Een zilveren Nanoparticle methode voor verbetering van biliaire atresie syndroom in muizen

Deze methoden kunnen helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in biliaire atresie. Van BA opvattingen over ziekte, pathogenese en behandeling. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat de neonatale muis injectie techniek zal onderzoekers helpen om vertrouwd te raken met de methode voor andere neonatale muis model studies.

De implicaties van deze techniek uit te breiden tot de therapie van BA als verschillende nanodeeltjes van betekenis Hoewel deze methode inzicht kan geven in BA behandeling, het kan ook worden toegepast op andere systemen, zoals neonatale muis modellen van de pathogenese van deze Over het algemeen op de manier waarop deze methode zal omdat de kleine omvang van neonatale muizen kan resulteren in de bouw van injectieproces. Om galia in een muismodel vast te stellen, laadt u het rhesus rotovirus in een insulinespuit van één milliliter die is uitgerust met een naald van 29 meter en levert intraperitoneally 1,2 keer 10 aan de 5e plaquevormende viruseenheden in 20 microliter van Dulbecco's Modified Eagle Medium tot elk neonaat binnen 24 uur na de geboorte. Breng de neonaten vervolgens terug naar hun moeder voor dagelijkse controle en weging.

Wanneer de neonatale dieren tekenen van geelzucht beginnen te vertonen, laad een een milliliter spuit uitgerust met een 29-gauge naald met 50 microliters van vers bereide zilveren nanodeeltjes collageen oplossing per dier en gebruik de ringvinger om het been van een geelzucht dier schuin over de rechter dij te drukken. Langzaam introduceren van de naald onder een hoek van 15 graden in het buikvlies, en bij het bereiken van het oppervlak van de onderste rand van de lever, injecteren van de zilveren nanodeeltjes collageen mengsel. Wanneer al het mengsel is geïnjecteerd, verwijder dan langzaam de naald en laat het dier tien minuten rusten om het collageen te laten stollen en om te voorkomen dat de moeder de injectieplaats likt.

Breng de muizen vervolgens terug naar hun kooien voor dagelijkse controle. Op dag negen of twaalf na inenting, steriliseren de boven-en onderbuik met 75%ethanol, en immobiliseren de ledematen van een geïnfecteerde muis. Open de huid, spier en buikvlies langs de middellijn naar de xyphoid, en gebruik een steriel wattenstaafje om het maag-darmkanaal te verwijderen om het middenrif volledig bloot te leggen.

Steek de naald van een geloste een milliliter insulinespuit in de linker ventrikel van het hart, en trek langzaam de spuit zuiger om het maximale bloedvolume te verkrijgen. Breng het bloed naar een 1,5 milliliter buis voor een 30 minuten incubatie bij kamertemperatuur en pellet de rode bloedcellen door centrifugatie. Verzamel dan het serum voor latere analyse.

Voor extrahepatische cholangiografie, gebruik een wattenstaafje om volledig bloot de lever, galblaas en extrahepatische galwegen. Na het fotograferen van het verschijnen van de lever en galwegen onder een ontledenmicroscoop, gebruik oogheelkundig tangen om de onderkant van de galblaas voorzichtig te grijpen en langzaam de naald van een een milliliter spuit geladen met methyleenblauwe oplossing in de galblaasholte te steken. Grijpen de naald met de tangen, langzaam infuus 10-20 microliter van methyleen blauw.

Wanneer de kleurstof door de extrahepatische galwegen naar het jejunum gaat, krijgt u een andere foto van het weefsel. Dan voor hematoxyline en eosine vlekken, oogst de lever van elk dier voor 's nachts fixatie in 10% formaline. De volgende ochtend, insluiten de monsters in paraffine voor sectioning, gevolgd door de-waxing re-hydratatie met een ethanol serie en hematoxylin en eosine vlekken volgens de standaard histopathologische analyse protocollen.

Vergeleken met onbehandelde galatresiemuizen vertonen zilvernanodeeltjes behandelde dieren verminderde geelzucht en behouden hun normale lichaamsgewicht. De niveaus van bilirubine metabolisme en levertransaminase dalen tot normale controlewaarden, wat suggereert dat de zilveren nanodeeltjes de leverfunctie sterk verbeteren. Extrahepatische cholangiografie met methyleenblauwe vlekken bevestigt galkanaalfasency na zilveren nanodeeltjesbehandeling, en H&E-vlekken onthullen een significante afname van ontstekingscelinfiltratie in het leverportaalgebied van muizen die met zilveren nanodeeltjes worden behandeld in vergelijking met controles.

Flow site en metrische analyse geeft de aanwezigheid van aanzienlijk minder NK cellen in de levers van zilver nanodeeltje behandelde dieren in vergelijking met onbehandelde rhesus rotavirus geïnfecteerde muizen. Verdere immunohistochemische kleuring onthult een aanzienlijk verminderde expressie van NK celmarkering in het portaal triade van zilver nanodeeltjes behandelde muizen in vergelijking met rhesus rotavirus geïnfecteerde dieren. Tijdens een poging tot deze procedure, is het belangrijk om te onthouden dat de praktijk de beste resultaten zal geven.

Na deze procedure, als methoden zoals het conjugating van zilveren nanodeeltjes aan andere dingen kan worden uitgevoerd om aanvullende vragen over de activiteit van laesies in de behandelingen van BA in muismodellen te beantwoorden. is ontwikkeling. Deze techniek bood een manier voor onderzoekers op het gebied van gastro-enterologie aan BA of andere ziekten zoals cholestasis in de lever.

Vergeet niet dat het werken met onderzoek rotavirus kan zeer gevaarlijk zijn, en dus voorzorgsmaatregelen zoals het dragen van de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen moet altijd worden genomen bij het uitvoeren van deze procedure.