Name: Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 33 s
Description: Leer een magnetische anastomosetechniek voor suprahepatische vena cava-reconstructie bij orthotopische levertransplantatie in ratten. Deze methode verkort de anhepatische fase en verbetert de postoperatieve overlevingskans aanzienlijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gesteund door subsidies van het ministerie van onderwijs innovatie Team ontwikkeling programma van China (nr. IRT16R57), National Natural Science Foundation van China (nr. 81470896), en een onderzoek financieren voor Jong Talent werven plannen van Xi'an Jiaotong University (RW).

Het protocol werd uitgevoerd overeenkomstig de richtsnoeren voor de zorg en het gebruik van proefdieren en werd goedgekeurd door de Commissie op de ethiek van dier experimenten van Xi'an Jiaotong University, Xi'an, Shaanxi Province, China.
Opmerking: Geen van de procedures in dit protocol was uitgevoerd onder een chirurgische Microscoop.
1. preoperatieve voorbereiding
<ol><li>Het ontwerp en de vorm van de magnetische ringen (Figuur 1)<ol>
<li>Monteer het magnetische wapendrager-apparaat door te vergelijken een paar van neodymium-ijzer-borium magnetische ringen.</li>
		<li>Het ontwerp van de ringen volgens de parameters van rat SHVC met een diameter van de hoofdas, secundaire as diameter, dikte en gewicht van 8 mm, 5.5 mm, 1 mm, 0,5 g, respectievelijk.</li>
		<li>Kromme van de ringen in de gewenste vorm door een draad-elektrode snijden techniek, en vervolgens de verkregen ringen met een titanium-oxide airbrush jas en steriliseren met 500 mg/L ethyleenoxide bij 55-60 ° C gedurende 6 uur.</li>
	</ol>
</li>
	<li>De manchetten (Figuur 2)<ol>
<li>De manchet voorbereiden door wapendrager van de IHVC en PV door het snijden van de polyethyleen buis. Zorg ervoor dat het lichaam van de manchet 5 mm lang met de extensie manchet 2 mm. Opmerking: De binnenste en buitenste diameters van de PV-manchet zijn 1,8 en 2,1 mm, terwijl die van de manchet IHVC 2.6 en 2.8 mm, respectievelijk.</li>
	</ol>
</li>
	<li>De Stent (Figuur 2)<ol>
<li>Voorbereiden op de stent wapendrager van de BD door snijden 24-G intraveneuze canule met een lengte van 5 mm tot inslag aan beide uiteinden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Proefdieren<ol>
<li>Gebruik mannelijke Sprague-Dawley ratten met een gewicht van tussen de 250 en 280 g als donoren en ontvangers. Zorg ervoor dat de ontvanger de hetzelfde gewicht of iets zwaarder (< 10 g) dan de donor.</li>
		<li>Houd de ratten in klimaat-gecontroleerde kamers met vrije toegang tot voedsel en water voor de operatie.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. donor operatie
<ol><li>Injecteren buprenorfine (0,05 mg/kg) subcutaan als pijnstiller 1 uur voor de operatie.</li>
	<li>Anesthetize de donor rat Isofluraan inademing. Gebruik 5 vol % Isofluraan op een debiet van 1,5 L/min in een doosje van de Plexiglas voor de inductie van de anesthesie en 2 vol % Isofluraan aan een stroomtarief 0.6-0.8 L/min op een kegel masker voor het onderhoud van anesthesie. Diepte van de verdoving bevestigen door het uitvoeren van een teen-knijp- en een snuifje van de huid.</li>
	<li>Scheren van de gehele buikhuid van de rat met behulp van een elektrisch scheerapparaat te voorzien in schonere blootstelling. Desinfecteer de overeenkomstige huid met een Povidon-jodium oplossing.</li>
	<li>Open de buikholte via een kruisvormige incisie met behulp van chirurgische schaar uit de wortel van de penis uit te breiden tot 1 cm boven de xiphisternum langs linea alba, uitbreiding van het middelpunt van de longitudinale incisie aan de midaxillaire lijn. Exteriorize van het maag-darmkanaal naar links en bedek het met natte gaas.</li>
	<li>Klem en trek de xiphisternum naar het hoofd met behulp van een verlostang hemostatische. Het ontleden van het ligamentum conoideum en het bindweefsel rond de lever. Isoleren en de linker inferieur phrenic ader met een 6-0 zijde hechtdraad afbinden.</li>
	<li>Plaats de stent in de koker van de gal.<ol>
<li>Klem de BD net boven het punt waar de gastroduodenal ader sluit zich aan bij de portal ader en trek hem om te houden van een beetje spanning met behulp van een microforceps. Voer een "V"-incisie van 1 mm lengte op de voorste muur ongeveer 5 mm proximale tot de biliaire samenkomst door een micro schaar.</li>
		<li>De stent in het lumen van het kanaal van de gal met behulp van een gebogen microforceps invoegen. Zorg ervoor dat ten minste de helft van de stent ligt buiten de buis van de gal.</li>
		<li>Beveilig de stent met een 6-0 zijde hechtdraad. Knip één uiteinde van de hechtdraad. Houd de andere die houden tijdens latere anastomose. Transect de gal duct onder de stent en ervoor te zorgen dat de gal kan komen van de stent.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Isoleren van de IHVC tot op het niveau van de linker nier ader. Gratis de IHVC van het voorste en laterale omliggende weefsels van katoen bud dissectie totdat de IHVC is skeletonized. Scheiden en afbinden het recht suprarenal ader en de recht nier ader met een 6-0 zijde hechtdraad.</li>
	<li>Heparinize de rat door injecterend 50 U van heparine verdund in 2 mL zuiver normale zoutoplossing via de dorsale ader van de penis.</li>
	<li>Perfuse van de lever.<ol>
<li>Isoleren van de abdominale aorta onder de linker nier ader. Een 22-G-katheter invoegen in de aorta.</li>
		<li>Uitvoeren van een Thoracotomie, klem van de thoracale aorta met behulp van een microforceps.</li>
		<li>Perfuse de donor lever via de katheter in de aorta met 20 mL van de normale zoute oplossing 25 U van heparine (4 ° C) met de snelheid van 3 mL/min met een infusiepomp. In de tussentijd, snijd de vena cava onder de recht nier ader zodat de perfusie-oplossing te stromen uit de lever.</li>
		<li>Transect de SHVC samen met deel van het middenrif en IHVC op het niveau van de linker nier ader toen de donor lever werd pallid.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Het ontleden van het bindweefsel rond de PV door twee micro pincet. Afbinden en verdeel de pyloric aderen met een 8-0 prolene hechtdraad. Transect van het PV op het niveau van de milt ader. De donor lever accijnzen en spoelen met koud normale zoutoplossing. Plaats het in een koude saline Bad 4 ° C.</li>
