Name: Regeneratieve therapie door Suprachoroidal cel Autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp In Vivo verslag (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-12T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Leer een chirurgische suprachoroidale autograft-techniek voor regeneratieve therapie bij droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie. Deze methode verbetert het gezichtsvermogen door stamcellen en groeifactoren in te zetten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben geen bevestigingen.

Het studie-protocol is goedgekeurd door de ethische commissie van de Academie van Low Vision en alle onderwerpen een schriftelijke toestemming overeenkomstig de verklaring van Helsinki ondertekend. Deze studie heeft ethische goedkeuring gekregen van zowel Loughborough en Sheffield universiteiten.
Opmerking: De integratie en uitsluiting criteria van droge leeftijdsgebonden maculadegeneratie patiënten ontvangen suprachoroidal autologe transplantatie door Limoli retinale restauratie techniek (LRRT) wordt beschreven in tabel 1.
1. de diagnose van droge leeftijdsgebonden maculadegeneratie patiënten
<ol><li>Het vaststellen van de diagnose met confocale scanning laser oftalmoscoop, SD-OCT en MY.</li>
	<li>Evalueren van elke groep BCVA voor veel en in de buurt van afstand. Maatregel VA voor in de omgeving van zicht (close-up) in punten (Pts). BCVA op moment 0 (T0), 90 (T90), meten en 180 dagen (T180) vergeleken met vroege behandeling diabetische retinopathie studie (EDTRS) grafieken op 4 meter in logMAR.</li>
	<li>Record elektrische scotopisch, mesopisch, en fotopisch cel activiteit of flash ERG, volgens de normen die in 2009 door de International Society for klinische electrofysiologie van visie (ISCEV)11.</li>
</ol>2. afstomping
Opmerking: De gouden standaard in de anesthesie tijdens LRRT is topische verdoving, versterkt door sub-tenon infiltratie van verdoving en sedatie. In specifieke gevallen heeft narcose de voorkeur.
<ol><li>Verkrijgen hoornvlies en conjunctivale verdoving door toepassing van actuele lokale anesthetica ingeprent dropwise 15-20 min vóór de operatie met lidocaïne op 4% en ropivacaine op 1%.</li>
	<li>Verdoving door infiltratie rechtstreeks in sub-conjunctivale injecteren en subtenon van ruimten.</li>
	<li>Lokale infiltratie in de abdominale regio, voordat het vetweefsel wordt gewonnen, zowel in de sub-conjunctivale en sub-tenon ruimten, 12 mm van de limbus gebruiken Aannemen van lokale verdoving van carbocaine of marcain gemengd met 1.200 IU epinefrine.</li>
	<li>Intraoperatieve sedatie door middel van de verdoving, die goed kan worden uitgevoerd met behulp van fentanyl als een verdovend pijnstiller via herhaalde kleine boli bieden. De dosering is over het algemeen 0,025 mg van fentanyl met 1 mg van midazolam per bolus.</li>
</ol>3. Limoli retinale restauratie techniek voorbereiding
Opmerking: Deze techniek vertegenwoordigt een variant van de Pelaez interventie door die orbitale autologe vet is getransplanteerd in de subscleral ruimte1,6,7,12. Operatief geënte cellen kunnen produceren veel GFs met eigenschappen van de neurotrophic en angiotrophic in het omringende weefsel, vaatvlies en netvlies18,19,20,21,22 ,23,24,25. LRRT, de afstand tussen geënte autologe cellen en vaatvlies wordt verminderd door middel van diepe sclerectomy, en de contactpunten tussen de stengel en het vaatvlies is uitgevouwen ter bevordering van de afscheiding autologe cel paracrine in de choroidal stroom9, 10,14.
<ol><li>Voer de juiste ontsmetting van elk van beide ogen voor de operatie met cellulaire enting tussen het vaatvlies en sclera, een procedure genaamd Limoli retinale restauratie techniek (LRRT)15,16,17.</li>
	<li>Het enten van de ADSCs, verkregen door Coleman et al. en Lawrences techniek (Figuur 1) van buikvet, in de SVF in de sovrachoroidal ruimte15,16,17.</li>
	<li>De obesitas stam infiltreren met bloedplaatjes afgeleid van PRP gel verkregen via de volgende stappen uit.</li>
	<li>Centrifugeren van bloed6,12 en verzamelen van platelet-rich plasma (PRP). De stimulans voor bloedplaatjes degranulatie veroorzaakt GF release in de obesitas stam6,12.</li>
</ol>4. technische specificaties en strategie
Opmerking: Vetweefsel is verzameld en gezuiverd uit de buik subcutane laag van patiënten, volgens de Lawrence en Coleman techniek17(Tabel van materialen).
