Name: Occlusie van de middelste cerebrale slagader waardoor reperfusie via gemeenschappelijke halsslagader reparatie in muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: Leer een chirurgische techniek voor reparatie van de arteria carotis communis bij muizen om reperfusie naar de arteria cerebri media te verbeteren. Deze methode vermindert variabiliteit in beroertemodellen en verhoogt de reproduceerbaarheid van experimentele resultaten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gefinancierd door het nationaal centrum voor de vervanging, verfijning en vermindering van dieren in het onderzoek (NC3Rs; NC/M000117/1 naar CG). De auteurs danken het personeel van de afdeling van biomedische diensten, Universiteit van Leicester, voor hun verzorging van de proefdieren en Maria Viskaduraki voor haar statistische advies. De representatieve resultaten worden aangepast met toestemming van ziekte modellen & mechanismen11.

<ol><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1%2C026+Experimental+treatments+in+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">1,026 Experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li>
<li>Sutherland, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+for+Ischaemic+Stroke%3A+Translation+from+the+Bench+to+the+Bedside%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection for Ischaemic Stroke: Translation from the Bench to the Bedside.</a> International Journal of Stroke. 7 (5), 407-418 (2012).</li>
<li>Reeves, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Stroke+Care+in+the+US%3A+Results+from+4+Pilot+Prototypes+of+the+Paul+Coverdell+National+Acute+Stroke+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Acute Stroke Care in the US: Results from 4 Pilot Prototypes of the Paul Coverdell National Acute Stroke Registry.</a> Stroke. 36 (6), 1232-1240 (2005).</li>
<li>Wardlaw, J. M., Murray, V., Berge, E., del Zoppo, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolysis+for+acute+ischaemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+of+Systematic+Reviews%22%5BJournal%5D)">Thrombolysis for acute ischaemic stroke.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. (7), CD000213(2014).</li>
<li>Pangalos, M. N., Schechter, L. E., Hurko, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+development+for+CNS+disorders%3A+strategies+for+balancing+risk+and+reducing+attrition%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Drug development for CNS disorders: strategies for balancing risk and reducing attrition.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 6 (7), 521-532 (2007).</li>
<li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+basis+of+translational+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22Folia+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological basis of translational stroke research.</a> Folia Neuropathologica. 47 (3), 213-227 (2009).</li>
<li>Ringelstein, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+and+extent+of+hemispheric+brain+infarctions+and+clinical+outcome+in+early+and+delayed+middle+cerebral+artery+recanalization%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Type and extent of hemispheric brain infarctions and clinical outcome in early and delayed middle cerebral artery recanalization.</a> Neurology. 42 (2), 289-289 (1992).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+Size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRX%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: Size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRX. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+Bedside%3A+The+Quest+for+Quality+in+Experimental+Stroke+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bench to Bedside: The Quest for Quality in Experimental Stroke Research.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 26 (12), 1465-1478 (2006).</li>
<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+parameters%27+impact+on+mortality+and+variability+in+mouse+stroke+experiments%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis.</a> Scientific Reports. 6, 21086(2016).</li>
<li>Trotman-Lucas, M., Kelly, M. E., Janus, J., Fern, R., Gibson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+surgical+approach+reduces+variability+following+filament+induction+of+experimental+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">An alternative surgical approach reduces variability following filament induction of experimental stroke in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 10 (7), 931-938 (2017).</li>
<li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+stroke+research+-+advantages+and+disadvantages+of+the+most+common+rodent+models+of+focal+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical stroke research - advantages and disadvantages of the most common rodent models of focal ischaemia.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (4), 1062-1078 (2011).</li>
