Name: Novel Object Exploration als een potentiële test voor hogere orde repetitief gedrag in Muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Ontdek een gedragsassay voor het identificeren van hogere orde repetitief gedrag bij muizen zonder training. Deze methode valideert muismodellen voor autisme-gerelateerd onderzoek effectief.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs willen graag aan de Summer Undergraduate Research Program, de Academic Technology User Group, het Center for Digital Learning, en het Science Center van de Universiteit van Redlands te erkennen. De auteurs willen graag naar dit document te wijden aan de nagedachtenis van Lou Yango.

Het hier beschreven protocol werd goedgekeurd door de Institutional Animal Care en gebruik Comite aan de Universiteit van Redlands. De C58, C57, en FVB muizen gebruikt in deze studies werden gefokt aan de Universiteit van Redlands Vivarium uit voorraad oorspronkelijk verkregen van de Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Sentinels van deze Vivarium werden elke zes maanden onderzocht en bleek pathogeen vrij zijn. 1. Apparatuur en Room Set Up Let op: We gebruikten twee verschillende arena&#39;s voor nieuwe object testen: een doorzichtige plastic rechthoekige kooi (45 cm x 24 cm x 20 cm) of een ondoorzichtige ronde kooi met een basis diameter van 41 cm; echter kan elke kooi worden gebruikt. Pearson et al. Gebruikten een kleinere rechthoekige kooi (20 cm x 30 cm x 20 cm) in de assay. Details van deze specifieke experimentele opzet worden hieronder weergegeven, maar gezien de nieuwheid van deze test, is er geen aanvaarde normen op het gebied van gedrags- fenotypering voor een van de beschreven variabelen. <ol><li&gt; Vul het testen arena met ongeveer ½ in maïs-cob beddengoed. </li><li> Selecteer vier verschillende nieuwe objecten. Selecteer vier objecten die ongeveer even groot, vervaardigd van kunststof hoge dichtheid eenvoudige reiniging en weerstaan ​​kauwen en verschillend van elkaar in vorm en kleur. Belangrijk, het test- muizen worden niet blootgesteld aan deze objecten wordt uitgevoerd totdat in de test. Opmerking: Zo werden een roze speelgoed baksteen, een rode aap, een witte tegel met blauwe schrijven en een standaard witte dobbelsteen die hier gebruikt. </li><li> In de rechthoekige arena, plaatst deze objecten ongeveer 3 cm van de hoeken. In de ronde arena, plaats de voorwerpen zodanig dat zij op gelijke afstand van elkaar en ongeveer 10 cm vanaf de zijkanten. Noteer de plaatsing van elk object een ander nummer, 1-4 (figuur 1). Waarborgen dat de voorwerpen in willekeurige volgorde of vorkheftruck tijdens testen worden geplaatst. </li><li> Plaats een camera direct boven het testenarena om de hele arena opnemen tijdens de acclimatisatie en de testperiode. Opmerking: Het hebben onderzoekers in dezelfde kamer met de muizen kunnen potentieel beïnvloeden activiteit en exploratie tijdens het testen. </li></ol> 2. Novel Object Exploration Test <ol><li> Test bij het begin van de lichtcyclus in een kamer verlicht met fluorescerend licht bij ongeveer 100 lux. Zorg ervoor dat de verlichting is uniform over het testen arena aan het uiterlijk, terwijl video-opname te standaardiseren. </li><li> Plaats een notecard van bekende afmetingen in de bodem proeven arena en beginnen video-opname. </li><li> Breng de testmuis in een lege van testing gedurende 10 min om te dienen als een acclimatiseringsperiode. Video opname de acclimatisatie periode. </li><li> Na de acclimatisatie periode, laat u de muis in de arena, snel de vier nieuwe objecten toe te voegen aan de test arena en de muis gedrag op te nemen voor een extra 10 min. </li><li> Zodra de volledige 20 min acclimatisatie / testen peRIOD is verstreken, keren de test muis zijn kooi en grondig schoon en de nieuwe objecten en testen arena met ongeparfumeerde afwasmiddel en water te drogen. </li></ol> 3. Video Scoring <ol><li> Voltooi alle gedrag scoren met behulp van video om de betrouwbaarheid te vergemakkelijken. Opmerking: De gedrags- registratiesoftware Noldus De Observer werd gebruikt om de stappen 22 zoals hier beschreven, maar een gespecialiseerd programma niet nodig: <ol><li> Voorafgaand aan de eerste video scoren, het opzetten van het project codeerschema in de gedrags-logging software door het creëren van een nieuw project of door een bestaand, soortgelijk project te bewerken. <ol><li> Binnen de instelling Project, stelt data-acquisitie op &#39;Offline Observation.&#39; Binnen het Gedrag Coding box, programma &quot;Scrabble&quot;, &quot;Graven&quot;, &quot;Opfok&quot;, &quot;Grooming&quot; en &quot;Sniff Object 1, 2, 3 en 4&quot; als &#39;State Events&#39;. Program &quot;Springen&quot; als een &#39;Point Event&#39;. Opmerking: Definitievanwege deze gedragingen zijn elders in detail beschreven 11. Opmerking: Events State hebben een begin- en eindtijd, terwijl Point Events gewoon tellen gegevens te verzamelen. Toetsaanslagen voor elke afzonderlijke gedrag worden gegenereerd door de software en tegelijkertijd de bijbehorende toetsaanslagen worden geprogrammeerd in een tweede toetsenbord (stap 3.1.2). </li><li> Om de secundaire toetsenbord te programmeren, opent u het toetsenbord software, klikt u op de juiste secundaire knop toetsenbord op het scherm, typt u in de juiste toetsencombinatie en klik op OK. Zodra de secundaire toetsenbord is geprogrammeerd, sluit u de software als het programma wordt uitgevoerd in de achtergrond van de computer. </li></ol></li><li> Zodra het project is opgezet, gebruik maken van de gedrags-logging software om het aantal en de duur van opsteekt (gedefinieerd als beide voorpoten op een muur van de arena worden geplaatst) scoren, graaft (gedefinieerd als twee voorpoten van de muis