Name: Preconditionering de luchtwegen van muizen met bleomycine verhoogt de efficiëntie van Orthotopic long kanker cel Engraftment (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: Ontdek een methode om de engraftment-efficiëntie van longkankercellen in muizen te verhogen door de luchtwegen vooraf te behandelen met bleomycine. Deze techniek maakt preklinische modellen mogelijk voor het bestuderen van stromale interacties, metastase en therapieresistentie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Deze studie werd gefinancierd door subsidies van het National Cancer Institute (R01CA166376 en R01CA191489 te D.X. Nguyen) en het ministerie van defensie (W81XWH-16-1-0227 te D.X. Nguyen).

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2015%5BTitle%5D)+AND+%22CA-Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2015.</a> CA-Cancer J Clin. 65, 5-29 (2015).</li>
<li>Gaspar, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+metastases+in+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Anticanc%22%5BJournal%5D)">Brain metastases in lung cancer.</a> Expert Rev Anticanc. 4, 259-270 (2004).</li>
<li>Hess, K. R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16518827">Metastatic patterns in adenocarcinoma.</a> Cancer. 106, 1624-1633 (2006).</li>
<li>Hoffman, P. C., Mauer, A. M., Vokes, E. E. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10841143">Lung cancer.</a> Lancet. 355, 479-485 (2000).</li>
<li>Travis, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chest+Med%22%5BJournal%5D)">Pathology of lung cancer.</a> Clin Chest Med. 23 (1), 65-81 (2002).</li>
<li>Chen, Z., Fillmore, C. M., Hammerman, P. S., Kim, C. F., Wong, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-small-cell+lung+cancers%3A+a+heterogeneous+set+of+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Non-small-cell lung cancers: a heterogeneous set of diseases.</a> Nat Rev Cancer. 14, 535-546 (2014).</li>
<li>Kim, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+human+non-small-cell+lung+cancer%3A+raising+the+bar%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Sym%22%5BJournal%5D)">Mouse models of human non-small-cell lung cancer: raising the bar.</a> Cold Spring Harb Sym. 70, 241-250 (2005).</li>
<li>Meuwissen, R., Berns, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+for+human+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Dev%22%5BJournal%5D)">Mouse models for human lung cancer.</a> Gene Dev. 19, 643-664 (2005).</li>
<li>Junttila, M. R., de Sauvage, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+tumour+micro-environment+heterogeneity+on+therapeutic+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Influence of tumour micro-environment heterogeneity on therapeutic response.</a> Nature. 501, 346-354 (2013).</li>
<li>Nguyen, L. V., Vanner, R., Dirks, P., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells%3A+an+evolving+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells: an evolving concept.</a> Nat Rev Cancer. 12, 133-143 (2012).</li>
<li>Minchinton, A. I., Tannock, I. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16862189">Drug penetration in solid tumours.</a> Nat Rev Cancer. 6, 583-592 (2006).</li>
<li>Leblond, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+cell+therapy+techniques+for+respiratory+disease%3A+intratracheal+delivery+of+genetically+engineered+stem+cells+in+a+murine+model+of+airway+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Developing cell therapy techniques for respiratory disease: intratracheal delivery of genetically engineered stem cells in a murine model of airway injury.</a> Hum Gene Ther. 20, 1329-1343 (2009).</li>
<li>Vaughan, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lineage-negative+progenitors+mobilize+to+regenerate+lung+epithelium+after+major+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lineage-negative progenitors mobilize to regenerate lung epithelium after major injury.</a> Nature. 517, 621-625 (2015).</li>
<li>Zuo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((p63%28%2B%29Krt5%28%2B%29+distal+airway+stem+cells+are+essential+for+lung+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">p63(+)Krt5(+) distal airway stem cells are essential for lung regeneration.</a> Nature. 517, 616-620 (2015).</li>
<li>Mahoney, J. E., Kim, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tracing+the+potential+of+lung+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Tracing the potential of lung progenitors.</a> Nat Biotechnol. 33, 152-154 (2015).</li>
<li>Wang, D., Morales, J. E., Calame, D. G., Alcorn, J. L., Wetsel, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+human+embryonic+stem+cell-derived+alveolar+epithelial+type+II+cells+abrogates+acute+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Transplantation of human embryonic stem cell-derived alveolar epithelial type II cells abrogates acute lung injury in mice.</a> Mol Ther. 18, 625-634 (2010).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 100, 8407-8411 (2003).</li>
