Name: Herhaald bloedinzameling van staart ader van niet-verdoofd ratten met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Leer een eenvoudige staartaderbloedafname bij niet-verdoofde ratten met een vacuümbuisysteem. Deze methode minimaliseert blootstelling aan bloed en maakt meerdere monsters van één venipunctie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben geen bevestigingen te maken.

Alle procedures werden goedgekeurd door de Tongji Medical College Council op het Animal Care Comité van Huazhong Universiteit voor wetenschap en technologie (Wuhan, China). Het manuscript werd voorbereid volgens aankomen (dier onderzoek: rapportage van In Vivo experimenten) richtsnoeren6.
1. veehouderij
<ol><li>Gebruik van Sprague-Dawley (SD) ratten (n = 20, 10 mannen, 8 weken oude, gewicht 261 tot 291 g, betekenen = 272.85 ±9.07 g) uit de experimentele dieren Center van Huazhong Universiteit van wetenschap en technologie en onderhouden van ratten volgens de richtsnoeren voor de zorg en het gebruik van Proefdieren die worden gepubliceerd door de ons National Institute of Health (NIH publicatie No.85-23, herziene versie van 1996)</li>
	<li>Huis onder standaardomstandigheden met gratis toegang tot voedsel en drinkwater. Houden beddengoed ratten in 530 cm2 kooien met hout-scheren. Huis twee ratten in elke kooi. Alle kooien open te houden voor het milieu van de kamer (geen micro-isolatie of geventileerde kooien)</li>
	<li>Zorgen dat het personeel dat betrokken is in de experimentele protocol regelmatig behandelen de ratten.</li>
	<li>Handhaven van de kamertemperatuur tussen 21 ° C en 23 ° C. Tarieven geven een normale zout dieet (0,3% NaCl) tijdens de studie.</li>
</ol>2. bloed verzameling Procedure
Opmerking: Het systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed bestaat uit een dubbel-puntige naald [22 G (0.7 mm x 25 mm)], een plastic houder, en een reeks van vacuümbuizen (2 mL) met rubberen stoppen (Figuur 1).
<ol><li>Plaats de rat in een kunststof beteugeling houder en wassen van de staart met warme (20-30 ° C) water te verwijderen van zichtbaar vuil of ontlasting. Terwijl een assistent de staart in een verlengde positie houdt, veeg de staart met 70% ethanol, en reinig met gaas om de ader die duidelijk.</li>
	<li>Breng de tip van 22 G vlinder naald in een van de laterale staart nerven (ongeveer 5 mm) op een positie ongeveer 2-3 cm afstand van het puntje van de staart onder hoek van ongeveer 20 ° (Figuur 2). Het verzamelen van bloed in de buis vacuüm collectie door het invoegen van het einde van de rubber van de vlinder naald in de vacuüm bloed collectie buis (Figuur 3). Opmerking: De maximale collectie bloed volumewaarde bedraagt 1,2 mL7.</li>
	<li>Na de bloedinzameling, verwijder de naald en zachtjes druk uitoefenen op de site van de punctie met gaas voor 15-30 s om te stoppen met de doorstroming van het bloed. Vervolgens laat de rat van de kunststof houder van de beteugeling en de rat terug naar haar kooi.</li>
	<li>Gebruik buizen die EDTA als een antistollingsmiddel bevatten voor het verzamelen van bloed plasma. Voorzichtig omkeren de buis meerdere malen te mengen antistollingsmiddel in het bloed en leg de monsters op ijs verticaal.</li>
	<li>Centrifugeer het bloed monster collectie buizen in een gekoelde centrifuge bij 2.000 x g gedurende 10 minuten om te scheiden van plasma of serum.</li>
	<li>Pak de plasma/serum, verzorgen niet te storen van de rode en witte bloedcellen lagen. Gebruik voor het verzamelen van bloedserum, buizen zonder antistollingsmiddel. Beide soorten monster kunnen worden onmiddellijk gebruikt of opgeslagen bij-80 ° C voor maximaal één jaar. Opmerking: Succesvolle bloedinzameling werd gedefinieerd als het verkrijgen van 1,2 mL bloed elke keer. Maximale punctie tijd was ingesteld naar drie proeven, als het volume van de totale bloed lager dan 1,2 mL na de derde lekke band was, was het gedefinieerd als een mislukte bloedinzameling. De duur van de bemonstering begint vanaf de staart ader punctie voor de verwijdering van de vlinder naald na bloed-collectie.</li>
	<li>
Het verzamelen van bloed twee keer binnen twee weken7.
	<ol>
<li>Om te testen en controleren van de haalbaarheid van deze methode, trainen twee medische studenten (beginners) voor 2 h alvorens dit bloed collectie protocol uit te voeren. Gebruik van twintig ratten en bloed trekken uit 10 ratten van 2 ervaren fellows (experimentele groep) en 10 ratten door de 2 medische studenten (beginner groep).</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. statistische analyse
<ol><li>Express-gegevens als een gemiddelde ± standaardafwijking en analyseren met PASW Statistics 17. Een α-waarde van 0.05 werd daarom gekozen voor p < 0.05 werd beschouwd als een statistisch significant.</li>
</ol>

