Name: Murine Prostaat Micro-dissectie en chirurgische castratie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Leer micro-dissectie van de muisprostaat en chirurgische castratie voor onderzoek naar prostaatkanker en hormonale effecten. Deze methoden maken gedetailleerde analyse van individuele prostaatklieren mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Sommige van de cijfers in dit manuscript waren royaal door het laboratorium van Bart O. Williams. De auteurs worden ondersteund door National Cancer Institute verleent U54CA143803, CA163124, CA093900, en CA143055.

Dit protocol voldoet en volgt de door de Johns Hopkins University Institutional Animal Care en gebruik Comite richtsnoeren. 1. Micro-ontleden a Mouse Prostaat <ol><li> Euthanaseren de muis door kooldioxide stikken of er een alternatief goedgekeurd methode in overeenstemming met de institutionele dierlijke zorg en het gebruik richtlijnen. </li><li> Speld de muis in een liggende positie om een ​​dissectie bord door een pin door middel van elk van de vier poten. </li><li> Spray de buik met 70% ethanol. </li><li> Houd de huid van de onderbuik met een pincet en een schaar door de huid te snijden en peritoneum ongeveer 1 cm juist voor de opening van de penis, voorzichtig alle organen niet te snijden. </li><li> Weggesneden en de huid peritoneum van de onderbuik, op beide zijden van de buik om de ribbenkast, waardoor de peritoneale holte. </li><li> Identificeer de blaas en urogenitale kanaal en blootstellen door voorzichtig bewegen vet en andere organen opzij. </li><li> Using tang, greep de zaadleider aan de basis in de buurt van de plasbuis, en scheur het weg. </li><li> Herhaal dit met de andere zaadleiders. </li><li> Met behulp van pincet voorzichtig grip blaas en trek het, tegelijkertijd met een schaar door de urethra onder de blaas en ventrale prostaat (ongeveer 1 cm onder de basis van de blaas) te snijden. Opmerking: Als de blaas wordt getrokken, zal de gehele urogenitale kanaal (bevattende blaas, een deel van de urethra, prostaat alle lobben en de zaadblaasjes) met zich meebrengt. Er kan enige weerstand. </li><li> Plaats het urogenitale kanaal (UGT) in een 60-100 mm petrischaal met ongeveer 5-10 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). </li><li> Voer de rest van het protocol onder een dissectie microscoop. Gebruik twee fijne tang, één in elke hand. Houd de tang &quot;als een potlood&quot; en rust de onderarmen op de bank top om hen te stabiliseren. </li><li> Gebruik fijne tang om de positie van de UGT, zodanig dat de blaasgeplaatst, wordt de urethra naar beneden gericht, en de zaadblaasjes zijn aan weerszijden van de blaas. </li><li> Pak de plasbuis met een pincet en trek weg vet met de andere tang zonder scheuren weg enige prostaatweefsel. Let op: Fat zal &quot;shiny&quot; ten opzichte van het omringende weefsel verschijnen. </li><li> Zodra het vet wordt verwijderd, een tang om het bindweefsel tussen de ventrale lobben van de prostaat scheuren en ze te scheiden. </li><li> Om een ​​van de ventrale lobben te verwijderen, gebruikt u een tang om grip één ventrale kwab in de buurt van de top, en gebruik de andere tang om grip die kwab aan de basis zo dicht mogelijk bij de plasbuis mogelijk. Terwijl de basis van de lob vastgrijpen gebruik de andere tang te grijpen de urethra. Trek de kwab weg van de plasbuis met een stevige, vloeiende beweging. Zorg ervoor dat er geen prostaatweefsel blijft verbonden aan de plasbuis. Plaats de lob in het geschikte medium, afhankelijk van de volgende experimentele stap. <ol><li> Om vast te stellen en paraffine-inbedding van de svoldoende voor histologische analyse, plaatst u de kwab in 10% neutraal gebufferde formaline (NBF) 8. </li><li> Plaats de kwab in de vrieskou medium, zoals oktober, voor cryopreservatie en snijden 8. </li><li> Leg de kwab in koude PBS voor enkele cel isolatie voor cultuur of flowcytometrie 