Name: Alternatieve methode voor het verwijderen Otoliths van Sturgeon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Leer een effectieve methode voor het verwijderen van onbeschadigde otolieten uit steur, waaronder de bedreigde Meervalsteur. Deze techniek behoudt anatomische structuren en ondersteunt onderzoek naar visleeftijd, groei en habitatmicrochemie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Speciale dank aan de St. Regis Mohawk divisie Milieu, Welaka National Fish Hatchery, US Fish and Wildlife Service Research Unit, Southern Illinois University, US Fish and Wildlife Service Northeast Fisheries Center, Sterling Caviar, University of California-Davis, Garrison Dam National Fish broederij, Bears Bluff National Fish Hatchery, en US Fish and Wildlife service Panama City Visserij Office Resource voor hun hulp leveren van steur voor dit project. dit artikel is Bijdrage 2013 van de USGS Great Lakes Science Center.

Belangrijke opmerking: Door de beschermde status van alle soorten steur in de Verenigde Staten, maakt het mogelijk te verwerven en verwerken vissen werden voorafgaand aan het laboratorium procedure verkregen. Alle monsters werden verkregen van broederij bronnen na het slachten als gevolg van natuurlijke oorzaken en vernietigd volgende standaard procedure. 1. Specimen Voorbereiding <ol><li> Alvorens insnijdingen lag steur karkas op zijn kant en met een meetlint te meten totale lengte van de snuit tot het uiteinde van de staart tot op 1 mm. (Figuur 1A) </li><li> Weeg steur karkas op een getarreerde schaal, tot op 1 g. Evalueer karkas voor enige externe labels of merken en opnemen. </li></ol> 2. Otolith Extraction <ol><li> Voeg een verticale insnijding met een grote fileermes tussen de basis van de schedel en de eerste dorsale scute door het lichaam naar de kop te scheiden van het lichaam (Figuur 1B). Na het verwijderen van het hoofd, turn het hoofd, zodat de mond naar boven (figuur 1C). </li><li> Verwijderen van zacht weefsel in de mond en kieuwen door het fileermes langs de ventrale zijde van de schedel (figuur 1D) te snijden. Een insnijding met een elektrische zaag bot van de punt van de snuit naar de basis van de schedel volledig halveren de kop (figuur 1E). Scheid de twee helften met de hand naar de hersenen holte (Figuur 2A) bloot. </li><li> Verwijder en gooi de hersenen materie (Rode doos links) met een tang om halfcirkelvormige kanalen bekijken (Rode doos rechts) in de hersenen holte (Figuur 2B). </li><li> Verwijder halfronde kanaal kraakbeen van de hersenen holte met een pincet (Figuur 2C). Prikken zorgvuldig halfronde gracht kraakbeen met de punt van de tang en verwijder otoliet (figuur 2D). Verwijder de otoliet (harde benige structuur binnen het kraakbeen) met een tang uit de halfcirkelvormige kanaal kraakbeen (Figuur 2E) </strong&gt;. </li><li> Herhaal stap 2,3-2,4 otoliet aan de andere helft van de schedel verwijderd. </li><li> Dompel de otolieten in 92% ethanol gedurende 5 seconden om eventuele kraakbeen te verwijderen. Plaats otolieten in een open 25 ml scintillatieflesje drogen gedurende 24 uur. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Elk gebruik van handels-, product- of bedrijfsnamen is uitsluitend voorbehouden aan beschrijvingsdoeleinden en impliceert geen goedkeuring door de Amerikaanse overheid.

Het overzicht van een alternatieve methode voor het extraheren van otolieten van steur karkassen is uitgewerkt. Het is belangrijk op te merken dat speciale aandacht behoeft de laterale incisie plaatsing op de middellijn van de schedel om de schedel gelijkmatig halveren om geen schade aan de otolieten garanderen tijdens dissectie. Wanneer de incisie niet diep genoeg om de schedel volledig halveren zal het zeer moeilijk zijn om de hersenen holte bloot wanneer de locatie van de otolieten duidelijk zichtbaar. Met ervaring, ...

