Name: Laminotomy voor lumbale achterwortelganglia Ganglion toegang en injectie in varkens (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: Leer een chirurgische laminotomie-methode voor toegang tot lumbale dorsale wortelganglia in varkens voor intraganglionaire injectie. Deze techniek valideert geneesmiddelafgifte met intraoperatieve monitoring en histologische bevestiging.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De studie werd uitgevoerd met steun van de Stichting familie Schulze (aan A.S.B.).

alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité (IACUC) van de Mayo Clinic.
 1. vereisten van strengheid en reproduceerbaarheid <ol><li>te zorgen van de strengheid van ontwerp, volg nationale normen van goede laboratorium praktijken zijn te allen tijde en interne erkend door IACUC (of soortgelijke Commissie) voorafgaand aan een dier betrokkenheid bij experimenten. 
	Opmerking: Dit protocol werd ontworpen om een klinisch trouw aanpak. Dus, de materialen, instrumenten en technieken die worden beschreven op een manier die identiek zijn aan de hoogste klinische normen bij de mens. Bijvoorbeeld, strenge steriele techniek wordt gevolgd en verlopen materialen mag nooit worden gebruikt.</li>
	<li>Ter ondersteuning van de reproduceerbaarheid van deze methode in een experimentele omgeving, ontwikkelen van interne operationele standaardprocedures en controle voor variabiliteit in varkens ras, gewicht, geslacht en leeftijd tussen afzonderlijke cohorten. 
	Opmerking: Het ontwerp van dit protocol was gebaseerd op het gebruik van varkens 38-53 kg. weegt</li>
</ol> 2. Pre-operatieve Animal Care <ol><li>beheren profylactische intramusculair (IM) ceftiofur, gegeven bij 5 mg/kg, 1 dag vóór de ingreep.</li>
	<li>Snel van vast voedsel dieren en dieren verhinderen dat cosmetische behandelingen, d.w.z. olie baden, 12 uur vóór de ingreep.</li>
	<li>Induce narcose binnen 1 uur van de procedure, met behulp van IM tiletamine en zolazepam, als Telazol bij 5 mg/kg, en IM xylazine, gegeven op 2 mg/kg. gegeven</li>
	<li>Zodra geïnduceerde, onderhuidse (SC) buprenorfine opgelopen release (SR), gegeven op 0,18 mg/kg. beheren</li>
	<li>Plaats een oor-veneuze katheter en het uitvoeren van snelle opeenvolging intubatie om een Endotracheale tube.</li>
	<li>Hechten van een Pulsoximeter met hartslag controle functie om de tong oxygenatie en hartslag controleren.</li>
	<li>Plaats van het dier in de vatbaar positie en illustraties van de huid over het dorsum met behulp van een elektrische clipper. Haar illustraties over een grote, bilaterale gebied uit te breiden van de middellijn sagittale vlak aan de middellijn coronale vlak en lengterichting van de sacrale apex aan de scapular stekels. Gebruik plakband om te verwijderen van de vrij zwevende huid en haren.</li>
	<li>Schrobben het uitgeknipte gebied tot 3 keer met warm water en zeep en droog de huid met behulp van een pluisvrije handdoek.</li>
	<li>Mark bilaterale anatomische monumenten met een chirurgische markering-pen. Mark van de laatste ribs iliac toppen, spinous processen en de dwarsuitsteeksels. 
	Opmerking: Door te markeren de laatste ribs iliac toppen en de dwarsuitsteeksels, de lumbale wervelkolom is afgebakend in de superior, inferior en zijdelingse begrenzingen, respectievelijk. Dit protocol is ontworpen om de toegang en de injectie van een lumbale DRG van belang. Ter referentie, de superieure iliac toppen uitlijnen met de L3 en L4 Vertebrale niveau.</li>
	<li>Dekking van het dier met een warme deken voor transport naar de operatieve suite.</li>
</ol> 3. Positionering in de operatieve Suite <ol><li>zachtjes lift en het dier vatbaar positie in een gemodificeerde groot menselijk dier sling met gewatteerde abdominale diafragma. 
	Opmerking: De abdominale diafragma zorgt voor afname van de abdominale druk vergelijkbaar met het frame van de Wilson gebruikt tijdens de menselijke operatie van de wervelkolom. Beurtelings, vermindert dit intraoperatieve bloeden uit de spinale bloedvaten. De slinger is gunstig omdat de benen zijn toegestaan om te hangen vrij door gewatteerde openingen die het dier tegen perifere zenuwen impingement beschermen. Echter omdat het frame van de slinger is gemaakt van metaal, moet het worden opgevuld met isolatie elektrische kortsluiting en onbedoelde dierlijke branden te voorkomen. Een deken rollen kan worden geplaatst om de positie van het hoofd en de nek in een comfortabele positie, afhankelijk van de grootte van het dier te.</li>
	<li>Behouden narcose met 1-3% ingeademd (IH) Isofluraan, getitreerd daartoe. Bevochtig ogen met ophthalmic zalf en tape ze zachtjes dicht.</li>
	<li>Plaatsen-regels voor de controle van de vitale teken aan document temperatuur, bloeddruk, hartslag en zuurstoftoevoer. Controleren van ventilatie door capnography.</li>
	<li>Plaatst u een zelfklevende, wegwerp elektrochirurgische dispersief elektrode op de linker of rechter schouderblad.</li>
	<li>Beheren opgewarmd Ringer Lactated &#39; s als onderhoud vloeistoffen via de oor-veneuze katheter. Geven van vloeistoffen met een snelheid van 5-10 mL/kg/h.</li>
	<li>Plaatst u een opwarming van de aarde apparaat van gedwongen-lucht boven de thoracale en cervicale regio en voorkomen die betrekking hebben op de laatste ribbetjes.</li>
</ol> 4. Steriele voorbereiding van operatieve veld voor een linkerpagina injectie nota: vanaf dit punt naar voren, gaan in strenge steriele mode.
<ol><li>Voorbereiden de huid over het begin van de lumbale wervelkolom met ruime toepassing van 0,7% jodium povacrylex en 74% isopropyl alcohol volgens de fabrikant &#39; s instructies. Lateralize om ervoor te zorgen dat de naald van de gids later kan worden geplaatst in een steriele mode, toepassing naar de kant van de geplande injectie door uit te breiden naar de middellijn coronale vlak langs de gemarkeerde dwarsuitsteeksels antisepsis.</li>
	<li>Plaats van wegwerpbare handdoeken van de chirurgische in rechthoekige mode te schetsen van de geplande incisie site, die over de middellijn langs de gemarkeerde lumbale spinous processen is.</li>
	<li>Toepassen een lijm antimicrobiële incise draperen over de operatieve handdoeken en huid blootgesteld. Klem gordijnen in plaats en de rand van de gordijnen uit het operationele gebied uit te breiden.</li>
	<li>Een verticale gordijn aan palen aan het hoofd van de strop of tussen de operatieve veld en de monitoring technicus secure.</li>
	<li>Secure lijnen voor zuig- en elektrochirurgie binnen het operationele gebied door klemmen aan de steriele gordijnen. Passeren van de vrije uiteinden van buizen en draden uit het steriel veld.</li>