<li>Suzuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+the+size+of+central+fibrosis+in+peripheral+adenocarcinoma+of+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of the size of central fibrosis in peripheral adenocarcinoma of the lung.</a> Ann Thorac Surg. 69, 893-897 (2000).</li>
<li>Cancer Genome Atlas Research, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+molecular+profiling+of+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Comprehensive molecular profiling of lung adenocarcinoma.</a> Nature. 511, 543-550 (2014).</li>
<li>Scotton, C. J., Chambers, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bleomycin+revisited%3A+towards+a+more+representative+model+of+IPF%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Lung+C%22%5BJournal%5D)">Bleomycin revisited: towards a more representative model of IPF?</a> Am J Physiol-Lung C. 299, L439-L441 (2010).</li>
<li>Hay, J., Shahzeidi, S., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+bleomycin-induced+lung+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of bleomycin-induced lung damage.</a> Arch Toxicol. 65, 81-94 (1991).</li>
<li>Vaccaro, C. A., Brody, J. S., Snider, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+wall+basement+membranes+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Alveolar wall basement membranes in bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> Am Rev Respir Dis. 132, 905-912 (1985).</li>
<li>Venkatesan, N., Ebihara, T., Roughley, P. J., Ludwig, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+large+and+small+proteoglycans+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Resp+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Alterations in large and small proteoglycans in bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats.</a> Am J Resp Crit Care. 161, 2066-2073 (2000).</li>
<li>Moore, B. B., Hogaboam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+models+of+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Lung+C%22%5BJournal%5D)">Murine models of pulmonary fibrosis.</a> Am J Physiol-Lung C. 294, L152-L160 (2008).</li>
<li>Izbicki, G., Segel, M. J., Christensen, T. G., Conner, M. W., Breuer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+bleomycin-induced+lung+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Time course of bleomycin-induced lung fibrosis.</a> Int J Exp Pathol. 83, 111-119 (2002).</li>
<li>Schrier, D. J., Phan, S. H., McGarry, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+the+nude+%28nu%2Fnu%29+mutation+on+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.+A+biochemical+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">The effects of the nude (nu/nu) mutation on bleomycin-induced pulmonary fibrosis. A biochemical evaluation.</a> Am Rev Respir Dis. 127, 614-617 (1983).</li>
<li>Ponomarev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+triple-modality+reporter+gene+for+whole-body+fluorescent%2C+bioluminescent%2C+and+nuclear+noninvasive+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+I%22%5BJournal%5D)">A novel triple-modality reporter gene for whole-body fluorescent, bioluminescent, and nuclear noninvasive imaging.</a> Eur J Nucl Med Mol I. 31, 740-751 (2004).</li>
<li>Morten, B. C., Scott, R. J., Avery-Kiejda, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Three+Different+Methods+for+Determining+Cell+Proliferation+in+Breast+Cancer+Cell%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Comparison of Three Different Methods for Determining Cell Proliferation in Breast Cancer Cell.</a> J. Vis. Exp. , (2016).</li>
<li>Tseng, J. C., Kung, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+bioluminescence+imaging+of+mouse+tumor+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+protocols%22%5BJournal%5D)">Quantitative bioluminescence imaging of mouse tumor models.</a> Cold Spring Harbor protocols. , pdb prot078261 (2015).</li>
<li>Byrne, F. L., McCarroll, J. A., Kavallaris, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyses+of+Tumor+Burden+In+Vivo+and+Metastasis+Ex+Vivo+Using+Luciferase-Expressing+Cancer+Cells+in+an+Orthotopic+Mouse+Model+of+Neuroblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Analyses of Tumor Burden In Vivo and Metastasis Ex Vivo Using Luciferase-Expressing Cancer Cells in an Orthotopic Mouse Model of Neuroblastoma.</a> Methods Mol Biol. 1372, 61-77 (2016).</li>
<li>Parkinson, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+necropsy+and+selected+tissue+and+sample+collection+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Diagnostic necropsy and selected tissue and sample collection in rats and mice.</a> J. Vis. Exp. , (2011).</li>
<li>Tammela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Wnt-producing+niche+drives+proliferative+potential+and+progression+in+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A Wnt-producing niche drives proliferative potential and progression in lung adenocarcinoma.</a> Nature. 545, 355-359 (2017).</li>
<li>DuPage, M., Dooley, A. L., Jacks, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+mouse+lung+cancer+models+using+adenoviral+or+lentiviral+delivery+of+Cre+recombinase%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Conditional mouse lung cancer models using adenoviral or lentiviral delivery of Cre recombinase.</a> Nat Protoc. 4, 1064-1072 (2009).</li>
