Name: Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 28 s
Description: Leer ultrasone vocalisaties opnemen bij muizen om sociale communicatie te evalueren in neurowetenschappelijk onderzoek. Deze gestandaardiseerde methode verbetert vergelijkbaarheid tussen studies en draagt bij aan inzicht in genetische basis van gedrag.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de Fondation de France; door de ANR FLEXNEURIM [ANR09BLAN034003]; door de ANR [ANR- 08-MNPS-037-01-SynGen]; door Neuron-ERANET (EUHF-AUTISM); door de Fondation Orange; door de Fondation FondaMentale; door de Fondation de France; door de Fondation Bettencourt-Schueller. Het onderzoek dat tot dit artikel heeft geleid, heeft ook steun ontvangen van de Innovative Medicine Initiative Joint Undertaking onder subsidieovereenkomst nr. 115300, waarvan de middelen zijn samengesteld uit een financiële bijdrage van het zevende kaderprogramma van de Europese Unie (FP7/2007-2013) en een in natura bijdrage van EFPIA-bedrijven. We danken Julie Lévi-Strauss voor nuttige opmerkingen over het manuscript en zes anonieme recensenten wiens opmerkingen het manuscript aanzienlijk hebben verbeterd.

<ol><li>American Psychiatric Association. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Diagnostic+and+Statistical+Manual+of+Mental+Disorders%2C%0A++Fifth+Edition+%28DSM-V%29%22">Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,
 Fifth Edition (DSM-V)</a>. , (2013).</li>
<li>Ey, E., Leblond, C. S., Bourgeron, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+Profiles+of+Mouse+Models+for+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral Profiles of Mouse Models for Autism Spectrum Disorders.</a> Autism Res. 4 (1), 5-16 (2011).</li>
<li>Bourgeron, T., Jamain, S., Granon, S. Animal Models of Autism - Proposed Behavioral Paradigms and Biological Studies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBourgeron%2C+T+%22Contemporary+Clinical+Neuroscience%3A+Transgenic+and+Knockout+Models+of+Neuropsychiatric+Disorders%22">Contemporary Clinical Neuroscience: Transgenic and Knockout Models of Neuropsychiatric Disorders</a>. , 151-174 (2006).</li>
<li>Scattoni, M. L., Crawley, J., Ricceri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations%3A+A+tool+for+behavioural+phenotyping+of+mouse+models+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations: A tool for behavioural phenotyping of mouse models of neurodevelopmental disorders.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 33 (4), 508-515 (2009).</li>
<li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Cur.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Cur. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li>
<li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice%2C+birds%2C+and+men%3A+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PLOS ONE. 7, e46610(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Schreiweis, C., Minge, C., Pääbo, S., Fischer, J., Enard, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+humanized+version+of+Foxp2+does+not+affect+ultrasonic+vocalization+in+adult+mice%3A+Ultrasonic+vocalization+of+%26%2334%3Bhumanized%26%2334%3B+FoxP2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A humanized version of Foxp2 does not affect ultrasonic vocalization in adult mice: Ultrasonic vocalization of &#34;humanized&#34; FoxP2 mice.</a> Genes Brain Behav. , (2015).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46, 28-34 (2007).</li>
<li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+Behavior%2C+Ultrasonic+Communication+and+Social+Reward+Are+Influenced+by+Genetic+Variation+in+Adolescent+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Affiliative Behavior, Ultrasonic Communication and Social Reward Are Influenced by Genetic Variation in Adolescent Mice.</a> PLOS ONE. 2, (2007).</li>
<li>Zippelius, H. -M., Schleidt, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultraschall-Laute+bei+jungen+M%C3%A4usen%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Ultraschall-Laute bei jungen Mäusen.</a> Naturwissenschaften. 43, 502(1956).</li>
<li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+emissions%3A+do+they+facilitate+courtship+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic emissions: do they facilitate courtship of mice.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 84, 445-452 (1973).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLOS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li>
<li>Maggio, J. C., Whitney, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizing+by+adult+female+mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizing by adult female mice (Mus musculus).</a> J. Comp. Psychol. 99, 420-436 (1985).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+Male+Mice+Emit+Context-Specific+Ultrasonic+Vocalizations+That+Are+Modulated+by+Prior+Isolation+or+Group+Rearing+Environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Adult Male Mice Emit Context-Specific Ultrasonic Vocalizations That Are Modulated by Prior Isolation or Group Rearing Environment.</a> PLOS ONE. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%22songs%22+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic "songs" with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5, 589-592 (2009).</li>
<li>Wöhr, M., Moles, A., Schwarting, R. K. W., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+social+exploratory+activation+in+male+-opioid+receptor+KO+mice+in+response+to+playback+of+female+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lack of social exploratory activation in male -opioid receptor KO mice in response to playback of female ultrasonic vocalizations.</a> Soc. Neurosci. 6, 76-87 (2011).</li>
<li>Granon, S., Faure, P., Changeux, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Executive+and+social+behaviors+under+nicotinic+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Executive and social behaviors under nicotinic receptor regulation.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 100 (16), 9596-9601 (2003).</li>
<li>Schmeisser, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+behaviours+and+hyperactivity+in+mice+lacking+ProSAP1%2FShank2%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like behaviours and hyperactivity in mice lacking ProSAP1/Shank2.</a> Nature. 486 (7402), 256-260 (2012).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+Deficits+in+Social+Behaviors+and+Ultrasonic+Vocalizations+in+Later+Generations+of+Mice+Lacking+Neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of Deficits in Social Behaviors and Ultrasonic Vocalizations in Later Generations of Mice Lacking Neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. 11, 928-941 (2012).</li>
<li>Chadman, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+Aberrant+Behavioral+Phenotypes+of+Neuroligin-3+R451C+Knockin+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Minimal Aberrant Behavioral Phenotypes of Neuroligin-3 R451C Knockin Mice.</a> Autism Res. 1, 147-158 (2008).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+Repertoire+of+Vocalizations+in+the+BTBR+T+plus+tf%2FJ+Mouse+Model+of+Autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual Repertoire of Vocalizations in the BTBR T plus tf/J Mouse Model of Autism.</a> PLOS ONE. 3, (2008).</li>
<li>De Chaumont, F., Coura, R. D. -S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computerized+video+analysis+of+social+interactions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Computerized video analysis of social interactions in mice.</a> Nat. Methods. 9, 410-417 (2012).</li>
<li>Leblond, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+Functional+Analyses+of+SHANK2+Mutations+Suggest+a+Multiple+Hit+Model+of+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetic and Functional Analyses of SHANK2 Mutations Suggest a Multiple Hit Model of Autism Spectrum Disorders.</a> PLOS Genet. 8 (2), e1002521(2012).</li>
<li>Berkel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+the+SHANK2+synaptic+scaffolding+gene+in+autism+spectrum+disorder+and+mental+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mutations in the SHANK2 synaptic scaffolding gene in autism spectrum disorder and mental retardation.</a> Nat. Genet. 42, 489-491 (2010).</li>
<li>Pinto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+impact+of+global+rare+copy+number+variation+in+autism+spectrum+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Functional impact of global rare copy number variation in autism spectrum disorders.</a> Nature. 466, 368-372 (2010).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+ProSAP1%2FShank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T+plus+tf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T plus tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10, 44-56 (2010).</li>
<li>Zorrilla, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparous+species+present+problems+%28and+possibilities%29+to+developmentalists%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Multiparous species present problems (and possibilities) to developmentalists.</a> Dev. Psychobiol. 30 (2), 141-150 (1997).</li>
<li>Lazic, S. E., Essioux, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+basic+and+translational+science+by+accounting+for+litter-to-litter+variation+in+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Improving basic and translational science by accounting for litter-to-litter variation in animal models.</a> BMC Neurosci. 14 (1), 37(2013).</li>
<li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. Behav. 96, 602-605 (2009).</li>
