Name: Fenotypische analyse van knaagdieren malaria parasiet asexual en seksuele bloed stadia en muggen stadia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-30T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 23 s
Description: Leer gestandaardiseerde fenotypische analyse van knaagdier malaria parasieten voor malariabestrijding. Deze methoden ondersteunen betrouwbaar onderzoek naar bloedstadia en transmissie naar muggen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ahmed Aly wordt gesteund door financiering aan de Bezmialem Vakif Universiteit van het Turkse Ministerie van ontwikkelings subsidie 2015BSV036, en door financiering door de Tulane University School of Public Health and Tropical Medicine, en door financiering van NIH-NIAID voor R21Grant 1R21AI111058-01A1.

<ol><li>Who/Unicef Report. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malaria+Mdg+Target+Achieved+Amid+Sharp+Drop+in+Cases+and+Mortality%2C+but+3+Billion+People+Remain+at+Risk%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosciences+%28Riyadh%29%22%5BJournal%5D)">Malaria Mdg Target Achieved Amid Sharp Drop in Cases and Mortality, but 3 Billion People Remain at Risk.</a> Neurosciences (Riyadh). 21, 87-88 (2016).</li>
<li>Naing, C., Whittaker, M. A., Nyunt Wai, V., Mak, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+Plasmodium+vivax+malaria+a+severe+malaria%3F%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Neglected+Tropical+Diseases%22%5BJournal%5D)">Is Plasmodium vivax malaria a severe malaria?: a systematic review and meta-analysis.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 8, e3071(2014).</li>
<li>Millar, S. B., Cox-Singh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+infections+with+Plasmodium+knowlesi--zoonotic+malaria%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+and+Infection%3A+The+Official+Publication+of+the+European+Society+of+Clinical+Microbiology+and+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Human infections with Plasmodium knowlesi--zoonotic malaria.</a> Clinical Microbiology and Infection: The Official Publication of the European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. 21, 640-648 (2015).</li>
<li>Spry, C., Kirk, K., Saliba, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coenzyme+A+biosynthesis%3A+an+antimicrobial+drug+target%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Coenzyme A biosynthesis: an antimicrobial drug target.</a> FEMS Microbiology Reviews. 32, 56-106 (2008).</li>
<li>Aly, A. S., Vaughan, A. M., Kappe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malaria+parasite+development+in+the+mosquito+and+infection+of+the+mammalian+host%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Malaria parasite development in the mosquito and infection of the mammalian host.</a> Annual Review of Microbiology. 63, 195-221 (2009).</li>
<li>Stephens, R., Culleton, R. L., Lamb, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+Plasmodium+chabaudi+to+our+understanding+of+malaria%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Parasitology%22%5BJournal%5D)">The contribution of Plasmodium chabaudi to our understanding of malaria.</a> Trends in Parasitology. 28, 73-82 (2012).</li>
<li>Bagnaresi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unlike+the+synchronous+Plasmodium+falciparum+and+P.+chabaudi+infection%2C+the+P.+berghei+and+P.+yoelii+asynchronous+infections+are+not+affected+by+melatonin%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+General+Medicine%22%5BJournal%5D)">Unlike the synchronous Plasmodium falciparum and P. chabaudi infection, the P. berghei and P. yoelii asynchronous infections are not affected by melatonin.</a> International Journal of General Medicine. 2, 47-55 (2009).</li>
<li>Cromer, D., Evans, K. J., Schofield, L., Davenport, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preferential+invasion+of+reticulocytes+during+late-stage+Plasmodium+berghei+infection+accounts+for+reduced+circulating+reticulocyte+levels%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+for+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Preferential invasion of reticulocytes during late-stage Plasmodium berghei infection accounts for reduced circulating reticulocyte levels.</a> International Journal for Parasitology. 36, 1389-1397 (2006).</li>
<li>Jayawardena, A. N., Mogil, R., Murphy, D. B., Burger, D., Gershon, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+expression+of+H-2K+and+H-2D+antigens+on+reticulocytes+infected+with+Plasmodium+yoelii%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Enhanced expression of H-2K and H-2D antigens on reticulocytes infected with Plasmodium yoelii.</a> Nature. 302, 623-626 (1983).</li>
<li>Okada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transient+resistance+to+blood-stage+malaria+in+interferon-gamma-deficient+mice+through+impaired+production+of+the+host+cells+preferred+by+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A transient resistance to blood-stage malaria in interferon-gamma-deficient mice through impaired production of the host cells preferred by malaria parasites.</a> Frontiers in Microbiology. 6, 600(2015).</li>
<li>Walliker, D., Sanderson, A., Yoeli, M., Hargreaves, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetic+investigation+of+virulence+in+a+rodent+malaria+parasite%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology%22%5BJournal%5D)">A genetic investigation of virulence in a rodent malaria parasite.</a> Parasitology. 72, 183-194 (1976).</li>
<li>Deharo, E., Coquelin, F., Chabaud, A. G., Landau, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+erythrocytic+schizogony+of+two+synchronized+strains+of+plasmodium+berghei%2C+NK65+and+ANKA%2C+in+normocytes+and+reticulocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology+Research%22%5BJournal%5D)">The erythrocytic schizogony of two synchronized strains of plasmodium berghei, NK65 and ANKA, in normocytes and reticulocytes.</a> Parasitology Research. 82, 178-182 (1996).</li>
<li>Fahey, J. R., Spitalny, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virulent+and+nonvirulent+forms+of+Plasmodium+yoelii+are+not+restricted+to+growth+within+a+single+erythrocyte+type%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Virulent and nonvirulent forms of Plasmodium yoelii are not restricted to growth within a single erythrocyte type.</a> Infection and Immunity. 44, 151-156 (1984).</li>