</ol> 5. Huid incisie en dissectie van de Subperiosteal <ol><li>palperen van de lumbale spinous processen langs de middellijn en identificeren van 3 opeenvolgende Vertebrale niveaus.</li>
	<li>Gebruiken een scalpel #15 te openen een Sagittaal incisie van de middellijn van 8-12 cm via de incise gordijn direct posterieure aan de spinous processen. Handhaven van hemostase met behulp van gaas tamponade en monopolaire elektrochirurgie. 
	Opmerking: Let erop niet af te wijken van de middellijn als de incisie is gevorderd in de voorste richting omdat dit beperkt bloeden uit de paraspinal spieren. Periodieke palpatie voor de spinous processen vergemakkelijkt vooruitgang. Zelf behoud van Weitlaner, Meyerding of Gelpi OPROLMECHANISMEN kan worden geplaatst en zo nodig ter vergemakkelijking van de dissectie verplaatst. Zuigkracht wordt gebruikt om zichtbaarheid.</li>
	<li>Ontleden de subcutane weefsel en vet met behulp van monopolaire elektrochirurgie totdat de thoracolumbar fascia is bereikt. De spinous processen diep aan de thoracolumbar fascia palperen en snijd de fascia langs de middellijn bloot de supraspinata ligament spanning tussen spinous processen. 
	Opmerking: De thoracolumbar fascia wordt geïdentificeerd als een georganiseerde, aponeurotic schede met een bindweefsel graan dat in een schuine, lateraal op mediale richting achtergrondspoor. Op dit punt, de incisie in de superior of inferieur richting om ervoor te zorgen dat de 3 spinous processen volledig zichtbaar met de centermost spinous proces uitgelijnd binnen het middelpunt van de dissectie-veld zijn kan worden verlengd.</li>
	<li>Gebruiken een #15 mes te plaatsen van een incisie van 2-mm diepe parasagittal door middel van het ligament supraspinata posterieure aan elk spinous proces. Plaats elke snede langs de linker derde van het achterste oppervlak van het proces van spinous.</li>
	<li>Vrij voorzichtig het ligament supraspinata op elk niveau langs iedere meerderingision met behulp van een vrijere lift van 5 mm.</li>
	<li>Het subperiosteal vliegtuig identificeren en ontleden binnen die vlak langs het laterale oppervlak van elk proces spinous.</li>
	<li>Subperiosteal dissectie uitvoeren op elk spinous proces op een parallelle manier om ervoor te zorgen dat een zachte, zelfs dissectie is bereikt.</li>
	<li>Incise de paraspinal spier bijlage langs de interspinous ruimten met behulp van monopolaire elektrochirurgie in concert met subperiosteal dissectie.</li>
	<li>Identificeren de lamina op elk niveau en blijven subperiosteal dissectie lateraal te bereiken van de laterale rand van de 2 zygapophyseal gewrichten die verbinding maken met de 3 blootgestelde wervels en te bereiken van de laterale rand van de lamina tussen de gewrichten, genaamd de pars interarticularis. 
	Opmerking: De pars interarticularis is de achterste rand van de lat. foramen waarin de DRG zich bevindt. Af en toe een kleine ader komt voort uit een foramen gelegen op het achterste oppervlak van de lamina. Deze aders hebben de neiging te scheuren tijdens de subperiosteal dissectie. Hemostase wordt gemakkelijk bereikt met behulp van een combinatie van bipolaire elektrochirurgie en been wax toegepast op het foramen.</li>
</ol> 6. Gelijkvloerse Laminotomy <ol><li>het doel van laminotomy identificeren als de centermost lamina gelegen tussen en mediale aan de 2 zygapophyseal gewrichten.</li>
	<li>Traceren de lamina naar zijn inferieur rand, tot een punt net mediale aan het aaneengesloten inferieur articulaire proces van het caudal zygapophyseal gewricht.</li>
	<li>Gebruiken een 5-mm vrijer lift of curettage te palperen van de overgang tussen de rand van de caudalmost van de lamina en centrale kanaal. 
	Opmerking: Zorg wordt genomen niet dwingen de palpating instrument anterior zoals dit dural OSS en het ruggemerg stuurt. Merk op dat het ruggenmerg in varkens strekt zich uit langs de lumbale wervelkolom 18. Een tussenwervelschijf rongeur kan worden gebruikt voor het verwijderen van extra zacht weefsel overliggende van dit gebied te vergemakkelijken van palpatie.</li>
	<li>Gebruik een 2-mm up-bijten, 45 graden Kerrison rongeur bot in een stuksgewijze mode uitpakken. Verwijderen van bot langs de basis van het proces van de spinous superiorly tot een niveau net caudal op het caudal oppervlak van de stam en lateraal uit haar volle omvang.</li>
	<li>Gebruik aflopend bot rongeurs om te helpen met de verwijdering van het bot. Laat de inferieure articulaire proces die was verbonden met de lamina in plaats totdat de laminotomy is grotendeels voltooid.</li>
	<li>Bevestigen dat de inferieure articulaire proces vrij mobiel en bijgevoegde alleen door de zygapophyseal gezamenlijke capsule is. De capsule met behulp van een #15 en #11 mes incise.</li>
	<li>Verwijderen van de inferieure articulaire proces in een stuksgewijze mode maar het aangrenzende superieure articulaire proces intact laten. 
	Opmerking: Als de laminotomy is voltooid, wordt hemostase uitgevoerd met bipolaire elektrochirurgie. Monopolaire elektrochirurgie is niet gebruikt vanwege de nabijheid van neurale structuren. Been wax kan worden geplaatst langs sites van bloeden uit blootgestelde bot en absorbeerbare gelatine sponzen kunnen worden gebruikt voor het verkrijgen van hemostase in de buurt van weke delen. Cottonoid is een nuttig hulpmiddel om wick met vocht en bloed uit de buurt van de dissectie.</li>
</ol> 7. Dissectie van de Deutsche Reichsbahn <ol><li>Evacuate het epidurale vet in een stuksgewijze mode van oppervlakkig naar diepe begin mediaal en lateraal verloopt. Verwijderen van vet door zachte dissectie met behulp van bipolaire pincet en zuig met 6-10 Franse Frazier zuig tips. 
	Opmerking: Loupe vergroting of het gebruik van een ontleden Microscoop is nuttig bij het verstrekken van de mate van detail die nodig zijn voor het veilig evacueren van de epidurale vet en bereiken van nauwgezette hemostase van de epidurale veneuze plexus met behulp van bipolaire elektrochirurgie.</li>
	<li>Identificeren de dural OSS langs de middellijn uitgevoerd in een superoinferior richting, evenwijdig aan de aslijn van de huid incisie. Epidurale vet langs de dural sac verwijderen totdat de dural OSS kan blijken dat aanleiding geven tot de dural zenuw wortel mouw.</li>
	<li>Traceren de dural mouw lateraal en ondeugdelijkheid epidurale vet evacuatie totdat het wordt gezien om te vergroten rond de DRG. 
	Opmerking: Identificeer de DRG voor haar ovale vorm en geel tot oranje kleur. Op de mid lumbale wervelkolom is de DRG meestal 4-6 mm in grootte, langste in het mediale, laterale richting, en ligt direct inferieur of 2-3 mm aan de respectieve stam medial. Een botte, rechthoekige zenuw haak kan worden gebruikt om voorzichtig voor de stam palperen.</li>