gravende in het beddengoed van de arena), self-bruidegoms (gedefinieerd als de mOuse likken elk gebied van het lichaam en / of de muis aanraken een deel van het gezicht met hun voorpoten) en springt (gedefinieerd als muis kweek en springen zodat alle vier voeten van de grond tegelijkertijd). <ol><li> Om een ​​video te scoren, gaat u naar Bestand&gt; Project openen en vervolgens in acht nemen&gt; Observatie&gt; Nieuw. Het programma vraagt ​​om een ​​bestandsnaam. Zodra de naam, selecteert u de juiste video-mediabestand. </li><li> Begin met het scoren door te klikken op de knop Begin Observation. Opmerking: Bij het maken van muis repetitief gedrag alle nationale gebeurtenissen is twee toetsaanslagen, de eerste overeenkomt met de opening van het gedrag en de tweede overeenkomt met het eindpunt van het gedrag. Point Events één toetsaanslag vereisen slechts. </li></ol></li><li> Score het aantal keren dat de muis rook elk object. Sniffs worden gedefinieerd als elke keer dat een muis binnen 0,5 cm van een object beweegt zijn neus. Meet duur snuifje met behulp van gedragsmatige logging software op dezelfde manier dat RePETtieve gedrag looptijden werden gemeten (stap 3.1.2). <ol><li> Telkens als een muis snuift een object, registreren de overeenkomstige positienummer, wat zal leiden tot een reeks getallen aan het eind van de 10 minuten testperiode (bijvoorbeeld 1.243.421 ...). Handmatig deze gegevens. Opmerking: Om de efficiëntie en consistentie te vergemakkelijken, terwijl het maken van video&#39;s, de nummers altijd overeen met een bepaalde positie, geen bezwaar. </li><li> Als een muis een object snuift, kijkt weg, dan snuift het object weer, tel dat nummer tweemaal. </li><li> Zodra de volledige 10 minuten video is gescoord, visualiseren van de gegevens door te klikken op Analyseren&gt; Behavior Analysis&gt; Nieuw. Zodra de gegevens op het scherm verschijnen, uitvoer of kopiëren en plakken in een aparte spreadsheet. </li></ol></li><li> Noteer de totale afstand die de muis gereisd binnen de arena tijdens het testen. Opmerking: de video tracking software, gekalibreerd op de testmuis volgen en de totale afgelegde afstand in centimeters opnemen werd gebruiktDeze stap is. Alle video gescoord door de video tracking software had notecard van bekende afmetingen geplaatst in de arena aan het begin van de video. <ol><li> Gebruik de notecard om elke video in de software te kalibreren door het instellen van een kalibratie lijn langs beide zijden van de notecard en het invoeren van de juiste lengte in calibratie scherm van de software. Zodra de lijnen getrokken, voert de bekende lengte en breedte van de notecard die overeenkomen met elke lijn. </li><li> Binnen Arena instellingen selecteert u de hele arena. Opmerking: Aparte gebieden van de arena kan in de software worden onderscheiden als, bijvoorbeeld, muis beweging langs de wanden vs. door het centrum was van belang. </li><li> Binnen Trial Controle-instellingen, selecteer een tien minuten duren. In Detection Settings, kies dan een donker voorwerp op een lichte achtergrond. Opmerking: Dit zou moeten worden gewijzigd als albino muizen werden gebruikt of wanneer de achtergrond een donkere kleur. </li><li> Zodra de instellingenzijn geprogrammeerd, de score van de video&#39;s. Klik Acquisitie&gt; Open Acquisition. In het vak Acquisition Control, klik op Nieuw Trial en start Trial. Na tien minuten zijn verstreken, stopt het programma en de data kan worden gevisualiseerd. </li><li> Klik op Analyseren&gt; Bereken Statistics. Zodra de gegevens op het scherm verschijnen, uitvoer of kopiëren en plakken in een aparte spreadsheet. </li></ol></li></ol></li></ol> 4. Statistische analyses, Sequencing <ol><li> Binnen de reeks cijfers overeenkomen met onderzoeken die door elke muis object, bepalen het totale aantal mogelijke combinaties 3 cijfers zonder aantallen herhalingen (bijvoorbeeld 121, 123, 124 maar 112 of 122). Opmerking: een programma geschreven in Python programmeertaal werd gebruikt om het aantal keren dat elke mogelijke volgorde geplaatst in reeks cijfers identificeren. Het is niet noodzakelijk om een externe programma en deze stap kon worden voltooid op verschillende manieren (bijvoorbeeld metZoek een functie in Microsoft Word of Excel). </li><li> Noteer het aantal keren dat elke sequentie voorkomt en identificeren de drie meest herhaalde sequenties voor elke muis. Opmerking: Individuele sequenties verschilt door de muis en de feitelijke sequentie van minder belang dan het aantal keren dat een sequentie herhaald (dat wil zeggen het volgen van een patroon is belangrijker dan het patroon zelf). </li><li> Omdat het totale aantal sequenties muis herhalingen positief correleren activiteitsniveau corrigeren deze waarden de hoeveelheid meest voorkomende patronen te delen door het totale aantal patronen voor elke individuele muis. Dit zal een volgordeherhaling index die onafhankelijk is van de totale activiteit opleveren. </li><li> Vergelijk het aantal keren dat elke muis herhaalt de meest voorkomende sequenties (gecorrigeerd voor activiteitsniveau) tussen groepen met een geschikte ANOVA, meervoudige vergelijking procedure (Dunnett, voor bijvoorbeeld) en post-hoc test. </li></ol><ol><li> Met dezelfde reeks cijfers hierboven (stap 3.1.3.1) gegenereerd, bepalen de nieuw onderwijs preferentie van elke muis door het tellen van het aantal keren elk object onderzocht, of met andere woorden, het tellen van het totaal aantal 1 sec, 2 sec , 3 sec en 4 sec in de reeks gegevens. Correct voor activiteitenniveau en vergelijken via ANOVA zoals hierboven beschreven (stappen 4,3-4,4). Opmerking: Deze methoden gepubliceerd door ons laboratorium 22 en hier beschreven zijn sterk gebaseerd op Pearson et al 17. </li></ol>