<li>Srivastava, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+reticulocytes+provide+metabolic+reservoirs+that+can+be+exploited+by+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Host reticulocytes provide metabolic reservoirs that can be exploited by malaria parasites.</a> PLoS Pathogens. 11, e1004882(2015).</li>
<li>Hart, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Characterization+of+Plasmodium+Putative+Pantothenate+Kinase+Genes+Reveals+Their+Essential+Role+in+Malaria+Parasite+Transmission+to+the+Mosquito%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Genetic Characterization of Plasmodium Putative Pantothenate Kinase Genes Reveals Their Essential Role in Malaria Parasite Transmission to the Mosquito.</a> Scientific Reports. 6, 33518(2016).</li>
<li>Hart, R. J., Ghaffar, A., Abdalal, S., Perrin, B., Aly, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmodium+AdoMetDC%2FODC+bifunctional+enzyme+is+essential+for+male+sexual+stage+development+and+mosquito+transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Open%22%5BJournal%5D)">Plasmodium AdoMetDC/ODC bifunctional enzyme is essential for male sexual stage development and mosquito transmission.</a> Biology Open. 5, 1022-1029 (2016).</li>
<li>Hart, R. J., Lawres, L., Fritzen, E., Ben Mamoun, C., Aly, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmodium+yoelii+vitamin+B5+pantothenate+transporter+candidate+is+essential+for+parasite+transmission+to+the+mosquito%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Plasmodium yoelii vitamin B5 pantothenate transporter candidate is essential for parasite transmission to the mosquito.</a> Scientific Reports. 4, 5665(2014).</li>
<li>Ramakrishnan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+maintenance+of+rodent+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Laboratory maintenance of rodent malaria parasites.</a> Methods in Molecular Biology. 923, 51-72 (2013).</li>
<li>Hart, R. J., Abraham, A., Aly, A. S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Characterization+of+Coenzyme+A+Biosynthesis+Reveals+Essential+Distinctive+Functions+during+Malaria+Parasite+Development+in+Blood+and+Mosquito%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cellular+and+Infection+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Genetic Characterization of Coenzyme A Biosynthesis Reveals Essential Distinctive Functions during Malaria Parasite Development in Blood and Mosquito.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 7, 260(2017).</li>
<li>Vanderberg, J. P., Yoeli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+temperature+on+sporogonic+development+of+Plasmodium+berghei%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Effects of temperature on sporogonic development of Plasmodium berghei.</a> The Journal of Parasitology. 52, 559-564 (1966).</li>
<li>Vaughan, A. M., Aly, A. S., Kappe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malaria+parasite+pre-erythrocytic+stage+infection%3A+gliding+and+hiding%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+%26+Microbe%22%5BJournal%5D)">Malaria parasite pre-erythrocytic stage infection: gliding and hiding.</a> Cell Host & Microbe. 4, 209-218 (2008).</li>
<li>Briones, M. R., Tsuji, M., Nussenzweig, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+large+difference+in+infectivity+for+mice+of+Plasmodium+berghei+and+Plasmodium+yoelii+sporozoites+cannot+be+correlated+with+their+ability+to+enter+into+hepatocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Biochemical+Parasitology%22%5BJournal%5D)">The large difference in infectivity for mice of Plasmodium berghei and Plasmodium yoelii sporozoites cannot be correlated with their ability to enter into hepatocytes.</a> Molecular and Biochemical Parasitology. 77, 7-17 (1996).</li>
<li>Hollingdale, M. R., Leland, P., Leef, J. L., Beaudoin, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+cell+type+and+culture+medium+on+the+in+vitro+cultivation+of+exoerythrocytic+stages+of+Plasmodium+berghei%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Parasitology%22%5BJournal%5D)">The influence of cell type and culture medium on the in vitro cultivation of exoerythrocytic stages of Plasmodium berghei.</a> The Journal of Parasitology. 69, 346-352 (1983).</li>
<li>House, B. L., Hollingdale, M. R., Sacci, J. B. Jr, Richie, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+immunoassays+using+an+in+vitro+malaria+liver-stage+infection+model%3A+where+do+we+go+from+here%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Functional immunoassays using an in vitro malaria liver-stage infection model: where do we go from here?</a> Trends in Parasitology. 25, 525-533 (2009).</li>
<li>Khan, Z. M., Vanderberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+host+cellular+response+in+differential+susceptibility+of+nonimmunized+BALB%2Fc+mice+to+Plasmodium+berghei+and+Plasmodium+yoelii+sporozoites%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Role of host cellular response in differential susceptibility of nonimmunized BALB/c mice to Plasmodium berghei and Plasmodium yoelii sporozoites.</a> Infection and Immunity. 59, 2529-2534 (1991).</li>
<li>Most, H., Nussenzweig, R. S., Vanderberg, J., Herman, R., Yoeli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Susceptibility+of+genetically+standardized+%28JAX%29+mouse+strains+to+sporozoite-+and+blood-induced+Plasmodium+berghei+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Military+Medicine%22%5BJournal%5D)">Susceptibility of genetically standardized (JAX) mouse strains to sporozoite- and blood-induced Plasmodium berghei infections.</a> Military Medicine. 131 (Suppl), 915-918 (1966).</li>
<li>Nussenzweig, R., Herman, R., Vanderberg, J., Yoeli, M., Most, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+sporozoite-induced+infections+of+rodent+malaria.+3.+The+course+of+sporozoite-induced+Plasmodium+berghei+in+different+hosts%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Tropical+Medicine+and+Hygiene%22%5BJournal%5D)">Studies on sporozoite-induced infections of rodent malaria. 3. The course of sporozoite-induced Plasmodium berghei in different hosts.</a> The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 15, 684-689 (1966).</li>