<ol><li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+of+the+rat+tail%3A+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li>
<li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+Guidelines+on+Drawing+Blood%3A+Best+Practices+in+Phlebotomy+WHO+Guidelines+Approved+by+the+Guidelines+Review+Committee%22">WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee</a>. , (2010).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
<li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry%2C+haematology+and+practical+usage+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Feline+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li>
<li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Assoc+Thai%22%5BJournal%5D)">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen

Dit verslag beschrijft een methode collectie easy-to-learn bloed bij ratten. Onze resultaten toonden aan dat deze methode haalbaar is voor herhaaldelijk het verzamelen van een grote hoeveelheid bloed van ratten. Bovendien, deze methode gemakkelijk kan worden beheerst met een korte leercurve. Deze procedure kan worden uitgevoerd bij ratten niet-verdoofd en veroorzaakt alleen minimale stress voor de dieren.
Bloed kunnen worden verzameld van ratten op verschillende locaties. De ader van de staart is een superieure locatie voor bloed bemonstering4. Het is echter niet altijd eenvoudig te verkrijgen genoeg bloed volume van de dunne en lage bloed stroom staart ader van de ratten. Het systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed wordt meestal gebruikt voor het verzamelen van bloedmonsters van patiënten in de dagelijkse klinische praktijk. Dit systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed is bij patiënten en onderzoek dieren gebruikt voor een lange tijd8,9,10. Dit systeem bestaat uit een vacuüm bloed collectie buis met siliconen gecoate binnenband muur en vlinder naald. Het was gebaseerd op het beginsel van de vacuüm onderdruk en laat de continue tekening van bloed zonder het risico van het verzamelen van bloed, dat ook de kans op besmetting en hemolyse11 vermindert. De hoeveelheid bloedmonster in de katheter is ongeveer 0.3 mL. Na de terugtrekking van de naald uit de staart ader, zullen het bloed geblokkeerd in de katheter vloeien in de verzamelen vacuüm buis als gevolg van het vacuüm. Deze methode is ook van toepassing voor het verzamelen van bloed van ratten met een gewicht van minder dan 100 g met het gebruik van een kleinere naald punctie.
Dit bloed collectie methode heeft verschillende voordelen. Deze procedure slechts minimale schade toebrengt aan ratten en bloedinzameling kan worden uitgevoerd zonder het gebruik van verdoving, dus de invloed van de stress-respons en de verdoving op het bloedmonster kan worden vermeden. Onze observaties bleek dat ratten stil in de plastic houder van de matigende tijdens de procedure en er geen doden tijdens deze experimenten waren. Ten tweede, herhaalde bloedinzameling elke één of twee dagen is mogelijk, waardoor frequente bemonstering van bloed met een voldoende volume voor verschillende onderzoeksdoeleinden. Ten slotte, deze methode is eenvoudig te leren en was gemakkelijk onder de knie door beginners na een periode van korte (2 h) leren, zoals aangegeven door de soortgelijke slagingspercentages en de punctie tijden tussen de groepen van het experimentele en beginners in dit verslag. In een vorig rapport, Lee et al. aangetoond een gelijkaardige methode voor de bemonstering van bloed uit de ader van de laterale staart van de rat-4. Onze methode is eenvoudiger dan die gerapporteerd door Lee et al. 4 in dat we direct de naald punctie in de ader van de staart en het andere uiteinde van de buis invoegen is direct verbonden met de vacuüm buis voor het verzamelen van het bloed, zonder het gebruik van een extra spuit en handmatige aspiratie van het bloed en zonder de noodzaak van ' melk ING' de ader ter vergemakkelijking van de bloedstroom. Het verzamelen van bloed met dit gesloten systeem vermindert de kans op besmetting van bloed. Gebruik van de plastic beteugeling houder ook vermindert de stress aan de rat en bevordert de fixatie van de staart.
De volgende twee stappen zijn cruciaal voor de succesvolle toepassing van deze methode. 1) het uitbreiden van de staart en te voorkomen dat het verkeer van de staart; 2) voorzichtig doorprikken de ader onder een hoek van 20 ° te voorkomen van lekke band via de ader en houd de naald punctie in de ader.
Kortom, is de aangenomen vacuüm bloed collectie methode bij ratten veilig, haalbaar en makkelijk om te oefenen. Deze methode kan regelmatige bemonstering van bloed met een volume van voldoende bloed verkregen uit niet-verdoofd ratten.