	<li>Evacueren epidurale vet lateraal, voorbij de DRG, totdat de aangrenzende spinale zenuw wordt gezien. 
	Opmerking: Als durotomy optreedt, repareren door waterdichte sluiting met 6-0 nylon hechtdraad en glad micro naald stuurprogramma in een eenvoudige lopende stich.</li>
</ol> 8. Injectie van de Deutsche Reichsbahn <ol><li>gebruik een spinale naald van 22-gauge te begeleiden de baan van een 32-gauge convectie verbeterde levering (CED) naald. Punctie van de 22-gauge gids naald door de huid en paraspinal spieren. 
	Opmerking: De CED naald is ontworpen om vloeistof convectie in weefsel, ook bekend als bulk stroom, als gevolg van druk verlopen 19 , 20.</li>
	<li>Beogen de naald van de gids langs een traject dat benadert de lengteas van de Deutsche Reichsbahn en resulteert in het uiteinde van de naald uit de muur van de laterale paraspinal van het veld dissectie.</li>
	<li>Fine tune de naald weg totdat de naald lumen wordt uitgelijnd met het middelpunt van de Deutsche Reichsbahn. 
	Opmerking: De gids naald nooit mogen contact opnemen met de Deutsche Reichsbahn.</li>
	<li>Steriel injectate opstellen in een steriele injectiespuit en de spuit verbinden met de steriele infusie buis.</li>
	<li>Beveiligen van de buis aan de CED naald en de spuit uit de steriele veld hand. De spuit verbinden met een programmeerbare-spuitpomp. 
	Opmerking: Buis is bereid tot een lengte van 5 voet om ervoor te zorgen dat de steriliteit en mobiliteit worden gehandhaafd. Ook is het van het allergrootste belang dat er geen luchtbellen worden ingevoerd in oplossing.</li>
	<li>De injectate verder tot expressie wordt gezien vanaf de punt van de naald CED.</li>
	<li>De naald van de CED binnen de gids naald lumen en de CED naald langzaam verder totdat uit de gids naald tip blijkt. Zorgen dat de DRG niet tijdens naald uitlijning is doorboord.</li>
	<li>Fine tune de gids naald positie langs de lange as van haar baan om te bepalen van de uiteindelijke locatie van de CED-tip.</li>
	<li>De gids veilige naalden en CED naald samen met elkaar grijpende naald hubs zodra diepte en de uitlijning van de gids en CED naalden is bereikt.</li>
	<li>Bevestigen dat alle injectie apparatuur verbindingen zijn volledig beveiligd, waaronder de gids naald, CED naald, en aangesloten leidingen boordevol injectate.</li>
	<li>Verder van de naald van de gids langs de lange as tot de onderlinge aanpassing van de CED naald uiteinde en de Deutsche Reichsbahn.</li>
	<li>De DRG met de tip van CED naald punctie.</li>
	<li>Borrelend de CED naald tip in het driedimensionale midden van de Deutsche Reichsbahn. Opmerking: omdat de DRG een driedimensionale structuur van variabele grootte en vorm is, DRG blootstelling moet zijn afgerond om nauwkeurig de CED naald tip op het echte centrum van de Deutsche Reichsbahn. De echte DRG-centrum ligt op het snijpunt van de drie anatomische assen, namelijk de anterior naar posterior, lateraal naar mediaal, en superieur aan inferieure assen.</li>
	<li>Leveren 100 μl van injectate door met behulp van een geijkte snelheid en volume van 3 stappen CED.</li>
	<li>Leveren 4 μl op 2 μL/min voor de eerste stap. 8 μL leveren op 4 l/min voor de tweede stap. 8 l/min voor de derde en laatste stap leveren 88 μL. 
	Opmerking: Laat een 3-min pauze tussen stappen en na de laatste stap te maken voor druk evenwichtsinstelling.</li>
	<li>Trekken de injectie apparatuur na de laatste injectie stap en 3-min pauze langs de lange as in een gladde, zachte beweging. 
	Opmerking: Voor ingespoten oplossingen die kleurloos zijn, gekleurde kleurstof is opgenomen in de oplossing bij een concentratie van 0,1% gewicht/volume bij visuele beoordeling van injectate distributie 12. Ook de vitale kleurstof 4 &#39;, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) is opgenomen in oplossing bij een concentratie van 0,25 μg/l wanneer de studie ontwerp histologische beoordelingvan injectate distributie 5 vereist.</li>
</ol> 9. Sluiting <ol><li>van toepassing 3 rondes van warme zoute irrigatie naar de chirurgische site vóór sluiting te mobiliseren en spoelen van de site van puin, dat wil zeggen de botfragmenten. Zuig gebruiken om te herstellen van de zoutoplossing en puin. 
	Opmerking: Zorgvuldige hemostase is gewaarborgd wanneer irrigatie duidelijk blijft. Hemostatische agenten (gelatine spons) en cottonoid zijn verwijderd op dit moment. Zorgen dat alle materialen en instrumenten zijn gewist van de incisie site vóór sluiting.</li>
	<li>Gebruik van een 3-gelaagde techniek voor sluiting.</li>
	<li>De thoracolumbar hechtdraad fascia 0 Sutuur (geologie) met een eenvoudige, onderbroken, noninverted mode. Plaatsen van een stich elke 5-8 mm om waterdichte sluiting.</li>
	<li>Hechtdraad geplaatst van het subcutane weefsel met 2-0 Sutuur (geologie) in een eenvoudige, onderbroken, omgekeerde mode met een steekje vallen elke 5 - tot 8-mm te bereiken van voldoende sterkte.</li>
	<li>Sluit de huid met behulp van 0 Sutuur (geologie) in een eenvoudige, actief of onderbroken mode.</li>
	<li>Een naald teller gebruiken om ervoor te zorgen dat geen slijpsel vermisten voor</li>
	<li>Bevloeiing van de huid met zoutoplossing, de huid droog en plaats zelfklevend verband stroken loodrecht op de incisie.</li>
	<li>Gaas op de top van de pleister strips en hechten een definitieve lijm antimicrobiële incise draperen.</li>
</ol> 10. Post-operatieve Animal Care <ol><li>Extubate, dek af met warme dekens, en vervoer van het dier tot herstel.</li>
	<li>Volg institutionele operationele standaardprocedures voor postoperatieve bewaking en herstel van overleving chirurgie. Minimaal acht het dier elke 15 min tot terugkeer van bewustzijn, per uur totdat volledige verdoving herstel wordt bereikt, en tweemaal daags daarna.</li>
	<li>Geven postoperatieve pijn beheer door het toedienen van IM of mondelinge carprofen, gegeven op 4 mg/kg, eenmaal daags gedurende 5 dagen vanaf postoperatieve dag 0. Beheren van SC buprenorfine SR, gegeven bij 0,18 mg/kg, eenmaal op postoperatieve dag 2.</li>
	<li>Beheren van post-operatieve antisepsis doordat IM ceftiofur, gegeven bij 5 mg/kg, eenmaal op postoperatieve dag 4.</li>
	<li>Verwijder het verband op postoperatieve dag 5-7. Verwijderen van de hechtingen bij wondgenezing voltooid, meestal op postoperatieve dag 10-14 is.</li>
	<li>Het dier volgens institutionele operationele standaardprocedures humaan euthanaseren zodra het eindpunt van de studie is bereikt.</li>
</ol>