<li>Silvie, O., Franetich, J. F., Boucheix, C., Rubinstein, E., Mazier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+invasion+pathways+for+Plasmodium+berghei+sporozoites%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+for+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Alternative invasion pathways for Plasmodium berghei sporozoites.</a> International Journal for Parasitology. 37, 173-182 (2007).</li>
<li>Tarun, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protracted+sterile+protection+with+Plasmodium+yoelii+pre-erythrocytic+genetically+attenuated+parasite+malaria+vaccines+is+independent+of+significant+liver-stage+persistence+and+is+mediated+by+CD8%2B+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Protracted sterile protection with Plasmodium yoelii pre-erythrocytic genetically attenuated parasite malaria vaccines is independent of significant liver-stage persistence and is mediated by CD8+ T cells.</a> The Journal of Infectious Diseases. 196, 608-616 (2007).</li>
<li>Weiss, W. R., Good, M. F., Hollingdale, M. R., Miller, L. H., Berzofsky, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+control+of+immunity+to+Plasmodium+yoelii+sporozoites%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Genetic control of immunity to Plasmodium yoelii sporozoites.</a> The Journal of Immunology. 143, 4263-4266 (1989).</li>
<li>Philip, N., Orr, R., Waters, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfection+of+rodent+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Transfection of rodent malaria parasites.</a> Methods in Molecular Biology. 923, 99-125 (2013).</li>
<li>Janse, C. J., Ponzi, M., Sinden, R. E., Waters, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromosomes+and+sexual+development+of+rodent+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Memorias+do+Instituto+Oswaldo+Cruz%22%5BJournal%5D)">Chromosomes and sexual development of rodent malaria parasites.</a> Memorias do Instituto Oswaldo Cruz. 89 (Suppl), 43-46 (1994).</li>
<li>Sinha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cascade+of+DNA-binding+proteins+for+sexual+commitment+and+development+in+Plasmodium%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A cascade of DNA-binding proteins for sexual commitment and development in Plasmodium.</a> Nature. 507, 253-257 (2014).</li>
<li>Malleret, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+robust+tri-color+flow+cytometry+assay+for+monitoring+malaria+parasite+development%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">A rapid and robust tri-color flow cytometry assay for monitoring malaria parasite development.</a> Scientific Reports. 1, 118(2011).</li>
<li>Aly, A. S., Matuschewski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+malarial+cysteine+protease+is+necessary+for+Plasmodium+sporozoite+egress+from+oocysts%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">A malarial cysteine protease is necessary for Plasmodium sporozoite egress from oocysts.</a> The Journal of Experimental Medicine. 202, 225-230 (2005).</li>
<li>Aly, A. S., Lindner, S. E., MacKellar, D. C., Peng, X., Kappe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SAP1+is+a+critical+post-transcriptional+regulator+of+infectivity+in+malaria+parasite+sporozoite+stages%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">SAP1 is a critical post-transcriptional regulator of infectivity in malaria parasite sporozoite stages.</a> Molecular Microbiology. 79, 929-939 (2011).</li>
<li>Aly, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+deletion+of+SAP1+abolishes+the+expression+of+infectivity+factors+necessary+for+successful+malaria+parasite+liver+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Targeted deletion of SAP1 abolishes the expression of infectivity factors necessary for successful malaria parasite liver infection.</a> Molecular Microbiology. 69, 152-163 (2008).</li>
<li>Ozaki, L. S., Gwadz, R. W., Godson, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+centrifugation+method+for+rapid+separation+of+sporozoites+from+mosquitoes%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Parasitology%22%5BJournal%5D)">Simple centrifugation method for rapid separation of sporozoites from mosquitoes.</a> The Journal of Parasitology. 70, 831-833 (1984).</li>
<li>de Koning-Ward, T. F., Gilson, P. R., Crabb, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+molecular+genetic+systems+in+malaria%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Advances in molecular genetic systems in malaria.</a> Nature Reviews. Microbiology. 13, 373-387 (2015).</li>
<li>Janse, C. J., Ramesar, J., Waters, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-efficiency+transfection+and+drug+selection+of+genetically+transformed+blood+stages+of+the+rodent+malaria+parasite+Plasmodium+berghei%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">High-efficiency transfection and drug selection of genetically transformed blood stages of the rodent malaria parasite Plasmodium berghei.</a> Nature Protocols. 1, 346-356 (2006).</li>
<li>Lin, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+%27gene+insertion%2Fmarker+out%27+%28GIMO%29+method+for+transgene+expression+and+gene+complementation+in+rodent+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A novel 'gene insertion/marker out' (GIMO) method for transgene expression and gene complementation in rodent malaria parasites.</a> PLoS One. 6, e29289(2011).</li>
<li>Manzoni, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+robust+selection+procedure+for+generating+drug-selectable+marker-free+recombinant+malaria+parasites%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">A rapid and robust selection procedure for generating drug-selectable marker-free recombinant malaria parasites.</a> Scientific Reports. 4, 4760(2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Ondanks de gelijkenis in de algemene biologie van hun levenscycli tot die van menselijke malariaparasieten, hebben muizen malaria modellen ook veel gelijkenissen met menselijke Plasmodium soorten die hun gebruik als betrouwbaar in vivo modellen zouden beperken. Bijvoorbeeld, met uitzondering van levende verzwakte parasieten als vaccins, alle vaccin studies met subeenheid en DNA en andere vaccins gaven uitstekende resultaten in het muismodel, maar bij mensen die in endemische gebieden wonen, waren de res...

