Name: Een gesloten-borst-Model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Leer een minimaal invasieve transversale aortaconstrictie uitvoeren bij muizen met intacte ribbenkast. Deze methode induceert linker ventrikelhypertrofie met verminderde ontstekingsreactie voor cardiovasculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wij danken Stilla Frede en Susanne Schulz voor hun technische bijstand. Deze studie ontvangen geen financiering.

Dit protocol is goedgekeurd door de ethische commissie voor dier experimenten LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374). Deze procedure is in het algemeen uitgevoerd op volwassen muizen > 10 weken oud. Het is echter mogelijk voor het uitvoeren van deze ingreep op jongere dieren ook. Chirurgische hulpmiddelen vóór gebruik gesteriliseerd moeten worden, en alle stappen moeten worden uitgevoerd onder aseptische condities.
1. de inductie van de anesthesie en intubatie
<ol><li>Injecteren van buprenorfine 0,1 µg/g lichaamsgewicht intraperitoneally voor verlichting van pijn. Herhaal de intraperitoneaal injecties van 0,1 mg/kg buprenorfine elke 8 h voor de komende drie dagen na de operatie.</li>
	<li>Voor inductie, plaatst u de muisaanwijzer in een verdoving inductie vak die is aangesloten op de vaporizer ingesteld op 3.0 Vol % van Isofluraan met een zuurstof-stroom van 1 L/min.</li>
	<li>Zorgen voor diepe versuffing door inducerende een tactiele prikkel. Opmerking: Verhoging Vol % van Isofluraan tot 5%, als inductie van de anesthesie mislukt of versuffing niet diep genoeg is.</li>
	<li>Knijp de staart van de muis om reflex ontbreken. In geval van volledige afwezigheid van reflexen, wegen de muis voor optimale ventilator setup (zie 1.12).</li>
	<li>Verplaats de muis naar een temperatuurgevoelig operatietafel te handhaven een lichaamstemperatuur van 37 ° C gedurende de hele procedure.</li>
	<li>Plaats de neus van de muis in een kunststof kegel die is aangesloten op het vak inductie anesthesie te handhaven versuffing.</li>
	<li>Fix de bovenste snijtanden van de muis met een nylon hechtdraad. De uiteinden met een plakband fixeren.</li>
	<li>Oefen druk uit op de achterste poot met het topje van de verlostang om een voldoende versuffing opnieuw. Bij gebrek aan een terugtrekking reflex gaat u verder met de volgende stappen. Opmerking: Verhogen van volume % van Isofluraan als inductie van de anesthesie mislukt of versuffing niet diep genoeg is en wacht op het ontbreken van de terugtrekking reflex.</li>
	<li>Plaats steriele ophthalmic glijmiddel op het hoornvlies ter voorkoming van uitdroging onder verdoving.</li>
	<li>Smeer de rectale sonde Voorkom rectale trauma. Invoegen van een rectale temperatuursonde om ervoor te zorgen een inwendige temperatuur van 37 ° C.</li>
	<li>Ontharen van de keel en de borst met ontharende room volgens de instructies van de fabrikant. Veeg de room na 1 min. Indien nodig, herhaal deze stap totdat succesvol. Opmerking: Gebruik katoen-tipped swabs in geval van bloeden.</li>
	<li>Reinig de depilated gebied met 70% ethanol. Vervolgens toepassen Povidon-jodium voor lokale huid desinfecteren 3 keer en voor ten minste 3 min.</li>
	<li>Ventilator instellingen fysiologische parameters aanpassen. Stelt het respiratoire tarief tot 150/min en tidal volumes tot 8-10 µL/g lichaamsgewicht (BW).</li>
	<li>Zet op een nieuw paar steriele handschoenen. Plaatst u de muisaanwijzer onder een chirurgische Microscoop en plaats een steriele fenêtré draperen over de muis.</li>
	<li>Incise van de huid op de middellijn van ongeveer 3 mm onder de mandibulaire tot de boordsteek 2nd . Middellijn en bindweefsel van de submandibulaire klier te identificeren. Vervolgens kunt schuine intracapsular pincet voorzichtig de klier op de middellijn ronduit verdelen met twee pincet en verkennen de tracheale spier.</li>
	<li>Bereid de luchtpijp zachtjes door de para-tracheale spieren botweg uit elkaar trekken met een intracapsular Tang.</li>
	<li>Trek op de tong met een tang strek de keel gemakkelijker intubatie voorwaarden en zachtjes invoegen een intubatiecanule (OD 1.2 mm) binnen de luchtpijp. Bevestig de intubatie door rechtstreekse visualisatie van de buis in de luchtpijp en door het zoeken van de juiste borst beweging.</li>
	<li>Pas de Isofluraan na intubatie aan 2% Isofluraan met een stroom van 1,0 L/min en 100% O2. Opmerking: Als ademhaling bewegingen niet stoppen of muizen gaan bewegen, eerst de hogere luchtwegen waarde tot 180/min. Indien nodig, verhogen de concentratie Isofluraan maximaal 3,5% subsidiair totdat de muis stopt met ademhalen op zijn eigen. Lekkages of onvoldoende vulling van de vaporizer hebben worden geëvalueerd als de meest voorkomende problemen.</li>
	<li>Als alternatief, intubatie zoals voorgesteld in de volgende sub-procedure uitvoeren<ol>
<li>Plaats de muis op een tafel in een hoek van 60°.</li>
		<li>De uiteinden van de muis met plakband fixeren en rusten van het hoofd.</li>
		<li>Plaats een koude-lichtbron rechtstreeks op de huid boven het strottenhoofd.</li>
		<li>Trek voorzichtig de tong met een tang om te visualiseren van de stembanden.</li>
		<li>Invoegen van een plastic buis van een IV-canule (24 G) door middel van de stembanden en sluit de plastic buis aan de ventilator-instellingen.</li>
		<li>De ventilator sluit aan op de canule intubatie bevestigen door synchrone borst bewegingen. Opmerking: Als ademhaling bewegingen niet stoppen of muizen gaan bewegen, eerst de hogere luchtwegen waarde tot 180 per min. Indien nodig vergroten subsidiair de Isofluraan concentratie maximaal 3,5% totdat de muis stopt met ademhalen op eigen Lekkages of onvoldoende vulling van de vaporizer hebben worden geëvalueerd als de meest waarschijnlijke problemen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. preoperatieve Doppler meting
<ol><li>Bereiden van beide halsslagaderen welke lag aanvulling op de luchtpijp door zachtjes trekken het bindweefsel uit elkaar met een tang.</li>
	<li>Plaats het uiteinde van de 20 MHz Doppler sonde met sommige steriele ultrageluid-gel op het recht en de linker halsslagader op een hoek van minder dan 45°.</li>
	<li>Langzaam draaien de sonde om het laterale en mediale te vinden een Doppler signaal en kantelen van de sonde voor het optimaliseren van het signaal te verplaatsen.</li>
	<li>Een Doppler software gebruiken voor het weergeven en opslaan van stroomsnelheden in de linker- en gemeenschappelijk halsslagaderen op een computer.</li>
</ol>3. Thoracotomie
<ol><li>Een set van steriele handschoenen voor elke individuele muis gebruiken om chirurgische site infecties te voorkomen.</li>
	<li>Vouw de huid incisie tot de 2nd intercostale ruimte met een schaar.</li>
	<li>De 2nd intercostale ruimte visueel identificeren door het tellen van de ribben en dan ronduit het doordringen van deze ruimte met een intracapsular Tang. Opmerking: De 1st rib bevindt zich onder het sleutelbeen en is daarom niet zichtbaar omdat de 2nd intercostale ruimte is gevonden tussen eerste zichtbaar rib (dat wil zeggen 2nd rib) en de 3rd rib.</li>
	<li>Open de 2nd intercostale ruimte met behulp van een verlostang tips en plaats van de oprolmechanismen.</li>
	<li>Pas de oprolmechanismen met een elastiekje dat is aangesloten op de operatietafel te hebben een duidelijk beeld van de thymus.</li>
	<li>In het geval van het bloeden een katoen-tip gebruikt en druk op de oppervlakkige vaten gedurende 2 minuten.</li>
</ol>4. "banding" van de dwarse Aorta
<ol><li>Pas de vergroting tot 200% om middellijn en bindweefsel te identificeren. Vervolgens kunt schuine pincet voorzichtig verdelen de thymus. Verwijderen vetweefsel totdat de aortaboog duidelijk kan worden gezien.</li>
	<li>Bereiden een tunnel met schuin koppelverkoop pincet onder de dwarse aorta tussen de slagader van de brachiocephalic en de linker gemeenschappelijke halsslagader (Zie Figuur 1). Houd het uiteinde van een 6.0 hechtdraad met behulp van fijne pincet en passeren van de draad onder de aortaboog.</li>
	<li>Neem de draad met de tweede verlostang vanaf de andere kant van de boog.</li>
	<li>Afgesneden van de lengte van een 3 mm lang stuk van een 27 G te gebruiken de naald als een de spacer voor TAC-afbinding voor muizen met een gewicht tussen 19-25 g lichaamsgewicht en een 26 G naald als een spacer voor muizen > 25 g BW.</li>
	<li>Zorgvuldig plaatst het tussenstuk parallel aan de dwarse aorta.</li>
	<li>Bereiden van een losse dubbele knoop op de spacer en zorgen voor optimale plaatsing van de spacer parallel aan de aorta. Vervolgens binden de eerste worp en snel uit te voeren een tweede strijd gooien. Verwijder het tussenstuk onmiddellijk.</li>
	<li>Voer uit sham muizen voor controle, om hetzelfde protocol weglaten van de afbinding van de aorta.</li>
	<li>Sluit de 2nd intercostale ruimte met een 6.0 polypropyleen hechtdraad. Speciale aandacht besteden aan de subclavian schepen als ligating.</li>
	<li>Sutuur (geologie) de huid met behulp van een 6.0 polypropyleen hechtdraad in een patroon van voortdurende hechtdraad.</li>
</ol>5. bevestiging van de succesvolle Afbinding van de dwarse Aorta
<ol><li>Plaats een 20 MHz Doppler sonde aan beide zijden van de nek op een hoek van 45° zoals in deel 2.</li>
	<li>Het document van de stroomsnelheden aan elke kant. Opmerking: Een succesvolle TAC kan worden gevalideerd door Doppler stroomsnelheid zoals afgebeeld in Figuur 2. Een stroom snelheid verhouding van 4-10 tussen de rechter en linker halsslagader meestal garandeert voldoende TAC (Zie Figuur 2).</li>
</ol>6. hart oogst
<ol><li>Induceren versuffing volgens stappen 1.2. en 1.3.</li>
	<li>Plaatst u de muisaanwijzer in een zaal van euthanasie en aanpassen van het debiet van de kooldioxide te verdrijven van 10-30% van de volume/minuut.</li>
	<li>Het fixeren van de muis op een operatie tafel. Open de buik met schaar en oogst bloed van de vena cava inferior met een canule voor verdere analyse.</li>
	<li>Snijd het middenrif en de sternale bot met een sterke schaar en verwijder het hart.</li>
	<li>Verwijder alle arterial en bindweefsel voordat het wegen van het hart.</li>
	<li>Scheiden het rechterventrikel en het tussenschot van het linkerventrikel en wegen van beide monsters.</li>
	<li>Het bevriezen van beide weefselmonsters in vloeibare stikstof.</li>
</ol>

