Name: Intracavernosal druk opname erectiele functie bij knaagdieren moet worden geëvalueerd (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-06T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: Leer intracavernosale drukmeting bij ratten om erectiele functie te evalueren via katheterisatie van het crus corpus cavernosum en elektrische stimulatie van de cavernöze zenuwen. Deze methode ondersteunt onderzoek naar mannelijke erectiestoornissen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gesteund door de fundamentele middelen voor onderzoek voor de centrale universiteiten (020814380018, 020814380077), de China Scholarship Raad (CSC, nr. 201606195024), Natural Science Foundation van de oostelijke provincie Jiangsu (BK20160138) en Key Project ondersteund door wetenschap en technologie Development Foundation, Nanjing Medizinische Universität (2014NJMUZD053).

Drie-maand-oude en 18-maand-oude Sprague-Dawley ratten werden gebruikt in de huidige studie. Alle dieren waren behandeld volgens de NIH-richtsnoeren voor de zorg en het gebruik van proefdieren. Procedures met betrekking tot dierlijke onderwerpen werden goedgekeurd door de lokale institutionele Animal Care en ethisch comité, met een poging om te minimaliseren van dierenleed. De protocollen werden goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité (IACUC) aan de Universiteit van de Tech Nanking (Nanjing, China).
De ratten werden verdeeld over twee groepen volgens hun leeftijd en voorafgaande prestaties in de APO-geïnduceerde erectiele functietest vóór ICP opname: de jonge normale groep (YN) en leeftijd erectiestoornissen groep (AE groep)10.
1. voorbereiding voor de ingreep
<ol><li>Handmatig maken een paar bipolaire elektroden voor de ICP-opname (Figuur 1). Iets buigen de uiteinden van elektroden, en pas de afstand tussen twee elektroden tot 1-2 mm breed, zoals weergegeven in figuur 1A.</li>
	<li>De elektroden aansluit op de stimulator met behulp van twee krokodil klemmen (figuur 1AB).</li>
	<li>
Monteren van het systeem van de katheter: Eerst een hypodermic 23G naald verbinden met een 3-weg-afsluiter met tubing, waarna de afsluiter verbinden met de drukopnemer. Vervolgens een 10 mL spuit te hechten aan het derde einde van afsluiter te verstrekken heparine zoutoplossing.</li>
	<li>Controleer zorgvuldig voor lekkage na het vullen van het hele systeem met heparine saline (200 U/mL). Sla de afsluiter van de 3-weg om te sluiten van de spuit-kanaal of de druk transducer kanaal (Figuur 1 c).</li>
	<li>De naald 20 cm verheffen op het niveau van de houten pad. Dan kalibreren het druk opname-systeem naar 20 cm H2O. Verplaats daarna de hoogte van de naald de juistheid van het registratiesysteem. Herhaal de kalibratie totdat de nauwkeurigheid werd bevestigd.</li>
	<li>De ratten van het dier faciliteit overboeken naar de operatie kamer, en laten wennen aan de operatie kamer voor minstens 30 min.</li>
	<li>De gesteriliseerde met autoclaaf instrumenten zijn gespoten met 70% ethanol net voor de ingreep</li>
</ol>2. operatie Procedure
<ol><li>Anesthetize van de rat met een intraperitoneale injectie van natrium pentobarbital bij een dosis van 45 mg/kg lichaamsgewicht, en wacht voor 5-10 min. knijpen de tenen te bevestigen van een juiste afstomping.</li>
	<li>De vacht van de buik en de nek scheren met een scheerapparaat, en plaats de rat op zijn rug op een verwarming pad.</li>
	<li>Veeg het operatie gebied met 10% Povidon-jodium oplossing gedrenkt katoen ballen gevolgd door 70% ethanol gedrenkt katoen ballen. Verder toepassen ophthalmic zalf om te voorkomen dat de ogen uitdrogen.</li>
	<li>Catheterize de linker halsslagader.<ol>
<li>De huid van de nek te vatten met een tang en maak een horizontale snede in het midden van de nek. Incise van de spieren, zorgvuldig bloot de linker halsslagader en isoleren van een 5-mm-sectie van het schip.</li>
		<li>Zorgvuldig de halsslagader scheiden van de nervus vagus met pincet, tekenen een zijde hechtdraad onder de halsslagader, en zet een losse stropdas aan de caudal kant van het schip, dan maken een andere strakke knoop aan de craniale kant van het schip.</li>
		<li>Caudally klem het vaartuig met een bulldog klem boven de hechtdraad om te stoppen met de bloedstroom.</li>
