Name: Implantatie van Electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een Rat-Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: Leer het implanteren van electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een ratmodel. Deze methode evalueert de in vivo prestaties van polycaprolacton-transplantaten voor vasculaire regeneratie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd financieel ondersteund door NSFC projecten (81522023, 81530059, 91639113, 81772000, 81371699 en 81401534).

Het gebruik van proefdieren werd goedgekeurd door het dier experimenten ethisch comité van Nankai Universiteit en uitgevoerd in overeenstemming met de gids voor zorg en gebruiken van proefdieren.
1. fabricage van Electrospun PCL transplantaten
Opmerking: Hierin een electrospinning techniek werd gebruikt om het fabriceren van vaattransplantaten.
<ol><li>PCL-oplossingen van 25 wt % en 10% van de wt, bereiden door PCL in een mengsel van methanol en chloroform, respectievelijk ontbinding (1:5 volumeverhouding), bij kamertemperatuur (RT) voor 12u.</li>
	<li>Laad de PCL-oplossing in een glas 10 mL spuit.</li>
	<li>Plaats de injectiespuit met een naald 21-G.</li>
	<li>Plaats de as van roestvrij staal (2 mm in diameter en 25 cm in lengte) op het instrument van de collectie.</li>
	<li>Voor dikkere-vezel transplantaten, gebruiken de PCL-oplossing van 25% van de wt, de afstand van 17 cm vanaf de naald tip om verzamelaar, debiet van 8 mL/h, en spanning van 11 kV als de parameters van de electrospinning. Voor dunner-vezel transplantaten, gebruik de PCL-oplossing van 10% van de wt, afstand van 20 cm vanaf de naald tip aan verzamelaar, een debiet van 2 mL/h en spanning van 18 kV als de parameters van de electrospinning.</li>
	<li>Ervoor zorgen dat de verkregen transplantaties zijn geplaatst in vacuüm 's nachts aan Verwijder het resterende oplosmiddel. Steriliseren van alle instrumenten vóór de ingreep en onderhouden van aseptische techniek in.</li>
	<li>Voorafgaand aan de implantatie, de protheses te ontsmetten door ze onder te dompelen in 10 mL van 75% ethanol voor 30 min en dan zij worden blootgesteld aan UV-licht 's nachts.</li>
	<li>Vezels en porie-grootte-metingen: Bereken de diameter van de gemiddelde vezel ImageJ softwarematig op basis van scanning elektronen microscopie (SEM) beelden.</li>
	<li>Mechanische testen van steigers:<ol>
<li>Snijd de tubulaire steigers in secties van de 3 mm in lengte met een scheermesje. Het meten van de dikte van steigers met behulp van een micrometer.</li>
		<li>Plaats de tubulaire steigers op een treksterkte-testen machine met een laadvermogen van 100 N.</li>
		<li>Klem de steigers met een 1 mm tussen klem afstand en pull lengterichting met een snelheid van 10 mm/min tot breuk. De treksterkte en de ultieme breukrek meten. Youngs modulus uit de eerste lineaire regio berekenen (tot 5% stam) van de spanning-spanning-curve.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. rat abdominale Aorta implantatie Model
Opmerking: Alle materialen en instrumenten die worden gebruikt in de chirurgie zijn steriel. Tijdens de operatie, door ervoor te zorgen dat de exploitant draagt een masker van gaas en steriele handschoenen om te voorkomen dat infecties. Verzekert de kamertemperatuur is bij 27-30 ° C om de dierlijke lichaamstemperatuur te houden. Volg lokale IACUC richtsnoeren met betrekking tot analgesie.
<ol><li>Gebruik mannelijke Sprague-Dawley ratten met een gewicht van 240-270 g als ontvangers van vasculaire prothese. Zorg ervoor dat de rat heeft gevast 24 uur voor de ingreep. De vasten ratten gedurende 24 uur wil leeg de uitwerpselen in het darmkanaal voldoende, aldus verbreden de exploitant van de horizon.</li>
