Name: Technieken voor het onderzoek naar de anatomie van het visuele systeem van Ant (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: Leer licht- en elektronenmicroscopie om de anatomie van het visuele systeem van mieren te bestuderen. Deze technieken schatten visuele parameters en zijn aanpasbaar voor diverse insectensoorten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We zijn dankbaar Jochen Zeil, Paul Cooper en Birgit Greiner voor het delen van hun kennis in de anatomie van insecten en voor het aantonen van enkele van de technieken die wij hier hebben beschreven. We zijn dankbaar om het getalenteerde en ondersteunend personeel van het centrum voor geavanceerde microscopie op ANU en The microscopie Unit op MQU. Dit werk werd gesteund door een gediplomeerde beurs FRE en subsidies van de Australian Research Council (DE120100019, FT140100221, DP150101172).

<ol><li>Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+homing%3A+an+insect+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Visual homing: an insect perspective.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 22, 285-293 (2012).</li>
<li>Wehner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Desert+ant+navigation%3A+how+miniature+brains+solve+complex+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Desert ant navigation: how miniature brains solve complex tasks.</a> J. Comp. Physiol. A. 189, 579-588 (2003).</li>
<li>Fent, K., Wehner, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17779641">Ocelli: a celestial compass in the desert ant Cataglyphis.</a> Science. 228, 192-194 (1985).</li>
<li>Warrant, E. J., Dacke, M. <a target="_blank" href="http://physiologyonline.physiology.org/content/31/3/182">Visual navigation in nocturnal Insects.</a> Physiology. 31, 182-192 (2016).</li>
<li>Taylor, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dual+function+of+Orchid+bee+ocelli+as+revealed+by+x-ray+microtomography%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">The dual function of Orchid bee ocelli as revealed by x-ray microtomography.</a> Curr. Biol. 26, 1-6 (2016).</li>
<li>Hölldobler, B., Wilson, E. O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aH%C3%B6lldobler%2C+B+%22The+Ants%22">The Ants</a>. , Springer-Verlag. Berlin Heidelberg. (1990).</li>
<li>Ali, T. M. M., Urbani, C. B., Billen, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01140185">Multiple jumping behaviors in the ant Harpegnathos saltator.</a> Naturwissen. 79, 374-376 (1992).</li>
<li>Weiser, M. D., Kaspari, M. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.0307-6946.2006.00759.x/abstract">Ecological morphospace of New World ants.</a> Ecol. Entomol. 31, 131-142 (2006).</li>
<li>Bulova, S., Purce, K., Khodak, P., Sulger, E., O'Donnell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Into+the+black+and+back%3A+the+ecology+of+brain+investment+in+Neotropical+army+ants+%28Formicidae%3A+Dorylinae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissen%22%5BJournal%5D)">Into the black and back: the ecology of brain investment in Neotropical army ants (Formicidae: Dorylinae).</a> Naturwissen. 103, 3-4 (2016).</li>
<li>Narendra, A., Reid, S. F., Hemmi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+twilight+zone%3A+ambient+light+levels+trigger+activity+in+primitive+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">The twilight zone: ambient light levels trigger activity in primitive ants.</a> Proc. R. Soc. B. 277, 1531-1538 (2010).</li>
<li>Narendra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caste-specific+visual+adaptations+to+distinct+daily+activity+schedules+in+Australian+Myrmecia+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">Caste-specific visual adaptations to distinct daily activity schedules in Australian Myrmecia ants.</a> Proc. R. Soc. B. 278, 1141-1149 (2011).</li>
<li>Moser, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.treesearch.fs.fed.us/pubs/9853">Eye size and behaviour of day-and night-flying leafcutting ant alates.</a> J. Zool. 264, 69-75 (2004).</li>
<li>Stöckl, A. L., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptations+for+nocturnal+and+diurnal+vision+in+the+hawkmoth+lamina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Adaptations for nocturnal and diurnal vision in the hawkmoth lamina.</a> J. Comp. Neurol. 524, 160-175 (2016).</li>
<li>Zeil, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF00605027">Sexual dimorphism in the visual system of flies: the compound eyes and neural superposition in Bibionidae (Diptera).</a> J. Comp. Physiol. A. 150, 379-393 (1983).</li>
<li>Dacke, M., Nordström, P., Scholtz, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twilight+orientation+to+polarised+light+in+the+crepuscular+dung+beetle+Scarabaeus+zambesianus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Twilight orientation to polarised light in the crepuscular dung beetle Scarabaeus zambesianus.</a> J. Exp. Biol. 206, 1535-1543 (2003).</li>
