Name: Gelijktijdig opnemen van Electroretinografie en Visual evoked potentials in verdoofde ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Leer gelijktijdige opname van elektroretinografie en visueel geëvoceerde potentialen bij verdoofde ratten. Deze methode biedt een uitgebreide beoordeling van retinale en corticale functies voor visueel onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De financiering voor dit project werd verstrekt door de National Health and Medical Research Council (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) en Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN).

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen relevante bekendmakingen met betrekking tot dit werk.

De ERG en VEP objectieve metingen van de visuele functie van het netvlies en de cortex, respectievelijk. Het voordeel van gelijktijdige opname is dat een meer uitgebreid overzicht van het gehele visuele route wordt geboden. Daarbij zouden de aanvullende informatie van de samenlopende beoordeling een duidelijker afbakening van de plaats van letsel te voorzien in de visuele banen (bijvoorbeeld bij aandoeningen met overlappende Nog ERG afzonderlijke VEP manifestaties 18, wanneer optische neuropathie kan...

Meting van de electroretinogram (ERG) en visuele evoked potential (VEP) bruikbare kwantitatieve beoordeling van de integriteit van de visuele route. De ERG meet de elektrische respons van het netvlies lichtstimulatiebron, terwijl de VEP meet de overeenkomstige functionele integriteit van de visuele trajecten van de retina naar de primaire visuele cortex na hetzelfde licht event. Dit manuscript beschrijft een protocol voor de registratie en analyse van de ERG en VEP reacties in een algemeen gebruikt laboratorium model, de rat. De ERG biedt een index van de functionele integriteit van een aantal belangrijke retinale cel klassen door het kwantificeren van de bruto elektrische reactie van de retina om een ​​lichtflits. Een gecoördineerde reeks ionische fluxen gestart door het aanzetten van licht en offset, detecteerbare veranderingen in de spanning die kan worden gemeten met behulp van oppervlakte-elektroden buiten het oog geplaatst. De resulterende golfvorm vertegenwoordigt de combinatie van een SERies van goed gedefinieerde componenten, die verschillen in amplitude, timing en frequentie. Een aanzienlijke hoeveelheid onderzoek is gebleken dat deze onderdelen relatief goed geconserveerd zijn over vele gewervelde retina en de componenten kunnen worden gescheiden van elkaar. Door oordeelkundig selecteren van de stimulus (flash stimulus, achtergrond, interstimulus interval) voorwaarden en de keuze van de specifieke kenmerken van de samengestelde golfvorm te analyseren kan men overtuigd van het terugsturen van een maatregel van een specifieke groep van retinale cellen 1,2 zijn. Deze kenmerken ten grondslag aan de bruikbaarheid en daarmee de wijdverspreide toepassing van de ERG als een niet-invasief meten van retina functie. Dit handschrift is gericht op de methode voor het meten van de ERG en de analyse van de mogelijkheden ervan om informatie terug te keren over een aantal van de grote mobiele klassen in het netvlies, namelijk fotoreceptoren (de PIII component), bipolaire cellen (de PII component) en retinale ganglion cellen (de positieve scotopisch drempel reactie of pstr). <p class= &quot;Jove_content&quot;&gt; The VEP biedt een analyse van de corticale reactie op licht; eerst afkomstig van het netvlies en daarna serieel gecommuniceerd via de oogzenuw, optische darmkanaal, thalamus (laterale geniculate nucleus, LGN) en optische straling tot gebied V1 van de cortex 3. Bij knaagdieren, de meerderheid (90-95%) van de optische zenuwvezels van elk oog kruisvormige 4 en innerveren de contralaterale midden hersenen. In tegenstelling tot de ERG, is het nog niet mogelijk verschillende componenten van de VEP toeschrijven aan specifieke klassen cellen, 5 verandert dus overal langs de gezichtsbaan kunnen hebben voor de VEP golfvorm. Toch is de VEP een nuttige niet-invasief meten van visuele prestatie en gezichtsbaan integriteit. De VEP, bij gebruik in combinatie met de ERG, kan een volledige beoordeling van de visuele systeem (bijv retina / gezichtsbaan) verschaffen. ERG en VEP opnamen kan worden uitgevoerd of in combinatie, afhankelijk van de toekation. De in dit document beschreven methode maakt gelijktijdige evaluatie van het netvlies en corticale visuele opgeroepen elektrofysiologie van beide ogen en beide halfronden in verdoofde ratten. Dit is een handige manier om de retinale functie en de upstream-effecten die veranderingen in de functie van de retina op de visuele opgeroepen corticale functie kan hebben meer uitvoerig te evalueren.

