Het Protocol van de onvoorspelbare chronische milde Stress voor inducerende Anhedonie in muizen

Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het voldoende vertaalt belangrijke neurobiologische en gedragskenmerken betrokken bij de pathogenese, etiologie, en de behandeling van depressie. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het begrijpen van de pathofysiologie van angst en depressie en het bevorderen van de ontwikkeling van nieuwe farmacologische behandelingen. De implicatie van deze techniek uit te breiden voor de therapie van depressie, omdat het maakt screenings voor potentiële antidepressiva, terwijl het lijkt op de langdurige loop van remissie duidelijk bij menselijke patiënten.

Begin met het vullen van kooien met vers zaagsel, en voeg een stuk watten toe voor verrijking. Huis dieren in de kooi voor een acclamatie periode van een week, en houden een consistente 12-uur licht / donker cyclus. Geef ad libitum toegang tot knaagdier chow en water.

Ontwerp een vier weken stressor regime waarin elk van de zeven stressoren wordt gebruikt een keer per week, op een andere dag elke week. Na een week acclamatie, initiëren toepassing van de stressoren op de vier weken oude muizen in de UCMS kamer. Voor de eerste stressor, plaats muizen samen met hun huis-kooi tegenhangers in een lege kooi.

Vul de lege kooi met water gehouden op 24 plus-of-min-een graden Celsius tot een diepte van een centimeter, en houd muizen in de natte kooi voor vier uur. Breng vervolgens elke muis over naar een afzonderlijke individuele voorbijgaande droogkooi met een warmtelamp erboven, een verwarmingskussen eronder en papieren handdoekbedden. Plaats een thermometer in de voorbijgaande kooi om te controleren of de temperatuur niet hoger is dan 37 graden Celsius.

Houd elke muis in de voorbijgaande kooi totdat het droog is en ziet er verkwikt, en dan terug muizen naar de huiskooi met dezelfde tegenhangers. Voor gedempt zaagsel, slecht water gehouden op 24 plus-min-een graden Celsius in de kooi van het huis totdat het zaagsel matig wordt gedempt. Na vier uur, droog de muizen in voorbijgaande kooien.

Plaats vervolgens de muizen met huiskooi tegenhangers in een steriele kooi met vers zaagsel. Voor de volgende stressor, kantel de kooi op 45 graden tegen de muur voor vier uur. Voor Empty Cage, breng alle vijf muizen samen met hun specifieke huis-kooi tegenhangers van de huiskooi naar een lege kooi voor vier uur.

Voor de vijfde stressor, overdracht muizen samen met hun specifieke huis-kooi tegenhangers van de huiskooi naar een kooi die werd gehuisvest door een andere groep muizen voor een periode van ten minste drie dagen voorafgaand aan stressor toepassing. Houd muizen vier uur in de onbekende kooi. Voor de zesde stressor, plaats elke muis afzonderlijk in een schone muis restrainer voor vier uur.

Daarna, terug muizen naar de huiskooi met dezelfde tegenhangers. Voor de laatste stressor, overdracht muizen in hun huis kooi met hun specifieke tegenhangers naar de UCMS kamer. Houd het licht 24 aaneengesloten uren aan.

Tot slot, na stressor toepassing, terug de kooien van de UCMS groep van de UCMS kamer naar de behuizing kamer. Houd tijdens de vier weken van stress blootstelling, houd de naïeve groep in hun huis kooien gelegen in de behuizing kamer. Op de dag na de stopzetting van het UCMS-protocol, start de toediening van vermeende therapeutische farmacologische middelen.

Na de behandelingsfase, verwijder elke muis uit de kooi van het huis en plaats het individueel in een kooi die met vers zaagsel en een stuk watten voor verrijking wordt gevuld. Bereid vervolgens twee flessen, een met gedestilleerd water, en een andere met 2%sucrose oplossing. Weeg de twee flessen en zet ze aan beide uiteinden van de kooi deksel en plaats knaagdier chow tussen de twee flessen om muizen ad libitum toegang tot zowel oplossingen en voedsel voor een periode van 24, 48, 72, of 144 uur.

Na 12 uur, of eenmaal per dag als de testduur meer dan 24 uur bedraagt, weegt u de flessen om het verbruik van elke fles te schatten en de posities van de sproeiers om te schakelen om de mogelijkheid te compenseren dat de resultaten werden verward door positievoorkeur. Ten slotte, weeg de flessen elke dag om het verbruik van elke fles te schatten. De UCMS-groep toonde een verminderde sucrose voorkeur in vergelijking met de naïeve groep, wat suggereert dat de UCMS-protocol effectief was in het induceren van anhedonia.

Bovendien toonde de UCMS-groep verminderde hippocampal BDNF-niveaus aan in vergelijking met de naïeve groep, wat suggereert dat het UCMS-protocol leidde tot de vermindering in hippocampal BDNF-niveaus zoals duidelijk in menselijke depressie. De resultaten gaven aan dat de UCMS zoutlijngroep een significante daling van de sucrosepreferentie vertoonde in vergelijking met de naïeve zoutgroep en in vergelijking met zowel de UCMS escitalopram als de UCMS NHT-groepen, wat suggereert dat zowel escitalopram als NHT de door de UCMS geïnduceerde anhedonia normaliseerden. Bovendien heeft de UCMS zoutoplossingsgroep aangetoond dat de hippocampal BDNF-niveaus daalden ten opzichte van de naïeve zoutgroep en in vergelijking met zowel de UCMS-escitalopram als de UCMS NHT-groepen, wat suggereert dat zowel escitalopram als NHT de door de UCMS geïnduceerde vermindering van het BDNF-niveau in de hippocampus normaliseerden.

Na deze procedure kunnen andere methoden worden uitgevoerd, zoals de staartsuspensietest, de geforceerde zwemtest en het verhoogde plus-doolhof. Deze tests worden gebruikt om gedragswanhoop te beoordelen, evenals verkennend en angstachtig gedrag.