<li>Greiner, B., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+optical+adaptations+for+nocturnal+vision+in+the+halictid+bee+Megalopta+genalis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and optical adaptations for nocturnal vision in the halictid bee Megalopta genalis.</a> Cell Tiss Res. 316, 377-390 (2004).</li>
<li>Warrant, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nocturnal+vision+and+landmark+orientation+in+a+tropical+halictid+bee%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Nocturnal vision and landmark orientation in a tropical halictid bee.</a> Curr. Biol. 14, 1309-1318 (2004).</li>
<li>Lattke, J. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLattke%2C+JE+%22Ants+Standard+Methods+for+Measuring+and+Monitoring+Biodiversity%22">Ants Standard Methods for Measuring and Monitoring Biodiversity</a>. , 155-171 (2000).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRibi%2C+WA+%22A+Handbook+in+Biological+Electron+Microscopy%22">A Handbook in Biological Electron Microscopy</a>. , 1-106 (1987).</li>
<li>Narendra, A., Ramirez-Esquivel, F., Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+eye+and+ocellar+structure+for+walking+and+flying+modes+of+locomotion+in+the+Australian+ant%2C+Camponotus+consobrinus%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Compound eye and ocellar structure for walking and flying modes of locomotion in the Australian ant, Camponotus consobrinus.</a> Sci. Rep. 6, 22331(2016).</li>
<li>Narendra, A., Greiner, B., Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+and+dark+adaptation+mechanisms+in+the+compound+eyes+of+Myrmecia+ants+that+occupy+discrete+temporal+niches%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Light and dark adaptation mechanisms in the compound eyes of Myrmecia ants that occupy discrete temporal niches.</a> J. Exp. Biol. 219, 2435-2442 (2016).</li>
<li>Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+visual+system+of+the+Australian+%26%2334%3BRedeye%26%2334%3B+cicada+%28Psaltoda+moerens%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The visual system of the Australian &#34;Redeye&#34; cicada (Psaltoda moerens).</a> Arthr. Struct. Dev. 44, 574-586 (2015).</li>
<li>Ribi, W. A., Warrant, E. J., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organization+of+honeybee+ocelli%3A+regional+specializations+and+rhabdom+arrangements%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The organization of honeybee ocelli: regional specializations and rhabdom arrangements.</a> Arthr. Struct. Dev. 40, 509-520 (2011).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colour+receptors+in+the+eye+of+the+digger+wasp%2C+Sphex+cognatus+Smith%3A+evaluation+by+selective+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Colour receptors in the eye of the digger wasp, Sphex cognatus Smith: evaluation by selective adaptation.</a> Cell Tiss. Res. 195, 471-483 (1978).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+and+migration+of+screening+pigments+in+the+retina+of+Pieris+rapae+L.+%28Lepidoptera%2C+Pieridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure and migration of screening pigments in the retina of Pieris rapae L. (Lepidoptera, Pieridae).</a> Cell Tiss. Res. 191, 57-73 (1978).</li>
<li>Lau, T., Gross, E., Meyer-Rochow, V. B. <a target="_blank" href="https://www.eje.cz/pdfs/eje/2007/03/14.pdf">Sexual dimorphism and light/dark adaptation in the compound eyes of male and female Acentria ephemerella (Lepidoptera: Pyraloidea: Crambidae).</a> Eur. J. Entomol. 104, 459-470 (2007).</li>
<li>Wipfler, B., Pohl, H., Yavorskaya, M. I., Beutel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+analysing+insect+structures+-+the+role+of+morphology+in+the+age+of+phylogenomics%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">A review of methods for analysing insect structures - the role of morphology in the age of phylogenomics.</a> Curr. Opin. Insect Sci. 18, 60-68 (2016).</li>
<li>Streinzer, M., Brockmann, A., Nagaraja, N., Spaethe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+and+caste-specific+variation+in+compound+eye+morphology+of+five+honeybee+species%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Sex and caste-specific variation in compound eye morphology of five honeybee species.</a> PLoS ONE. 8, e57702(2013).</li>
<li>Somanathan, H., Warrant, E. J., Borges, R. M., Wallén, R., Kelber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+and+sensitivity+of+the+eyes+of+the+Asian+honeybees+Apis+florea%2C+Apis+cerana+and+Apis+dorsata%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Resolution and sensitivity of the eyes of the Asian honeybees Apis florea, Apis cerana and Apis dorsata.</a> J. Exp. Biol. 212, 2448-2453 (2009).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen concurrerende belangen.