<ol><li>Millan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+induction+of+pain%3A+An+integrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The induction of pain: An integrative review.</a> Prog Neurobiol. 57 (1), 1-164 (1999).</li>
<li>Burma, N. E., Leduc-Pessah, H., Fan, C. Y., Trang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+chronic+pain%3A+Advances+and+challenges+for+clinical+translation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models of chronic pain: Advances and challenges for clinical translation.</a> J Neurosci Res. , (2016).</li>
<li>Pleticha, J., Maus, T. P., Beutler, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Future+directions+in+pain+management%3A+integrating+anatomically+selective+delivery+techniques+with+novel+molecularly+selective+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Mayo+Clin+Proc%22%5BJournal%5D)">Future directions in pain management: integrating anatomically selective delivery techniques with novel molecularly selective agents.</a> Mayo Clin Proc. 91 (4), 522-533 (2016).</li>
<li>Standring, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aStandring%2C+S+%22The+anatomical+basis+of+clinical+practice%22">The anatomical basis of clinical practice</a>. , Elsevier Churchill. Edinburg. (2005).</li>
<li>Fischer, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+injection+into+the+dorsal+root+ganglion%3A+technical%2C+behavioral%2C+and+histological+observations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Direct injection into the dorsal root ganglion: technical, behavioral, and histological observations.</a> J Neurosci Methods. 199 (1), 43-55 (2011).</li>
<li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+long+noncoding+RNA+contributes+to+neuropathic+pain+by+silencing+Kcna2+in+primary+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A long noncoding RNA contributes to neuropathic pain by silencing Kcna2 in primary afferent neurons.</a> Nat Neurosci. 16 (8), 1024-1031 (2013).</li>
<li>Xu, Y., Gu, Y., Wu, P., Li, G. W., Huang, L. Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficiencies+of+transgene+expression+in+nociceptive+neurons+through+different+routes+of+delivery+of+adeno-associated+viral+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Efficiencies of transgene expression in nociceptive neurons through different routes of delivery of adeno-associated viral vectors.</a> Hum Gene Ther. 14 (9), 897-906 (2003).</li>
<li>Puljak, L., Kojundzic, S. L., Hogan, Q. H., Sapunar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+delivery+of+pharmacological+agents+into+rat+dorsal+root+ganglion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Targeted delivery of pharmacological agents into rat dorsal root ganglion.</a> J Neurosci Methods. 177 (2), 397-402 (2009).</li>
<li>Mason, M. R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+AAV+serotypes+for+gene+delivery+to+dorsal+root+ganglion+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Comparison of AAV serotypes for gene delivery to dorsal root ganglion neurons.</a> Mol Ther. 18 (4), 715-724 (2010).</li>
<li>Jelicic Kadic, A., Boric, M., Kostic, S., Sapunar, D., Puljak, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+intraganglionic+injection+of+calcium%2Fcalmodulin-dependent+protein+kinase+II+inhibitors+on+pain-related+behavior+in+diabetic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci%22%5BJournal%5D)">The effects of intraganglionic injection of calcium/calmodulin-dependent protein kinase II inhibitors on pain-related behavior in diabetic neuropathy.</a> Neurosci. 256, 302-308 (2014).</li>
<li>Greenberg, M. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGreenberg%2C+MS+%22Handbook+of+neurosurgery%22">Handbook of neurosurgery</a>. , Thieme. (2010).</li>
<li>Yu, H., Fischer, G., Hogan, Q. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAV-mediated+gene+transfer+to+dorsal+root+ganglion%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">AAV-mediated gene transfer to dorsal root ganglion.</a> Methods Mol Biol. 1382, 251(2016).</li>
<li>Yaksh, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacology+and+toxicology+of+chronically+infused+epidural+clonidine+HCL+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pharmacology and toxicology of chronically infused epidural clonidine HCL in dogs.</a> Toxicol Sci. 23 (3), 319-335 (1994).</li>
<li>Federici, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+technique+for+spinal+cord+delivery+of+therapies%3A+demonstration+of+procedure+in+gottingen+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Surgical technique for spinal cord delivery of therapies: demonstration of procedure in gottingen minipigs.</a> J Vis Exp. (70), e4371(2012).</li>
<li>Lee, J. H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+porcine+model+of+traumatic+thoracic+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A novel porcine model of traumatic thoracic spinal cord injury.</a> J Neurotrauma. 30 (3), 142-159 (2013).</li>
<li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy%3A+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36 (3), e164(2011).</li>
<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspinal+stem+cell+transplantation+in+amyotrophic+lateral+sclerosis%3A+A+phase+I+safety+trial%2C+technical+note%2C+and+lumbar+safety+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Intraspinal stem cell transplantation in amyotrophic lateral sclerosis: A phase I safety trial, technical note, and lumbar safety outcomes.</a> Neurosurg. 71 (2), 405-416 (2012).</li>
<li>Olmarker, K., Holm, S., Rosenqvist, A., Rydevik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+nerve+root+compression.++A+model+of+acute%2C+graded+compression+of+the+porcine+cauda+equina+and+an+analysis+of+neural+and+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Experimental nerve root compression. A model of acute, graded compression of the porcine cauda equina and an analysis of neural and vascular anatomy.</a> Spine. 16 (1), 61-69 (1991).</li>
<li>Bobo, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Convection-enhanced+delivery+of+macromolecules+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Convection-enhanced delivery of macromolecules in the brain.</a> Proc Natl Acad Sci U.S.A. 91 (6), 2076-2080 (1994).</li>
<li>Lonser, R. R., Sarntinoranont, M., Morrison, P. F., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Convection-enhanced+delivery+to+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Convection-enhanced delivery to the central nervous system.</a> J Neurosurg. 122 (3), 697-706 (2015).</li>
<li>Shen, J., Wang, H. Y., Chen, J. Y., Liang, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+analysis+of+normal+human+lumbar+dorsal+root+ganglion+by+3D+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22AJNR+Am+J+Neuroradiol%22%5BJournal%5D)">Morphologic analysis of normal human lumbar dorsal root ganglion by 3D MR imaging.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 27 (0195–6108 (Print)), 2098-2103 (2006).</li>
<li>Pleticha, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+convection-enhanced+delivery+of+biologics+into+dorsal+root+ganglia%3A+validation+in+the+pig+model+and+prospective+modeling+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans.</a> J Neurosurg. 121 (4), 851-858 (2014).</li>
</ol>

None; de auteurs hebben geen conflicten van belang aan deze studie gerelateerde.

We wilden een methode voor chirurgische blootstelling van DRG via laminotomy en intraganglionic injectie in een gezonde grote diersoorten, met name varkens. Bij knaagdieren is een gelijkaardige methode gedetailleerde 12 en gebruikt voor conventionele farmacologische agenten 8,10 en virale vectoren 6,,7,,9,12</...

Dorsal root ganglia (DRG) zijn anatomisch discrete, neuronale verzamelingen gelegen langs de wervelkolom. Elke DRG bevat de primaire sensorische neuronen die coderen en doorsturen van perifere prikkels aan het centrale zenuwstelsel (CNS) uit specifiek orgaan regio's. Bijvoorbeeld, begint de pijn van artrose met pijnreceptoren gelegen over een gezamenlijke waarnemen schadelijke stimuli. Dit proces heet Nociceptie. Op lange termijn bewustzijn van schadelijke stimuli leidt tot chronische pijn 1.
Chronische pijn is een frequent onderwerp van preklinische studie 2 waar het doel is om nuttige methoden voor gerichte levering van pijnstillers aan DRG, zoals intraganglionic injectie 3te ontwikkelen. Deutsche Reichsbahn zijn echter moeilijk toegankelijk, omdat zij zich bevinden binnen de boney grenzen van lat. foramen 4. Verschillende groepen hebben met succes het overwinnen van dit obstakel door het gebruik van de wervelkolom chirurgie in knaagdieren 5,6,7,8,9,10.
In de kliniek, laminectomie is een gemeenschappelijk rug operatie en verwijst naar de chirurgische verwijdering van de wervel lamina, waardoor unroofing de vertebral kanaal 11. Opneming van chirurgische technieken om directe toegang bieden DRG succesvol is geweest in knaagdieren 5,12, vertaling kan evenwel onrealistisch overweegt verschillen in grootte van de betrokken structuren en hoe die invloeden farmacokinetiek of technische haalbaarheid 13,14. Bijvoorbeeld vastgesteld een studie de diameter van de dwarse ruggenmerg bij T10 3.0, 7.0, en 8,2 mm voor de rat, varken en menselijk, respectievelijk 15. Dus diermodellen grote beter geschatte menselijke afmetingen van zenuwstelsel structuren.
In varkens gebruikt de Raore et al. multi-level laminectomie toegang te krijgen tot het cervicale ruggenmerg voor meerdere intraspinal injecties 16. De procedure werd goed verdragen en geleid tot een fase I klinische proef waar vergelijkbare chirurgische resultaten waren gedocumenteerd 17. Deze resultaten bevorderen voortgezet gebruik van preklinische grote dierlijke modellen als voorspellers van technische haalbaarheid en veiligheid bij de mens.
Tot op heden bestaat geen gedetailleerde methodologie voor chirurgische toegang en injectie van de DRG in een grote diersoorten. Als u wilt dit translationeel kloof te verkleinen, rapporteren we een protocol voor DRG blootstelling en injectie via laminotomy in varkens. Standaard neurochirurgische technieken, instrumenten en materialen werden gebruikt en de methode werd ontworpen om na te bootsen moderne chirurgische praktijk. We tonen intraganglionic injectie met behulp van een waterige oplossing voor lumbale DRG en Bevestig succesvolle levering via histologie na postoperatieve dag 21.

<table><tbody><tr><td>Large humane animal sling</td><td>Britz &amp; Company</td><td>002539</td><td>Gemodificeerd om een abdominale opening te bevatten</td></tr><tr><td>Adhesive patient return electrode - 9 inch</td><td>Medtronic</td><td>E7506</td><td>-</td></tr><tr><td>Ranger blood &amp; fluid warming system</td><td>3M</td><td>24500</td><td>-</td></tr><tr><td>Lactated Ringer's fluid</td><td>Hospira</td><td>0409-7953-09</td><td>-</td></tr><tr><td>Force air warming device</td><td>3M</td><td>77500</td><td>-</td></tr><tr><td>Duraprep solution with applicator, 26 mL (0.7% iodine povacrylex, 74% isopropyl alcohol)</td><td>3M</td><td>8630</td><td>-</td></tr><tr><td>Sterile disposable surgical towels</td><td>Medline</td><td>MDT2168286</td><td>-</td></tr><tr><td>Ioban 2 incise drape</td><td>3M</td><td>6651EZSB</td><td>-</td></tr><tr><td>Disposable suction canister and tubing</td><td>Medline</td><td>DYND44703H</td><td>-</td></tr><tr><td>Button switch electrosurgical monopolar pencil</td><td>Medtronic</td><td>E2450H</td><td>-</td></tr><tr><td>Fine smooth straight bipolar electrosurgical forceps, 4 1/2 inch</td><td>Bovie</td><td>A826</td><td>-</td></tr><tr><td>#15 blade</td><td>Miltex</td><td>4-315</td><td>-</td></tr><tr><td>#11 blade</td><td>Miltex</td><td>4-311</td><td>-</td></tr><tr><td>4 x 4 surgical gauze</td><td>Dynarex</td><td>3262</td><td>-</td></tr><tr><td>Weitlaner self-retaining retractor, 8 inch</td><td>Miltex</td><td>11-618</td><td>-</td></tr><tr><td>Meyerding self-retaining retractor, 1 x 2 3/8 inch</td><td>Sklar</td><td>42-2078</td><td>-</td></tr><tr><td>Gelpi self-retaining retractor, 7 inch</td><td>Sklar</td><td>60-6570</td><td>-</td></tr><tr><td>Freer elevator, 5 mm</td><td>Medline</td><td>MDS4641518F</td><td>-</td></tr><tr><td>Bone wax</td><td>Ethicon</td><td>W31G</td><td>-</td></tr><tr><td>Spurling intervertebral disc rongeur, 3 mm</td><td>Sklar</td><td>42-2852</td><td>-</td></tr><tr><td>Spurling 45-degree, up-biting Kerrison rongeur, 2 mm</td><td>Medline</td><td>MDS4052802</td><td>-</td></tr><tr><td>Leksell angled rongeur, 2 mm</td><td>Sklar</td><td>40-4097</td><td>-</td></tr><tr><td>Gelfoam, size 50</td><td>Pfizer</td><td>AZL32301</td><td>-</td></tr><tr><td>Cottonoid patty</td><td>Medtronic</td><td>8004007</td><td>-</td></tr><tr><td>Frazier suction tip, 6 Fr</td><td>Sklar</td><td>50-2006</td><td>-</td></tr><tr><td>Frazier suction tip, 10 Fr</td><td>Sklar</td><td>50-2010</td><td>-</td></tr><tr><td>Dandy blunt right angle nerve hook</td><td>Medline</td><td>MDS4005220</td><td>-</td></tr><tr><td>Nylon suture, 6-0</td><td>Ethicon</td><td>697G</td><td>-</td></tr><tr><td>Castroviejo smooth micro needle holder</td><td>Medline</td><td>MDG2428614</td><td>-</td></tr><tr><td>22 gauge Quinke point spinal needle</td><td>Halyard Health</td><td>18397</td><td>-</td></tr><tr><td>32 gauge CED needle with locking Luer hub</td><td>Zie opmerkingen</td><td>n/a</td><td>Zoals in: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. Technical note. J Neurosurg. 121(4), 851-8 (2014).</td></tr><tr><td>Polyethylene tubing, 5 feet</td><td>Scientific Commodities</td><td>BB31695-PE/05</td><td>-</td></tr><tr><td>Monoject syringe, 3 mL</td><td>Kendall</td><td>SY15352</td><td>-</td></tr><tr><td>NanoJet syringe pump</td><td>Chemyx</td><td>10050</td><td>-</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542</td><td>-</td></tr><tr><td>Fast Green FCF</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F7252</td><td>-</td></tr><tr><td>Bulb irrigation syringe</td><td>Medline</td><td>DYND20125</td><td>-</td></tr><tr><td>Fine-toothed Adson forceps</td><td>Medline</td><td>MDS1000212</td><td>-</td></tr><tr><td>Vicryl suture, 0</td><td>Ethicon</td><td>J603H</td><td>-</td></tr><tr><td>Vicryl suture, 2-0</td><td>Ethicon</td><td>J317H</td><td>-</td></tr><tr><td>Needle counter</td><td>Medline</td><td>NC20FBRGS</td><td>-</td></tr><tr><td>Steri-strip skin closure, 1/2x4 inch</td><td>3M</td><td>R1547</td><td>-</td></tr></tbody></table>

laminotomy voor lumbale achterwortelganglia ganglion toegang en injectie in varkens

Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine

Dorsal root ganglia (DRG) zijn anatomisch goed gedefinieerde structuren die alle primaire sensorische neuronen onder het hoofd bevatten. Dit feit maakt DRG aantrekkelijke doelen voor injectie van roman therapeutics gericht op de behandeling van chronische pijn. In kleine diermodellen, is laminectomie gebruikt om de DRG injectie omdat daarbij chirurgische verwijdering van de wervel bot rond elke DRG. We tonen een techniek voor intraganglionic injectie van lumbale DRG in een grote diersoorten, namelijk varkens. Laminotomy wordt uitgevoerd om directe toegang tot de DRG met behulp van standaard neurochirurgische technieken, instrumenten en materialen. In vergelijking met de meer uitgebreide bot verwijderen via laminectomie, implementeren we laminotomy om te besparen wervelkolom anatomie terwijl het bereiken van voldoende DRG toegang. Intraoperatieve voortgang van DRG injectie wordt gecontroleerd met behulp van een niet-toxisch kleurstof. Na euthanasie op postoperatieve dag 21, het welslagen van de injectie wordt bepaald door de histologie voor intraganglionic distributie van 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). Wij injecteren een biologisch inactieve oplossing om aan te tonen van het protocol. Deze methode zou toegepaste voortaan Preklinische studies naar doel therapeutische oplossingen voor DRG. Onze methodologie moet vergemakkelijken de vertaalbaarheid van intraganglionic kleine dierlijke paradigma's te testen in een grote diersoorten. Bovendien, kan dit protocol dienen als een belangrijke bron voor die planning van preklinische studies van DRG injectie in varkens.