<ol><li>Handmatig oogst 10 mL van vet weefsel van de buik subcutane laag van elke patiënt, met behulp van een 3-mm botte canule verbonden met een vergrendeling spuit, volgens de Lawrence en Coleman techniek17 (cijfers 2A/2B).</li>
	<li>Pure SVF van vetweefsel van bloed, vet, olie en vloeistof scheiden door middel van centrifugeren voor 5 min bij 1.500 x g bij 20 ° C (Figuur 2C). De SVF is zeer rijk van ADSCs17.</li>
	<li>Verzamelen 8 mL perifere bloed met een naald 22 G en in een aparte buis PRP voorbereiding.</li>
	<li>Centrifugeer het verzamelde bloed gedurende 5 minuten bij 1.500 x g bij 20 ° C (Figuur 2D). In LRRT, de daaruit voortvloeiende veranderingen leiden tot betere overleving van het autologe transplantatie van vet, ADSC proliferatie, die verhoogde choroidal perfusie gunsten, en een uitgebreidere modulatie van het optreden van die factoren die worden uitgescheiden door vet7, 11,17.</li>
	<li>De suprachoroidal zak (meer details in stap 4, bepaalde 4.4 en 4.5) bouwen om de prothese orbitale vet verkregen en het residuele volume van deze zak te verzadigen met een mengsel van ADSCs van SVF en PRP, verkregen volgens de Lawrence en Coleman techniek17.</li>
</ol>5. Suprachoroidal Autograft door LRRT (Limoli retinale restauratie techniek): chirurgische ingreep en technische Details
<ol><li>Het verankeren van de sclera met 6-0 zijde hechtdraad, in de buurt van het inferior-temporele limbus.</li>
	<li>Open de subconjunctival en subtenonian ruimte op 11 mm van het inferior-temporele limbus, met behulp van 5.5" gebogen schaar Westcott Tenetomy.</li>
	<li>Het Limoli-Basile conjunctivale oprolmechanisme in deze ruimte te maken van een scleral chirurgische veld invoegen</li>
	<li>Met behulp van een 5-mm wassende mes Schuine Afschuining, snijden vooraf van een flap aan de kant in de sclera op 8 mm, van de limbus. Het klep scharnier is altijd radiale en aan de linkerkant van de chirurg.</li>
	<li>Open in het inferior-temporele Kwadrant, op 8 mm van de limbus, een diep scleral deur van ongeveer 5 mm voor de zijde door radiale scharnier met behulp van een halve maan mes, Schuine Afschuining omhoog. Uitvoeren van sclerectomy op een voldoende diepte te bekijken van de leisteen kleur van het vaatvlies.</li>
	<li>Maak een gat door het verwijderen van een beetje operculum in het distale deel van de klep, ter vergemakkelijking van de bloedcirculatie in de daaropvolgende suprachoroidal autograft.</li>
	<li>Pak met een oogheelkundige Tang de orbitale vet uit een gat boven de inferieure Musculus obliquus. Zorg ervoor dat is voldoende gevacuoliseerd het uitgepakte vet om te overleven na de innesteling kunnen.</li>
	<li>Plaats de autologe vet klep voorzichtig op de choroidal bed en hechtdraad met choroidal 6/0 polyglactin vezel aan de proximale rand van de deur.</li>
	<li>Sutuur (geologie) de scleral klep om te voorkomen dat compressie op de dikke stam of op haar voedingsstoffen vaartuigen.</li>
	<li>Het stroma van de dikke stam met 1 mL PRP gel (verkregen door centrifugering van het bloed-materiaal, scheiding van de component, en bloedplaatjes degranulatie26) infiltreren met behulp van een canule 30 G schuine (30 °).</li>
	<li>De zijkanten van het bindvlies voorbereiden op het hechtdraad. Verwijder vervolgens de conjunctivale oprolmechanisme.</li>
	<li>Suture het bindvlies, met behulp van 6/0 polyglactin vezel.</li>
	<li>Laat een ruimte om in te voegen in de subscleral ruimte, tussen de klep, het vaatvlies en de choroidal autograft, een kleine flexibele kunststof buis met het vet autologe transplantatie alvorens te besluiten.</li>
	<li>Verzadig de resterende ruimte tussen de autologe transplantatie van vet, vaatvlies en scleral kleppen met 0,5 cc van SVF (rijk van ADSCs), eerder bereid in stap 3.2, door een kleine flexibele kunststof buis, ingevoegd in de scleral zak.</li>
	<li>Sluit na het verzadigen van de resterende ruimte, de hechtdraad.</li>
	<li>Na de operatie, drie dagen van antibiotische therapie met 500 mg, Azithromycine te beheren. Ook voorzien van oog neerzetten therapie een antibiotica en steroïden combinatie, zoals chlooramfenicol en Betamethasone, voor ongeveer 15-20 dagen. Opmerking: Een autograft samengesteld uit vetcellen, ADSCs van SVF en PRP is nu verkregen26. Verklein de afstand tussen de geënte autologe cellen en vaatvlies door diepe sclerectomy ter stimulering van de secretie van de paracrine van autologe cellen in de choroidal stroom. Vouw voor hetzelfde doel, het gebied van contact tussen de stengel en het vaatvlies.</li>
</ol>

