Name: Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen. (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 8 s
Description: Leer een nieuwe methode voor gelijktijdige opname van renale sympathieke zenuwactiviteit en bloeddruk bij bewuste, ongebreidelde muizen zonder verdovingsbeïnvloeding.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

S.M.H. werd gesteund door postdoctorale beurzen van de Canadese instituten voor gezondheid onderzoek (CIHR), hart & beroerte Stichting van Canada (HSFC) en Alberta innoveert Health Solutions (AiHS); J.E.H. wordt ondersteund door een subsidie van de National Heart-, Long- en bloed Instituut PO1HL-51971.

<ol><li>Young, C. N., Davisson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+assessment+of+neurocardiovascular+regulation+in+the+mouse%3A+principles%2C+progress%2C+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">In vivo assessment of neurocardiovascular regulation in the mouse: principles, progress, and prospects.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 301 (3), H654-H662 (2011).</li>
<li>Kass, D. A., Hare, J. M., Georgakopoulos, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cardiac+function%3A+a+cautionary+tail%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Murine cardiac function: a cautionary tail.</a> Circ Res. 82 (4), 519-522 (1998).</li>
<li>Charkoudian, N., Wallin, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neural+activity+to+the+cardiovascular+system%3A+integrator+of+systemic+physiology+and+interindividual+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neural activity to the cardiovascular system: integrator of systemic physiology and interindividual characteristics.</a> Compr Physiol. 4 (2), 825-850 (2014).</li>
<li>Guyenet, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sympathetic+control+of+blood+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The sympathetic control of blood pressure.</a> Nat Rev Neurosci. 7 (5), 335-346 (2006).</li>
<li>Hamza, S. M., Hall, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+recording+of+renal+sympathetic+nerve+activity+in+unrestrained%2C+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Direct recording of renal sympathetic nerve activity in unrestrained, conscious mice.</a> Hypertension. 60 (3), 856-864 (2012).</li>
<li>DeBeck, L. D., Petersen, S. R., Jones, K. E., Stickland, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+rate+variability+and+muscle+sympathetic+nerve+activity+response+to+acute+stress%3A+the+effect+of+breathing%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Heart rate variability and muscle sympathetic nerve activity response to acute stress: the effect of breathing.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 299 (1), R80-R91 (2010).</li>
<li>Krowicki, Z. K., Kapusta, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+glycine+into+the+hypothalamic+paraventricular+nucleus+produces+diuresis%2C+natriuresis%2C+and+inhibition+of+central+sympathetic+outflow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Microinjection of glycine into the hypothalamic paraventricular nucleus produces diuresis, natriuresis, and inhibition of central sympathetic outflow.</a> J Pharmacol Exp Ther. 337 (1), 247-255 (2011).</li>
<li>do Carmo, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+blood+pressure%2C+appetite%2C+and+glucose+by+leptin+in+mice+lacking+leptin+receptors+in+proopiomelanocortin+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Control of blood pressure, appetite, and glucose by leptin in mice lacking leptin receptors in proopiomelanocortin neurons.</a> Hypertension. 57 (5), 918-926 (2011).</li>
<li>Brockway, B. P., Mills, P. A., Azar, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+continuous+chronic+measurement+and+recording+of+blood+pressure%2C+heart+rate+and+activity+in+the+rat+via+radio-telemetry%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Hypertens+A%22%5BJournal%5D)">A new method for continuous chronic measurement and recording of blood pressure, heart rate and activity in the rat via radio-telemetry.</a> Clin Exp Hypertens A. 13 (5), 885-895 (1991).</li>
<li>Tallam, L. S., Silva, da, A, A., Hall, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanocortin-4+receptor+mediates+chronic+cardiovascular+and+metabolic+actions+of+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Melanocortin-4 receptor mediates chronic cardiovascular and metabolic actions of leptin.</a> Hypertension. 48 (1), 58-64 (2006).</li>
<li>Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+indirect+methods+used+to+study+arterial+blood+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 44 (2), 361-373 (2000).</li>
<li>Zvara, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-anesthetized+mouse+model+for+recording+sensory+urinary+bladder+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">A non-anesthetized mouse model for recording sensory urinary bladder activity.</a> Front Neurol. 1, 127(2010).</li>
