Analyseren van ruimtelijke leren en prosociaal gedrag in muizen met behulp van de Barnes doolhof en Damsel-in-nood paradigma 's

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de gedragsneurowetenschappen veld over de vraag of een genetische mutatie of omgevingsvariabele kan invloed hebben op sociaal gedrag of de verwerving en het behoud van ruimtelijke herinneringen. De belangrijkste voordelen van deze technieken zijn dat beide studies eenvoudig kunnen worden geconstrueerd met minimale financiële investeringen en dat geen van beide protocol vereist dat de dieren extreme of stressvolle stimuli ervaren. De Damsel in Distress methode kan inzicht geven in de muis pro-sociaal gedrag, maar het kan ook worden gebruikt als een empathie maatregel in andere zoogdier model organismen.

Reinig alle doolhofcomponenten met water en 70% ethanol voordat u begint met de Barnes Maze Testing Procedure. Wanneer de componenten droog zijn, monteer het doolhof en willekeurig toewijzen elke muis aan een doelgat te gebruiken tijdens de testperiode. De gaten kunnen worden gelabeld een tot 20 op de bodem van het doolhof of aan de buitenkant van het doolhof omtrek waar ze niet zichtbaar zijn vanuit het doolhof.

Om een trainingstest te starten, vervang je de toegewezen gatschijf door een zwarte doos van 23 bij 11 centimeter en gebruik je elastiekjes en haken om de doos stevig aan het doolhof te bevestigen. Plaats vervolgens een muis op het midden van het Barnes Maze onder een kopje en laat de muis 30 seconden acclimatiseren. Aan het einde van de acclimatisatieperiode, beginnen met de video-opname en zet de lichte en ultrasone ruis maker.

Til de beker op via een snaarmechanisme om te voorkomen dat de oorspronkelijke kop van het dier wordt beïnvloed en start een timer achter een observatiegordijn. Volg de bewegingen van het dier op een stuk papier met een diagram van het doolhof en gebruik het diagram om de zoekstrategieën van de muis te analyseren en om het aantal gaten te bepalen dat in het kwadrant tegenover het doel is onderzocht. Wanneer de muis het doelgat binnenkomt, bedek het gat met een zwaar ondoorzichtig bindmiddel en zet u de ultrasone ruismaker uit.

Als de muis het doel na vijf minuten niet is binnengekomen, corral het dier in het doelgat. Laat de muis vervolgens ongestoord een minuut ongestoord in de doelkast blijven, zodat u het ultrasone geluid uitschakelt. Breng het dier vervolgens terug naar zijn kooi.

Wanneer alle muizen zijn getest, handmatig bekijken van hun opname om de algehele beweging van de muis te volgen om het aantal onjuiste gaten onderzocht voor en na het doel is gevonden, evenals het aantal gaten van het doel gat naar het eerste gat onderzocht en een opmerkelijke verzorging gedrag te bepalen. Voor verkennend gedrag Damsel in Distress Testing, plaats een gesloten en lege stress kamer in het centrum van een empathie arena en beginnen met het opnemen met de geschorste camera. Plaats voorzichtig een mannelijke muis onder een kopje in de linkerbenedenhoek in de arena gedurende 30 seconden.

Verwijder vervolgens de beker via een snaarmechanisme en laat de muis 10 minuten verkennen en zorg ervoor dat u tijdens de opname uit het gezichtsveld blijft. Aan het einde van de verkenningsperiode, beweeg de muis van de arena in een holding kooi voor vijf minuten en stop en sla de opname. Voor sociale responsiviteit Damsel in Distress Testing, voorzichtig handmatig beperken van een vrouwelijke muis en laat de muis in een terughoudendheid kamer.

Sluit het open uiteinde van de kamer achter de muis en bevestig dat de muis niet in staat is om te draaien. Begin met opnemen met de hangende camera en plaats de bevestigingskamer in het midden van de arena. Laat het dier 10 minuten acclimatiseren en zorg ervoor dat het buiten het gezichtsveld blijft.

Breng vervolgens de mannelijke muis van het wachtgebied 10 seconden terug naar de empathiearena en laat de mannelijke muis nog vijf minuten extra de arena verkennen en zorg ervoor dat hij uit het gezichtsveld blijft. Aan het einde van de verkenningsperiode, stop en sla het videobestand op en breng beide muizen terug naar hun kooien. Vervang vervolgens het maïsbed en ontsmet zowel de arena als de stresskamer met 70%-ethanol.

Als u de gegevens wilt analyseren, opent u het videobestand in de juiste trackingsoftware en plaatst u een transparant blad over het scherm. Omtrek het vierkant van de arena met een marker en verdeel het arenaplein in negen gelijke compartimenten. Bekijk de videogegevens gedurende de eerste vijf minuten van de eerste verkennende maatregel met het opnemen van het aantal gekruiste compartimenten, de tijd die in het middenplein van de arena wordt doorgebracht, het aantal graaf- en grooming-afleveringen en het aantal keren dat de muis de lege middelste bevestigingskamer raakte.

Bekijk vervolgens de videogegevens voor de vijf minuten van de sociale responsiviteitsmeting onmiddellijk nadat het mannetje opnieuw in de arena is geïntroduceerd met de gevangen vrouw die dezelfde gegevens opneemt als voor de eerste verkennende maatregel, maar het toevoegen van het aantal keren dat de mannelijke muis neuzen aanraakte met de gevangen vrouwelijke muis. Wanneer Barnes Maze getrainde neonaten worden uitgevoerd als volwassenen in een enkele lange termijn proef, de ethanol geïnjecteerd muizen hebben een hardere tijd herinneren waar het doel gat was gelegen dan zout geïnjecteerd controle dieren. Ethanol behandeld muizen ook onderzoeken aanzienlijk meer gaten in het tegenovergestelde kwadrant van het doel, wat wijst op een gebrek aan de juiste algemene ruimtelijke locatie herinneren en gebruik een sequentiële gat om te zoeken in een ring vormige mode totdat het gat is gevonden.

In het Model Damsel in Nood kruisen oudere muizen meer pleinen dan jongere muizen. In aanwezigheid van een gevangen vrouwtje echter, mannelijke muizen van beide leeftijden besteden minder tijd aan het verkennen van de arena. Jonge mannen besteden meer tijd aan het graven tijdens hun tijd in de arena in aanwezigheid van een gevangen vrouwelijke muis dan wanneer alleen suggereert angst of pro-sociaal gedrag in de richting van de gevangen vrouw.

Daarentegen raken mannelijke muizen de buis met het gevangen vrouwtje aan en starten ze als volwassenen aanzienlijk vaker contact met gevangen vrouwen dan als jongeren. Tijdens het proberen van deze procedure, is het belangrijk om te onthouden om de omstandigheden constant te houden tussen en binnen de proeven om ervoor te zorgen dat de milieuvariabelen niet verwarren de resultaten van de studie. Na het eerste gebruik van deze gedragstesten, kunnen dezelfde dieren opnieuw worden getest op verschillende tijdstippen tijdens de ontwikkeling om vragen te beantwoorden over lange termijn geheugen en mogelijke veranderingen in sociaal gedrag.