9. </li></ol></li><li> Herhaal stap 1,15 de andere ventrale lob. </li><li> Om een ​​van de voorste lobben te verwijderen, een tang om trek de kwab weg van de zaadblaasjes, zorg ervoor dat niet aan de zaadblaasjes doorboren. Zodra de lob onafhankelijk van de zaadblaasjes, verwijderen op dezelfde manier als de ventrale lob in stap 1.15. </li><li> Herhaal stap 1,17 de andere voorkwab. </li><li> Flip de resterende urogenitale kanaal boven zodat de dorsale prostaat zichtbaar. </li><li> Om een ​​van de dorsolaterale lobben te verwijderen, een tang om het bindweefsel tussen de twee dorsolaterale lobben en ook het bindweefsel tussen de lobben en t scheurenhij posterior regio van de zaadblaasjes. Verwijder de lob op dezelfde wijze als de ventrale lob in stap 1.15. </li><li> Herhaal stap 1,20 de andere dorsolaterale kwab. </li></ol> 2. chirurgische castratie Let op: Dit is een survival operatie, dus asepsis, anesthesie en pijnbestrijding zijn belangrijk voor de ethische en succesvolle afronding van dit protocol. Volg alle institutionele dierlijke zorg en het gebruik richtlijnen. Een externe warmtebron, zoals een recirculerende water deken tijdens de chirurgische ingreep om onderkoeling te voorkomen. Heeft een dier niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven. Heeft een dier dat een operatie heeft ondergaan om het gezelschap van andere dieren tot volledig hersteld niet meer terug. Autoclaaf alle chirurgische instrumenten voor gebruik in de chirurgie. <ol><li> Op een schone, steriele oppervlak verdoven de muis met behulp van passende maatregelen (bv 2% geïnhaleerd isofluraan) en de positie van de mOuse in een liggende positie. Opmerking: Alternatieve anesthesie methoden, zoals ketamine, kunnen eveneens worden gebruikt, afhankelijk van het goedgekeurde protocol dier. </li><li> Controleer reflexen van de muis door knijpen de tenen. Als de muis niet reageert, ga dan naar de volgende stap. Als het reageert, wacht 1-3 min en opnieuw controleren. Scheer de chirurgische gebied met een elektrisch scheerapparaat. </li><li> Aseptisch bereiden de buik van de muis met behulp van afwisselende scrubs van 70% ethanol en jodium of procedures aanbevolen door de institutionele veterinaire personeel of IACUC. </li><li> Met behulp van een steriel scalpel een 1 cm verticale incisie door de huid in de middellijn van de onderbuik, ongeveer 1,5 cm ventraal van de penis. </li><li> Maak een kleine incisie (&lt;1 cm) door middel van het buikvlies, voorzichtig om geen organen te snijden. </li><li> Met behulp van een steriel pincet, pak de gesneden rand van het buikvlies en til het voorzichtig op, zodat zij in staat om de buikholte eronder te zien. </li><li> Met behulp van een andere steriel pincet, bereiken in the peritoneale holte en grip links of rechts testicular vetkussentje, lateraal van de blaas. Trek de vetkussentje door de opening in het peritoneum en de huid tot de testis komt ook. Wees voorzichtig om geen andere weefsels of organen verwonden tijdens deze stap. </li><li> Met behulp van een cautery pen, dwars door het vet pad dat houdt de testis. Snijd langzaam door de testis slagader met de cauterisatie pen Opmerking: Als de testis slagader te snel wordt gesneden, kan er te veel bloeden en de muis kan moeten worden gedood. </li><li> Zodra het vet pad en slagader worden gesneden, verwijder de testis en vet pad. </li><li> Herhaal stap 2,6-2,9 met andere testis. Opmerking: Een alternatieve methode voor het verwijderen van de testes is operatief ligeren de testiculaire ader, gevolgd door het snijden van het vaartuig met een schaar. </li><li> Hechten het buikvlies afgesloten met absorbeerbare hechtdraad. </li><li> Staple de huid gesloten met chirurgische wond clips. </li><li> Dien een pijnstiller om pijn te beheren, en de plaatsde muis in een schone kooi een kooi warmere gedurende 5-10 min. Bewaken van de muis op tekenen van pijn of bloeden. </li></ol>

