Name: Meten van de motorische eindplaat functionaliteit (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 40 s
Description: Leer neuromusculaire junction functionaliteit meten via ex vivo spier-zenuwpreparaten van soleus-sciaticus en diafragma-frenicus. Deze methode helpt onderzoekers contractiele reacties te evalueren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Werk in de auteurs laboratorium werd gesteund door de Fondazione Roma en Telethon (verlenen neen. GGP14066).

<ol><li>Dadon-Nachum, M., Melamed, E., Offen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%26%2334%3Bdying-back%26%2334%3B+phenomenon+of+motor+neurons+in+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The &#34;dying-back&#34; phenomenon of motor neurons in ALS.</a> J Mol Neurosci. 43 (3), 470-477 (2011).</li>
<li>Dobrowolny, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+Muscle+Is+a+Primary+Target+of+SOD1G93A-Mediated+Toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Skeletal Muscle Is a Primary Target of SOD1G93A-Mediated Toxicity.</a> Cell Metab. 8 (5), 425-436 (2008).</li>
<li>Mantilla, C. B., Zhan, W. Z., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurotrophins+improve+neuromuscular+transmission+in+the+adult+rat+diaphragm%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Neurotrophins improve neuromuscular transmission in the adult rat diaphragm.</a> Muscle Nerve. 29 (3), 381-386 (2004).</li>
<li>Prakash, Y. S., Miyata, H., Zhan, W. Z., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivity-induced+remodeling+of+neuromuscular+junctions+in+rat+diaphragmatic+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Inactivity-induced remodeling of neuromuscular junctions in rat diaphragmatic muscle.</a> Muscle Nerve. 22 (3), 307-319 (1999).</li>
<li>Sieck, D. C., Zhan, W. Z., Fang, Y. H., Ermilov, L. G., Sieck, G. C., Mantilla, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure-activity+relationships+in+rodent+diaphragm+muscle+fibers+vs.+neuromuscular+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Structure-activity relationships in rodent diaphragm muscle fibers vs. neuromuscular junctions.</a> Respir Physiol Neurobiol. 180 (1), 88-96 (2012).</li>
<li>Van Lunteren, E., Moyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+DAP+on+diaphragm+force+and+fatigue%2C+including+fatigue+due+to+neurotransmission+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of DAP on diaphragm force and fatigue, including fatigue due to neurotransmission failure.</a> J Appl Physiol. 81 (5), 2214-2220 (1996).</li>
<li>Van Lunteren, E., Moyer, M., Kaminski, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+effects+of+myasthenia+gravis+on+rat+phrenic+diaphragm+contractile+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Adverse effects of myasthenia gravis on rat phrenic diaphragm contractile performance.</a> J Appl Physiol. 97 (3), 895-901 (2004).</li>
<li>Lee, Y., Mikesh, M., Smith, I., Rimer, M., Thompson, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscles+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy+show+profound+defects+in+neuromuscular+development+even+in+the+absence+of+failure+in+neuromuscular+transmission+or+loss+of+motor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Muscles in a mouse model of spinal muscular atrophy show profound defects in neuromuscular development even in the absence of failure in neuromuscular transmission or loss of motor neurons.</a> Dev Biol. 356 (2), 432-444 (2011).</li>
<li>Personius, K. E., Sawyer, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variability+and+failure+of+neurotransmission+in+the+diaphragm+of+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscular+Disord%22%5BJournal%5D)">Variability and failure of neurotransmission in the diaphragm of mdx mice.</a> Neuromuscular Disord. 16 (3), 168-177 (2006).</li>
<li>Röder, I. V., Petersen, Y., Choi, K. R., Witzemann, V., Hammer, J. A., Rudolf, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+myosin+Va+in+the+plasticity+of+the+vertebrate+neuromuscular+junction+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Role of myosin Va in the plasticity of the vertebrate neuromuscular junction in vivo.</a> PLoS ONE. 3 (12), e3871(2008).</li>
<li>Chevessier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+congenital+myasthenic+syndrome+due+to+MuSK+mutations+reveals+defects+in+structure+and+function+of+neuromuscular+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">A mouse model for congenital myasthenic syndrome due to MuSK mutations reveals defects in structure and function of neuromuscular junctions.</a> Hum Mol Genet. 17 (22), 3577-3595 (2008).</li>
<li>Farchi, N., Soreq, H., Hochner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+acetylcholinesterase+overexpression+induces+multilevelled+aberrations+in+mouse+neuromuscular+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic acetylcholinesterase overexpression induces multilevelled aberrations in mouse neuromuscular physiology.</a> J Physiol. 546 (1), 165-173 (2002).</li>
<li>Kuei, J. H., Shadmehr, R., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+contribution+of+neurotransmission+failure+to+diaphragm+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%28Bethesda%2C+Md%3A+1985%29%22%5BJournal%5D)">Relative contribution of neurotransmission failure to diaphragm fatigue.</a> J Appl Physiol (Bethesda, Md: 1985). 68 (1), 174-180 (1990).</li>
<li>Del Prete, Z., Musarò, A., Rizzuto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+mechanical+properties%2C+including+isotonic+fatigue%2C+of+fast+and+slow+MLC%2FmIgf-1+transgenic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Measuring mechanical properties, including isotonic fatigue, of fast and slow MLC/mIgf-1 transgenic skeletal muscle.</a> Ann Biomed Eng. 36 (7), 1281-1290 (2008).</li>
<li>Lynch, G. S., Hinkle, R. T., Chamberlain, J. S., Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+and+power+output+of+fast+and+slow+skeletal+muscles+from+mdx+mice+6-28+months+old%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Force and power output of fast and slow skeletal muscles from mdx mice 6-28 months old.</a> J Physiol. 535 (2), 591-600 (2001).</li>
<li>Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+properties+of+skeletal+muscles+from+young%2C+adult+and+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contractile properties of skeletal muscles from young, adult and aged mice.</a> J Physiol. 404, 71-82 (1988).</li>
<li>Lynch, G. S., Hinkle, R. T., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+and+power+output+of+diaphragm+muscle+strips+from+mdx+and+control+mice+after+clenbuterol+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscul+Disord%22%5BJournal%5D)">Force and power output of diaphragm muscle strips from mdx and control mice after clenbuterol treatment.</a> Neuromuscul Disord. 11 (2), 192-196 (2001).</li>
<li>Rizzuto, E., Pisu, S., Musar, A., Del Prete, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+Neuromuscular+Junction+Functionality+in+the+SOD1+G93A+Animal+Model+of+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng+%22%5BJournal%5D)">Measuring Neuromuscular Junction Functionality in the SOD1 G93A Animal Model of Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> Ann Biomed Eng . 43, (2015).</li>
<li>Soliani, L. <a target="_blank" href="http://www.dsa.unipr.it/soliani/soliani.html">Manuale di statistica per la ricerca e la professione statistica univariata e bivariata parametrica e non-parametrica per le discipline ambientali e biologiche</a>. , (2004).</li>
<li>Gurney, M. E., Pu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+neuron+degeneration+in+mice+that+express+a+human+Cu%2CZn+superoxide+dismutase+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%28New+York%2C+N.Y%29%22%5BJournal%5D)">Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation.</a> Science (New York, N.Y). 264 (5166), 1772-1775 (1994).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het experimentele protocol hierboven beschreven biedt een ideale manier van meten en discriminerende functionele wijzigingen die hebben plaatsgevonden in de spier direct of niet indirect op het niveau van de motorische eindplaat. Aangezien deze techniek is gebaseerd op een indirecte meting van NMJ functionaliteit, kan het niet worden gebruikt om vast te stellen als een defect is gerelateerd aan morfologische veranderingen of aan biochemische veranderingen. Daarentegen biedt het een effectieve manier om te bepalen of wijz...

