Effecten van blootstelling van Formaldehyde aan een Rat Model van atopische Dermatitis veroorzaakt door neonatale capsaïcine behandeling

Het algemene doel van deze procedure is om atopic dermatitis-achtige symptomen te induceren door capsaïcine-behandeling bij neonaten. En om het effect van formaldehyde op atopic dermatis-achtige symptomen te meten. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van een belangrijke vraag met betrekking tot de pathofysiologie van atopische dermatitis in het dermatologisch veld.

Het grote voordeel van deze techniek zijn de inductie van atopic dermatitis-achtige symptomen en het opzetten van een belangrijk blootstellingssysteem met de incrementen. Om vijf milligram per milliliter capsaïcine-oplossing te bereiden, voeg je één milliliter Tween 80, één milliliter 100%ethanol en 50 milligram capsaïcine toe aan een 15 milliliter kegelvormige buis. Voeg vervolgens acht milliliter normale zoutoplossing toe aan de kegelvormige buis.

Doe de dop op de buis en schud krachtig totdat er geen gescheiden lagen zichtbaar zijn. Het is van cruciaal belang om de capsaïcine binnen 12 tot 48 uur na de geboorte toe te dienen. Injecteer de capsaïcine-oplossing in het subcutane weefsel op de middellijn en de achterkant van de nek van een neonatale Sprague Dawley Rat.

Om ademstilstand door de capsaïcine-injectie te voorkomen, plaats je de neonaten in een zuurstofkamer totdat de ademhaling weer normaal wordt. Indien nodig, duw je op de borst van de neonaten om de ademhaling te stimuleren. Begin met het voorbereiden van plastic kamers uitgerust met een spiegel om volledige dekking voor bekijking mogelijk te maken en gaten om de ratten te laten ademen.

Plaats de ratten in de plastic kamer en dek het plafond van de kamer af met een zwaar object om te voorkomen dat de deksel opent. Zet vervolgens een digitale videocamera op om tegelijkertijd zowel de spiegelbeelden als de vooraanzichten van de ratten op te nemen. Neem vervolgens het spontane gedrag van de ratten gedurende één uur op.

Speel de videoclips af en tel het aantal krabbende gedragingen zoals die door de rat aan de rechterkant worden vertoond. En de rat in het midden. Om de laesies te scoren, identificeer je de omvang en ernst van de dermatitis in de oren en andere delen van een geanesthetiseerde rat.

Definieer de eenheidsgrootte voor de omvang van de huidlaesies als 0,25 centimeter in het vierkant. En de ernst van de huidlaesies met behulp van deze tabel. Bereid een acrylglasdoos voor die twee connectoren aan tegenoverliggende zijden heeft.

Voor de circulatie van formaldehydegas moet de ventilatie-uitlaat hoger worden geplaatst dan de gasinlaatopening. Verbind buizen met beide connectoren. Leid de ventilatie-uitlaatbuis naar de circulatiekap of buiten het gebouw voor de emissie van het gas.

En verbind de andere inlaatbuis met een medische zuurstofregelaar. Plaats een conventionele rattenkooi in de acrylglasdoos. Doe een week oude ratten in de kooi en verzegel vervolgens de acrylglasdoos zo strak mogelijk om gaslekkage te voorkomen.

Breng kleeffolie aan om de kamer in te pakken en sluit de kamer met een rubberen deksel voor een dichte afdichting. Voeg 0,5% formaldehyde-oplossing toe aan de bevochtigerfles die is aangesloten op de medische zuurstofregelaar. Vergeet niet dat werken met formaldehyde extreem gevaarlijk kan zijn.

En voorzorgsmaatregelen zoals maskers en handschoenen moeten altijd worden genomen bij het uitvoeren van deze procedure. Schakel vervolgens de regelaar in en stel de stroomsnelheid in op vijf liter per minuut. Stel de ratten gedurende twee uur bloot aan formaldehydegas.

Hier zijn representatieve foto's van huidondersteking bij de capsaïcine-behandelde rat. De chronologische ontwikkeling van dermatitis van de capsaïcine-behandelde ratten wordt hier getoond. Deze afbeelding toont de chronologische ontwikkeling van krabbende gedragingen bij de capsaïcine-behandelde ratten.

Dit is een representatieve afbeelding van recidiverende huidlaesies van 16 weken oude capsaïcine-behandelde ratten. Serum IgE-niveaus zijn significant verhoogd bij capsaïcine-behandelde dieren. Er wordt ook een significante verhoging van IL-4 mRNA-expressie waargenomen bij capsaïcine-behandelde dieren.

Een significante verhoging van IL-13 mRNA-expressie bij capsaïcine-behandelde dieren wordt hier getoond. Deze representatieve foto's tonen atopische dermatitis na de vijfde week van behandeling met 1,2 delen per miljoen. En 0,8 delen per miljoen formaldehyde in vergelijking met gecontroleerde behandeling met lucht.

Blootstelling aan 1,2 delen per miljoen formaldehyde, maar niet 0,8 delen per miljoen formaldehyde, verergerde significant de pruritus in het capsaïcine-behandelde atopische dermatitismodel. Vergelijkbare resultaten werden waargenomen bij het meten van dermatitis. Verhoogde serum IgE-niveaus werden waargenomen in het capsaïcine-behandelde AD-rattenmodel behandeld met 1,2 delen per miljoen formaldehyde-blootstelling.

Na deze procedure kunnen andere materialen zoals glycol-oplossing worden gebruikt om aanvullende vragen te beantwoorden met betrekking tot de effecten van specifieke materie op atopische dermatitis. Na deze ontwikkelingen heeft deze techniek de weg geëffend voor onderzoekers op het gebied van dermatologie om de rol van omgevingsfactoren in de pathogenese van atopische dermatitis te onderzoeken.