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).</li>
<li>Roehrborn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+benign+prostatic+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Impot+Res%22%5BJournal%5D)">Pathology of benign prostatic hyperplasia.</a> Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).</li>
<li>Valkenburg, K. C., Williams, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate+Cancer%22%5BJournal%5D)">Mouse models of prostate cancer.</a> Prostate Cancer. , 895238(2011).</li>
<li>Shappell, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostate+pathology+of+genetically+engineered+mice%3A+definitions+and+classification.+The+consensus+report+from+the+Bar+Harbor+meeting+of+the+Mouse+Models+of+Human+Cancer+Consortium+Prostate+Pathology+Committee%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Prostate pathology of genetically engineered mice: definitions and classification. The consensus report from the Bar Harbor meeting of the Mouse Models of Human Cancer Consortium Prostate Pathology Committee.</a> Cancer Res. 64 (6), 2270-2305 (2004).</li>
<li>Valkenburg, K. C., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+discovery+in+prostate+cancer+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Drug discovery in prostate cancer mouse models.</a> Expert Opin Drug Discov. , 1-14 (2015).</li>
<li>El-Alfy, M., Pelletier, G., Hermo, L. S., Labrie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+features+of+the+basal+cells+of+human+prostate+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Res+Tech%22%5BJournal%5D)">Unique features of the basal cells of human prostate epithelium.</a> Microsc Res Tech. 51 (5), 436-446 (2000).</li>
<li>Prins, G. S., Huang, L., Birch, L., Pu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+estrogens+in+normal+and+abnormal+development+of+the+prostate+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of estrogens in normal and abnormal development of the prostate gland.</a> Ann N Y Acad Sci. 1089, 1-13 (2006).</li>
<li>Valkenburg, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+Wnt%2Fbeta-catenin+signaling+in+a+subpopulation+of+murine+prostate+luminal+epithelial+cells+induces+high+grade+prostate+intraepithelial+neoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Activation of Wnt/beta-catenin signaling in a subpopulation of murine prostate luminal epithelial cells induces high grade prostate intraepithelial neoplasia.</a> Prostate. 74 (15), 1506-1520 (2014).</li>
<li>Lukacs, R. U., Goldstein, A. S., Lawson, D. A., Cheng, D., Witte, O. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+cultivation+and+characterization+of+adult+murine+prostate+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, cultivation and characterization of adult murine prostate stem cells.</a> Nat Protoc. 5 (4), 702-713 (2010).</li>
<li>Michiel Sedelaar, J. P., Dalrymple, S. S., Isaacs, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice+and+men--warning%3A+intact+versus+castrated+adult+male+mice+as+xenograft+hosts+are+equivalent+to+hypogonadal+versus+abiraterone+treated+aging+human+males%2C+respectively%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Of mice and men--warning: intact versus castrated adult male mice as xenograft hosts are equivalent to hypogonadal versus abiraterone treated aging human males, respectively.</a> Prostate. 73 (12), 1316-1325 (2013).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+luminal+epithelial+stem+cell+that+is+a+cell+of+origin+for+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A luminal epithelial stem cell that is a cell of origin for prostate cancer.</a> Nature. 461 (7263), 495-500 (2009).</li>
<li>Pascal, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5alpha-Reductase+inhibition+coupled+with+short+off+cycles+increases+survival+in+the+LNCaP+xenograft+prostate+tumor+model+on+intermittent+androgen+deprivation+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">5alpha-Reductase inhibition coupled with short off cycles increases survival in the LNCaP xenograft prostate tumor model on intermittent androgen deprivation therapy.</a> J Urol. 193 (4), 1388-1393 (2015).</li>
<li>Shen, M. M., Abate-Shen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+genetics+of+prostate+cancer%3A+new+prospects+for+old+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Molecular genetics of prostate cancer: new prospects for old challenges.</a> Genes Dev. 24 (18), 1967-2000 (2010).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen.