Malariaparasieten veroorzaken honderden miljoenen malaria-infecties bij mensenwereld wijd, met meer dan 600.000 sterfgevallen per jaar1. Menselijke infecties worden veroorzaakt door vijf malaria parasitaire soorten, namelijk p. falciparum, p. vivax, p. ovale, p. malariae, en p.kennis. De meeste klinische malaria sterfte wordt veroorzaakt door P. falciparum in Afrika ten zuiden van de Sahara1. Een andere menselijke malariaparasiet soorten die grote wereldwijde Morbiditeiten buiten het Afrika bezuiden de Sahara veroorzaakt is P. vivax2. De andere drie soorten zijn allemaal meer geografisch beperkt en veroorzaken goedaardige malaria-infecties, behalve de dodelijke P. Prosi3. De onbeschikbaarheid van relevante en praktische niet-humane in vivo-modellen van infecties is altijd geweest en is nog steeds een belemmering voor malaria vaccin en Geneesmiddelenontwikkeling. Eerdere malaria drugs targeting en metabole studies hebben uitgebreid vertrouwd op aviaire malaria modellen zoals p. gallinaceum en p. lophurae, het infecteren van kippen en eenden, respectievelijk4. Daarna werden knaagdier malaria soorten geleidelijk geïntroduceerd in verschillende vaccins en drugs targeting studies als in vivo modellen. In de loop der jaren, het bewijs van gelijkenissen van de biologie en gastheer-parasiet interacties van de levenscyclus stadia van knaagdieren malaria modellen aan menselijke malaria soorten hebben opgebouwd.
In het bijzonder waren Knaagdieren malaria modellen uiterst belangrijk om de biologie van muggen en pre-erytrocytische stadia5te verkennen en karakteriseren. Er zijn echter vier Knaagdieren malaria soorten (p. berghei, p. yoelii, p. chabaudi, en p. vinckei) die verschillende biologische kenmerken hebben, waarvan de meest opvallende in de bloed stadia6. Knaagdier malaria soorten verschillen in de synchroniciteit van bloed stadia, waarbij bloed stadia van p. chabaudi en p. vinckei stammen zijn meestal synchroon, terwijl het bloed stadia van p. berghei en p. yoelii zijn niet6 , 7. een ander opmerkelijk verschil is de zelf klaring van bloed stadia die voorkomt in sommige stammen (bijv. p. yoelii 17x-nl, p. berghei NK65 en P. vinckei lentum), terwijl de bloedinfectie van andere stammen van dezelfde soort kunnen dodelijk zijn indien onbehandeld (P. yoelii 17x-L, p. berghei ANKA, en P. chabaudi as). Bovendien, p. yoelii 17x-nl stam en p. berghei ANKA stam bij voorkeur de reticulocyten8,9,10,11, hoewel deze kenmerken van p. yoelii en P. berghei stammen zijn niet een strikte groei eis12,13,14. Daarom worden muizen behandeld met fenylhydrazine voorafgaand aan een infectie met de bloed stadia van die parasieten om de parasitemie en gametocytemia te verhogen die nodig zijn voor een mug-infectie voor de p. berghei ANKA-stam en voor p. yoelii 17x-nl15,16,17,18,19.
Verschillen in muggen stadia ontwikkeling bestaan ook tussen verschillende Knaagdieren malaria soorten, de meest opvallende is de temperatuur en de tijd die nodig zijn voor optimale muggen stadia ontwikkeling en de sporozoite lengte5,6, 20. In pre-erytrocytische stadia van knaagdier malaria soorten, verschillen omvatten de knaagdieren soorten en stam die het meest vatbaar zijn voor infectieuze sporozoïet inoculatie, het aantal sporozoieten nodig voor de inoculatie in een gevoelige knaagdier stam, de zoogdier celtypen nodig voor in vitro lever fase ontwikkeling testen, en de tijd om te voltooien van de ontwikkeling van de lever fase5,21,22,23,24,25 ,26,27,28,29,30.
Ondanks deze variabele waren knaagdieren malariaparasieten eerder de gunstige modellen voor de toepassing van omgekeerde genetische benaderingen, omdat ze minder tijd en middelen verbruiken met een grote kans op succes31. In feite, knaagdieren malaria modellen waren de beste modellen, en in veel gevallen de enige modellen, beschikbaar voor vele jaren om functioneel te karakteriseren genen uitgedrukt in muggen en lever stadia.
In het licht van de populariteit en de mogelijkheden van omgekeerde genetische benaderingen in knaagdieren malaria modellen, een aantal verschillende methodologieën zijn gebruikt voor het analyseren van de fenotypes van transgene parasiet levenscyclus stadia, met name bloed stadia. Sommige van deze methoden zijn echter inconsistent; bijvoorbeeld, het vergelijken van infecties van bloed-fase parasieten na een IP-injectie (die mogelijk worden afgevoerd naar de peritoneale lymfeklieren en, vanaf daar, kan de bloedbaan in te voeren; daarom, de geïnjecteerde parasieten eindigen niet in de bloedbaan gelijk) , het vergelijken van de Mosquito transmissie van klonen met een verschillend aantal seriële bloed-fase overdrachten of G-nummer (die invloed kunnen hebben op gametocytogenesis32,33), of het vergelijken van transgene parasieten rechtstreeks naar naïef wild-type (WT) parasieten die nooit werden onderworpen aan elektroporation en positieve drug selectie en de verschillende niet-gestandaardiseerde evaluaties van mannelijke gameten exflagellatie. Daarom is het cruciaal om protocollen te standaardiseren die eenvoudig te volgen zijn voor de fenotypische analyse van elk type transgene of WT knaagdier malariaparasieten in het bloed en in de mug om tegemoet te komen aan de biologische variabele van knaagdieren malaria parasietsoorten.
Hierin rapporteren we over een gestandaardiseerd, gedetailleerd experimenteel protocol voor de fenotypische analyse van het bloed en de levenscyclus van muggen van transgene of wild-type p. yoelii en p. berghei parasieten. Deze protocollen zijn ook van toepassing op p. chabaudi en p. vinckei parasieten.