Bloedmonsters van ratten is vereist voor een breed scala aan experimentele studies. Technieken voor de bloedinzameling van de rat omvatten aanprikken van het hart, retro-orbitaal plexus halsslagader, saphenous ader, staart bloedvaten, halsslagader, abdominale aorta en vena cava. De meeste technieken (behalve saphenous ader en staart bloedvat punctie) vereisen verdoving1,2. Aderen van de staart van de rat zijn routinematig doorboord voor bloedmonsters en vasculaire injectie. Na behandeling van de staart met warm water, zijn de bloedvaten goed verwijde en geschikt voor manipulatie, zelfs wanneer er ratten zijn narcose3.
Ondanks de ontwikkeling van nieuwe en verbeterde technieken voor het verkrijgen van bloedmonsters in kleine laboratorium dieren2, is het niet altijd gemakkelijk te verkrijgen van voldoende bloed bij de bemonstering van kleine dieren. De ader van de staart van ratten is een superieure locatie voor bloed bemonstering4. Echter, de ader van de staart is dun, dus het is soms moeilijk te doorprikken en lang zou duren om genoeg bloed als gevolg van zijn lage bloedtoevoer. Bloedinzameling via een opzuigen buis systeem is een typische methode in de dagelijkse klinische praktijk. Dit gesloten systeem voor het verzamelen van bloed vermindert het risico van directe blootstelling aan bloed en gemakkelijker meerdere monsters van een enkele Venapunctie5te nemen. Het onderhavige verslag wordt een eenvoudige staart veneuze bloedmonsters methode bij niet-verdoofd ratten met behulp van het opzuigen buis systeem beschreven. Deze methode is gemakkelijk te beheersen en kan worden gebruikt voor het verkrijgen van een grote hoeveelheid bloed herhaaldelijk bij ratten.