Prostate micro-dissectie maakt kwab-specifieke experimenten en analyses van de muis prostaat (Figuur 1). Door genetisch muismodellen kan fenotypes worden gezien in een lob die niet wordt gezien in andere. Ook voor histologische analyse, dit protocol verzekert dat de maximale hoeveelheid zuiver prostaatweefsel kan worden doorgesneden en gekleurd zonder andere urogenitale weefsels in de sectie. Tot slot, voor single-cell experimenten, dit protocol zorgt voor isolatie van bijna zuiver prostaatcellen. Epith...

De prostaat is de meest voorkomende plaats van kanker bij mannen in de Verenigde Staten. Bijna 220.000 mensen elk jaar zal worden gediagnosticeerd met prostaatkanker, en ongeveer 27.000 mensen zullen bezwijken aan hun ziekte 1. Mannen hebben een 1 op 7 levensduur van het risico van een diagnose van prostaatkanker in de Verenigde Staten 1. Goedaardige prostaathyperplasie (BPH), een leeftijdsgebonden goedaardige prostaatvergroting, is een wijdverspreide aandoening, die meer dan 80% van de mannen boven 80 2. Als zodanig, de prostaat is de focus van veel onderzoek. Muismodellen zijn op grote schaal gebruikt om ziekten van de prostaat 3 te bestuderen. Kortom, de muis prostaat is een uitstekende vertegenwoordiger van de menselijke klier 4, maar er zijn overeenkomsten en verschillen tussen muis en menselijke prostaat anatomie en fysiologie 5. Bij beide soorten is de prostaat aan de onderkant van de blaas, rond de urethra. De menselijke prostaat is een lozijn verdeeld in vier zones: centraal, overgang, perifere en anterior fibromusculaire stroma. In tegenstelling, de muis prostaat bestaat uit drie gekoppelde lobben op verschillende plaatsen rondom de urethra: voorste, ventraal en dorsolaterale. Op cellulair niveau is het belangrijkste verschil is dat de basale cel luminale celverhouding in mens is ongeveer 1: 1, maar is 1: 4 bij muizen 6. De muizen stroma is ook verschillend in muizen ten opzichte van de mens - de mens uitgebreidere gladde spieren, terwijl de spierlaag veel dunner murine prostaat. De juiste identificatie, ontleding, en de behandeling van de muis prostaat essentieel muis prostate onderzoek. Hormoonspiegels drastische invloed op de ontwikkeling en homeostase van de prostaat bij zowel mensen en muizen. Hoewel oestrogeen lijkt een rol te spelen in prostate ontwikkeling 7, het belangrijkste hormoon in de prostaat wordt testosteron. Testosteron is essentieel voor de ontwikkeling van een glandulard onderhoud. Na zowel fysische of chemische castratie, ongeveer 90% van de luminale cellen in de volwassen prostaat apoptose en de klier krimpt. Als testosteron opnieuw aan een individu onder castratie omstandigheden, de prostaat kan zichzelf regenereren op volle capaciteit. Testosteron lijkt ook prostaatkanker, daarom androgeendeprivatietherapie is een algemeen gebruikte therapeutische strategie rijden. Veel prostaatkanker resistent geworden androgeendeprivatie. Bovendien, mannen die androgeen deprivatie therapie voor behandeling van prostaatkanker ondergaat cycli gecastreerde en geregenereerd omstandigheden. In de muis, chirurgische castratie, samen met hormonale regeneratie van de prostaat herinvoering van testosteron, is een belangrijk instrument om castratie weerstand en de effecten van testosteron fietsen op de prostaat bestuderen. In dit artikel zullen we bespreken en tonen de juiste technieken waarmee aan Locate en micro-ontleden muis prostaat, en operatief castreren muis.

<table><tbody><tr><td>Chirurgische instrumenten</td><td>Roboz</td><td>Diverse</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehyde</td><td>Sigma</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>OCT medium</td><td>VWR</td><td>25608-930</td><td>Moet op droog ijs worden geplaatst om in te vriezen, en bewaard worden bij -80 &deg;C</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Life Technologies</td><td>10010</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Johns Hopkins</td><td></td><td>Ook verkrijgbaar bij online verkopers</td></tr><tr><td>Cauterisatiepen</td><td>Medline</td><td>ESCT002</td><td></td></tr><tr><td>Zijde draad</td><td>AD Surgical</td><td>M-S330R19</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische wondclips</td><td>Roboz</td><td>RS-9265</td><td></td></tr></tbody></table>