<ol><li>American Psychological Association. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Diagnostic+and+Statistical+Manual+of+Mental+Disorders%22">Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders</a>. , 5th edn, American Psychological Association. Washington, D.C. (2013).</li>
<li>Baio, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Autism+Spectrum+Disorder+Among+Children+Aged+8+Years+-+Autism+and+Developmental+Disabilities+Monitoring+Network%2C+11+Sites%2C+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Morb.+Mortal.+Wkly.+Rep%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Autism Spectrum Disorder Among Children Aged 8 Years - Autism and Developmental Disabilities Monitoring Network, 11 Sites, United States.</a> Morb. Mortal. Wkly. Rep. 63 (SS02), 1-21 (2010).</li>
<li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+approach+and+repetitive+behavior+in+eleven+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Social approach and repetitive behavior in eleven inbred mouse strains.</a> Behav. Brain Res. 191 (1), 118-129 (2008).</li>
<li>Bodfish, J. W., Symons, F. J., Parker, D. E., Lewis, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Varieties+of+repetitive+behavior+in+autism%3A+comparisons+to+mental+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Autism+Dev.+Disord%22%5BJournal%5D)">Varieties of repetitive behavior in autism: comparisons to mental retardation.</a> J. Autism Dev. Disord. 30 (3), 237-243 (2000).</li>
<li>Lewis, M. H., Kim, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+restricted+repetitive+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurodev.+Disord%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of restricted repetitive behavior.</a> J. Neurodev. Disord. 1 (2), 114-132 (2009).</li>
<li>Lewis, M. H., Bodfish, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+behavior+disorders+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Ment.+Retard.+Dev.+Disabil.+Res.+Rev%22%5BJournal%5D)">Repetitive behavior disorders in autism.</a> Ment. Retard. Dev. Disabil. Res. Rev. 4, 80-89 (1998).</li>
<li>Lam, K. S. L., Bodfish, J. W., Piven, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+three+subtypes+of+repetitive+behavior+in+autism+that+differ+in+familiarity+and+association+with+other+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Child+Psychol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Evidence for three subtypes of repetitive behavior in autism that differ in familiarity and association with other symptoms.</a> J. Child Psychol. Psychiatry. 49 (11), 1193-1200 (2008).</li>
<li>Bishop, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcategories+of+Restricted+and+Repetitive+Behaviors+in+Children+with+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Autism+Dev.+Disord%22%5BJournal%5D)">Subcategories of Restricted and Repetitive Behaviors in Children with Autism Spectrum Disorders.</a> J. Autism Dev. Disord. 43 (6), 1287-1297 (2013).</li>
<li>Lewis, M. H., Tanimura, Y., Lee, L. W., Bodfish, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+restricted+repetitive+behavior+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models of restricted repetitive behavior in autism.</a> Behav. Brain Res. 176 (1), 66-74 (2007).</li>
<li>Korff, S., Stein, D. J., Harvey, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotypic+behaviour+in+the+deer+mouse%3A+Pharmacological+validation+and+relevance+for+obsessive+compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neuropsychopharmacol.+Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Stereotypic behaviour in the deer mouse: Pharmacological validation and relevance for obsessive compulsive disorder.</a> Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 32 (2), 348-355 (2008).</li>
<li>Ryan, B. C., Young, N. B., Crawley, J. N., Bodfish, J. W., Moy, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+deficits%2C+stereotypy+and+early+emergence+of+repetitive+behavior+in+the+C58%2FJ+inbred+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Social deficits, stereotypy and early emergence of repetitive behavior in the C58/J inbred mouse strain.</a> Behav. Brain Res. 206 (1), 178-188 (2010).</li>
<li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+behavioral+tasks+relevant+to+autism%3A+phenotypes+of+10+inbred+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse behavioral tasks relevant to autism: phenotypes of 10 inbred strains.</a> Behav. Brain Res. 176, 4-20 (2007).</li>
<li>Moy, S. S., Nadler, J. J., Poe, M. D., Nonneman, R. J., Young, N. B., Koller, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+mouse+test+for+repetitive%2C+restricted+behaviors%3A+relevance+to+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Development of a mouse test for repetitive, restricted behaviors: relevance to autism.</a> Behav. Brain Res. 188 (1), 178-194 (2008).</li>