<table><tbody><tr><td>een dubbelpuntige naald</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>22G&nbsp;</td><td>(0.7&times;25mm)</td></tr><tr><td>vacuümbuizen</td><td>Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td><td>2 ml</td><td></td></tr><tr><td>rat houder&nbsp;</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>250g rat houder model</td><td></td></tr><tr><td>normale zoutvoeding voor ratten</td><td></td><td></td><td>Ratten ontvingen gedurende het hele onderzoek een normale zoutvoeding (0,3% NaCl)</td></tr><tr><td>SPSS-software voor statistische analyse</td><td>SPSS Inc,&nbsp; Chicago; USA&nbsp;</td><td>Versie 17.0.&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

herhaald bloedinzameling van staart ader van niet-verdoofd ratten met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Bloed kunnen worden verzameld van ratten in een aantal locaties van de bemonstering. Bijvoorbeeld, is de staart-ader een superieure locatie voor bloedmonsters. Echter is de ader van de staart dun zodat het is soms moeilijk te doorprikken. Bovendien, de staart-ader heeft lage bloedtoevoer en vereist een lange bemonsteringstijdstip om voldoende bloed. Dit verslag beschrijft een eenvoudig bloed bemonsteringsmethode, de vacuüm bloed collectie methode, die meestal gebruikt wordt om het verkrijgen van bloedmonsters van patiënten, hier gebruikt voor niet-verdoofd ratten. De 22 G vlinder naald tip is ingevoegd in een van de aders van de laterale staart ongeveer 2-3 cm vanaf het puntje van de staart onder een hoek van ongeveer 20°, en bloed in de buis vacuüm collectie werd verzameld door het invoegen van het einde van de rubber van de vlinder naald in de va cuum bloed collectie buis. De huidige experimentele resultaten blijkt dat het slagingspercentage 95% in de experimentele groep en 90% in de groep van de beginner. Het slagingspercentage en punctie tijden waren vergelijkbaar tussen twee groepen. De bemonstering duur was aanzienlijk korter in de experimentele groep ten opzichte van beginner groep. Kortom, is deze methode vacuüm bloed collectie voor sequentiële bloedmonsters van de ader van de staart van niet - narcose ratten haalbaar en easy-to-learn, die kan dienen als een betrouwbare alternatief voor andere conventioneel bloed sampling technieken voor gebruikt ratten.