<li>Hagan, K. P., Bell, L. B., Mittelstadt, S. W., Clifford, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+dynamic+exercise+on+renal+sympathetic+nerve+activity+in+conscious+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of dynamic exercise on renal sympathetic nerve activity in conscious rabbits.</a> J Appl Physiol. 74 (5), 2099-2104 (1985).</li>
<li>Matsukawa, K., Ninomiya, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+renal+sympathetic+nerve+activity%2C+heart+rate+and+arterial+blood+pressure+associated+with+eating+in+cats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Changes in renal sympathetic nerve activity, heart rate and arterial blood pressure associated with eating in cats.</a> J Physiol. 390, 229-242 (1987).</li>
<li>Stocker, S. D., Muntzel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+sympathetic+nerve+activity+chronically+in+rats%3A+surgery+techniques%2C+assessment+of+nerve+activity%2C+and+quantification%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Recording sympathetic nerve activity chronically in rats: surgery techniques, assessment of nerve activity, and quantification.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (10), 6(2013).</li>
<li>Burke, S. L., Lambert, E., Head, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approaches+to+quantifying+sympathetic+nerve+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Hypertens+Rep%22%5BJournal%5D)">New approaches to quantifying sympathetic nerve activity.</a> Curr Hypertens Rep. 13 (3), 249-257 (2011).</li>
<li>Smith, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+recording+renal+sympathetic+nerve+activity+in+awake%2C+freely+moving+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Techniques for recording renal sympathetic nerve activity in awake, freely moving animals.</a> Methods. 30 (2), 122-126 (2003).</li>
<li>Miki, K., Kosho, A., Hayashida, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+continuous+measurements+of+renal+sympathetic+nerve+activity+and+cardiovascular+function+during+exercise+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Method for continuous measurements of renal sympathetic nerve activity and cardiovascular function during exercise in rats.</a> Exp Physiol. 87 (1), 33-39 (2002).</li>
<li>Yoshimoto, M., Miki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+renal+sympathetic+nerve+activity+in+freely+moving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measurement of renal sympathetic nerve activity in freely moving mice.</a> J Physiol. 560, (2004).</li>
<li>Yoshimoto, M., Miki, K., Fink, G. D., King, A., Osborn, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+angiotensin+II+infusion+causes+differential+responses+in+regional+sympathetic+nerve+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Chronic angiotensin II infusion causes differential responses in regional sympathetic nerve activity in rats.</a> Hypertension. 55 (3), 644-651 (2010).</li>
<li>Salman, I. M., Sarma Kandukuri,, Harrison, D., L, J., Hildreth, C. M., Phillips, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+conscious+telemetry+recordings+demonstrate+increased+renal+sympathetic+nerve+activity+in+rats+with+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Direct conscious telemetry recordings demonstrate increased renal sympathetic nerve activity in rats with chronic kidney disease.</a> Front Physiol. 6, 218(2015).</li>
<li>Morgan, D. A., Despas, F., Rahmouni, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+leptin+on+sympathetic+nerve+activity+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rep%22%5BJournal%5D)">Effects of leptin on sympathetic nerve activity in conscious mice.</a> Physiol Rep. 3 (9), (2015).</li>
<li>Alfie, M. E., Sigmon, D. H., Pomposiello, S. I., Carretero, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+high+salt+intake+in+mutant+mice+lacking+bradykinin-B2+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Effect of high salt intake in mutant mice lacking bradykinin-B2 receptors.</a> Hypertension. 29 (1 Pt 2), 483-487 (1997).</li>
<li>Dietz, J. R., Landon, C. S., Nazian, S. J., Vesely, D. L., Gower, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+cardiac+hormones+on+arterial+pressure+and+sodium+excretion+in+NPRA+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Biol+Med+%28Maywood%29%22%5BJournal%5D)">Effects of cardiac hormones on arterial pressure and sodium excretion in NPRA knockout mice.</a> Exp Biol Med (Maywood). 229 (8), 813-818 (2004).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclosporine+A-induced+hypertension+involves+synapsin+in+renal+sensory+nerve+endings%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cyclosporine A-induced hypertension involves synapsin in renal sensory nerve endings.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (17), 9765-9770 (2000).</li>
<li>Szczesny, G., Veihelmann, A., Massberg, S., Nolte, D., Messmer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+anaesthesia+using+inhalatory+isoflurane+in+different+strains+of+mice-the+haemodynamic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Long-term anaesthesia using inhalatory isoflurane in different strains of mice-the haemodynamic effects.</a> Lab Anim. 38 (1), 64-69 (2004).</li>