		<li>Zorgvuldig een incisie over het schip met een microchirurgische schaar en invoegen van de arteriële katheter naar het hart met de hulp van de micro-ontrafeling haak en pincet.</li>
		<li>Zet de losse caudal ligatuur rond de katheter om het veilig vast. Verwijder de bulldog klem om te herstellen van de bloedstroom.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Isoleren van de GN en plaats van de elektrode
	<ol>
<li>Til de huid en de spieren van de buik met een paar pincet. Met het ontleden schaar, doorsnijden de onderbuik aan de penis te maken van een incisie middellijn.</li>
		<li>Duw voorzichtig de darm met doekje in het bovenste deel van de buikholte.</li>
		<li>Begrijpen van de blaas met een paar pincet en trek de blaas van de buikholte. Bloot de ventrale lobben van de prostaat, dat zich op het ventrale gedeelte van de urinebuis bevindt.</li>
		<li>Trek de ventrale lobben van de prostaat, zaadblaasje en zaadleiders de dorsale kwab van de prostaat bloot te stellen. Het punt van de hechting van de zaadleiders en prostaat vinden.</li>
		<li>De ruimte tussen de prostaat en de zaadleiders te scheiden. Zorgvuldig bloot de vezelige capsule, die zich op het koppelingspunt van de prostaat en de zaadleiders posterieure bevindt. Dan vinden de grote bekken ganglion (Figuur 2). Opmerking: De grote bekken ganglion en cavernous zenuwen kunnen worden gezien op het oppervlak van de prostaat.</li>
		<li>Zorgvuldig droog GN-gebied met een steriel doekje. Zorgvuldig isoleren en haak de rechts cavernous zenuw met de bipolaire elektroden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Catheterize de linker Crura
	<ol>
<li>Snijd een kleine incisie in de huid van de penis met een ontleden schaar, en vervolgens zorgvuldig denude de huid van de penisschacht.</li>
		<li>Ontleden de gegroefde penile spierstelsel. Vind de bovenste tak van schaambeen bot.</li>
		<li>Bloot de bulbospongiosus spier, die betrekking heeft op de spongious-lamp.</li>
		<li>Verdeel de musculus bulbospongiosus uit de ischiocavernosus spier met behulp van gebogen pincet.</li>
		<li>De ischiocavernosus spier zorgvuldig te isoleren met een gebogen Tang, en knip de ischiocavernosus spier om de witte tunica albuginea van de crus corpus cavernosum bloot te stellen.</li>
		<li>Na de anatomische richting van de crus corpus cavernosum, zorgvuldig plaats de naald in de crus corpus cavernosum door de witte tunica albuginea. Opmerking: Dit is een cruciale stap voor succesvolle catheterisatie. Een kleine hoeveelheid EDTA zoutoplossing kan worden ingespoten, en een lichte penile tumescentie moet worden nageleefd, als de naald is correct ingevoegd.</li>
		<li>Zorgvuldig vrij van de naald en Vermijd eventuele glijden van de naald of verstoring van de aansluitende buis. Inspecteren op eventuele lekkage.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. stimuleren van de GN
<ol><li>Open het softwareprogramma voor druk signaal opname en druk signaal opnemen.</li>
	<li>Instellen van de parameters van de stimulatie: 15 Hertz, pulsbreedte van 5 milliseconden, 5 volt, en een 60 s duur. Stimuleren van CN met een frequentie van 15 Hz met een pulsbreedte van 5 ms. Opmerking: Een scherpe stijging van het ICP kan worden waargenomen tijdens het toepassen van de elektrische stimulatie.</li>
	<li>Een interval van 30 minuten rust tussen stimulaties toestaan. Het maximum van opeenvolgende stimulatie in elk dier is drie keer.</li>
</ol>4. Beëindig de Procedure
<ol><li>Na de opname wordt euthanasie te beheren door het injecteren van een overdosis van pentobarbital natrium bij een dosis van 150 mg/kg lichaamsgewicht. Bevestig de dood van ratten door het controleren van de arteriële druk. Verwijder van de ratten, en reinig de operatie-instrumenten.</li>
</ol>5. de gegevensanalyse
<ol><li>Opslaan en exporteren van de gegevens van de software. De reactie wordt gewoonlijk uitgedrukt als de verhouding van het ICP aan de systemische gemiddelde arteriële druk (kaart). De verhouding van de piek ICP/kaart werd berekend de erectiele functie moet worden geëvalueerd.</li>
	<li>Gegevens uit ten minste vijf ratten te bundelen en te analyseren met statistische software. Verschillen zijn statistisch significant geacht wanneer p < 0,05, met behulp van de Student t-test.</li>
</ol>