De motorische eindplaat (NMJ) is een chemische synapse gevormd door de verbinding tussen de motorische eindplaat van de spiervezel en de motor neuron axon terminal. De NMJ heeft aangetoond dat een cruciale rol spelen bij communicatie tussen spieren en zenuwen aangetast is, zoals gebeurt in veroudering of Amyotrofische laterale sclerose (ALS). Zoals spieren en zenuwen in een bidirectionele manier1,2 communiceren, zijnde kundig voor meten NMJ gebreken los van spier gebreken kunnen nieuwe inzichten in hun pathofysiologische samenspel. Inderdaad, deze functionele evaluatie kan helpen om te beoordelen of morfologische of biochemische veranderingen verminderen transmissie signalering van functionaliteit.
De vergelijking van spier contractiele reactie ontlokte door zenuwstimulatie en de reactie van de dezelfde spier opgeroepen door directe stimulatie van het membraan is voorgesteld als een indirecte meting van NMJ functionaliteit. Inderdaad, sinds membraan stimulatie door-pasjes transmissie signalering, eventuele verschillen in de twee contractiele reacties kunnen worden toegeschreven aan veranderingen in de NMJ. Deze aanpak is uitgebreid voorgesteld voor ratten3,4,5,6,7, en ook gebruikt om informatie te verzamelen over muis modellen8,9,10,11,12.
Hier beschrijven we in detail een procedure voor accijnzen en testen van twee spier-zenuw preparaten, d. w. z. de soleus-ischialgie en membraan-phrenic voorbereidingen. Met behulp van een op maat gemaakte software, we ontwierpen een continu testen protocol dat combineert de meting van de verschillende parameters die kenmerkend zijn voor zowel NMJ en spier-functionaliteit, waardoor opbrengst een uitgebreide evaluatie van NMJ schade apart van die van de spier. Met name meet het protocol de twitch force, de kinetiek van de spier, de kracht-frequentie curve voor directe en zenuw stimulaties, de transmissie storing13 voor zowel een afvuren en de tetanic frequenties en de intratetanic vermoeidheid7.