<table><tbody><tr><td>Alligator clip</td><td>generic brand</td><td>HM3022</td><td>Roestvrijstalen clip van 26 mm voor het verbinden van VEP-schroefelektroden op kabels</td></tr><tr><td>Bioamplifier</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>Voor het versterken van ERG- en VEP-signalen</td></tr><tr><td>Carboxymethylcellulose natrium 1,0%</td><td>Allergan</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>Visceus vocht om de signaalkwaliteit van de actieve ERG-elektrode te verbeteren</td></tr><tr><td>Carprofen 0,5%</td><td>Pfizer Animal Health Group</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>Merknaam: Rimadyl injecteerbaar (50 mg/ml). Voor pijnstilling na de operatie, verdund tot 0,5% (5 mg/ml) in fysiologische zoutoplossing</td></tr><tr><td>Chlorhexadine 0,5%</td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>Voor het desinfecteren van chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>Circulerende waterbad</td><td>Lauda-Königshoffen</td><td>MGW Lauda</td><td>Voor het handhaven van de lichaamstemperatuur van het verdoofde dier tijdens operaties en elektrofysiologische opnames</td></tr><tr><td>Tandheelkundig amalgama</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>Voor het omhullen van de elektrode-schedelsamenstelling om deze robuuster te maken</td></tr><tr><td>Tandheelkundige boor</td><td>Storz Instruments, Bausch and Lomb</td><td>#E0824A</td><td>Een miniatuurboorkop van ~ 0,7 mm diameter voor het maken van een klein gaatje in de schedel boven elke hemisfeer om VEP-schroeven te implanteren</td></tr><tr><td>Boor</td><td>Bosch</td><td>Dremel 300 serie</td><td>Een automatische boor voor het boren van gaten</td></tr><tr><td>Elektrodekabel</td><td>Grass Telefactor</td><td>F-E2-30</td><td>Platinakabels voor het verbinden van zilverdraadelektroden op de versterker</td></tr><tr><td>Faradaykooi</td><td>op maat gemaakt</td><td></td><td>Zorgt voor lichtdichtheid om donkeraanpassing te behouden. Omvat de Ganzfeld-opstelling om de signaal-ruisverhouding te verbeteren</td></tr><tr><td>Gaasjes</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>Voor het drogen van de chirurgische incisie en blootgestelde schedeloppervlakte tijdens de operatie</td></tr><tr><td>Ganzfeld-integrerende bol</td><td>Photometric Solutions International</td><td></td><td>Op maat gemaakte lichtstimulator: 36 mm diameter, 13 cm opening</td></tr><tr><td>Velcro</td><td>VELCRO Australia Pty Ltd</td><td>VELCRO Brand Herbruikbare omwikkeling</td><td>Haak-en-lus-bevestiging om de elektroden en het dier op het opnameplatform te bevestigen</td></tr><tr><td>Isofluraan 99,9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>Merknaam: Isoflo(TM) Inhalatie-anestheticum. Farmaceutische kwaliteit inhalatie-anestheticum gemengd met zuurstofgas voor VEP-elektrode-implantaatchirurgie</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Ketamil</td><td>Merknaam: Ketamil Injectie, Merk: Ilium. Farmaceutische kwaliteit anestheticum voor elektrofysiologisch opname</td></tr><tr><td>Luxeon LED's</td><td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>Voor lichtstimulatie twintig 5 W en een 1 W LED's.</td></tr><tr><td>Micromanipulator</td><td>Harvard Apparatus</td><td>BS4 50-2625</td><td>Houdt de actieve ERG-elektrode vast tijdens opnamen</td></tr><tr><td>Naaldelelektrode</td><td>Grass Telefactor</td><td>F-E2-30</td><td>Subcutaan ingebracht in de staart om als aardelektrode te dienen voor zowel de ERG als de VEP</td></tr><tr><td>Fenylefrine 2,5% minims</td><td>Bausch and Lomb</td><td>CAS 61-76-7</td><td>Geïnstilleerd met Tropicamide om maximale dilatatie te bereiken voor ERG-opname</td></tr><tr><td>Povidonjodium 10%</td><td>Sanofi-Aventis</td><td>CAS 25655-41-8</td><td>Merknaam: Betadine, antisepticum om de geschoren huid voor te bereiden op de chirurgie 10%, 500 ml</td></tr><tr><td>Powerlab data-acquisitiesysteem</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td><td>Bestuurt de LED's</td></tr><tr><td>Proxymetacaïne 0,5%</td><td>Alcon Laboratories</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>Voor hoornvliesanesthesie tijdens ERG-opnamen</td></tr><tr><td>Zoutoplossing</td><td>Gelflex</td><td></td><td>Niet-injecteerbaar, voor het elektroplating van zilverdraadelektroden</td></tr><tr><td>Scope Software</td><td>ADInstruments</td><td>versie 3.7.6</td><td>Activeert tegelijkertijd het stimulus via het Powerlab-systeem en verzamelt gegevens</td></tr><tr><td>Zilver (fijne ronde draad)</td><td>A&amp;E metaal</td><td>0,3 mm</td><td>Gebreikt om actieve en inactieve ERG-elektroden te maken, en de inactieve VEP-elektrode</td></tr><tr><td>Roestvrijstalen schroeven</td><td>MicroFasterners</td><td></td><td>0,7 mm asdiameter, 3 mm lengte om boven de primaire visuele cortex te worden geïmplanteerd en als actieve VEP-elektroden te dienen</td></tr><tr><td>Stereotaxisch frame</td><td>David Kopf</td><td>Model 900</td><td>Een stereotaxisch instrument voor kleine dieren voor het lokaliseren van de primaire visuele cortex volgens de coördinaten van de rattenhersenatlas van Paxinos &amp; Watson uit 2007</td></tr><tr><td>Chirurgisch mes</td><td>Swann-Morton Ltd.</td><td>0206</td><td>Voor het insnijden van het huidgebied boven de primaire visuele cortex om de VEP-elektroden te implanteren</td></tr><tr><td>Hechtdraad</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co.,Ltd</td><td></td><td>3-0 zijde gevlochten niet-absorbeerbare hechtdraad, voor huidretractie tijdens VEP-elektrode-implantatiechirurgie</td></tr><tr><td>Tobramycine oogzalf 0,3%</td><td>Alcon Laboratories</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>Merknaam: Tobrex. Profylactische antibioticumzalf aangebracht rond de huidwond na de operatie</td></tr><tr><td>Tropicamide 0,5%</td><td>Alcon Laboratories</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>Merknaam: 0,5% Mydriacyl oogdruppel, Geïnstilleerd om mydriase te bereiken voor ERG-opname</td></tr><tr><td>Xylazijn</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Xylazil-100</td><td>Farmaceutische kwaliteit anestheticum voor elektrofysiologisch opname</td></tr><tr><td>Pipettip</td><td>Eppendorf Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5,000 ml, voor op maat gemaakte elektroden</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>versie 2010</td><td>spreadsheet software voor gegevensanalyse</td></tr><tr><td>Lethabarb Euthanazia Injectie</td><td>Virbac (Australia) Pty Ltd</td><td>LETHA450