</ol>3. enten van de voorbereiding
Opmerking: Alle procedures voor de bereiding van de lever graft worden uitgevoerd in een koude saline bad bij 4 ° C.
<ol><li>Een manchet sluit aan op de donor IHVC (Figuur 3).<ol>
<li>Plaats de IHVC in de manchet met de extensie van de manchet wijst naar de lever. Plaats de manchet-extensie op de achterste muur van de IHVC. Fix de manchet-uitbreiding en de IHVC met een gebogen microforceps zelf aangesloten met behulp van een bestand clip naar de bad-container.</li>
		<li>Evert de distale einde van de IHVC over het lichaam van de manchet met behulp van twee micro pincet.</li>
		<li>Beveilig de rand met een 6-0 zijde hechtdraad. Zorg ervoor dat de IHVC niet is gedraaid tijdens het proces.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Herhaal stap 3.1 op de PV een manchet om aan te koppelen van de donor PV.</li>
	<li>Een magnetische ring hechten aan de donor SHVC (Figuur 4).<ol>
<li>Haal het middenrif door de vier verlostang en versiering van de SHVC.</li>
		<li>Doorgeven van de SHVC door de magnetische ring met behulp van de micro-titaanlegering-Tang.</li>
		<li>Evert de distale einde van de SHVC over de ring.</li>
		<li>Beveilig de ring met een 6-0 zijde hechtdraad. Zorg ervoor dat de SHVC niet is gedraaid tijdens het proces.</li>
		<li>Verwijder het overtollige middenrif rond de lever.</li>
	</ol>
</li>
	<li>De lever van de donor in een koude normale saline Bad onderdompelen en bewaren bij 4 ° C.</li>
</ol>4. de ontvangende operatie
Opmerking: Het schema van de inplanting van de prothese in de ontvangende rat is afgebeeld in Figuur 5.
<ol><li>Injecteren buprenorfine (0,05 mg/kg) subcutaan als pijnstiller 1 uur voor de operatie. Anesthetize de donor rat Isofluraan inademing. Gebruik 5 vol % Isofluraan op een debiet van 1,5 L/min in een doosje van de Plexiglas voor de inductie van de anesthesie en 2 vol % Isofluraan aan een stroomtarief 0.6-0.8 L/min op een kegel masker voor het onderhoud van anesthesie.</li>
	<li>Scheren van de gehele buikhuid van de rat. Desinfecteer de overeenkomstige huid met een Povidon-jodium oplossing.</li>
	<li>Open de buikholte via een incisie van de middellijn van 4 cm. Plaats de abdominale OPROLMECHANISMEN. Trek de ribben zo ver uit elkaar als mogelijk vanaf de middellijn.</li>
	<li>Klem en trek de xiphisternum naar het hoofd met behulp van een verlostang hemostatische. Het ontleden van het bindweefsel en de ligamenten rond de lever. Afbinden en verdeel het hepato-oesofageale ligament. Afbinden en verdeel de hepatische slagader met een 8-0 prolene hechtdraad.</li>
	<li>Isoleren van de Galgang vanaf de eerste hepatische portal. Plaats een 6-0 zijde hechtdraad rond de Galgang net onder de afdeling en de Galgang afbinden.</li>
	<li>Het ontleden van de IHVC tot de recht nier ader. Afbinden en verdeel de rechts bijnier ader. Plaats een band in de SHVC van de lever.</li>
	<li>Klem de IHVC net boven de recht nier ader met microvessel-clips. Klem het PV op het niveau van de pyloric ader met microvessel-clips.<ol>
<li>Het bloed uit de lever leeggemaakt, injecteren langzaam 2 mL van normale zout door de PV. Sleep naar beneden van de lever door te trekken van de eerder geplaatste riem. Klem de SHVC en een deel van het middenrif met een Satinsky klem.</li>
		<li>Transect de IHVC dicht bij de parenchym en de PV in de porta hepatis. Accijnzen de lever door het transecting van de SHVC net boven de lever. De ontvangende lever snel verwijderen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Een magnetische ring aan de geadresseerde SHVC koppelen.<ol>
<li>Plaats de geadresseerde resterende SHVC in een magnetische ring.</li>
		<li>Fix de magnetische ring op een Satinsky klem door magnetische aantrekkingskracht.</li>
		<li>Evert de SHVC over de magnetische ring totdat het schip heeft betrekking op de rand van de ring.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plaats de orthotopically van de donor lever graft en bedek het met een koude natte gaas.</li>
	<li>Vul het lumen van de donor en de geadresseerde SHVCs met normale zoutoplossing. Het verwijderen van luchtbellen grondig om te voorkomen dat de lucht longembolie. Voltooien van de wederopbouw van de SHVC door de magnetische ringen koppeling ingebed in de donor als de ontvanger de SHVC samen door middel van magnetische kracht.</li>
	<li>Reconstrueren de PV.<ol>
<li>Tract de rechter en linker tak van de geadresseerde PV door te trekken van een 8-0 prolene hechtdraad om de spanning van de PV.</li>
		<li>Verplaats de klem van geadresseerde PV naar beneden van de Maagportier ader naar de milt ader om de ader volledig bloot.</li>
		<li>Incise de voorste muur van de ontvanger. Vul het lumen van de PV met normale zoutoplossing.</li>
		<li>Houd de uitbreiding van de manchet van de donor PV met een gebogen pincet.</li>
		<li>Plaats de manchet lichaam van de donor PV in de geadresseerde PV blijven spoelen de PV lumen met normale zout terwijl.</li>
		<li>Veilig met een ze zijde ligatuur van de 6-0. Herstel van de bloedtoevoer naar de lever graft door het vrijgeven van de klemmen op de PV en SHVC.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Herhaal stap 4.11 op het IHVC te reconstrueren van de IHVC.</li>
	<li>Reconstrueren de gal buis door een stent-techniek.<ol>
<li>Incise een "V" op de voorste muur van de ontvangende Galgang.</li>
		<li>De donor-stent in het lumen van de ontvanger BD invoegen en repareren met een 6-0 zijden ze hechtdraad. De hechtingen trekken op de twee galwegen samen en binden de hechtingen te brengen de BD dicht bij elkaar.</li>
		<li>Wikkel majus weefsel rond de anastomotic site om te voorkomen dat gal lek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bevloeiing van de buikholte met warme normale zoutoplossing. Sluit de insnijding van de buik in twee lagen met een continue 3-0 niet-absorbeerbare chirurgische hechtdraad.</li>
	<li>Beheren 16 mg/kg cefuroxim (antibioticum) en 0,05 mg/kg buprenorfine (een analgeticum) onmiddellijk door subcutane injectie na de operatie.</li>
	<li>Plaats de rat in een schone kooi en toestaan dat voedsel en water ad libitum.</li>
	<li>Injecteren cefuroxim (16 mg/kg) en buprenorfine (0,05 mg/kg) in de buikholte elke 12 uur gedurende 3 dagen.</li>
</ol>