<li>Tank, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+nerve+traffic+and+circulating+norepinephrine+levels+in+RGS2-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Auton+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Sympathetic nerve traffic and circulating norepinephrine levels in RGS2-deficient mice.</a> Auton Neurosci. 136 (1-2), 52-57 (2007).</li>
<li>Schwarte, L. A., Zuurbier, C. J., Ince, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+ventilation+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Mechanical ventilation of mice.</a> Basic Res Cardiol. 95 (6), 510-520 (2000).</li>
<li>Zuurbier, C. J., Emons, V. M., Ince, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamics+of+anesthetized+ventilated+mouse+models%3A+aspects+of+anesthetics%2C+fluid+support%2C+and+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hemodynamics of anesthetized ventilated mouse models: aspects of anesthetics, fluid support, and strain.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 282 (6), H2099-H2105 (2002).</li>
<li>Farnham, M. M., O'Connor, E. T., Wilson, R. J., Pilowsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+preparation+of+mice+for+recording+cardiorespiratory+parameters+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Surgical preparation of mice for recording cardiorespiratory parameters in vivo.</a> J Neurosci Methods. 248, 41-45 (2015).</li>
<li>Cuellar, J. M., Antognini, J. F., Carstens, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vivo+method+for+recording+single+unit+activity+in+lumbar+spinal+cord+in+mice+anesthetized+with+a+volatile+anesthetic%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Brain+Res+Protoc%22%5BJournal%5D)">An in vivo method for recording single unit activity in lumbar spinal cord in mice anesthetized with a volatile anesthetic.</a> Brain Res Brain Res Protoc. 13 (2), 126-134 (2004).</li>
<li>Carruba, M. O., Bondiolotti, G., Picotti, G. B., Catteruccia, N., Da Prada, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+diethyl+ether%2C+halothane%2C+ketamine+and+urethane+on+sympathetic+activity+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of diethyl ether, halothane, ketamine and urethane on sympathetic activity in the rat.</a> Eur J Pharmacol. 134 (1), 15-24 (1987).</li>
<li>Wang, G. F., Mao, X. J., Chen, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urethane+suppresses+renal+sympathetic+nerve+activity+in+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Rev+Med+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Urethane suppresses renal sympathetic nerve activity in Wistar rats.</a> Eur Rev Med Pharmacol Sci. 18 (10), 1454-1457 (2014).</li>
<li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+induced+hypothermia+on+renal+sympathetic+nerve+activity+and+baroreceptor+reflex+in+urethane-anesthetized+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of induced hypothermia on renal sympathetic nerve activity and baroreceptor reflex in urethane-anesthetized rabbits.</a> Crit Care Med. 28 (12), 3854-3860 (2000).</li>
<li>Shimokawa, A., Kunitake, T., Takasaki, M., Kannan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+anesthetics+on+sympathetic+nerve+activity+and+arterial+baroreceptor+reflex+in+chronically+instrumented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Auton+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Differential effects of anesthetics on sympathetic nerve activity and arterial baroreceptor reflex in chronically instrumented rats.</a> J Auton Nerv Syst. 72 (1), 46-54 (1998).</li>
<li>Janssen, B. J., Smits, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+control+of+blood+pressure+in+mice%3A+basic+physiology+and+effects+of+genetic+modification%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Autonomic control of blood pressure in mice: basic physiology and effects of genetic modification.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 282 (6), R1545-R1564 (2002).</li>
<li>Nunn, N., Feetham, C. H., Martin, J., Barrett-Jolley, R., Plagge, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+blood+pressure%2C+heart+rate+and+body+temperature+in+mice+lacking+the+XLalphas+protein+of+the+Gnas+locus+is+due+to+increased+sympathetic+tone%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Elevated blood pressure, heart rate and body temperature in mice lacking the XLalphas protein of the Gnas locus is due to increased sympathetic tone.</a> Exp Physiol. 98 (10), 1432-1445 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Wij hebben hierin uiteengezet, aangetoond en een nieuwe methode voor gerichte beoordeling van RSNA in bewuste muizen, vrij te verplaatsen en comfortabel rusten in hun huis kooien gevalideerd. Na chirurgische implantatie van een radiotelemeter van de arteriële druk, een inwonende intraveneuze infusie-katheter en een douane-ontworpen RSNA bipolaire elektrode, muizen hersteld van de operatie en gedurende 48 tot 72 uur ongemoeid werden gelaten. Muizen bleef comfortabel vaste in hun kooi te allen tijde (met inbegrip van exper...