gelijktijdig opnemen van electroretinografie en visual evoked potentials in verdoofde ratten

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

Het elektroretinogram (ERG) en het visueel geëvokte potentiaal (VEP) worden vaak gebruikt om de integriteit van de visuele route te beoordelen. De ERG meet de elektrische reacties van het netvlies op lichtstimulatie, terwijl de VEP de bijbehorende functionele integriteit van de visuele routes van het netvlies tot de primaire visuele cortex meet na dezelfde lichtgebeurtenis. De ERG-golfvorm kan worden onderverdeeld in componenten die de reacties van verschillende retinale neuronale en gliacellenklassen weerspiegelen. De vroege componenten van de VEP-golfvorm vertegenwoordigen de integriteit van de oogzenuw en hogere corticale centra. Deze opnames kunnen afzonderlijk of samen worden uitgevoerd, afhankelijk van de toepassing. De in dit artikel beschreven methodologie maakt gelijktijdige beoordeling van retinale en corticale visuele geëvokte elektrofysiologie mogelijk vanuit beide ogen en beide hemisferen. Dit is een nuttige manier om de retinale functie en de stroomopwaartse effecten die veranderingen in retinale functie kunnen hebben op visuele geëvokte corticale functie meer uitgebreid te beoordelen.

De ERG a-wave (&gt; -1,38 log cd.sm -2), b-golven (&gt; - 4,99 log cd.sm -2) STR&#39;s (&lt;- 4,99 log cd.sm -2) en de VEP (&gt; - 0,52 log cd.sm -2) gelijktijdig (figuur 1 en 3 opgenomen). Bij zeer zwak knippert, wordt een positieve STR ​​(pstr) waargenomen bij ongeveer 110 msec na de flits, en een negatieve STR ​​(NSTR) bij ongeveer 220 msec (figuren 1 en 2). Een ERG met een grote b-golf, pieken tussen 50 tot...

Dit protocol beschrijft gelijktijdige meting van elektroretinogram en visueel geëvokte potentialen bij geanesthetiseerde ratten.

Gelijktijdig opnemen van Electroretinografie en Visual evoked potentials in verdoofde ratten