<ol><li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Consensus+Conference.+Impotence.+NIH+Consensus+Development+Panel+on+Impotence%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">NIH Consensus Conference. Impotence. NIH Consensus Development Panel on Impotence.</a> JAMA. 270 (1), 83-90 (1993).</li>
<li>Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigative+models+in+erectile+dysfunction%3A+a+state-of-the-art+review+of+current+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models.</a> J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).</li>
<li>Lue, T. F., Takamura, T., Schmidt, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamics+of+erection+in+the+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Hemodynamics of erection in the monkey.</a> J Urol. 130 (6), 1237-1241 (1983).</li>
<li>Carati, C. J., Creed, K. E., Keogh, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+control+of+penile+erection+in+the+dog%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Autonomic control of penile erection in the dog.</a> J Physiol. 384, 525-538 (1987).</li>
<li>Steers, W. D., Mallory, B., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+study+of+neural+activity+in+penile+nerve+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological study of neural activity in penile nerve of the rat.</a> Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), R989-R1000 (1988).</li>
<li>Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+erectile+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Animal models of erectile dysfunction.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).</li>
<li>Burnett, A. L., Lowenstein, C. J., Bredt, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide%3A+A+physiologic+mediator+of+penile+erection%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide: A physiologic mediator of penile erection.</a> Science. 257 (5068), 401-403 (1992).</li>
<li>Oh, T. Y., Kang, K. K., Ahn, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erectogenic+effect+of+the+selective+phosphodiesterase+type+5+inhibitor%2C+DA-8159%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Erectogenic effect of the selective phosphodiesterase type 5 inhibitor, DA-8159.</a> Arch Pharm Res. 23 (5), 471-476 (2000).</li>
<li>Ouyang, B., Sun, X., Han, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+urine-derived+stem+cells+alone+or+genetically-modified+with+FGF2+Improve+type+2+diabetic+erectile+dysfunction+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Human urine-derived stem cells alone or genetically-modified with FGF2 Improve type 2 diabetic erectile dysfunction in a rat model.</a> PLoS One. 9 (3), e92825(2014).</li>
<li>Pan, F., Xu, J., Zhang, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+the+MicroRNA+profile+in+aging+rats+with+erectile+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of the MicroRNA profile in aging rats with erectile dysfunction.</a> J Sex Med. 11 (7), 1646-1656 (2014).</li>
<li>Cho, M. C., Park, K., Kim, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+erectile+function+by+suppression+of+corporal+apoptosis%2C+fibrosis+and+corporal+veno-occlusive+dysfunction+with+rho-kinase+inhibitors+in+a+rat+model+of+cavernous+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Restoration of erectile function by suppression of corporal apoptosis, fibrosis and corporal veno-occlusive dysfunction with rho-kinase inhibitors in a rat model of cavernous nerve injury.</a> J Urol. 193 (5), 1716-1723 (2015).</li>
<li>Hannan, J. L., Matsui, H., Sopko, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caspase-3+dependent+nitrergic+neuronal+apoptosis+following+cavernous+nerve+injury+is+mediated+via+RhoA+and+ROCK+activation+in+major+pelvic+ganglion%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Caspase-3 dependent nitrergic neuronal apoptosis following cavernous nerve injury is mediated via RhoA and ROCK activation in major pelvic ganglion.</a> Sci Rep. 6, 29416(2016).</li>
<li>Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+characterization+of+a+bio-assay+of+erectile+function+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model.</a> J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).</li>
<li>Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+as+an+animal+model+for+male+erectile+function+evaluation+in+sexual+medicine+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research.</a> J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).</li>
<li>Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rat+as+a+model+for+the+study+of+penile+erection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">The rat as a model for the study of penile erection.</a> J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).</li>
<li>Albersen, M., Orabi, H., Lue, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+and+treatment+of+erectile+dysfunction+in+the+aging+male%3A+A+mini-review%5BTitle%5D)+AND+%22Gerontology%22%5BJournal%5D)">Evaluation and treatment of erectile dysfunction in the aging male: A mini-review.</a> Gerontology. 58 (1), 3-14 (2012).</li>
<li>Hedlund, P., Matsumoto, K., Andersson, K. -E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Erectile+Dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Prot+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Erectile Dysfunction.</a> Curr Prot Pharmacol. 29, 5.41.1-5.41.22 (2005).</li>
<li>Giuliano, F., Bernabe, J., Rampin, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Telemetric+monitoring+of+intracavernous+pressure+in+freely+moving+rats+during+copulation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Telemetric monitoring of intracavernous pressure in freely moving rats during copulation.</a> J Urol. 152 (4), 1271-1274 (1994).</li>
<li>Bernabe, J., Rampin, O., Giuliano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracavernous+pressure+changes+during+reflexive+penile+erections+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Intracavernous pressure changes during reflexive penile erections in the rat.</a> Physiol Behav. 57 (5), 837-841 (1995).</li>
<li>Bernabe, J., Rampin, O., Sachs, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracavernous+pressure+during+erection+in+rats%3A+an+integrative+approach+based+on+telemetric+recording%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Intracavernous pressure during erection in rats: an integrative approach based on telemetric recording.</a> Am J Physiol. 276 (2 Pt 2), R441-R449 (1999).</li>
<li>Adachi, H., Kodama, K., Ishihara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+erectile+response+by+continuous+measurement+of+penile+diameter+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of erectile response by continuous measurement of penile diameter in rats.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 41 (4), 147-152 (1999).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen

Als een directe maat voor erectiele functie is ICP een betrouwbare methode14. Het maakt het mogelijk voor de overname van gegevens over basale ICP, piek ICP, plateau ICP, tijd tot erectie en detumescence tijd, duur van respons, enz. Naast deze gemeten parameters direct, zijn er sommige andere index-parameters: (1) "T80", de tijd tot 80% van de piek ICP; (2) "D20", de tijd te dalen tot 20% van de piek ICP; (3) "ΔT80", het tempo van de toename van de druk (per seconde) in T80; en (4) "ΔD20"...

ED is gedefinieerd als de onmogelijkheid te bereiken of te houden een penile erectie, en een gemeenschappelijk mannelijke seksuele stoornis1is geworden. Proefdieren worden gebruikt en reproduceerbare modellen om te onderzoeken erectiele functie2voorzien. Voor een lange tijd, hebben verschillende grotere dierlijke modellen gewerkt voor het onderzoeken van erectiele functie3,4,5. Hoewel knaagdieren relatief klein in vergelijking met andere dieren zijn, worden ze ook gebruikt voor de studie van mannelijke erectiestoornissen te wijten aan verscheidene voordelen6tentoonstellen. Ten eerste, de morfologische en functionele geslachtskenmerken van de mens zijn gerecapituleerd in knaagdieren. Ten tweede, in vergelijking met grotere dieren gebruikt in ED studies, knaagdieren zijn zuiniger om te kopen, huis, en te handhaven. Derde, genetisch gemodificeerde knaagdier modellen bieden voordelen in reproduceerbaar en latere gedrags evenals neurofysiologische studies. Knaagdieren hebben daarom snel uitgegroeid tot de primaire dieren die worden gebruikt in de studie van mannelijke erectiestoornissen.
Profiteren van een zuivere genetische achtergrond en consistente kweekomstandigheden, hebben knaagdier modellen verstrekt consequent reproduceerbare gegevens5,,6,,7,8. Onder de talrijke beschikbare studies met betrekking tot de vele aspecten van erectiele functies, de apomorphine (APO)-geïnduceerde Erectiele reactie en de elektrische stimulatie-geïnduceerde ICP reactie test zijn de meest gebruikte methoden die erectiele een getrouw beeld geven functie9,10,11,12. De APO-geïnduceerde erectiele functietest, ontwikkeld door Heaton et al. 13, is een biotoetsen dat gebruik maakt van het fenomeen dat toediening van apomorphine aan ratten erecties en gegaap lokt. Als een eenvoudig, noninvasive en stabiele biotoetsen erectiele functie moet worden geëvalueerd, wordt de APO-geïnduceerde erectiele functietest veel gebruikt in tal van studies. Echter overeen deze test niet voldoende met de kwaliteit van erecties of de dynamische veranderingen in de bloedstroom een erectiele reactie14is gekoppeld. ICP-metingen werden aanvankelijk ontwikkeld door Quinlan et al. 15. bij deze methode wordt een katheter wordt geplaatst in de halsslagader aan de systemische bloeddruk meten en een andere katheter de crus corpus cavernosum om vast te leggen van het ICP wordt ingevoegd. Vóór of tijdens de opname, een vasoactieve agent en/of elektrische veld stimulatie van het grote bekken ganglion (MPG) ICP of CN werden vaak gegeven aan de ratten14. Deze test is een betrouwbaar hulpmiddel voor de evaluatie van de therapieën en geneesmiddelen voor ED, en zal waarschijnlijk worden gebruikt als een vitale evaluatiemethode in de toekomstige6.
Vergeleken met de erectiele APO-geïnduceerde gemakkelijk uitgevoerd functietest, vereist succesvolle ICP opnames aandacht voor detail, praktijk, en aanhankelijkheid aan de operatie methode. Daarom hier, bieden wij een gedetailleerde beschrijving van het uitvoeren van ICP opname.