De suite van bovengenoemde methoden, is voorzien van een daadwerkelijk onderzoek naar het optische systeem van mieren en andere insecten. Deze technieken informeren ons begrip van de sampling-resolutie, optische gevoeligheid en potentiële polarisatie gevoeligheid van het oog wordt onderzocht. Deze kennis is een belangrijke basis voor fysiologische en gedragsmatige onderzoek naar hun visuele mogelijkheden. Bovendien, terwijl de hier gedetailleerde methoden hebben gericht op mier visuele systemen, deze technieken kunnen wo...

Visie is een belangrijke sensorische modaliteit voor de meeste dieren. Visie is vooral belangrijk in het kader van navigatie voor het aanwijzen van doelstellingen, vaststelling van vast te houden aan routes en verkrijgen van kompas informatie1,2. Insecten detecteren visuele informatie met behulp van een paar samengestelde ogen en, in sommige gevallen één tot drie dorsally geplaatste eenvoudige ogen genoemd ocelli3,4,5.
De ogen van mieren zijn van bijzonder belang omdat, terwijl de mieren zijn verbazingwekkend verschillend, ze enkele belangrijke kenmerken over soorten besparen. Ondanks de dramatische variatie in de anatomie, de grootte en ecologie, de overgrote meerderheid van de soorten zijn eusociale en leven in kolonies; Dientengevolge, uitdagingen verschillende soorten soortgelijke visuele in termen van het heen en weer navigeren tussen een centrale plaats en middelen. Over mieren kan de dezelfde fundamentele oog-bauplan worden waargenomen bij dieren variërend van 0,5-26 mm in lengte, uitsluitend dagverloop naar strikt nachtactieve soorten, en traag lopen ondergrondse naar visuele roofdieren6,7, springen 8,9,10. Al deze duizelingwekkende verschillen in ecologie en gedrag geeft aanleiding tot talloze permutaties van de dezelfde fundamentele oog structuren aanpassen aan verschillende omgevingen, levensstijlen en lichaam-maten11,12. Dientengevolge, biedt bestuderen van de visuele ecologie van mieren een ware schat aan mogelijkheden om de vastberaden onderzoeker.
Inzicht van het visuele systeem van insecten is essentieel bij het verkrijgen van inzicht in hun gedrags vermogens. Dit blijkt uit integrative studies die mooi anatomie met ecologie en gedrag tot een groot succes in een paar insecten groepen (bijvoorbeeldverwijzingen13,14,15,16, combineren 17). Hoewel het gebied van ant navigatie en ant gedrag in het algemeen heel succesvol geweest, heel weinig nadruk is gelegd op mier visie buiten een paar geselecteerde soorten. Hier, zullen we ingaan op de technieken die betrokken zijn bij het onderzoeken van oog ontwerp van mieren. Terwijl we ons op mieren richten zullen, deze technieken kunnen worden toegepast, met kleine aanpassingen, aan andere insecten, ook.