<li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li>
<li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Peñagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VoICE%3A+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Sci. Rep. 5, 10237(2015).</li>
<li>Weissgerber, T. L., Milic, N. M., Winham, S. J., Garovic, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+Bar+and+Line+Graphs%3A+Time+for+a+New+Data+Presentation+Paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Beyond Bar and Line Graphs: Time for a New Data Presentation Paradigm.</a> PLOS Biol. 13 (4), e1002128(2015).</li>
<li>Jamain, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+social+interaction+and+ultrasonic+communication+in+a+mouse+model+of+monogenic+heritable+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Reduced social interaction and ultrasonic communication in a mouse model of monogenic heritable autism.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. U. S. A. 105, 1710-1715 (2008).</li>
<li>Won, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+social+behaviour+in+Shank2-mutant+mice+improved+by+restoring+NMDA+receptor+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like social behaviour in Shank2-mutant mice improved by restoring NMDA receptor function.</a> Nature. 486, 261-265 (2012).</li>
<li>Ferhat, A. -T., Le Sourd, A. -M., de Chaumont, F., Olivo-Marin, J. -C., Bourgeron, T., Ey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+Communication+in+Mice+-+Are+There+Optimal+Cage+Conditions%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Social Communication in Mice - Are There Optimal Cage Conditions?</a> PLOS ONE. 10 (3), e0121802(2015).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het protocol hier gepresenteerde biedt gestandaardiseerde en betrouwbare manieren om muizen ultrasone geluiden te verzamelen in het laboratorium. Deze zeer beperkte situaties presenteren het voordeel van standaardisatie. Ze worden gebruikt met succes aan stammen of genotypen binnen stammen 18,19,26,27 te vergelijken. Zoals gepresenteerd in de representatieve resultaten, deze methoden kan de identificatie van atypische sociale communicatie bij muizen gemuteerd voor Shank2, een gen geassocieerd met autisme spectrum stoornissen. Vergelijkingen tussen muizenstammen tussen verschillende contexten of zelfs tussen laboratoria wordt geactiveerd door de beschikbaarheid van grote datasets op mouseTube database. Dit instrument moet onderzoeken op de muis ultrasone geluiden te verhogen doordat multivariate analyses. De hier beschreven protocollen worden geoptimaliseerd om muizen van verschillende genotypen te testen in een stam, zoals in de meeste studies gedaan modelleren van de genetische cIJDRAGE neuropsychiatrische aandoeningen. Aanbevolen wordt experimenteel ontwerpen elke studie om de beste controles. Sterker nog, misschien strooisel effecten maskeren of kunstmatig genetische effecten 28,29. Het is daarom raadzaam om nestgenoot controles omvatten voor elk genotype. Fokken van heterozygote ouders moeten daarom de voorkeur, omdat het de juiste afstemming van mutant en controle muizen binnen een nestje zal toestaan. Dit rechtvaardigt de poot tattoo markering van alle pups (blind voor genotype) om personen te volgen gedurende de opnames om de twee dagen. Genotypering wordt gedaan bij het spenen, door het nemen van monsters staart. Bij het opnemen van pup isolement oproepen van P2 op, zouden we niet aanraden om staart monsters al in pups, omdat deze operatie omvat aanvullende manipulatie en stress zeer dicht in de tijd naar een opnamesessie. De protocollen die hier voorgesteld om ultrasone geluiden op te wekken bij volwassenen niet mogelijk een duidelijke identificatie van het EMItter van de geluiden. Dit verklaart waarom we de motivatie van het proefdier te manipuleren. Inderdaad, worden de test muizen geïsoleerd en geen nieuwkomer en proefdieren gewennen gedurende een lange tijd om de testkooi tijdens hetzelfde geslacht interacties. In man-vrouw interacties, de geïntroduceerde vrouwtje is niet geïsoleerd en de test mannelijke went voor kortere tijd sinds motivatie hoger in deze seksuele context. Deze manipulaties motivatie dient de waarschijnlijkheid van de testmuis emitterende de geluiden en niet de geïntroduceerde één maximaliseren. Om mannelijke ultrasone geluiden op te nemen in een seksuele context, een eenvoudig wattenstaafje met verse (dus niet ingevroren) urine van een oestrus vrouwelijke kan ook worden in de kooi 30 geïntroduceerd. Deze werkwijze maakt de overdracht van ultrasone geluiden naar test man met 100% zekerheid maar voorkomt verzamelen van specifieke gegevens over de werkelijke sociale context van de emissie van deze vocalisaties. Daarom geven we de voorkeur aan de protocol hier beschreven (met een vrij bewegende oestrus vrouwelijke). We ook aan om altijd ingevoerd muizen van dezelfde stam bij het testen muizen uit een mutante stam en de gegevens te analyseren als een paar muizen vocalizing. Een recente studie bevordert het gebruik van triangulatie met de emitter 31 lokaliseren. In deze studie werden vrouwen gevonden om ook uit te stoten ultrasone geluiden tijdens ontmoetingen met een mannelijke. Dit kan worden verklaard door het feit dat ze werden geïsoleerd gedurende ten minste twee weken vóór de opnamesessie. De veralgemening van het gebruik van de in deze studie voorgestelde triangulatie moet toch mogelijk maken de identificatie van de emitter van de geluiden in de meeste gevallen, als video-opnamen correct worden gesynchroniseerd. Het isolement oproepen van pups opgenomen tijdens de ontwikkeling worden niet verstoord door achtergrondgeluiden van het beddengoed. Gewoonlijk wordt een automatische analyse werkt erg goed naar de belangrijkste variabelen te extraheren. In tegenstelling geluiden opgenomen van volwassenen zijn disturbed door achtergrondgeluiden van de dieren bewegen in het beddengoed. Automatische analyse uitvalt en daarom handmatige analyse worden gebruikt. Niettemin, het toevoegen van beddengoed in de test kooi moeten voorwaarden die minder belastend voor de dieren dan kale grond (dat muizen niet bevalt) zijn voorzien. Verdere inspanningen in de gemeenschap zijn gericht op het verbeteren van de automatische detectie van ultrasone geluiden onder verschillende omstandigheden, zelfs die impliceren achtergrondgeluiden. Bijvoorbeeld, de voice-software maakt het mogelijk om geluiden die handmatig waren geselecteerd voor de afwezigheid van ruis 32 te analyseren. In deze software, de winning van de akoestische variabelen is automatisch, maar moet de eerste handmatige selectie. Opgemerkt wordt dat de inter-individuele variabiliteit is zeer belangrijk in de vocale gedrag van muizen. Zo wordt de oproep snelheid van volwassen mannen in aanwezigheid van een oestrus vrouwelijke zeer verdeeld (figuur 1). we suggest deze gestandaardiseerde protocollen aan ultrasone geluiden lokken reeds aan de variabiliteit in verband met de experimentele context te beperken. Toch willen we wijzen op het belang van de presentatie niet alleen het gemiddelde en SEM voor de gegevens, maar het belangrijkste is de afzonderlijke punten in monsters van kleine omvang 33. Het is ook zeer relevant - zo niet nodig - tenminste 12 individuen per groep / genotype opnemen representatieve gegevens te verzamelen. In veel gevallen moet de inter-individuele variabiliteit niet worden verborgen (meestal kan het niet), en het zou van groot belang zijn voor individuen die de genetische mutatie onderzocht, maar niet weergegeven geen atypisch fenotype te identificeren. Zulke mensen kunnen aanwijzingen over compensaties, die nieuwe wegen zou kunnen openen voor therapieën van genetische stoornissen. In de meeste gedragsproblemen karakteriseringen van muismodellen voor neuropsychiatrische aandoeningen, vocale gedrag en sociale contacten te overwegened elkaar (bijvoorbeeld 19,27,34,35). Recente analyse methoden leveren nu een semi-automatische gedetailleerde karakterisering van de sociale gebeurtenissen en reeksen gebeurtenissen tijdens een interactie (met MiceProfiler bijvoorbeeld) 36, evenals de mogelijkheid om deze analyse met gegevens van geluidsopnamen combineren. Het belangrijkste voordeel van deze methode is om een ​​volledig beeld van de sociale communicatie in muismodellen van ASD, om nauwkeuriger te bepalen welke aspecten van sociale communicatie worden beïnvloed. In dit protocol de synchronisatie nog handmatig, maar dit kan worden verbeterd door het activeren van de video-opname door de geluidsopnametoepassing. Dit soort analyses moet de norm naar een meer uitgebreid overzicht van de tekorten sociale communicatie in muismodellen van neuropsychiatrische stoornissen geworden. Bovendien tot nu vocale signalen worden meestal geanalyseerd vanuit het emitter zijde (bijv tests worden gebouwd om de emissie van vo bevorderencal signalen van de geteste muizen, zoals in de onderhavige protocollen). De nadruk moet nu ook instelbaar op de ontvanger van deze signalen, de functies van deze akoestische signalen beter te identificeren. Dit moet gebeuren door de beoordeling ook het gedrag van de nieuwkomer muizen in de onderhavige protocollen bij volwassenen (met MiceProfiler bijvoorbeeld) 36, met weergave experimenten 16 of door nieuwe protocollen. Inderdaad, de huidige protocollen voorzien zeer constrained situaties die misschien niet de exacte ethologisch voorwaarden emissie vocalisatie bij muizen. De spontane emissie van ultrasone geluiden moeten worden beter gekarakteriseerd met behulp van continue audio- en video-opnamen om meer licht te werpen op de spontane vocale gedrag van de muizen.