<ol><li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol+Clifton+NJ%22%5BJournal%5D)">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods Mol Biol Clifton NJ. 573, 115-137 (2009).</li>
<li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp+JoVE%22%5BJournal%5D)">Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> J Vis Exp JoVE. (38), (2010).</li>
<li>Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wall+stress+and+patterns+of+hypertrophy+in+the+human+left+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle.</a> J Clin Invest. 56 (1), 56-64 (1975).</li>
<li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffet, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).</li>
<li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulsed+Doppler+signal+processing+for+use+in+mice%3A+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Pulsed Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans Biomed Eng. 52 (10), 1771-1783 (2005).</li>
<li>Shioura, K. M., Geenen, D. L., Goldspink, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+function+with+the+pressure-volume+conductance+system+following+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+-+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac function with the pressure-volume conductance system following myocardial infarction in mice.</a> Am J Physiol - Heart Circ Physiol. 293 (5), H2870-H2877 (2007).</li>
<li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+Catheterization+in+Mice+to+Measure+the+Pressure+Volume+Relationship%3A+Investigating+the+Bowditch+Effect%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE+J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect.</a> JoVE J Vis Exp. (100), e52618(2015).</li>
<li>Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+response+to+pressure+overload+in+129S1%2FSvImJ+and+C57BL%2F6J+mice%3A+temporal-+and+background-dependent+development+of+concentric+left+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 292 (5), H2119-H2130 (2007).</li>
<li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).</li>
<li>Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp+JoVE%22%5BJournal%5D)">Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> J Vis Exp JoVE. (121), (2017).</li>
<li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice+for+Induction+of+Left+Ventricular+Hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy.</a> J Vis Exp. (127), (2017).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., Baumgarten, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Murine+Closed-chest+Model+of+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp+JoVE%22%5BJournal%5D)">A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion.</a> J Vis Exp JoVE. (65), (2012).</li>
<li>Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+ventilation+of+isolated+mouse+lungs+on+surfactant+and+inflammatory+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines.</a> Eur Respir J. 17 (3), 488-494 (2001).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het snelle begin van hypertensie als gevolg van de TAC verschilt van klinisch relevante hypertrofie veroorzaakt door aorta stenose of hypertensie. Echter het gebruik van kleine dierlijke modellen voor het opwekken van hartfalen heeft vele voordelen en is, daarom, gekozen door veel onderzoekers11. Deze gesloten borst-model verbetert de reeds bestaande modellen van de chirurgische techniek voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen4.
<p class="jove_cont...