	<li>Begrijpen van de rat rug nek en houd zijn hoofd naar beneden, de springe naald in de buikholte van de onderbuik invoegen. Het opwekken van de rat voor anesthesie met Chloraalhydraat (330 mg/kg) door een intraperitoneale injectie.</li>
	<li>Bevestigen voldoende afstomping door ervoor te zorgen dat de rat heeft ontspannen spieren en regelmatige ademhaling. Plaats de rat onder de operationele Microscoop in een liggende positie.</li>
	<li>Toepassing petrolatum ophthalmic dierenarts zalf op de ogen om te voorkomen dat droogte terwijl onder verdoving. Beheren antistolling (100 UI/kg) met fysiologische zoutoplossing EDTA-oplossing (50 UI/mL) door staart veneuze injectie voor de operatie.</li>
	<li>De vacht in de voorste buikwand met behulp van een scheermesje afscheren, en reinig de huid met behulp van jodiumoplossing en medische alcohol oplossing.</li>
	<li>Een middellijn laparotomie incisie uitvoeren met een chirurgische schaar en ervoor zorgen dat de incisie ongeveer 4-5 cm lang, en vervolgens bloot de buikholte.</li>
	<li>Intrekken en wikkel de darmen met gaas bevochtigd met zoutoplossing bij voorkeur.</li>
	<li>Ontleden van de abdominale aorta zorgvuldig.</li>
	<li>Identificeren en afbinden van alle kleine takken met 9-0 monofilamenten nylon hechtingen.</li>
	<li>Klem het geïsoleerde gedeelte (maximaal 1 cm in lengte) van de aorta met behulp van twee vasculaire klemmen. De aorta kan blijven geklemd voor 20-30 min.</li>
	<li>Transect van de abdominale aorta tussen twee klemmen de anastomotic sites maken met behulp van micro-schaar.</li>
	<li>De twee uiteinden van de aorta met behulp van EDTA saline (50 UI/mL) oplossing voor het verwijderen van de resterende bloed te spoelen.</li>
	<li>De adventitia met behulp van de micro-schaar afschilferen.</li>
	<li>Anastomose de prothese met 2 mm binnendiameter en 1 cm in de lengte van de rat abdominale aorta met een cijfer-van-8 hechtdraad patroon met 9-0 monofilamenten nylon hechtingen.</li>
	<li>Ten eerste, bouw van vier anastomoses volgens de volgorde van 9, 3, 12 en 6 uur posities op de proximale zijde, dan anastomose gesneden randen in 4 steken tussen twee hechtingen. Na het beëindigen van de proximale hechtdraad, suture de distale zijde door de dezelfde methode. Opmerking: Elke steek is vereist om ervoor te zorgen dat de inheemse kant iets is ingebed in de prothese.</li>
	<li>De distale klem zodat het bloed stromen naar de prothese te verwijderen en deze vervolgens verwijdert de proximale klem.</li>
	<li>Druk op de uiteinden van de hechtdraad om te stoppen met het bloeden met een steriel katoenen bal of een kleine gaas spons. Druk gedurende ongeveer 3 minuten, tot de hemostase.</li>
	<li>De darmen in de buikholte retourneren</li>
	<li>Spoel de buikholte met behulp van warme fysiologische zoutoplossing oplossing met gentamicine (320 U/mL).</li>
	<li>Naai op de buikwand met een 3-0 Nylon hechtdraad in de spieren en huid laag, respectievelijk.</li>
	<li>Plaats de rat in een kooi schoon en droog en zet een verwarming pad onder de kooi te handhaven van dierlijke lichaamstemperatuur; dan wacht op de rat om te herstellen van de verdoving. Wonen aan het dier totdat het voldoende bewustzijn te handhaven sternale lighouding heeft herwonnen.</li>
	<li>Nadat het terugkrijgt bewustzijn, zet u de rat in een enkele kooi met voedsel en water. Breng jodium op de wond om infecties te voorkomen na de operatie. Terug de rat naar het gezelschap van andere dieren tot het volledig herstelt.</li>
	<li>Euthanaseren ratten volgens institutionele richtsnoeren op vooraf bepaalde tijdstippen.</li>
</ol>

