Name: Met behulp van hoge resolutie echografie naar Monitor Tumor ontstaan en groei in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker modellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Leer hoe je hoogresolutie-echografie gebruikt voor het detecteren en evalueren van endogene alvleeskliertumoren in het KPC-muismodel. Deze methode maakt nauwkeurige monitoring van tumorontwikkeling en groeikinetiek mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit onderzoek werd gesteund door de Deutsche Wenatex_helpt (Max Eder groep AN: 110972), een DGVS proefschrift studiebeurs (SMB), en een beurs van de Else-Kröner-Fresenius-Stichting (voor RGG) op de Universiteit medisch centrum Göttingen. Wij danken Jutta Blumberg en Ulrike Wegner voor deskundige technische bijstand. Wij danken alle dierlijke technici op het dier faciliteit van de Universiteit medisch centrum Göttingen voor muis houden. Alle experimenten werden uitgevoerd volgens voorschriften van de Duitse dierenwelzijn.

Dit protocol is in overeenstemming met de richtsnoeren van de verzorging van de dieren op de Universiteit medisch centrum Goettingen, Duitsland (33.9-42502-04-15/2056). Afhankelijk van de specifieke behoeften van individuele dier Bekijk planken, enkele van de stappen van het protocol kan worden gewijzigd.
1. abdominale palpatie van KPC muizen
<ol><li>Voorkom geen onnodige echografie, palperen de buik van de muis om te identificeren van muizen die eventueel een intraabdominal laesie zou kunnen dragen en vervolgens echografie van de buik moeten ondergaan.<ol>
<li>Abdominale palpatie per vanaf 8 weken leeftijd hebben bereikt in de KPC muismodel uitvoeren Hoge resolutie echografie kan ook worden toegepast in de modellen van de getransplanteerde tumor (bijvoorbeeld, orthotopics) of andere genetisch gemodificeerde Muismodellen. Opmerking: Afhankelijk van de tumor kinetiek en studie doel (studie van de preventie, therapeutische interventie studie), opsporing van zeer kleine tumoren (1-2 mm) is haalbaar om monitor tumor begin voordat tumoren kunnen worden gepalpeerd.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plaatst u de muisaanwijzer op de grid van de kooi en zachtjes til de muis door de staart en palperen van de buik door zachtjes op en neer te gaan met index en duim van de hand van niet-vaststelling (Figuur 1).</li>
	<li>Als de muis zachte palpatie tolereert, gaat u verder door het langzaam verhogen van de druk. Een grotere weerstand kan gemakkelijk worden opgespoord in de bovenste en onderste buik. Soms, harde ontlasting ten onrechte kunnen worden geïnterpreteerd als een tumor massa.</li>
</ol>2. voorbereiding van de werkruimte
<ol><li>Bieden ruimte voor ten minste drie verschillende werkeenheden: pre scangebied, scannen fase en herstel kooi. Vereist materiaal zijn afgebeeld in Figuur 2.</li>
	<li>De belangrijkste werkende plaat schoon (bijvoorbeeld met 70% Ethanol) en zet de verwarming platform vóór het scannen (Figuur 3). Zorg ervoor dat de doelgroep temperatuur van 38-40 ° C is bereikt voordat de eerste muis wordt overgedragen.</li>
	<li>Zet de echografie machine en maak een nieuwe map voor de verworven gegevens (Figuur 4). De B-modus instelling wordt toegepast voor beeldvorming van de buik. Verder zorgen dat de abdominale transducer is aangesloten op de actieve poort van de machine. Positiebepaling de transducer hoofd boven aan de fase van de werken tegen using naar de transducer montagesysteem.</li>
	<li>Bereiden van een herstel kooi op een verwarmingsplaat of thermische mat (of gebruik verwarming lamp) om ervoor te zorgen de post procedurele thermoregulatie en beterschap van gescande muizen. Breng een dun laagje weefsel als kussen aan de onderkant van deze kooi om aspiratie van beddengoed met het risico van verstikking (Figuur 5).</li>
</ol>3. inademing verdoving
<ol><li>Ga verder door de invoering van een muis in de bedwelmingsruimte inductie. Open de klep voor de gasstroom van de vervoerder (1 L/min zuurstof of lucht) en de concentratie Isofluraan ingesteld op 4% waardoor een langzaam toenemende verzadiging van de inductie-kamer. Zorg ervoor dat juiste Isofluraan opruiming (passieve of actieve filteren) op zijn plaats is. Na ongeveer 2-4 min zal de muis gewoonlijk onder diepe sedatie.<ol>
<li>Sedatie handhaven door het toedienen van 2% Isofluraan via de neus in het werkgebied werken.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Zorgvuldig overbrengen in het dier uit de zaal van de inductie fase van de werken. Controleer de neus voor een constante gasstroom. De snuit van de muis in de neus van de verdoving lijn afvoer plaatsen De normale positie voor het eerste scannen is liggende positie. De muis kan ook worden geplaatst op de linker- of rechterkant te verbeteren van de zichtbaarheid van de alvleesklier kop of staart tumoren (Figuur 6).</li>
	<li>Hoewel abdominale echografie niet pijnlijk per se is, voeren de voet snuifje test als indicator voor een pijn vrije voorwaarde en diep verdoving staat. Als de muis is nog steeds actief of actief bewegen, retransfer het dier terug in de kamer van de inductie voor herhaalde of langdurige inductie.</li>
	<li>Oog bescherming zalf gebruiken om te voorkomen dat hoornvlies verwondingen als gevolg van vocht verlies.</li>
	<li>Tijdens anesthesie, gebruik maken van een controlesysteem. Echter, ECG en rectale temperatuur is niet regelmatig gebruikt voor het scannen van abdominale echografie. Nog belangrijker is, verliezen muizen de mogelijkheid om te thermoregulate onder verdoving. Daarom nauw observeren klinische symptomen voor onderkoeling of respiratoire nood zoals hijgen of apneu. Als elk symptoom direct duidelijk stop Isofluraan en plaats de muis in de kooi van herstel is.</li>
</ol>4. echografie instellingen
<ol><li>Zet de echografie systeem zoals beschreven door de aanwijzingen van de fabrikant. Zorg ervoor dat de primaire instelling is op algemene imaging met de abdominale pakket geactiveerd. B-modus-imaging wordt meestal gebruikt voor data-acquisitie als een standaard.</li>