<li>Moy, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+behavior+profile+and+supersensitivity+to+amphetamine+in+the+C58%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Repetitive behavior profile and supersensitivity to amphetamine in the C58/J mouse model of autism.</a> Behav. Brain Res. 259, 200-214 (2014).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> PLoS ONE. 3 (8), e3067(2008).</li>
<li>Muehlmann, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+characterization+of+repetitive+behavior+in+C58+mice%3A+developmental+trajectory+and+effects+of+environmental+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Further characterization of repetitive behavior in C58 mice: developmental trajectory and effects of environmental enrichment.</a> Behav. Brain Res. 235, 143-149 (2012).</li>
<li>Pearson, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+and+cognitive+stereotypies+in+the+BTBR+T%2Btf%2FJ+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Motor and cognitive stereotypies in the BTBR T+tf/J mouse model of autism.</a> Genes Brain Behav. 10 (2), 228-235 (2011).</li>
<li>Belzung, C. Measuring exploratory behavior. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBelzung%2C+C+%22Handbook+of+molecular+genetic+techniques+for+brain+and+behavior+research+%28techniques+in+the+behavioral+and+neural+sciences%29%22">Handbook of molecular genetic techniques for brain and behavior research (techniques in the behavioral and neural sciences)</a>. Crusio, W. E., Gerlai, R. T. , Elsevier. Amsterdam. 739-749 (1999).</li>
<li>Kalueff, A. V., Keisala, T., Minasyan, A., Kuuslahti, M., Tuohimaa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+stability+of+novelty+exploration+in+mice+exposed+to+different+open+field+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Process%22%5BJournal%5D)">Temporal stability of novelty exploration in mice exposed to different open field tests.</a> Behav. Process. 72, 104-112 (2006).</li>
<li>Prut, L., Belzung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+as+a+paradigm+to+measure+the+effects+of+drugs+on+anxiety-like+behaviors%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review.</a> Eur. J. Pharmacol. 46, 3-33 (2003).</li>
<li>Walsh, R. N., Cumins, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open-field+test%3A+a+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol.+Bull%22%5BJournal%5D)">The open-field test: a critical review.</a> Psychol. Bull. 83 (3), 482-504 (1976).</li>
<li>Blick, M. G., Puchalski, B. H., Bolanos, V. J., Wolfe, K. M., Green, M. C., Ryan, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+object+exploration+in+the+C58%2FJ+mouse+model+of+autistic-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Novel object exploration in the C58/J mouse model of autistic-like behavior.</a> Behav. Brain Res. 282, 54-60 (2015).</li>
<li>Crawley, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotypes+of+inbred+mouse+strains%3A+implications+and+recommendations+for+molecular+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotypes of inbred mouse strains: implications and recommendations for molecular studies.</a> Psychopharmacol. 132, 107-124 (1997).</li>
<li>Logue, S. F., Owen, E. H., Rasmussen, D. L., Wehner, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+locomotor+activity%2C+acoustic+and+tactile+startle+and+prepulse+inhibition+of+startle+in+inbred+mouse+strains+and+F1+hybrids%3A+implications+of+genetic+background+for+single+gene+and+quantitative+trait+loci+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci%22%5BJournal%5D)">Assessment of locomotor activity, acoustic and tactile startle and prepulse inhibition of startle in inbred mouse strains and F1 hybrids: implications of genetic background for single gene and quantitative trait loci analyses.</a> Neurosci. 80 (4), 1075-1086 (1997).</li>
<li>Lamprea, M. R., Cardenas, F. P., Setem, J., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thigmotactic+responses+in+an+open-field%5BTitle%5D)+AND+%22Braz.+J.+Med.+Biol.+Res%22%5BJournal%5D)">Thigmotactic responses in an open-field.</a> Braz. J. Med. Biol. Res. 41, 135-140 (2008).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Hier presenteren we een recentelijk ontwikkelde test die bruikbaar zijn voor het kwantificeren muis gedrag met gezicht geldigheid hogere orde repetitief gedrag bij mensen kan zijn. In tegenstelling tot de meer gevestigde assays, zoals de Barnes of T-labyrint, is deze roman verkenning object assay vereist geen muis training noch is het bijzonder angst provoceren. Bovendien wordt nieuw object verkenning geen eten of sociale stimuli nodig, waardoor meer focus op het gedrag van belang, RRBs, en het verminderen van de kans o...

