modelleren 18, immunologische paden en allotransplantaattolerantie te bestuderen 19, chirurgische training te bieden 20-22, nieuwe farmacologische therapieën te testen 23, nieuwe medische apparaten te implementeren en nieuwe immunologische mechanismen in xenotransplantatie te bestuderen 24-26.
De varkens- en menselijke niertransplantatiesettings zijn niet volledig analoog. Dit artikel richt zich op belangrijke technische details die een succesvolle implementatie van een nierautotransplantatiemodel zullen faciliteren. Soort-aangepaste pre- en postoperatieve huisvesting, toediening van anesthesie met nauwlettend toezicht en gematchte chirurgische technieken worden in het protocol beschreven en in de video gedemonstreerd. Resectie van de contralaterale native nier biedt de mogelijkheid om de functie van de getransplanteerde nier te beoordelen. De plaatsing van veneuze en urinekatheters en het gebruik van metabolische kooien maken een diepere beoordeling mogelijk. Voor studies gericht op het onderzoeken van alternatieve graftbewaarmethoden en mechanismen van IRI zijn autotransplantatiemodellen superieur aan allotransplantatiemodellen, omdat ze de complicaties en verstorende bias geassocieerd met afstoting en gebruik van immunosuppressieve medicijnen vermijden.

<table><tbody><tr><td>Anesthesiegoederen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthesiemachine, Optimax</td><td>Moduflex anesthesiegoederen</td><td>SN5180</td><td></td></tr><tr><td>Infuuspomp 3.000</td><td>SIMS Graseby LTD.</td><td>SN300050447</td><td></td></tr><tr><td>Infuuslijn</td><td>Smith Medical ASD Inc.</td><td>21-0442-25</td><td></td></tr><tr><td>Intraveneuze permanente katheter (9.5 Fr)</td><td>Cook Medical Company</td><td>G01865</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan Damp 19.1</td><td>Draeger Medical Canada Inc.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Mallinckrodt, Tracheale tube, 6.5 mm</td><td>Covidien Canada</td><td>86449</td><td></td></tr><tr><td>Temperatuurtherapiepad</td><td>Gaymar Industries Inc</td><td>TP26E</td><td></td></tr><tr><td>Ventilator, AV 800</td><td>DRE Medical Equipment</td><td>40800AVV</td><td></td></tr><tr><td>Warm Touch, patiëntverwarmingssysteem</td><td>Nellcor/ Covidien Canada</td><td>5015300A</td><td></td></tr><tr><td>Naam</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Chirurgische apparatuur</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Abdominale retractor</td><td>Medite GmbH</td><td>07-0001-00</td><td></td></tr><tr><td>Aorta/vene pons 4.0 mm, rond</td><td>Scanlan International Inc.</td><td>1001-602</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, Atraumatisch perifeer, klem</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB463R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey-Beck, Atraumatisch vena cava, klem</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB519R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, Atraumatisch Mini-Bulldog, recht</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB422R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, Atraumatisch Mini-Bulldog, gebogen</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB423R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey, Atraumatisch Coarctatieklem, hoekig</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB453R</td><td></td></tr><tr><td>Dissectieblad #11</td><td>Feather Safety Razor Co.</td><td>089165B</td><td></td></tr><tr><td>Connector (1/4") met mannelijke luer-lock</td><td>Sorin Group Inc.</td><td>AB1452</td><td></td></tr><tr><td>Leveradministratieset (flush line)</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>17175</td><td></td></tr><tr><td>Maxon, 1</td><td>Covidien Canada</td><td>606173</td><td></td></tr><tr><td>Med-Rx zuigverbindingsbuis</td><td>Benlan Inc.</td><td>70-8120</td><td></td></tr><tr><td>Orgaanzak</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>2990</td><td></td></tr><tr><td>Potts &ndash; De Martel, schaar</td><td>Aesculap Inc.</td><td>BC648R</td><td></td></tr><tr><td>Nierarterie cannula, 1.6"</td><td>Sorin Group Inc.</td><td>VC-11000</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 2-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S405</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 3-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S404</td><td></td></tr><tr><td>Satinsky, Suprahepatische Cava-klem</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB605R</td><td></td></tr><tr><td>Zuigtip</td><td>Tyco Healthcare Group LP</td><td>8888501023</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 6-0</td><td>Covidien Canada</td><td>VP733X</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, cauterist</td><td>Covidien Canada</td><td>E2515H</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Force Tx</td><td>Valleylab Inc.</td><td>216151480</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, patiënt retour elektrode</td><td>Covidien Canada</td><td>E7507</td><td></td></tr><tr><td>Naam</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Medicatie</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropinesulfaat 15 mg/30 ml</td><td>Rafter 8 Products</td><td>238481</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfine 0.3 mg/ml</td><td>RB Pharmaceuticals LDT</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Ceftiofur 3 mg/ml</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td>11103</td><td></td></tr><tr><td>Cefazoline 1 g</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td>2237138</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl Citraat 0.25 mg/5 ml</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td>2240434</td><td></td></tr><tr><td>Heparine 10.000 iU/10 ml</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td>10750</td><td></td></tr><tr><td>Histidine-tryptofaan-ketoglutaraat (HTK) oplossing</td><td>Methapharm</td><td>CU001LBG</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan 99,9%, 250 ml</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td>2231929</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine Hydrochloride&nbsp; 5.000 mg/50 ml</td><td>Bimeda-MTC Animal Health Inc.</td><td>612316</td><td></td></tr><tr><td>Lactated Ringer + 5% Dextrose 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>JB1064</td><td></td></tr><tr><td>Lactated Ringer 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>JB2324</td><td></td></tr><tr><td>Metronidazol 500 mg/100 ml</td><td>Baxter Corporation</td><td>870420</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam 50 mg/10 ml</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td>2242905</td><td></td></tr><tr><td>Norepinefrine 16 mg/250 ml Dextrose 5%</td><td>Baxter Corporation</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pantoprazol 40 mg</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td>2306727</td><td></td></tr><tr><td>Papaverine 65 mg/2 ml</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td>9881</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 1.000 mg/100 ml</td><td>Pharmascience Inc.</td><td>2244379</td><td></td></tr><tr><td>Saline 0,9%, 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>60208</td><td></td></tr><tr><td>Solu-Medrol 500 mg</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td>2367963</td><td></td></tr><tr><td>Verapamil</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td>2166739</td><td></td></tr><tr><td>Xylocaine Endotracheal 10 mg/50 ml</td><td>AstraZeneca</td><td>2003767</td><td></td></tr></tbody></table>