Muismodellen worden vaak gebruikt om na te bootsen van ziekten bij de mens1. Transversale aorta vernauwing (TAC) wordt gebruikt voor het opwekken van druk overbelasting en links ventriculaire hypertrofie2. Het open-borst TAC model in muizen werd gevalideerd door Rockman et al. 3 en de chirurgische ingreep is in detail beschreven door DeAlmeida et al. 4. Banding van de dwarse aorta is gunstiger in vergelijking met abdominale aorta vernauwing omdat een groter deel van het verkeer kan negatieve effecten van deze laatste procedure2compenseren.
De strepen van de dwarse aorta leidt tot een verhoogde arteriële druk in de aorta en de oplopende brachiocephalic slagader maar voldoende perfusie van de organen verlaat via de distale schepen (dat wil zeggen de linker gemeenschappelijke halsslagader, de linker subclavian slagader en aflopende aorta). Dit leidt tot een verhoogde cardiale afterload en een verhoogde cardiale muur stress. De muur stress vermindert vervolgens als gevolg van de vezel verdikking5. De chronische verandering in de cardiale hemodynamiek resulteert in maladaptation en maagdilatatie van het linkerventrikel. Op deze manier de TAC creëert een reproduceerbare model voor hypertrofie van het hart uiteindelijk zal leiden tot hartfalen.
De standaardprocedure voor TAC zoals beschreven door DeAlmeide et al. 4 benadert de aortaboog via een gedeeltelijke bovenste Thoracotomie via dissectie van de ribben of het borstbeen en het invoeren van het mediastinum evenals de pleurale holte. Dit zorgt voor een goede weergave van de aortaboog en de zij-takken. Helaas kunnen niet de ontleed ribben worden reattached, die laat ze vrij zwevende en waardoor het wijzigen van de dynamiek van de ademhaling.
Wij derhalve vastgesteld een minimaal invasieve benadering gesloten-borst van de aortaboog met behulp van een laterale chirurgische aanpak via de 2nd intercostale ruimte. Het grootste voordeel van dit model is de mogelijkheid voor het uitvoeren van TAC zonder zelfs doorsnijden de ribben. Het chirurgisch trauma is beperkt tot de insnijding van de huid en de dissectie van de intercostale spieren. Deze procedure minimaliseert het trauma zelf en helpt om voldoende borst stabiliteit te handhaven.
Hier beschrijven we een stapsgewijze procedure voor het uitvoeren van TAC chirurgie in muizen zonder het uitvoeren van het totaal of de bovenste Thoracotomie. Hoge frequentie Doppler werd gebruikt om dat het succes van TAC 6,7zoals hiervoor is beschreven.