<li>Byrne, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interrogating+open+issues+in+cancer+precision+medicine+with+patient-derived+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Interrogating open issues in cancer precision medicine with patient-derived xenografts.</a> Nat Rev Cancer. 17, 254-268 (2017).</li>
<li>Nguyen, D. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WNT%2FTCF+signaling+through+LEF1+and+HOXB9+mediates+lung+adenocarcinoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">WNT/TCF signaling through LEF1 and HOXB9 mediates lung adenocarcinoma metastasis.</a> Cell. 138, 51-62 (2009).</li>
<li>Raghu, G., Nyberg, F., Morgan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+interstitial+lung+disease+and+its+association+with+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Brit+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of interstitial lung disease and its association with lung cancer.</a> Brit J Cancer. 91, Suppl 2. S3-S10 (2004).</li>
<li>Hubbard, R., Venn, A., Lewis, S., Britton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+and+cryptogenic+fibrosing+alveolitis.+A+population-based+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Resp+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Lung cancer and cryptogenic fibrosing alveolitis. A population-based cohort study.</a> Am J Resp Crit Care. 161, 5-8 (2000).</li>
<li>Nagai, A., Chiyotani, A., Nakadate, T., Konno, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+in+patients+with+idiopathic+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Tohoku+J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Lung cancer in patients with idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Tohoku J Exp Med. 167, 231-237 (1992).</li>
<li>Rock, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+stromal+populations+contribute+to+pulmonary+fibrosis+without+evidence+for+epithelial+to+mesenchymal+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Multiple stromal populations contribute to pulmonary fibrosis without evidence for epithelial to mesenchymal transition.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 108, E1475-E1483 (2011).</li>
<li>Saito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+after+surgery+for+pathologic+stage+IA+non-small+cell+lung+cancer+associated+with+idiopathic+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Survival after surgery for pathologic stage IA non-small cell lung cancer associated with idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Ann Thorac Surg. 92, 1812-1817 (2011).</li>
<li>Stevens, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+Matrix+Receptor+Expression+in+Subtypes+of+Lung+Adenocarcinoma+Potentiates+Outgrowth+of+Micrometastases%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Extracellular Matrix Receptor Expression in Subtypes of Lung Adenocarcinoma Potentiates Outgrowth of Micrometastases.</a> Cancer Res. 77, 1905-1917 (2017).</li>
<li>Harrison, J. H., Lazo, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+dose+continuous+infusion+of+bleomycin+in+mice%3A+a+new+model+for+drug-induced+pulmonary+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">High dose continuous infusion of bleomycin in mice: a new model for drug-induced pulmonary fibrosis.</a> J Pharmacol Exp Ther. 243, 1185-1194 (1987).</li>
<li>Shcherbo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+far-red+fluorescent+protein+for+whole-body+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Bright far-red fluorescent protein for whole-body imaging.</a> Nature Methods. 4, 741-746 (2007).</li>
<li>Aso, Y., Yoneda, K., Kikkawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+and+biochemical+study+of+pulmonary+changes+induced+by+bleomycin+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Morphologic and biochemical study of pulmonary changes induced by bleomycin in mice.</a> Lab Invest. 35, 558-568 (1976).</li>
<li>Kim, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bronchioalveolar+stem+cells+in+normal+lung+and+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Identification of bronchioalveolar stem cells in normal lung and lung.</a> Cell. 121, 823-835 (2005).</li>
<li>Fichtner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+non-small+cell+lung+cancer+xenografts+as+models+for+the+identification+of+predictive+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenografts as models for the identification of predictive biomarkers.</a> Clin Cancer Res. 14, 6456-6468 (2008).</li>
<li>Zhang, X. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+non-small+cell+lung+cancer+xenograft+models+with+genetic+aberrations+within+EGFR%2C+KRAS+and+FGFR1%3A+useful+tools+for+preclinical+studies+of+targeted+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenograft models with genetic aberrations within EGFR, KRAS and FGFR1: useful tools for preclinical studies of targeted therapies.</a> J Transl Med. 11, 168(2013).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen concurrerende financiële belangen.