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

Het algemene doel van deze procedure is om gelijktijdig het elektroretinogram en het visueel opgeroepen potentiaal bij een rat te meten. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen binnen de neurowetenschappen van de fissuur, zoals de vraag of veroudering of ziekten bepaalde componenten in de visuele baan beïnvloeden.Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het een uitgebreide beoordeling van de retinale functie en het bovenstroomse effect daarvan op de visuele corticale opgeroepen functie mogelijk maakt. Om deze procedure te starten, worden de op maat gemaakte inactieve ERG-elektroden voorbereid door een stuk zilverdraad van 70 millimeter af te knippen en een lus met een diameter van acht millimeter te vormen om het oog van de rat te omsluiten. Vorm een gelijkmatige cirkel en pas de grootte van de lus aan door deze te vormen op de kop van een pijpje van één millimeter.Dit is belangrijk omdat een te kleine ring onbedoeld de intra-articulaire druk kan verhogen, terwijl een te grote ring de variabiliteit van de signalen kan vergroten. Vorm vervolgens de op maat gemaakte VEP-inactieve elektrode door een stuk zilver van 70 millimeter af te knippen en een ellips van acht millimeter diameter te vormen om deze aan de snijtanden van de rat te bevestigen.Vervolgens worden de op maat gemaakte actieve ERG-elektroden voorbereid door een stuk zilverdraad van 30 millimeter af te knippen en een kleine lus van ongeveer één tot twee millimeter diameter te vormen, die wordt gebruikt om het hoornvlies van de rat voorzichtig te contacteren met minimale cornea-abrasies. Bevestig daarna de elektroden stevig aan de elektrodekabels door het zilver te vervlechten met de blootgestelde binnenkern van de draad. Isoleer overtollig blootgesteld metaal met maskeringstape om fotovoltaische artefacten te verminderen.Voor de actieve ERG-elektroden kunnen meer lagen maskeringstape worden aangebracht om een dikkere en stijvere wikkeling te verkrijgen, zodat de elektrode gemakkelijker met een micromanipulator kan worden vastgehouden. Plak op elke inactieve ERG-elektrode een klein stukje klittenband op de maskeringstape om een stabiele bevestiging aan de nekband van het knaagdier mogelijk te maken. Bevestig vervolgens voor elke actieve VEP-elektrode een krokodillenklem aan de binnenste draad van de elektrodeleiding.Direct voor de opnames worden de blootliggende oppervlakken van de zilverdraden elektrogeplateerd met chloride om de signaalgeleiding te verbeteren. Doe dit door de kathode aan de negatieve pool van de batterij te verbinden en het andere uiteinde in de zoutoplossing te dompelen. Dompel vervolgens de zilveren tip van de anodedraad in normale zoutoplossing en verbind het andere uiteinde van deze elektrodedraad met de positieve pool van een batterij van negen volt.Koppel ze na 20 seconden los; de zilveren punt van de elektrodedraad moet nu gelijkmatig wit gecoat zijn. Herhaal de chloreringsprocedure voor alle zilveren ERG- en VEP-elektroden. Desinfecteer bij deze procedure het geschoren gebied van een geanestheseerd dier drie keer met 10% povidonjodium.Maak met een scalpel een sagittale incisie langs de middellijn van de kop en exciseer een cirkel van dermaal weefsel met een diameter van 20 millimeter om het schedelbot bloot te leggen. Verwijder vervolgens het onderliggende periosteum door te schrapen en te drogen met gaas, om de coronale en sagittale schedelnaden bloot te leggen. Boor twee gaten door de schedel in beide hemisferen.Draai roestvrijstalen schroeven tot een diepte van één millimeter in de twee voorgeboorde gaten om een stevige verankering te bewerkstelligen. Bereid vervolgens het chirurgische gebied voor op het tandamalgaam door het schedelbot droog te maken met gaas en de huid terug te trekken met twee hechtingen. Breng daarna het tandamalgaam aan over de blootgelegde schedel om de schroefelektroden op hun plaats te fixeren en zorg dat ongeveer 1,5 millimeter van de schroeven is blootgelegd voor