<table><tbody><tr><td>Dier</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ratten</td><td></td><td></td><td>Strain: Sprague-Dawley Leeftijd: 2-3 maand</td></tr><tr><td>Ratten</td><td></td><td></td><td>Strain: Sprague-Dawley Leeftijd: 15-18 maand</td></tr><tr><td>Naam</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Reagentia</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>Sigma-Aldrich, S7653</td><td></td><td>Los 8,5 gram natriumchloride op in gedistilleerd water</td></tr><tr><td>Pentobarbital natriumoplossing</td><td>Sigma-Aldrich, P3761</td><td></td><td>Los 1 gram op in 100 ml saline</td></tr><tr><td>Povidon-jodium</td><td>BTP Pharmaceutical Co. Limited</td><td></td><td>10% (V/V)</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM)</td><td></td><td>70% (V/V)</td></tr><tr><td>Heparine</td><td>Sigma-Aldrich, H3149</td><td></td><td>Los 20000U heparine op in 100 ml saline</td></tr><tr><td>Naam</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Materialen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hypodermische naald</td><td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.&nbsp;</td><td>23G</td><td></td></tr><tr><td>Spuit</td><td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd</td><td>10 ml</td><td></td></tr><tr><td>Drieweg stopcock</td><td>Chengdu Instrument factory</td><td>TSK 01</td><td></td></tr><tr><td>Elektrode</td><td>Chengdu Instrument factory</td><td>JST-1</td><td></td></tr><tr><td>Katheterbuis</td><td>Chengdu Instrument factory</td><td>PE-10, PE-50</td><td></td></tr><tr><td>Operatie schaar</td><td>Shanghai operation equipment factory</td><td>J22010, J22020</td><td></td></tr><tr><td>Oogoperatieschaar</td><td>Shanghai operation equipment factory</td><td>Y00010, Y00020</td><td></td></tr><tr><td>Oogoperatietang</td><td>Shanghai operation equipment factory</td><td>JD1010, JD1020</td><td></td></tr><tr><td>MicroScissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WAA260</td><td></td></tr><tr><td>Zijde draad</td><td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.&nbsp;</td><td>5-0</td><td></td></tr><tr><td>Naam</td><td>Bedrijf</td><td>Catalogusnummer</td><td>Opmerkingen</td></tr><tr><td>Apparatuur</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stimulator</td><td>Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H)</td><td></td><td>15 Hz, 5 ms puls, 5 V, 60 s duur en 5 minuten interval</td></tr><tr><td>Multikanaals signaalverzamelverwerkingssysteem</td><td>Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H)</td><td></td><td>Bloeddrukmodel</td></tr><tr><td>Druktransducer</td><td>Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100)</td><td></td><td>40KPa</td></tr></tbody></table>

intracavernosal druk opname erectiele functie bij knaagdieren moet worden geëvalueerd