<table><tbody><tr><td>Druk-volumekatheter</td><td>Millar Instruments, USA</td><td>SPR-839</td><td></td></tr><tr><td>Muisventilator</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Minivent - TYPE 845</td><td></td></tr><tr><td>Muisventilator</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Y-aansluiting met intubatiecanule OD 1,2mm 73-2844</td><td></td></tr><tr><td>Verdamper</td><td>Dr&auml;ger Medical AG&amp;CO.KG, Germany</td><td>19.3 Isofluran-Verdamper (een nieuwere versie is beschikbaar onder catalogusnummer&nbsp; D-877-2010)</td><td></td></tr><tr><td>Microscoop&nbsp;</td><td>Leica Microsystems, Germany</td><td>MZ 7.5</td><td></td></tr><tr><td>Lichtbron&nbsp;</td><td>Schott AG, Germany</td><td>KL 1500 LCD</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Prolene</td><td>Ethicon, USA</td><td>Polypropyleennaald BV-1 9,3 mm 3/8c</td><td>naald voor chirurgie</td></tr><tr><td>Seraflex</td><td>Serag Wiessner, Germany</td><td>USP 5/0 schwarz;&nbsp; IC108000&nbsp;</td><td>naald voor vernauwing</td></tr><tr><td>Homoeotherme gecontroleerde operatietafels</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Type 872/3 HT met driepootstandaard en homoeotherme controller Type 874; 73-4233</td><td></td></tr><tr><td>Flexibele rectale sonde</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>1,6 mm OD; 55-7021</td><td></td></tr><tr><td>Doppler Signaalvisualisatie Instrument</td><td>Indus Instruments, USA</td><td>Doppler Signaalverwerkingswerkstation (DSWP) met 20MHz Gepulseerde Doppler Module</td><td></td></tr><tr><td>Arruga Intracapsulaire Pincetten</td><td>Altomed, UK</td><td>A5400</td><td></td></tr><tr><td>Doppler Sonde</td><td>Indus Instruments, USA</td><td>20MHz Buismaat Sonde</td><td></td></tr><tr><td>Jaffe Ooglid Retractor</td><td>Altomed, UK</td><td>A3513</td><td></td></tr></tbody></table>