Duur van de bemonstering, lichaamsgewicht en bloed collectie volume van de twee groepen Bloed werd bijeengezocht uit 10 ratten (5 reutjes) tweemaal binnen twee weken in elke groep. Het gemiddelde lichaamsgewicht in beide groepen gelijkaardig was (272.00 ±9.66 g en 273.70 ±8.87 g). Bemonstering van duur was aanzienlijk korter in de experimentele groep ten opzichte van beginner groep (2,77 ±0.53 min vs. 3,28 ±0.83 min, p < 0.05) (tabel 1).
Succes tarief en perforaties van de tijden van twee groepen Het slagingspercentage was 95% (19/20) in de experimentele groep en 90% (18/20) in de beginner groep (p > 0,05). Punctie tijden waren niet significant verschillend tussen de twee groepen (1,50 ±0.61 min vs. 1.85 ±0.75 min, p > 0,05) (tabel 2). Deze resultaten geven aan deze methode is eenvoudig te leren, en de techniek onder de knie kan worden na de training voor 2 h.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> Figuur 1 : vacuüm blood collection tube 2 mL (links); 22 G vlinder naald (midden); de kunststof beteugeling houder (rechts). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> Figuur 2 : De naald tip was de laterale staart ader (ongeveer 5 mm) ingevoegd op de positie ongeveer 2-3 cm afstand van het puntje van de staart onder hoek van ongeveer 20 °. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> Figuur 3 : Succesvol Venapunctie. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">Experimentele groep</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">Beginner groep</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Geslacht</td>
			<td>Lichaamsgewicht (g)</td>
			<td>Verzamelde bloed volume (mL)</td>
			<td>bemonstering duur (min)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Geslacht</td>
			<td>Lichaamsgewicht (g)</td>
			<td>Verzamelde bloed volume (mL)</td>
			<td>bemonstering duur (min)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-1</td>
			<td>man</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1-1</td>
			<td>man</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-2</td>
			<td>man</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1-2</td>
			<td>man</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>man</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2-1</td>
			<td>man</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-2</td>
			<td>man</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2-2</td>
			<td>man</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>man</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B3-1</td>
			<td>man</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-2</td>
			<td>man</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3,88</td>
			<td></td>
			<td>B3-2</td>
			<td>man</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>man</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.41</td>
			<td></td>
			<td>B4-1</td>
			<td>man</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-2</td>
			<td>man</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,52</td>
			<td></td>
			<td>B4-2</td>
			<td>man</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>man</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5-1</td>
			<td>man</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-2</td>
			<td>man</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5-2</td>
			<td>man</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,33</td>
			<td></td>
			<td>B6-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>274</td>
			<td>0.9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B6-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,82</td>
			<td></td>
			<td>B7-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,05</td>
			<td></td>
			<td>B8-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,52</td>
			<td></td>
			<td>B9-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4,38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10-1</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3,25</td>
			<td></td>
			<td>B10-2</td>
			<td>vrouw</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>Gemiddelde</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2,77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Nl-1: serienummer van ratten in de experimentele groep voor de eerste collectie van bloed.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Nl-2: serienummer van ratten in de experimentele groep voor de tweede collectie van bloed.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-1: serienummer van ratten in de groep van de beginner voor het eerste bloed-collectie.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-2: serienummer van ratten in de groep van de beginner voor de tweede collectie van bloed.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabel 1: Resultaten van bloed opgevangen in de experimentele groep en de groep van de beginner.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>Bloed collectie keer</td>
			<td>Gemiddelde punctie keer</td>
			<td>Een punctie van de tijd</td>
			<td>Twee keer perforaties</td>
			<td>Driemaal perforaties</td>
			<td>Mislukt</td>
			<td>Slagingspercentage</td>
		</tr>
<tr>
<td>Experimentele groep</td>
			<td>20</td>
			<td>1,50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>Beginner groep</td>
			<td>20</td>
			<td>1.85 ±0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Een punctie van de tijd: aantal ratten met succesvolle bloedinzameling na de eerste lekke band</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Twee keer lek: aantal ratten met succesvolle bloedinzameling na de tweede lekke band</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Drie keer een lekke band: aantal ratten met succesvolle bloedinzameling na de derde lekke band</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">Mislukt: ratten met het aantal mislukte bloedinzameling na de derde lekke band</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>Tabel 2: Vergelijking van de punctie times en slagingspercentages van de experimentele groep en de groep van de beginner.

Hier beschrijven we een eenvoudige staart veneuze bloedmonsters methode bij niet-verdoofd ratten met behulp van een systeem van de buisjes opzuigen. Deze methode vermindert het risico van directe blootstelling aan bloed en vereenvoudigt meerdere bemonstering van een enkele Venapunctie.

Herhaald bloedinzameling van staart ader van niet-verdoofd ratten met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