<ol><li>Coombs, K. E., Leonard, A. T., Rush, M. N., Santistevan, D. A., Hedberg-Dirk, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+effect+of+material+stiffness+on+valvular+interstitial+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Isolated effect of material stiffness on valvular interstitial cell differentiation.</a> J Biomed Mater Res A. 105 (1), 51-61 (2017).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sandwich+tubular+scaffold+derived+from+chitosan+for+blood+vessel+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering.</a> J Biomed Mater Res A. 77 (2), 277-284 (2006).</li>
<li>Thottappillil, N., Nair, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffolds+in+vascular+regeneration%3A+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22Vasc+Health+Risk+Manag%22%5BJournal%5D)">Scaffolds in vascular regeneration: current status.</a> Vasc Health Risk Manag. 11, 79-91 (2015).</li>
<li>Pektok, E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19029464">Degradation and healing characteristics of small-diameter poly (e-caprolactone) vascular grafts in the rat systemic arterial circulation.</a> Circulation. 118 (24), 2563-2570 (2008).</li>
<li>Innocente, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paclitaxel-eluting+biodegradable+synthetic+vascular+prostheses%3A+a+step+towards+reduction+of+neointima+formation%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Paclitaxel-eluting biodegradable synthetic vascular prostheses: a step towards reduction of neointima formation?</a> Circulation. 120 (11 Suppl), S37-S45 (2009).</li>
<li>de Valence, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+of+bilayered+vascular+grafts+for+surgical+applicability+and+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Advantages of bilayered vascular grafts for surgical applicability and tissue regeneration.</a> Acta Biomater. 8 (11), 3914-3920 (2012).</li>
<li>Assmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+autologous+in+vivo+recellularization+of+decellularized+aortic+conduits+by+fibronectin+surface+coating%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Acceleration of autologous in vivo recellularization of decellularized aortic conduits by fibronectin surface coating.</a> Biomaterials. 34 (25), 6015-6026 (2013).</li>
<li>Hasan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+scaffolds+for+tissue+engineering+of+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Electrospun scaffolds for tissue engineering of vascular grafts.</a> Acta Biomater. 10 (1), 11-25 (2014).</li>
<li>Baker, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+to+improve+cell+infiltration+in+composite+fiber-aligned+electrospun+scaffolds+by+the+selective+removal+of+sacrificial+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers.</a> Biomaterials. 29 (15), 2348-2358 (2008).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+of+macropores+in+electrospun+silk+fibroin+scaffolds+using+sacrificial+PEO-microparticles+to+enhance+cellular+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+A%22%5BJournal%5D)">Creation of macropores in electrospun silk fibroin scaffolds using sacrificial PEO-microparticles to enhance cellular infiltration.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101 (12), 3474-3481 (2013).</li>
<li>Lee, B. L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femtosecond+laser+ablation+enhances+cell+infiltration+into+three-dimensional+electrospun+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Femtosecond laser ablation enhances cell infiltration into three-dimensional electrospun scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 8 (7), 2648-2658 (2012).</li>
<li>Rnjak-Kovacina, J., Weiss, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+the+pore+size+of+electrospun+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Increasing the pore size of electrospun scaffolds.</a> Tissue Eng Part B Rev. 17 (5), 365-372 (2011).</li>
<li>Zhong, S., Zhang, Y., Lim, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+large+pores+in+electrospun+nanofibrous+scaffolds+for+cellular+infiltration%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Fabrication of large pores in electrospun nanofibrous scaffolds for cellular infiltration: a review.</a> Tissue Eng Part B Rev. 18 (2), 77-87 (2012).</li>
<li>Pham, Q. P., Sharma, U., Mikos, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+poly%28epsilon-caprolactone%29+microfiber+and+multilayer+nanofiber%2Fmicrofiber+scaffolds%3A+characterization+of+scaffolds+and+measurement+of+cellular+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Electrospun poly(epsilon-caprolactone) microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds: characterization of scaffolds and measurement of cellular infiltration.</a> Biomacromolecules. 7 (10), 2796-2805 (2006).</li>
<li>Rnjak-Kovacina, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tailoring+the+porosity+and+pore+size+of+electrospun+synthetic+human+elastin+scaffolds+for+dermal+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering.</a> Biomaterials. 32 (28), 6729-6736 (2011).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+thick+fibers+and+large+pores+of+electrospun+poly%28epsilon-caprolactone%29+vascular+grafts+on+macrophage+polarization+and+arterial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(epsilon-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration.</a> Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).</li>
<li>Hutcheson, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genesis+and+growth+of+extracellular-vesicle-derived+microcalcification+in+atherosclerotic+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Genesis and growth of extracellular-vesicle-derived microcalcification in atherosclerotic plaques.</a> Nat Mater. 15 (3), 335-343 (2016).</li>
<li>Tara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Well-organized+neointima+of+large-pore+poly%28L-lactic+acid%29+vascular+graft+coated+with+poly%28L-lactic-co-epsilon-caprolactone%29+prevents+calcific+deposition+compared+to+small-pore+electrospun+poly%28L-lactic+acid%29+graft+in+a+mouse+aortic+implantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Well-organized neointima of large-pore poly(L-lactic acid) vascular graft coated with poly(L-lactic-co-epsilon-caprolactone) prevents calcific deposition compared to small-pore electrospun poly(L-lactic acid) graft in a mouse aortic implantation model.</a> Atherosclerosis. 237 (2), 684-691 (2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen tegenstrijdige belangen.