<li>McColl, B. W., Carswell, H. V., McCulloch, J., Horsburgh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cerebral+hypoperfusion+and+ischaemic+pathology+beyond+MCA+territory+after+intraluminal+filament+occlusion+in+C57Bl%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Extension of cerebral hypoperfusion and ischaemic pathology beyond MCA territory after intraluminal filament occlusion in C57Bl/6J mice.</a> Brain Research. 997 (1), 15-23 (2004).</li>
<li>Trueman, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model%3A+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Translational Stroke Research. 2 (4), 651-661 (2011).</li>
<li>Dittmar, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ECA+transection+in+the+development+of+masticatory+lesions+in+the+MCAO+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The role of ECA transection in the development of masticatory lesions in the MCAO filament model.</a> Experimental Neurology. 195 (2), 372-378 (2005).</li>
<li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Bioscience+Research+Reporting%3A+The+ARRIVE+Guidelines+for+Reporting+Animal+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+Biology%22%5BJournal%5D)">Improving Bioscience Research Reporting: The ARRIVE Guidelines for Reporting Animal Research.</a> Plos Biology. 8 (6), e1000412(2010).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nature Methods. 7 (6), 447-479 (2010).</li>
<li>Orsini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+Mannose-Binding+Lectin+Confers+Long-Lasting+Protection+With+a+Surprisingly+Wide+Therapeutic+Window+in+Cerebral+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Targeting Mannose-Binding Lectin Confers Long-Lasting Protection With a Surprisingly Wide Therapeutic Window in Cerebral Ischemia.</a> Circulation. 126 (12), 1484-1494 (2012).</li>
<li>Simoni, M. G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+by+Complement+%28C1%29+Inhibitor+in+Mouse+Transient+Brain+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection by Complement (C1) Inhibitor in Mouse Transient Brain Ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 23 (2), 232-239 (2003).</li>
<li>Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Citicoline+Treatment+for+Experimental+Intracerebral+Hemorrhage+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Citicoline Treatment for Experimental Intracerebral Hemorrhage in Mice.</a> Stroke. 29 (10), 2136-2140 (1998).</li>
<li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Brain+Edema+on+Infarct+Volume+in+a+Focal+Cerebral-Ischemia+Model+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Effect of Brain Edema on Infarct Volume in a Focal Cerebral-Ischemia Model in Rats.</a> Stroke. 24 (1), 117-121 (1993).</li>
<li>Loihl, A. K., Asensio, V., Campbell, I. L., Murphy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+nitric+oxide+synthase+%28NOS%29-2+following+permanent+focal+ischemia+and+the+role+of+nitric+oxide+in+infarct+generation+in+male%2C+female+and+NOS-2+gene-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of nitric oxide synthase (NOS)-2 following permanent focal ischemia and the role of nitric oxide in infarct generation in male, female and NOS-2 gene-deficient mice.</a> Brain Research. 830 (1), 155-164 (1999).</li>
<li>Connolly, E. S., Winfree, C. J., Stern, D. M., Solomon, R. A., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedural+and+strain-related+variables+significantly+affect+outcome+in+a+murine+model+of+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Procedural and strain-related variables significantly affect outcome in a murine model of focal cerebral ischemia.</a> Neurosurgery. 38 (3), 523-531 (1996).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Strain+Differences+in+Susceptibility+to+Cerebral+Ischemia+are+Related+to+Cerebral+Vascular+Anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse Strain Differences in Susceptibility to Cerebral Ischemia are Related to Cerebral Vascular Anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+Ischemia+after+Bilateral+Carotid+Artery+Occlusion+and+Intraluminal+Suture+Occlusion+in+Mice%3A+Evaluation+of+the+Patency+of+the+Posterior+Communicating+Artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral Ischemia after Bilateral Carotid Artery Occlusion and Intraluminal Suture Occlusion in Mice: Evaluation of the Patency of the Posterior Communicating Artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Gloeidraad inductie van voorbijgaande MCAO in knaagdieren is de meest gebruikte experimentele beroerte model, aangezien het reperfusie aan het getroffen gebied, het nabootsen van het vóórkomen van gebeurtenissen na klinische ischemische beroerte7toestaat. Gemeld hier is een alternatieve chirurgische benadering naar de traditionele methode van voorbijgaande MCAO gloeidraad-geïnduceerd in muizen. De alternatieve aanpak, analgesie behandeling, ECA afbinding vermijden en CCA incisie reparatie, resulteert in een verminderde variabiliteit van de LV wanneer beoordeeld met behulp van zowel de MRI als de histologische kleuring methoden11.