Opvallende klinische parallellen zijn gedocumenteerd tussen longkanker en andere chronische ziekten van de Long-36. Met name patiënten met idiopathische longfibrose (IPF) hebben een verhoogde voorliefde voor ontwikkelende longkanker, en deze vereniging is onafhankelijk van roken geschiedenis37,38. IPF wordt gekenmerkt door progressieve vernietiging van Long architectuur en verminderde ademhalingsfunctie door afzetting van ECM<sup class="xr...

Longkanker is de belangrijkste oorzaak van kanker gerelateerde sterfgevallen wereldwijd1. Patiënten met longkanker bezwijken uiteindelijk van metastase tot verre organen, met name aan het centraal zenuwstelsel, lever, bijnieren en botten2,3,4. Thoracale maligniteiten zijn traditioneel ingedeeld als kleincellige longkanker (SCLC) of niet-kleincellige longkanker kanker (NKCLK)5. NKCLK is de meest vaak gediagnosticeerd maligniteit en kan worden onderverdeeld in verschillende histologische subtypes, met inbegrip van adenocarcinoom van de Long (LUAD) en Long plaveiselcelcarcinoom (LUSC)6. Genomic analyse van gereseceerd menselijke primaire longkankerziekten is gebleken dat de tumoren binnen een bepaalde histotype ook divers moleculaire verstoringen, verder bij te dragen aan hun uiteenlopende klinische progressie en verstorende patiënt prognose kunnen uitdrukken. De opmerkelijke heterogeniteit van de longkankerziekten vormt een aanzienlijke uitdaging voor het rationele ontwerp preklinisch onderzoek en uitvoering van effectieve therapeutische strategieën. Daarom is er een noodzaak om uit te breiden van het repertoire van hanteerbare experimentele long kanker modellen te bestuderen van de verschillende cellulaire oorsprong, moleculaire subtypen en stadia van deze ziekte.
Verschillende benaderingen met behulp van dierlijke modellen zijn tewerkgesteld long kanker om te studeren in vivo, elk met hun eigen voor- en nadelen, afhankelijk van de biologische vragen van belang. Genetisch gemodificeerde Muismodellen (GEMMs) kunnen richten op specifieke genetische wijzigingen in een bepaalde voorlopercellen celtype, resulterend in tumoren die vooruitgang binnen een immunocompetent host7. Terwijl zeer krachtig en klinisch relevante, kunnen de latency, variabiliteit, en/of Long tumor morbiditeit geassocieerd met GEMMs verbiedend met bepaalde kwantitatieve metingen en de detectie van late stadium metastase in verre organen8. Een complementaire benadering is het gebruik van allograft modellen, waarbij Long kankercellen, hetzij rechtstreeks uit een muis tumor verkregen of afgeleid eerst als het gevestigde cellijnen in cultuur, opnieuw binnengebracht in syngeneic hosts worden. Naar analogie, zijn long kanker xenografts gevestigd van menselijke cellijnen of patiënt afgeleide tumor monsters. Menselijke cel lijn xenografts of patiënt afgeleide xenografts (PDXs) zijn over het algemeen gehandhaafd bij immuungecompromitteerde muizen en daarom beletten volledig immuun-surveillance9. Ondanks dit nadeel bieden zij een laan voor het doorgeven van de beperking van de hoeveelheid menselijke biospecimens en studie fundamentele in vivo eigenschappen van menselijke kankercellen, die voor meer complexe genomic afwijkingen dan GEMM tumoren coderen.
Een nuttige eigenschap van allografts en xenografts is dat ze vatbaar voor traditionele beperkende cel verdunning testen, werkzaam te kwantificeren van de frequentie van de tumor cellen (TICs) binnen een kwaadaardige cel bevolking10initiëren. In deze experimenten, een bepaald aantal cellen worden subcutaan ingespoten in de flank van de dieren en de frequentie van de TICs kan worden geschat op basis van de tumor te nemen koers. Subcutane tumoren kunnen echter meer hypoxische11 en kunnen niet zeer belangrijke fysiologische beperkingen van de Long tumor communicatie model. Intratracheale levering van epitheliale stam of voorlopercellen in de longen van muizen is een methode om te studeren pulmonaire regeneratie en airway stamcel biologie12. Het tarief van de engraftment van deze techniek kan echter relatief laag, tenzij de longen eerst aan fysiologische vormen van schade, zoals virale infectie13,14 onderworpen zijn. Ondersteuning van inflammatoire stromale cellen en/of de verstoring van het membraan van de kelder Long kan in de cel van de stam van de relevante niches in de distale airways15eigendomsvoorbehoud getransplanteerde cellen verbeteren. Fibrose inducerende agenten kan ook vooraf een voorwaarde van de longen te verbeteren engraftment van geïnduceerde pluripotente cellen16 en17van de mesenchymale stamcellen. Of soortgelijke beschermingsvormen airway letsel kunnen invloed hebben op het engraftment tarief, hebben tumor-initiërende capaciteit, en uitgroei van Long kankercellen nog systematisch worden beoordeeld.
In deze studie beschrijven we een methode te vergroten van de doelmatigheid van orthotopic long kanker cel engraftment, door preconditionering de longen van muizen met blessure. LUAD ontstaat in de distale airways met een grote subset van deze kankers ontwikkelen een fibrotische stroma18 die vaak met slechte prognose19 correleert. Bleomycine, een natuurlijke nonribosomal hybride peptide-polyketide, is uitgebreid om te induceren van longfibrose in muizen20gebruikt. Airway instillation van bleomycine bevordert eerst epitheliale uitputtingsslag in de longblaasjes en rekrutering van ontstekingscellen, met inbegrip van macrofagen, neutrofiele granulocyten en monocyten21. Dit wordt gevolgd door de weefsel remodeling in de distale airways, kelder membraan reorganisatie22,23 en24afzetting extracellulaire matrix (ECM). De effecten van een enkele Bleomycine injectie zijn voorbijgaande, met fibrosis oplossen na 30 dagen in de meeste studies25. Met behulp van zowel allograft en xenograft modellen, we getest als preconditionering de luchtwegen van muizen met bleomycine aanzienlijk van de te nemen koers van LUAD cellen in de longen verhogen kan.

