Name: Bevestiging van de Myocardiale ischemie en reperfusie schade in Muizen met behulp van Surface Pad elektrocardiografie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Leer hoe u myocardiale ischemie en reperfusie bevestigt bij muizen met behulp van oppervlakte-ECG-elektroden. Deze techniek verbetert de consistentie en reproduceerbaarheid van chirurgische ingrepen door real-time monitoring.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door Merit Review-awards (BX002332 en BX000640) van de Biomedical Laboratory Research and Development Service van de Veterans Affairs Office of Research and Development, National Institutes of Health (R15HL129140), en fondsen van de Institutional Research and Improvement-rekening. Het project wordt gedeeltelijk ondersteund door de National Institutes of Health-subsidie C06RR0306551.

Alle chirurgische ingrepen uitgevoerd op dieren dienen in overeenstemming met Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren 13 of andere passende ethische richtlijnen worden uitgevoerd. Protocollen dient te worden goedgekeurd door het dierenwelzijn commissie op de juiste instelling voordat u verder gaat. 1. Voorbereiding van de ECG LET OP: Voordat u begint, don persoonlijke beschermingsmiddelen zoals handschoenen, brillen en een schone labjas of wegwerp jurk. <ol><li> Reinig het ECG pad met een niet-alcohol en niet-bleekmiddel decontaminatie oplossing. Voorzichtig gebruik maken van een delicate taak veeg overtollige oplossing uit te wissen om ervoor te zorgen dat de elektrode pad niet beschadigd wordt. </li><li> Als de ECG-pad heeft een verwarming functie, gebruik het. Verdoofde muizen hebben de neiging om lichaamswarmte snel verliezen. Verwarm de pad 40-42 ° C om normotherme lichaamstemperatuur van 37 ° C te handhaven gedurende de operatie 14. Monitor lichaam temperARD met behulp van een rectale thermometer. Pas pad temperatuur nodig om de lichaamstemperatuur ~ 37 ° C te houden. </li><li> Zoals de meeste thoracotomie worden uitgevoerd met de muis liggend op zijn rug (rugligging), ervoor zorgen dat de schakelaar is gespiegeld aan de &quot;liggende&quot; setting. Veel ECG-pads hebben een functie om te schakelen tussen de buikligging en rugligging. Als u de juiste richting te kiezen kan leiden tot een verkeerde voorstelling van elektrocardiografische evenementen. </li><li> Verdoven muis met behulp van 5% isofluraan geïnhaleerd en 1 l / min zuurstof. Zodra de muis wordt verdoofd, overdracht muis om ECG pad uitgerust met een verdoving neuskegel en vermindering van isofluraan tot 2% en 1 l / min zuurstof. Bevestig de juiste verdoving door te zorgen voor de muis niet reageert wanneer de voet van de muis wordt geknepen met een pincet. </li><li> Breng een dun laagje van het oog van de smering zalf over de ogen van de muis tot droog en het hoornvlies schade te voorkomen tijdens het verdoofd. </li><li> Reinig de poten van de muis met een vochtig doekje om alle zichtbare beddengoed verwijderendie kunnen vast aan de poten of kan interfereren met de transmissie van elektrische impulsen van de poten aan de ECG pad. Droog poten met een doekje. </li><li> Een kleine hoeveelheid (iets kleiner dan USD dime) zeer geleidend elektrolyt gel aan elk van de vier metalen elektroden op het ECG pad. Opmerking: Zorg ervoor dat u slechts een kleine hoeveelheid van de gel zoals teveel gel maakt het moeilijk om de poten te beperken om de pad met tape. Bovendien, poten waarschijnlijk out van het beveiligingssysteem te glijden tijdens de operatie als ze nat worden voor het aanbrengen van tape waren. </li><li> Met de muis in rugligging Gebruik duidelijke medische tape aan elke poot beperken tot de overeenkomstige elektrode (figuur 1). Druk eerst op elke poot aan haar stuk tape en dan houden de tape om de ECG pad. Zorgen dat elke poot ingehouden is in contact met het elektrolyt gel en de elektrode. </li></ol> 2. verwerven van de ECG <ol><li> Afhankelijk van de gebruikte voor ECG-acquisitie, conf apparatuurIGUUR de machine, zodat de ECG-curve kunnen worden gevisualiseerd in real time. Voor ECG-opnamen met behulp van de fysiologische controle-instellingen op een echocardiografie machine, zal het een live-B-modus de ECG-curve langs de onderkant van het scherm te hebben. Opmerking: Zie ook de individuele machine gebruikershandleidingen om te bepalen wat de beste manier om die apparatuur te configureren. </li><li> Enable real time visualisatie van de ECG-curve door op de B-mode-toets op een