<ol><li>Daftarian, N., Kiani, S., Zahabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+therapy+for+retinal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Ophthalmic+Vis.+Res%22%5BJournal%5D)">Regenerative therapy for retinal disorders.</a> J. Ophthalmic Vis. Res. 5, 250-264 (2010).</li>
<li>Thanos, C., Emerich, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+neurotrophic+factors+and+therapeutic+proteins+for+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Opin.+Biol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Delivery of neurotrophic factors and therapeutic proteins for retinal diseases.</a> Expert. Opin. Biol. Ther. 5, 1443-1452 (2005).</li>
<li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+protection+of+photoreceptors+from+light+damage+by+pigment+epithelium-derived+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Inv.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">In vivo protection of photoreceptors from light damage by pigment epithelium-derived factor.</a> Inv. Ophthalmol. Vis. Sci. 42, 1646-1652 (2001).</li>
<li>Bhutto, I., Lutty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+age-related+macular+degeneration+%28AMD%29%3A+Relationships+between+the+photoreceptor%2Fretinal+pigment+epithelium%2FBruch%27s+membrane%2Fchoriocapillaris+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Understanding age-related macular degeneration (AMD): Relationships between the photoreceptor/retinal pigment epithelium/Bruch's membrane/choriocapillaris complex.</a> Mol. Aspects Med. 33 (4), 295-317 (2012).</li>
<li>McHarg, S., Brace, N., Bishop, P. N., Clark, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enrichment+of+Bruch%27s+membrane+from+human+donor+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Enrichment of Bruch's membrane from human donor eyes.</a> J. Vis. Exp. (105), (2015).</li>
<li>Kevy, S. V., et al. Preparation of growth factor enriched autologous platelet gel. <a target="_blank" href="NULL">Transactions of the Society for Biomaterials 27th Annual Meeting</a>. , St. Paul, Minnesota, USA. April 24-29 (2001).</li>
<li>Schaffler, A., Buchler, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concise+review%3A+adipose+tissue-derived+stromal+cells-basic+and+clinical+implications+for+novel+cell-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Concise review: adipose tissue-derived stromal cells-basic and clinical implications for novel cell-based therapies.</a> Stem Cells. 25, 818-882 (2007).</li>
<li>Filatov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Gen.+Fr%22%5BJournal%5D)">Tissue therapy.</a> Med. Gen. Fr. 11, 3-5 (1951).</li>
<li>Pelaez, O. Retinitis pigmentosa. <a target="_blank" href="NULL">Cuban experience</a>. , Editorial Cientifico Técnica. La Habana, Cuba. (1997).</li>
<li>Meduri, R., et al. Effect of basic fibroblast growth factor on the retinal degeneration of B6(A)- Rperd12/J (retinitis pigmentosa) mouse: a morphologic and ultrastructure study. ARVO 2007 Annual Meeting. , Fort Lauderdale. May 6-10 (2007).</li>
<li>Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Morales, M. U., Nebbioso, M., Limoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+Study+on+Electrophysiological+Changes+After+Cellular+Autograft+in+Age-Related+Macular+Degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine%22%5BJournal%5D)">Preliminary Study on Electrophysiological Changes After Cellular Autograft in Age-Related Macular Degeneration.</a> Medicine. 93 (29), 355(2014).</li>
<li>Tischler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+rich+plasma%3A+The+use+of+autologous+growth+factors+to+enhance+bone+and+soft+tissue+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Y.+State+Dent.+J%22%5BJournal%5D)">Platelet rich plasma: The use of autologous growth factors to enhance bone and soft tissue grafts.</a> N. Y. State Dent. J. 68, 22(2002).</li>
<li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biol.+Cell%22%5BJournal%5D)">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Mol. Biol. Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li>
<li>Lin, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+administration+of+orbital+fat-derived+stem+cells+promotes+corneal+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res.+Ther%22%5BJournal%5D)">Topical administration of orbital fat-derived stem cells promotes corneal tissue regeneration.</a> Stem Cell Res. Ther. 4 (3), 72(2013).</li>
<li>Limoli, P. The retinal cell-neurorigeneration. Principles, applications and perspectives. <a target="_blank" href="NULL">The growth factors</a>. , FGE Reg. Canelli (AT). 159-206 (2014).</li>
<li>Coleman, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+of+care+for+liposuction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Acad.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Guidelines of care for liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 45, 438-447 (2001).</li>