<table><tbody><tr><td>Mier</td><td>Myrmecia midas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscoop</td><td>Leica M205 FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sputter coater</td><td>Pro Sci Tech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petrischaal</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dissectiemicroscoop</td><td>Leica MZ6</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Insectenspeld</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kleurloze nagellak</td><td>Niet gebrand: van elke cosmeticawinkel</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glazen plaatje</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vestschrap</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pincet</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dekglas</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Compound microscoop</td><td>Leica DM5000 B</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyde</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformalydehyde</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchloride (KCl)</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>di-Natriumwaterstoffosfaat (Na2HPO4)</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kaliumdi-waterstoffosfaat (KH2PO4)</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Natriumchloride (NaCl)</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Osmiumtetroxide</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aceton</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Araldite epoxyhars</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pasteurpipet</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Toluidieblauw</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hotplate</td><td>Riechert HK120</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

technieken voor het onderzoek naar de anatomie van het visuele systeem van ant

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

Dit artikel schetst een suite van technieken in (LM) de lichte microscopie en elektronenmicroscopie (EM) die kan worden gebruikt voor de studie van de anatomie van de interne en externe oog van insecten. Het gaat hierbij om traditionele histologische technieken geoptimaliseerd voor werk op mier ogen en aangepast om te werken in concert met andere technieken zoals Transmissie Electronenmicroscopie (TEM) en scanning elektronen microscopie (SEM). Deze technieken, kunnen hoewel enorm nuttig, moeilijk zijn voor de beginnende microscopist, zodat grote nadruk in dit artikel over probleemoplossing en optimalisatie voor verschillende exemplaren. Wij verstrekken informatie over imaging technieken voor het hele model (foto-microscopie en SEM) en bespreken hun voor- en nadelen. We markeren de techniek die gebruikt wordt bij het bepalen van de diameter van de lens voor het hele oog en bespreken van nieuwe technieken voor verbetering. Tot slot bespreken we technieken die betrokken zijn bij de voorbereiding van monsters voor LM- en TEM, afdelen, kleuring en imaging van deze monsters. We bespreken de horden die één zouden kunnen komen over als voorbereiding van monsters en de beste manier om te navigeren naar hen.

De hier beschreven methoden inschakelen gedetailleerde studie van de eenvoudige en samengestelde ogen van mieren. Beeldvorming van de dorsale weergave van het hoofd met behulp van Z-stack photomicrography technieken kan men krijgen een overzicht van de indeling van het visueel systeem (Figuur 1). Dit is een goede voorbereiding voor ontledingen en om te bepalen van de vereiste vectorafbeeldingsbestanden hoek. Deze techniek is ook handig voor metingen zoals oce...

Dit artikel beschrijft een reeks van technieken in licht- en elektronenmicroscopie te bestuderen van de interne en externe oog anatomie van insecten. Het gaat hierbij om verschillende traditionele technieken geoptimaliseerd voor werk op mier ogen, gedetailleerde probleemoplossing, en suggesties voor optimalisatie voor verschillende exemplaren en regio's van belang.

