Chirurgische technieken voor de plaatsing van de katheter en 5/6 Nefrectomie in lymfkliertest modellen van peritoneale dialyse

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het Peritoneale Dialyse-veld over peritoneale of systemische veranderingen als reactie op vloeistofblootstelling, hetzij onder uremische of niet-uremische omstandigheden. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat grote hoeveelheden vloeistof intraperitoneaal kunnen worden geïnjecteerd over een lange behandelingsperiode en dat het het gebruik van genetisch gemodificeerde dieren mogelijk maakt. De implicaties van deze techniek breiden zich uit naar de therapie en diagnostiek van structurele en functionele peritoneale verslechtering, aangezien het potentiële, therapeutische strategische tests en biomerkerevaluatie vergemakkelijkt.

We hadden het idee voor deze methode voor het eerst toen we de noodzaak voorspelden om genetisch gemodificeerde muizen te gebruiken om de moleculaire signalen die betrokken zijn bij peritoneale schade te starten. Voor het plaatsen van de katheter, na het scheren van de rechterflank en rug van elk dier, bevestig een gebrek aan reactie op teenknijpen en breng zalf aan in de ogen van het dier. Plaats vervolgens het eerste dier op zijn linkerflank op de operatietafel en desinfecteer de blootgestelde huid met 1% chlorhexidine gluconaat-oplossing.

Gebruik stompe schaar om een snede van 0,5 centimeter in de huid te maken op de rechterflank van het lichaam. Scheid vervolgens voorzichtig de huid van de aangrenzende spierlaag totdat de huid die de hele rug van het dier bedekt, goed gescheiden is. Maak een incisie van één millimeter diameter in de spierlaag door de huidincisie en breng het uiteinde van de katheter en de eerste plastic ring in de spierincisie.

Hecht de peritoneale wand stevig rond de katheter met de 5-0 of 6-0 niet-resorbeerbare hechting, met één plastic ring binnen de peritoneale holte en de andere tussen de spier en de huid. De hechtingen moeten worden voorbereid voordat de incisie wordt gemaakt en de spier mag niet worden losgelaten totdat de katheter is ingebracht. Anders zou het, omdat de incisie erg klein is, moeilijk kunnen zijn om het weer te vinden.

Breng de toegangspoort in de subcutane ruimte naar de staart van de muis en sluit de wond met een tweede hechting. Breng het dier vervolgens terug naar zijn kooi na volledige sternal liggende positie. Vier tot zeven dagen later, om de peritoneale dialysebehandeling te starten, laadt u eerst een spuit met twee milliliter peritoneale dialysevloeistof en desinfecteert u de huid rond de poort met 1% chlorhexidine gluconaat-oplossing.

Gebruik vervolgens één hand om het dier vast te houden aan de staart en toegangspoort, en injecteer de vloeistof in de poort met de andere hand met behulp van een afgeschuinde naald. Voor een 5/6 Nephrectomie en katheterplaatsing, nadat de dieren voor de operatie zijn voorbereid, zoals gedemonstreerd, maakt u een incisie van 0,5 centimeter in de huid aan de linkerkant van het dier dicht bij de onderkant van de ribben. Open een kleine incisie in de spier om de linker nier uit het peritoneum te extraheren en verwijder de capsule en de bijnier.

Gebruik een brandijzer om de uiteinden van de nier te branden en snijden en breng de nier terug in de peritoneale holte. Sluit vervolgens de spier- en huidwonden met onoplosbare 5-0 of 6-0 hechtingen en breng het dier terug naar zijn kooi wanneer het volledig is hersteld. De volgende dag maakt u een incisie van 0,5 centimeter in de huid aan de rechterkant van het dier en scheidt u de huid aan de achterkant van het dier van de spier, zoals gedemonstreerd.

Maak een incisie van 0,3 tot 0,4 centimeter in de spier en verwijder de rechter nier uit de peritoneale holte. Verwijder de capsule en de bijnier en gebruik een niet-resorbeerbare 5-0 of 6-0 hechting om de niervene, slagader en ureter te binden. Verwijder nu de nier volledig en breng de katheter in zodat de spier tussen de twee plastic ringen wordt gehouden, zoals gedemonstreerd, voordat de spierwond wordt gesloten.

Breng de toegangspoort in de subcutane ruimte en sluit de huid, zoals gedemonstreerd. Breng het dier vervolgens terug naar zijn kooi met monitoring tot volledige herstel, en laat het dier minstens 10 dagen herstellen voordat u de hypertone vloeistof toedient, zoals gedemonstreerd. Uit muisperinale peritoneale weefsels verkregen uit het meest verre gebied van de katheter, vertonen een verhoogde dikte en celrekrutering tijdens dialyse die verder wordt verergerd bij de geënterectomiseerde dieren.

Thymus-epitheelcellen vertonen ook een veranderde morfologie als gevolg van intercellulaire verbindingsdegradatie geïnduceerd door de peritoneale dialyse. Serummonsters van geënterectomiseerde muizen wijzen erop dat een 5/6 Nephrectomie een uremische toestand induceert, waardoor de ureumstikstofwaarden tijdens het verloop van het experiment toenemen, vergeleken met de basislijn. Bovendien blijven de ureumstikstofwaarden vergelijkbaar met de basale toestand, zelfs bij muizen die zijn blootgesteld aan peritoneale dialysevloeistof, wanneer de nieren volledig functioneel zijn.

Deze technieken kunnen in vijf tot zeven minuten worden voltooid. Zonder de nefrectomie, 15 tot 20 minuten. Voor de cauterisering van de linker nier, 20 tot 25 minuten.

Voor het verwijderen van de rechter nier en het plaatsen van de katheter, als de methodologie goed wordt uitgevoerd. Na de ontwikkeling heeft deze techniek de weg geëffend voor onderzoekers op het gebied van peritoneale dialyse om therapeutische opties voor peritoneale behoud bij nierpatiënten die onderworpen zijn aan peritoneale dialysebehandeling te verkennen.