Cel infiltratie is kritisch voor de regeneratie en remodelleert van de vasculaire graft in vivo16. Beperkte cel infiltratie is vaak gerelateerd aan de relatief kleine poriën van de prothese, die een belemmering vormen voor de migratie van de cellen in de wand van de prothese. Om aan te pakken dit probleem, we een gewijzigde methode ontwikkeld om electrospun PCL vaattransplantaten met grote-poriënstructuur bereiden. In detail, de poriegrootte toegenomen met de toename van de dikte van de v...

Vaattransplantaten gemaakt van synthetische polymeren worden algemeen gebruikt in de kliniek voor de behandeling van cardiovasculaire aandoeningen (CVDs). Helaas, in het geval van kleine diameter vaattransplantaten (D < 6 mm) er zijn geen succesvolle producten beschikbaar vanwege de lage bij veroorzaakt door verminderde bloed stroomsnelheid, die vaak tot trombose, intima hyperplasie en andere leidt complicaties1.
Weefselengineering biedt een alternatieve strategie te realiseren op lange termijn bij en homeostase op basis van een steiger geleide vasculaire regeneratie en wederopbouw. In detail, de vasculaire prothese, als een driedimensionale sjabloon, kon bieden mechanische ondersteuning en structurele begeleiding tijdens de regeneratie van vaatweefsel en invloed cellulaire functies, met inbegrip van cel adhesie, migratie, proliferatie, en secretie van extracellulaire matrix2. Tot nu toe zijn verschillende synthetische polymeren geëvalueerd voor toepassingen in vaatweefsel engineering. Onder deze polymeren, is poly(ε-caprolactone) (PCL) intensief onderzocht vanwege goede cel compatibiliteit en langzame afbraak, variërend van enkele maanden tot twee jaar3. In een rat aorta model4,5,6, PCL vaattransplantaten verwerkt door electrospinning tentoongesteld uitstekende structurele integriteit en bij, zo goed als continu verhoogde cel invasie en neovascularization in de Graft muur voor maximaal 6 maanden. Echter nadelige weefsel remodeling, met inbegrip van regressie van cellen en de haarvaten en verkalking, werden ook waargenomen bij langere timepoints, omhoog tot 18 maanden.
Cellularization van de vasculaire prothese is een sleutelfactor bepalen Weefselregeneratie en omvorming van7. Electrospinning, heeft als een veelzijdige techniek, grote schaal gewerkt voor de bereiding van vaattransplantaten met nano-vezelige structuur8. Helaas, de relatief kleine poriënstructuur leidt vaak tot onvoldoende cel infiltratie in de electrospun vasculaire prothese, waardoor de latere weefselregeneratie wordt beperkt. U kunt dit probleem oplossen, zijn diverse technieken geprobeerd poriegrootte en algehele porositeit, met inbegrip van het zout/polymeer uitloging9,10, wijziging van verzamelaar apparaten, nabehandeling door laserstraling11 te verhogen , enz. In feite, is de structuur van electrospun transplantaties (met inbegrip van de diameter van de vezel, poriegrootte en porositeit) nauw verwant aan de verwerking voorwaarden12,13. Tijdens electrospinning, kan de diameter van de vezels gemakkelijk worden gecontroleerd door het veranderen van de parameters, zoals de concentratie van de polymeeroplossing, debiet, spanning, etc. 14 , 15, en dus de poriën en porositeit dienovereenkomstig zijn verbeterd.
Onlangs meldden wij een gemodificeerde PCL electrospun transplantaat met macroporeuze structuur (vezels met diameter van 5-7 µm en poriën van 30-40 µm). In vivo implantatie door vervanging van de abdominale aorta rat toonde hoge tarief van bij, evenals de goede endothelialization en gladde spieren regeneratie op 3 maanden na operatie16. Wat nog belangrijker is, kon geen negatieve weefsel remodeling met inbegrip van verkalking en cel regressie worden waargenomen zelfs na een jaar van implantatie.