de registratie.Verwijder daarna de retractiehechtingen. Voor scotopische metingen worden alle procedures in een donkere kamer uitgevoerd. Om illustratieve redenen wordt de positionering van de elektroden hier onder normale kamerverlichting uitgevoerd.Het dier werd 12 uur aan het donker gewend en geanestheseerd met ketamine en xylazine. Na pupilverwijding en lokale anesthesie werd de inactieve VEP-elektrode rond de onderste snijtanden gehaakt. Plaats het dier vervolgens op het ERG-platform voor de Ganzfeld-kom in de kooi van Faraday.Zet het dier vast op het platform met een stripje klittenband dat stevig, maar niet te strak, rond de nek is geplaatst. Positioneer vervolgens de inactieve ERG-elektroden door de sclerale ring niet-invasief rond de equator van de ogen te plaatsen. Ongeveer drie meter achter de limbus.Stabiliseer dit door de elektrode te bevestigen aan de klittenbandstrip rond de nek. Herhaal de procedure voor het contralaterale oog. Bevestig nu de actieve VEP-elektroden door de krokodillenklemmen te bevestigen aan de roestvrijstalen schroeven die vooraf in de schedel zijn geïmplanteerd.Breng vóór het plaatsen van de actieve ERG-elektrode een kleine druppel 1% carboxymethylcellulose natrium aan op de elektrode om de signaalkwaliteit te verbeteren. Positioneer de actieve ERG-elektroden zodanig dat ze het centrale hoornvliesoppervlak licht raken met behulp van een micromanipulator die is bevestigd aan de op maat gemaakte stereotaxische arm. Zorg ervoor dat het carboxymethylcellulose natrium alleen in contact komt met het hoornvlies en niet met de sclera door overtollige vloeistof weg te vegen.Voeg vervolgens twee tot vijf millimeter van de roestvrijstalen geaarde naaldelektrode subcutaan in de staart in. Schuif het platform dichter naar de Ganzfeld-kom en zorg ervoor dat de ogen van de dieren zijn uitgelijnd met de opening van de kom om een gelijkmatige verlichting van beide retina's mogelijk te maken. Sluit vervolgens de kooi van Faraday om externe ruis te verminderen.Met behulp van het bovenstaande protocol kan een reeks ERG-golfvormen worden geregistreerd in reactie op een reeks stimuli, waarbij de zwakste flits onderaan en de sterkste bovenaan wordt weergegeven. Bij zeer lage lichtniveaus kunnen scotopische drempelresponsen worden geregistreerd. Bij toenemende stimulushelderheid worden de golfvormen gedomineerd door de B-golf, waarna bij de sterkste stimuli de negatiefgaande A-golf verschijnt.De functie van de staaf-fotoreceptoren kan worden bepaald door een P3 te gebruiken om de A-golf te modelleren. Deze figuur laat zien dat de P2-amplitude toeneemt bij een stijgende stimulusenergie. De functie van de staaf-bipolaire cellen kan worden bepaald door de intensiteitsresponstheorieën van de staaf-P2 te modelleren met een Naka-Rushton-functie.De functie van de retinale gangliecellen wordt bepaald bij lage lichtenergieën en gekwantificeerd aan de hand van de amplitude en timing van de pSTR-piek. De functie van de kegelpolaire cellen wordt opgewekt met een gepaarde flitsparadigma en gekwantificeerd aan de hand van de amplitude en timing van de kegel-P2-piek. De amplitudeanalyse van het VEP wordt bepaald als de amplitudes van piek-naar-dal en dal-naar-piek, wat de timing van deze responsen aangeeft.De amplitude van de VEP-golfvormen neemt toe naarmate de stimulusenergie toeneemt. Wanneer men deze techniek beheerst, kan deze in ongeveer 30 tot 45 minuten worden uitgevoerd, exclusief de tijd voor het voorbereiden en plaatsen van de elektroden en de donkeradaptatie. Tijdens het uitvoeren van deze procedure is het bijzonder belangrijk omtenzijn van de nauwkeurigheid van de plaatsing van de elektroden en om voldoende tijd te laten voor de donkeradaptatie.Na deze procedure kunnen andere procedures, zoals ziektemodificatie of therapieën, worden uitgevoerd om specifieke vragen te beantwoorden. Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe de elektroden te bereiden en te plaatsen, alsmede hoe de ERG- en VEP-golfvormen te registreren en te analyseren.