<table><tbody><tr><td>Heparine</td><td>Sigma</td><td>375095-100KU</td><td></td></tr><tr><td>Xanthurenzuur</td><td>Sigma</td><td>D120804-5G</td><td></td></tr><tr><td>Hypoxanthine</td><td>Sigma</td><td>H9377-25G</td><td></td></tr><tr><td>Alsever's oplossing</td><td>Sigma</td><td>A3551-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Natriumbicarbonaat</td><td>Sigma</td><td>S5761-500G</td><td></td></tr><tr><td>Fenyhydrazine</td><td>Sigma</td><td>P26252-5G</td><td></td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>Sigma</td><td>G5516-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Giemsa</td><td>Sigma</td><td>GS1L-1L</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 3/8 Precision Glide Naald, </td><td>Becton Dickinson</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>1 mL TB Spuit, 26 G x 3/8</td><td>Becton Dickinson</td><td>309625</td><td></td></tr><tr><td>1 cc Insulinspuit, U-100 27 G</td><td>Becton Dickinson</td><td>329412</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan, USB</td><td>Piramal</td><td>2667- 46- 7</td><td></td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010049</td><td></td></tr><tr><td>RPMI</td><td>Gibco</td><td>22400105</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11995065</td><td></td></tr><tr><td>Penicilline/Streptomycine</td><td>Gibco</td><td>10378016</td><td></td></tr><tr><td>Foetaal Runderserum</td><td>Gibco</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Glaswol</td><td>Corning</td><td>3950</td><td></td></tr></tbody></table>