Sturgeon (Acipenseridae) bevolkingsgroepen over de hele wereld zijn gedaald meer dan een eeuw als gevolg van de effecten, waaronder habitatverlies, bevolking fragmentatie, en overbevissing zodanig dat vele bevolkingsgroepen worden beschermd door de staat en federale wetten 1,2. Agentschappen in heel de VS en de wereld hebben steur geïdentificeerd als doelsoort voor de restauratie en 1 herstel. Bevolking kenmerken (groei, werving, voeding) van de meeste steur populaties zijn bestudeerd om beter te begrijpen fundamentele biologie en levensgeschiedenis kenmerken 1. Als gevolg van de beschermde status van de meeste steur populaties leeftijd evaluatie is moeilijk in kleine bedreigde bevolkingsgroepen waar geen offer of letsel aan personen gerechtvaardigd is. De winning van botstructuren behoeve van leeftijdsraming en groei analyse is een techniek 3 .Het gebruik van fin ray secties bepalen leeftijd sturge geweestop geworden een praktische nonlethal methode, maar het vergelijken van de techniek is beperkt en leeftijd kunnen zeer moeilijk te ontcijferen bij ouderen (&gt; 15 jaar) zijn 4. Onderzoekers evaluatie van het gebruik van meerdere botstructuren in steur voor het gebruik ervan bij het ​​valideren van de leeftijd van de Golf Steur (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, Steur (A. o. Oxyrinchus) 6, White Sturgeon (A. transmontanus) 7, en Lake Sturgeon (A. fluvescens) 8 geconcludeerd dat de eerste marginale borstvin ray op voorwaarde dat de meest accurate leeftijd, maar deze invasieve procedure schadelijk voor grotere individuen te zijn gesloten. Momenteel is er de ontwikkeling van het gebruik otoliet vorm metrieken te onderscheiden Noordamerikaanse steur soorten met een zeer hoog slagingspercentage 9. Details over het verwijderen van de otoliet met een dorsale dwarse snede in de basis van de schedel is een gemeenschappelijk otoliet extraction methode gevonden in de literatuur en duidelijk beschreven door Secor et al. (1991) 10. Deze werkwijze is moeilijk toe te passen op steur die dikke schedels met otolieten dat kleine en delicaat zijn en zou de neiging om te breken. Een verdere herziening van de literatuur laat geen andere gedetailleerde methodologie van het otoliet verwijderingsprocedure voor steur. Het doel van dit document was voor detail een alternatieve methode voor het extraheren van otolieten van steur door het invoeren van de hersenen holte van de buikzijde.

<table><tbody><tr><td>Meetlint</td><td></td><td></td><td>Metrische meterstok is geprefereerd</td></tr><tr><td>Weegschaal</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vilesmes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scalpel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pincet</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Staalviltjes</td><td></td><td></td><td>25 ml scintillatie-viltjes werken goed</td></tr></tbody></table>

alternatieve methode voor het verwijderen otoliths van sturgeon

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

Extraheren van de otolieten (oor botten) van de vis die zeer dikke schedels kan moeilijk en zeer tijdrovend te zijn. De gangbare praktijk van het maken van een dwarse verticale insnijding op de top van de schedel met een hand- of elektrische zaag kan otoliet beschadigen als niet correct uitgevoerd. Steuren (Acipenseridae) zijn één familie in het bijzonder dat een zeer grote en dikke schedel hebben. Een nieuwe laboratoriummethode die in de schedelholte uit de ventrale zijde van de vis aan de otolieten bloot was makkelijker dan andere otoliet extractiemethoden uit de literatuur. Methoden beoordeeld in de literatuur zijn ontworpen voor het veld en zijn efficiënter bij het verwerken van grote hoeveelheden vis snel. Echter, deze nieuwe techniek ontwikkeld meer geschikt voor een laboratoriumomgeving te zijn wanneer de tijd is niet persen en succesvolle extractie van elk specimen is kritisch. Het succes van het vinden en verwijderen otolieten met deze techniek is zeer hoog en niet het gevaar sTRUCTUUR op enigerlei wijze. Deze alternatieve techniek is toepasbaar op soortgelijke vissoorten de extractie van de otolieten.

De volwassen grootte van steur in de hele wereld varieert sterk, maar de locatie van de otolieten is consistent. Het gebruik van een scherp fileermes bleek de zachte weefsels van de mond gemakkelijk figuur 1D verwijderen. Een elektrische botzaag het instrument bij de laterale incisie aan de hersenen holte in figuur 1E bloot. Echter, de aandacht voor tweeën deelt de middellijn van de schedel is nodig omdat anders de otolieten kunnen worden gekneusd tijden...

Het doel van het protocol is om een effectieve methode te laten zien om de otoliths uit de karkassen van steuren te extraheren.

