Routine Screening Method voor microdeeltjes in bloedplaatjes transfusies
31 januari 2018
Bloedplaatjes voorraadbeheer gebaseerd op screening microparticle inhoud in bloedplaatjes concentraten is een nieuw initiatief van de verbetering van de kwaliteit in ziekenhuisbloedbanken. Het doel is om te onderscheiden van niet-geactiveerde bloedplaatjes aan optimaal gebruik van de bloedplaatjes geactiveerd. Verstrekken van niet-geactiveerde bloedplaatjes aan hematologie-oncologie patiënten kan hun hoge risico tot vuurvaste.
Het algemene doel van deze methode is om trombocytentransfusies te karakteriseren door middel van routinetesten die kunnen worden uitgevoerd in donorcentra of ziekenhuisbloedbanken om het gebruik van deze bloedproducten voor bloedende of bloedkankerpatiënten te optimaliseren. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de transfusiegeneeskunde, zoals of een trombocytentransfusie geactiveerde of niet-geactiveerde trombocyten bevat. Het grote voordeel van deze techniek is dat het een snelle en nauwkeurige screening biedt voor het microdeeltjesgehalte als een bewezen indicator van trombocytenactivatie.
Personen die nieuw zijn met deze methode, zullen moeten leren hoe ze monsters moeten nemen van segmenten van slangen uit zakjes, omdat dit momenteel niet routinematig wordt gedaan. We hadden voor het eerst het idee voor deze methode toen we zagen dat trombocyten van verschillende donoren een hoge variabiliteit in de activeringsstatus hadden en dit leek een impact te hebben op de patiënt. Er zijn drie methoden om een monster te verkrijgen van een trombocytenconcentraat.
Om te bemonsteren vanuit een zakje, meng de inhoud van het trombocytenzakje goed door middel van zachte horizontale beweging gedurende vijf seconden, kantelen van het ene uiteinde naar het andere, vijf keer. Open de klem naar de zak, de zak wordt leeggepompt en zal zichzelf vullen. Het is niet nodig om de zak volledig te vullen, omdat er slechts een monster van 100 microliter nodig is voor dynamisch lichtverstrooiing of DLS-testen.
Ontkoppel de zak van de zak door de verbindingsslang met een slangverbinding af te dicht. Bij het bemonsteren van lege slangen, controleer of de slang van het trombocytenzakje leeg is opgeslagen en dat de slangblok nog op zijn plaats zit. Inspecteer de slang visueel om te controleren of er geen trombocytenconcentraat in de slang zit.
Sluit de slangstripper op de slang, zo dicht mogelijk bij de slangblok, door de handvatten te comprimeren om de slang tussen de rollen te knijpen terwijl de stripper gesloten blijft, laat de slangblok los. Trek de stripper langzaam door de lege slang, waardoor de slang langzaam achter de stripper kan vullen. Ga door totdat het gedeelte onder de stripper volledig is opgeblazen of totdat de stripper binnen een centimeter van het uiteinde van de slang is.
Het is van cruciaal belang om de handvatten van de slangstripper stevig te comprimeren en langzaam de stripper door de slang te trekken. Zodra het stoppunt met de stripper is bereikt, gebruik de slangverbinding om de slang een centimeter boven de stripper te verhitten. Laat nu de handvatten van de handmatige slangstripper los.
Verhit opnieuw, één tot twee centimeter boven de vorige verbinding om het testsegment te creëren. Snijd vervolgens het testsegment van de trombocyteneenheid. Dit segment zal worden gebruikt voor DLS-testen.
Bij het bemonsteren van slangen die niet leeg zijn, hang de zak verticaal en laat de slangblok los, indien aanwezig. Inspecteer de slang visueel om te bepalen of er significante vaste klonten zijn. Als er vaste klonten zijn, sluit boven deze, zodat ze niet in de zak kunnen worden verwijderd.
Sluit vervolgens de slangstripper op de slang, zo dicht mogelijk bij het verzegelde uiteinde van de slang. Strip de inhoud van de slang in de zak, door de handvatten te knijpen om de slang tussen de rollen te knijpen. Terwijl u de klemkracht handhaaft, beweegt u de slangstripper langs de slang naar de zak.