Autisme spectrum stoornis (ASS) is een neurologische aandoening die bestaat uit drie kernactiviteiten symptomen: sociale stoornis, moeite om te communiceren door middel van taal, en repetitief patroon gedragingen 1. Sinds 2000 is het aantal mensen die zijn gediagnosticeerd met ASS gestegen van 1 in 150 tot 1 op 68 in de tijdsspanne van tien jaar 2. Hoewel de prevalentie van de ziekte blijft toenemen, is de oorzaak van de aandoening nog niet bekend. Er is een stijging naar passende muismodellen voor de kern en geassocieerde symptomen van ASS identificeren, aangezien deze modellen kunnen leiden tot een beter begrip van de onderliggende symptomen en oorzaken van ASS. Er zijn meerdere inteelt muizenstammen die lijken te zijn gedrag met face validity geven voor de kern symptomen van ASD, met inbegrip van repetitief gedrag 3. Beperkt, repetitief gedrag (RRBs) zijn een kern symptoom van sommige psychiatrische stoornissen zoals ASD.RRBs kan toenemen met de ernst van de aandoening 4 en drastisch verstoren de levensstijl van getroffen individuen. RRBs worden vaak geplaatst in twee categorieën, lagere orde repetitief gedrag, die bij de mens bestaan ​​uit acties zoals schommelen en hand-klapperen; en hogere orde repetitieve gedragingen, die bestaan ​​uit een strikte naleving van routine en weerstand tegen verandering 5-8. Lagere orde repetitief gedrag zijn uitgebreid bestudeerd in knaagdieren, waar ze zich manifesteren als motorbrandstof stereotypieën, die gemakkelijk kan worden waargenomen in een laboratoriumomgeving 9. Deze gedragingen blijken goede face validity voor RRBs bij de mens, en potentieel sterke construct validiteit en 10 hebben. Het testen op de aanwezigheid van lagere orde RRBs kan worden ingevuld door middel van video bewaking van de muis activiteit aan de aanvallen en de duur van deze motor stereotiep 11 bestuderen. Hogere orde repetitief gedrag vormen een uitdaging voor fundamenteel biomedisch reZoek met behulp van knaagdieren, omdat deze RRBs zijn niet zo gemakkelijk te herkennen door middel van eenvoudige observatie. Vanwege de moeilijkheid bij deze gedragingen, minder gevestigde assays voor hogere orde repetitief gedrag bestaat. Traditioneel zijn hogere-orde RRBs gemeten in knaagdieren met behulp van een doolhof paradigma waarbij het proefdier is getraind om competentie te bereiken in het ontsnappen. De ontsnapping locatie wordt vervolgens ingeschakeld en het aantal pogingen nodig is om opnieuw te leren de ontsnapping locatie wordt opgenomen 12. Deze testen zijn niet ideaal omdat ze een lange trainingsperiode vereist vaak angst veroorzaken en kan resulteren in sterk wisselende resultaten. Hole-board exploratie is ook gebruikt om hogere orde kwantificeren RRBs 13,14. Deze benadering heeft geen uitgebreide trainingen nodig, maar wel een beroep doen op voedsel motivatie en / of olfactorische discriminatie. Assays voor hogere orde RRBs die niet anxiogeen of eisen training zou een mooie aanvulling op het bestaande repertoire van hole-board exploratio zijn<html> en n-doolhof gebaseerde bepalingen die momenteel in gebruik. De C58 / J (C58) inteelt muizenstam voorbeeld sterk hoge niveaus van stereotiep gedrag in verband met ASS, namelijk repetitieve, doelloze motorische stereotypieën en verhoogde niveaus van zelf-verzorging 3,11. Daarnaast is de C58 muizen weer te geven RRBs door middel van een hoog niveau van het grootbrengen, back flipping en scrabbling 11,14,16. Deze stam begint geeft dit gedrag vroeg in de neonatale periode en blijft deze weergeven op volwassen leeftijd. Ideaal zou kunnen testen op de aanwezigheid van verhoogde hogere orde RRBs de goed gedocumenteerde lagere orde RRBs aanwezig in deze stam en andere muizenstammen vullen zijn. De roman exploratie object test hier beschreven biedt de mogelijkheid voor onderzoekers om lagere orde en hogere-orde RRBs observeren tegelijkertijd, want het geeft de mogelijkheid om een ​​patroon gedrag evenals herhalende motorische stereotypieën meten. e_content &quot;&gt; makend van nieuwe object exploratie als een test voor hogere orde repetitief gedrag werd ontwikkeld door Pearson et al. 17. Deze nieuwe evaluatie is een uitbreiding van de gevestigde geopend veldtest 18-21 met de toevoeging van vier nieuwe objecten de arena. muizen werden vrijelijk onderzoek deze onbekende objecten en het aantal en de volgorde van object onderzoeken werd gevolgd. het object onderzoeken werden vervolgens geanalyseerd op de aanwezigheid van patronen met BTBR-muizen tonen verhoogde aantallen gevormde onderzoeken tussen de objecten. met deze assay, kunnen muizen hogere-orde repetitief en gedessineerde gedrag weer te geven terwijl het elimineren van de noodzaak om gedrag te leren, evenals het verwijderen van onnodige stimuli. Novel object exploratie induceert hogere orde RRBs, moet het mogelijk worden de muizen om patronen en vormen sequenties te creëren door middel van hun natuurlijke exploratie . met deze test kan de onderzoeker de aanwezigheid van deze hogere orde RRBs kwantificeren. Pearson et al. ontwikkelde deze test en gebruikt om te testen op de aanwezigheid van potentiële hogere orde repetitief gedrag in de BTBR inteelt muizenstam, intrigerende resultaten 17. We hebben onlangs een follow-up studie naar het gedrag van de C58, C57BL / 6J (C57) en FVB / NJ (FVB) stammen, alsmede een nader onderzoek naar mogelijke verstorende variabelen aanwezig in deze assay en eventuele statistische benaderingen voor het analyseren van de gegevens die 22.