fenotypische analyse van knaagdieren malaria parasiet asexual en seksuele bloed stadia en muggen stadia

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Recente ontwikkelingen in de genetica en systemen biologie technologieën hebben ons begrip van de biologie van malariaparasieten op moleculair niveau bevorderd. Effectieve malariaparasiet doelen voor de ontwikkeling van vaccins en chemotherapie zijn echter nog steeds beperkt. Dit is grotendeels te wijten aan de onbeschikbaarheid van relevante en praktische in vivo infectie modellen voor menselijke Plasmodium soorten, met name voor p. falciparum en p. vivax. Daarom zijn knaagdier malaria soorten uitgebreid gebruikt als praktisch alternatief in vivo modellen voor malaria vaccin, drug targeting, immuunrespons, en functionele karakterisering studies van gecondengeerde Plasmodiumspp. genen. Inderdaad, knaagdier malaria modellen zijn van onschatbare waarde gebleken, vooral voor het verkennen van mug transmissie en lever stage biologie, en waren onmisbaar voor immunologische studies. Echter, er zijn verschillen in de methoden die worden gebruikt voor het evalueren van de fenotypes van transgene en wild-type ongeslachtelijke en seksuele bloed-fase parasieten. Voorbeelden van deze verschillen zijn de keuze van een intraveneuze versus intraperitoneale infectie van knaagdieren met bloed-fase parasieten en de evaluatie van mannelijke gameten exflagellatie. Hierin worden gestandaardiseerde experimentele methoden beschreven voor het evalueren van de fenotypes van ongeslachtelijke en seksuele bloed stadia in transgene parasieten die verslag doen van Reporter-gen of wild type knaagdier malariaparasieten. We ook detail de methoden voor het evalueren van de fenotypes van malariaparasiet muggen stadia (gameten, ookinetes, oöcysten, en sporozoites) in Anopheles muggen vectoren. Deze methoden zijn gedetailleerd en vereenvoudigd hier voor de dodelijke en niet-dodelijke stammen van p. berghei en p. yoelii maar kan ook worden toegepast met enkele aanpassingen aan p. chabaudi en p. vinckei knaagdier malaria soorten.