echocardiografie machine of het equivalent van andere ECG-opname-apparaten. <ol><li> Pas de resolutie om rekening te houden met verschillen in de amplitude. Als de piek van de R-golf of de trog (dal) van de Q-golf buiten het visuele frame, de resolutie aan totdat de gehele hoogte van de golfvorm waar te nemen. Opmerking: Dit kan onder het tabblad fysiologische instellingen worden gedaan op een echocardiografie machine. Klik op de stijging of pijlen te verlagen totdat de gehele golfvorm zichtbaar is. </li></ol></li><li> Elke keer dat een beeld OBT te zijnained, schakelt u het ECG pad van gereedschap. Aanraken van de muis tijdens ECG-registratie met een tang of vingers de golfvorm verstoren. Zorg ervoor dat de muis is nog steeds onaangetast en op het ECG pad voor de opname elke ECG&#39;s. </li><li> Gebruik van de machine &quot;record&quot; of &quot;store&quot; functie voor het maken van een chirurgische incisies op de muis. Deze afbeelding wordt gebruikt als een basislijn ter vergelijking later. </li></ol> 3. Chirurgische Procedure en opnemen ECG <ol><li> Injecteren verdoofde muis met pijnstillende (buprenorfine, 1,5 ug, intraperitoneaal) voordat u begint. De data van het ischemie / reperfusie chirurgische procedure kan ook elders worden 5 gevonden. </li><li> Verwijder haar rond de operatiewond chemisch of mechanisch en te ontsmetten het gebied met betadine-oplossing. Gebruik een scalpel om een ​​verticale insnijding parallel aan de slokdarm en de luchtpijp te maken. Beweeg de lymfeklieren aan elke kant van de insnijding tot de dunne weefsel dat de tracheablootgesteld. Met behulp van een tang voorzichtig het weefsel te scheiden, tot het witte kraakbeen ringen van de luchtpijp zijn zichtbaar. Let op: We gebruiken over het algemeen Nair ontharen lotion. De lotion wordt aangebracht op de operatieplaats gedurende ~ 1 minuut. Nair wordt vervolgens grondig afgespoeld met behulp van een zoutoplossing of water. Deze methode heeft de voorkeur in ons laboratorium omdat hoge resolutie echocardiografie (dat haarzakjes kunnen detecteren) wordt vóór en na de operatie uitgevoerd. Echter, moet voorzichtigheid worden genomen om gevoelige gebieden zoals genitaliën te vermijden, en vervolgens grondig wassen van de Nair af om mogelijke brandwonden te voorkomen. </li><li> Snel verwijderen van de neus van de muis uit de neus-cone en steek ventilatie slang in de mond van de muis en naar de keel. Wanneer de punt van de ventilatie buis zichtbaar is door de blootgestelde nek Zet de buis met het begin van de luchtpijp. Voorzichtig wiebelen de buis van links naar rechts, terwijl de toepassing opwaartse druk totdat de slang dia&#39;s in de luchtpijp die visueel kan worden bevestigd through de doorschijnende trachea. </li><li> Zorg ervoor dat de muis onder narcose blijft tijdens de intubatie procedure. Pauze van intubatie en de terugkeer van de muis om de neuskegel als het begint te roeren. </li><li> Een lus touw, haak voortanden van de muis door de lus en plak de string eindigt de ECG pad om het hoofd van de muis te stabiliseren en de ventilatie- buis niet beweegt tijdens de operatie te waarborgen. Snel hechten ventilatie slang aan knaagdieren ventilator en ventilatie instellingen aan te passen op basis van het gewicht van de muis. Tape ventilatie buizen op hun plaats. </li><li> Bedek de muis blootgesteld luchtpijp met een gaasje gedrenkt in warme zoutoplossing om weefsel van het drogen te houden. </li><li> Maak een verticale insnijding met behulp van een scalpel langs de linkerkant van het borstbeen. </li><li> Met behulp van een tang voorzichtig scheiden de fascia laag van de spierlaag. Knip voorzichtig de onderliggende spieren lagen zonder te snijden zichtbare bloedvaten. </li><li> Met behulp van een tang, pak de derde rib en trekboven zachtjes. Handhaaf grip op de rib met de ene hand en het gebruik van chirurgische schaar zorgvuldig knippen de intercostale weefsel tussen de derde en vierde rib. Zorg ervoor dat de longen niet beschadigd. Opmerking: Longen wordt diep in de borstholte trekken vrijwel direct na de borstholte wordt geperforeerd door de chirurgische incisie door het verlies van de drukgradiënt. Wacht tot de longen voordat u verder hebben teruggetrokken. </li><li> Gebruik een tang te grijpen en voorzichtig scheiden van de dunne laag van hartzakje, die het hart omringt. </li><li> Plaats oprolmechanismen of handmatig tang rib oprolmechanisme aan de ribben verplaatsen naar een positie waar het hart zichtbaar