murine prostaat micro-dissectie en chirurgische castratie

Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

Muismodellen worden veelvuldig gebruikt om prostaatkanker en andere ziekten te bestuderen. De muis is een uitstekend model om de prostaat te bestuderen en is gebruikt als een surrogaat voor ontdekkingen in menselijke prostaatontwikkeling en ziekte. Microdissectie van de prostaat maakt een consistente studie mogelijk van lob-specifieke prostaat anatomie, histologie en cellulaire kenmerken in de afwezigheid van besmetting van andere weefsels. Testosteron heeft invloed op de ontwikkeling en ziekte van de prostaat. Androgen-deprivatietherapie is een veelgebruikte behandeling voor prostaatkankerpatiënten, maar veel prostaattumoren worden resistent tegen castratie. Chirurgische castratie van muismodellen maakt het mogelijk om castratie-resistentie en andere facetten van hormonale biologie op de prostaat te bestuderen. Deze procedure kan worden gecombineerd met het opnieuw introduceren van testosteron, of hormonale regeneratie van de prostaat, een krachtige methode om stamcellijnen in de prostaat te bestuderen. Samen openen prostaat-microdissectie en chirurgische castratie een veelvoud aan mogelijkheden voor robuust en consistent onderzoek naar prostaatontwikkeling en ziekte. Dit manuscript beschrijft de protocollen voor prostaat-microdissectie en chirurgische castratie bij de laboratoriummuis.

Alle zes prostaat lobben werden verwijderd uit de muis via prostaat micro-dissectie (figuur 1). Totale urogenitale kanaal (UGT) bestaat uit alle lobben prostaat, de blaas, zaadblaasjes en de urethra (figuur 1a). De zaadleider hecht aan de urethra, maar is niet nodig voor de prostaat micro-dissectie, en kan dus vóór verwijdering van de UGT worden losgemaakt door het snijden van de plasbuis (figuur 1b-1c). Het urogenitale kanaal zullen sam...

Dit manuscript beschrijft de protocollen voor prostaat micro-dissectie en chirurgische castratie in het laboratorium muis. We tonen ook representatieve resultaten van deze protocollen. Tenslotte bespreken we de voordelen en het gebruik van deze protocollen.

Murine Prostaat Micro-dissectie en chirurgische castratie

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has ...

Het algemene doel van deze procedures is om de studie van de prostaat, evenals variërende hormonale condities binnen de muis, mogelijk te maken. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen in het vakgebied van prostaatkanker, zoals wat de effecten zijn van hormoondeprivatie op prostaatcarcinogenese. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat de effecten van diverse pathologische processen en hormonale veranderingen kunnen worden bestudeerd in individuele prostaatklieren.Begin met het vastpinnen van een muis in rugligging op een dissectieplank via het voetzoolkussentje van elke poot en bespuit de buik met 70%ethanol. Houd vervolgens de huid van de onderbuik vast met een pincet en gebruik een schaar om door de huid en het peritoneum te snijden, ongeveer één centimeter anterior van de opening van de penis. Snijd de huid en het peritoneum verder door van de onderbuik langs beide zijden van de buik naar de ribbenkast, om zo de peritoneumholte bloot te leggen.Nadat de locatie van de blaas en het urogenitale stelsel, of UGT, is geïdentificeerd, wordt het vet en andere organen voorzichtig opzij geschoven om de urineweefsels bloot te leggen. Pak vervolgens met een p

murine-prostate-micro-dissection-and-surgical-castration

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In this video, we describe the procedure for the dissection of the urogenital system or UGS from a male mouse model. This UGS is further dissected ex vivo to isolate the prostate gland and study its role in prostate cancer development.

Extracting Prostate from Mouse Urogenital System: A Technique to Separate Prostate Gland from Other Urinary and Genital System Organs in Male Mouse

In this video, we demonstrate the procedure for administering intra-prostatic injection of prostate cancer cells into a mouse model. Orthotopic murine models can be used to study the disease origin and response to treatment therapies in a non-invasive and clinically relevant environment.