Verwijder de trombocytenzak van de hangende haak en meng de zak voorzichtig gedurende vijf seconden, door hem vijf keer van het ene uiteinde naar het andere te kantelen, terwijl de stripper gesloten blijft. Hang de zak verticaal, terwijl de stripper gesloten blijft. Trek de stripper langzaam door de lege slang, waardoor de slang langzaam achter de stripper kan vullen.
Ga door totdat het gedeelte onder de stripper volledig is opgeblazen, of totdat de stripper binnen een centimeter van het uiteinde van de slang is. Zodra het stoppunt met de stripper is bereikt, gebruik de slangverbinding om de slang te verhitten, een centimeter boven de stripper. Na het loslaten van de stripper, verhit opnieuw één tot twee centimeter boven de vorige verbinding om het testsegment te creëren.
Snijd het laatste gedeelte van de slang af en gooi het weg. Snijd vervolgens het testsegment van de trombocyteneenheid. Dit segment zal worden gebruikt voor DLS-testen.
Gebruik een spatscherm en schone, droge schaar om een einde van de zakslang of het testsegment af te snijden. Vul onmiddellijk de capillair door het bemonsteringsgereedschap te gebruiken om het monster rechtstreeks uit de geopende zak of het slangsegment in de capillair te trekken. Sluit de bodem van de gevulde capillair door deze voorzichtig in de capillairbuisverbinding te duwen, terwijl u een zachte draai en wat druk tegen de lade aanbrengt.
Ontkoppel vervolgens de 100 microliter vaste volumepipet en punt van de capillair, en zorg ervoor dat de capillair stevig ingebed blijft in de capillairbuisverbinding. Verwijder de capillair uit de capillairbuisverbindinglade en veeg af met een isopropylalcoholpad. Zorg ervoor dat er geen luchtbellen vastzitten door voorzichtig te schudden met de bodem van de capillair.
Plaats ten slotte de capillair in het DLS-systeem. Om te beginnen, start de console, volg de instructies op het aanraakscherm om in te loggen en selecteer de microdeeltjes of MP-testoptie om een nieuwe DLS-test te starten voor het meten van het microdeeltjesgehalte van een trombocytenmonster. Voer de monsterinformatie in met een streepjescodescanner of voer deze handmatig in.
Plaats de capillair in het DLS-systeem wanneer dit wordt aangegeven en start de test. Wanneer de test is voltooid, verwijdert u het monster uit de capillairhouder en gooit u de verbruiksartikelen op de juiste manier weg volgens de richtlijnen van de faciliteit. Markeer de trombocytenzak met de kleur die overeenkomt met het resultaat.
Bijvoorbeeld, oranje voor niet-geactiveerd en roze voor geactiveerd. Dynamische lichtverstrooiing meet de snelheid van deeltjes die in suspensie bewegen door bruine beweging. Op basis van de verschillende snelheden bewegen kleine deeltjes snel en grote deeltjes langzaam.
Deze technologie bepaalt de grootteverdeling van een monster. DLS bepaalt dat deze transfusie niet-geactiveerde trombocyten
Overzicht
Dit artikel presenteert een methode voor het beheer van het trombocytenvoorraad door het screenen van het microdeeltjesgehalte in trombocytenconcentraten. De techniek beoogt onderscheid te maken tussen geactiveerde en niet-geactiveerde trombocyten, wat mogelijk de transfusieresultaten voor hematologie-oncologiepatiënten kan verbeteren.
Belangrijke studiecomponenten
Wetenschapsgebied
- Transfusiegeneeskunde
- Hematologie
- Trombocytbiologie
Achtergrond
- Trombocyttransfusies kunnen aanzienlijk variëren in activeringsstatus.
- Geactiveerde trombocyten kunnen tot complicaties leiden bij patiënten.
- Het begrijpen van het microdeeltjesgehalte kan trombocytenactivatie aangeven.
- Huidige praktijken beoordelen de activeringsstatus van trombocyten niet routinematig.
Doel van de studie
- Om het gebruik van trombocyten in klinische omgevingen te optimaliseren.
- Om een betrouwbare methode te bieden voor het beoordelen van trombocytenactivatie.
- Om het risico op refractiviteit bij hematologie-oncologiepatiënten te verminderen.
Gebruikte methoden
- Dynamische Lichtverstrooiing (DLS) voor microdeeltjesanalyse.
- Bemonsteringstechnieken van trombocytenzakjes en slangen.
- Visuele inspectie op klonten in trombocytenconcentraten.
- Barcode-scannen voor monstertracering in DLS-tests.
Belangrijkste resultaten
- Niet-geactiveerde trombocyten werden geïdentificeerd met minder dan 15% microdeeltjesgehalte.
- Microscopie bevestigde de aanwezigheid van discoïde trombocyten met weinig microdeeltjes.
- De methode maakt snelle en nauwkeurige screening van trombocytenactivatie mogelijk.
- Het labelen van trombocytenzakjes op basis van activeringsstatus werd vastgesteld.
Conclusies
- Deze methode verbetert het beheer van trombocytentransfusies.
- Het biedt een raamwerk voor het verbeteren van patiëntresultaten in de transfusiegeneeskunde.
- Er is verdere training vereist voor het personeel om deze techniek effectief te implementeren.
Veelgestelde vragen
Executive Industry Relevance
Routine screening of platelet concentrates for microparticle content enables blood banks to differentiate activated from non-activated platelets, supporting optimized transfusion strategies for hematology-oncology patients. This approach addresses a critical quality gap in platelet inventory management by providing a rapid, quantitative indicator of platelet activation status. Implementing this method can reduce transfusion-related complications and improve resource allocation in transfusion medicine workflows.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of platelet activation states as a biomarker for transfusion efficacy and patient risk stratification.
- Operational Value: Provides a standardized, rapid assay for assessing platelet quality in preclinical transfusion models.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Delivers quantitative microparticle content measurements via DLS to distinguish platelet activation thresholds.
- Operational Value: Establishes a reproducible, high-throughput screening method for platelet product release testing.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Supports disease-relevant evaluation of platelet products in transfusion models aligned with hematology-oncology applications.
- Operational Value: Facilitates translational continuity from donor product screening to clinical transfusion outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This method integrates into the transfusion medicine workflow as a release testing step for platelet concentrates, enabling go/no-go decisions based on activation status prior to clinical use.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing regarding platelet activation pathways and microparticle generation in storage or stress conditions.
- Screening: Delivers assay readiness through standardized sampling and DLS-based quantification of microparticles as a release criterion.
- Analytics: Provides quantitative microparticle content readouts (<15% for non-activated, >15% for activated) to enable objective product classification.
- Translational Research: Connects product quality assessment to clinical outcomes in transfusion settings, particularly for refractory risk mitigation.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable platform for platelet quality control across blood bank operations and donor center networks.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in platelet product quality through direct measurement of activation-associated microparticles.
- Operational Value: Standardized sampling and DLS testing enable reproducible, rapid (<8 min) platelet characterization.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions for platelet issuance, reducing biological risk and improving transfusion safety.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of platelet units, supporting conservation of scarce blood products.
Implementation Considerations
- Training in aseptic sampling techniques from platelet bag tubing and pouches.
- Access to Dynamic Light Scattering instrumentation with microparticle detection capability.
- Standard operating procedures for sample preparation, capillary loading, and DLS test execution.
- Integration of results into inventory tagging systems (e.g., color-coded labeling).
- Validation of sampling reproducibility across different platelet storage conditions and donor variability.
Biopharma FAQs
Chapters in this video
0:05
Title
1:02
Obtaining a Sample from a Platelet Concentrate
5:04
Filling the Sample into the DLS Testing Capillary
6:14
Performing the DLS Test
7:21
Results: Platelet Activation Status in Platelet Transfusions Measured by Microparticle Content
8:19
Conclusion