heterotope renal autotransplantatie in een varkens model: a step-by-step protocol

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

Nieratransplantatie is de behandelingsmethode bij patiënten die lijden aan eindstadium nierziekte. Het biedt een betere levensverwachting en hogere kwaliteit van leven in vergelijking met dialyse. Hoewel de afgelopen decennia grote verbeteringen zijn gezien in de resultaten voor patiënten na een niertransplantatie, vormt de toenemende schaarste aan beschikbare organen wereldwijd een ernstig probleem. Om de donorpool uit te breiden, worden marginale niertransplantaten die worden teruggevonden bij donoren met uitgebreide criteria (ECD) of gedoneerd na circulatoir overlijden (DCD) nu geaccepteerd voor transplantatie. Om het postoperatieve resultaat van deze marginale transplantaten verder te verbeteren, moet onderzoek zich richten op nieuwe therapeutische benaderingen zoals alternatieve bewaartechnieken, immunomodulatie, genoverdracht en stamceladministratie.
Experimentele studies in diermodellen zijn de laatste stap voordat nieuw ontwikkelde technieken kunnen worden vertaald naar de klinische praktijk. Varkensniertransplantatie is een uitstekend model voor menselijke transplantatie en maakt onderzoek naar nieuwe benaderingen mogelijk. Het grote voordeel van het varkensmodel is de anatomische en fysiologische gelijkenis met het menselijk lichaam, wat de snelle vertaling van nieuwe bevindingen naar klinische proeven mogelijk maakt. Dit artikel biedt een chirurgisch stapsgewijs protocol voor een autotransplantatiemodel en benadrukt belangrijke factoren om experimenteel succes te garanderen. Adequate pre- en postoperatieve huisvesting, zorgvuldige anesthesie en consistente chirurgische technieken resulteren in gunstige postoperatieve resultaten. Resectie van de contralaterale native nier biedt de mogelijkheid om de post-transplantatie graftfunctie te beoordelen. De plaatsing van veneuze en urinekatheters en het gebruik van metabole kooitjes maken verdere gedetailleerde evaluatie mogelijk. Voor langetermijnopvolgingsstudies en onderzoek naar alternatieve graftbewaartechnieken zijn autotransplantatiemodellen superieur aan allotransplantatiemodellen, omdat ze de verstorende bias veroorzaakt door afstoting en immunosuppressieve medicatie vermijden.