Patiënten met neuropsychiatrische stoornissen meestal weer tekorten in de sociale communicatie (bijvoorbeeld patiënten met autisme spectrum stoornissen, schizofrenie, of de ziekte van Alzheimer) 1. Genetisch gemanipuleerde muizen worden steeds vaker gebruikt voor genetische oorzaken van deze aandoeningen 2 modelleren. Het bestuderen sociale communicatie in deze muismodellen is van groot belang voor het begrip van de mechanismen van de genetische mutaties die leiden tot atypische sociale stoornissen en voor het testen van nieuwe therapieën. Omdat muizen zijn sociale dieren en te communiceren met elkaar met behulp van olfactorische, tactiele, visuele en akoestische signalen, ze zijn geschikte modellen voor sociale communicatie te evalueren. Mouse ultrasone geluiden worden nu nog gebruikt als proxy voor het modelleren van de genetische basis van vocale communicatie tekorten 3,4 (maar het bestaan ​​van vocale leren in deze soort is nog steeds gedebatteerd 5,6, zelfs als de meeste recente studies betooge voor de afwezigheid van oefendoeleinden 7). Laboratorium muizen zijn gevonden om ultrasone geluiden uit te stoten in de moeder-kind relaties, in man-vrouw socio-seksuele interacties, in hetzelfde geslacht sociale interacties (beoordeeld in verwijzing 8) en bij juveniele-juveniele sociale interacties 9. Muis pups uitstoten isolement oproepen tijdens hun eerste twee weken van het leven wanneer geïsoleerd van dam en nestgenoten 10. Mannetjes zenden ultrasone geluiden wanneer in aanwezigheid van een oestrus vrouwelijke (of urine-signalen uit haar) 11,12. Mannetjes en vrouwtjes zenden ultrasone vocalisatie bij de interactie met een onbekende soortgenoten van hetzelfde geslacht 13,14. De organisatie en de functies van deze geluiden zijn niet helemaal duidelijk en moeten verder onderzoek. Huidige kennis over het functionele aspect beperkt is tot het uitlokken van retrieval gedrag bij moeders horen pup isolatie dringt het vergemakkelijken van de nabijheid van volwassen vrouwen tegen volwassen mannelijke vocalizationen 15 en de toegenomen verkennende gedrag van de volwassen mannen horen volwassen vrouwtje vocalizations 16. Karakteriseren van de afwijkingen in vocale communicatie in muismodellen van neuropsychiatrische aandoeningen moeten in gestandaardiseerde omstandigheden worden uitgevoerd om uit te sluiten belangrijke bijdrage van de experimentele omstandigheden. Dergelijke karakteriseringen, gecombineerd met de schatting van gelijktijdige sociale interacties en neurobiologische studies in verschillende genetische modellen moeten onze kennis over de genetische bijdrage aan de verschillende aspecten van de muis ultrasone communicatie te verbeteren. Over een lange termijn moet het verder licht te geven op een aantal neurobiologische basis van sociale communicatie bij de mens. We nu streven ernaar om eenvoudige protocollen betrouwbaar wekken ultrasone geluiden tijdens de ontwikkeling en in de volwassenheid voor zowel mannelijke als vrouwelijke muizen in het laboratorium. Dergelijke protocollen moeten de standaardisatie van opnames om meer betrouwbaar te vergelijken Ultr verlichtenAsonic stemgebruik emissies tussen stammen en laboratoria. Het moet ook het opzetten van dergelijke opnames in laboratoria hebben geen ervaring met de muis ultrasone geluiden opnames te vergemakkelijken. We hebben ook wijzen op de huidige mogelijkheid om ultrasone geluiden data te combineren met gedetailleerde behavioral data gelijktijdig verzameld tijdens sociale interacties in volwassen muizen, om cruciale informatie te verkrijgen over sociale beperkingen als op de context van de uitstoot van ultrasone geluiden. Dergelijke analyses zullen nieuw licht werpen op de organisatie en de functies van de muis ultrasone geluiden. Tot slot, wij adverteren ook de mogelijkheid om ultrasone vocalisatie opnames te delen met de hele wetenschappelijke gemeenschap op de mouseTube database (http://mousetube.pasteur.fr). Open toegang tot de audio-opname gegevens moeten kennis over de muis ultrasone communicatie stimuleren doordat wetenschappers om hun eigen gegevens te vergelijken met ultrasone geluiden opgenomen in andere laboratoria (met gelijke of verschillende stammen / protocols) en / of hun analysemethoden dagen met bestanden die onder verschillende omstandigheden.