simultaneous-recording-electroretinography-visual-evoked-potentials

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

This video demonstrates the preparation of a rat model to study retinal health and visual pathway integrity. Visual evoked potential and electroretinography reference and active electrodes are connected to the rat, followed by aligning the platform with the rat in front of the Ganzfeld bowl for even retinal illumination and closing the Faraday cage to avoid external interference.

Preparing a Rat Model to Assess Visual Pathway Integrity Using an Electrophysiology Setup

This video demonstrates the process of measuring visual evoked potentials or VEPs in a dark-adapted, anesthetized rat with pre-implanted skull electrodes, which record the electrical signals from the brain's visual cortex in response to light stimuli.

Recording of Visual Evoked Potentials via the Skull Electrodes in a Rat Model

This video demonstrates the procedure for concurrent recordings of co-localized electroencephalography (EEG) and local field potentials (LFPs) in an anesthetized rat. The process involves preparing the rat and attaching stimulating electrodes to its whisker pads. An EEG spider electrode is placed on the rat's skull for surface EEG measurements. At the same time, a multi-channel microelectrode is inserted into a specific brain region through a burr hole in the skull to record neural activity...

Concurrent Electroencephalographic and Local Field Potential Recordings in an Anesthetized Rat

This video demonstrates how to record electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) in a conscious rat. The rat, with surgically implanted electrodes, is first dark-adapted. After applying dilating drops, the animal is placed in a restrainer and positioned in a Ganzfeld bowl. The ERG and VEP signals are then recorded.