Alternatieve methode voor het verwijderen Otoliths van Sturgeon

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

Het algemene doel van deze methode is om een effectieve alternatieve techniek te bieden voor het extraheren van onbeschadigde otolieten uit bedreigde vissoorten, zoals de lake sturgeon. Deze methode voor otolietextractie kan helpen bij het beantwoorden van kernvragen over de leeftijd en groei van vissen, de positie van de gehoorsteentjes in relatie tot de hersenmorfologie en habitatgerelateerde microchemie. Het voordeel van deze techniek is dat bij vissen met dikke schedels en fragiele otolieten het openen van de hersenholte de otolieten niet beschadigt en andere kritieke structuren niet verstoort.Het idee voor deze methode werd ontwikkeld tijdens onderzoek naar de restauratie-ecologie van bedreigde steuren. In overgebleven populaties worden zelden exemplaren verkregen voor necropsie en laboratoriumanalyse. Het succesvol verzamelen van leeftijd en andere informatie van individuele dieren is daarom cruciaal om de datagaten van de soort op te vullen.Mark zal de procedure uitvoeren om de otolieten uit de steur te verwijderen. Om de otolieten te extraheren, leg je de steur eerst op zijn buik en gebruik je een meetlint om de totale lengte van de snuit tot de punt van de staart te bepalen, afgerond op de dichtstbijzijnde millimeter. Weeg vervolgens het dier op een genulled weegschaal afgerond op de dichtstbijzijnde gram en inspecteer het lichaam op externe labels of markeringen.Nadat deze gegevens zijn geregistreerd, gebruikt u een groot fileermes om een verticale incisie door het lichaam te maken tussen de basis van de schedel en het eerste rugschild om de kop te scheiden. Keer de kop na verwijdering om zodat de bek naar boven is gericht. Gebruik vervolgens het fileermes om langs de ventrale zijde van de schedel te snijden om het weke weefsel te verwijderen.Maak vervolgens met een elektrische gipszaag een incisie van de snuitpunt naar de basis van de schedel om de kop volledig doormidden te delen. Scheid de twee helften met de hand om de hersenholte bloot te leggen. Gebruik daarna een pincet om het hersenweefsel te verwijderen en weg te gooien, zodat de halfcirkelvormige kanalen in de hersenholte zichtbaar worden.Verwijder het kraakbeen van het halve cirkelvormige kanaal uit de hersenholte. Gebruik vervolgens de punt van de pincet om het kraakbeen van het halve cirkelvormige kanaal voorzichtig door te prikken. Nadat de harde botstructuur binnen het kraakbeen is geïdentificeerd, wordt de otoliet verwijderd en het oorbot gedurende vier seconden in 92% ethanol gedoopt om eventueel resterend kraakbeen te verwijderen.Droog tot slot de otoliet gedurende 24 uur in een open scintillatiebuisje van 25 milliliter. De volwassen grootte van steur varieert wereldwijd sterk, maar de locatie van de otolieten is consistent. Zoals aangetoond, verwijdert een scherp fileermes eenvoudig het zachte weefsel van de mond.Een elektrische gipzaag is echter het voorkeursinstrument voor de laterale incisie om de hersenholte bloot te leggen. Er moet nauwgezet worden gelet op de bisectie van de middellijn van de schedel. Anders kunnen de otolieten tijdens dit proces worden verbrijzeld.Pincetten vergemakkelijken de eenvoudige verwijdering van het hersenweefsel, waardoor toegang ontstaat tot het kraakbeen van het halvcirkelvormige kanaal waarin de otoliet zich bevindt aan de basis van de hersenholte. Het kraakbeen in het halvcirkelvormige kanaal kan vervolgens zonder veel moeite met een pincet van de otoliet worden verwijderd voor verdere analyse van het gehoorbeen. Zodra deze techniek onder de knie is, kan deze in minder dan vijf minuten worden voltooid indien deze correct wordt uitgevoerd.Tijdens het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om er rekening mee te houden dat de incisies zorgvuldig en op rustig tempo worden gemaakt. Houd er rekening mee dat het werken met dissectie-instrumenten en dode vissen gevaarlijk kan zijn en een sterke geur kan verspreiden. Daarom moeten er altijd voorzorgsmaatregelen worden genomen tijdens deze procedure, zoals het correct gebruik van de chirurgische instrumenten en het dragen van geschikte PBM.Na het bekijken van deze video zou u een goed begrip moeten hebben van hoe u de schedel van de steur aan de ventrale zijde opent en de otolieten verwijdert zonder de gehoorbeentjes te beschadigen. Na de ontwikkeling heeft deze techniek de weg vrijgemaakt voor onderzoekers in de visserijwetenschap om alternatieve manieren te verkennen om otolieten succesvol te verwijderen bij vissoorten waarbij standaardtechnieken moeilijk bleken.

alternative-method-of-removing-otoliths-from-sturgeon

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

Het doel van deze video aan te tonen procedures voor het verkrijgen van gezonde, intacte haarcellen van het binnenoor organen van volwassen zebravissen en gebruik voor patch clamp studies gericht op het karakteriseren van de biofysische eigenschappen van de voltage-gated kanalen.