<table><tbody><tr><td>naalden 0,3 mm x 13 mm [30&nbsp;G 1/2"]</td><td>BD Microlance</td><td>304000</td><td>-</td></tr><tr><td>groene tattoo pasta</td><td>Ketchum Manufacturing Inc., Ottawa, Canada</td><td>329AA</td><td>-</td></tr><tr><td>thermometer</td><td>Fisherbrand, Waltham, VS</td><td>4126 (W255NA)</td><td>-</td></tr><tr><td>zelfgemaakte geluiddichte kamer (puppy's)</td><td>Institut Pasteur, Parijs</td><td>-</td><td>akoestische schuim + plexiglas; binnenafmetingen (B x H x D): 32 cm x 33 cm x 32 cm</td></tr><tr><td>kleine oppervlakte thermistor + enkele sonde thermokoppel</td><td>Harvard Apparatus</td><td>599814 + 601956</td><td>-</td></tr><tr><td>reukloze pen</td><td>bijvoorbeeld: Giotto</td><td>-</td><td>inkt gemaakt met water, wasbaar: deze pennen zijn ontworpen voor baby's</td></tr><tr><td>Ethanol absoluut (100%)</td><td>Sigma Aldrich,&nbsp; Saint-Quentin Fallavier, Frankrijk</td><td>24103</td><td>1/10 verdund</td></tr><tr><td>Condensor ultrasoon microfoon Avisoft-Bioacoustics CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#40011</td><td>uitgerust met verlengkabels door de Avisoft-onderneming</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate 416H</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#34163</td><td>geluidskaart</td></tr><tr><td>Avisoft Recorder USGH</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#10301; #10302</td><td>opnamesoftware voor Windows Vista, 7 en 8</td></tr><tr><td>Avisoft SASLab Pro</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlijn, Duitsland</td><td>#10101, 10111; #10102, 10112;&nbsp;</td><td>Windows 10, 8.1, 8, 7 of Vista inclusief Intel-gebaseerde Apple Macintosh die Boot Camp, Parallels of soortgelijke virtualisatiesoftware draaien.</td></tr><tr><td>Laptop of Apple Macintosh die Boot Camp draaien</td><td>-</td><td>-</td><td>die Windows 10, 8.1, 8, 7 of Vista draaien; voor de Apple Macintosh heeft Boot Camp de voorkeur boven virtualisatiesoftware zoals Parallels vanwege geheugenbeperkingen</td></tr><tr><td>kunststof vat (opnames van puppy's)</td><td>Lock &amp; Lock, Chatswood, VS</td><td>HPL932D</td><td>Lock &amp; Lock Stackable Airtight Container Round 700&nbsp;ml; gebruik zonder deksel; afmetingen: 9&nbsp;cm diameter, 10 cm hoogte</td></tr><tr><td>PBS 1x (pH = 7,4)</td><td>Gibco (Life Technologies)</td><td>10010-023</td><td>-</td></tr><tr><td>glazen plaatjes</td><td>Menzel-Glä&auml;ser, Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td>Superfrost Plus</td></tr><tr><td>May-Gr&uuml;nwald-oplossing 500 ml</td><td>RAL Réactifs, Martillac, Frankrijk</td><td>320070-0500</td><td>-</td></tr><tr><td>Giemsa R 500 ml</td><td>RAL Réactifs, Martillac, Frankrijk</td><td>720-1107</td><td>1/20 verdund in fosfaatbufferoplossing</td></tr><tr><td>fosfaatbufferoplossing (zelfgemaakt)</td><td>-</td><td>-</td><td>pH = 7, 0,1 M: 39 ml NaH2PO4 0,2 M + 61 ml Na2HPO4 0,2 M + 100&nbsp;ml H2O (eindvolume: 200&nbsp;ml)</td></tr><tr><td>testkooi</td><td>Institut Pasteur, Parijs</td><td>-</td><td>50&nbsp;x&nbsp;25&nbsp;cm, 30&nbsp;cm hoogte; Plexiglas</td></tr><tr><td>zelfgemaakte geluiddichte kamer (opnames volwassenen)</td><td>Institut Pasteur, Parijs</td><td>-</td><td>akoestische schuim + PVC; binnenafmetingen (B x H x D): 66 cm x 90 cm x 46 cm</td></tr><tr><td>videocamera</td><td>Van Noldus Information Technologies, Wageningen, Nederland</td><td>-</td><td>hoge resolutie CamTech Super-Hi-Res videocamera; 25 fps&nbsp;</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus Information Technology, Wageningen, Nederland</td><td>http://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt</td><td>video-acquisitiesoftware</td></tr><tr><td>Mice Profiler Tracker-plug-in van het ICY-platform</td><td>Bio Image Analysis, Institut Pasteur, Parijs</td><td>http://icy.bioimageanalysis.org/plugin/Mice_Profiler_Tracker</td><td>trackingsoftware voor het analyseren van gedragsgebeurtenissen tijdens sociale interacties</td></tr></tbody></table>