<table><tbody><tr><td>Standard Polycarbonaat Knaagdierkooi (45 cm x 24 cm x 20 cm)</td><td></td><td></td><td>Meerdere kooien zijn wenselijk om het testen van meerdere muizen mogelijk te maken&nbsp;</td></tr><tr><td>Kunststof Opake Circulaire Testarena (41 cm basisdiameter)</td><td>United States Plastic Corp.</td><td>13931</td><td>Meerdere arena's zijn wenselijk om het testen van meerdere muizen mogelijk te maken&nbsp;</td></tr><tr><td>Standaard Maïskolk Knaagdierbedsprei</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nieuw Object - rode aap</td><td>Hasbro, Pawtucket RI</td><td></td><td>uit Barrel of Monkeys</td></tr><tr><td>Nieuw Object - rechthoekige 2 x 4 LEGO</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nieuw Object - tegel</td><td>Thinkfun Inc., Alexandria VA</td><td></td><td>uit Toot and Otto</td></tr><tr><td>Nieuw Object - standaard wit dobbelsteen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Videocamera</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gedragslogboeksoftware - The Observer</td><td>Noldus, Wageningen, Nederland</td><td>andere programma's kunnen worden gebruikt</td><td></td></tr><tr><td>Video Tracking Software - EthoVision</td><td>Noldus, Wageningen, Nederland</td><td>andere programma's kunnen worden gebruikt</td><td></td></tr><tr><td>X-Keys invoertoetsenbord</td><td>P.I. Engineering, Williamstown MI</td><td>829484</td><td></td></tr><tr><td>MacroWorks II</td><td>P.I. Engineering, Williamstown MI</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