<table><tbody><tr><td>Poly(&epsilon;-caprolactone) (PCL) pellets (Mn=80.000)</td><td>Sigma</td><td>704067</td><td></td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>1060</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>1083</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>A1007</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Tianjin Fengchuan Company</td><td>2296</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Alfa Aesar</td><td>A16046</td><td></td></tr><tr><td>Sprague Dawley-ratten</td><td>Laboratory Animal Center of the Academy of Military Medical Sciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Normale zoutoplossing</td><td>Hebei Tiancheng Pharmaceutical company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chloraalhydraat</td><td>Tianjin Ruijinte chemical company</td><td>2223</td><td></td></tr><tr><td>Heparine-natriuminjectie</td><td>Tianjin Biochem Pharmaceutical company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gentamicinesulfaatinjectie</td><td>Jiangsu Lianshui Pharmaceutical company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Muis anti-&alpha;-SMA primaire antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab7817</td><td></td></tr><tr><td>Muis anti-smooth MYH primaire antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab683</td><td></td></tr><tr><td>Konijn polyklonaal anti-ratten-elastine-antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab23748</td><td></td></tr><tr><td>Konijn anti-von Willebrand-factor primaire antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab6994</td><td></td></tr><tr><td>Geit anti-muis IgG (Alexa Fluor 488)</td><td>Invitrogen</td><td>ab150117</td><td></td></tr><tr><td>Geit anti-konijn IgG (Alexa Fluor 488)</td><td>Invitrogen</td><td>ab150077</td><td></td></tr><tr><td>5% normaal geitenserum</td><td>Zhongshan Golden bridge</td><td>ZLI9022</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxyline en eosine (H&amp;E)</td><td>Beijing leagene biotech</td><td>DH0006</td><td></td></tr><tr><td>Masson's trichrome</td><td>Beijing leagene biotech</td><td>DC0032</td><td></td></tr><tr><td>Verhoeff-van Gieson (VVG)</td><td>Beijing leagene biotech</td><td>DC0059</td><td></td></tr><tr><td>Von Kossa</td><td>Beijing leagene biotech</td><td>DS0003</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische hechtnaalden met draad, 3-0 zijde</td><td>Shanghai Jinhuan medical supplies company</td><td>G3002b</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische hechtnaalden met draad, 9-0 zijde</td><td>Shanghai Jinhuan medical supplies company</td><td>H901</td><td></td></tr></tbody></table>

implantatie van electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een rat-model

Implantation of Electrospun Vascular Grafts with Optimized Structure in a Rat Model