opname mouse ultrasone geluiden om sociale communicatie evalueer

Recording Mouse Ultrasonic Vocalizations to Evaluate Social Communication

Muizen stoten in verschillende contexten gedurende de ontwikkeling en in volwassenheid ultrasone vocalisaties uit. Deze vocale signalen worden momenteel gebruikt als proxies voor het modelleren van de genetische basis van vocale communicatiedeficiënties. Het karakteriseren van het vocale gedrag van muizenmodellen die mutaties dragen in genen geassocieerd met neuropsychiatrische stoornissen zoals autismespectrumstoornissen, zal helpen om de mechanismen die leiden tot sociale communicatiedeficiënties te begrijpen. We bieden hier protocollen om betrouwbaar ultrasone vocalisaties bij pups en bij volwassen muizen op te wekken. Deze standaardisering zal helpen de inter-studievariabiliteit te verminderen als gevolg van de experimentele instellingen. Isolatieoproepen van pups worden gedurende de ontwikkeling opgenomen van individuele pups geïsoleerd van moeder en nestgenoten. In de volwassenheid worden vocalisaties opgenomen tijdens interacties tussen gelijkgestemden (zonder een seksuele component) door sociaal gemotiveerde mannetjes of vrouwtjes bloot te stellen aan een onbekende gelijkgestemde consoort. We bieden ook een protocol om vocalisaties op te nemen van volwassen mannetjes die worden blootgesteld aan een vrouwtje in oestrus. In dit context is er een seksuele component in de interactie. Deze protocollen zijn opgesteld om een grote hoeveelheid ultrasone vocalisaties bij laboratoriummuizen op te wekken. We wijzen echter op de belangrijke interindividuele variabiliteit in het vocale gedrag van muizen, waarmee rekening moet worden gehouden door een minimaal aantal individuen op te nemen (minstens 12 in elke conditie). Deze opnames van ultrasone vocalisaties worden gebruikt om de oproepfrequentie, het vocale repertoire en de akoestische structuur van de oproepen te evalueren. Gegevens worden gecombineerd met de analyse van synchrone video-opnamen om een vollediger beeld te krijgen van sociale communicatie bij muizen. Deze protocollen worden gebruikt om de vocale communicatiedeficiënten te karakteriseren bij muizen die ProSAP1/Shank2 missen, een gen geassocieerd met autismespectrumstoornissen. Meer opnames van ultrasone vocalisaties zijn ook te vinden op de mouseTube database, ontwikkeld om de uitwisseling van dergelijke gegevens te bevorderen.