Interesse in het gebruik van muizen op verschillende terreinen van biomedisch onderzoek blijft uitbreiden met de ontwikkeling van talloze genetisch gemanipuleerde modellen. Voor het grootste deel, technische vooruitgang gelijke tred hebben gehouden met het toegenomen gebruik van muizen in fysiologie en er is nu een indrukwekkende selectie van verkleinde apparaten ontwikkeld specifiek voor het meten van belangrijke fysiologische parameters in muizen. Hoewel telemetrische apparaten voor directe meting van autonome zenuwstelsel Toon in de bewuste rat zijn beschikbaar voor meer dan een decennium, verkleinde apparaten voor het beoordelen van zenuw activiteit in bewuste muizen zijn momenteel niet beschikbaar. Onderzoekers meestal omzeilen deze beperking door de beoordeling van de bijdrage van het autonome zenuwstelsel met indirecte methoden (d.w.z. plasma of urine catecholamines, farmacologische autonome blokkade, spectrale analyse van patronen van bloed Druk/hartslag)1.
Hoewel deze benaderingen waardevolle informatie bieden, is het resultaat een algemeen beeld van de totale autonome Toon, in plaats van waaruit de afzonderlijke bijdrage van geïsoleerde populaties van zenuwen naar het fenomeen onderzochte. Als alternatief, directe opname van de activiteit van bepaalde zenuwen is uitgevoerd in narcose muizen, die een veelheid van zorgen met zich meebrengt. Het is buitengewoon moeilijk om stabiele bloeddruk binnen de fysiologische bereik in een narcose muis voor enkele uren na de operatie. In feite, in dit soort experimenten, bloeddruk is vaak niet-aangegeven of gepresenteerd op een zeer laag niveau (dat wil zeggen 60-80 mmHg vs > 100mmHg in een bewuste muis)2. De kwetsbaarheid van het cardiovasculaire systeem tentoongesteld in de voorbereiding van een narcose muis vaak uitsluit zinvolle beoordeling van autonome zenuw activiteit, gezien de codependent relatie tussen bloeddruk en sympathieke Toon3, 4.
Om deze beperking, een nieuwe methode voor directe opname van renale sympathiek zenuw activiteit (RSNA) in bewuste, ongebreidelde muizen, ongestoord binnen hun huis kooien werd ontwikkeld. Zowel de chirurgische en experimentele aanpak voor een succesvolle implementatie van deze techniek wordt in detail beschreven. Deze voorbereiding kan de onderzoeker gelijktijdig opnemen arteriële druk via radiotelemetry naast RSNA, met de toegevoegde mogelijkheid om intraveneus infuus agenten van belang zonder verstoring van de muis.
Vierentwintig uur na chirurgie, muizen zich normaal gesproken gedragen en doen niet vertonen tekenen van pijn of leed. Experimentele opnames kunnen dan 48 tot 72 uur na operatie beginnen, terwijl de muis comfortabel in haar kooi met onbeperkte toegang tot voedsel, water en milieu verrijking ligt. Duidelijke RSNA sporen worden gepresenteerd en de karakteristieke reacties van deze zenuw bevolking normale fysieke bewegingen van het dier (zoals eten en grooming) worden gedemonstreerd naast farmacologische modulatie van de systemische bloeddruk. De kwaliteit en de specificiteit van de RSNA signaal wordt verder bevestigd door ganglionaire blokkade. Dit manuscript bevat de audiovisuele aanvulling op een aanvankelijk gepubliceerde beschrijving van deze techniek5.