<li>Lawrence, N., Coleman, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liposuction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Acad.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 47, 105-108 (2002).</li>
<li>Kamao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+retinal+pigment+epithelium+cell+sheets+aiming+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Characterization of human induced pluripotent stem cell-derived retinal pigment epithelium cell sheets aiming for clinical application.</a> Stem Cell Reports. 23 (2), 205-218 (2014).</li>
<li>Dang, Y., Zhang, C., Zhu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+therapies+for+age-related+macular+degeneration%3A+the+past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Interv.+Aging%22%5BJournal%5D)">Stem cell therapies for age-related macular degeneration: the past, present, and future.</a> Clin. Interv. Aging. 10, 255-264 (2015).</li>
<li>Nebbioso, M., Livani, M. L., Steigerwalt, R. D., Panetta, V., Rispoli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retina+in+rheumatic+diseases%3A+Standard+full+field+and+multifocal+electroretinography+in+hydroxychloroquine%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Optom%22%5BJournal%5D)">Retina in rheumatic diseases: Standard full field and multifocal electroretinography in hydroxychloroquine.</a> Clin. Exp. Optom. 94 (3), 276-283 (2011).</li>
<li>Wang, P., Mariman, E., Renes, J., Keijer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+secretory+function+of+adipocytes+in+the+physiology+of+white+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The secretory function of adipocytes in the physiology of white adipose tissue.</a> J. Cell. Physiol. 216, 3-13 (2008).</li>
<li>Chen, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-Mediated+Proliferation+of+Human+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">VEGF-Mediated Proliferation of Human Adipose Tissue-Derived Stem Cells.</a> PloS One. 8, 73673(2013).</li>
<li>Bagchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+endothelial+growth+factor+is+important+for+brown+adipose+tissue+development+and+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Vascular endothelial growth factor is important for brown adipose tissue development and maintenance.</a> FASEB J. 27, 3257-3271 (2013).</li>
<li>Carron, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cultured+human+retinal+pigment+epithelial+cells+differentially+express+thrombospondin-1%2C+-2%2C+-3%2Cand+-4%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biochem.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cultured human retinal pigment epithelial cells differentially express thrombospondin-1, -2, -3,and -4.</a> Int. J. Biochem. Cell. Biol. 32, 1137-1142 (2000).</li>
<li>Kim, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+pigment+epithelium-derived+factor+%28PEDF%29+and+vascular+endothelial+growth+factor+%28VEGF%29+in+sickle+cell+retina+and+choroid%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Expression of pigment epithelium-derived factor (PEDF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in sickle cell retina and choroid.</a> Exp. Eye Res. 77, 433-445 (2003).</li>
<li>Limoli, P. G., Limoli, C., Vingolo, E. M., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+surgery+and+growth+factors+in+dry+age-related+macular+degeneration%3A+visual+prognosis+and+morphological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Cell surgery and growth factors in dry age-related macular degeneration: visual prognosis and morphological study.</a> Oncotarget. 7 (30), 46913-46923 (2016).</li>
<li>Ueki, Y., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EGF+stimulates+M%C3%BCller+glial+proliferation+via+a+BMP-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">EGF stimulates Müller glial proliferation via a BMP-dependent mechanism.</a> Glia. 61, 778-789 (2013).</li>
<li>Kozlowski, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RPE+cell+senescence%3A+A+key+contributor+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">RPE cell senescence: A key contributor to age-related macular degeneration.</a> Med. Hypotheses. 78, 505-510 (2012).</li>
<li>Schneider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hematopoietic+factor+G-CSF+is+a+neuronal+ligand+that+counteracts+programmed+cell+death+and+drives+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">The hematopoietic factor G-CSF is a neuronal ligand that counteracts programmed cell death and drives neurogenesis.</a> J. Clin. Invest. 115, 2083-2098 (2015).</li>
<li>Yin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncomodulin+is+a+macrophage-derived+signal+for+axon+regeneration+in+retinal+ganglion+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Oncomodulin is a macrophage-derived signal for axon regeneration in retinal ganglion cells.</a> Nat. Neurosci. 9, 843-852 (2006).</li>
</ol>