Traditionele benaderingen voor het opwekken van MCAO grotendeels vertrouwen op het transect, of ten minste afbinding, van de Rekenkamer, waarvan is aangetoond, bij ratten, beïnvloeden van gedrag drinken en een toename van de lichaam gewichtsverlies na de MCAO14. Het protocol hier, gedefinieerd in muizen, met het vermijden van ECA afbinding en analgesie toevoeging, stelde een afname van de lichaam gewichtsverlies na de MCAO met geen effect op het volume van de laesie. Het gebruik van analgesie is vermeden, of in ieder geval niet gemeld, in de meeste studies van de experimentele lijn, als gevolg van mogelijke storende effecten op de experimentele resultaten. Echter, volledig vermijden van analgesie niet altijd gerechtvaardigd is en er is een noodzakelijke evenwicht tussen enerzijds de behoeften van de welzijn van de dieren en de verwezenlijking van de wetenschappelijke doelstellingen.
Verschillen in de grootte van de dieren, stam en cerebrovasculaire anatomie, naast gloeidraad grootte en type variaties, worden alle voorgesteld om de invloed van beroerte resultaten23,24. De hier beschreven alternatieve aanpak vermijdt de afhankelijkheid van de koe tijdens reperfusie, waardoor, ten minste gedeeltelijk de variabiliteit tussen de dieren in de laesie volume gezien. Koe-anatomie is zeer variabel in muizen, met name in de C57BL /6 stam, die vaak wordt gebruikt in experimentele lijn studies. 90% van de C57BL/6 muizen hebben een onvolledige koe als gevolg van een gevarieerde posterieure communicerende slagader (PcomA) bij, die een effect op de hoeveelheid ischemische schade als gevolg van de ontoereikende perfusie van structuren buiten het MCA grondgebied13, hebben kan 25. repareren het CCA in muizen, zoals hier wordt weergegeven, resulteert in het opnieuw opzetten van bloed stromen via het CCA aan het ischemische gebied, zoals hiervoor is beschreven in ratten15. De representatieve gegevens hier is gebleken dat de reparatie van de CCA reperfusie uitbreidt, hoewel de bloedstroom in de CCA was niet direct gemeten. Het is echter mogelijk dat de chirurg te visualiseren de CCA-reperfuse met bloed na de reparatie van het vaartuig, als het terugkeert naar een pulserende en volledige staat langs de stam, proximale en distale naar de locatie van de reparatie. Deze visuele bevestiging, samen met laser Doppler flowmetrie lezingen van de ischemische ruimte, kan worden gebruikt ter bevestiging van de succesvolle reparatie van het schip. De tijd tussen de toepassing van de pad weefsel en de verwijdering van de clip van het vaartuig van de CCA kan een invloed hebben op de resulterende bij van het CCA, voor het verminderen van de tijd tussen de toepassing van de pad weefsel en de clip verwijderen voorkomt u dat de weefsel pad vast te houden aan de o pposite kant van de CCA. Hoewel technisch uitdagende, vereist de alternatieve MCAO procedure uitgelegd hier geen geen extra vaardigheden dan die welke vereist zijn voor het uitvoeren van de chirurgische inductie van MCAO in muizen.
Traditioneel geassocieerd met een hoge variabiliteit in resultaat maatregelen, kunnen experimentele lijn studies hebben de neiging om worden ondermaatse. Ethische en sociale eisen in combinatie met economische en praktische zorgen kunnen bijdragen aan studies worden ondermaatse. Door het verminderen van de variabiliteit in de uitkomst, en daarom, het produceren van meer consistente resultaten van de laesie in een experimentele groep, kunnen doeltreffender macht berekeningen worden uitgevoerd met het uiteindelijke doel van studies op de juiste wijze wordt aangedreven.
Kortom, deze alternatieve CCA-herstelprocedure, bij muizen, resulteert in minder variabiliteit in laesie volume na experimentele beroerte en maakt het mogelijk kleinere experimentele groepen nodig zijn voor het testen van een effect van de behandeling indien nodig power berekeningen worden gebruikt.

Een belangrijke oorzaak van cerebrale beroerte is focal ischemie op het grondgebied van de middelste cerebrale slagader. Tissue plasminogen activator (tPA) is het alleen farmacologische behandeling beschikbaar met bewezen werkzaamheid, ondanks talrijke klinische drug tests gericht op ischemische beroerte1,2. Echter, als gevolg van bezorgdheid over de veiligheid en een smalle therapeutische venster (< 4.5 h), slechts ~ 15 procent van alle beroerte-patiënten komen in aanmerking voor tPA, en de recanalization-tarieven kunnen < 50%3,4.