tussen de ribben. Opmerking: Het is gebruikelijk lager linkerpoot de muis verplaatst zodat deze over de onderste rechterpoot tijdens de plaatsing van de ligatuur. Dit helpt om het hart te plaatsen zodat het linker hartoor of oorschelp is gemakkelijk toegankelijk tijdens het plaatsen van de ligatuur. Wees ervan bewust dat geldig ECG waveforms niet worden verkregen onder de linker poot is off van de elektrode. Daarom is het raadzaam om de poot weer naar de elektrode na het hechten ligatuur door het hartspierweefsel maar voordat een knoop wordt aangetrokken afgelopen. </li><li> Zoek de LAD visueel, onder de linker oorschelp. Snel plaats een 7-0 zijden taps hechten naald in het myocard diep genoeg door te geven onder de LAD, maar niet zo diep als de LV holte dringen. Trek de hechten ligatuur door tot er ongeveer 4 cm van het hechten zijde links op de vrije (non-naald) uiteinde van de hechten ligatuur. </li><li> Begin met een eenvoudige hechting knoop. Zodra het vrije uiteinde van de hechtmiddelen zijde is door de lussen getrokken om de knoop te vormen, onderbreken. </li><li> Het houden van zowel de vrije en naald uiteinden van de hechten zijde met een tang, plaatst u een cm sectie ~ 1 van de PE-10 buizen onder de vorming van knoop en bovenop de epicardiale oppervlak. </li><li> Als linkerpoot van de muis wordt overschreden, de terugkeer van de poot aan de proper elektrode. Draai de knoop zodat de PE-10 buis wordt gehecht aan het hart. Vrijlating van alle fysiek contact met de muis om ECG op te nemen. </li><li> Laat ECG-curve te doorlopen voor ~ 10 sec. Controleer ECG golfvorm visueel en opnemen golfvorm als &quot;Time occlusie&quot;. Als de T-golf niet toeneemt in amplitude binnen 1 minuut, opnieuw te beoordelen plaatsing van ligatuur. <ol><li> Als de T-golf amplitude niet toeneemt, ofwel gooi het dier uit de studie of een poging om de ligatuur plaatsing te corrigeren. </li></ol></li><li> Controleer visueel de kleur van het myocard ischemische paling van de LV te bevestigen. </li><li> Als ECG veranderingen en myocard kleurveranderingen geven ischemie, dubbele knoop de hechtdraad rond de PE-10 buizen. </li><li> Bedek de open borstholte met warme zoutoplossing gaas. </li><li> Neem ECG elke 5-10 minuten voor de duur van de ischemische periode. </li></ol> 4. Bevestiging van reperfusie gebruiken ECG <ol><li> Verwijder zoutoplossing gaas covering de borstholte en visualiseer het hart. </li><li> Gebruik een zaag om de hechtmiddelen zijde boven de PE-10 buis gesneden. Zodra de ligatuur wordt gesneden, verwijder dan het deel van PE-10 buizen en verwijder voorzichtig het hechten ligatuur van de hartspier. </li><li> Laat alle fysieke contact met de muis en laat de ECG-curve ~ 10 sec om te fietsen. Record golfvorm als &quot;Time of reperfusie.&quot; Blijf ECG-golfvormen op te nemen elke 5-10 minuten totdat de gewenste experimentele tijdstip wordt bereikt. </li><li> Resolutie aanpassen op veranderingen in amplitude nodig. Als de T-golf niet verandert bij verwijdering van de PE-10 buis en ligatuur wordt reperfusie niet bevestigd. <ol><li> Als de T-golf verandert niet bij verwijdering van de slang, ofwel gooi het dier uit de studie of een poging om de ligatuur plaatsing te corrigeren. </li></ol></li><li> Voer een visuele inspectie myocard om extra te bevestigen reperfusie door terugkeer naar rode kleur. </li><li> Dichtbij borstholte door het hechten van de intercostale ruimte met een 5-0zijden hechtdraad terwijl het toepassen van lichte druk op de borst van de muis om overtollige lucht die tijdens de operatie is aangegaan te verdrijven. hechten dan de spierlagen en tenslotte huid. Opmerking: Druk uitoefenen op de borstholte mogelijk niet voldoende om de borstholte lucht geëvacueerd alle muizen. Daarom moet de spuit en naald Werkwijze evacuatie worden toegepast om te waarborgen dat alle lucht uit. </li><li> Noteer de laatste ECG alvorens geïnhaleerd verdoving uit en het verwijderen van de poten van de muis van de elektroden. Verhogen zuurstof tot 2 l / min en ventilatie te handhaven totdat de muis herwint bewustzijn. </li><li> Laat de muis om te herstellen in een constante temperatuur gecontroleerde omgeving, bijvoorbeeld verwarming pad of warm incubator, om infarct variabiliteit te voorkomen. Behandel muis met buprenorfine 24 uur na de operatie en vervolgens zo nodig zoals aangegeven door de muis grimas schaal. Opmerking: Procedure voor reperfusie wordt ook in detail besproken door Xu et al 5. </li></ol>