<table><tbody><tr><td>Teflon-coated roestvrij staal meerdraads draad</td><td>A-M Systems</td><td>793200</td><td>0,001 inch diameter bare; 0,0055 inch diameter gecoat</td></tr><tr><td>#11 Scalpelblad</td><td>Fisher Scientific</td><td>ALMM9011</td><td></td></tr><tr><td>Soldeerbout en soldeertin</td><td></td><td></td><td>Elke make of model geschikt</td></tr><tr><td>Mannelijke miniatuur pin connectors</td><td>A-M Systems</td><td>520200</td><td>Messing met goud plating</td></tr><tr><td>Vrouwelijke miniatuur pin connectors</td><td>A-M Systems</td><td>520100</td><td>Messing met goud plating</td></tr><tr><td>Heat Shrink tubing</td><td>Radio Shack</td><td>Model #: 278-1610 |&nbsp;Catalog #: 2781610</td><td>1,6 mm diameter</td></tr><tr><td>Polyethyleen 90 (PE90) buis</td><td>VWR</td><td>CA-63018-703</td><td>0,86mm binnendiameter; 1,27mm buitendiameter</td></tr><tr><td>Dissectie microscoop</td><td>Leica Microsystems</td><td>Leica M80</td><td>Elke make of model ook geschikt</td></tr><tr><td>Polyethyleen 10 (PE10) buis</td><td>Braintree Scientific</td><td>PE10&nbsp; 50 FT</td><td>0,28mm binnendiameter; 0,61mm buitendiameter</td></tr><tr><td>Superlijm Vloeibaar</td><td>Loctite</td><td>n/a</td><td>Vloeibare formule; elk merk geschikt</td></tr><tr><td>Superlijm Gel</td><td>Loctite</td><td>n/a</td><td>Gel formule; elk merk geschikt</td></tr><tr><td>Polyethyleen buis</td><td>Scientific Commodities</td><td>BB31695-PE/13</td><td>Voor sokkel 2,7mm binnendiameter; 4,0mm buitendiameter</td></tr><tr><td>Ziekenhuis Sterilisatie Diensten &amp; Ozon Sterilisatie pakketten</td><td></td><td></td><td>Contact lokale ziekenhuis sterilisatie diensten</td></tr><tr><td>Isofluraangeanesthesie</td><td>Abbott</td><td>05260-05</td><td></td></tr><tr><td>Deltaphase isotherme hitte pads &amp; operatietafel</td><td>Braintree Scientific</td><td>39OP</td><td>Houd hitte pads warm in een 37&deg;C waterbad; Corresponderende operatietafel essentieel</td></tr><tr><td>Glycopyrrolate</td><td>Amdipharm Mercury Company Limited</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan verdampingssysteem &amp; flow meter</td><td>Braintree Scientific</td><td>VP I</td><td>Voeg medische kwaliteit zuurstof toe</td></tr><tr><td>Weefselschaar</td><td>Fine Science Tools</td><td>14173-12</td><td></td></tr><tr><td>Fijne veerschaar</td><td>Fine Science Tools</td><td>15006-09</td><td></td></tr><tr><td>Kleine wattenstaafjes</td><td>Fisher Scientific</td><td>23400100</td><td></td></tr><tr><td>Fijne rechte pincet</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td>#5, FST door Dumont Biologie Tip</td></tr><tr><td>Gebogen pincet</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td><td>#5/45 FST door Dumont</td></tr><tr><td>Kleine absorberende speren</td><td>Fine Science Tools</td><td>18105-03</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Sigma Aldrich</td><td>BR701605&nbsp;ALDRICH</td><td></td></tr><tr><td>Kwik-Sil 2 component Silicone Polymeer</td><td>World Precision Instruments (WPI)</td><td>KWIK-SIL</td><td>Koop extra gespecialiseerde tips van WPI</td></tr><tr><td>5-0 Polysorb Naald</td><td>Tyco Healthcare</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Zijde Naald</td><td>Braintree Scientific</td><td>SUT-S&nbsp; 104</td><td>Deknatel merk, spoel</td></tr><tr><td>Radiotelemetry Sonde</td><td>Data Sciences International (DSI)</td><td>TA11-PAC10</td><td></td></tr><tr><td>Radiotelemetry Ontvanger</td><td>Data Sciences International (DSI)</td><td>PhysioTel RPC-1</td><td></td></tr><tr><td>Omgevingsdruk Referentie</td><td>Data Sciences International (DSI)</td><td>Apr-01</td><td></td></tr><tr><td>Druk Uitvoer Adapter</td><td>Data Sciences International (DSI)</td><td>R11CPA</td><td></td></tr><tr><td>Rena Pulse Slang</td><td>Braintree Scientific</td><td>RPT-040</td><td></td></tr><tr><td>Infusie Draaischarnier</td><td>Instech Solomon</td><td>375/D/22</td><td></td></tr><tr><td>Draaischarnier Ondersteunende Arm &amp; Mount</td><td>Instech Solomon</td><td>SMCLA</td><td></td></tr><tr><td>Polysulfone knop&nbsp;</td><td>Instech Solomon</td><td>LW62S/6</td><td></td></tr><tr><td>Roestvrij staal veer</td><td>Instech Solomon</td><td>PS62</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond chirurgische lijm</td><td>3M</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Drievoudig Antibioticum Zalf</td><td>Fougera</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 8 Kanaals Data Acquisitie Systeem &amp; Software</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 8/35</td><td></td></tr><tr><td>PVC Geïsoleerde Kabel</td><td>Belden</td><td>PVC Audio Verbindingskabel 32 AWG</td><td></td></tr><tr><td>Preamplificatie Headstage</td><td>Dagan Corporation</td><td>Model 4002</td><td></td></tr><tr><td>Differentiële Versterker</td><td>Dagan Corporation</td><td>EX4-400</td><td></td></tr><tr><td>Natrium Nitroprusside</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71778-25G</td><td></td></tr><tr><td>Fenylephrine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P6126-5G</td><td></td></tr><tr><td>Steriele Fysiologische Saline 0,9% NaCl</td><td>Beckton Dickinson</td><td></td><td>Contact lokale ziekenhuis leverancier</td></tr><tr><td>hexamethonium</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H0879-5G</td><td></td></tr><tr><td>Roestvrij Staal top anti vibratie tafel</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Op maat ontworpen in huis; Solide stalen plaat op een werkbank is ook geschikt</td></tr><tr><td>Faraday kooi</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Op maat ontworpen en gebouwd in huis</td></tr><tr><td>Kleine dieren haar trimmer</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Drugstore, mannen baard trimmer geschikt</td></tr><tr><td>Depilator Cream</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Veet merk, gevoelige huid formule</td></tr><tr><td>10% Povidone Jodium</td><td>Purdue Products</td><td>Betadine</td><td></td></tr><tr><td>70% Ethanol</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Stalen microretractors</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Gemaakt in huis. Buig een stalen paperclip &amp; loop 4-0 zijde om een retractor te vormen</td></tr><tr><td>Hemostats</td><td>Fine Science Tools</td><td>13011-12</td><td></td></tr><tr><td>Warmtepistool</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-201-27</td><td></td></tr></tbody></table>

nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Renale sympathische zenuwen bijdragen aanzienlijk tot zowel fysiologische en pathofysiologische verschijnselen. Evaluatie van de activiteit van de renale sympathiek zenuw (RSNA) is van groot belang op vele terreinen van onderzoek zoals chronische nierziekten, hypertensie, hartfalen, diabetes en obesitas. Eenduidige beoordeling van de rol van het sympathische zenuwstelsel is dus absoluut noodzakelijk voor de juiste interpretatie van de experimentele resultaten en begrip van ziekteprocessen. RSNA is traditioneel gemeten bij narcose knaagdieren, zoals muizen. Echter, muizen meestal vertonen zeer lage systemische bloeddruk en hemodynamische instabiliteit voor enkele uren tijdens anesthesie en chirurgie. Zinvolle interpretatie van RSNA is verward door deze niet-fysiologische toestand, gezien de intieme relatie tussen sympathische zenuwstelsel Toon en cardiovasculaire status. Om deze beperking van de traditionele benaderingen, ontwikkelden we een nieuwe methode voor het meten van de RSNA in bewuste, vrij bewegende muizen. Muizen zijn chronisch geïnstrumenteerd met radio-telemeters voor continue monitoring van bloeddruk evenals een infusie van jugular veneuze katheter en bipolaire elektrode douane-ontworpen voor directe opname van RSNA. Na een herstelperiode van 48-72 uur, overlevingskans was 100% en alle muizen zich normaal gedragen. Op dit moment-punt, werd RSNA met succes opgenomen in 80% van de muizen, met levensvatbare signalen verworven tot 4 en 5 dagen na chirurgie in 70% en 50% van de muizen, respectievelijk. Fysiologische bloed druk werden opgenomen in alle muizen (116±2 mmHg; n = 10). Opgenomen RSNA verhoogd met eten en grooming, als gevestigde in de literatuur. RSNA werd bovendien gevalideerd door ganglionaire blokkade en modulatie van de bloeddruk met farmacologische stoffen. Een effectieve en beheerbare methode voor duidelijke opname van RSNA in bewuste, vrij bewegende muizen wordt hierin beschreven.