Hier presenteren we een protocol om te fabriceren macroporeuze PCL-vasculaire graft en beschrijven van een evaluatie-protocol met behulp van een model van de rat van vervanging van de abdominale aorta. De electrospun vaattransplantaten bezitten vaak relatief kleine poriën, die beperken cel infiltratie in de transplantaties en de regeneratie en verbouwing van de neo-aders belemmeren. In deze studie werden PCL vaattransplantaten met dikkere vezels (5-6 µm) en grotere poriën (~ 30 µm) vervaardigd met behulp van een gemodificeerde gegevensverwerking. De prestaties op lange termijn van de prothese werd beoordeeld door de inplanting in een rat abdominale aorta-model. Echografie-analyse toonde aan dat de transplantaten bleef octrooi zonder aneurysma of stenose die zelfs na 12 maanden innesteling intreedt. Macroporeuze structuur verbeterd de cel ingroei en dus bevorderd weefsel geregenereerd op 3 maanden. Wat nog belangrijker is, was er geen teken van nadelige Remodellerend, zoals verkalking binnen de stadsmuur van het transplantaat na 12 maanden. Daarom houdt electrospun PCL vaattransplantaten met gemodificeerde macroporeuze verwerking potentieel als een slagader substituut voor lange termijn implantatie.

De PCL-transplantaties waren transplanteren op 3 maanden en 12 maanden post-operatively en geanalyseerd door histologische standaardtechnieken voor haematoxyline en eosine (H & E), Masson trichrome, Verhoeff-van Gieson (VVG), Von Kossa en immunofluorescentie kleuring voor α-SMA, MYH, vWF en elastine. De histologische beelden werden genomen met behulp van een rechtop Microscoop, en de immunofluorescentie beelden werden genomen met behulp van een microscoop met ﬂuorescence.
<p class="jo...

Hier presenteren we een gewijzigde electrospinning methode voor het fabriceren van PCL vaattransplantaten met dikke vezels en grote poriën en een protocol ter evaluatie van de prestaties in vivo in rat model van abdominale aorta vervanging beschrijven.

Implantatie van Electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een Rat-Model

Here, we present a protocol to fabricate macroporous PCL vascular graft and describe an evaluation protocol by using a rat model of abdominal aorta ...

Het algemene doel van deze chirurgische ingreep is om een elektrogesponnen vasculair implantaat in de buikslagader van een rat te transplanteren en de langetermijnprestaties van het implantaat te evalueren. Deze methode is ontwikkeld door professor Deling Kong en andere collega's in onze groep en kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de studie van elektrogesponnen vasculaire implantaten, zoals het effect van structuur en de oppervlakte-eigenschappen van het implantaat op de vasculaire regeneratie. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat deze goede herhaalbaarheid heeft en een hoge overlevingskans bij dieren.Bovendien is het diermodel gemakkelijk te beheren tegen lage kosten. Dit werk zal worden uitgevoerd door onze collega, doctor Wang. Om te beginnen, bereid de polymeeroplossing voor door polycaprolacton op te lossen in een 1-op-5 mengsel van methanol en chloroform, en roer het 12 uur bij kamertemperatuur.Laad de polymeeroplossing in een glasinjectiespuit van 10 milliliter en voorzie deze van een stompe naald van 21 gauge. Plaats vervolgens een roestvrijstalen mandrel op het opvanginstrument en zorg ervoor dat deze goed geaard is. Pas de werkafstand

implantation-electrospun-vascular-grafts-with-optimized-structure-rat

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

We beschrijven hier een cardiale chirurgische ingreep om weefsel ontwikkeld implantaat in de atrioventriculaire (AV)-groove van een volwassene Lewis rat.

Implantatie van Engineered Tissue in het Rat Hart

Om onze kennis van cellulaire en moleculaire neotissue vorming te verbeteren, werd een muizenmodel van het TEVG recent ontwikkelde. De transplantaten werden geïmplanteerd infrarenale vena cava tussenvoeging enten in C57BL / 6 muizen. Dit model behaalt dezelfde resultaten als die bereikt bij onze klinische onderzoek, maar over een veel kortere tijd-cursus.

Implantatie van de vena cava inferior Interpositie Graft in muismodel

Een stap-voor-stap protocol voor de inter-positionele plaatsing van weefselengineering Vessels (Tevs) in de halsslagader van een schaap met end-to-end anastomose en real-time digitale evaluatie in vivo tot dierenoffers.