Technieken voor het onderzoek naar de anatomie van het visuele systeem van Ant

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

Het algemene doel van deze reeks microscopietechnieken is om gedetailleerde anatomische informatie te verkrijgen over het visuele systeem van mieren. Deze methode kan helpen om belangrijke vragen op het gebied van visuele ecologie te beantwoorden, om verschillende visuele parameters te schatten, zoals optische gevoeligheid, visueel scherpzinnigheid en de grootte van het gezichtsveld. Het grote voordeel van deze techniek is dat het een volledig overzicht geeft van een bepaald visuele systeem.Het kan ook worden aangepast voor gebruik met veel verschillende soorten. Om de cornea-replica's te maken, gebruik mieren die in ethanol zijn geconserveerd of op een speld zijn gemonteerd, of in plasticine. Als het hoofd relatief groot is, kunnen de overige lichaamsdelen worden verwijderd.Om te beginnen, breng snel opdrogende, kleurloze nagellak aan over het oog, met behulp van een tandenstoker, zonder het oog te krassen. Laat de nagellak op kamertemperatuur uitharden. Gebruik vervolgens een fijne insectenspeld om het replica voorzichtig van de kopcapsule rond het oog te tillen.En grijp met behulp van een pincet het deel van het replica dat het hoofd bedekt, maar niet het oog. Plaats vervolgens het replica op een glazen plaatje. Gebruik daar een scheermes om voorzichtig het overtollige materiaal rond het oog te trimmen, terwijl het replica wordt vastgezet.Voordat u een dekglas over het replica plaatst, kan het nodig zijn om drie tot vier fijne gedeeltelijke radiale sneden te maken om het te helpen vlakken. Bij het plaatsen van het dekglas, documenteer de oriëntatie van het replica op de plaat. Vervolgens, verzegel het dekglas, met behulp van kleine druppeltjes nagellak op de hoeken, ervoor zorgen dat de vloeistof het replica niet raakt.De plaat is dan klaar om te beeldvormen met behulp van een samengesteld microscoop. Om te beginnen, verdoof de mier en plaats deze in een petrischaal. Als kleurstof moet worden aangepast voor heldere of stip-condities, moet dit een paar uur voor de dissectie gebeuren.Als de stip-condities het lijken te behouden, moet de dissectie in het rode licht worden uitgevoerd. Verwijder eerst de antennes met behulp van een pincet. Vervolgens, verwijder de monddelen met behulp van een scherp scheermes.Bij grote exemplaren, snij door het voorste deel van het oog. Bij een klein exemplaar, snij zo dicht bij de ogen mogelijk, zonder aan de hersenen te trekken, omdat dit de retina kan scheuren. Richt vervolgens het hoofd en maak een transversale incisie, die het ventrale deel van het hoofd verwijdert, dat mogelijk een deel van het ventrale oog omvat.Los vervolgens de kopcapsule los met een coronale incisie, net achter het samengestelde oog. In dit voorbeeld worden de transversale en coronale incisies tegelijkertijd gemaakt. Ten slotte, breng de gedissecteerde kopcapsule met de samengestelde ogen over naar ijskoud fixatief.Het is belangrijk om deze stappen snel uit te voeren om te voorkomen dat het weefsel degradeert, dus het weefsel moet binnen twee minuten na de eerste incisie in het fixatief gaan. Volg het tekstprotocol, bereid het specimen voor en tapp de overtollige hars af. Plaats vervolgens het specimen in een verticale positie op de blok en gebruik indien nodig een beetje overtollige hars om het daar vast te zetten.Label de blok met papieren labels ingebed in de hars, of bevestigd aan de blok. Genees vervolgens de hars in een oven van 60 graden Celsius, gedurende 12 tot 14 uur. Eenmaal uitgehard, laad het specimen in een schone envelop.Monteer vervolgens de blok op een microtoompas. Voordat u gaat snijden, zorg ervoor dat de oriëntatie van het specimen geschikt is voor het snivlak. Onder een dissectiemicroscoop, trim de harsblok met behulp van een scheermes.Monteer vervolgens de pas op de microtoommas en plaats het specimen onder hoek. Vul vervolgens de mesboot met gedistilleerd water met behulp van een spuit met een 0,45 micron filter. Laad het water op tot aan de rand van het mes.Op sommige plaatsen kan de meniscus convex zijn. Dan, tapp de boot tot de meniscus zeer licht concaaf is, maar nog steeds de rand van het mes bereikt. Breng nu langzaam en voorzichtig het mes naar het specimen, en aligneer de blok naar het mes.Controleer regelmatig via het oculaire. Wanneer het mes dichtbij is maar nog niet het specimen snijdt, begin met het draaien van het microtoemwiel om de nadering te voltooien. Wanneer u het gebied van belang in de blok nadert, pas dan de dikte van de sectie aan.In dit geval wordt een diamantmes gebruikt om secties van één micron te maken. Plaats vervolgens vanuit de filter-uitgeruste spuit een reeks kleine druppeltjes gedistilleerd water op een plaatje. Om een sectie van belang te verzamelen, pak deze op met behulp van een wimpertool.En drijf voorzichtig de verzamelde sectie op een waterdruppel. Laad doorgaans zoveel secties op elke plaat als er passen. Wanneer een plaatje volledig is geladen, breng het over naar een hotplate op 60 graden Celsius om het water te laten verdampen en de secties aan het plaatje te bevestigen.Dit duurt ongeveer 15 tot 20 minuten. Gebruik vervolgens een andere filter-uitgeruste spuit om een druppel toluidineblauwe kleurstof op het plaatje te deponeren. Plaats de druppel op het ene uiteinde van het plaatje en verspreid deze met de rand van een naald zonder de secties aan te raken of te schrapen.Plaats vervolgens het plaatje gedurende 20 tot 60 seconden op de hotplate. Spuit vervolgens het plaatje met gedistilleerd water van een wasfles en gebruik de hotplate om het af te drogen. Controleer later de plaatjes onder de samengesteld microscoop en beeld ze vervolgens af.De beschreven technieken maken een gedetailleerd onderzoek mogelijk van de eenvoudige en samengestelde ogen van mieren. Het beeldvormen van de dorsale weergave van het hoofd met behulp van Z-