Recording of Electroretinogram and Visual Evoked Potential in a Rat

This video demonstrates the recording of a direct-coupled electroretinogram (DC-ERG) on a dark-adapted, anesthetized mouse retinal pigment epithelium (RPE). After applying dilating drops, the animal is placed in a recording setup, and the capillary electrode filled with a salt buffer is placed on the cornea. After establishing the baseline, DC-ERG is recorded.

Direct-Coupled Electroretinogram Recording of the Retinal Pigment Epithelium in a Mouse

Het elektroretinogram (ERG) is een elektrisch potentiaal dat door de retina wordt gegenereerd als reactie op licht. Dit artikel beschrijft hoe de ERG kan worden gebruikt om de retinale functie te beoordelen, bij in het donker aangepaste ratten, en hoe het kan worden gebruikt om een neuroprotectieve interventie te evalueren, in dit geval afstandsischemisch preconditioning.

Met behulp van de electroretinogram om Function beoordelen in het knaagdier Retina en de beschermende effecten van Remote Limb Ischemische preconditionering

Focale demyelinering wordt geïnduceerd in de oogzenuw met behulp van lysolecithine-micro-injectie. Visueel geëvokte potentialen worden opgenomen via schedelelektroden die over de visuele cortex zijn geïmplanteerd om de signaalgeleiding langs de visuele route in vivo te onderzoeken. Dit protocol beschrijft de chirurgische procedures die ten grondslag liggen aan elektrode-implantatie en micro-injectie van de oogzenuw.

Visual Evoked Potential Opname in een rat model van Experimentele Optic Nerve Demyelinisatie

We tonen chirurgische implantatie en recording procedures visuele elektrofysiologische signalen van het oog (electroretinogram) en hersenen (visuele evoked potential) in ratten bij bewustzijn, dat meer analoog is aan de menselijke aandoening waarbij opnamen zonder verdoving uitgevoerd worden verwart meten.

Implantatie en Registratie van Wireless electroretinogram en Visual opgewekte potentiele in Conscious Rats

Dit protocol beschrijft een eenvoudige methode voor gelijktijdige opname van co gelokaliseerde elektro-encefalografie (EEG) en multi-laminaire lokale veld potentieel in een narcose rat. Een burr gat geboord in de schedel voor het inbrengen van een micro-elektrode is aangetoond dat het te verwaarlozen vervorming van het EEG signaal veroorzaken.

Gelijktijdige opname van elektro-encefalografie mede gelokaliseerde en lokale veld potentieel in knaagdier

Vasthouden aan internationale normen en het handhaven van retinale donkere aanpassing zijn van cruciaal belang om geldige full-field elektroretinogram reacties te verwerven in de diagnose en het beheer van erfelijke netvliesziekten. Een praktisch protocol met behulp van een draagbare donkere kamer is voorzien om full-field elektroretinogram te verkrijgen voor zuigelingen en kinderen onder sedatie of algemene anesthesie in de operatiekamer instelling.

Electroretinogram-opname voor zuigelingen en kinderen onder narcose om optimale donkere aanpassing en internationale normen te bereiken

Het doel van dit protocol is het karakteriseren van een nieuw model van glaucoomneurodegeneratie op basis van 360° thermische cauterisatie van de limbale vasculaire plexus, die subacute oculaire hypertensie induceert.

Volledige cirkel Cauterisatie van limbale vasculaire plexus voor chirurgisch geïnduceerd glaucoom bij knaagdieren

Leer gelijktijdige opname van elektroretinografie en visueel geëvoceerde potentialen bij verdoofde ratten. Deze methode biedt een uitgebreide beoordeling van retinale en corticale functies voor visueel onderzoek.

Gelijktijdig opnemen van Electroretinografie en Visual evoked potentials in verdoofde ratten

Meer video's verkennen