<table><tbody><tr><td>Dual-Mode Lever System&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>300B</td><td>actuator/transducer</td></tr><tr><td>High-Power Bi-Phase Stimulator&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>701B</td><td>puls stimulator (zenuw)</td></tr><tr><td>High-Power Bi-Phase Stimulator&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>701C</td><td>puls stimulator (spier)</td></tr><tr><td>In vitro Muscle Apparatus&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>800A</td><td></td></tr><tr><td>Preparatory tissue bath</td><td>Radnoti</td><td>158400</td><td></td></tr><tr><td>Monopolar Suction Electrode</td><td>A-M Systems</td><td>573000</td><td>met een zelfgemaakte referentie&nbsp;</td></tr><tr><td>Oscilloscoop&nbsp;</td><td>Tektronix</td><td>TDS2014</td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscoop</td><td>Nikon</td><td>SMZ 800</td><td></td></tr><tr><td>Koude lichtverlichting&nbsp;</td><td>Photonic Optics</td><td>PL 3000</td><td></td></tr><tr><td>Acquisitiekaart</td><td>National Instruments</td><td>NI PCIe-6353</td><td></td></tr><tr><td>Connectorblok</td><td>National Instruments</td><td>NI 2110</td><td></td></tr><tr><td>Persoonlijke computer</td><td>AMD Phenom II x4 970</td><td></td><td>Processor 3.50 Ghz met Windows 7</td></tr><tr><td>LabView 2012 software</td><td>National Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Krebs-Ringer Bicarbonaat Buffer&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K4002&nbsp;</td><td>fysiologische buffer</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonaat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5761&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchloride CaCl2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4901</td><td>watervrij, poeder, &ge;97%</td></tr><tr><td>HEPES-buffer</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375</td><td>&ge;99,5% (titratie)</td></tr><tr><td>Schalen 60mm x 15mm</td><td>Falcon</td><td>353004</td><td>Polystyreen</td></tr><tr><td>Silicone</td><td>Sylgard&nbsp;</td><td>184 Silicone&nbsp;</td><td>Elastomer Kit&nbsp; 0.5Kg.</td></tr><tr><td>Thermostaat</td><td>Dennerle</td><td>DigitalDuomat 1200</td><td></td></tr><tr><td>Pomp</td><td>Newa Mini</td><td>MN 606</td><td>voor aquarium</td></tr><tr><td>Hittebestendige Thermokabel</td><td>Lucky Reptile</td><td>61403-1</td><td>50/60Hz 50W</td></tr><tr><td>Emmer</td><td>elke 10 liter</td><td></td><td>Polypropyleen</td></tr><tr><td>O2 + 5%CO2</td><td>siad</td><td></td><td>Menggas</td></tr><tr><td>#5 Pincet&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-20</td><td>2 items</td></tr><tr><td>Spring Scissors - 8 mm Blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>15024-10</td><td>zenunextcisie</td></tr><tr><td>Scherpe schaar&nbsp;</td><td>Fine Science Tools&nbsp;</td><td>14059-11</td><td>spierverwijdering</td></tr><tr><td>Fijne schaar</td><td>Wagner</td><td>02.06.32</td><td>extern van het dier</td></tr><tr><td>Student Scalpel Handle #3</td><td>Fine Science Tools&nbsp;</td><td>91003-12&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel Blades #10</td><td>Fine Science Tools&nbsp;</td><td>10010-00</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel Blades #11</td><td>Fine Science Tools&nbsp;</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>Nylondraad &Oslash;0.16 mm</td><td>elke</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