Reproduceerbaar zijn en klinisch relevante dierlijke modellen van een beroerte als essentieel om de ontwikkeling van nieuwe en potentiële beroerte therapeutische behandelingen worden beschouwd. Als gevolg van bezorgdheid over de samenhang en de variabiliteit in de resultaten met diermodellen blijft het echter belangrijk voor het verfijnen van bestaande in vivo modellen ter verbetering van de vertaling van preklinische studies naar de kliniek. Het ontbreken van vertaling van de preklinische experimentele werkzaamheid van potentiële behandelingen naar klinische gebruik is een voortdurende zorg voor beroerte onderzoek5. Redenen voor het mislukken van de vertaling zijn waarschijnlijk meerdere en kunnen worden gerelateerd aan, bijvoorbeeld, de proefopzet, vertraging van de behandeling, klinische beroerte heterogeniteit, en de beperkingen van de dierlijke modellen gebruikt6. Een belangrijke uitdaging voor beroerte onderzoek blijft de ontwikkeling van veilige en effectieve behandelingen.
Middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO) door intraluminale gloeidraad opneming is de meest gebruikte in vivo knaagdier model van experimentele beroerte. Dit model kunnen het herstel van de bloedtoevoer na een ischemie inductie, het nabootsen van de gebeurtenissen die zich in menselijke lijn7 voordoen. Echter, in het bijzonder in muizen, heterogene laesie volumes met gevarieerde standaarddeviaties ook optreden als gedefinieerd chirurgische protocollen zijn toegepaste8,9,10. Het is tekenend dat een bimodaal verdeling van kleine striatale en grote striato-corticale laesie volumes11. Om te induceren ischemie, wordt meestal de gloeidraad ingebracht via een snede van de CCA of ECA die vervolgens blijven permanent ligaturen12. De permanente Afbinding van de CCA voorkomt het opnieuw opzetten van de bloedstroom in de interne halsslagader (ICA) en vervolgens het MCA grondgebied. Hierdoor reperfusie zijn afhankelijk van de collaterale levering binnen de cirkel van Willis (CoW). De structuur van de koe heeft anatomische variabiliteit tussen de individuele dieren, met name in C57BL/6 muizen-a stam meestal gebruikt in in-vivo onderzoek lijn13. Een alternatieve methode, van de gloeidraad inbrengen via de ECA, laat de voortdurende perfusie via het CCA, maar deze methode compromissen de arteriële toevoer naar het grondgebied van de Europese Rekenkamer, waarvan is aangetoond, bij ratten, hebben een nadelig effect op het dier welzijn14.
De afhankelijkheid van de koe voor bijkomende leveringen en reperfusie in de gevestigde MCAO model kan gedeeltelijk verantwoordelijk voor de laesie volume variabiliteit na occlusie. We beschrijven een alternatieve lymfkliertest chirurgische procedure waar ECA Afbinding wordt vermeden en de CCA-incisie is gerepareerd, dus mooi reperfusie via de CCA, onafhankelijk van de koe. De reparatie van de incisie CCA is eerder aangetoond in ratten leiden tot een succesvolle reperfusie via de CCA-15. Wij hebben deze aanpak succesvol in muizen11 toegepast en verslag hier het protocol wat in een verminderde variabiliteit in laesie volume, de belangrijkste resultaat maatregel gebruikt in experimentele lijn studies resulteert.
In dit protocol, laten we zien hoe ertoe MCAO via CCA vaartuig gloeidraad invoeging gevolgd door CCA vaartuig reparatie, waarbij een weefsel pad- en afdichtmassa toepassing zodat reperfusie.