Intracavernosal Pressure Recording to Evaluate Erectile Function in Rodents

Erectiele dysfunctie (ED) is gedefinieerd als de onmogelijkheid te bereiken of behouden van een erectie van de penis, en dit is uitgegroeid tot een overwegend mannelijke seksuele stoornis. Knaagdieren worden gebruikt door vele studies de Fysiologie/pathologie van erectiele functie onderzoek. Erectiele functie bij knaagdieren kan worden geëvalueerd door het meten van de druk van de intracavernosal (ICP). In de praktijk, kan ICP worden gecontroleerd na elektrische stimulatie van de cavernous zenuwen (CNs). De arteriële druk van de halsslagader (de gemiddelde arteriële druk) wordt gebruikt als referentie voor ICP. ICP opname protocollen gebruikt, kunnen veel sleutelparameters van erectiele functie wordt gemeten vanaf de ijkkromme ICP. De ICP-meting vindt u meer informatie dan de apomorphine-geïnduceerde penile erectie-test, en is goedkoper dan telemetrische monitoring van de corpus spongiosum penis, waardoor deze methode de populairste een erectiele functie moet worden geëvalueerd. Vergeleken met de erectiele APO-geïnduceerde gemakkelijk uitgevoerd functietest, moeten succesvolle ICP opnamen echter aandacht voor detail, praktijk, en aanhankelijkheid aan de operatie methode. Hierbij vindt u een inleiding tot de ICP opname bij ratten efficiënt als aanvulling op de procedure.

Talrijke studies hebben aangetoond dat erectiele dysfunctie in leeftijd mannetjes is steeds een veelvoorkomend probleem. Medische behandeling is echter beperkt in het beheer van veroudering-gerelateerde ED16. In knaagdier modellen van veroudering-gerelateerde ED, worden veel therapieën getest op de erectiele functie van leeftijd ratten. Zoals we hierboven hebben geïntroduceerde, kan detest opname ICP worden gebruikt om te onderscheiden van de dieren ED van de total...

Intracavernosal druk opname (ICP) is een belangrijke methode om te evalueren van de erectiele functie van proefdieren. Hier, een gedetailleerd protocol blijkt procedure voor de opname van ICP door catheterizing de crura penis en dan elektrisch stimuleren de cavernous zenuwen bij ratten.

Intracavernosal druk opname erectiele functie bij knaagdieren moet worden geëvalueerd

Erectile dysfunction (ED) is defined as the inability to attain or keep an erection of the penis, and this has become a prevalent male sexual disorder. ...