Met de huidige protocollen, we karakteriseerde de vocale gedrag van muizen ontbreekt ProSAP1 / Shank2, een gen geassocieerd met autisme spectrum stoornissen (ASS) 23-25. ASD worden gekenmerkt door tekorten in de sociale communicatie en stereotype gedragingen 1. Onze Shank2 - / - muizen weergegeven hyperactiviteit, verhoogde angst en atypische vocale communicatie 18,26. Sterker nog, we hebben geconstateerd dat Shank2 - / - muizen verschijnt een atypisch ontwikkelings-profiel in hun emissie van pup isolement oproepen in vergelijking met de typische omgekeerde U-vormige curve in hun wild-type nestgenoten Shank2 -. / - Muizen getoond een verhoogde call rate bij P4 en verminderde gesprekstarief op P6 in vergelijking met hun wild-type nestgenoten (figuur 2). We zagen ook een verminderde call rate bij vrouwelijke interacties met een Shank2 - / - vrouw in VERGELIJKIn met interacties van een wild-type littermate (figuur 2). We hebben gekeken naar het repertoire van de 5 verschillende call categorieën. Het bleek verschillend tussen pups (bijvoorbeeld hier P2, P6 en P10) en volwassenen (figuur 3) te zijn. -Genotype gerelateerde verschillen significant waren meestal in volwassenheid. Tijdens sociale interacties van volwassen Shank2 - / - mannen of vrouwen met een C57BL / 6N vrouwen werden meer korte gesprekken en ongestructureerde gesprekken die in vergelijking met de omgang met hun wild-type nestgenoten (Figuur 3D en E). Minder complexe oproepen en frequentie springt gesprekken werden opgenomen tijdens interacties met een C57BL / 6N vrouw met volwassen Shank2 - / - vrouwen in vergelijking met de interacties van Shank2 + / + vrouwen (figuur 3E). Tot slot hebben we ook gemeten handmatig akoestische variabelen. Er was geen significant-genotype samenhangend verschil during ontwikkeling. In tegenstelling, de duur van gesprekken die tijdens interacties van volwassen Shank2 - / - vrouwtjes waren korter dan die opgenomen tijdens interacties met hun wild-type nestgenoten (Figuur 4A). We hebben ook benadrukt dat de piek frequentie van ultrasone geluiden verhoogd tijdens pup ontwikkeling zonder noemenswaardige-genotype samenhangend verschil 26. Tijdens interacties met Shank2 - / - mannen of vrouwen met een C57BL / 6N vrouw, ultrasone geluiden had een lagere piek frequentie in vergelijking met de gesprekken opgenomen tijdens interacties met hun wild-type nestgenoten (Figuur 4B). Daarnaast heeft de onderhavige protocol ook toegestaan ​​om de context van de emissie van ultrasone geluiden bestuderen door het combineren van de data van geluidsopnamen de gedragsgegevens onttrokken MiceProfiler (ICY software, Institut verledeneur, Parijs). Bijvoorbeeld, in twee vrouwelijke interacties, werden de meeste ultrasone geluiden te horen als de dieren in contact en meer in het bijzonder de bewoner snuiven ano-genitale gebied van de nieuwkomer waren, of in ieder geval de bewoner zijn achter de nieuwkomer. Muizen ook uitgestoten veel ultrasone geluiden wanneer de bewoner benaderde de nieuwkomer (Figuur 5, bovenste paneel). Minder geluiden werden opgenomen toen de bewoner Shank2 - / - muizen waren in fysiek contact met de nieuwkomer (bv, snuiven de ano-genitale gebied van de nieuwkomer) dan wanneer de bewoner was een wild-type muis. Minder geluiden werden geactiveerd wanneer de bewoner achter de nieuwkomer was een Shank2 - / - muis dan toen het nog een wild-type muis. Meer geluiden werden geregistreerd wanneer de nieuwkomer was in het gezichtsveld van de bewoner muis, en meer in het wild-type dan in de mutanten (Figuur 5, onderste paneel). s = &quot;jove_content&quot; fo: keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="Figuur 2" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig2.jpg" /> Figuur 2:. Emissie van ultrasone geluiden tijdens de ontwikkeling en in volwassen mannelijke en vrouwelijke Shank2 - / - muizen en wild-type nestgenoten Bel snelheid van pups (om de twee dagen van P2 tot P12, n = 18-19 Shank2 + / +, n = 15-16 Shank2 - / -) en volwassenen in man-oestrus vrouwelijke interacties (n = 15 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / -) en vrouwelijke uiteinden interacties (n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 - / -) in wild-type muizen (linker paneel) en Shank2 - / - muizen (rechter paneel). Gegevens zijn weergegeven als gemiddelde +/- SEM en afzonderlijke punten (niet-gepaarde Wilcoxon test: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01, *** p &lt;0,001).ge.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken. <img alt="figuur 3" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig3.jpg" /> Figuur 3:. Vocale repertoire van Shank2 - / - muizen en wild type nestgenoten aandelen van de vijf verschillende soorten oproepen afkomstig van P2 pups (A; n = 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P6 pups (B; n = 19 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P10 pups (C; n = 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), volwassen mannen met een oestrus vrouwelijke (D ; n = 16 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / -) en volwassen vrouwen met een vrouwelijke (E; n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 </em&gt; - / -) in wild-type muizen (links panelen) en Shank2 - / - muizen (rechter panelen). De gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde +/- SEM en individuele punten (chi-kwadraat testen: * p &lt;0,05, ** p &lt;0.01, *** p &lt;0,001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 4" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig4.jpg" /> Figuur 4:. Akoestische variabelen onttrokken ultrasone vocalisatie in Shank2 - / - muizen en wild type nestgenoten (A) Duur van alle soorten oproepen verward uitgeschreven door P2 pups (n = 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / - ), P6 pups (n = 19 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P10 pups (n = 20 Shank2 + / + </sup&gt;, n = 18 Shank2 - / -), volwassen mannen met een oestrus vrouwelijke (n = 16 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / -) en volwassen vrouwen met een vrouwelijke (n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 - / -) in wild-type muizen (linker paneel) en Shank2 - / - muizen (rechter paneel). (B) Maximale piek frequentie gemeten op alle soorten oproepen beschaamd in P2 pups, P6 pups, P10 pups, volwassen mannen met een oestrus vrouwelijke en volwassen vrouw met een andere vrouw (zelfde Ns als hierboven). De gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde +/- SEM en individuele punten (niet-gepaarde Wilcoxon test: * p &lt;0,05, ** p &lt;0.01, *** p &lt;0,001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <img alt="figuur 5" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig5.jpg" /> Figuur 5: Context. s van de emissie van de muis ultrasone geluiden in female-vrouwelijke volwassen sociale interacties Aandeel van de ultrasone geluiden uitgezonden door paren met een Shank2 + / + met een C57BL / 6N muis (n = 16, A) en paren met een Shank2 - / - met een C57BL / 6N muis (n = 13, B) tijdens de volgende soorten behavioral evenementen (rood: bewoner, groen: nieuwkomer): sociale contacten, oro-oraal contact, ano-genitale snuiven van de bewoner muis, baar genitale snuiven van de nieuwkomer muis, bewoner achter nieuweling, nieuwkomer achter bewoner, onbeweeglijkheid van de bewoner, immobiliteit van nieuwkomer, aanpak van de bewoner en ontsnappen aan de nieuwkomer, aanpak van de nieuwkomer &amp; ontsnappen aan de bewoner, aanpak en ontsnappen aan de bewoner, aanpak en ontsnappen aan de nieuwkomer, bewoner naar aanleiding van de nieuwkomer, nieuwkomer in het gezichtsveld van de bewoner, bewoner in het gezichtsveld van de nieuwkomer. De gegevens zijn pwoordigd als gemiddelde +/- SEM en afzonderlijke punten (niet-gepaarde Wilcoxon test: * p &lt;0,05, ** p &lt;0,01). Ongepubliceerde gegevens. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> call types </td><td> Beschrijving </td></tr><tr><td> kort </td><td> duur ≤5 msec en frequentiebereik ≤6.25 kHz </td></tr><tr><td> eenvoudig </td><td> duur&gt; 5 msec en frequentiebereik ≤6.25 kHz (plat), of de frequentie modulatie slechts in één richting (naar boven of naar beneden) met een frequentiebereik&gt; 6.25 kHz </td></tr><tr><td> complex </td><td> frequentiemodulaties in meer dan één richting en frequentiebereik&gt; 6,25 kHz (gemoduleerd), of opname van een of meer additionele frequentie component (harmonische of niet-lineaire verschijnselen, maar geen verzadiging) maar geen beperking voor frequentiebereik (complex) </td></tr><tr><td> frequentie sprongen </td><td> opneming van een jump (één frequentie sprong) of meer sprongen (frequentie sprongen, andere) in de frequentie zonder tijd tussen de opeenvolgende frequentie componenten, met een (gemengde) of zonder enig luidruchtige gedeeltelijk binnen de zuivere toon oproep </td></tr><tr><td> ongestructureerde </td><td> geen zuivere toon component identificeerbaar is; &quot;Noisy&quot; gesprekken </td></tr></tbody></table> Tabel 1:. Kenmerken van de vijf soorten muizen ultrasone geluiden Voorbeelden van criteria van de duur, frequentie bereik, de frequentie modulaties en frequentie sprongen gebruikt om 5 verschillende soorten oproepen binnen muis ultrasone geluiden te bepalen.