	<li>Bereiken van geoptimaliseerde beeldkwaliteit met de volgende parameters: frequentie 40 MHz, 2D-gain 25-30 dB, image 10 mm, breedte van de afbeelding 10 mm, diepte 3 focal zones met midden tussen 3-6 mm.</li>
</ol>5. muis voorbereiding
<ol><li>De bovenste en onderste extremiteit met plakband vast te stellen. Wees zo voorzichtig mogelijk om te voorkomen dat schade aan het dier als gevolg van fixatie (Figuur 7).</li>
	<li>Verwijder alle abdominale bont met behulp van elektronische huisdier tondeuse. Als gevolg van de textuur van bont, starten vanuit de onderbuik tot de ribbenkast. Zorg op de processus xiphoideus om te voorkomen dat de huid verwondingen op dit gebied. Opmerking: Muis bont weerspiegelt ultrasone golven en zichtbaarheid vermindert.</li>
	<li>Ontharende room gebruiken voor het uitvoeren van een geoptimaliseerde huid voorbereiding en volledige verwijdering van bont. Het beheren van een dunne laag van room op de geschoren buik met behulp van katoen tips (Figuur 8). Verwijder de crème (na 30 s of later afhankelijk van de crème gebruikt) met droge weefsels gevolgd door veel water voor het verwijderen van alle resten (afbeelding 9 afbeelding 10 afbeelding 11). Crème restanten kunnen ervoor zorgen dat huid en mucosa irritaties na de echografie en dus van invloed kunnen zijn op de gezondheid.</li>
	<li>Voorwaarden gelden om ervoor te zorgen dat voldoende scannen tal van ultrageluid-gel op de buik (Figuur 12). Warme ultrageluid-gel wordt meestal gebruikt om te minimaliseren van hypothermie voor de muis.</li>
	<li>Breng een dunne laag van ultrageluid-gel handmatig op het hoofd van de transducer. Voer een test uit door het aanraken op het einde van de transducer met de inkeping. Op het scherm kan een signaal aan de linker bovenzijde worden gezien als de transducer juist gepositioneerd.</li>
</ol>6. abdominale echografie
<ol><li>Pas de transducer op de buik met behulp van stevige druk. Zware compressie van de buik van de muis kan leiden tot respiratoire of bloedsomloop bijzondere waardeverminderingen en moet worden vermeden.</li>
	<li>Scannen op en neer. Aanpassen van het frame van het werkplatform en de wielen voor x-as en y-as.</li>
	<li>De eerste stap moet u aangeven beide nieren. Meestal verschijnen ze als homogene structuren van de hyperechogenic in de onderbuik. De aangesloten vena renalis kunnen gemakkelijk worden gevonden die verder leidt tot de vena cava inferior (Figuur 13).</li>
	<li>Gebruik de vena lienalis serveert als landmark vaartuig voor de alvleesklier. Poging om het onderscheid worden gemaakt tussen de vena renalis en vena lienalis. Na detectie van de vena lienalis kan de alvleesklier precies worden gelokaliseerd. De normale alvleesklier is nogal een membraan verspreid via de buikholte dan een solide structuur (Figuur 14 en Figuur 15).</li>
</ol>7. de alvleesklier Tumor detectie en evaluatie van het Volume
<ol><li>Identificeren alvleesklier laesies van alle omliggende structuren. In het algemeen lijken ze als hypoechoic inhomogene ronde of langwerpige weefsel massa (Figuur 16). De tumor is meestal stevig en kan nauwelijks worden gecomprimeerd door het hoofd van de scan. Note, van tijd tot tijd die het wellicht lastig om duidelijk onderscheid te maken tussen een tumor en een lus van de kleine darm. Aandacht besteden aan de peristaltiek van de darm die niet moet worden nageleefd in de alvleesklier tumoren.</li>
	<li>Na tumor detectie scherm omhoog en omlaag om een indruk van de totale grootte en de grootste diameter meten met behulp van de echografie remklauw. Zodra een geschikte afbeelding is gevonden, bevriezen van het scherm en het gereedschap Meetlat kunt precies bepalen de grootte van de tumor. Opmerking, voor later gebruik, die het is belangrijk om te onderscheiden of een tumor is gelokaliseerd in de staart, het lichaam of het hoofd van de alvleesklier.</li>
	<li>Voordat u terug naar de live-ISO modus, zorg ervoor dat het opslaan van afbeeldingen als u wilt opnemen van het werk. Let op, terwijl het bevriezen van het beeld, dat kan het gebeuren dat het wiel aanpassing worden vrijgegeven en de ultrasone sonde zelfs meer om de buik van de muis ingedrukt is. Daarom lossen de aanpassing van de compressie voor het veranderen van de mode om te bevriezen.</li>
	<li>Na het beëindigen van de meting van het eerste vliegtuig de scan hoofd draaien 90 ° in lengterichting positie (Figuur 17) of zet de muis aan de kant, om te ontdekken de tumoren longitudinale expansie. Sommige tumoren kunnen eisen veranderen van de positie van de muis voor adequate zichtbaarheid. Voor tumoren van de staart van de pancreas, kan de muis worden geplaatst aan de rechterzijde (Figuur 10 en Figuur 19), voor alvleesklier hoofd tumoren aan de linkerkant (Figuur 11 en figuur 20).</li>
</ol>8. kwantificering van Tumor Volume
Opmerking: Een grote doel van alle inspanningen is de juiste bepaling van de omvang van de tumor. Hoewel er verschillende technieken beschikbaar is een berekeningsmethode met inbegrip van de formule van een ellipsoïde aangewezen op de Universiteit medisch centrum Göttingen.
<ol><li>Uitgerust met alle drie eerder verkregen diameters, het berekenen van de geschatte omvang van de overeenkomstige tumor (Figuur 21).</li>
	<li>Ook gebruiken een locomotorisch stelsel van de scan hoofd een automatische scan van de regio van de tumor met daaropvolgende volume berekening en 3-d-3-d-reconstructie uit te voeren.</li>
</ol>9. herstel
<ol><li>Na het scannen, verwijder voorzichtig alle plakband en verwijder voorzichtig alle ultrageluid-gel met droge tissue.</li>
	<li>Breng zorgvuldig de muis in de kooi herstel ( Figuur 21). Vermijd elk weefsel van de bekleding op het gezicht van de mouse´s dat leiden respiratoire bijzondere waardevermindering tot kan. Kant staat voor herstel de voorkeur verdient.</li>
</ol>