<ol><li>Kochanek, K. D., Murphy, S. L., Xu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deaths%3A+Final+Data+for+2011%5BTitle%5D)+AND+%22Natl+Vital+Stat+Rep%22%5BJournal%5D)">Deaths: Final Data for 2011.</a> Natl Vital Stat Rep. 63 (3), 1-120 (2015).</li>
<li>World Health Organization. The 10 leading causes of death in the world. , Available from:
 http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2012).</li>
<li>Klabunde, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKlabunde%2C+RE+%22Cardiovascular+Physiology+Concepts+2edn%22">Cardiovascular Physiology Concepts 2edn</a>. , Wolters Kluwer Health Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 243(2012).</li>
<li>Bhardwaj, R., Kandoria, A., Sharma, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+young+adults-risk+factors+and+pattern+of+coronary+artery+involvement%5BTitle%5D)+AND+%22Niger+Med+J%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in young adults-risk factors and pattern of coronary artery involvement.</a> Niger Med J. 55 (1), 44-47 (2014).</li>
<li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li>
<li>Fernández, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> J Anat. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>Thaler, M. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aThaler%2C+MS+%22The+Only+EKG+Book+You%27ll+Ever+Need%22">The Only EKG Book You'll Ever Need</a>. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 4 edn (2003).</li>
<li>Poirier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise%2C+heart+rate+variability%2C+and+longevity%3A+the+cocoon+mystery%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Exercise, heart rate variability, and longevity: the cocoon mystery?</a> Circulation. 129 (21), 2085-2087 (2014).</li>
<li>Boudoulas, K. D., Borer, J. S., Boudoulas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Rate%2C+Life+Expectancy+and+the+Cardiovascular+System%3A+Therapeutic+Considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiology%22%5BJournal%5D)">Heart Rate, Life Expectancy and the Cardiovascular System: Therapeutic Considerations.</a> Cardiology. 132 (4), 199-212 (2015).</li>
<li>Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+electrocardiography%3A+an+interval+of+thirty+years%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse electrocardiography: an interval of thirty years.</a> Cardiovasc Res. 45 (1), 231-237 (2000).</li>
<li>Boukens, B. J., Rivaud, M. R., Rentschler, S., Coronel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Misinterpretation+of+the+mouse+ECG%3A+%27musing+the+waves+of+Mus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Misinterpretation of the mouse ECG: 'musing the waves of Mus musculus.</a> J Physiol. 592 (21), 4613-4626 (2014).</li>
<li>O'Gara, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACCF%2FAHA+guideline+for+the+management+of+ST-elevation+myocardial+infarction%3A+executive+summary%3A+a+report+of+the+American+College+of+Cardiology+Foundation%2FAmerican+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines%3A+developed+in+collaboration+with+the+American+College+of+Emergency+Physicians+and+Society+for+Cardiovascular+Angiography+and+Interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Catheter+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">ACCF/AHA guideline for the management of ST-elevation myocardial infarction: executive summary: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines: developed in collaboration with the American College of Emergency Physicians and Society for Cardiovascular Angiography and Interventions.</a> Catheter Cardiovasc Interv. 82 (1), E1-E27 (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , National Academies Press. Washington DC. 8 edn (2011).</li>
<li>Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiography+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Echocardiography in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 71-83 (2011).</li>
<li>Jong, W. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+acute+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+in+IL-6-deficient+mice+employing+a+closed-chest+model%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Res%22%5BJournal%5D)">Reduced acute myocardial ischemia-reperfusion injury in IL-6-deficient mice employing a closed-chest model.</a> Inflamm Res. 65 (6), 489-499 (2016).</li>
<li>Nadtochiy, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+cardioprotection+by+S-nitroso-2-mercaptopropionyl+glycine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">In vivo cardioprotection by S-nitroso-2-mercaptopropionyl glycine.</a> J Mol Cell Cardiol. 46 (6), 960-968 (2009).</li>
<li>Preda, M. B., Burlacu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiography+as+a+tool+for+validating+myocardial+ischemia-reperfusion+procedures+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Electrocardiography as a tool for validating myocardial ischemia-reperfusion procedures in mice.</a> Comp Med. 60 (6), 443-447 (2010).</li>
<li>Speerschneider, T., Thomsen, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+and+analysis+of+the+electrocardiographic+T+wave+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+%28Oxf%22%5BJournal%5D)">Physiology and analysis of the electrocardiographic T wave in mice.</a> Acta Physiol (Oxf. 209 (4), 262-271 (2013).</li>
<li>Kersten, J. R., Schmeling, T. J., Pagel, P. S., Gross, G. J., Warltier, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+mimics+ischemic+preconditioning+via+activation+of+K%28ATP%29+channels%3A+reduction+of+myocardial+infarct+size+with+an+acute+memory+phase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Isoflurane mimics ischemic preconditioning via activation of K(ATP) channels: reduction of myocardial infarct size with an acute memory phase.</a> Anesthesiology. 87 (2), 361-370 (1997).</li>
<li>Gargiulo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+anesthesia%2C+analgesia%2C+and+care%2C+Part+I%3A+anesthetic+considerations+in+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research.</a> ILAR J. 53 (1), E55-E69 (2012).</li>
<li>Curtis, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Lambeth+Conventions+%28II%29%3A+guidelines+for+the+study+of+animal+and+human+ventricular+and+supraventricular+arrhythmias%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">The Lambeth Conventions (II): guidelines for the study of animal and human ventricular and supraventricular arrhythmias.</a> Pharmacol Ther. 139 (2), 213-248 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Gebruik ECG veranderingen als een extra methode voor het bevestigen van myocardiale ischemie en reperfusie zorgt voor de nauwkeurige plaatsing van de afsluitende ligatuur. Nauwkeurigheid van ligatuur plaatsing is van cruciaal belang voor het verminderen van data variatie tussen dieren. De LAD in een muis hart is een moeilijke slagader te visualiseren. Daarom, ter aanvulling van visuele bleekheid met elektrocardiografische veranderingen zullen helpen zorgen voor de juiste plaatsing van de ligatuur en de daaruit voortvloe...