Hieronder zijn de resultaten van renale autotransplantatie experimenten (n = 4) worden aangetoond. Na de eerste transplantaat retrieval, de varkens teruggevonden in hun woongebied. Ondertussen werden de nieren grafts op ijs bewaard gedurende gemiddeld van 7 uur 35 minuten (± 18 min). Na Herstart van de anesthesie en herhaal laparotomie, werden de contralaterale nieren weggesneden en de koude opgeslagen transplantaten heterotoop getransplanteerd zoals beschreven. Na ontwennen van de ventilator werden varkens van een operatie teruggewonnen en dat gedurende 10 dagen (zie figuur 1). Dagelijks (1-4 postoperatieve dag pod) of om de tweede dag (6-10 pod) bloedmonsters werden verzameld om bloed gas analyses uit te voeren; aan de nierfunctie, serum creatinine en bloed ureum stikstof te beoordelen (BUN) waarden werden geschat. Ter vergelijking zijn de resultaten van een allotransplantatie niertransplantaat gepresenteerd. Voor immunosuppressie, ontving deze varken cyclosporine 100 mg po en cortisone 250 mg ivbid De chirurgische techniek was dezelfde als in de autotransplant protocol; geen warme ischemie tijd werd toegepast. Alle varkens waren in goede klinische toestand tijdens de follow-up periode. Het serum creatinine en BUN waarden bleek de grootste stijging op dag na chirurgie (Crea 2,8 ± 0,7 mg / dl BUN 25,3 ± 7 mg / dl) en daalde tot pod 10 (Crea 1,7 ± 0,4 mg / dl BUN 10,7 ± 4 mg / dl) in de buurt van de oorspronkelijke uitgangswaarden. De allotransplantatie niertransplantaat aangetoond hogere creatinine en BUN waarden na goede initiële transplantaatfunctie, in vergelijking met de autografts, waarschijnlijk door afstoting (figuur 2 en 3). Zuur-base hemostase (figuur 4) en elektrolyten (figuur 5) stabiel zonder tussenkomst. Histologisch onderzoek bleek bewaard tubulointerstitium in de nier getransplanteerd (Figure 6) en diffuse interstitiële ontsteking, tubulitis en glomerulitis in de allotransplantatie nier (Figuur 7). <img alt="figuur 2" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig2.jpg" /> Figuur 2. serumcreatininewaarden. Serum creatinine waarden (gemiddelde en standaarddeviatie) voor baseline en 10 na de operatie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 3" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig3.jpg" /> Figuur 3. Serum BUN-waarden. Serum BUN-waarden (gemiddelde en standaarddeviatie) voor baseline en 10 dagen na de operatie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> Figuur 4. Zuur-base hemostase. Zuur-base hemostase (gemiddelde en standaarddeviatie) voor baseline en 10 dagen na de operatie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 5" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig5.jpg" /> Figuur 5. Elektrolyt niveaus. Elektrolyt niveaus (gemiddelde en standaarddeviatie) voor baseline en 10 dagen na de operatie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 6" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig6.jpg" /> Figuur 6. histologie (H &amp;# 38;.. E), 100X vergroting Normaal tubulointerstitium in de nier getransplanteerd 10 dagen na de operatie <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig6large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 7" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig7.jpg" /> Figuur 7. Histologie (H &amp; E), 100X vergroting. Uitgebreide interstitiële ontsteking, tubulitis en glomerulitis, in overeenstemming met de afwijzing, in de allotransplantatie nier 10 dagen na de operatie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig7large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Varkensmodellen van orgaantransplantatie bieden een belangrijk platform om mechanismen van orgaanbehoud te bestuderen. Dit artikel beschrijft een heterotopisch varkensnier-autotransplantatiemodel, dat het onderzoek naar nieuwe benaderingen mogelijk maakt om het resultaat van transplantatie te verbeteren met behulp van marginale niertransplantaten.

Heterotope Renal Autotransplantatie in een Varkens Model: A Step-by-Step Protocol