meten van de motorische eindplaat functionaliteit

Measuring Neuromuscular Junction Functionality

Functionaliteit van de motorische eindplaat (NMJ) speelt een cruciale rol bij de studie van de ziekten waar de communicatie tussen motor neuron en spier met gezichtsstoornissen, zoals veroudering en Amyotrofische laterale sclerose (ALS is). Hier beschrijven we een experimenteel protocol dat kan worden gebruikt voor het meten van NMJ functionaliteit door het combineren van twee soorten elektrische stimulatie: directe spierstimulatie membraan en de stimulatie door middel van de zenuw. De vergelijking van de spier reactie op deze twee verschillende stimulaties kunnen worden gedefinieerd, op het functionele niveau, mogelijke veranderingen in de NMJ die tot daling van de functionele in spier leiden.
Ex vivo preparaten zijn geschikt voor goed gecontroleerde studies. Hier beschrijven we een intensieve protocol voor het meten van verschillende parameters van spier- en NMJ functionaliteit voor de soleus-ischialgie zenuw voorbereiding alsmede voor de bereiding van de membraan-phrenic zenuw. Het protocol duurt ongeveer 60 minuten en onafgebroken wordt uitgevoerd door middel van een op maat gemaakte software die de kramp kinetiek eigenschappen, de relatie van de kracht-frequentie voor zowel spieren en zenuw stimulaties en twee parameters specifiek voor NMJ functionaliteit, d.w.z. transmissie storing en intratetanic vermoeidheid meet. Deze methode werd gebruikt voor het detecteren van schade in de soleus en het middenrif spier-zenuw preparaten met behulp van SOD1G93A transgene muis, een experimenteel model van ALS dat overal overexpresses de mutant anti-oxidant enzym superoxide dismutase 1 (SOD1).

Het protocol we beschreven informatie over functionele denervation in verschillende neuromusculaire ziekten of veroudering-sarcopenie. Dit protocol kan worden gebruikt om te bepalen of (en zo ja, op welk niveau) spier veranderingen zijn te wijten aan selectief veranderingen die zich in de spier zelf of in de neuromusculaire transmissie voordoen. De gegevens hieronder zijn de resultaten van een eerdere werk van onze groep18, uitgevoerd op het SOD1G93A tra...

Een functionele evaluatie van de motorische eindplaat (NMJ) kan verschaffen essentiële informatie over de communicatie tussen spieren en zenuwen. Hier beschrijven we een protocol uitvoerig evalueren zowel de spier de NMJ functionaliteit met behulp van twee verschillende spier-zenuw preparaten, d.w.z. soleus-ischialgie en membraan-phrenic.

Meten van de motorische eindplaat functionaliteit

Neuromuscular junction (NMJ) functionality plays a pivotal role when studying diseases in which the communication between motor neuron and muscle is ...

Het algemene doel van deze procedure is om de functionaliteit van de neuromusculaire overgang te bestuderen middels een ex vivo experimentele benadering. Dit wordt bereikt door de spier-zenuwprioriteit op twee manieren te stimuleren: direct op het spiermembraan en via de zenuw. Aangezien membraanstimulatie de neurotransmissiesignalering omzeilt, kunnen eventuele verschillen tussen de twee contractiereacties worden beschouwd als een indirecte meting van de functionaliteit van de neuromusculaire overgang.Hier presenteren we deze procedure in een soleus-nervus ischiadicus-preparaat. De spier wordt samen met de zenuw gedissekeerd en in een geperfuseerd weefselbad geplaatst. Deze wordt bevestigd aan een kracht- en lengtecontroller en een paar platina elektroden worden parallel aan de spier geplaatst.Een glazen zuigelektrode wordt vervolgens dicht bij het doorgesneden uiteinde van de zenuw bewogen. Er wordt daarna een uitgebreid testprotocol toegepast om zowel de neuromusculaire overgang als de spierfunctionaliteit grondig te evalueren. De functionele verbinding tussen spier en zenuw vormt de conclusie voor beide delen en de twee overlevende fracties.In het eerste gebied van het niveau v

measuring-neuromuscular-junction-functionality

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

De Drosophila neuromusculaire verbinding (NMJ) wordt gebruikt als model om de morfologie en functie van synapsen te bestuderen. Deze video beschrijft belangrijke kenmerken die onderzoekers kwantificeren om de NMJ te karakteriseren. Het voorbeeldprotocol demonstreert een software die de kwantificering automatisch kan uitvoeren.

Drosophila Neuromusculaire junction (NMJ) kwantificering: een methode om synaptische morfologie en functie te beoordelen

This video demonstrates an in vivo technique for measuring compound muscle action potential (CMAP) in mice. It outlines the steps for setting up electrodes, stimulating forelimb neurons that innervate muscle fibers, and recording muscle responses. The technique assesses neuronal demyelination and functional neuron loss.

Measuring Compound Muscle Action Potentials in Mouse Forelimb Muscles In Vivo

This video demonstrates a method to assess functional neuromuscular junctions. Using a bioreactor containing muscle tissue and motor neurons, along with fluorescent microscopy, the light-sensitive channels in the neurons are stimulated to generate electrical signals, causing muscle fiber contractions.