Ultrasone vocalisaties van muizen worden gebruikt als proxy's om de genetische basis van vocale communicatiedeficiënties te modelleren in muismodellen voor neuropsychiatrische stoornissen. Het huidige protocol beschrijft drie experimentele contexten die betrouwbaar ultrasone vocalisaties oproepen bij pups (gedurende de ontwikkeling) en volwassen muizen (interacties tussen dieren van hetzelfde geslacht, interacties tussen mannetjes en vrouwtjes in oestrus).

Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer

Mice emit ultrasonic vocalizations in different contexts throughout development and in adulthood. These vocal signals are now currently used as proxies ...

Het algemene doel van dit protocol is om ultrasone vocalisaties van muisjongens of volwassen muizen op te nemen en te analyseren, en vervolgens de gegevens openbaar beschikbaar te maken in de mouseTube-database. We hebben eerder mutaties geïdentificeerd in autisme, dus nu willen we de rol van deze genen begrijpen. We gebruiken muismodellen en kijken vooral naar de ultrasone vocalisatie van muizen.Dit model kan helpen om belangrijke vragen in het neurowetenschappelijke veld te begrijpen. Bijvoorbeeld, hoe genetische mutaties de sociale communicatie beïnvloeden in een muismodel voor neuropsychotische stoornissen zoals autisme. Het belangrijkste voordeel van dit protocol is dat muizenadresserende vocalisaties betrouwbaar worden opgeroepen.Het zou een standaardisering van contextinformatie bevorderen om vergelijkingen tussen studies te verbeteren. Deze methode zal ook de kennis over de intrasonische communicatie van muizen vergroten door middel van de mouseTube-database. Na het voorbereiden van de muizen en het verkrijgen van pasgeboren jongen, zet een kooi op om hun roepjes op te nemen.Gebruik een geluiddichte doos of een piepschuim doos. Zet eerst een thermometer op om de interne temperatuur te controleren. Vervolgens, door een gat in de bovenkant van de doos, laat een condensor ultrasoon microfoon zakken zodat het membraan van de microfoon ongeveer 12 tot 15 centimeter boven de vloer is.Verbind de microfoon nu met een computergeluidskaart. Plaats het niet-experimentele jong in een schone plastic jonghouder in de opnamedoos en sluit hem. Zorg ervoor dat het piekrecordgeluid de volledige beschikbare amplitude gebruikt zonder vervorming.Verander deze instelling niet tijdens het experiment. Nu, voor experimentele metingen, plaats het jong zo voorzichtig en snel mogelijk in een schone plastic beker. Plaats vervolgens het jong onder de microfoon en sluit de doos zo voorzichtig en stil mogelijk.Maak vervolgens een 16-bits, 300 kilohertz opname voor een hoge kwaliteit dataset. Verwijder na maximaal vijf minuten opname het jong. Noteer zijn poottattoo en meet vervolgens zijn huidtemperatuur met een digitale thermometer.Maak nu een kleine markering op het jong met watergebaseerde inkt en breng het terug naar zijn nest. Was de beker tussen tests met 10% ethanol en laat hem volledig drogen. Gebruik voor een volwassen testkooi een Plexiglas kooi die past in een geluiddichte doos verlicht met laag intensiteits wit licht.Maak de kooi schoon met zeepwater, droog hem af en vul hem met twee centimeter verse bedden. Bevestig de microfoon in een hoek van de kooi en pas de hoek van de microfoon aan om geluiden van de hele kooi op te vangen. Plaats vervolgens een videocamera boven de geluiddichte kamer zodat deze het oppervlak van de testkooi bekijkt zonder dat de microfoon een hoek verduistert.Stel met een niet-experimenteel paar dieren de versterking van de opname in zoals voorheen. Voor het experiment, introduceer eerst een dier in de kooi om de bewonersrol te vervullen. Laat het 20 minuten wennen.Een basisopname kan gedurende deze tijd worden gemaakt. Start vervolgens de video- en audio-opnames en introduceer het tweede dier van hetzelfde geslacht om de rol van de nieuwkomer te vervullen. Synchroniseer de opnames door een pieptoon af te spelen zodra de tweede het kooi aanraakt.Neem de interacties van de dieren op zolang als nodig is, zoals vier minuten. Om voor deze test voor te bereiden, neem vroeg in de ochtend van de testdag vaginale uitstrijkjes van elke vrouw om hun status in de oestruscyclus te bepalen. Houd de vrouw vast aan haar staart en laat haar de kooirooster grijpen.Gebruik een pipet om haar vagina meerdere keren te spoelen door 20 microliter PBS te injecteren en weer op te vangen. Let op het PBS wanneer het uit de vagina wordt gespoeld. Wanneer het enigszins troebel is, bevat het voldoende cellen.Doe dit voorzichtig om geen slijm te creëren. Verdeel de monster op een glaasje. Tot vier kunnen tegelijk worden onderzocht.Laat de monsters drogen voordat u verder gaat. Incubeer de glaasjes onder een afzuigkap in een bad van 0,1 molaire May-Grunwald-oplossing in PBS gedurende drie minuten. Breng vervolgens de glaasjes over naar een PBS-bad gedurende een minuut.Breng vervolgens de glaasjes over naar een bad van 5% gewicht per volume Giemsa R in PBS. Spoel de glaasjes na 10 minuten in vers PBS gedurende nog een minuut. Bekijk vervolgens de gekleurde glaasjes.Als het monster alleen grote, verhoornde epitheelcellen laat zien die geen kernen hebben en blauw kleuren, bevindt de vrouw zich in volle oestrus. Alleen dergelijke vrouwtjes kunnen voor de test worden gebruikt. Zet nu de testkooi op met de man als bewoner.Laat hem 10 minuten wennen en neem indien nodig een basisaudio-opname. Start vervolgens de video- en audio-opnames en introduceer het vrouwtje in volle oestrus. Synchroniseer de records zoals eerder met een pieptoon.Laat de dieren vervolgens zolang als nodig is met elkaar interageren, zoals een periode van vier minuten. Wanneer de opname is voltooid, breng de muizen terug naar hun respectieve kooi. Om gegevens te uploaden naar de mouseTube-website bij het Institut Pasteur, log eerst in.Controleer of de muissoort die is opgenomen in de mouseTube-database bestaat door op de knop Stams te klikken. Zo niet, vraag de beheerders om het te creëren. Maak vervolgens dierdieren.Voer de identificatiecodes van de opgenomen dieren in. Verzamel ze in groepen om later het ophalen van gegevens te vergemakkelijken. Geef vervolgens een beschrijving van het gebruikte protocol.Maak nu een experiment voor elke opnamesessie. Specificeer het protocol, de groep individuen die is opgenomen, de gebruikte hardware en software en hun specificiteiten. Het experiment verzamelt alle meta-gegevens die overeenkomen met de vocalisatiebestanden.Maak vervolgens de link naar de vocalisatiebestanden. Selecteer eerst het experiment in de lijst. Kopieer en plak vervolgens de URL van het vocalisatiebestand in het overeenkomstige veld van de kolom Bestanden om te linken.Het is mogelijk dat de link die u naar deze database