<ol><li>Aller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+half+century+%281961-2011%29+of+applying+microsurgery+to+experimental+liver+research%5BTitle%5D)+AND+%22World+journal+of+hepatology%22%5BJournal%5D)">A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research.</a> World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).</li>
<li>Aller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+value+of+microsurgery+in+liver+research%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+international+%3A+official+journal+of+the+International+Association+for+the+Study+of+the+Liver%22%5BJournal%5D)">The value of microsurgery in liver research.</a> Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li>
<li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).</li>
<li>Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+procedures+for+a+rat+model+of+partial+orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+arterial+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376(2013).</li>
<li>Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+New+Technique+for+Reconstruction+of+Hepatic+Artery+during+Liver+Transplantation+in+Sprague-Dawley+Rat%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat.</a> PloS one. 10, e0145662(2015).</li>
<li>Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis%3A+magnetic+compression+anastomosis+with+comparison+to+suture+and+staple+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+pediatric+surgery%22%5BJournal%5D)">Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques.</a> Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).</li>
<li>Pichakron, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis+II%3A+Magnetic+compression+anastomosis+for+minimally+invasive+gastrojejunostomy+and+jejunojejunostomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy.</a> Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).</li>
<li>Gonzales, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis+III%3A+delivery+of+a+magnetic+compression+anastomosis+device+using+minimally+invasive+endoscopic+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+pediatric+surgery%22%5BJournal%5D)">Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques.</a> Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).</li>
<li>Wall, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MAGNAMOSIS+IV%3A+magnetic+compression+anastomosis+for+minimally+invasive+colorectal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Endoscopy%22%5BJournal%5D)">MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery.</a> Endoscopy. 45, 643-648 (2013).</li>
<li>Xue, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochojejunostomy+with+an+innovative+magnetic+compressive+anastomosis%3A+How+to+determine+optimal+pressure%3F%5BTitle%5D)+AND+%22World+journal+of+gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure?</a> World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portacaval+shunt+established+in+six+dogs+using+magnetic+compression+technique%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique.</a> PloS one. 8, e76873(2013).</li>
<li>Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+esophageal+atresia+with+proximal+fistula+using+endoscopic+magnetic+compression+anastomosis+%28magnamosis%29+after+staged+lengthening%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+surgery+international%22%5BJournal%5D)">Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening.</a> Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).</li>
<li>Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnamosis%3A+a+novel+technique+for+the+management+of+rectal+atresia%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+case+reports%22%5BJournal%5D)">Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia.</a> BMJ case reports. , (2014).</li>
<li>Shi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+ring+anastomosis+of+suprahepatic+vena+cava%3A+novel+technique+for+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+international+%3A+official+journal+of+the+European+Society+for+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat.</a> Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Veel klinische vordert in lever transplantatie kunnen worden toegeschreven aan dierproeven. Rat OLT is een veel gebruikte en goed aanvaard model in het onderzoek van orgel behoud, transplantatie-immunologie, fysiologie en pathologie. Echter het is ook een zeer ingewikkelde procedure en geavanceerde microchirurgische vaardigheid vereist. Ondanks vele verbeteringen in de procedure voor rat OLT bleef de SHVC anastomosis een uitdagende stap. In dit artikel beschrijven we een nieuwe magnetische wapendrager techniek voor de we...