Na het protocol beschreven was overlevingspercentage 100% - alle muizen geïnstrumenteerd in deze studie overleefd en herstelde zich goed na de chirurgische ingreep. Binnen 24 uur na chirurgische voorbereiding, alle muizen zich normaal gesproken gedragen vertonen de typische eten, verzorgen en experimentele gedrag. Geen dieren toonde teken van pijn of leed op dit moment. 48 uur na de operatie, werd een verifieerbare en duidelijk signaal van de RSNA opgenomen in 10 van de 12 muizen. Dit sig...

Narcose muizen vertonen niet-fysiologische systemische bloeddruk, die zich verzet tegen de zinvolle beoordeling van autonome Toon gezien de intieme relatie tussen bloeddruk en het autonome zenuwstelsel. Dus, een nieuwe methode om tegelijkertijd record renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste muizen wordt geschetst.

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Het algemene doel van deze nieuwe chirurgische en experimentele methode is om de renale sympathische activiteit te evalueren bij bewuste, ongehinderde muizen zonder storende effecten van anesthesie. Gezien de recente interesse in muizenmodellen, biedt deze benadering een toegankelijke techniek waarmee autonome tonus betrouwbaar kan worden beoordeeld bij bewuste muizen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat zenuwactiviteit kan worden beoordeeld bij de bewuste, comfortabel rustende muis zonder storende factoren zoals anesthesie of beperking.Nadat de muis klaar is voor de operatie, plaats hem op zijn rechterzij met het rostrale uiteinde naar links van de chirurg. Maak eerst een vijf millimeter incisie in het mid-dorsale gebied met het scalpel. Vervolgens maakt u een grotere incisie in de huid boven de linkerflank, loodrecht op de wervelkolom, twee millimeter caudaal van de ribbenkast.Van daaruit, tunnel een 13 gauge roestvrijstalen naald subcutaan naar de dorsale uitgangsplaats. Gebruik vervolgens een voorbereide RSNA-elektrode. Haal deze door de naald en trek de naald terug zodat de elektrodetop op de buikspier van de linkerflank ligt.Een deel van de elektrodeleiding moet onder de huid doorlopen. Stel nu de linker nier bloot, verplaats de elektrodetop opzij en maak een incisie in de buikspier, direct onder de huidincisieverwijdering. Open vervolgens het chirurgische veld met micro-retractoren en trek de nier naar buiten.Gebruik applicators om het vet en bindweefsel langs de ruggengraat te scheiden om de nier te bekijken. Rek niet aan het renale neurovasculaire bundeltjes, omdat dit onomkeerbare schade aan de zenuw zal veroorzaken en het experiment zal beïnvloeden. Gebruik een hoogwaardig objectief om het renale neurovasculaire bundeltje te visualiseren.Het bevindt zich meestal naast de renale vaten. Nu ontleed het zenuwbundeltje voorzichtig uit de omringende weefsels met fijne, rechte pincetten. Raak het zenuwbundeltje niet aan en verstoor de vaten die de zenuw bevoorraden niet.Het is essentieel om het zenuwbundeltje gedurende dit proces intact te houden. Introduceer vervolgens de RSNA-elektrodetop in de buik. Plaats de tip en de aardedraad loodrecht op het renale neurovasculaire bundeltje.De aardedraad moet goed contact maken met de onderliggende weefsels. Til vervolgens voorzichtig het renale zenuwbundeltje op met een hoekige pincet en schuif de elektrodetop onder het zenuw en plaats de zenuw zodat deze in direct contact komt met beide draden, maar laat niet toe dat de elektrode de renale vaten comprimeert. Plaats vervolgens een klein stuk gesteriliseerde paraffinefolie tussen de zenuwdraden en de aardedraad.Zuig vervolgens het bloed en de vloeistoffen op met kleine absorberende spelden. Om de elektrodetop elektrisch te isoleren, breng voorzichtig net genoeg twee componenten siliconenelastomeer onder en rond de zenuw aan. Na enkele minuten uitharden, tilt u de siliconen voorzichtig op met pincetten en bevestigt u deze met een kleine hoeveelheid vloeibare chirurgische lijm.Sluit vervolgens de buikincisieverwijdering met discontinue absorbeerbare 50-naden en doe hetzelfde met de bovenliggende huid. Het volgende gedeelte beschrijft het implanteren van de bloeddruktelemeter. Begin met het opnieuw positioneren van de muis op zijn rug met het rostrale uiteinde naar de chirurg.Pas de anesthesie aan naar behoefte en geeft een tweede dosis glycopyrrolate toe. Maak vervolgens een middenlijnincisieverwijdering in de nekstreek met het scalpel, beginnend van net onder de onderkaak en uitstrekkend tot net boven de ribbenkast. Scheid nu het klierweefsel om de onderliggende nekspieren te ontbloten.Wees zeer voorzichtig om de nervus vagus niet te beschadigen, ga verder door de linkergemeenschappelijke halsslagader bloot te leggen en deze te scheiden van het omliggende weefsel. Breng nu drie stukken 60 zijden draad onder de slagader, over de volle lengte van de blootstelling. Plaats een draad rostrale en bind deze vast om de vaat te occluderen.Plaats een tweede draad in het midden en bind deze losjes vast en plaats de derde draad caudal en bind deze losjes vast. Trek vervolgens de rostrale-st draad terug en bevestig deze aan de neusconus met behulp van een klein stukje navelstrengtape. Trek vervolgens met micro-pincetten de caudal-st draad terug om de bloedstroom te beperken.Maak nu met fijne veerscharen een kleine incisie in de vaatwand zo rostrale mogelijk. Breng de radiotelemeterkatheter door de incisie in en breng hem naar de caudale draad. Trek de middelste draad aan om het te stabiliseren.Laat vervolgens de caudale terugtrekking los en breng de katheter 10 millimeter naar voren. Bevestig vervolgens de katheter met de draad. Tunnel tenslotte het telemeterlichaam naar een subcutane zak langs de rechterflank en ga verder met het implanteren van de jugulaire veneuze katheter.Begin met het gebruik van wattenstaafjes om de rechterhalsader bloot te leggen. Breng vervolgens twee stukken 60 zijden draad rond de ader. Plaats er een ver weg rostrale en bind deze vast om de ader te occluderen.Plaats de andere ver weg caudal en trek deze voorzichtig terug om de bloedstroom in de vaat te stoppen. Gebruik vervolgens fijne veerscharen om een kleine incisie in de vaatwand te maken zo dicht mogelijk bij de rostrale draad. Catheteriseer vervolgens de ader met hittegetrokken buis gevuld met zoutoplossing.Breng nu de katheter acht millimeter in de ader en bevestig deze met de zijden draden en een kleine druppel gelformule cyanoacrylaat. Draai nu de muis naar zijn linkerzij en gebruik een 13 gauge naald om de katheter van de nek naar de uitgang te tunnel die is voorbereid in het dorsale mid-scapulaire gebied. Positioneer de muis vervolgens op zijn rug en sluit de nekincisieverwijdering met discontinue 50-naden.Plaats nu het dier in de buikligging en schuif een kleine subcutane knop in roestvrijstalen veer op de veneuze katheter. Bevestig de knop onder de huid met naden. Bevestig vervolgens de polyethyleen sokkel die de elektrode

novel-approach-for-simultaneous-recording-renal-sympathetic-nerve

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Elektrofysiologische eigenschappen van de neuronale antwoorden is van belang voor het begrijpen van de hersenfunctie en voor het geleiden van de plaatsing van kleurstoffen voor route tracing. Er zijn echter vele studies uitgevoerd in verdoofde dieren. Om de hersenfunctie te begrijpen zonder verdoving, ontwikkelden we een methode om neuronale respons-eigenschappen op te nemen en te injecteren kleurstoffen in wakkere muis.