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

Het algemene doel van deze chirurgische procedure is om betrouwbaar een heterotope renale autotransplantatie uit te voeren in een varkensmodel, wat goede nierfunctie van het transplantaat oplevert. Deze video en het bijbehorende manuscript kunnen helpen bij het beantwoorden van sleutelvragen over hoe heterotope renale autotransplantatie in een varkensmodel kan worden uitgevoerd. Het belangrijkste voordeel van deze video is dat het alle belangrijke handelingen laat zien en de verschillen tussen het varkens- en het klinische model benadrukt om adequate nierfunctie van het transplantaat na transplantatie te garanderen.Nadat het varken is verdoofd en op de operatietafel is voorbereid, worden de stembanden blootgelegd met behulp van een laryngoscope. De banden worden besproeid met een 2% lidocaine-oplossing om spasmen tijdens het intuberen te voorkomen. Vervolgens wordt het varken met een buis van 6,5 millimeter geïntubeerd en wordt de manchet geblokkeerd met drie tot vijf milliliter lucht.Regel de verdamper en bevestig een diepe anesthesie voordat u verdergaat. Zodra de anesthesie is bevestigd, wordt een 9,5 French enkel-lumen katheter geïntroduceerd in de halsslagader met behulp van de Seldinger-techniek. Dit betekent dat de ader wordt gepuncteerd, een geleidedraad wordt geïntroduceerd, de naald wordt vervangen door een peel-away introducer en de draad wordt vervangen door de katheter.Vervolgens wordt de katheter bevestigd met een 3-0 zijden naad. Gedurende de hele operatie wordt de katheter gebruikt om een cocktail van antibiotica en pijnstillers te introduceren. Smeer ook vetzalf op de ogen van het varken om uitdroging te voorkomen.Na steriele desinfectie en afdekking van het operatieveld, wordt een middenincisie van 25 centimeter lang gemaakt en wordt een retractor geplaatst. De dikke en dunne darmen worden bedekt met een handdoek en naar de linkerkant geplaatst voor optimale toegang tot de rechter nier. Nu moeten de urineleider en de rechter nier worden bevrijd van het aanhechtende weefsel met behulp van de cauterisatie.Vervolgens worden de rechter renale ader en slagader gedisseceerd met behulp van de cauterisatie totdat ze zijn bevrijd van hun oorsprong in de inferieure vena cava en de aorta. Om arteriële vasospasmen te voorkomen, kan het nuttig zijn om 30 tot 65 milligram papavarine toe te dienen. Nadat de renale dissectie is voltooid, wordt de urineleider afgebonden met een 3-0 zijden naad en wordt de urineleider distaal doorgesneden.Bereid op dit moment een kom met ijs en een steriele orgaanzak voor. Gebruik om de nier te verzamelen vaatklemmen. Klem eerst de nierslagader dicht bij de aorta.Tweede, klem de nierader dicht bij de vena cava. Vervolgens wordt het niertransplantaat gereserd en op ijs geplaatst. Canuleer nu onmiddellijk de nierslagader met de nierslagadercanule.Gebruik 500 milliliter ijskoude HTK-oplossing om het bloed weg te spoelen en bewaar de nier op ijs tot de transplantatie. Op zijn plaats, sluit de resterende nierslagader met een zijden 2-0 ligatuur en sluit de nierader met een loopende proleen 6-0 naad. Na het afhandelen van eventuele bloedingen, sluit de buik en de huid.Bevestig vervolgens de veneuze katheter subcutaan met een 3-0 zijden naad en tunnel hem in de rug van het varken om ongewenste manipulatie te voorkomen. Nadat het varken in rugligging is geplaatst, wordt de katheter stevig aan de huid genaaid. Na het verdoven van het varken en steriele desinfectie van de operatieplaats, wordt een snede van vier centimeter gemaakt naast de luchtpijp en wordt het weefsel gedissecteerd om de halsslagader bloot te leggen.Breng Overholt-tangen rond de slagader aan om een 2-0 zijden naad te plaatsen. Gebruik vervolgens de Seldinger-techniek om een plastic katheter te introduceren om de arteriële druk gedurende de hele operatie continu te meten. Hierna wordt de buikholte opnieuw geopend zoals voorheen.Nu wordt het bewaarde niertransplantaat eind-aan-zijde getransplanteerd naar de vena cava en aorta onder de nieren. Om dit te doen, worden vijf tot acht centimeter van de vena cava en aorta boven de iliacale bifurcatie gedisseceerd met behulp van pincetten en de cauterisatie. Probeer de lymfatische vaten te vermijden.Sluit ze indien nodig met 5-0 proleennaden. Controleer op bloedingen en verwijder eventueel overgebleven weefsel uit de vaten. Het doel is om voldoende vat bloot te leggen om Satinsky-klemmen te plaatsen.Vervolgens wordt de contralaterale nier gereserd. Plaats eerst het darmwerk naar rechts. Vervolgens worden de urineleider, de nier zelf, de nierader en de nierslagader van het omringende weefsel gedissecteerd.Bind vervolgens de urineleider en bloedvaten. Reseceren nu de nier en controleren op bloedingen. Plaats vervolgens het darmwerk opnieuw om de aorta en vena cava onder de nieren bloot te leggen.Injecteer heparine en wacht minimaal twee minuten. Neem het niertransplantaat en wikkel het in een doek met steriele ijs. Begin met de veneuze anastomose.Gebruik een Satinsky-klem om de vena cava volledig te klemmen. Maak vervolgens met een mes nr. 11 een snede die even groot is als de opening van de nierader. Potschaar kan worden gebruikt om de snede naar behoefte te verlengen.Gebruik twee dubbele 6-0 proleennaden om een craniale en caudale hoeksteek uit te voeren. Verwijder nu de nier van het varken van het ijs en plaats het in het operatieveld. Voer een craniale en caudale hoeksteek uit naar het transplantaat.Approximeer vervolgens de nier. Bind de bovenste hoek vast en voer een loopnaad uit met 6-0 proleen, beginnend met de achterwand. Bij 2/3 van de weg, gebruik het andere uiteinde van de knoop om de naad aan de voorkant te voltooien.Na het binden van de craniale steken, bind de steken op de caudale hoek. Plaats nu een bulldogklem op de nierader, open de Satinskyklem en controleer de veneuze anastomose op bloedingen. Plaats de Satinskyklem op de aorta.Maak vervolgens een snede die overeenkomt met de