Assessing a Functional Neuromuscular Junction Via Simultaneous Optical Stimulation and Video Recording

De neuromusculaire junctie (NMJ) wordt gewijzigd in een verscheidenheid aan omstandigheden die soms kunnen resulteren in synaptische falen. Dit rapport beschrijft op fluorescentiemicroscoop gebaseerde methoden om dergelijke structurele veranderingen te kwantificeren.

De neuromusculaire junctie: Meten Synapse Maat, Fragmentatie en Veranderingen in Synaptic Protein dichtheid met behulp van confocale fluorescentie microscopie

Het protocol beschreven in dit document maakt gebruik van de muis Musculus levator auris longus (LAL) spier graag spontane, zenuw-opgeroepen postsynaptisch potentieel (current-clamp) en stromingen (spanning-klem) op de motorische eindplaat. Gebruik van deze techniek kan belangrijke inzicht verwerven in de mechanismen van synaptische transmissie onder normale en zieke voorwaarden.

Musculus levator Auris Longus Voorbereiding onderzoek van zoogdieren neuromusculaire transmissie Voltage Clamp voorwaarden

Het vermogen om neuromusculaire verbindingscomponenten nauwkeurig te detecteren is cruciaal bij het evalueren van wijzigingen in de architectuur vanwege pathologische of ontwikkelingsprocessen. Hier presenteren we een volledige beschrijving van een eenvoudige methode om hoogwaardige beelden te verkrijgen van neuromusculaire verbindingen die kunnen worden gebruikt om kwantitatieve metingen uit te voeren.

Dissectie van enkelvoudige skeletspiervezels voor immunofluorescente en morfometrische analyses van neuromusculaire knooppunten van de hele berg

We beschrijven een methode om menselijke motorische eenheden te genereren in commercieel verkrijgbare microfluïdische apparaten door door de mens geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide motorneuronen te co-cultiveren met menselijke primaire mesoangioblast-afgeleide myotubes, wat resulteert in de vorming van functioneel actieve neuromusculaire juncties.

Generatie van menselijke motorische eenheden met functionele neuromusculaire juncties in microfluïdische apparaten

Dit protocol beschrijft een methode voor morfometrische analyse van neuromusculaire juncties door gecombineerde confocale en STED-microscopie die wordt gebruikt om pathologische veranderingen in muismodellen van SMA- en ColQ-gerelateerd CMS te kwantificeren.

Karakterisering van neuromusculaire juncties bij muizen door gecombineerde confocale en superresolutiemicroscopie

We beschrijven een reproduceerbaar, geautomatiseerd en onbevooroordeeld beeldvormingssysteem voor het karakteriseren van de neuromusculaire junctiefunctie met behulp van menselijk gemanipuleerd skeletspierweefsel en optogenetische motoneuronen. Dit systeem maakt de functionele kwantificering van neuromusculaire connectiviteit in de loop van de tijd mogelijk en detecteert verminderde neuromusculaire functie veroorzaakt door neurotoxinen en myasthenia gravis patiëntenserum.

Engineering en karakterisering van een optogenetisch model van de menselijke neuromusculaire junctie

Het protocol toont een methode om ruimtelijke correlatie tussen de pre-synaptische terminals, post-synaptische receptoren en peri-synaptische Schwann-cellen in de mediale gastrocnemius-spier van de rat te onderzoeken met behulp van fluorescerende immunohistochemie met verschillende biomarkers, namelijk neurofilament 200, vesiculaire acetylcholinetransporter, alfa-bungarotoxine en S100.

Visualisatie van de morfologische kenmerken van neuromusculaire overgang in rat mediale gastrocnemiusspier

In deze studie demonstreren we een verfijnd single fiber electromyography (SFEMG) protocol om in vivo meting van neuromusculaire junctie (NMJ) transmissie in knaagdiermodellen mogelijk te maken. Een stapsgewijze benadering van de SFEMG-techniek wordt beschreven om kwantificering van NMJ-transmissievariabiliteit en -falen in de gastrocnemius-spier van ratten mogelijk te maken.

Gestimuleerde elektromyografie met één vezel (SFEMG) voor het beoordelen van de overdracht van neuromusculaire juncties in knaagdiermodellen

Leer neuromusculaire junction functionaliteit meten via ex vivo spier-zenuwpreparaten van soleus-sciaticus en diafragma-frenicus. Deze methode helpt onderzoekers contractiele reacties te evalueren.

Meten van de motorische eindplaat functionaliteit

Meer video's verkennen