<ol><li>Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+in+oncology+research+and+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine.</a> EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).</li>
<li>Olive, K. P., Politi, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOlive%2C+KP+%22Translational+therapeutics+in+genetically+engineered+mouse+models+of+cancer%22">Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer</a>. (2), Cold Spring Harbor. 131-143 (2014).</li>
<li>Westphalen, C. B., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+Cancer+Journal%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer.</a> The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trp53R172H+and+KrasG12D+cooperate+to+promote+chromosomal+instability+and+widely+metastatic+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice.</a> Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).</li>
<li>Frese, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((nab-Paclitaxel+potentiates+gemcitabine+activity+by+reducing+cytidine+deaminase+levels+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).</li>
<li>Paredes, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+method+of+quantifying+pancreatic+volume+in+mice+using+micro-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI.</a> PLoS One. 9 (3), e92263(2014).</li>
<li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li>
<li>Aung, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotargeting+of+Integrin+alpha6beta4+for+Single-Photon+Emission+Computed+Tomography+and+Near-Infrared+Fluorescence+Imaging+in+a+Pancreatic+Cancer+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model.</a> Molecular Imaging. 15, (2016).</li>
<li>Akladios, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+microCT+structural+imaging+to+preclinical+evaluation+of+hepatocellular+carcinoma+chemotherapeutics+on+orthotopic+graft+in+ACI+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+du+Cancer%22%5BJournal%5D)">Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats.</a> Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).</li>
<li>Neesse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CTGF+antagonism+with+mAb+FG-3019+enhances+chemotherapy+response+without+increasing+drug+delivery+in+murine+ductal+pancreas+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+USA%22%5BJournal%5D)">CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).</li>
<li>Sastra, S. A., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+murine+pancreatic+tumors+by+high-resolution+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Met dit protocol, wordt een gedetailleerde beschrijving voor het kwantificeren van de alvleesklier tumoren met behulp van hoge-resolutie abdominale echografie imaging in genetisch gemodificeerde Muismodellen gegeven. Onlangs gepubliceerd Sastra et al. een gedetailleerde beschrijving hoe te kwantificeren alvleesklier tumoren in muismodellen, maar geen gevisualiseerde instructies over de voorbereiding en de behandeling als voorwaarde voor alle verdere stappen11werden getoond. Het algemene d...

Genetisch gemodificeerde Muismodellen hebben opgedaan een steeds belangrijker in kankeronderzoek vanwege hun vermogen om nauw recapituleren de complexe aard van menselijke carcinogenese1,2,3. Een van de meest gebruikte modellen om te studeren van pancreatic kankerontwikkeling, progressie en therapeutische respons wordt gekenmerkt door een activerend mutatie in de Kras oncogen gecombineerd met een inactivatie van de tumor suppressor p534. Deze LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre (KPC) muismodel bootst het stapsgewijs progressie van vooraf invasieve alvleesklier geest neoplasie (PanIN) laesies naar invasief carcinoom. Bijna alle muizen ontwikkelen fenotypische, PDAC binnen de eerste zes maanden na de geboorte. Echter, vergeleken met getransplanteerde modellen, het KPC-model onthult het begin van een zeer variabel tumor van 8 weken tot meerdere maanden4. Zodra alvleesklier tumoren bereiken een bepaalde grootte (5-9 mm diameter), tumorgroei versnelt snel en muizen zullen moeten worden ingeschreven in de preklinische proeven5. De exacte detectie van tumor ontstaan en de grootte van de tumor is daarom een essentiële voorwaarde voor preklinische studie logistiek en monitoring van de therapie. In het algemeen, verschillende benaderingen zoals magnetische resonantie beeldvorming (MRI)6, computertomografie scannen7,8,9 of hoge resolutie echografie kan worden gebruikt om te voeren tumor screening en therapie10. Elke techniek heeft zijn voor- en nadelen. Hoewel MRI- of berekend tomografie (CT)-imaging kunt hoge resolutie data-acquisitie evenals nauwkeurige volume berekening, langdurige onderzoek tijd onder algemene sedatie en zeer dure apparatuur nodig is, en staat niet toe dat frequente scannen gedurende een lange periode van tijd. Kleine dierlijke Ultrasonografie is daarentegen een gevestigde methode die kan worden gebruikt om te screenen op abdominale pathologieën in muizen11. Voordelen van deze beeldvorming methode zijn kort scannen tijden, hoge resolutie, en de mogelijkheid tot gebruik van doppler echografie of contrast enhanced echografie (CEUS) te visualiseren perfusie van organen in parallel. Anatomische kennis, 3D verbeelding en grondige praktijkopleiding zijn echter vereist voor correcte beeldinterpretatie.
In het volgende artikel vindt u een gedetailleerd protocol voor het gebruik van hoge resolutie echografie in het KPC-model. Bovendien zijn de standaard echografie beelden afgebeeld en geëtiketteerd met orgel structuren om de afdrukstand voor de onderzoeker.

<table><tbody><tr><td>Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, inclusief beeldvormingsfase en anesthesielijn</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11874</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Anesthesiesysteem (anesthesie-inductiekamer met inlaat voor vers en afvoergassen)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>SA-12055</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Beeldvormingsstation (werkfase met neuskoker voor anesthesietoevoer)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>SA-11982</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;elektronische huisdierdeken</td><td>Panasonic Marketing Europe, Duitsland</td><td>5025232484324</td><td>Panasonic ER-PA10-s</td></tr><tr><td>Labotect Hot plate</td><td>Labor tech G&ouml;ttingen, Duitsland</td><td>13854</td><td></td></tr><tr><td>oogcrème (oftalmische zalf)</td><td>Sch&uuml;lke&amp;Mayr, Duitsland</td><td>9080249</td><td></td></tr><tr><td>veterinair isofluraan</td><td>Abbvie, Duitsland</td><td>4831867</td><td></td></tr><tr><td>ontharingscrème</td><td>RB healthcare UK, Verenigd Koninkrijk</td><td>8218535</td><td></td></tr><tr><td>70% ethanol (v/v) in gedistilleerd water</td><td>TH. Geyer, Duitsland</td><td>22941000</td><td></td></tr><tr><td>echografiegel</td><td>Asmuth, Duitsland</td><td>13477</td><td></td></tr><tr><td>weefseldoekjes</td><td>Kimberly-Clark Germany, Duitsland</td><td>7558</td><td></td></tr><tr><td>wattenstaafjes</td><td>Meditrade, Duitsland</td><td>75481116</td><td></td></tr><tr><td>glazen kom voor echografiegel</td><td>ARC France, Frankrijk</td><td>H1149</td><td></td></tr><tr><td>waterkom</td><td>W &amp; P Trading Co., VS</td><td>B00K2P6PLQ</td><td></td></tr><tr><td>gaasjesponzen</td><td>Fuhrmann, Duitsland</td><td>960504</td><td></td></tr></tbody></table>

met behulp van hoge resolutie echografie naar monitor tumor ontstaan en groei in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker modellen