In dit rapport wordt de methode voor eenmalige bloedafname uit de staartвена bij niet-genarceerde ratten beschreven met behulp van een vacuümsysteem voor extractiebuizen. Dit wordt bereikt door eerst de rat te fixeren, de staart te reinigen en deze af te vegen met 70% ethanol. Vervolgens wordt een vlindernaald in een van de gedilateerde laterale staartvenen ingebracht en wordt het bloed opgevangen in de vacuümopvangbuis aan het rubberen uiteinde van de vlindernaald.Ten slotte wordt de naald verwijderd en wordt de bloedpunctie gestelpt. Het belangrijkste kenmerk van deze afnametechniek is het gebruik van een vacuümsysteem voor extractiebuizen. Hiermee kan het risico op direct contact met bloed worden verminderd en is het eenvoudiger om meerdere monsters te nemen via één enkele venepunctie.De procedure zal worden gedemonstreerd door twee leden van ons laboratorium, Yanyang Cheng en Zhong Peng. Bereid ter start een plastic houder, vacuümbuisjes met rubberen stop en een dubbele puntnaald voor. Plaats dit materiaal op een steriel oppervlak.Plaats de rat vervolgens in de plastic fixatiehouder, waarbij u erop let dat de voor- en achterpoten in een comfortabele positie zijn en de ademhaling niet wordt belemmerd. Zet de houder daarna op een stevig werkoppervlak. Laat de staart gestrekt over de rand van de tafel hangen.Om het bloedmonster te verkrijgen, wast u de staart met water van 20 tot 30 graden Celsius om eventueel zichtbaar vuil te verwijderen. Veeg de staart af met 70% ethanol om de bloedvaten in de staart te dilateren. Lokaliseer vervolgens de rechter- of linkerstaartader, lateraal van de arterie, voor de bloedafname.Het nemen van een sectie van de ader in het onderste deel van de staart. Pak de staart voorzichtig maar stevig vast bij de punt om de staart recht te houden tijdens de monsterneming. Voer nu de punt van de 22g vlinder-naald ongeveer vijf millimeter diep in een van de laterale staartaders, op een positie van ongeveer twee tot drie centimeter vanaf de punt van de staart, onder een hoek van ongeveer 20 graden.Zodra de ader is gepenetreerd, zal het bloed in de naald stromen. Steek nu snel het rubberen uiteinde van de vlindernaald in de vacuümbuis voor bloedafname. Het bloed zal langzaam in de vacuümbuis stromen.Het geplande bloedvolume is elke keer 1,2 milliliter. Wanneer er voldoende monstervolume is verzameld, wordt de naald uit de ader getrokken en wordt er kort druk uitgeoefend op de insteekplaats om de bloeding te stoppen. Gebruik voor het afnemen van bloedplasma buizen die EDTA bevatten als antistollingsmiddel.Keer de buis voorzichtig enkele keren om om het bloed te mengen en te decoaguleren. Plaats de monsters vervolgens verticaal op ijs. Centrifugeer de verzamelbuizen met volbloed tien minuten lang in een gekoelde centrifuge om plasma en serum te scheiden.Elueer het plasma, waarbij u er zorg voor draagt de lagen rode en witte bloedcellen niet te verstoren. Gebruik voor het verzamelen van bloemserum buizen zonder antistollingsmiddel. Beide typen monsters kunnen onmiddellijk worden gebruikt of bewaard worden bij temperaturen onder 80 graden Celsius voor maximaal één jaar.Om de haalbaarheid van deze methode te testen en te verifiëren, werden twee medische studenten gedurende twee uur getraind voordat zij dit bloedafnameprotocol uitvoerden als beginnersgroep. Twee ervaren fellows dienden als experimentele groep. De resultaten toonden aan dat het succespercentage 95% was in de experimentele groep en 90% in de beginnersgroep.Het succespercentage en de punctietijden waren vergelijkbaar tussen de twee groepen. De bemonsteringsduur was significant korter in de experimentele groep vergeleken met de beginnersgroep. Deze bemonsteringstechniek is eenvoudig en efficiënt voor herhaalde bloedafname bij ratten en maakt het mogelijk om telkens een voldoende bloedvolume te verkrijgen.Bovendien is deze methode eenvoudig aan te leren; deze kan worden uitgevoerd bij niet-genarceerde ratten en veroorzaakt minimale stress bij de dieren. Bij het gebruik van een vacuümbloedafnamemethode zorgen het vacuüm en de druk voor een continue bloedafname zonder risico op bloedcontact, wat tevens de kans op contaminatie en hemolyse verkleint.

repeated-blood-collection-from-tail-vein-non-anesthetized-rats-with

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Bloedmonsters zijn nuttig voor het beoordelen van biomarkers van fysiologische toestanden of ziektes in vivo. Hier beschrijven we de methodologie om bloed te bemonsteren uit de laterale staarsafvoerende ader bij de rat. Deze methode levert snelle monsters met minimale pijn en invasiviteit.