een gesloten-borst-model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Onderzoek op hypertrofie van het hart en hartfalen is vaak gebaseerd op druk overbelasting Muismodellen geïnduceerd door TAC. De standaardprocedure is het uitvoeren van een gedeeltelijke Thoracotomie om te visualiseren de dwarse aortaboog. Het chirurgische trauma veroorzaakt door de Thoracotomie in open-borst modellen verandert echter de respiratoire fysiologie als de ribben zijn ontleed en niet-vastgemaakte na sluiting van de borst verliet. Om dit te voorkomen, vastgesteld wij een minimaal invasieve, gesloten borst aanpak via laterale Thoracotomie. Hierin benaderen we de aortaboog via de 2nd intercostale ruimte zonder het invoeren van de borst bevinden, waardoor de muis met een minder traumatisch letsel herstellen. Wij voeren deze operatie met behulp van standaard laboratorium instellingen voor open borst TAC procedures met gelijke overlevingskans van de patiënt. Naast het onderhouden van fysiologische ademhaling patronen vanwege de gesloten borst aanpak, lijken de muizen te profiteren door aan te tonen van snelle herstel, zoals de minder invasieve techniek wordt weergegeven voor een snelle genezing proces te faciliteren en te verminderen de immune reactie na trauma.

Een succesvolle TAC garandeert de inductie van druk overbelasting en linker ventriculaire hypertrofie. Een ad hoc-validatie van druk overbelasting kan worden bereikt met behulp van Doppler Stroommeting snelheid, zoals weergegeven in Figuur 2. Terwijl preoperatieve bloed stroomsnelheid in beide halsslagaderen bedraagt, TAC veroorzaakt een vergrote bloed snelheid in de rechts halsslagader als gevolg van verhoogde druk in de linker hartkamer en aorta terwijl ver...

Hier presenteren we een protocol van Transverse aorta vernauwing (TAC) via een laterale Thoracotomie. Deze techniek is een minimaal invasieve, gesloten borst chirurgische ingreep gericht om overbelasting van de druk en hartfalen in muizen met behulp van TAC laboratorium standaardinstellingen te simuleren.

Een gesloten-borst-Model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Het algemene doel van deze procedure is om een transversale aortaconstrictie uit te voeren, in een muismodel met gesloten borstkas, waardoor hypertrofie van het linkerventrikelmyocard wordt geïnduceerd. Deze minimaal invasieve techniek helpt om ademhalingsproblemen te verminderen en de ontstekingsreactie te minimaliseren. Deze methode kan ons helpen om belangrijke vragen te beantwoorden op het gebied van immunologie, bijvoorbeeld de reactie van cardiale macrofagie bij de ontwikkeling van hypertrofie van het linker ventrikel.Het grote voordeel van deze techniek is dat de ribbenkast intact blijft en daarom het trauma wordt geminimaliseerd. Omdat ruimtes en tijdelijk volume worden aangepast aan het lichaamsgewicht, kan dit protocol worden gebruikt bij muizen van verschillende groottes. Het vermindert ook het chirurgisch trauma en vermindert de afwijking in meetwaarden.Nadat een muis is verdoofd, volgens het tekstprotocol, verplaats de muis naar een temperatuur gecontroleerde operatietafel en los de nosecone die is aangesloten op de anesthesie-inductiebox om de narcose te behouden. Bevestig de bovenste snijtanden van de muis met een nylonnaald. Knijp in de staart om de afwezigheid van

a-closed-chest-model-to-induce-transverse-aortic-constriction-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Dwars aorta vernauwing (TAC) in de muis is een veel gebruikte experimenteel model om de mechanismen die ten grondslag liggen cardiale hypertrofie en hartfalen ontwikkeling te bestuderen. Hier beschrijven we de procedures aan vernauwen de aorta naar een reproduceerbare mate van cardiale hypertrofie in muizen te creëren.

Dwars Aorta Vernauwing in Muizen

Chirurgisch trauma veroorzaakt een ontstekingsreactie. Cytokines en endogene liganden zijn bekend voor het moduleren van een myocard infarct grootte na ischemie en reperfusie. We presenteren een aangepaste gesloten kist model van muizen ischemie en reperfusie met behulp van gewichten opknoping om de effecten van thoracotomie te minimaliseren.