Patch Clamp Opnamen in Binnen-oorhaar cellen geïsoleerd uit zebravis

Dit manuscript beschrijft een protocol om de herverdeling van branchiale ionocyten en hun innervatie te volgen met behulp van een tijdsdifferentiële kleuringstechniek gekoppeld aan volledige bilaterale kieuwdenervatie.

A Time Differential kleuringstechniek combinatie met Full Bilaterale Gill denervatie te Ionocytes Studie in Fish

Het meten van de effecten van milieuverontreinigende stoffen op vis gedrag is vaak subjectief en uitdagend in het bijzonder bij de behandeling van subletale eindpunten. We beschrijven methoden, waaronder video-technologie om te zwemmen gedrag van de vroege levensfase witte steur (Acipenser transmontanus) te kwantificeren tijdens en na 96 uur acute blootstelling aan verschillende concentraties van koper.

Het kwantificeren van vissen zwemmen gedrag in reactie op acute blootstelling van Waterige Copper Met behulp van Computer Assisted Video en Digital Image Analysis

Het branchiale skelet, inclusief kieuwbogen, keeltanden en branchiale botten, dient als de primaire plaats voor voedselverwerking bij de meeste vissen. Hier beschrijven we een protocol om dit interne skelet in drie-stekelige stekelbaarzen te dissecteren en plat te monteren. Deze methode is ook toepasbaar op een verscheidenheid aan andere vissoorten.

Dissection en Flat-montage van de driedoornige stekelbaars branchial Skeleton

(Rana catesbeiana) sacculus De Amerikaanse brulkikker's maakt rechtstreeks onderzoek van hair-cel fysiologie. Hier de dissectie en de voorbereiding van sacculus de brulkikker voor biofysische studies beschreven. We tonen representatieve experimenten uit deze haarcellen, inclusief de berekening van een bundel van kracht-verplaatsing relatie en meting van de ongedwongen beweging.

Fysiologische Bereiding van haarcellen van het sacculus van de Amerikaanse brulkikker (<em&gt; Rana catesbeiana</em&gt;)

De gezondheid van de wilde vissen kan worden gebruikt als een indicator van de gezondheid van aquatische ecosysteem. Documentatie van de zichtbare laesies of afwijkingen, gegevens die worden gebruikt voor de berekening van de voorwaarde-indicatoren, alsmede de mogelijkheid om het verzamelen van weefsels voor microscopische evaluatie, genuitdrukking en andere meer diepgaande necropsie gebaseerde vis medische keuringen te verstrekken analyses.

De beoordeling van de gezondheid van de necropsie gebaseerde wilde vis

Dit is een protocol voor het modelleren van de grootte spectrum (schaal relatie tussen individuele massa en bevolkingsdichtheid) voor gecombineerde vissen en ongewervelde gegevens van wadable streams en rivieren. De methoden omvatten: veld technieken voor het verzamelen van kwantitatieve vissen en ongewervelde monsters; labmethoden om de veldgegevens te standaardiseren; en statistische gegevensanalyse.

Modellering van het maat spectrum voor macro-invertebraten en vissen in stroom ecosystemen

In deze studie presenteren we een protocol voor cortisol extractie uit de Fin en kaakbeen van steursoorten. De cortisol spiegels van Fin en Jawbone werden verder onderzocht door twee wasoplosmiddelen te vergelijken, gevolgd door ELISA-assays. Deze studie bestuurde de haalbaarheid van Jawbone cortisol als een nieuwe stress-indicator.

Cortisol extractie van Sturgeon Fin en Jawbone matrices

Het doel van het protocol is om een geïndustrialiseerde visfermentatie techniek te bieden op basis van inoculatie van Saccharomyces cerevisiae.

Bereiding van kwalitatief hoogwaardig gefermenteerd visproduct

Extracellulaire multi-unit opname van de reukzenuw is een gevoelige, robuuste en reproduceerbare methode voor het beoordelen van reukgevoeligheid bij zeevissen. Het registreert primaire zintuiglijke input en is onafhankelijk van extern zoutgehalte.

Extracellulaire multi-unit opname van de olfactorische zenuw van Teleosts

Het artikel beschrijft een snel protocol om bloed van de kleine teleostvis te gonadectomiseren en te bemonsteren, met behulp van Japanse medaka (Oryzias latipes) als model, om de rol van geslachtssteroïden in de dierfysiologie te onderzoeken.

Gonadectomie en bloedafname procedures in het kleine formaat Teleost Model Japanse Medaka(Oryzias latipes)

Leer een effectieve methode voor het verwijderen van onbeschadigde otolieten uit steur, waaronder de bedreigde Meervalsteur. Deze techniek behoudt anatomische structuren en ondersteunt onderzoek naar visleeftijd, groei en habitatmicrochemie.

Alternatieve methode voor het verwijderen Otoliths van Sturgeon

Meer video's verkennen