Hart-en vaatziekten nog steeds de belangrijkste doodsoorzaak wereldwijd 1,2. Niet alleen de linker ventrikel (LV) de musculaire kamer, verantwoordelijk voor het pompen van bloed van het hart naar het lichaam 3 is een gemeenschappelijke cardiale verwonding post- myocardiaal infarct 4. Linker ventrikel weefsel dood resulteert vaak in systolische hartfalen. Diermodellen van hart-en vaatziekten zijn noodzakelijk voor de vooruitgang van het biomedisch cardiovasculair onderzoek. De C57BL / 6 stam van muizen hebben een populaire keuze voor dierlijke modellen als gevolg van hun snelle broedtijd, lage kosten en gemak in de genetische veranderingen. De meeste chirurgische murine modellen voor de studie van hartkwaal omvatten occlusie van de LAD tak van de linker kransslagader. De LAD wordt ook wel de linker stompe marginale 5,6. De LAD levert bloed naar het linker ventrikel anterior en antero-laterale wanden. LAD occlusie studies zijn gericht op het induceren van anterior infarcten, soms uitstrekt into de inferieure en laterale wandgebieden 7. Twee modellen die vaak worden gebruikt myocardinfarct studies omvatten chronische occlusie myocardiaal infarct en myocardiale ischemie / reperfusie schade. Chronische occlusie wordt gecreëerd door chirurgisch hechten rond en permanent blokkeren van de bloedstroom door de LAD. De ischemie / reperfusie schade ontstaat veel op dezelfde wijze alleen met zijn doorgaans 30-60 min, ischemie. Om tijdelijke ischemie bereiken, het afsluitende hechtdraad banden rond de LAD en een kleine PE-10 buis die evenwijdig aan de LAD op het epicardiale oppervlak van het hart geplaatst, gevolgd door een reperfusie periode waarin de buis en occlusie hechtingen verwijderd en bloed liet opnieuw stromen door de slagader en in het myocardium. De ischemie / reperfusie operatie wordt geacht klinisch relevant zijn door de aard van reperfusieschade parallel de behandeling van humane infarcten die omvat prompt coronaire angioplastie en stenting van de slagader of coronaire bypass. Typisch tijdens deze operaties, ischemie van de LV in een muizenhart wordt bevestigd door zichtbare bleekheid van de myocardiale wand. Echter, door simpelweg uitvoeren van operaties op een elektrocardiogram (ECG) onderlegger onder voortdurende controle omstandigheden zichtbare veranderingen kunnen worden waargenomen in de ECG-golfvorm, waardoor ischemie en reperfusie van de hartspier muis bevestigd. Hoewel het hart muizen is vergelijkbaar met het menselijk hart in vele opzichten, waaronder de vier kamers structuur, het hart ook verschillen. Een duidelijk verschil is de gemiddelde hartslag in rust van volwassen muizen is 600-700 slagen per minuut (bpm), terwijl die van de volwassen mensen wordt ~ 60-100 bpm 8,9. Bovendien, bij muizen de repolarisatie golven, J en T, vaak fuseren met de depolarisatie QRS-complex het maken van een duidelijke ST-segment moeilijk te onderscheiden 10. Om het proces van electrocardiographicall complicereny bevestiging myocardiale ischemie, is de verhoging van de T-golf en de ST-segment dat wordt gebruikt als markers voor de diagnose van ischemie en myocardiaal infarct letsels bij mensen, klinisch aangeduid als ST e levation m yocardial i nfarction of STEMI. Een van de belangrijkste verschillen tussen mensen en muizen golfvormen is dat S-golf wordt onmiddellijk gevolgd worden van een J-golf die direct overbrengt in een negatieve T-golf. Tijdens acuut myocard ischemie bij muizen de amplitude van de S-golf afneemt en wordt direct gevolgd door een abnormale J-wave en een omgekeerde T-top 11. De T-golf lijkt niet een aanzienlijk deel van de repolarisatie vertegenwoordigen muizen 11. Ondanks nomenclatuur en muis vs. menselijke verschillen, ECG bevestiging van muizen ischemie en reperfusie is nog steeds haalbaar en relatief eenvoudig. Omwille van de vereenvoudiging golfvorm interpretatie, wordt het segment tussen de SJT aangeduid als ST-segment hierin. STEMI richtlijnen gepubliceerd in 2013 aan een patiënt door-to-balloon van minder dan 90 min 12 .Dit houdt in dat de tijd na de identificatie van kransslagader occlusie van de patiënt totdat de slagader wordt geopend moet lager zijn dan 90 min. Het kloppend hart is voortdurend bezig en daarom heeft een hoge oxidatieve metabolisme en een hoog niveau van zuurstofverbruik 3. Hierin te voorzien, een netwerk van capillairen waarover elke myocyten 3. Het duurt slechts een hart een paar slagen om de zuurstof en voedingsstoffen uitputten. In een 90 minuten venster, zal een ischemische hartziekte gebied in een menselijk zijn geblokkeerd van het ontvangen tussen 5400 en 9000 hartslag waarde van zuurstofrijk bloed. In datzelfde 90 min raam, zou een muis moeten 54.000 tot 63.000 hartslagen. Experimentele tijdstippen voor murine ischemie / reperfusieschade typisch tussen 30 en 60 minuten. Het belang van de ontwikkeling vaning een aanvullende methode voor het bevestigen van ischemie en reperfusie in een muizenmodel heeft ingrijpende gevolgen voor de consistentie en reproduceerbaarheid van de gegevens in myocard ischemie / reperfusie studies. De huidige praktijk visueel observeren het hart van een verandering in weefsel kleur is niet geschikt als een stand-alone diagnostisch. Bovendien wordt reperfusie na verwijdering van de buis en de hechting niet gegarandeerd. Hoewel de slagader niet langer wordt afgebonden, kan de slagader blijvende schade tijdens de procedure en kunnen onmogelijk reperfusie worden. Het zou gunstig zijn voor een record van veranderingen in het elektrocardiogram moet reperfusie bevestigen plaats van te vertrouwen op observaties van het myocard bleekheid en rubor (rode kleur) zijn. Harten die de markers van ischemie / reperfusie schade vertonen kan dan snel worden gemarkeerd en een besluit over hoe verder te gaan kan worden gemaakt door de onderzoekers. Tot slot, de oprichting van een record van ECG veranderingen ten opzichte van baseline in heel the ischemische en reperfusie kunnen onderzoekers blijven het hart volgen na de eerste operatie. Onderzoekers moment uit het oog verliezen hart, zodra de operatie is voltooid. ECG is een eenvoudige manier om inzicht in veranderingen in het myocardium uren tot dagen na de operatie krijgen. ECG geregistreerd op tijdstippen na de operatie kon openbaren laat de ontwikkeling van Q-waves aangeeft voortgezet of verergering van dood weefsel. Echter, om effectief gage nieuwe of verergerende elektrocardiografische markers, een baseline ECG moet ter vergelijking beschikbaar zijn. Dit protocol zal laten zien hoe te bereiden, te verkrijgen en te interpreteren ECG ischemie en reperfusie van het hart met behulp van muis 8 bevestigen - 12 weken oude mannelijke C57BL / 6 muizen.