Chirurgische techniek voor de inplanting van Tissue Engineered vaattransplantaten en de daaropvolgende<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoring

Hier presenteren we een protocol om tissue engineered vaartuig enten die functioneel zijn voor het enten in muizen door dubbel zaaien gedeeltelijk geïnduceerde pluripotente stamcellen genereren (PiPSC) - afgeleide gladde spiercellen en PiPSC - afgeleide endotheelcellen op een gedecellulariseerde schip steiger bioreactor.

Generatie en enten van-Weefselmanipulatieproducten Schepen in een muismodel

Diermodellen zijn belangrijke hulpmiddelen voor de evaluatie van door weefseltechniek ontwikkelde grafts. Dit artikel presenteert het protocol voor het bereiden van een elektrospunnend biologisch afbreekbaar polymeer graft voor gebruik in weefseltechniek van het voorste kruisband, evenals een chirurgisch protocol voor implantatie in een rattenmodel.

Athymische Rat Model voor de Evaluatie van Engineered voorste kruisband Grafts

We beschrijven een microchirurgische benadering voor het genereren van een arterioveneuze (AV) -lus als model voor het analyseren van vascularisatie in vivo in een geïsoleerd en goed gekarakteriseerd omgeving. Dit model is niet alleen nuttig voor het onderzoek naar angiogenese, maar ook optimaal geschikt voor engineering axiaal gevasculariseerd en transplantable weefsels.

De arterioveneuze (AV) Loop in een klein proefdiermodel voor Angiogenese en Gevasculariseerd Tissue Engineering Studie

Deze video demonstreert een model om de ontwikkeling van myointimale hyperplasie na veneuze interpositiechirurgie bij ratten te bestuderen.

Vein Interpositie Model: Een geschikt model om te studeren Bypass Graft Patency

Slokdarmreconstructie is een uitdagende procedure, en de ontwikkeling van een weefsel-engineered slokdarm die regeneratie van slokdarmslijmvlies en spier mogelijk maakt en die kan worden geïmplanteerd als een kunstmatige graft is noodzakelijk. Hier presenteren we ons protocol om een kunstmatige slokdarm te genereren, inclusief steigerproductie, bioreactorteelt en verschillende chirurgische technieken.

Tissue-Engineered Graft voor circumferential slokdarmreconstructie bij ratten

Dit werk presenteert een diermodel van endotheliale-naar-mesenchymale overgangsgeïnduceerde fibrose, zoals te zien is bij aangeboren hartafwijkingen zoals kritieke aortastenose of hypoplastisch linkerhartsyndroom, wat gedetailleerde histologische weefselevaluatie, de identificatie van regulerende signaalroutes en het testen van behandelingsopties mogelijk maakt.

Een neonataal heterotopisch rattenharttransplantatiemodel voor de studie van endotheel-naar-mesenchymale overgang

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor de implantatie van een weefselgemanipuleerd vasculair transplantaat in de halsslagader van de muis met behulp van de manchettechniek, waardoor een geschikt diermodel wordt geboden voor het onderzoeken van mechanismen voor de regeneratie van vasculair weefsel.

Implantatie van weefselgemanipuleerd vasculair transplantaat in de halsslagader van muizen via manchettechniek

Deze studie presenteert een varkensmodel voor het evalueren van transplantaten met een kleine diameter in dijbeenslagaders. Het model bootst de menselijke vasculaire dynamiek na en beoordeelt uitgebreid de doorgankelijkheid van het transplantaat, de hemodynamica en de vasculaire remodellering. Het biedt een waardevol platform voor het testen van vasculaire transplantaten en het monitoren ervan met Doppler-echografie en angiografie.

Implantatie van een femurvasculair transplantaat in een varkensmodel om vasculaire transplantaten met een kleine diameter te testen

Leer het implanteren van electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een ratmodel. Deze methode evalueert de in vivo prestaties van polycaprolacton-transplantaten voor vasculaire regeneratie.

Implantatie van Electrospun vaattransplantaten met geoptimaliseerde structuur in een Rat-Model

Meer video's verkennen