De herkenningstest roman-Object voor het onderzoek naar leren en geheugen in muizen

Het algemene doel van deze gedragstest is om verschillende aspecten van leren en geheugen bij muizen te testen. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van talrijke vragen op het gebied van knaagdiercognitie, van de basis van het ontwikkelen van een dieper begrip, voor bepaalde aspecten van leren in geheugen en muizen, tot aan complexere kwesties, zoals cognitieve stoornissen, inclusief ziektemodellen, zoals de ziekte van Alzheimer, tot de exploratie van potentiële cognitieve verbetering. Het grote voordeel van de ORT is de eenvoud, efficiëntie en flexibiliteit en het bestuderen van leren en geheugen bij muizen.

Deze procedure wordt gedemonstreerd door Andrei Jeltyi, een laboratoriumtechnicus uit ons lab. Begin met het selecteren van molgrote objecten die gemakkelijk door het dier kunnen worden onderscheiden, maar een vergelijkbare mate van complexiteit in eigenschappen hebben, zoals textuur, vorm of helderheid, om eventuele geïnduceerde objectvoorkeur die de resultaten kan beïnvloeden te minimaliseren. Om geïnduceerde voorkeuren verder te verminderen, zorg ervoor dat muizen op beide objecten of op geen van beide objecten kunnen klimmen.

De mogelijkheid om op een object te klimmen kan de interesse in exploratie verhogen. Om de stress van fel licht te minimaliseren, gebruik verstrooid laag licht waarbij het midden van het labyrint ongeveer 20 lux verlicht is. Laat muizen ten minste een uur acclimatiseren aan nieuwe testruimten voordat ze elke dag worden gebruikt en houd de temperatuur en vochtigheid vergelijkbaar met de reguliere huisvestingsomstandigheden.

Let op, de muizen moeten één tot twee keer per dag gedurende ten minste één minuut worden behandeld, gedurende één tot twee weken voorafgaand aan de test. Gebruik voor de hoofdarena een vierkante kamer gemaakt van wit of zwart niet-poreus plastic, in contrast met de kleur van de muis. Begin met het verwijderen van de muis uit zijn kooige en plaats hem in het midden van de open lege arena.

Sta vrije exploratie van de arena gedurende vijf minuten toe. Zodra de kooige leeg is, bewaar deze voor gebruik als kooige op de volgende dag. Aan het einde van de vijf minuten, verwijder de muis en plaats hem in een kooige.

Plaats de muis niet terug in zijn oorspronkelijke kooige, omdat dit het gedrag van de overige muizen die getest moeten worden, kan beïnvloeden. Reinig vervolgens het apparaat grondig tussen muizen, met behulp van 70% volume per volume ethanol. Begin vervolgens de trainingsfase of T1, door twee identieke objecten in tegenoverliggende kwadranten van de arena te plaatsen.

Bijvoorbeeld, één in de noordwestelijke hoek en één in de zuidoostelijke hoek. Bevestig eventuele objecten die te licht zijn aan de vloer met verwijderbare montagekit. Compenseer het gebruik van elke set objecten evenals de locatie van het nieuwe object in elk van de vier hoeken van de arena.

Zorg ervoor dat u weet welke diagonaal voor welk dier wordt gebruikt, zodat de diagonaalgebruik op de trainingsdag de vorm heeft zoals die op de testdag voor elke muis wordt gebruikt. 24 uur na habituatie, verwijder de muis uit zijn kooige en plaats hem in het midden van de arena, op gelijke afstand van de twee identieke objecten om met de training te beginnen. Sta vrije exploratie toe voor minimaal vijf minuten, als u een stam muizen gebruikt die bekend staat om lage locomotorische of exploratie-activiteit, verleng de proef tot 10 minuten voor alle muizen in de cohorten.

Aan het einde van de trainingsproef, verwijder de muis en plaats hem in de kooige. Zodra de kooige leeg is, bewaar deze voor gebruik als kooige op de testdag. Zorg ervoor dat u het apparaat en de objecten tussen de muizen schoonmaakt.

Begin vervolgens met de testfase of T2, door het tijdens de training gebruikte bekende object en één nieuw object in tegenoverliggende kwadranten van de arena te plaatsen. Gebruik dezelfde locaties als u tijdens de training voor elke muis gebruikt. Bij het T1 naar T2-interval van kiezen, verwijder de muis uit zijn kooige en plaats hem in het midden van de arena, op gelijke afstand van het bekende object en het nieuwe object.

Sta vrije exploratie gedurende 10 minuten toe. Ten slotte, aan het einde van de testproef, verwijder de muis en plaats hem in de kooige. Voor analyse wordt exploratie gedefinieerd als de neus gericht naar het object binnen twee tot drie centimeter met actief vibrerend vegen.

De muis die op het object zit, wordt echter niet meegeteld voor de exploratietijd. Voor zowel T1 als T2, scoor de eerste vijf minuten en bereken de totale exploratietijd voor beide objecten voor elke sessie. Als de muis niet voldoet aan de minimale exploratietijd van 20 seconden voor beide objecten, blijf scoren na vijf minuten totdat de totale exploratie 20 seconden overschrijdt.

Verleng T1 en T2 tijd tot 10 minuten voor stammen van muizen die een lage exploratie hebben en dit minimumcriterium niet binnen vijf minuten bereiken, zoals waargenomen tijdens pilottesten. Ten slotte, als muizen niet binnen 10 minuten een minimum van 20 seconden exploratie bereiken voor beide objecten voor zowel T1 als T2, sluit ze uit van de analyse, aangezien niet kan worden bevestigd dat het dier voldoende tijd besteedde aan het verkennen om te leren en te discrimineren. De objectherkenningstaak is een efficiënte en flexibele methode voor het bestuderen van leren en geheugen bij muizen, waarbij fosfodiësterase 2-remmers zijn aangetoond verbetering tijdens deze taak.

In vergelijking met voertuig, heeft toediening van de PDE2-remmers bays 60-7550 of ND7001, de geheugen aanzienlijk verbeterd op een dosisafhankelijke manier, wanneer gegeven 30 minuten voorafgaand aan de training. Wanneer toegediend op verschillende tijdstippen, ten opzichte van training en testen, heeft de PDE2-remmer bay 60-7550 zijn geheugen aanzienlijk verbeterd wanneer gegeven 30 minuten voorafgaand aan de training, evenals onmiddellijk na de training en 30 minuten voorafgaand aan het herinneren. Eenmaal beheerst, kan deze techniek in twee tot drie dagen worden voltooid als deze correct wordt uitgevoerd.

Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk