26 oktober 2019
Hier presenteren we een protocol om een repliceerbaar geleidingsverlies inductie te creëren via chirurgische trommelvlies membraan punctie en verificatie door Otoscoop visualisatie en gedrags beoordeling door Clap Startle.
Het algemene doel van deze studie is om een betrouwbare gehoorverlies inductie vast te stellen via chirurgische tympanische membraanpunctie en verificatie door otoscoop visualisatie en gedragsbeoordeling door klap schrik. Het doel van onze praktijk is het ontwikkelen van een model voor menselijke gehoorgeleidende stoornissen. We tonen in de praktische, de geleidende gehoorverlies chirurgische procedure, dat is een vereenvoudiging in de malleus verwijdering, de methode om geleidend gehoorverlies te verifiëren door otoscoop visualisatie, en een eenvoudige gedragsklap schrik, die valideren dat geleidend gehoorverlies heeft plaatsgevonden.
Het belangrijkste voordeel van de procedure die we beschreven zijn niet-invasieve procedures, verificatie van geleidend gehoorverlies door otoscoop, en validatie door klap schrik. De huidige studie en procedures werden goedgekeurd door de comité voor dieronderzoek en de City University of Hong Kong, de Universiteit van Hong Kong en het Ministerie van Volksgezondheid van de speciale administratieve regio van Hongkong. Voor het huidige protocol kiezen we ratten, maar je elk knaagdier kiezen.
Weeg dieren af om een goede anesthesie te garanderen voor ip-injectie. Voor anesthesie is het belangrijk dat dieren de juiste dosis hebben. Pak je rat bij de scruff.
Zorg voor uw juiste dosis ketamine en xylazine voor IP-injectie, en injecteer. Zorg ervoor dat teen knijpen uit te voeren om geen pijn sensatie te verifiëren. Voor chirurgische setup bestaat uit uw verdoofde rat, de microscissors, en uw otoscoop.
Reinig het chirurgische gebied grondig met ethanol. Plaats de chirurgische gordijnen op de gereinigde bank. Introduceer vervolgens uw schaar, otoscoop en rat.
De grootte van uw schaar hangt af van de grootte van uw knaagdier. Visualiseer onder otoscoop het linker- en rechteroor van de rat om een gezond trommelvlies te garanderen. Pak de helix en breid het externe gehoorkanaal uit om verduisterd en zwart te worden.
Hier introduceert u de microscissors. Introduceer de microscissors in het midden van het gehoorkanaal, met veel aandacht om het weefsel niet te stelen. Luister naar het popgeluid en draai vervolgens om de verplaatsing van de malleus te garanderen.
De bevestiging van een succesvolle geleidende gehoorverliesoperatie, moet worden gemaakt met een otoscoop. Evalueer elk rattenoor voor en na de operatie met een otoscoop met een speculum met een kleine diameter. Wanneer gevisualiseerd met een otoscoop, moeten de verschillen tussen een normaal trommelvlies en een doorboord timpaansmembraan worden bestudeerd.
Hier heeft het normale trommelvlies aan de linkerkant het hoofd van de malleus op zijn plaats en is het drastisch anders dan het doorboorde trommelvlies aan de rechterkant. De doorboorde trommelvlies, na de geleidende gehoorverlies chirurgie, heeft de malleus verplaatst en de pars tensa gescheurd met de umbo van de malleus en het hoofd volledig ontbreekt. Postoperatieve zorg voor knaagdieren.
Plaats het knaagdier in de kooi van het huis onder een warme lamp en injecteer met antibacteriële middelen en glucose. Bevestig bindbaar gehoorverlies met gedragsklappenschrrijf. De CHL rat wordt naast een normale rat geplaatst in twee aangrenzende kooien.
Deze worden geplaatst in een stille kamer. Sta een halve meter afstand en klap in een even gesprete duur een bepaald aantal keren. Hier kiezen we er vijf.
Hier, onze representatieve gedragsresultaten. Let op de rat aan de onderkant niet springen om de luide klap geluid. De rat aan de bovenkant van het scherm wordt opgeschrikt door deze luide klappende geluiden.
Bestudeer de voor en na het klapverschil voor deze twee ratten. Het niet veroorzaken van geleidend gehoorverlies. Het niet veroorzaken van geleidend gehoorverlies kan worden veroorzaakt door bloedingen in een of beide oren.
En in dit geval moet het knaagdier worden geëuthanaseerd. Dit zou erop wijzen dat de schaar geen contact heeft gemaakt met het trommelvlies. Een geen knallend geluid tijdens de procedure.
Een geen knallend geluid zou erop wijzen dat de geleidende gehoorverlies procedure slecht was en niet schoon. Een geen knallend geluid zou betekenen dat uw microscissors geen direct contact maakten met het trommelvlies. Otoscoopvisualisatie.
Als, bij het visualiseren door otoscoop, het trommelvlies normaal lijkt, zou dit erop wijzen dat er geen CHL is opgetreden. Een reactie op de luide klap geluidstest. Dit zou erop wijzen dat er geen CHL is opgetreden en het knaagdier geen geleidend gehoorverlies heeft.
Dit zou gebeuren wanneer een rat springt of wordt opgeschrikt door een luide klap geluid. Het belangrijkste voordeel van de procedure die we beschreven, zijn niet-invasieve procedures, verificatie van geleidend gehoorverlies door otoscoop, en validatie door klap schrik. Na het doen van de praktische, u leidend gehoorverlies in een knaagdier model en verken de gedrags-en psychofysische manifestaties van deze gehoorstoornis.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
De studie stelt een betrouwbaar protocol vast voor het induceren van conductieve gehoorverlies bij knaagdieren door middel van chirurgische punctie van het trommelvlies. Door gebruik te maken van otoscopische visualisatie en gedragsbeoordelingen wordt de inductie van het gehoorverlies geverifieerd, waarmee een model wordt geboden om menselijke conductieve aandoeningen te onderzoeken.
Betrouwbare knaagdiermodellen voor conductieve gehoorverlies (CHL) zijn essentieel voor het verminderen van risico's bij de vroege ontdekking van auditieve targets en voor het evalueren van de gedragsmatige en neurale gevolgen van gehoorbeperkingen. Dit protocol maakt een reproduceerbare inductie en verificatie van CHL mogelijk, wat translationeel onderzoek en de ontwikkeling van preklinische modellen voor auditieve aandoeningen ondersteunt. De aanpak faciliteert een gestandaardiseerde beoordeling van interventies bij gehoorverlies en mechanistische studies in ziekterelevante systemen.
Dit protocol voor de inductie en verificatie van CHL bevindt zich op het grensvlak van vroege ontdekking en de ontwikkeling van preklinische modellen, waardoor robuuste hypothesetoetsing en assay-gereedheid voor auditieve onderzoeksportefeuilles mogelijk worden gemaakt.