<table><tbody><tr><td>0.7 mm flexible single fibre optic probe</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>P10d</td><td>Gebruik met master probe code: VP10M200ST</td></tr><tr><td>7-0 silicone coated monofilament</td><td>Doccol, USA</td><td>701956PKRe</td><td>Artikel afhankelijk van de grootte en het gewicht van het dier - gebruik de richtlijnen van de fabrikant. Productcode hier werd gebruikt voor representatieve resultaten weergegeven in het artikel.</td></tr><tr><td>9.4T Preclinical MRI system</td><td>Agilent Technologies, Santa Clara, California, USA</td><td>MY11520101</td><td>Uitgerust met gradiënt en RF-spoelen geschikt voor muis hersenbeeldvorming</td></tr><tr><td>Animal monitoring and gating equipment</td><td>SA Instruments, Stony Brook, New York, USA</td><td>22124005</td><td>MRI compatibele temperatuur en ademhaling controle</td></tr><tr><td>Bupivacaine</td><td>National Veterinary Services, Stoke-on-trent, UK</td><td>512345</td><td>Marcaine</td></tr><tr><td>C57BL/6 Mice</td><td>Charles River, Oxford, UK</td><td>B6JSIMA49D</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Norbrook Laboratories</td><td>143658</td><td>Carprieve 5% w/v Kleine dieren oplossing voor injectie</td></tr><tr><td>Chlorhexidine 4% hand cleanser solution</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, UK</td><td>MOLN10008780</td><td>HibiScrub Antimicrobiële handreiniger, Molnlycke Health Care</td></tr><tr><td>Cotton buds</td><td>National Veterinary Services, Stoke-on-trent, UK</td><td>213512</td><td>Elke plastic body, katoenen uiteinde is geschikt zodra ze steriel gemaakt door autoclavage.</td></tr><tr><td>Dissecting stereoscope</td><td>Carl Zeiss</td><td>OPMI99</td><td>Resident stukje apparatuur. Elke binoculaire dissectie stereoscoop in staat tot x1-x5 vergroting zal geschikt zijn.</td></tr><tr><td>dissolvable 6-0 sutures</td><td>National Veterinary Services, Stoke-on-trent, UK</td><td>9544</td><td>Absorbeerbare hechtingen Ethicon Gecoat Vicryl 6/0 (Ethicon code: W9981)</td></tr><tr><td>Donut probe holder</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>PHDO</td><td>Probe houder voor muis, moet worden gebruikt met enkele vezel optische sonde wanneer gebruikt met laser Doppler flowmtry machine.</td></tr><tr><td>dumont #5 forceps</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, UK</td><td>500342</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinogen and thrombin sealant</td><td>Baxter, Berkshire, UK</td><td>1502243</td><td>TISSEEL Klaar voor gebruik oplossingen voor Sealant 2 mL</td></tr><tr><td>Gel food</td><td>Datesand group, Manchester, UK</td><td>72065022</td><td>Diet Gel Recovery</td></tr><tr><td>Image display and measuring software package</td><td>3D Slicer</td><td>https://www.slicer.org/</td><td>Versie 4.0</td></tr><tr><td>Image display and measuring software package</td><td>NIH, Maryland, USA</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/index.html</td><td>NIH/ImageJ</td></tr><tr><td>LDF monitor</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>moorVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>micro vannas scissors</td><td>InterFocus Ltd, Linton, UK</td><td>15000-08</td><td>Andere microvannas veerschaar kan worden gebruikt als een alternatief, hoewel fijne punten zijn vereist.</td></tr><tr><td>Microvascular clip</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, UK</td><td>15911</td><td>10 G Vessel Clip</td></tr><tr><td>microvascular clip holders</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, UK</td><td>14189</td><td></td></tr><tr><td>MRI acquisition and analysis software</td><td>Agilent Technologies, Santa Clara, California, USA</td><td>VnmrJ Version 4.2</td><td>Revisie A</td></tr><tr><td>no. 15 scalpel</td><td>Scientific Laboratory Supplies, Nottingham, UK</td><td>INS4678</td><td>Steriele No15 Scalpel - fabrikant nummer P305. Andere leveranciers zijn beschikbaar.