Histologische beoordelingvan injectate verspreiding Succesvolle levering van injectate aan DRG wordt bepaald door de histologische beoordelingvan DAPI verspreid. De techniek gaat positionering van de naald-tip in de driedimensionale midden van de Deutsche Reichsbahn. Daarom, succesvolle levering wordt bepaald door de beoordeling van de omvang van de DAPI kleuring van histologische secties beide in de buurt van (centrale DRG delen) en verre (perifere DRG afdelingen) tot aan de vingertop naald. <strong ...

Beschrijven we een methode voor laminotomy in varkens die toegang tot lumbale dorsal root ganglia (DRG) voor intraganglionic injectie geeft. Injectie is toezicht op de vorderingen en en histologisch bevestigde tot 21 dagen na de operatie. Dit protocol kan worden gebruikt voor toekomstige Preklinische studies waarbij DRG injectie.

Laminotomy voor lumbale achterwortelganglia Ganglion toegang en injectie in varkens

Dorsal root ganglia (DRG) are anatomically well defined structures that contain all primary sensory neurons below the head. This fact makes DRG attractive ...

Het algemene doel van deze procedure is om chirurgische toegang te bieden tot een lumbaal dorsaal wortelganglion bij varkens voor intraganglionische injectie van een oplossing met behulp van een convectie-verbeterde aflevernaald. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van de fundamentele en translationele neurowetenschappen met betrekking tot het effect van een nieuw medicijn op DRG-cellen wanneer het rechtstreeks op het DRG-parenchym wordt afgegeven. Het grote voordeel van deze techniek is dat het de nodige technische gegevens levert om te bevestigen dat een oplossing met succes op DRG is afgegeven en om resultaten te vergelijken tussen biologische replica's.Deze techniek zal de referentiestandaard zijn voor intraganglionische aflevering. Het uiteindelijke doel is beeldgestuurde aflevering. Met deze referentiestandaard kunnen we de therapeutische werkzaamheid van de middelen en de afleverefficiëntie uniek karakteriseren.Anesthesiseer een varken voor de operatie en plaats het vervolgens in een gemodificeerde grote humane dieren-sling met een gewatteerde buikopening. Zorg ervoor dat de metalen onderdelen gewatteerde zijn om kortsluiting te voorkomen. Om de huid boven de lumbale wervelkolom voor te bereiden, schrobt u het gebied volgens de instructies van de fabrikant met een royale hoeveelheid oplossing.Ga door met het chirurgische schrobben richting de coronale middenlijnvlak voorbij de gemarkeerde dwarsprocessen met behulp van dezelfde techniek. Plaats vervolgens chirurgische handdoeken netjes rond de incisieplaats over de middenlijn langs de gemarkeerde lumbale doornuitsteeksels. Bedek vervolgens het hele gebied ruim voorbij de rand van de operatieplaats.Zodra u volledig voorbereid bent op de operatie, begint u met een nummer-15 scalpel om een midline sagittale incisie van acht tot 12 centimeter te openen door de incisiedrape direct achter de doornuitsteeksels. Houd hemostasis in stand met behulp van gaas tamponades en monopolaire elektrochirurgie. Gebruik vervolgens monopolaire elektrochirurgie om het onderhuidse weefsel en vet bovenop de thoracale lumbale fascia te dissecteren.Palpeer vervolgens de doornuitsteeksels diep onder de thoracale lumbale fascia en snijd de fascia langs de middenlijn om het supraspinaal ligament bloot te leggen dat zich tussen de doornuitsteeksels uitstrekt. Op dit punt kan de incisie in beide richtingen worden verlengd om ervoor te zorgen dat drie doornuitsteeksels volledig zichtbaar zijn. Maak nu een twee millimeter diepe parasagittale incisie door het supraspinaal ligament achter elk doornuitsteeksel met behulp van een nummer-15 blad.Maak de incisies langs de linker derde van de achterste oppervlakte van de doornuitsteeksels. Gebruik vervolgens een vijfentwintig millimeter Freer elevator om het supraspinaal ligament op elk niveau langs elke incisie voorzichtig los te maken. Identificeer nu het subperiostale vlak en dissecteer in dat vlak langs het laterale oppervlak van elk doornuitsteeksel.Voer vervolgens drie subperiostale dissecties uit in een parallelle vorm om een zachte en gelijkmatige dissectie te maken. Identificeer vervolgens de lamina op elk niveau en voer een subperiostale dissectie lateraal uit. Breng de dissectie uit tot de laterale rand van de twee zygapofyseale gewrichten die de drie blootgestelde wervels in de laterale rand van de lamina tussen de gewrichten verbinden.Deze lamina is de pars interarticularis. Het markeert de achterste rand van de intervertebrale foramina waar de DRG zich bevinden. Gebruik voorzichtig een vijfentwintig millimeter Freer elevator of curette om de overgang tussen de caudale rand van de lamina en centrale kanaal te palperen.Duw de elevator niet naar voren. Gebruik vervolgens rongeurs om het bot stukjesgewijs te verwijderen. Verwijder bot langs de basis van het doornuitsteeksel superieur tot een niveau net caudal van het caudale oppervlak van de pedikel en lateraal tot het volledige uiteinde.Breng het gladde glanzende periosteum volledig bloot. Snijd met een nummer-11 blad en leg epiduraal vet bloot. Laat het inferieure gewrichtsuitsteeksel dat verbonden was met de lamina gedurende het grootste deel van de laminotomie op zijn plaats.Verwijder vervolgens het inferieure gewrichtsuitsteeksel in stukken, maar laat het aangrenzende superieure gewrichtsuitsteeksel intact. Dissecteer nu de DRG met behulp van een loepvergroting of een dissectiesmicroscoop. Evacueer eerst het epidurale vet in stukken beginnend mediaal en ga lateraal verder.Maak een zachte dissectie met bipolaire forceps en zuig via zes tot tien Franse Frazier zuigtips. Identificeer vervolgens de durazak langs de middenlijn die in een superieur inferieure richting loopt parallel aan de as van de huidincisiever. Verwijder vervolgens het epidurale vet langs de durazak totdat de durazak de durale zenuwwortelhuls kan laten zien.Ga door met het ontdoen van epiduraal vet, volg de durale huls lateraal en inferieur totdat deze zich rond de DRG verbreedt. De DRG is ovaal en geeloranje, ongeveer vier tot zes millimeter breed. Ga lateraal verder met het verwijderen van vet voorbij de DRG totdat de aangrenzende spinale zenuw te zien is.Gebruik een 22-gauge spinale naald om de traject van een 32-gauge CED-naald te begeleiden. Prik de geleidnaald door de huid en paraspinale spieren. Richt de geleidnaald zeer zorgvuldig uit op een traject dat de longitudinale toegang van de DRG benadert.Breng de geleidnaald geleidelijk naar voren totdat de punt uit de laterale paraspinale wand van het dissectieveld tevoorschijn komt. Breng vervolgens de geleidnaald langs zijn lange as naar voren om de punt van de CED-naald te benaderen tot de DRG. Prik nu de DRG met de punt van de CED-naald en dompel de punt onder in het driedimensionale centrum van de DRG.Het is van cruciaal belang om opnieuw rekening te houden met de unieke grootte en vorm van de blootgestelde DRG. Het doel is om een soepele punctie te bereiken en de naaldpunt onder te dompelen om het driedimensionale centrum van de DRG te bereiken zonder te overschieten of de doelgroep te missen. Lever nu 100 microliters injectaat