Het model van de rat van orthotopic lever transplantatie (OLT) is essentieel voor transplantatie onderzoek1,2. De eerste rat OLT werd beschreven door Lee et al. in 19733. In dat model, werden alle vaartuigen gereconstrueerd door de techniek van de hand-hechtdraad. De hand-hechtdraad techniek vereist geavanceerde microchirurgische vaardigheden, die aanzienlijk beperkt het gebruik. Sindsdien zijn er verschillende wijzigingen in het oorspronkelijke protocol van rat OLT gemeld. Onder hen, de techniek van de manchet voor wapendrager van de portal vein (PV) en infrahepatic vena cava (IHVC) gemeld door Kamada et al. in 1979 wordt beschouwd als een belangrijke verbetering van dit model, aangezien het aanzienlijk vereenvoudigd de wederopbouw procedures4 . Echter, als gevolg van de korte voorste muur van de ontvangers suprahepatic vena cava (SHVC), de manchet techniek is zeer moeilijk te gebruiken voor de wederopbouw van de SHVC. De meeste onderzoekers in dit veld gebruiken nog steeds de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC, waardoor het de stap knelpunt in rat OLT5,6,7.
De techniek van de magnetische wapendrager (dat wil zeggen, magnamosis) is een methode voor het verbinden van twee schepen of andere buisvormige structuren met behulp van de aantrekkelijke kracht tussen twee magneten8,9,10,11. De magnetische kracht geleidelijk comprimeert en hervormt het weefsel in een sterke, sutureless anastomosis12,13. Deze compressie wapendrager heeft bewezen effectief te zijn in de mens14,15. Wij hebben een paar van magnetische ringen specifiek voor de anastomose van de SHVC bij ratten ontworpen. Onze recente studie heeft aangetoond dat de magnetische wapendrager techniek superieur aan de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC van de rat OLT16 is. Het doel van dit artikel is een gedetailleerde, stapsgewijze protocol voorzien in SHVC wederopbouw in ratten met behulp van de roman magnetische wapendrager-techniek.