novel object exploration als een potentiële test voor hogere orde repetitief gedrag in muizen

Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

Beperkende, repetitief gedrag (RRB's) zijn een kernkenmerk van autismespectrumstoornis (ASS) en verstoren het leven van getroffen individuen. RRB's worden gewoonlijk opgesplitst in lagere-orde en hogere-orde componenten, waarbij lagere-orde RRB's bestaan uit motorische stereotiepen en hogere-orde RRB's bestaan uit perseveratieve en sequentiële gedragingen. Hogere-orde RRB's zijn uitdagend om te modelleren bij muizen. Huidige testen voor RRB's bij muizen richten zich voornamelijk op de lagere-orde componenten, waardoor fundamenteel biomedisch onderzoek naar mogelijke behandelingen of interventies voor hogere-orde RRB's moeilijk wordt. Hier beschrijven we een nieuwe test, onderzoek van nieuwe objecten. Deze test gebruikt een eenvoudige open-veld arena met vier nieuwe objecten rond de omtrek geplaatst. De proefmuis mag vrij het arena verkennen en de volgorde waarin de muis de nieuwe objecten onderzoekt wordt geregistreerd. Uit deze gegevens kunnen gepatterreerde sequenties van verkenning worden geïdentificeerd, evenals het meest voorkeursobject voor elke muis. De representatieve gegevens die hier gedeeld worden en eerdere resultaten met behulp van de test voor onderzoek van nieuwe objecten illustreren dat ingefokt muizenrassen verschillend gedrag vertonen in deze test en dat rassen met verhoogde lagere-orde RRB's ook verhoogd gepatteerd gedrag vertonen. Als zodanig lijkt de test voor onderzoek van nieuwe objecten goede face validiteit te bezitten voor hogere-orde RRB's bij mensen en kan een waardevolle test zijn voor toekomstige studies die nieuwe therapieën voor ASS onderzoeken.

De representatieve gegevens blijkt dat 22 vrouwelijke C58 / J muizen vertoonden een groter aantal van opeenvolgende patronen dan de andere stammen in de rondte arena (Figuur 2, paneel A), maar niet in de rechthoekige arena (Figuur 2, paneel C). Geen van de drie mannelijke stammen verschillen van elkaar (Figuur 2, panelen B en D). De representatieve gegevens tonen aan dat zowel mannelijke als vrouwelijke C58 / J-muizen vertonen...

Gecompliceerdere, beperkte, repetitieve gedragingen (RRB's) verstoren het leven van getroffen individuen. Dit gedrag is moeilijk te modelleren bij knaagdieren, waardoor fundamenteel biomedisch onderzoek naar mogelijke behandelingen of interventies voor RRB's moeilijk wordt. Hier beschrijven we de exploratie van nieuwe objecten als een potentiële test voor complexere RRB's bij muizen.

Novel Object Exploration als een potentiële test voor hogere orde repetitief gedrag in Muizen

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

Het algemene doel van deze gedragsanalyse is het identificeren van de aanwezigheid van repetitief gedrag van hogere orde bij muizen. Deze analyse kan helpen bij het valideren van potentiële muismodellen en autisme-achtig gedrag, zoals bij de inteeltstam C 58 J. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat er geen training van de muizen vereist is en dat het niet bijzonder angstaanjagend is.Begin met het vullen van de testarena. Gebruik een rechthoekige kooi van transparant plastic met een laag maïskolfbedding van een halve inch. Selecteer vier nieuwe objecten die verschillen in vorm en kleur.Bijvoorbeeld een roze speelgoedblokje, een rode aap, een witte tegel met blauwe belettering en een standaard witte dobbelsteen. Zorg ervoor dat deze objecten ongeveer dezelfde grootte hebben en zijn vervaardigd uit plastic met een hoge dichtheid om de reiniging te vergemakkelijken en kauwen te weerstaan. Plaats deze objecten in de rechthoekige arena op drie centimeter van de hoeken in een willekeurige en tegengebalanceerde volgorde gedurende de testperiode.Noteer de plaatsing van elk object als een afzonderlijk nummer van één tot vier. Positioneer tenslotte een camera direct boven de t

novel-object-exploration-as-potential-assay-for-higher-order

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Ziekte, hoofdletsel, genetische modificaties en de behandeling van muizen met medicijnen kunnen diepgaande effecten hebben op het gedrag. Door gebruik te maken van goed gekarakteriseerde en gevalideerde benaderingen zoals het begraven van marmer en het versnipperen van nestjes, kunnen dwangmatig gedrag nauwkeurig worden gedocumenteerd bij muizen als modellen van menselijke obsessieve-compulsieve stoornis en autismespectrumstoornis.