Gepresenteerd op ARVO 2015, mei 3-7-Denver, CO - USA.

Het primaire doel van deze studie was om te evalueren of de prothese suprachoroidal van adipocytes, ADSCs in SVF en PRP VA en netvlies gevoeligheid in droge AMD geteisterde ogen na verloop van tijd zou kunnen verbeteren. Een ander hoofddoel was om aan te tonen van mogelijke therapeutische effecten van deze cellen, op basis van de recente literatuur, aangezien verschillende Preklinische studies hebben gesuggereerd dat GF gebaseerde therapie nuttig voor patiëntenzorg in verschillende ziekten zijn kan.
<p class="jove_co...

Celtherapie, bestaande uit de systemische of lokale injectie stam/van voorlopercellen van de gewonde gebied voor de behandeling van meerdere chronische aandoeningen, heeft veel aandacht getrokken in de laatste tien jaar1. Sinds de jaren 1990, hebben groeifactoren (GFs) onderzocht voor hun potentieel therapeutische rol in de retina atrofie2. In feite, kunnen veel menselijke cellen produceren GFs, die specifieke proteïnen die kunnen blokkeren of vertragen apoptosis, dat wil zeggen, de geprogrammeerde dood van cellen3.
Het is bekend dat droge leeftijdsgebonden Macula Degeneratie (LMD) is een atrofische retinale ziekte wanneer geleidelijke en onomkeerbare celdood betrekking heeft op schade aan de fotoreceptor laag en dus het verlies van centrale visuele functie4. AMD is de belangrijkste oorzaak van blindheid bij mensen ouder dan 55 jaar in ontwikkelde landen en goed voor 80% van alle macula degenerations, die het ontbreken van een effectieve behandeling tot nu toe.
Verschillende studies hebben aangetoond dat er zijn verschillende bronnen waaruit autologe GFs kunnen worden verkregen. Deze bestaan uit verschillende soorten cellen, met inbegrip van obesitas stromale cellen afgeleid van orbitale vet, trombocyten afgeleid van platelet-rich plasma (PRP) en adipeus-afgeleide cellen van de stam (ADSCs) opgenomen in de stromale vasculaire fractie (SVF) van vetweefsel5 ,6,7. De huidige GF-set zorgt voor retinale neuroenhancement, en onderzoek uitgevoerd door Filatov, Meduri, Pelaez, en Limoli heeft aangetoond dat autologe transplantatie vet (AFT) effectieve8,9,10.
Bovendien, een voorafgaande studie toonde significante verbeteringen in electroretinogram (ERG) gegevens, in droge AMD geteisterde ogen11post suprachoroidal autologe transplantatie, opgenomen. Het chirurgisch geënte weefsel in de suprachoroidal ruimte gemoduleerd de secretie van de paracrine van netvlies cellen, vertragen hun apoptosis6,7,12. Rekening houdend met de dikte van de nucleaire buitenlaag, het histopathologisch onderzoek van het netvlies van cavia's is gebleken dat GFs kon een trofische effect op het netvlies. Daarom kan de directe of indirecte gebruik van GFs potentieel therapeutische voordelen opleveren door middel van een evenwichtige relatie tussen moleculaire inductoren en inhibitoren6,7,12.
Het doel van deze methode is gecorrigeerd om te beoordelen of de prothese suprachoroidal van adipocytes, ADSCs in SVF en PRP best kan verbeteren gezichtsscherpte (BCVA) en microperimetry (MY) Reacties in droge AMD geteisterde ogen. Deze studie heeft tot doel om aan te tonen van het therapeutische effect van autograft op basis van haar GF-productie, volgens de geciteerde literatuur6,7,12,13.

<table><tbody><tr><td>Blunt cannula, 3 mm. </td><td>Mentor, Santa Barbara, CA.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Luer-LokTM-sering. </td><td>BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Regen-BCT-buis. </td><td>RegenKit; RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td> RegenPRP Centri. RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Venflon Pro Safety 22G x 1,00 inch (0,9 mm x 25 mm). </td><td>BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SPSS Statistics Versie 19.0</td><td>IBM Corp., Armonk, NY, VS.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Confocale scanlaser oogspiegel </td><td>Nidek Inc, Fremont, CA</td><td>Nidek F10 </td><td></td></tr><tr><td>Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography</td><td>Carl Zeiss Meditec AG, Jena, Duitsland</td><td> SD-OCT </td><td></td></tr><tr><td>Maia 100809 Microperimetry </td><td>CenterVue S.p.A., Padua, Italië</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oculair elektrofysiologie elektromedisch systeem,</td><td>C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italië</td><td></td><td> Retimax voor ERG </td></tr></tbody></table>

regeneratieve therapie door suprachoroidal cel autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp in vivo verslag