Een murine Closed-borst Model van myocardiale ischemie en reperfusie

In this video, we demonstrate an experimental protocol for minimally invasive transverse aortic constriction in mice to examine pressure overload-induced heart failure.

Transverse Aortic Arch Banding in Mouse Model: A Minimally Invasive Technique in Mice for Induction of High Pressure in the Left Ventricle

We beschrijven een stapsgewijze procedure voor het creëren van druk overbelasting en linker ventrikel hypertrofie in Wistarratten door vernauwing van de aorta ascendens met een kleine metalen clip. Dit model wordt veel gebruikt voor het bestuderen remodelleren veranderingen tijdens cardiale hypertrofie en voor het identificeren en evalueren van strategieën voor regressie van dergelijke veranderingen.

Oplopend Aorta Vernauwing in ratten voor de schepping van druk overbelasting cardiale hypertrofie Model

Het doel van dit protocol is om niet-invasief beoordelen cardiale structurele en functionele veranderingen in een muismodel van hart-en vaatziekten door dwarse aorta vernauwing, met behulp van B- en M-mode echocardiografie en kleur / pulse wave Doppler imaging.

Beoordeling van Cardiac morfologische en functionele veranderingen in muismodel van Transversale Aorta Vernauwing door Echocardiografie Imaging

Minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (MTAC) behoudt de essentie van de reguliere dwarse aorta vernauwing (TAC), terwijl het elimineren van het gebruik van een ventilator met tracheale intubatie. Het blijkt een zeer wenselijke werkwijze voor high-throughput studies linker ventrikel overbelasting, met name translationele studies.

Minimaal Invasieve Transversale Aorta Vernauwing in Muizen

Het doel van dit protocol is te beschrijven stap voor stap de techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (TAC) in muizen. Door eliminatie van intubatie en ventilatie die verplicht is voor de gebruikte standaardprocedure zijn, minimaal invasieve TAC vereenvoudigt de operatieve procedure en vermindert de stam het dier op te zetten.

Techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing in muizen voor inductie van links ventriculaire hypertrofie

Dit protocol presenteert een verbeterde methode om voorbijgaande myocardhypertrofie met absorbeerbare hechting te verkrijgen, waarbij de afname van linkerventrikelhypertrofie wordt gesimuleerd na het verwijderen van drukoverbelasting. Het kan waardevol zijn voor de studies naar myocardhypertrofische conditionering.

Operatie transversale aortavernauwing met absorbeerbare hechting om voorbijgaande myocardhypertrofie te verkrijgen

Het huidige protocol beschrijft een aangepaste en vereenvoudigde techniek met een minimaal invasieve transversale aortavernauwing (TAC) procedure met behulp van een zelfgemaakt retractor. Deze procedure kan worden uitgevoerd zonder een ventilator of microscoop en introduceert drukoverbelasting, wat uiteindelijk leidt tot harthypertrofie of hartfalen.

Een aangepaste techniek voor transversale aortavernauwing bij muizen

Infectie van muizen met een adenovirus uiting van de belangrijkste humane autoantigeen cytochroom P450 2D6 (hCYP2D6) erkend door sera van patiënten die lijden aan type 2-auto-immune hepatitis resulteert in een blijvende vorm van auto-immuun-gemedieerde lever ziekte die wordt gekenmerkt door uitgestrekte hepatitis, fibrose en genereren van een CYP2D6 -specifieke immuunrespons.

De CYP2D6 Animal Model: Hoe kan ik auto-immune hepatitis induceren in Muizen

Leer een minimaal invasieve transversale aortaconstrictie uitvoeren bij muizen met intacte ribbenkast. Deze methode induceert linker ventrikelhypertrofie met verminderde ontstekingsreactie voor cardiovasculair onderzoek.

Een gesloten-borst-Model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen

Meer video's verkennen