Marmer begraven en Nestlet verscheuren als Tests van Repetitive, dwangmatig-achtig gedrag in Muizen

Hier beschreven is een gestage, gedrags screening aanpak die kan worden gebruikt om te screenen voor verbindingen die in vivo werkzaamheid vertonen op cognitief en functioneel motorisch gedrag bij transgene muismodellen van β-amyloïdose en tauopathie. Deze methoden zijn geoptimaliseerd om verbindingen te screenen voor activiteit in kort- en werkgeheugen taken.

Evaluatie van spontane alternatie, herkenning van nieuwe objecten en limb clasping in transgene muismodellen van Amyloid-B en Tau Neuropathology

De herkenningstest object (ORT) is een eenvoudige en efficiënte test voor de evaluatie van leren en geheugen in muizen. De methodologie wordt hieronder beschreven.

De herkenningstest roman-Object voor het onderzoek naar leren en geheugen in muizen

Dit protocol beschrijft een gedrags assay, op basis van de test van de doolhof Barnes, om te bestuderen hoe instinctieve defensieve acties worden gewijzigd door de kennis van de ruimtelijke omgeving.

Een gedrags Assay voor het onderzoeken van de rol van ruimtelijk geheugen tijdens instinctieve verdediging in muizen

Dit protocol meet ruimtelijke leren en geheugen met behulp van de Barnes doolhof. Een roman jonkvrouw-in-nood-paradigma wordt gebruikt ter beoordeling van motorische activiteit en prosociaal gedrag in muizen.

Analyseren van ruimtelijke leren en prosociaal gedrag in muizen met behulp van de Barnes doolhof en Damsel-in-nood paradigma 's

Hier bieden we een protocol waarin uitgebreide instructies voor de economische vaststelling van lymfkliertest object locatie en roman object erkenning gedrags testen, met inbegrip van het ontwerp, de kosten en de bouw van de benodigde duikuitrusting, evenals uitvoering van het testen van de gedragsmatige, gegevensverzameling en analyse.

Roman Objectherkenning en Object locatie gedrags testen in muizen op een begroting

Een uitgebreide gedrags testbatterij van motorische vaardigheden, stemming — met inbegrip van sociale interactie, depressie en angst — en cognitie is ontworpen voor de herhaalde beoordeling van neurodegeneratie-gerelateerde gedragsveranderingen bij muizen.

Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen

De rol van recent ontdekte ziekte-geassocieerde genen in de pathogenese van neuropsychiatrische aandoeningen blijft onduidelijk. Een gemodificeerde bilaterale in utero elektroporatie techniek maakt de genoverdracht in grote populaties neuronen en onderzoek van de veroorzakers van genexpressie veranderingen op sociaal gedrag mogelijk.

Een pijpleiding die bilaterale in Utero-elektroporatie gebruikt om genetische invloeden op knaagdiergedrag te ondervragen

Knaagdiermodellen zijn waardevolle hulpmiddelen voor het bestuderen van kerngedrag dat verband houdt met autismespectrumstoornis (ASS). In dit artikel gaan we dieper in op twee gedragstests voor het modelleren van de kernkenmerken van ASS bij muizen: zelfverzorging, die repetitief gedrag beoordeelt, en de driekamertest voor sociale interactie, die sociale beperkingen documenteert.

Strategieën voor het beoordelen van autistisch-achtig gedrag bij muizen

De huidige studie beschrijft een test voor fijn motorisch gedrag voor het onderzoeken van motorische stoornissen in knaagdiermodellen, waaronder de TgF344-AD-rat, met behulp van machine learning.

Een fijne motorische taak om gewrichtskinematica te bestuderen in een preklinisch model van neurodegeneratieve ziekten

Ontdek een gedragsassay voor het identificeren van hogere orde repetitief gedrag bij muizen zonder training. Deze methode valideert muismodellen voor autisme-gerelateerd onderzoek effectief.

Novel Object Exploration als een potentiële test voor hogere orde repetitief gedrag in Muizen

Meer video's verkennen