<table><tbody><tr><td>Anesthesia Machine</td><td>Harvard</td><td>&nbsp;tabletop</td><td>Animal anesthesie</td></tr><tr><td>PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System</td><td>Perlong Medical</td><td>PLX7000B</td><td>Het wordt voornamelijk gebruikt voor de angiografie en fotografie van verschillende operaties</td></tr><tr><td>Syringe Pump</td><td>Mindray</td><td>BeneFusion SP5</td><td>intraveneuze infusie</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD life Science Co.</td><td></td><td>anestheticum: voor de inductie en het onderhoud van anesthesie</td></tr><tr><td>iohexol</td><td>Shanghai General Pharmaceutical Co</td><td></td><td>&nbsp;intravasculair contrastmiddel&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>heparine natrium injectie</td><td>SPH No.1 Biochemical &amp; Pharmaceutical Co., LTD&nbsp;</td><td></td><td>&nbsp;voorkomen van trombosevorming&nbsp;</td></tr><tr><td>cefuroxim&nbsp;</td><td>Glaxo Operations UK Limited&nbsp;</td><td></td><td>een antibioticum</td></tr><tr><td>buprenorfine&nbsp;</td><td>TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd</td><td></td><td>een pijnstiller</td></tr><tr><td>gebogen microforceps</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>W40350</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>hemostase forceps(recht)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J31010</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>hemostase forceps(gebogen)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J31020</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>Satinsky klem</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>XEC050</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>naaldhouder</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J32010</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>micro naaldhouder</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WBA040</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>gekartelde forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J42010</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>weefselforceps(met haak)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J41010</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>weefselschaar</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>Y00040</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>chirurgische schaar</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>Y00030</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>micro schaar</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>MR-S121T</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>microvaatclips</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>XEC240</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>rechte microforceps(titaniumlegering)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WCC010</td><td>chirurgisch instrument</td></tr><tr><td>gebogen microforceps&nbsp; (titaniumlegering)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WCC020</td><td>chirurgisch instrument</td></tr></tbody></table>

een rat model van orthotopic met behulp van een roman magnetische anastomosis techniek voor suprahepatic vena cava wederopbouw levertransplantatie