<table><tbody><tr><td>Vevo 1100</td><td>Fujifilm Visual Sonics</td><td></td><td>Echocardiografieapparaat</td></tr><tr><td>Muis-hanteringplaat</td><td>Fujifilm Visual Sonics</td><td></td><td>Verwarmde ECG-plaat</td></tr><tr><td>Signa-Gel&nbsp;</td><td></td><td></td><td>Hoog geleidend multi-</td></tr><tr><td>Elektrode Gel</td><td>Parker</td><td>15-25</td><td>Doel Electrolyt</td></tr><tr><td>Transpore Medisch Plakband</td><td>3M</td><td>1527-0</td><td></td></tr><tr><td>PI-Spray II</td><td>Pharmaceutical Innovations</td><td>NDC 36-2013-25</td><td>Reinigingsmiddel voor ECG-plaat</td></tr><tr><td>C57Bl6 Muizen</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td>Mannetje, 8 - 12 wk</td></tr><tr><td>IsoThesia-Isoflurane</td><td>Henry Schein</td><td>NDC 1169-0500-1</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Systane Nighttime Smeermiddel Oogzalf</td><td>Alcon</td><td>65050935</td><td></td></tr><tr><td>7-0 Perma-Hand Zijde Naalden</td><td>Ethicon</td><td>640.O32</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Perma-Hand Zijde Naalden</td><td>Ethicon</td><td>K809.O32</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische Schaar</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5881</td><td></td></tr><tr><td>Pincet</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Gaas</td><td>Bio Nuclear Diagnostics Inc</td><td>DIS-022B</td><td></td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex CIII&nbsp;</td><td>Patterson Veterinary</td><td>0-891-9756</td><td>Buprenorfine Hydrochloride Pijnstiller&nbsp;</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Purdue Products</td><td>67618-150-08</td><td></td></tr><tr><td>Nair</td><td>Church and Dwight Co.</td><td>NRSL-22339-05</td><td></td></tr></tbody></table>