Bloedafname van de Lateral staartader van de Rat

Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van bloedmonsters van de rat subclavian ader.

Subclavian ader punctie als een alternatieve methode van bloed monster collectie bij ratten

Deze studie meldt bloedmonsters van staart ader in muizen met behulp van een systeem van de buisjes opzuigen met lenzenvloeistof vergrootglas. Onze methode is makkelijk om te oefenen en kan worden gebruikt voor herhalen bloedmonsters in muizen.

Gemodificeerde bloedinzameling uit staart aderen van muizen niet-verdoofd met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed en lenzenvloeistof Vergrootglas

Het huidige protocol beschrijft een eenvoudige en efficiënte methode voor het verzamelen van bloed uit de subclavia-ader bij ratten. Het maakt snelle, tijdige en gemakkelijk identificeerbare bemonstering zonder anesthesie mogelijk en verkrijgt bloed van hoge kwaliteit door herhaalde monsterverzameling.

Repetitieve bloedafname uit de subclavia-ader van bewuste rat

Hier presenteren we een protocol om snelle, eenvoudige en betrouwbare alternatieven voor bloedafname te bieden voor het rattenmodel. We beschrijven drie verschillende bloedafnamemethoden, afhankelijk van de context: staartaderpunctie onder anesthesie of op een bewust dier en dorsale penisaderpunctie onder anesthesie.

Gemodificeerde staartader en penisaderpunctie voor bloedafname in het rattenmodel

Het protocol toont herhaalde cerebrospinale vocht- en bloedafname van epileptische ratten die parallel worden uitgevoerd met continue video-elektro-encefalogram (EEG)-monitoring. Deze zijn van groot belang voor het onderzoeken van mogelijke verbanden tussen veranderingen in verschillende lichaamsvloeistofmoleculen en epileptische activiteit.

Bemonstering van hersenvocht en bloed uit laterale staartader bij ratten tijdens EEG-opnames

Hier presenteren we een combinatie van effectieve rattenbeperking en subclavia-aderpunctiemethoden die snelle, veilige en herhaalde bloedafname bij ratten zonder verdoving mogelijk maken.

Bloedafname van subclavia-aderen bij bewuste ratten

Deze video toont een dissectie procedure voor de verwerking van de menselijke pancreas in meerdere opslagformaten. Anatomische oriëntatie wordt gedurende de gehele pancreas regio's definitie van regionale eilandje samenstelling en dichtheid mogelijk te maken.

Collectie Protocol for Human Pancreas

Biomarkers zijn direct gemeten biologische indicatoren van ziekte of gezondheid. Van de bevolking en de sociale wetenschappen, moeten biomarkers te zijn gemakkelijk te verkrijgen, het vervoer, en te analyseren. Gedroogde Blood Spot (DBS) collectie voldoet aan deze behoefte, kunnen worden verzameld in het veld met hoge respons en voor een verscheidenheid van biomarkers geanalyseerd.

Gedroogde Blood Spot Collectie van Volksgezondheid Biomarkers voor deelname aan Population Studies maximaliseren

Het gebruik van cytobrush-sampling om lymfocyten en monocyten uit de endocervix te verzamelen is een minimaal invasieve techniek die monsters levert voor analyse van de immuniteit van het vrouwelijke genitale kanaal. In dit protocol beschrijven we het verzamelen van cytobrush-monsters en het isoleren van immuuncellen voor flowcytometrie-analyses.

Collectie, Isolatie, en Flowcytometrische analyse van de menselijke Endocervicale Monsters

Leer een eenvoudige staartaderbloedafname bij niet-verdoofde ratten met een vacuümbuisysteem. Deze methode minimaliseert blootstelling aan bloed en maakt meerdere monsters van één venipunctie mogelijk.

Herhaald bloedinzameling van staart ader van niet-verdoofd ratten met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed

Meer video's verkennen