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Het model van de rat van orthotopic lever transplantatie (OLT) is essentieel voor transplantatie-onderzoek. Het is een zeer geavanceerde diermodel en vereist een steile het leren kromme. De invoering van de techniek van de manchet voor wapendrager van de portal vein (PV) en infrahepatic vena cava (IHVC) heeft de haartransplantatie procedure bij ratten aanzienlijk vereenvoudigd. Echter, als gevolg van de korte voorste muur van de ontvangers suprahepatic vena cava (SHVC), de manchet techniek is zeer moeilijk te gebruiken voor de wederopbouw van de SHVC. De meeste onderzoekers in dit veld gebruiken nog steeds de hand-hechtdraad techniek voor de wederopbouw van de SHVC, waardoor het de stap knelpunt in rat orthotopic lever transplantatie. De techniek van de magnetische wapendrager (dat wil zeggen, magnamosis) is een methode voor het verbinden van twee schepen met behulp van de aantrekkelijke kracht tussen twee magneten. Onze recente studie heeft aangetoond dat de magnetische wapendrager techniek superieur aan de hand-hechtdraad techniek voor SHVC wederopbouw bij ratten is. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van de roman magnetische wapendrager-techniek. In dit model, werd de wederopbouw van de PV en IHVC uitgevoerd door de standaard manchet techniek, terwijl de wederopbouw van de gal buis (BD) werd uitgevoerd door een stent-techniek. De hepatische re arterialization werd niet uitgevoerd. De magnetische wapendrager techniek SHVC wederopbouw gemakkelijker gemaakt en aanzienlijk verkort de anphepatic fase. Na een redelijke leercurve, kunnen zelfs onderzoekers zonder geavanceerde microchirurgische vaardigheden produceren betrouwbare en reproduceerbare resultaten met behulp van dit model van de rat van OLT.

Na ongeveer 10 pogingen, de magnetische wapendrager techniek voor SHVC wederopbouw was met succes onder de knie door een onderzoeker die had geen voorafgaande microchirurgische opleiding. De wederopbouw van de SHVC nam minder dan 2 min. De fase van de anhepatic voor de ontvangende rats was ongeveer 10 min. Geen trombose, bloeden of angiostegnosis werd waargenomen op de SHVC anastomotic site op 1, 5 tot 30 dagen na reperfusie. De cavography inferior vena werd uitgevoerd op 2 weken na de tr...

De wederopbouw van de suprahepatic vena cava (SHVC) blijft een moeilijke stap in rat orthotopic lever transplantatie. In dit artikel tonen we een stapsgewijze protocol voor SHVC wederopbouw in ratten met behulp van een roman magnetische wapendrager-techniek.