heterotopic-renal-autotransplantation-porcine-model-step-step

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Niertransplantatie bij muizen is een technisch uitdagend procedure die een zorgvuldige postoperatieve zorg en behandeling voor succes vereist.

Murine niertransplantatie Procedure

This video demonstrates nephrectomy, the surgical procedure to remove one of the kidneys along with the section of the ureter. The blood vessels to and from the kidney are tied and divided. The excised kidney can be used for transplantation procedures.

Nephrectomy in a Porcine Model: A Surgical Procedure to Retrieve Porcine Kidney Graft for Transplantation

This video describes orthotopic kidney auto-transplantation in a porcine model. This surgical procedure involves the transplantation of an animal's kidney graft at its original anatomical location. The model is used to investigate new treatments for end-stage kidney diseases in humans.

Orthotopic Porcine Kidney Transplantation: A Technique to Transplant Graft Kidney in Porcine Model

Onderzoek naar de fysiologie van dierlijke organen kan worden uitgevoerd door een experimenteel ex vivo perfusiesysteem uit te voeren. De toevoeging van een varkensnier, als homeostatisch orgaan aan ons eerder ontwikkelde ex vivo leverperfusiemodel, kan een belangrijke stap zijn om een betere fysiologische omgeving te realiseren.

Stappen voor het autologe Ex vivo geperfundeerde varkenslever-nierexperiment

Hier beschrijven we een pre-klinisch groot dier (Porcine) model van orthotopic harttransplantatie dat stevig is vastgesteld en gebruikt om nieuwe cardioprotective strategieën te onderzoeken.

Een preklinisch varkens model van Orthotopic harttransplantatie

Grote diermodellen spelen een essentiële rol in het preklinisch transplantatieonderzoek. Vanwege de gelijkenis met de klinische setup, het varkensmodel van orthotopische nier auto-transplantatie beschreven in dit artikel biedt een uitstekende in vivo setting voor het testen van orgaan behoud technieken en therapeutische interventies.

Orthotopische nier auto-transplantatie in een varkensmodel met behulp van 24 uur orgaanbehoud en continue telemetrie

We presenteren een protocol voor het gebruik van een normotherme ex vivo sanguineuze perfusiesysteem voor de levering van therapeutica aan een volledig cardiaal allograft in een varkens heterotopisch harttransplantatiemodel.

Een porcine heterotopisch harttransplantatieprotocol voor de levering van therapeutica aan een cardiale allograft

Hier presenteren we een protocol dat een chirurgisch model voor nierverkrijging beschrijft in een preklinisch varkensmodel voor daaropvolgende machineperfusie of transplantatie.

Nierverkrijging in een preklinisch groot diermodel

Het protocol beschrijft hier een high-fidelity varkensmodel van harttransplantatie na donatie na dood van de bloedsomloop met behulp van ex vivo perfusie van het allotransplantaat.

Een high-fidelity varkensmodel van orthotope harttransplantatie na donatie na overlijden van de bloedsomloop

Het meten van gyrification (corticale vouwen) op elke leeftijd is er een venster in de vroege ontwikkeling van de hersenen. Vandaar dat we reeds ontwikkelde een algoritme om de lokale gyrification meten op duizenden punten over het...

Hoe kan ik Corticale Folding Meet vanaf MR Foto&#39;s: een stap-voor-stap handleiding voor lokale Gyrification Index Compute

Leer heterotopische nierautotransplantatie in een varkensmodel voor niertransplantatieonderzoek. Dit protocol toont chirurgische technieken voor optimale nierfunctie en orgaanpreservatie.

Heterotope Renal Autotransplantatie in een Varkens Model: A Step-by-Step Protocol

Meer video's verkennen