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

Deze studie is gericht op het onderzoeken of een suprachoroidal prothese van autologe cellen best gecorrigeerde gezichtsscherpte (BCVA) verbeteren kan en reacties op microperimetry (MY) in ogen beïnvloed door droog leeftijdsgebonden Macula Degeneratie (LMD) na verloop van tijd door de productie en afscheiding van groeifactoren (GFs) op het omliggende weefsel. Patiënten werden willekeurig toegewezen aan elke studiegroep. Alle patiënten waren gediagnosticeerd met droge AMD en BCVA gelijk is aan of groter is dan 1 logaritme van de minimale hoek van resolutie (logMAR). Een autologe transplantatie van suprachoroidal door Limoli retinale restauratie techniek (LRRT) werd uitgevoerd op groep A, waaronder 11 ogen van 11 patiënten. De techniek werd uitgevoerd door het implanteren van adipocytes, adipeus afkomstige stamcellen verkregen uit de stromale vasculaire breuk, en de trombocyten van platelet-rich-plasma in de suprachoroidal ruimte. Omgekeerd, groep B, met inbegrip van 14 ogen van 14 patiënten, werd gebruikt als een controlegroep. Voor elke patiënt, werd diagnose gecontroleerd door confocale scanning laser oftalmoscoop en spectrale domein-optische coherentie tomografie (SD-OCT). In groep A, BCVA verbeterd door 0.581 aan de 0.504 90 dagen en 0.376 logMAR op 180 dagen (+32.20%) postoperatief. Bovendien, mijn test 11.44 dB tot 12.59 dB stegen op 180 dagen. De verschillende soorten cellen geënt achter het vaatvlies konden verzekeren naar constante GF secretie in de choroidal stroom. Derhalve de resultaten betekenen dat visuele gezichtsscherpte (VA) voor de geënte groep kan verhogen meer dan in de controlegroep na zes maanden.

Met behulp van de procedure die hier gepresenteerd, werden twee groepen van droge AMD geteisterde patiënten, met een BCVA gelijk is aan of groter is dan 1 logaritme van de minimale hoek van resolutie (logMAR), in de studie ingeschreven. Groep A, met inbegrip van 11 ogen van 11 patiënten, ontvangen suprachoroidal autologe transplantatie door Limoli retinale restauratie techniek (LRRT), terwijl groep B, met inbegrip van 14 ogen van 14 patiënten, werd gebruikt als een controlegroep.
<p c...

Het doel van deze studie is om te beoordelen of de suprachoroidal prothese van adipeus afkomstige stamcellen opgenomen in de stromale vasculaire Fractie en bloedplaatjes platelet-rich plasma door de Limoli techniek voor de restauratie van de retinale afgeleid gezichtsscherpte verbeteren kan en netvlies gevoeligheid reacties in ogen beïnvloed door droge leeftijdsgebonden Macula degeneratie.

Regeneratieve therapie door Suprachoroidal cel Autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp In Vivo verslag

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

Het algemene doel van deze chirurgische ingreep is het introduceren van een retinale neuro-verbetering die de apoptose van retinale cellen vertraagt om de visuele prestaties en revalidatie van laagvisiepatiënten te verbeteren. Deze methode kan helpen om belangrijke vragen op het gebied van laagvisie veroorzaakt door retinale atrofische degeneratie, zoals een droge AMD of neurale optische atrofie, te beantwoorden. Het zal het zicht verbeteren, zowel in de natuurlijke omgeving als in het zicht met een geassisteerd vergrotingsapparaat.Deze retinale restauratie bevordert de toename van het vasculaire pedikelvet met het onderliggende colloïde. en het verbetert de vascularisatie van het pedikel, waardoor de gezondheid en overleving van het pedikel wordt verbeterd. Deze therapie werkt ook omdat het een regeneratieve start geeft aan alle retinale elementen, door de deelname van groeifactoren.Hoewel deze techniek werd ontwikkeld voor het vertragen van retinale degeneratie interry, kan het ook worden toegepast op volwassen weefsels of orgaansystemen waar therapie nodig is. Om te beginnen, gebruik een 22-gauge naald om acht milliliter perifeer bloed te verzamelen, om het trombocytenrijke plasma te verzamelen. Gebruik een natriumcitraat vacuümbuis met separatorgel, die de scheiding tussen cellulaire componenten en plasma bevordert.Centrifugeer de bloedbuis gedurende vijf minuten bij 1500g en 20 graden Celsius. Het bloed zal zich in drie lagen scheiden. Aspireer en gooi de bovenste laag weg, bestaande uit trombocytenarm plasma.Verzamel en bewaar vervolgens de middelste laag, bestaande uit trombocytenrijk plasma. Anesthetiseer de patiënt met maculaire degeneratie voor de Limoli retinale restauratie om het vetweefsel te oogsten. Verzamel vetweefsel van de subcutane laag van de buik.Verzamel ongeveer 10 milliliter weefsel met behulp van een drie millimeter stompe canule, verbonden aan een vergrendelde spuit. Gebruik de Lawrence en Coleman techniek. Scheid vervolgens de stromale vasculaire fractie van het vetweefsel door de steekproef gedurende vijf minuten bij 1500 en 20 graden Celsius te laten draaien.De stromale vasculaire fractie, gelegen net boven de bloedlaag, is zeer rijk aan vetafgeleide stamcellen. Er is niet meer dan één milliliter nodig voor de autotransplantatie. Composeer tenslotte de autotransplantatie, door 0,5 tot 0,6 milliliter van de stromale vasculaire fractie, 0,2 tot 0,3 milliliter trombocytenrijk plasma en 0,1 milliliter hyaluronzuur in een afgiftebuis te laden.Meng het met behulp van twee spuiten en een driewegstopkraan. Draai de buis van de canule omhoog op vijf millimeter om de injectie van de autotransplantatie in de sub-sclerale ruimte te vergemakkelijken. Markeer voor het begin van de chirurgie het oog dat de behandeling ondergaat terwijl de patiënt in zittende positie is, om het werkgebied af te bakenen en het fysiologische cyclo-torsie-effect van het oog te vermijden.Begin de restauratieve chirurgie door eerst de sclera te verankeren met een 6-0 zijden hechting nabij de inferieure temporale limbus. Het verankeren van de sclera is een kritieke stap. De naald moet niet te diep, maar ook niet te oppervlakkig de limbus binnengaan.Als je het oog perforeert, zal het leeg lopen. Als de draad een oketa is, zal het oog niet worden verankerd. Wat een stress!Gebruik vervolgens 5,5 inch Westcott tenotomie gebogen scharen om de sub-conjunctivale en sub-Tenonian ruimte te openen, 11 millimeter van de inferieure temporale limbus. Voeg daar de Limoli basiale conjunctivale retractor in om een sclerale chirurgische werkruimte te maken. Gebruik nu een vijf millimeter halvemaanmes, hoekig bevel omhoog, om een flap binnen de inferieure temporale quadrant van de sclera, acht millimeter van de limbus, voor te snijden.Maak de flap straalsgewijs, en aan de linkerkant van de chirurg. Gebruik vervolgens het halvemaanmes, hoekig bevel omhoog, om een diepe sclerale deur van ongeveer vijf millimeter breed te openen, met een straalsgewijze scharnierende in de inferieure temporale quadrant, op acht millimeter van de limbus. Snijd heel langzaam, tangentieel aan het oculaire oppervlak.Pentreer de choroïdale ruimte niet. De ideale diepte is bereikt wanneer de blauwachtige kleur van de onderliggende choroïde verschijnt en de witachtige sclerale sporen minder zichtbaar worden. In dit stadium is de choroïde als een dunne ijsschots.Als de Sclerectomie niet diep genoeg is, zullen gramfactoren geproduceerd door geïmplanteerde cellen niet zoals gewenst penetreren. Als de Sclerotomy te diep is, bestaat het risico op perforatie van de choroïde, wat leidt tot bloeding, of bulkperforaties, gevolgd door retinale schade. Verzamel nu wat orbitaal vet.Maak een opening door een kleine operculum in het distale deel van de flap te verwijderen, om de bloedcirculatie in het volgende supra-choroïdale autotransplantaat te vergemakkelijken. Gebruik vervolgens oogheelkundige pincetten om het orbitaal vet uit een opening boven de inferieure oblique spier te extraheren. Let op kleine bloedingen van het pedikel.Deze zijn indicatief voor een goede vascularisatie, belangrijk voor de overleving van de autotransplantatie. Orbitale vetchirurgie is een andere kritieke stap. We openen de orbitale ruimte zonder schaar, om bloedingen of spiersneden te voorkomen.Vervolgens isoleren we het vetpedikel voordat we het aan de sclera verankeren. Plaats vervolgens voorzichtig het autologe vetpedikel op het choroïdale bed en hecht het langs de proximale rand van de deur dicht, met behulp van choroïdale 6-0 polyglactinevezel. Hecht vervolgens de sclerale flap om compressie op het vetpedikel of op zijn voedingsvaten te voorkomen.Infiltreer nu een milliliter trombocytenrijk plasmagel in het stroma van het vetpedikel, met behulp van een 30-gauge gehoekte canule. Bereid vervolgens de zijden van de conjunctiva voor op het hechten door de retractor te verwijderen. Hecht vervolgens de conjunctiva met behulp van 7-0 polyglactinevezel, maar sluit deze niet.La

regenerative-therapy-suprachoroidal-cell-autograft-dry-age-related

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Celtransplantatie vertegenwoordigt een strategie voor de behandeling van netvliesdegeneratie die wordt gekenmerkt door fotoreceptorverlies. Hier beschrijven we een methode voor verrijking van transplanteerbare fotoreceptoren en hun subretinale enting in volwassen muizen.

Subretinale transplantatie van MACS gezuiverde fotoreceptor precursor cellen in de volwassen muis retina

Hier presenteren we een door de gemeenschap geaccepteerd protocol in multimedia-formaat voor het subretinaal injecteren van een bolus RPE-cellen bij ratten en muizen. Deze aanpak kan worden gebruikt voor het bepalen van reddingspotentieel, veiligheidsprofielen en overlevingscapaciteiten van getransplanteerde RPE-cellen bij implantatie in diermodellen van retinale degeneratie.