<table><tbody><tr><td>Bleomycin</td><td>Sigma</td><td>B5507-15UN</td><td>CAUTION Health hazard GHS08</td></tr><tr><td>Exel Catheter 24G</td><td>Fisher</td><td>1484121</td><td>Verwijder de naald. Voor intratracheale injectie</td></tr><tr><td>Ketamine (Ketaset inl 100 mg/mL C3N 10 mL)</td><td>Butler Schein</td><td>56344</td><td>Om muizen te anesthetiseren</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Butler Schein</td><td>33198</td><td>Om muizen te anesthetiseren</td></tr><tr><td>Ketoprofen, 5,000 mg</td><td>Cayman Chemical</td><td>10006661</td><td>Analgetisch</td></tr><tr><td>Puralube Veterinary Ophthalmic Ointment</td><td>BUTLER ANIMAL HEALTH COMPANY LLC</td><td>8897</td><td>Om droge ogen onder anesthesie te voorkomen</td></tr><tr><td>D-Luciferin poeder</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>122799</td><td>Voor luminescente beeldvorming. Herstel het poeder met PBS voor een werkconcentratie van 15mg/mL. Bescherm tegen licht</td></tr><tr><td>Rodent Intubation stand</td><td>Braintree Scientific</td><td>RIS-100</td><td>Aanbevolen stand voor intratracheale injectie</td></tr><tr><td>MI-150 ILLUMINATOR 150W MI-150</td><td>DOLAN-JENNER INDUSTRIES</td><td>MI-150 / EEG2823M</td><td>Om de luchtpijp te verlichten en visualiseren</td></tr><tr><td>Graefe Forceps, 2.75 (7 cm) long serrat</td><td>Roboz</td><td>RS-5111</td><td>Voor intratracheale injectie</td></tr><tr><td>Syringe Luer-Lok Sterile 5ml</td><td>BD / Fisher</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Satiny Smooth by Conair Dual Foil Wet/Dry Rechargeable Shaver</td><td>Conair</td><td>-</td><td>Om muizen te scheren</td></tr><tr><td>Bonn Scissors, 3.5" straight 15 mm sharp/sharp sure cut blades</td><td>Roboz</td><td>RS-5840SC</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conische buis</td><td>BD / Fisher</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL centrifugebuizen</td><td>USA SCIENTIFIC INC</td><td>1615-5500</td><td></td></tr><tr><td>Vial Scintillatie 7 mL Borosilicaatglas GPI</td><td>Fisher</td><td>701350</td><td></td></tr><tr><td>Filter pipette tips (200 &mu;L)</td><td>USA SCIENTIFIC INC</td><td>1120-8710</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat gebufferde zoutoplossing</td><td>Life Technologies</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>0.25% Trypsin-EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>DMEM hoge glucose</td><td>Life Technologies</td><td>11965-092</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Medium 1640</td><td>Life Technologies</td><td>11875-093</td><td></td></tr><tr><td>Fetaal bovien serum USDA</td><td>Life Technologies</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Penicilline-Streptomycine</td><td>Life Technologies</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Sigma</td><td>A2942-20ML</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blauwe Kleurstof 0,4%</td><td>Life Technologies</td><td>15250-061</td><td></td></tr><tr><td>Countess Geautomatiseerde Celteller</td><td>Life Technologies</td><td>AMQAX1000</td><td></td></tr><tr><td>Flask T/C 75cm vierkante hals, blauwe dop</td><td>Fisher / Corning</td><td>353135</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum Xenogen Bioluminescentie</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>124262</td><td>Voor in vivo bioluminescentie beeldvorming</td></tr><tr><td>Living Image software</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>128113</td><td>Voor in vivo bioluminescentie analyse</td></tr><tr><td>XGI-8 Gas Anesthesie Systeem</td><td>Perkin Elmer Health Sciences Inc</td><td>118918</td><td>Voor Isofluraan anesthesie</td></tr><tr><td>BD Ultra-Fine II Korte Naald Insuline Spuit 1 cc. 31 G x 8 mm (5/16 in)</td><td>BD / Fisher</td><td>BD328418</td><td>Voor retro-orbitale luciferine injectie</td></tr><tr><td>Spuit 1ml</td><td>BD / Fisher</td><td>14-823-434</td><td>Voor intraperitoneale injecties</td></tr><tr><td>26 G x 1/2 in. naald</td><td>BD / Fisher</td><td>305111</td><td>Voor intraperitoneale injecties</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyde</td><td>VWR</td><td>43368-9M</td><td>CAUTION Health hazard GHS07, GHS08. Voor het fixeren van weefsel</td></tr><tr><td>Pipet-Lite Pipet, Unv. SL-200XLS+</td><td>METTLER-TOLEDO INTERNATIONAL</td><td>17014411</td><td></td></tr><tr><td>Mayer's Hematoxyline</td><td>ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES</td><td>517-28-2</td><td></td></tr><tr><td>Eosin Y kleurstof 0,25% (w/v) in 57%</td><td>Fisher</td><td>67-63-0</td><td></td></tr><tr><td>Masson Trichrome Stain Kit</td><td>IMEB Inc</td><td>K7228</td><td>Voor Masson trichrome kleurstof om collageen te visualiseren</td></tr><tr><td>Superfrost plus glasplaten</td><td>Fisher</td><td>1255015</td><td></td></tr><tr><td>6 welpenplaat</td><td>Corning</td><td>C3516</td><td></td></tr><tr><td>Universele Mycoplasma Detectie Kit</td><td>ATCC</td><td>30-1012K</td><td></td></tr><tr><td>OCT Inbeddingscompound</td><td>ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES</td><td>62550-12</td><td>Voor het inbedden van weefsel voor bevroren secties</td></tr><tr><td>Leica CM3050 S Research Cryostat</td><td>Leica</td><td>CM3050 S</td><td>Om weefsel te snijden voor bekleuringsanalyse</td></tr><tr><td>Keyence All-in One Fluorescerende Microscoop</td><td>Keyence</td><td>BZ-X700</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>US National Institutes of Health</td><td>IJ1.46</td><td>http://rsbweb.nih.gov/ij/ download.html</td></tr><tr><td>Prism 7.0 voor Mac OS X</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Athymic (Crl:NU(NCr)-Foxn1nu) muizen</td><td>Charles River</td><td>NIH-553</td><td></td></tr><tr><td>NSG (NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ) muizen</td><td>Jackson Laboratories</td><td>5557</td><td></td></tr><tr><td>B6129SF1/J muizen</td><td>Jackson Laboratories</td><td>101043</td><td></td></tr><tr><td>NIH-H2030 cellen</td><td>ATCC</td><td>CRL-5914</td><td></td></tr><tr><td>368T1</td><td>vriendelijk verstrekt door Monte Winslow (Standford University)</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>PC9 cellen</td><td>Nguyen DX et al. Cell. 2009;138:51&ndash;62</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>H2030 BrM3 cellen</td><td>Nguyen DX et al. Cell. 2009;138:51&ndash;62</td><td>-</td><td></td></tr></tbody></table>