Het algemene doel van deze procedure is om de erectiele functie van ratten te testen door het katheteriseren van het crus corpus cavernosum en het registreren van de intracaverneuze druk na stimulatie van de caverneuze zenuwen. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van mannelijke erectiestoornissen, zoals voor het evalueren van therapieën en medicijnen voor erectiestoornissen. Een voordeel van deze techniek is dat het een nauwkeurigere evaluatie biedt van de erectiefunctie en reflexen, de dynamische verandering in bloedstroom geassocieerd met erectiele respons.Visuele demonstratie van deze methode is cruciaal, omdat katheterisatie moeilijk te leren is omdat het kleine gebied van de witte tunica albuginea van het crus corpus cavernosum het moeilijk maakt om de naald in de penis crura te steken. Om je voor te bereiden op de operatie, maak een paar bipolaire elektroden voor intracavernosale drukmetingen. Buig de uiteinden van de elektroden lichtjes en pas de afstand tussen hen aan op één tot twee millimeter.Verbind vervolgens de elektroden met de stimulator met behulp van twee krokodillenklemmen. Monteer vervolgens het kathetersysteem. Gebruik eerst een slang om een hypodermische 23-gauge naald te verbinden met een driewegstopkraan.Verbind vervolgens de stopkraan met een druksensor. Bevestig vervolgens een spuit van 10 milliliter gevuld met heparine-zoutoplossing op de derde positie van de stopkraan. Vul vervolgens het hele systeem met heparine-zoutoplossing en controleer op lekken.Til vervolgens de naald 20 centimeter op en kalibreer het registratiesysteem tot 20 centimeter water. Na de kalibratie, pas de hoogte van de naald aan en controleer de nauwkeurigheid van het registratiesysteem. Herhaal indien nodig de kalibratie totdat de nauwkeurigheid is bevestigd.Breng vervolgens de ratten over van de dierfaciliteit naar de operatiekamer en laat ze minimaal 30 minuten acclimatiseren. Steriliseer ondertussen de chirurgische instrumenten met 70%ethanol en bereid de nodige chirurgische materialen voor. Na 30 minuten bereid de eerste rat voor op de operatie.Anesthetiseer het met natriumpentobarbital en wacht vijf tot 10 minuten. Prik vervolgens in de tenen van de ratten en controleer op afwezigheid van reflex om een goede anesthesie te bevestigen. Scheer vervolgens de vacht van de buik en nek en plaats de rat in rugligging op een chirurgische plank.Veeg nu de blootgestelde huid af met drie afwisselende scrubs met 10%povidon-jodium gevolgd door 70%ethanol. Breng ook oogzalf aan om te voorkomen dat de ogen uitdrogen. Ga vervolgens door met de operatie.Voordat je de caverneuze zenuw isoleert, katheteriseer je de linker halsslagader volgens het tekstprotocol. Begin met het isoleren van de zenuw door de huid en spier van de buik op te tillen met een paar pincetten. Maak vervolgens met een schaar een middenlijnsnede van de onderbuik tot de penis.Beweeg vervolgens voorzichtig de darmen naar het bovenste deel van de buikholte. Grijp vervolgens de blaas met een paar pincetten en trek hem uit de buikholte. Vind nu de ventrale lobben van de prostaat die zich op de ventrale portie van de urethra bevinden.Exposeer vervolgens de dorsale lob van de prostaat door de ventrale lobben, zaadblaasjes en zaadleider uit te trekken. Vind nu het hechtingspunt van de zaadleider en prostaat. Scheid vervolgens de ruimte tussen de prostaat en de zaadleider.Blootstel vervolgens voorzichtig de vezelige capsule die zich achter het verbindingspunt van de prostaat en de zaadleider bevindt. Zoek vervolgens het grote bekkenganglion en de caverneuze zenuwen op het oppervlak van de prostaat. Droog vervolgens voorzichtig het gebied van de caverneuze zenuwen af met een wattenstaafje of tissuepapier, en isoleer en haak vervolgens voorzichtig de rechter caverneuze zenuw met de bipolaire elektroden.Snij om de operatie voort te zetten een kleine incisie in de huid van de penis met dissecteerende schaar en ontdoe vervolgens voorzichtig de huid van de penisschacht. Blootstel vervolgens voldoende weefsel om de gestreepte penismusculatuur te disseceren. Vind nu de bovenste tak van het schaambeen.Exposeer vervolgens de bulbospongiosus-spier die de spongios-bol bedekt. Verdeel vervolgens met gebogen pincetten de bulbospongiosus-spier van de ischiocavernosus-spier. Scheid voorzichtig de ischiocavernosus-spier.Snij vervolgens de ischiocavernosus-spier om de witte tunica albuginea van het crus corpus cavernosum bloot te leggen. Voer nu de katheterisatie uit. Volg voorzichtig de anatomische richting van het crus corpus cavernosum en steek de naald voorzichtig door de witte tunica albuginea in het cavernosum.De locatie van de naald is cruciaal voor het succes van de operatie, dus injecteer als test een kleine hoeveelheid heparinegelatine. Dit zou moeten resulteren in een lichte penistumescentie als de naald correct is ingebracht. Laat vervolgens, zonder de naald opnieuw te positioneren of de verbindingsbuis te verstoren, de naald voorzichtig loslaten.Inspecteer vervolgens het gebied op eventuele lekken. Als er geen lekken worden gevonden, ga door met het stimuleren van de zenuw en het analyseren van de gegevens. De beschreven ICP-registratietest werd gebruikt om oudere ratten met erectiestoornissen te onderscheiden om de effecten van potentiële behandelingen of medicijnen op de erectiele functie te helpen kwantificeren.Een typische ICP-responscurve van de erectiestoornisgroep was veel lager dan de curve van de controlegroep. Meestal werd de hoogste ICP gekozen voor statistische analyse. Na het berekenen van de verhouding tussen ICP en gemiddelde arteriële druk, toonden de gepoolde gegevens van vijf ratten aan dat de verhouding in de oudere groep significant afnam in vergelijking met die van de controlegroepen.Naast deze twee belangrijke parameters, verminderden de piek-ICP, de plateau-ICP, de detumescentietijd, de duur van de respons en het gebied onder de curve allemaal significant bij oudere ratten, dus de gegevens zijn vol kwantitatieve metingen die de erectiele functie weerspiegelen. Na het bekijken van deze video, zou je een go

intracavernosal-pressure-recording-to-evaluate-erectile-function

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Een nieuwe techniek om de druk in de schedel op te nemen wordt beschreven. De minimaal invasieve methode maakt gebruik van een fiber-optic drukgevoelige systeem om intracraniële druk (ICP) nauwkeurig te meten in verdoofd ratten zonder significante hersentrauma. De techniek kan worden gebruikt in uiteenlopende experimentele modellen.