laminotomy-for-lumbar-dorsal-root-ganglion-access-injection

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Neurale voorloper transplantatie is een veelbelovende strategie voor de bescherming en / of vervangen van verloren / disfunctionele cervicale diafragma motorische neuronen in het ruggenmerg letsel (SCI) en de motor neuron ziekte, amyotrofe laterale sclerose (ALS). Wij bieden een protocol voor de cel levering aan cervicale ruggenmerg ventrale hoorn in knaagdiermodellen van ALS en SCI.

Intraspinale Cel Transplantatie voor Targeting Cervicale ventrale hoorn van Amyotrofische Lateraal Sclerose en traumatisch ruggenmergletsel

Live-Imaging van de dorsale wortel Axonen na Rhizotomy

Korte visuele beschrijving van de chirurgische techniek en apparaat voor de levering van (gen en cellen) therapieën in het ruggenmerg. De techniek blijkt in het dier, maar is volledig en vertaalbaar momenteel gebruikt bij de mens.

Chirurgische Techniek voor Spinal Cord Levering van therapieën: Demonstratie van orde in Göttingen minivarkens

Source: Unger, M. D., et al., Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates a laminotomy procedure in an anesthetized pig to access the lumbar dorsal root ganglion for targeted neurotherapeutic delivery using convection-enhanced delivery.

Laminotomy for Targeted Injection into the Lumbar Dorsal Root Ganglion in a Pig Model

Source: Cheah, M., et al. Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration. J. Vis. Exp. (2017).This video demonstrates a step-by-step procedure for injecting a viral suspension into the dorsal root ganglia (DRGs) and inducing a controlled axonal injury via a dorsal root crush in an anesthetized rat. The protocol involves exposing the DRGs, delivering a growth-promoting viral vector to facilitate axonal regeneration, and severing axonal...

Modeling Sensory Axon Regeneration in a Rat Using Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury

Dit protocol presenteert het gebruik van een dorsale wortelganglion (DRG) injectie met een virale vector en een gelijktijdige dorsale wortelbeschadiging bij een volwassen rat als een model om sensorische axonregeneratie te bestuderen. Dit model is geschikt voor het onderzoeken van het gebruik van gentherapie om sensorische axonregeneratie te bevorderen.

Ganglion Injection en dorsale Root crush als een model voor Sensory Axon Regeneration

Het huidige protocol beschrijft in vivo calciumbeeldvorming voor het meten van de reacties van ensembles van lumbale-6 DRG-neuronen op somatische en viscerale stimuli. Er kunnen grondige vergelijkingen worden gemaakt tussen neuronen die reageren op verschillende stimuli. Dit protocol is waardevol voor het onderzoeken van mechanismen van viscerale pijn en somatische stimulatie, zoals acupunctuur.

In Vivo calciumbeeldvorming van de respons van neuronen in dorsale wortelganglia op somatische en viscerale stimuli

Dit chirurgische protocol is een stapsgewijze handleiding voor het inbrengen van een intrathecale katheter in de subdurale wervelkolom van een knaagdier om een gerichte behandeling toe te dienen.

Toegang tot de subdurale ruimte van het ruggenmerg van het knaagdier voor behandeling

Dit protocol biedt een stapsgewijze handleiding voor het uitvoeren van transforaminale volledige endoscopische foraminotomie onder plaatselijke verdoving. Deze bewegingsbehoudende techniek wordt gepresenteerd als een minimaal invasief chirurgisch alternatief voor fusie-extensie voor de behandeling van L5/S1 foraminale stenose bij patiënten met ziekte van het aangrenzende segment.

Transforaminale volledige endoscopische lumbale foraminotomie onder plaatselijke verdoving voor l5/S1 aangrenzende segment foraminale stenose

Dit artikel beschrijft intrathecale toedieningsmethoden voor op het CNS gerichte therapieën bij volwassen muizen, met de nadruk op protocolprecisie en het mogelijk maken van herhaalde injectie. Het bevat bevindingen uit een validatiestudie waarbij antisense-oligonucleotiden de expressie van mutant SOD1 verminderden in SOD1-ALS-modelmuizen, wat het nut van deze aanpak ondersteunt in preklinisch onderzoek naar neurodegeneratieve ziekten.

Lumbale intrathecale injectie van SOD1-ASO's voor precieze CNS-targeting en voorspellende effectiviteit bij menselijke SOD1-G93A ALS-muizen

Leer een chirurgische laminotomie-methode voor toegang tot lumbale dorsale wortelganglia in varkens voor intraganglionaire injectie. Deze techniek valideert geneesmiddelafgifte met intraoperatieve monitoring en histologische bevestiging.

Laminotomy voor lumbale achterwortelganglia Ganglion toegang en injectie in varkens

Meer video's verkennen