bevestiging van de myocardiale ischemie en reperfusie schade in muizen met behulp van surface pad elektrocardiografie

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Er zijn veel diermodellen ontwikkeld voor de studie van myocardremodellering en hartfalen vanwege het feit dat dit de belangrijkste doodsoorzaak wereldwijd is. Bij mensen vormt zich een pathologische occlusie in een kransslagader en reperfusion van die verstopte slagader wordt als essentieel beschouwd om de levensvatbaarheid van het bedreigde myocard te behouden. Hoewel essentieel voor de herstel van het myocard, veroorzaakt reperfusion van het ischemische myocard zelf weefselbeschadiging. De fysiologische reactie en genezing van een ischemie/reperfusion-letsel verschilt van een chronische occlusie-letsel. Myocardischemie/reperfusion-letsel wordt erkend als een klinisch relevant model voor studies naar myocardiale infarcten. Om deze reden zijn parallelle diermodellen van ischemie/reperfusion essentieel voor het verbreden van de kennis over myocardletsel. Meestal wordt ischemie van het muishart na occlusie van de linker voorste aflopende (LAD) kransslagader bevestigd door zichtbare bleekheid van het myocard onder de occlusie (ligatuur). Dit biedt echter slechts een subjectieve manier om de juiste of consistente plaatsing van de ligatuur te bevestigen, aangezien er meerdere grote slagaders zijn die bleekheid in verschillende myocardiale regio's kunnen veroorzaken. Een methode om elektrocardiografische veranderingen te registreren om de juiste plaatsing van de ligatuur en het resulterende ischemie en reperfusion te beoordelen, ter aanvulling van waargenomen myocardiale bleekheid, zou helpen om consistente infarctgrootten in muismodellen te verkrijgen. Dit zou op zijn beurt het aantal gebruikte muizen helpen verminderen. Bovendien kunnen elektrocardiografische veranderingen na de operatie non-invasief in een tijdsafhankelijke manier worden geregistreerd. Dit artikel zal een methode demonstreren om myocardischemie en reperfusion in real time elektrocardiografisch te bevestigen.

Een normale muizen ECG wordt weergegeven in figuur 2 met alfabetische merkers voor elektrische gebeurtenissen P, Q, R, S, T. J en P is de eerste atriale depolarisatie. QRS is de golf van depolarisatie over de ventrikels. J is vroeg repolarisatie en T staat voor heterogene repolarisatie ook wel bekend als het herstel 11. Opgemerkt wordt dat vele laboratoria niet het J-wave naamgevingregels en in plaats daarvan betrekking op de SJT-segment als ST-segment 10...

Tijdens muis myocardischemie/reperfusie chirurgie, wordt de juiste plaatsing van de occluderende ligatuur meestal bevestigd door zichtbare waarneming van myocardbleken. Hierin wordt een methode van elektrocardiografisch bevestigen van ischemie en reperfusie, ter aanvulling van waargenomen myocardbleken, gedemonstreerd bij mannelijke C57Bl/6 muizen.

Bevestiging van de Myocardiale ischemie en reperfusie schade in Muizen met behulp van Surface Pad elektrocardiografie

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...

Het algemene doel van deze procedure is om elektrocardiografie te gebruiken om een succesvolle myocardiale ischemie en reperfusie bij muizen te bevestigen. Deze methode kan helpen de consistentie en reproduceerbaarheid van de ischemie-reperfusiechirurgie te verhogen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het mogelijk maakt om het succes van de ischemie en reperfusie tijdens de procedure te beoordelen, in plaats van dat er tijdrovende postoperatieve analyses nodig zijn.Nadat het ECG-kussen is voorbereid, brengt u een hoeveelheid hooggeleidende elektrolytengel aan op elk van de vier metalen elektroden op het ECG-kussen; de hoeveelheid per elektrode moet kleiner zijn dan de grootte van een dime. Druk vervolgens elke poot van een geanestheseerde muis in rugligging tegen een stukje plakband en bevestig het plakband aan een ECG-elektrode, waarbij u erop let dat elke poot in contact staat met de gel en de elektrode. Configureer daarna het apparaat zodat de ECG-golfvorm in realtime kan worden gevisualiseerd, waarbij u de resolutie naar behoefte aanpast om rekening te houden met de verschillen in amplitude.Als de piek van de R-golf of het dal van de Q-golf buiten het beeldkade

confirmation-myocardial-ischemia-reperfusion-injury-mice-using

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Geprogrammeerde elektrische stimulatie biedt de mogelijkheid tot geleiding eigenschappen van het hart te bepalen, en de mogelijkheid om te induceren en te beëindigen hartritmestoornissen met behulp van verschillende pacing protocollen. Met behulp van een katheter transveneuze, kan intracardiale elektrogram opnames worden verkregen bij muizen na geprogrammeerde elektrische stimulatie protocollen aritmogene substraten te identificeren.