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Het algemene doel van dit protocol is om een orthotopisch rattenlevertransplantatiemodel te introduceren met behulp van een magnetische anastomosetechniek voor reconstructie van de suprahepatische vena cava. Deze methode kan helpen om een belangrijke vraag in het levertransplantatiemodel over reconstructie van de suprahepatische vena cava te beantwoorden. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het de anhepatische fase van levertransplantatie vermindert en de postoperatieve overlevingskans aanzienlijk verbetert.Scheer eerst de hele buikhuid van de rat. Desinfecteer de bijbehorende huid met een povidon-jodiumoplossing. Ontleed het valsieve ligament rond de lever.Isoleer vervolgens en bind de linker inferieure frenicusvene af. Voer een V-snede uit op de voorwand. Plaats de stent in het lumen van de galblaas.Zorg ervoor dat minstens de helft van de stent buiten de galblaas ligt. Zet de stent vast met een 6-0 zijden hechtdraad. Snijd een uiteinde van de hechting door.Bewaar de andere om later tijdens de anastomose vast te houden. Isoleer de infrahepatische vena cava tot aan het niveau van de linker nierslagader. Ontleed het totdat de infrahepatische vena cava is geskeletoniseerd.Scheiden en bind de rechter suprarenale ader af. Scheiden en bind de rechter nierslagader af. Hepariniseer de rat via de dorsale penisader.Breng een 22-gauge katheter in de abdominale aorta onder de linker nierslagader. Voer een thoracotomie uit. Klem de thoracale aorta af met behulp van een microforceps.Perfuseer de donorlever via de katheter in de aorta. Doorsnijd de suprahepatische vena cava. Snijd intussen de vena cava onder de rechter nierslagaders door om het perfusatoom de lever uit te laten stromen.Ontleed het bindweefsel rond de poortader. Bind de pylorische ader af en snijd deze door. Doorsnijd de poortader ter hoogte van de miltslagader.Doorsnijd de infrahepatische vena cava ter hoogte van de linker nierslagader. De levertransplantaatpreparaten worden uitgevoerd in een zoutwaterbad van vier graden Celsius. Plaats de infrahepatische vena cava in zijn manchet, waarbij de manchetverlenging naar de lever wijst.Keer het distale uiteinde van de infrahepatische vena cava om over de manchet. Zet de rand vast met een 6-0 zijden hechting. Herhaal de bovenstaande stappen op de poortader om een manchet aan de poortader van de donor te bevestigen.Trek het diafragma door de forceps en trim de suprahepatische vena cava. Breng de suprahepatische vena cava door de magnetische ring. Keer het distale uiteinde van de suprahepatische vena cava om over de ring.En zet de ring vast met een 6-0 zijden hechting. Verwijder vervolgens het overtollige diafragma rond de lever. Plaats een 6-0 zijden hechting en bind de gemeenschappelijke galblaas af.Isoleer de gemeenschappelijke galblaas van de eerste leverpoort. Bind en snijd de rechter bijnierslagader door. Plaats een band in de suprahepatische vena cava van de lever.Klem de infrahepatische vena cava net boven de rechter nierslagader af met microvatklemmetjes. Klem de poortader af op het niveau van de pylorische ader. Injecteer langzaam twee milliliter normale zoutoplossing via de poortader om het bloed uit de lever te spoelen.Trek de lever naar beneden door aan de eerder geplaatste band te trekken. Klem de suprahepatische vena cava en een deel van het diafragma af met een Satinsky-klem. Verwijder de lever door de suprahepatische vena cava net boven de lever door te snijden.Doorsnijd de infrahepatische vena cava dicht bij het parenchym en de poortader op de porta hepatis. Plaats de resterende suprahepatische vena cava van de ontvanger in een magnetische ring. Bevestig de magnetische ring op een Satinsky-klem door magnetische aantrekking.Keer de suprahepatische vena cava om over de magnetische ring. Plaats de donorlevertransplantaat orthotopisch en vul het lumen met normale zoutoplossing, koppel de magnetische ringen om de vaatconstructie te voltooien. Bouw de poortader weer op.Vul het lumen van de poortader met normale zoutoplossing. Plaats het manchet van de poortader van de donor in de poortader van de ontvanger. En zet dit vast met een cirkelvormige 6-0 zijden hechting.Verwijder de Satinsky-klem van de suprahepatische vena cava. Snijd een V in de voorwand van de gemeenschappelijke galblaas. Breng de donor stent in het lumen van de galblaas van de ontvanger.En bevestig deze met een 6-0 zijden cirkelvormige hechting. Trek de hechtingen aan de twee galwegen bij elkaar en knoop de hechtingen om de galwegen dicht bij elkaar te brengen. De angiografie twee weken na de operatie toonde een patent bloedstroming van de anastomose van de suprahepatische vena cava.De overlevingskans na de transplantatie was tot 85% op dag 30 na de operatie. De magnetische anastomosetechniek maakt een gemakkelijke en snelle reconstructie van de suprahepatische vena cava bij ratten mogelijk. Na het bekijken van deze video, kan zonder geavanceerde microchirurgische vaardigheden, betrouwbare en reproduceerbare resultaten worden geproduceerd met behulp van dit rattenmodel voor levertransplantatie.

a-rat-model-orthotopic-liver-transplantation-using-novel-magnetic

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

We een gemakkelijk te stellen herziening van de klassieke twee manchet techniek orthotope levertransplantatie in rat.