Presterende Subretinal Injecties in Knaagdieren om retinale pigment epitheel cellen leveren in Suspension

Netvliespigmentepitheel (RPE) vervangende strategieën en gen-gebaseerde therapie in aanmerking komen voor een aantal retinale degeneratieve aandoeningen. Voor klinische toepassing worden grote oog dierlijke modellen moeten chirurgische technieken bij patiënten toepassing bestuderen. Hier presenteren we een konijnenmodel voor subretinale chirurgie gericht RPE transplantatie, die veelzijdig en kostenefficiënt.

Een Step by Step Protocol voor Subretinal Surgery in Rabbits

Subretinal injectie is veel toegepast in preklinische studies van stamcel substitutietherapie voor leeftijdsgebonden maculaire degeneratie. In dit gevisualiseerde artikel beschrijven we een minder riskant, reproduceerbaar zijn en juist gewijzigd subretinal injectietechniek via de trans-scleral-benadering te leveren van cellen in de ogen van de rat.

Ontwikkeling van een verfijnde Protocol voor Trans-scleral Subretinal transplantatie van menselijke retinale Pigment epitheliale cellen in de ogen van de Rat

Retinale pigment epitheliale cellen kunnen dienen als een cel-vervangende therapie voor de geavanceerde vorm van droge leeftijdsgebonden Macula degeneratie. Dit protocol beschrijft de generatie van een grote-eyed model van geografische atrofie en subretinal transplantatie van menselijke embryonale stamcellen cel afkomstige retinale pigment epitheliale cellen in dit model van ziekte.

Subretinal transplantatie van menselijke embryonale stamcellen afgeleid-retinale Pigment epitheliale cellen in een grote-eyed Model van geografische atrofie

Het doel van dit protocol is om aan te tonen dat het kweken van retinale pigment epitheliale (RPE) cellen op leeftijd en/of zieke mens Bruch membraan. Deze methode is geschikt om te bestuderen het gedrag van de cel van de RPE op een gecompromitteerde extracellulaire matrix.

Kweken van de epitheliale cellen van de retinale Pigment op een Ex Vivo Model van leeftijd menselijke Bruch membraan

Beschrijven we een methode om ingenieur een retinale weefsel samengesteld van retinale pigment epitheliale cellen afgeleid van menselijke pluripotente stamcellen gekweekt op de top van menselijke vruchtwater membranen en de voorbereiding voor de transplantatie in diermodellen.

Transplantatie-geschikt retinale Pigment epitheel Tissue Engineering afgeleid van menselijke embryonale stamcellen

Hier wordt een protocol gepresenteerd om primaire iris- en retinale pigmentepitheelcellen van verschillende zoogdieren (muizen, ratten, konijnen, varkens en runderen) te isoleren en te transfecteren. De methode is bij uitstek geschikt om oculaire gentherapiebenaderingen te bestuderen in verschillende opstellingen voor ex vivo analyses en in vivo studies die overdraagbaar zijn op mensen.

Isolatie, kweek en genetische manipulatie van primaire pigmentepitheelcellen van zoogdieren voor niet-virale gentherapie

De niet-menselijke primaat (NHP) is een ideaal model voor het bestuderen van menselijke retinale cellulaire therapieën vanwege de anatomische en genetische overeenkomsten. Dit manuscript beschrijft een methode voor submaculaire transplantatie van retinale pigmentepitheelcellen in het NHP-oog en strategieën om intraoperatieve complicaties geassocieerd met maculaire manipulatie te voorkomen.

Retinale pigmentepitheeltransplantatie in een niet-humaan primaatmodel voor degeneratieve retinale ziekten

Dit protocol presenteert een transpupillaire zichtgeleide transsclerale benadering om veilig en nauwkeurig subretinale cellulaire transplantaten af te leveren, met een laag aantal chirurgische complicaties, bij muizenontvangers met of zonder retinale degeneratie.

Transpupilgeleide transsclerale transplantatie van subretinale transplantaten in een muismodel voor retinale degeneratie

We beschrijven een gedetailleerd protocol voor de bereiding van post-gecryopreserveerde hESC-afgeleide fotoreceptor-voorlopercellen en de subretinale afgifte van deze cellen in rd10-muizen .

Subretinale toediening van van menselijke embryonale stamcellen afgeleide fotoreceptorvoorlopercellen bij RD10-muizen

Leer een chirurgische suprachoroidale autograft-techniek voor regeneratieve therapie bij droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie. Deze methode verbetert het gezichtsvermogen door stamcellen en groeifactoren in te zetten.

Regeneratieve therapie door Suprachoroidal cel Autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp In Vivo verslag (Video) | JoVE Journal

Regeneratieve therapie door Suprachoroidal cel Autograft in droge leeftijdsgebonden maculaire degeneratie: voorontwerp In Vivo verslag

Meer video's verkennen