Geprogrammeerde elektrische stimulatie in Muizen

Hoge frequentie Doppler-echografie is een nieuwe technologie voor de beoordeling van regionale myocardiale functie. Dit werk presenteert eerste bewijs waaruit de toepasselijkheid van deze veelzijdige imaging platform voor de herhaalde meting van het myocard stam, dp / dt, en mitralisinsufficiëntie in de ischemie-reperfusie (IR) muizen hart.

Hoogfrequente hoge resolutie Echocardiografie: eerste bewijs op niet-invasieve Herhaalde Maatregel van myocard Strain, contractiliteit, en mitralisinsufficiëntie in de Ischemie-reperfusie Murine Hart

Chirurgisch trauma veroorzaakt een ontstekingsreactie. Cytokines en endogene liganden zijn bekend voor het moduleren van een myocard infarct grootte na ischemie en reperfusie. We presenteren een aangepaste gesloten kist model van muizen ischemie en reperfusie met behulp van gewichten opknoping om de effecten van thoracotomie te minimaliseren.

Een murine Closed-borst Model van myocardiale ischemie en reperfusie

We introduceren een chirurgische methode experimentele ischemie / reperfusie (I / R) letsel veroorzaken simuleren myocardiaal infarct (MI) in muismodellen die zorgt voor meer duidelijkheid in positionering van de ligatie van de LAD (LAD) om de reproduceerbaarheid te verhogen MI van experimenten in muizen.

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Onder adequate anesthesie werd het muizenhart geëxternaliseerd door de intercostale ruimte en werd een myocardinfarct met succes geïnduceerd door de linker voorste dalende slagader (LAD) af te binden met behulp van materialen die in de meeste laboratoria gemakkelijk verkrijgbaar zijn.

Een aangepaste eenvoudige methode voor het opwekken van een hartinfarct bij muizen

Hier beschrijven we een eenvoudige en reproduceerbare methode die myocardinfarct of myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen kan induceren door precisieligatie van de linker voorste dalende kransslagader door middel van micromanipulatie.

Inductie van myocardinfarct en myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen

De huidige studie demonstreert een zeer reproduceerbaar diermodel van acute regionale myocardischemie en reperfusieletsel bij konijnen met behulp van een linker mini-thoracotomie voor overlevingsgevallen of een middellijnsternotomie voor niet-overlevingsgevallen.

Model van ischemie en reperfusieletsel bij konijnen

Het huidige protocol beschrijft een aangepast parasternale langsasaanzicht voor snelle en nauwkeurige lokalisatie van de linker voorste dalende slagader. Deze aanpak is ontworpen om eenvoudiger en gebruiksvriendelijker te zijn en tegelijkertijd het onderzoek naar dynamische veranderingen in de coronaire flowreserve na myocardischemie-reperfusie bij muizen te vergemakkelijken.

Dynamische beoordelingen van coronaire stroomreserve na reperfusie van myocardischemie bij muizen

Dit artikel presenteert een unieke techniek met gesloten borstkas voor het induceren van myocardischemie-reperfusieletsel (IRI) bij muizen. De gepresenteerde methode stelt muizen in staat om spontaan te ademen terwijl ze op afstand myocardischemie induceren. Dit biedt toegang tot het dier voor het bestuderen van de dynamische processen van ischemie en reperfusie in situ en in real-time via niet-invasieve beeldvorming.

Op afstand geactiveerde LAD-occlusie met behulp van een ballonkatheter bij spontaan ademende muizen

Een krachtige model voor de peri-operatieve en intensive care gerelateerde acute nierschade wordt gepresenteerd. Met behulp van het hele lichaam hypoperfusie veroorzaakt door een hartstilstand is het mogelijk om bijna een kopie van de histologische en functionele veranderingen van de klinische AKI.

Normotherme hartstilstand en cardiopulmonale reanimatie: een muismodel van ischemie-reperfusie schade

Leer hoe u myocardiale ischemie en reperfusie bevestigt bij muizen met behulp van oppervlakte-ECG-elektroden. Deze techniek verbetert de consistentie en reproduceerbaarheid van chirurgische ingrepen door real-time monitoring.

Bevestiging van de Myocardiale ischemie en reperfusie schade in Muizen met behulp van Surface Pad elektrocardiografie

Meer video's verkennen