recording-mouse-ultrasonic-vocalizations-to-evaluate-social

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Ultrasone vocalisaties (USV's) bij muizen verschillen afhankelijk van leeftijd, geslacht, conditie en genetische achtergrond. Door twee ultrasone zenders tegelijkertijd op verschillende locaties uit te zenden, kan deze tweeduidige test muiserkenning en voorkeursreacties op verschillende kenmerken van USV's evalueren.

Het bepalen van Ultrasonic Vocalisatie Voorkeuren in Muizen met behulp van een twee-keuze afspelen Test

Muizen produceren een complex multisyllabic repertoire van ultrasone vocalisaties (USV's). Deze USV's worden op grote schaal gebruikt als uitlezingen voor neuropsychiatrische stoornissen. Dit protocol beschrijft enkele van de praktijken die we hebben geleerd en ontwikkeld om consequent de akoestische eigenschappen en syntaxis van muisliedjes te induceren, verzamelen en analyseren.

Eliciting and Analyzing Male Mouse Ultrasonic Vocalization (USV) Songs

Ultrasone vocalisaties (USV's) van laboratoriumratten en muizen zijn nuttig voor het bestuderen van vocale en neurale functies. Dit protocol beschrijft een voedselbeloningsparadigma dat betrouwbaar lustieve USV's oproept zonder paringsgerelateerde verwarringen. Het beschrijft dierconditionering, stimuluspresentatie, opname en akoestische analyse, en biedt een reproduceerbare methode om affectieve-motiverende en craniale sensorimotorische functies te bestuderen.

Anticiperende voedselbeloning Oproepen van Appetitieve Ultrasone Vocalisaties bij laboratoriumratten en -muizen

Eerder onderzoek naar de sociale dimensie van stress richtte zich op twee belangrijke variabelen: sociale identiteit en sociale steun. Dit protocol introduceert een effectieve experimentele manipulatie van deze twee sociale variabelen en beschrijft hun implementatie in een standaard stressinductieparadigma (Trier Social Stress Test).

De sociale dimensie van Stress: experimentele manipulaties van maatschappelijke ondersteuning en sociale identiteit in de Trier Social Stress Test

Het werkgeheugen voorspelt een aanzienlijke hoeveelheid variantie voor een aantal cognitieve taken, waaronder spreken, lezen en schrijven. Er zijn echter weinig gereedschappen beschikbaar om het werkgeheugen bij kinderen te beoordelen. Wij presenteren een innovatieve, computergebaseerde batterij die de verschillende componenten van het werkgeheugen bij kinderen met een leeftijd van school leert.

Het beoordelen van werkgeheugen bij kinderen: de uitgebreide batterij voor kinderen - werkgeheugen (CABC-WM)

Een draadloze, bidirectionele systeem voor meerkanaals neurale opnamen en stimulatie in vrij gedragen ratten wordt ingevoerd. Het systeem is licht en compact, dus met minimale impact op het gedrags repertoire van animal´s. Bovendien biedt dit systeem bidirectionele een geavanceerde tool om te beoordelen van de causale relaties tussen hersenen activering patronen en gedrag.

Een draadloze, bidirectionele Interface voor In Vivo opname en stimulatie van neurale activiteit in vrij gedragen ratten

Hier presenteren we een protocol voor het beheer van de video-georefereerde rating van wederzijdse sociale gedrag (vrRSB) met behulp van een papieren of een online versie. Deze enquête kwantificeert RSB, een voorwaarde voor sociale competentie, in peuters door "video-referentie" items waarbij een onderwerp wordt vergeleken met een referentie-kind getoond in een drie minuten durende video.

Gebruik van een Video anker scoren voor snelle seriële beoordeling van sociale communicatie in peuters

Dit witboek beschrijft een semantische priming ERP taak met behulp van binnen-modaliteit paren van plaatjes en woorden te onderzoeken van semantische verwerking bij personen met autisme spectrum disorder (ASD).

Een semantische Priming Event-related potentiële (ERP) taak te bestuderen Lexico-semantische en Visuo-semantische verwerking in Autisme Spectrum Disorder

De visuele wereld paradigma bewaakt deelnemers oogbewegingen in de visuele werkruimte als ze beluisteren of een gesproken taal te spreken. Dit paradigma kan worden gebruikt om te onderzoeken van de online verwerking van een breed scala aan psycholinguïstisch vragen, met inbegrip van semantisch complexe verklaringen, zoals de verklaringen van de disjunctieve.

Met behulp van oogbewegingen die worden opgenomen in de visuele wereld paradigma te verkennen van de Online verwerking van gesproken taal

In de blad-cutting mieren, presenteren wij een visuele ondersteuning om ziekte verdediging gedrag met afzonderlijke clips en de bijbehorende definities, geïllustreerd in een experimentele infectie scenario. Ons belangrijkste doel is om te helpen andere onderzoekers belangrijke defensief gedrag te herkennen en te zorgen voor een gemeenschappelijk begrip voor toekomstig onderzoek op dit gebied.

Een visuele gids voor het bestuderen van gedrags verdediging aan Pathogen aanslagen in blad-Cutting mieren

Leer ultrasone vocalisaties opnemen bij muizen om sociale communicatie te evalueren in neurowetenschappelijk onderzoek. Deze gestandaardiseerde methode verbetert vergelijkbaarheid tussen studies en draagt bij aan inzicht in genetische basis van gedrag.

Opname Mouse Ultrasone geluiden om sociale communicatie Evalueer

Meer video's verkennen