Voorbereiding van een Awake Muis voor opnemen Neurale Reacties en injecteren van Tracers

This video demonstrates a technique of studying the activity of renal sympathetic nerves (RSNs) in response to changes in arterial pressure in rats. Upon attaching a pressure-sensing catheter to the femoral artery, the renal sympathetic nerves are exposed. The nerves are then lifted onto a recording electrode, and their electrical activity is recorded. Next, a vasoconstricting drug is injected to elevate blood pressure, and corresponding changes in RSN activity are monitored.

Recording Changes in Renal Sympathetic Nerve Activity in Response to Arterial Pressure in Rats

Deze film laat zien hoe systemische en lever hemodynamiek bij muizen te verwerven. De gehele controle omvat verkrijging van vitale parameters, systemische bloeddruk, centrale veneuze druk, gemeenschappelijk leverslagader stroomsnelheid en poortader druk en het portaal debiet in muizen.

Monitoring van Systemische en lever hemodynamische parameters in Muizen

We presenteren methoden voor de constructie van elektroden om gelijktijdig extracellulaire neurale activiteit op te nemen en meerdere neuroactieve stoffen in de buurt van de opnameplaatsen bij wakkere muizen vrij te geven. Deze techniek maakt de gedetailleerde analyse van veronderstelde lokale synaptische input naar de belangrijke neuron mogelijk.

Extracellulaire van neuronale activiteit Gecombineerd met Microiontophoretic Toepassing van neuroactive stoffen in Awake Muizen

Het doel van dit protocol is om de systemische bloeddruk te beoordelen bij bewuste, vrij bewegende muizen met behulp van implanteerbare radio-telemetrie-apparaten.

Langdurige Bloeddruk meten in vrij bewegende muizen met behulp van telemetrie

Methoden voor het meten van sympathiek en cardiovasculaire reacties op het centrale zenuwstelsel (CNS) manipulaties zijn belangrijk voor het bevorderen van de neurowetenschappen. Dit protocol werd ontwikkeld om te helpen wetenschappers met meten en kwantificeren van acute wijzigingen in renal sympathiek zenuw activiteit (RSNA) bij narcose ratten (niet-overleving).

Acute wijzigingen kwantificeren van de renale sympathiek zenuw activiteit in reactie op het centrale zenuwstelsel manipulaties bij narcose ratten

Hier beschrijven we een setup voor gelijktijdige opname elektrocardiogram en intra-arteriële bloeddruk (BP) in experimentele ratten, die kunnen worden gedaan met standaard uitrusting in dierlijke voorzieningen en kunnen worden toegepast op de fysiologische of farmacologische studies om te onderzoeken van pathogene of therapeutische mechanismen in cardiovasculaire geneeskunde.

Gelijktijdige electrocardiografie opname en invasieve bloed druk meting bij ratten

De baroreflex is een hartslagregulatiemechanisme door het autonome zenuwstelsel als reactie op bloeddrukveranderingen. We beschrijven een chirurgische techniek om telemetriezenders te implanteren voor continue en gelijktijdige meting van elektrocardiogram en bloeddruk bij muizen. Dit kan spontane baroreflexgevoeligheid bepalen, een belangrijke prognostische marker voor hart- en vaatziekten.

Implantatie van gecombineerde telemetrische ECG- en bloeddruktransmitters om spontane baroreflexgevoeligheid bij bewuste muizen te bepalen

Het huidige protocol beschrijft een langdurige continue meting van de renale bloedstroom bij bewuste ratten en tegelijkertijd het registreren van de bloeddruk met geïmplanteerde katheters (met vloeistof gevuld of door telemetrie).

Continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten

Dit protocol beschrijft een methode om in vivo opnames van één neuron met hoge dichtheid te verkrijgen van de hersenstam van muizen met een hoofdfixatie. Deze benadering wordt gebruikt om het afvuren van het actiepotentiaal van neuronen in het ventrolaterale periaqueductale grijs te meten - een hersenstamgebied dat inactief is tijdens de Rapid Eye Movement (REM)-slaap - voor en tijdens algemene anesthesie.

Acute single-unit multi-elektrode-opnames van de hersenstam van muizen met een hoofdfixatie

Leer een nieuwe methode voor gelijktijdige opname van renale sympathieke zenuwactiviteit en bloeddruk bij bewuste, ongebreidelde muizen zonder verdovingsbeïnvloeding.

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen. (Video) | JoVE Journal

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Meer video's verkennen