preconditionering de luchtwegen van muizen met bleomycine verhoogt de efficiëntie van orthotopic long kanker cel engraftment

Pre-Conditioning the Airways of Mice with Bleomycin Increases the Efficiency of Orthotopic Lung Cancer Cell Engraftment

Longkanker is een dodelijke behandeling vuurvaste ziekte die biologisch heterogeen is. Om te begrijpen en effectief behandelen het volledige klinische spectrum van thoracale maligniteiten, zijn extra dierlijke modellen die diverse menselijke long kanker subtypen en stadia kunnen recapituleren nodig. Allograft of xenograft modellen zijn veelzijdig en inschakelen van de kwantificering van tumorigene capaciteit in vivo, met behulp van kwaadaardige cellen van lymfkliertest of menselijke oorsprong. Echter zijn eerder beschreven methoden voor long kanker cel engraftment uitgevoerd in niet-fysiologische sites, zoals de flank van muizen, te wijten aan de inefficiëntie van orthotopic transplantatie van cellen in de longen. In deze studie beschrijven we een methode ter verbetering van orthotopic long kanker cel engraftment door preconditionering de luchtwegen van muizen met de fibrose inducerend agent bleomycine. Als een experiment van proof-of-concept, wij deze aanpak om het engraft van tumorcellen van het Long adenocarcinoom subtype, verkregen uit de muis of menselijke bronnen, in verschillende muizenstammen toegepast. We laten zien dat het verwonden van de luchtwegen met bleomycine vóór tumor cel injectie de engraftment van tumorcellen van 0-17 verhoogt % tot 71-100%. Deze methode verbeterde aanzienlijk, Long tumor incidentie en verdere uitgroei met behulp van verschillende modellen en muis stammen. Daarnaast verspreiden werk Long kankercellen uit de longen in relevante verre organen. Dus, wij bieden een protocol dat kan worden gebruikt om te stellen en onderhouden van nieuwe modellen van de orthotopic van longkanker met beperking van de hoeveelheid cellen of biospecimen en kwantitatief beoordelen de tumorigene capaciteit van Long kankercellen in fysiologisch relevante instellingen .

Het vergroten van de efficiëntie van LUAD kanker cel engraftment in de longen van muizen, ontwikkelden we een protocol dat eerst vooraf de voorwaarden van de luchtwegen met behulp van bleomycine gevolgd door orthotopic tumor cel injectie (Figuur 1). We hebben bevestigd dat zelfs indien toegediend in immuungecompromitteerde athymic muizen, bleomycine voorbijgaande fibrose geïnduceerd door dag 14 blijkens door verlies van airway architectuur en verhoogde collag...

Beschrijven we een methode om engraftment van de orthotopic van longkanker kankercellen in de longen lymfkliertest aanzienlijk te verbeteren door preconditionering van de luchtwegen met blessure. Deze benadering kan ook worden toegepast om te studeren stromale interacties binnen de longen communicatie, gemetastaseerde verspreiding, long kanker co morbiditeit en efficiënter genereren patiënt afgeleid xenografts.

Preconditionering de luchtwegen van muizen met bleomycine verhoogt de efficiëntie van Orthotopic long kanker cel Engraftment

Lung cancer is a deadly treatment refractory disease that is biologically heterogeneous. To understand and effectively treat the full clinical spectrum of ...

Het algemene doel van deze procedure is om de efficiëntie van het transplanteren van tumor-initiërende longkankercellen in de luchtwegen van muizen te verhogen. Deze methode kan helpen bij het opzetten van nieuwe preklinische modellen om belangrijke vragen in de kankerbiologie te beantwoorden, inclusief de oorzaken van geneesmiddelresistentie en de relatie tussen fibrose en longkanker. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het de transplantatie-efficiëntie van tumor-initiërende cellen in de longen van een verscheidenheid aan muisstammen verhoogt.De implicaties van deze techniek strekken zich uit naar therapie, omdat het ons in staat stelt om een grotere verscheidenheid aan menselijke longkankersubtypen te modelleren, die bekend staan om verschillende klinische reacties op behandeling. Voor dit protocol moeten de muizen eerst worden geïnjecteerd met bleomycine. Vervolgens, na 14 dagen, worden de tumorcellen geïnjecteerd.De procedure voor beide injecties is zeer vergelijkbaar en wordt hier beschreven. Twee uur voorafgaand aan de injectie, ontdooi de bleomycine-voorraad op ijs en verdun deze tot de werkconcentratie. Houd het op ijs.Voor een celbolus, laat een celsuspensi

pre-conditioning-airways-mice-with-bleomycin-increases-efficiency

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

This video describes a method to engraft lung adenocarcinoma cells in murine lungs by preconditioning the airways with fibrosis-inducing agent–bleomycin. This method significantly enhances orthotopic engraftment of lung cancer cells into murine...

Adenocarcinoma Engraftment: A Method to Implant Cancer Cells into the Murine Lungs

Het gebruik van een model dat de toestand van longziekten bij mensen nabootst is kritiek voor het bestuderen van de pathofysiologie en / of etiologie van een bepaalde ziekte en ontwikkelen van therapeutische interventie. Hier een niet-invasieve intratracheaal intubatie methode die direct exogene materialen kunnen leveren aan muizenlongen wordt gepresenteerd.