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

De LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre (KPC) muismodel vertegenwoordigt een gevestigde en veelgebruikte transgene model voor de evaluatie van nieuwe therapieën in alvleesklierkanker. Begin van de tumor is variabel in het KPC model tussen 8 weken en enkele maanden. Niet-invasieve beeldvormende instrumenten zijn dus vereist voor het scherm voor het begin van de tumor en monitor voor reactie op behandeling. Om dit probleem te verhelpen, verschillende benaderingen naar voren zijn gekomen in het afgelopen jaar. Hoge resolutie echografie heeft belangrijke voordelen zoals snelle sessie keer, niet-invasiviteit en een hoge beeldresolutie zonder blootstelling aan straling. Echter, echografie in muizen is niet triviaal en voldoende anatomische kennis en praktische vaardigheden zijn vereist om te hoge resolutie echografie uitvoeren in preklinische alvleesklierkanker modellen. Met het volgende artikel, wordt een gedetailleerde hands-on gids voor echografie van de buik in lymfkliertest modellen met een speciale focus op endogene alvleesklierkanker modellen gepresenteerd. Bovendien vindt u een overzicht van voorkomende fouten en hoe ze te vermijden.

Echografie imaging is een veelzijdig en niet-invasieve techniek die wordt gebruikt om verschillende kwesties in lymfkliertest modellen van ziekten bij de mens. In vergelijking met alle andere imaging benaderingen grote voordelen zijn high-throughput, kosten-efficiëntie, korte Acquisitietijd en real-time beeldvorming. Dit hulpprogramma moet echter expertise voor het genereren van nauwkeurige, hoge kwaliteitsbeelden. Met name in het geval van ongewenste artefacten is op zijn minst enige erv...

Dit artikel beschrijft het gebruik van hoge resolutie echografie in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker muizen. Het primaire doel is om een gedetailleerde instructies voor detectie en evaluatie van endogene alvleesklier tumoren.

Met behulp van hoge resolutie echografie naar Monitor Tumor ontstaan en groei in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker modellen

The LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mouse model represents an established and frequently used transgenic model to evaluate novel ...

Er zijn verschillende genetisch gemanipuleerde muismodellen om pancreaskanker te bestuderen. Het meest gebruikte model is het Kras, p53-muismodel dat een activerende mutatie in het Kras-oncogen heeft, en een inactiverende mutatie in het p53-tumorsuppressorgeen. Beide mutaties worden conditioneel geactiveerd door de Pdx-Cre-promotor.Dit Kras, p53, Pdx-Cre-muismodel, kortweg KPC-model, ontwikkelt endogene pancreastumoren tussen de leeftijd van twee tot zes maand. Ter voorbereiding op uw echografieprocedure, moet de volgende apparatuur worden voorbereid en klaar zijn voor gebruik. Voor hoogwaardige echografie wordt een stationair echografieapparaat gebruikt.De echografieprocedure wordt uitgevoerd onder algemene anesthesie met isofluraanverdamping. Zodra de muis onder diepe sedatie is, wordt deze overgebracht naar het groene werkstation. Na de echografieprocedure moet de muis in een voorverwarmde kooi worden geplaatst om de hersteltijd te versnellen.De tumorontwikkeling is zeer variabel in het KPC-muismodel. Om onnodige echografiescreeningsprocedures te voorkomen, voeren we meestal wekelijks buikpalpatie uit vanaf de leeftijd van twee maanden. Palpeer zachtjes de buik van de muis van b

utilizing-high-resolution-ultrasound-to-monitor-tumor-onset-growth

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

This video describes the protocol for ultrasound-guided orthotopic implantation of murine-derived pancreatic ductal adenocarcinoma cells directly into the pancreas of the mouse. This causes less inflammation at the implantation site compared to surgical procedures.

Ultrasound-Guided Implantation: A Technique to Implant Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Cells into an Adult Mouse

This video demonstrates an orthotopic model of pancreatic cancer that utilizes Matrigel for localized cell delivery and in vivo bioluminescence imaging for non-invasive monitoring of tumor progression. The orthotopic model is suited to both syngeneic and xenograft models and could be used in pre-clinical trials to investigate the impact of novel anti-cancer therapeutics on the growth of the primary pancreatic tumor and metastasis.