Intra-prostatic Injection of Cancer Cells: A Technique to Deliver Cancer Cells for Establishing Orthotopic Prostate Cancer Mouse Model

This video describes a method for editing specific genes in prostate gland cells using an adenovirus-based delivery system. The approach allows for orthotopic and localized alteration of gene expression utilizing CRISPR technology to develop novel mouse models for prostate cancer.

Modeling Prostate Cancer in Genetically-engineered Mouse Models: A CRISPR/Cas9-mediated Localized Gene Editing Technique in Mouse Anterior Prostate Lobe Cells

Dit orthotopisch model van menselijke prostaatkanker maakt kwantificering van tumorgrootte circulerende tumorcellen en de vorming van verschillende metastase naar de longen. Omdat de cellen van het belangrijkste orgaan moet ontsnappen, in de bloedsomloop, en implantaat in een tweede locatie, dit model effectief recapituleert het scenario bij de mens.

Een orthotope muizenmodel van menselijke prostaatkankercellen Metastasis

Prostaatkanker is de op een na meest voorkomende oorzaak van kankergerelateerde sterfgevallen in de Verenigde Staten. Een orthotopisch kankermodel biedt een nuttige benadering om de biologie van prostaatkanker te begrijpen en de werkzaamheid van therapeutische regimes te evalueren. Dit protocol beschrijft gedetailleerde stappen die nodig zijn om een orthotopisch muismodel voor prostaatkanker te vestigen.

Pre-klinische Orthotope muizenmodel van Human prostaatkanker

Het doel van dit protocol is om aan te tonen van de intra-prostaat injectie van prostaat kankercellen, met latere castratie. Orthotopic preklinische modellen van androgeen-afhankelijke en castratie-resistente prostaatkanker zijn cruciaal voor het bestuderen van de ziekte in het kader van een klinisch relevante tumor communicatie en een immunocompetent host.

Een bioluminescente en fluorescerende Orthotopic Syngeneic lymfkliertest Model van androgeen-afhankelijke en castratie-resistente prostaatkanker

Weefsel-engineered renale constructies bieden een oplossing voor het tekort aan organen en de schadelijke effecten van dialyse. Hier beschrijven we een protocol bij micro ontleden lymfkliertest nieren voor isolatie van cortico-Wallenberg segmenten. Deze segmenten zijn steiger-vrije cellulaire constructies, vorming van renale organoids ingeplant.

Microdissection van primaire renale weefsel segmenten en integratie met nieuwe steiger-vrije constructie technologie

Dit protocol beschrijft een nieuw opgerichte methode voor virus levering aan de lymfkliertest prostaat. Met behulp van technologie van de CRISPR/Cas9, gene overexpressie of Cre recombinase levering, de techniek kunt orthotopic wijziging van genexpressie en implementeert een roman muismodel voor prostaatkanker.

Virus levering van CRISPR gidsen voor de lymfkliertest prostaat voor Gene wijziging

Genetisch gemodificeerde muizen zijn nuttige modellen voor het onderzoek naar prostaatkanker mechanismen. Hier presenteren we een protocol om te identificeren en ontleden prostaat lobben van het urogenitaal systeem van een muis, onderscheiden van hen op basis van histologie, isoleren en cultuur de primaire prostaat cellen in vitro als spheroïden voor downstream analyses.

Identificatie en karakterisering van het histologische dissectie van de prostaat lobben van de muis voor In Vitro 3D sferoïde cultuur modellen

We tonen een methode voor obductie en dissectie van muizen prostaatkanker modellen, gericht op prostaat tumor dissectie. Een stap-voor-stap protocol voor het genereren van muis prostaat tumor organoïden wordt ook gepresenteerd.

Generatie van tumor Organoïden uit genetisch gemanipuleerde Muismodellen van prostaatkanker

Dit manuscript beschrijft een consistente manier om snel overleving uit te voeren knaagdierorchidtomieën en ovariëctomieën.

Muizen orchidectomie en ovariëctomie om de productie van geslachtshormonen te verminderen

Leer micro-dissectie van de muisprostaat en chirurgische castratie voor onderzoek naar prostaatkanker en hormonale effecten. Deze methoden maken gedetailleerde analyse van individuele prostaatklieren mogelijk.

Murine Prostaat Micro-dissectie en chirurgische castratie

Meer video's verkennen