Het succes van het toepassen van reverse genetische hulpmiddelen en technieken voor malariaparasieten heeft een revolutie teweeggebracht in het gebied van malaria onderzoek, met de mogelijkheid om toe te voegen, te verwijderen, of te wijzigen specifieke genomische segmenten van verschillende Plasmodium soorten39. Belangrijk is dat de uit te leggen genomische loci is geïdentificeerd en met succes gebruikt om fluorescentie eiwit markers in knaagdieren en men...

Als gevolg van de opvallende gelijkenissen van de levenscyclus en de biologie van knaagdieren malariaparasieten voor menselijke malariaparasieten, knaagdieren malaria modellen zijn onmisbaar geworden voor malaria onderzoek. Hierin hebben we enkele van de belangrijkste technieken gestandaardiseerd die worden gebruikt in de fenotypische analyse van wild-type en transgene knaagdier malaria soorten.

Fenotypische analyse van knaagdieren malaria parasiet asexual en seksuele bloed stadia en muggen stadia

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...

Door de opvallende gelijkenissen van de levenscyclus en biologie van knaagdiermalariaparasieten, de menselijke malariaparasieten, zijn knaagdiermalariamodellen onmisbaar geworden voor malariaonderzoek. Deze standaardmethoden kunnen helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van malariaonderzoek over hoe u een fenotypische analyse van wilde type en transgene knaagdiermalariasoorten uitvoeren. Het aantonen van de procedures zal worden afgestudeerde studenten Gozde Deveci en Ilknur Yilmaz uit mijn laboratorium.Begin met het snel ontdooien cryo bewaard bevroren parasiet voorraden en onmiddellijk met behulp van een een milliliter spuit uitgerust met een 26-gauge naald om ten minste twee donormuizen per genotype intraperitoneally injecteren met ongeveer 200 microliter voorraad. Vierentwintig uur na de injectie, gebruik een 24 of 26 meter naald om de staart van de eerste muis prikken en het verzamelen van de bloeddruppel op een microscoop dia. Gebruik de korte rand van een andere dia om het bloed snel over de eerste dia te smeren.Wanneer het bloed volledig is gedroogd, bevestig de dia's in 100% methanol gedurende ten minste een minuut. Bevlek de vaste monsters in Gie

phenotypic-analysis-rodent-malaria-parasite-asexual-sexual-blood

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Zodra een gen is geïdentificeerd als potentieel vuurvaste voor malaria, dient te worden geëvalueerd voor zijn rol in het voorkomen van Plasmodium besmettingen binnen de mug. Dit protocol illustreert hoe de mate van plasmodium infecties van muggen kunnen worden getest. De technieken voor de voorbereiding van de gametocyt cultuur, membraan voeden muggen menselijk bloed, en het testen van virale titers in de mug middendarm worden gedemonstreerd.

Protocol voor Plasmodium falciparum Infecties in Muggen en Infection Fenotype Bepaling

In dit interview, George Dimopoulos richt zich op de fysiologische mechanismen die door muggen om Plasmodium falciparum en dengue virus infecties te bestrijden. Uitleg wordt gegeven voor de manier waarop de belangrijkste vuurvaste genen, zijn deze genen die resistentie tegen pathogenen vector, die in de mug, en hoe deze kennis kan worden gebruikt om transgene muggen die niet in staat zijn om de malaria parasiet of dengue virus dragen genereren.

Bouwen aan een betere Mosquito: Het identificeren van de genen Enabling malaria en knokkelkoorts verzet in A. gambiae en A. aegypti muggen

Genetische kruisen van knaagdieren malariaparasieten worden uitgevoerd door het voeren van twee genetisch verschillende parasieten aan muggen. Recombinant nakomelingen zijn gekloond van muizen bloed na waardoor muggen om geïnfecteerde muizen bijten. Deze video laat zien hoe de productie van genetisch kruisen...