techniques-for-investigating-the-anatomy-of-the-ant-visual-system

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

De niet-menselijke primaat is een belangrijk translationeel soort voor ons begrip van de ontwikkeling en veroudering. De anatomische organisatie van het primaat netvlies kan leveren belangrijke inzichten in normale en pathologische omstandigheden bij de mens.

De poort naar de hersenen: Ontrafeling van de Primate Eye

De voorbereiding van de ontwikkeling en Adult Drosophila Hersenen en retinae voor Live Imaging

Technieken voor het visualiseren retinale cytoarchitecture direct aan individuele elektroden binnen een retinale stimulator.

Technieken voor verwerking Ogen geïmplanteerd met een Retina Prothese voor Gelokaliseerde histopathologisch Analysis

Hier laten we zien hoe het aantal en de ruimtelijke verdeling van synaptische actieve zones in Drosophila melanogaster fotoreceptoren te kwantificeren, gemarkeerd met een genetisch gecodeerde moleculaire marker, en hun modulatie na langdurige blootstelling aan licht.

Het analyseren van Synaptic Modulatie van<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Fotoreceptoren na blootstelling aan Langdurige Light

Presenteren we een protocol voor de klassieke conditionering van wervelende mieren waarmee onderzoekers te bestuderen van visueel leren en geheugen vorming op een niveau van analyse niet mogelijk met vrij bewegende personen.

Visuele klassieke conditionering in hout mieren

Dit protocol beschrijft drie stappen om larvale en volwassen Drosophila optische kwabben voor te bereiden op beeldvorming: 1) hersendissecties, 2) immunohistochemie en 3) montage. De nadruk wordt gelegd op stap 3, omdat er verschillende montagerichtingen nodig zijn om specifieke optische lobstructuren te visualiseren.

Dissectie, immunohistochemie en montage van larvale en volwassen Drosophila-hersenen voor visualisatie van optische kwabben

Het huidige protocol demonstreert een eenvoudige methode voor het traceren van ventrale tegmentale gebied (VTA) glutamaatprojecties naar de hippocampus. Fotostimulatie van VTA-glutamaatneuronen werd gecombineerd met CA1-opname om aan te tonen hoe VTA-glutamaatterminals ca1-putatieve piramidale vuursnelheid in vivo moduleren.

Gecombineerde In Vivo anatomische en functionele tracing van Ventral Tegmental Area Glutamate Terminals in de Hippocampus

Dit protocol beschrijft de dissectieprocedure, kweekconditie en live beeldvorming van een antenne-hersenexplantatiesysteem voor de studie van de olfactorische circuitassemblage.

Een explantatiesysteem voor time-lapse beeldvormingsstudies van olfactorische circuitassemblage in Drosophila

Het protocol beschrijft hier de meting van de ruimtelijke organisatie van de visuele assen van huisvliegogen, in kaart gebracht door een automatisch apparaat, met behulp van het pseudopupil-fenomeen en het pupilmechanisme van de fotoreceptorcellen.

Geautomatiseerde in kaart brengen van de visuele ruimte van housefly compound eyes

We beschrijven hier methoden voor het induceren en analyseren van olfactorische ervaring-afhankelijke remodellering van synaptische glomeruli van de antennekwab in de juveniele hersenen van Drosophila .

Ervaringsafhankelijke hermodellering van juveniele reukbare sensorische neuronen Synaptische connectiviteit van de hersenen in een kritieke periode in het vroege leven

Leer licht- en elektronenmicroscopie om de anatomie van het visuele systeem van mieren te bestuderen. Deze technieken schatten visuele parameters en zijn aanpasbaar voor diverse insectensoorten.

Technieken voor het onderzoek naar de anatomie van het visuele systeem van Ant

Meer video's verkennen