Bioluminescent Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model: A Non-invasive Technique to Monitor Cancer Progression in Mice

Beter begrip van alvleesklierkanker biologie is kritisch nodig om de ontwikkeling van betere therapeutische opties om pancreaskanker te behandelen mogelijk te maken. Om aan deze behoefte te pakken, zien we een orthotopic model van pancreaskanker die niet-invasieve monitoring van de progressie van kanker maakt gebruik...

Bioluminescent Orthotope Model van pancreaskanker Progression

Het doel van dit protocol is om dynamisch contrastversterkte magnetische resonantie beeldvorming (DCE-MRI) toe te passen voor ortotopische pancreatische tumor xenografts bij muizen. DCE-MRI is een niet-invasieve methode om de microvaten in een doelweefsel te analyseren en is nuttig om de vasculaire respons in een tumor na een nieuwe therapie te beoordelen.

Dynamisch contrast versterkte MRI van een orthotope pancreaskanker Muis Model

Een procedure om groen fluorescerende eiwit-expresserende pancreaskankercellen (PANC-1 GFP) orthotopisch in de pancreas van Balb-c Ola Hsd-Fox1nu muizen te implanteren om tumorprogressie en metastase te beoordelen, wordt hier gepresenteerd.

Fluorescerende orthotope Muis Model van pancreaskanker

We beschrijven een protocol voor de echografie geleide implantatie van Murine-afgeleide alvleesklier ductaal adenocarcinoom cellijnen rechtstreeks in de inheemse tumor site. Deze aanpak resulteerde in alvleesklier tumoren detecteerbaar door echografie scannen binnen 2-4 weken van injectie, en aanzienlijk verminderd de proportie tumor cel zaaien op de peritoneale muur in vergelijking met chirurgische orthotopic implantatie.

Echografie-geleide Orthotopic implantatie van Murine pancreatic Ductal adenocarcinoom

In vivo beeldvorming met hoge resolutie van de alvleesklier werd vergemakkelijkt met het pancreas intravital imaging venster.

Gestabiliseerde longitudinale in vivo cellulaire visualisatie van de alvleesklier in een murien model met een pancreas intravital imaging venster

We presenteren een protocol om een minimaal invasief orthotopisch pancreaskankermodel te genereren door echogeleide injectie van menselijke pancreaskankercellen en de daaropvolgende monitoring van tumorgroei in vivo door echografie.

Generatie van een orthotopisch xenotransplantaat van pancreaskankercellen door echogeleide injectie

Het huidige protocol beschrijft hoogfrequente echografie voor het visualiseren van de gehele schildklier van de muis en het monitoren van de groei van anaplastisch schildkliercarcinoom.

Hoge-resolutie echografie voor de analyse van orthotopische ATC-tumoren in een genetisch gemanipuleerd muismodel

We presenteren een protocol voor de chirurgische implantatie van een gestabiliseerd inwonend optisch venster voor subcellulaire beeldvorming van de alvleesklier van muizen, waardoor seriële en longitudinale studies van de gezonde en zieke alvleesklier mogelijk zijn.

Gestabiliseerd venster voor intravitale beeldvorming van de alvleesklier van muizen

Dit protocol gebruikt een meerkamerbed voor parallelle magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) van maximaal vier dieren om pancreasadenocarcinoomtumoren te detecteren in genetisch gemodificeerde muismodellen. Dit multianimal MRI-protocol is snel en kosteneffectief voor het opsporen en meten van tumoren, wat de dierselectie voor preklinische studies en longitudinale monitoring van tumorgroei vergemakkelijkt.

Multianimal Magnetic Resonance Imaging voor tumormetingen in alvleesklierkanker muismodellen

Leer hoe je hoogresolutie-echografie gebruikt voor het detecteren en evalueren van endogene alvleeskliertumoren in het KPC-muismodel. Deze methode maakt nauwkeurige monitoring van tumorontwikkeling en groeikinetiek mogelijk.

Met behulp van hoge resolutie echografie naar Monitor Tumor ontstaan en groei in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker modellen (Video) | JoVE Journal

Met behulp van hoge resolutie echografie naar Monitor Tumor ontstaan en groei in genetisch gemanipuleerde alvleesklierkanker modellen

Meer video's verkennen