Protocol voor de productie van een genetische Kruis van het knaagdieren malariaparasieten

This video demonstrates the generation of an experimental mouse model of cerebral malaria. Sporozoites isolated from Plasmodium berghei-infected female mosquitoes are injected into a restrained mouse's tail veins, leading to blood-brain barrier disruption and brain inflammation, causing cerebral malaria. This infected mouse model offers a valuable tool to study in vivo microvascular pathology associated with cerebral malaria.

Generation of a Mouse Model of Experimental Cerebral Malaria Using Host Mosquito-Derived Sporozoites

Tuberculose en malaria zijn twee van de meest voorkomende infecties bij mensen en de belangrijkste oorzaken van morbiditeit en mortaliteit in arme bevolking in de tropen. Wij vestigden een experimenteel model systeem om resultaten van malaria-tuberculose co-infectie te bestuderen in muizen na challenge met beide ziekteverwekkers via hun natuurlijke route van infectie.

Een experimenteel model om te studeren Tuberculose-Malaria Coinfection op Natuurlijke Transmissie van Mycobacterium tuberculosis En Plasmodium berghei</i

Muggen die malaria overdragen, hebben een aantal epidemiologisch belangrijke kenmerken die alleen kunnen worden gedetecteerd met behulp van moleculaire technieken. Door gebruik te maken van een MALDI-TOF-gebaseerde SNP-genotyperingsplatform, hebben we een test ontwikkeld voor het gelijktijdig detecteren van meerdere belangrijke eigenschappen (soorten, insecticideresistentie, parasietinfectie en gastheukeuze) van malariavectoren.

Een Multi-detectie test voor Malaria Zenden Muggen

We beschrijven een muismodel van experimentele cerebrale malaria en laten zien hoe inflammatoire en microvasculaire pathologie in vivo kunnen worden gevolgd met behulp van magnetische resonantie beeldvorming.

In vivo Tracking van Oedema Ontwikkeling En Microvasculaire Patologie In Een Model Van Experimentele Cerebrale Malaria Met Magnetic Resonance Imaging

Gedetailleerd onderzoek naar muggenstadia van malariaparasieten is van cruciaal belang voor het ontwerpen van effectieve transmissieblokkeringsstrategieën. Dit protocol laat zien hoe infectieuze gametocyten effectief kunnen worden gekweekt en deze gametocyten vervolgens aan muggen kunnen worden gevoerd om muggenstadia van P. falciparumte genereren .

Plasmodium falciparum Gametocytencultuur en muggeninfectie door kunstmatige membraanvoeding

De standaard membraanvoedingstest (SMFA) wordt beschouwd als de gouden standaard voor de beoordeling en identificatie van potentiële antimalariaverbindingen. Dit kunstmatige voedingssysteem wordt gebruikt om muggen te infecteren om de effecten van dergelijke verbindingen op de intensiteit en prevalentie van de Plasmodium falciparum-parasiet verder te evalueren.

Standaard membraanvoedingstest voor de detectie van Plasmodium falciparum-infectie in Anopheles Mosquito Vectors

Malaria wordt overgedragen door inoculatie van het sporozoietstadium van Plasmodium door geïnfecteerde muggen. Transgeen Plasmodium heeft ons in staat gesteld de biologie van malaria beter te begrijpen en heeft rechtstreeks bijgedragen aan de ontwikkeling van malariavaccins. Hier beschrijven we een gestroomlijnde methodologie om transgene Plasmodium berghei sporozoïeten te genereren.

Genereren van genetisch gemodificeerde Plasmodium berghei Sporozoïeten

De seksuele ontwikkeling van Plasmodium vindt plaats in de middendarm van de mug. Het richten op de seksuele stadia van de parasiet is een veelbelovende strategie om de overdracht te blokkeren. We ontwikkelden Ookluc, een transgene P. berghei die nanoluciferase tot expressie brengt na de vorming van zygoten, waardoor high-throughput screening van transmissieblokkerende verbindingen mogelijk is. In dit artikel worden de methoden voor screening met Ookluc beschreven.

Ookluc: een Plasmodium berghei-lijn voor het identificeren van transmissieblokkerende verbindingen

Leer gestandaardiseerde fenotypische analyse van knaagdier malaria parasieten voor malariabestrijding. Deze methoden ondersteunen betrouwbaar onderzoek naar bloedstadia en transmissie naar muggen.

Fenotypische analyse van knaagdieren malaria parasiet asexual en seksuele bloed stadia en muggen stadia

Meer video's verkennen