Niet-invasieve Intratracheaal intubatie om te studeren de Pathologie en Fysiologie van Mouse Lung

Dit artikel presenteert een snelle en eenvoudige methode voor het toedienen van bleomycine rechtstreeks in de muis luchtpijp via intubatie. Belangrijkste voordelen van deze werkwijze zijn dat het zeer reproduceerbaar, gemakkelijk onder de knie, en vereist geen gespecialiseerde apparatuur of lange hersteltijden.

Een verbeterde werkwijze voor snelle intubatie van de trachea in muizen

Beschrijven we een niet-invasieve multimodale aanpak op basis van Micro-CT en fluorescentie moleculaire tomografie voor longitudinale beoordelingvan de muismodel van lung fibrosis geïnduceerd door dubbele intratracheale instillatietest van bleomycine imaging.

Een multimodale Imaging aanpak op basis van Micro-CT en fluorescentie moleculaire tomografie voor longitudinale beoordeling van bleomycine-geïnduceerde Lung Fibrosis in muizen

Hier presenteren we een effectieve methode voor het onderzoeken van de antifibrotische activiteit van intraveneus geïnfundeerde humane mesenchymale stromale cellen verkregen uit de gehele navelstreng na de inductie van long letsel door een Endotracheale injectie van bleomycine in C57BL /6 muizen. Dit protocol kan eenvoudig worden uitgebreid tot de preklinische testen van andere therapieën.

Inductie van muis long letsel door Endotracheale injectie van bleomycine

Er zijn verschillende diermodellen van longfibrose opgesteld met behulp van bleomycine om de pathogenese van longfibrose te verduidelijken en nieuwe medicijndoelen te vinden. De meeste longfibrosemodellen die gericht zijn op longweefsel hebben echter een ongelijke toediening van geneesmiddelen. Hier stellen we een model voor van uniforme longfibrose geïnduceerd door nasale bleomycine-verneveling.

Een muismodel van longfibrose geïnduceerd door nasale bleomycineverneveling

Dit protocol beschrijft de isolatie van pulmonale interstitiële macrofagen (IM's) en hun adoptieve overdracht na IL-33 stimulatie van de longblaasjes in een muismodel, wat de in vivo studie van idiopathische longfibrose (IPF) kan vergemakkelijken.

Adoptieve overdracht van IL-33-gestimuleerde macrofagen naar bleomycine-geïnduceerde muismodellen om hun effect op idiopathische longfibrose in vivo te bestuderen

Dit protocol demonstreert de orofaryngeale aspiratietechniek voor gebruik in het bleomycine muizenmodel van longfibrose.

orofaryngeale toediening van bleomycine in het muizenmodel van longfibrose

Celtherapie biedt een veelbelovende interventie voor longfibrose door voorlopercellen te gebruiken om beschadigd weefsel te herstellen en de longfunctie te verbeteren. Aangezien beeldvorming een cruciale rol speelt bij het volgen van celintegratie, beschrijven we hierin magnetische beeldvorming-geleide in vivo tracking van celtherapie voor longfibrose in een muismodel.

Beeldgeleide in vivo tracking van getransplanteerde distale longepitheliale voorlopercellen voor longfibrose met behulp van magnetische beeldvorming

Dit protocol schetst een methode voor het induceren van longfibrose bij muizen door herhaalde orofaryngeale toediening van bleomycine, wat pathologische kenmerken oplevert die sterk lijken op die van idiopathische longfibrose.

Verfijnd muizenmodel van idiopathische longfibrose

Hier presenteren we een protocol om pulmonale fibrose bij muizen te modelleren met gebruik van geaerosoliseerde bleomycine toegediend via de luchtpijp. Deze geoptimaliseerde methode maakt uniforme, kwantitatieve en precieze toediening mogelijk zonder chirurgische incisie, wat de reproduceerbaarheid en betrouwbaarheid van door bleomycine geïnduceerde fibrose verbetert.

Een verfijnde aerosolgebaseerde intratracheale bleomycine toedieningsmethode voor reproduceerbare en minimaal invasieve muismodellen van pulmonale fibrose

Ontdek een methode om de engraftment-efficiëntie van longkankercellen in muizen te verhogen door de luchtwegen vooraf te behandelen met bleomycine. Deze techniek maakt preklinische modellen mogelijk voor het bestuderen van stromale interacties, metastase en therapieresistentie.

Preconditionering de luchtwegen van muizen met bleomycine verhoogt de efficiëntie van Orthotopic long kanker cel Engraftment

Meer video's verkennen