Orthotope levertransplantatie bij ratten

Orthotope levertransplantatie bij ratten is een onmisbare experimenteel model voor biomedisch onderzoek. Hier presenteren we onze chirurgische procedures voor orthotope rat levertransplantatie met een lever-arteriële reconstructie met behulp van een 50% gedeeltelijke graft.

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

We beschrijven het ontwerp van de "quick-linker" apparaat voor eenvoudiger rat orthotope levertransplantatie.

Productie apparaten en instrumenten voor eenvoudiger Rat Liver Transplantation

We beschrijven een nieuwe techniek voor heterotope abdominale hart-longtransplantatie (HAHLT) bij ratten. De transplantaatconfiguratie resulteert in een gedeeltelijk belaste graftcirculatie, waardoor een directe functionele beoordeling mogelijk is. Dit model kan worden gebruikt voor acute of chronische studies van de functie en het immunologische status van het getransplanteerde graft.

Rat Heterotope Abdominale Hart / Single-longtransplantatie in een Volume geladen configuratie

Hier, wordt een protocol met betrekking tot de gedeeltelijke levertransplantatie opnieuw arterialized rat gepresenteerd. 70% lever was precies gereseceerd in vivo met behulp van een bijgewerkte techniek van het vaartuig georiënteerde hepatectomy. De hepatische slagader werd gereconstrueerd op een end-to-side wijze. De manchet techniek was aangepast zodat het verkorten van de infrahepatic vena cava anastomose.

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

Het doel van deze studie is om de rat orthotopische levertransplantatie model te wijzigen om beter te vertegenwoordigen menselijke levertransplantatie en verbetering van de overleving van de ontvanger. De gepresenteerde methode hersteld leverslagaderlijke instroom door het aansluiten van de donor lever gemeenschappelijke lever slagader aan de juiste lever van de ontvanger slagaderslagader.

Verminderde complicaties na arteriële heraansluiting in een ratmodel van orthotopische levertransplantatie

In dit protocol bespreken we de implementatie van een model van succesvolle orthotope levertransplantatie (OLT) bij muizen. Daarnaast worden ook adjuvantia besproken om de doorgankelijkheid van het transplantaat verder te analyseren na succesvolle OLT in een muis, met name met behulp van microcomputertomografie (microCT)-scans.

Succesvolle orthotope levertransplantatie bij muizen met behulp van microcomputertomografie-angiografie

Dit protocol biedt technische informatie voor vatreconstructie met behulp van de manchettechniek bij orthotope levertransplantatie bij muizen.

Vasculaire reconstructie met de manchettechniek bij orthotope levertransplantatie bij muizen

Het hier beschreven heterotope hulplevertransplantatieprotocol bij ratten biedt een praktisch onderzoeksinstrument voor het onderzoeken van mechanismen van afstoting van het levertransplantaat. Dit model helpt bij het verlichten van de chirurgische hindernissen en dierlijke stress van orthotope levertransplantatie bij ratten.

Heterotopisch aanvullend transplantaatmodel voor ratten in de hele lever met behulp van een hepaticouretostomie voor onderzoeken naar afstoting van transplantaten

Deze video toont de orthotope aorta transplantatie model als een eenvoudig model om de ontwikkeling van transplantatie vasculopathie (TVP) studie bij ratten.

Orthotope Aorta Transplantatie: Een Rat Model voor de ontwikkeling van chronische vasculopathie Study

Leer een magnetische anastomosetechniek voor suprahepatische vena cava-reconstructie bij orthotopische levertransplantatie in ratten. Deze methode verkort de anhepatische fase en verbetert de postoperatieve overlevingskans aanzienlijk.

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie (Video) | JoVE Journal

Een Rat Model van Orthotopic met behulp van een roman magnetische Anastomosis techniek voor Suprahepatic Vena Cava wederopbouw levertransplantatie

Meer video's verkennen