Epidurale intracraniale druk meting in ratten met behulp van een Fiber-optic Pressure Transducer

This video demonstrates a technique of studying the activity of renal sympathetic nerves (RSNs) in response to changes in arterial pressure in rats. Upon attaching a pressure-sensing catheter to the femoral artery, the renal sympathetic nerves are exposed. The nerves are then lifted onto a recording electrode, and their electrical activity is recorded. Next, a vasoconstricting drug is injected to elevate blood pressure, and corresponding changes in RSN activity are monitored.

Recording Changes in Renal Sympathetic Nerve Activity in Response to Arterial Pressure in Rats

This video demonstrates the isolation and stimulation of the cavernous nerve in an anesthetized rat to study blood pressure changes in the cavernous body.

Performing Cavernous Nerve Stimulation in Rats to Measure Intracavernous Pressure

Dit manuscript beschrijft een protocol voor het implanteren van telemeters in de muis om intrauterine drukken tijdens de zwangerschap te meten.

Intra-uteriene Telemetrie naar Mouse Contractiele druk te meten<em&gt; In Vivo</em

Narcose muizen vertonen niet-fysiologische systemische bloeddruk, die zich verzet tegen de zinvolle beoordeling van autonome Toon gezien de intieme relatie tussen bloeddruk en het autonome zenuwstelsel. Dus, een nieuwe methode om tegelijkertijd record renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste muizen wordt geschetst.

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Dit protocol beschrijft eerst de chirurgische procedure de permanente innesteling van een urineblaas katheter gecombineerd met externe urethrale sluitspier elektroden, en de tweede, de waardering van de functie van de urineblaas en de externe urethrale sphincter in geïmplanteerde wakker dieren.

Cystometric en externe urethrale sluitspier metingen in wakker ratten met geïmplanteerde katheter en elektroden waardoor voor herhaalde metingen

Deze studie beschrijft een vereenvoudigde chirurgische ingreep en techniek voor het uitvoeren van cavernous zenuwstimulatie met het isolement van de zenuw-elektrode complex met siliconen lijm en meting van de intracavernous druk.

Cavernous zenuwstimulatie en opname van Intracavernous druk in een Rat

Hier beschrijven we een setup voor gelijktijdige opname elektrocardiogram en intra-arteriële bloeddruk (BP) in experimentele ratten, die kunnen worden gedaan met standaard uitrusting in dierlijke voorzieningen en kunnen worden toegepast op de fysiologische of farmacologische studies om te onderzoeken van pathogene of therapeutische mechanismen in cardiovasculaire geneeskunde.

Gelijktijdige electrocardiografie opname en invasieve bloed druk meting bij ratten

Dit protocol beschrijft de procedure voor het meten van ATP-concentraties in het lumen van de blaas bij een verdoofd knaagdier.

In vivo Luminale meting van Distensie-evoked Urothelial ATP Release bij knaagdieren

De controle van de extracellulaire neurotransmitter niveaus in verschillende gebieden van de hersenen van vrij bewegende dieren biedt inzichten over het verband tussen neurotransmitters en gedrag. In vivo microdialyse gekoppeld met elektrochemische detectie zorgt voor een uitstekende anatomische en chemische resolutie, en informatie over hoe basale neurotransmissie wordt aangepast door farmacologische of fysiologische manipulaties.

Survivable stereotaxische Chirurgie in Knaagdieren

Leer intracavernosale drukmeting bij ratten om erectiele functie te evalueren via katheterisatie van het crus corpus cavernosum en elektrische stimulatie van de cavernöze zenuwen. Deze methode ondersteunt onderzoek naar mannelijke erectiestoornissen.

Intracavernosal druk opname erectiele functie bij knaagdieren moet worden geëvalueerd

Meer video's verkennen