</td></tr><tr><td>Non-disolvable 6-0 suture</td><td>National Veterinary Services, Stoke-on-trent, UK</td><td>W529</td><td>Ethicon Mersilk Hechtingen</td></tr><tr><td>Ocular lubricant</td><td>National Veterinary Services, Stoke-on-trent, UK</td><td>847288</td><td>Lacrilube (5100G13)</td></tr><tr><td>Optical matching gel</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>PMG</td><td></td></tr><tr><td>Pulse Oximetry Reader</td><td>Starr Life Sciences Corp., Oakmont, PA, USA</td><td>MouseOx</td><td>MouseOx - rat &amp; muis pulse oximeter &amp; fysiologische monitor Gebruik met muis dij sensor.</td></tr><tr><td>Rehydration gel</td><td>Datesand group, Manchester, UK</td><td>70015022</td><td>HydroGel</td></tr><tr><td>Small hair clippers</td><td>vetproductsuk.com</td><td>HS61</td><td>Contura Cordless trimmer/clippers</td></tr><tr><td>Sterile 0.9 % NaCl Solution</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, UK</td><td>LOCA3528286</td><td>SODIUM CHLORIDE 0.9% W/V INTRAVENOUS INFUSION BP 500 ML IN ECOFLAC&frac12; PLUS</td></tr><tr><td>sterile Petri dish</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, UK</td><td>5168021</td><td>50 mm steriele Petri schaal. Elke merk is geschikt. Minimaal 50 mm diameter is vereist.</td></tr><tr><td>Topical tissue adhesive</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, UK</td><td>503763</td><td>GLUture topische weefsel Adhesive</td></tr><tr><td>Waterproof superglue</td><td>Loctite</td><td>Loctite Superglue Precision Max</td><td>Verkrijgbaar bij de meeste bouwmarkten.</td></tr><tr><td>White paper chip</td><td>Datesand group, Manchester, UK</td><td>CS1BPB</td><td>Pure-O'Cel</td></tr></tbody></table>

occlusie van de middelste cerebrale slagader waardoor reperfusie via gemeenschappelijke halsslagader reparatie in muizen

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

De ischemische beroerte is een belangrijke oorzaak van volwassen langdurige invaliditeit en dood wereldwijd. De huidige behandelingen beschikbaar zijn beperkt, met alleen tissue plasminogen activator (tPA) als een goedgekeurd geneesmiddel behandeling te richten van ischemische beroerte. Huidige onderzoek op het gebied van ischemische beroerte richt zich op meer inzicht te krijgen in de pathofysiologie van beroerte, te ontwikkelen en nieuwe farmaceutische doelstellingen onderzoeken. Betrouwbare experimentele beroerte modellen zijn cruciaal voor de voortgang van mogelijke behandelingen. Het middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO) model is klinisch relevante en de meest gebruikte chirurgische model van ischemische beroerte in knaagdieren. De resultaten van dit model, zoals het volume van de laesie, zijn echter geassocieerd met een hoge mate van variabiliteit, met name in muizen. De alternatieve MCAO model hier beschreven staat de reperfusie van de gemeenschappelijke halsslagader (CCA) en de toegenomen perfusie van het grondgebied van de middelste cerebrale slagader (MCA), met behulp van een weefsel pad met afdichtmiddel fibrinogeen gebaseerde om te herstellen van het schip, en de verbeterde welzijn van de muizen door het vermijden van externe halsslagader (ECA) afbinding. Dit vermindert de afhankelijkheid van de cirkel van Willis, die bekend staat als zeer anatomisch variabele in muizen. Representatieve gegevens blijkt dat de variabiliteit in de laesie volumes tussen de traditionele benadering van de MCAO en de alternatieve benadering die hier beschreven met behulp van deze alternatieve chirurgische aanpak vermindert.

Een totaal van 24 volwassen mannelijke C57BL/6 muizen, met een gewicht van 24 – 31 g ten tijde van de operatie, werden gebruikt in de studie. Één dier stierf na middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO) en één werd uitgesloten als gevolg van chirurgische complicaties. De hier gepresenteerde gegevens zijn afkomstig uit een eerder gepubliceerde werk door de auteurs. Deze werden gebruikt ter illustratie van het effect van schip reparatie op MCAO resultaten11. Alle gegevens zijn uitgedrukt in thr gemiddelde ± standaardafwijking. De gegevens zijn statistisch beoordeeld voor normaliteit met behulp van de test van de omnibus normaliteit D'Agostino-Pearson. Parametrische gegevens werden vergeleken met behulp van de Student t-test (voor twee middelen) en one-way ANOVA met de Sidak test (meerdere betekent). Niet-parametrische gegevens werden vergeleken met behulp van de Mann-Whitney U test. De variabiliteit van de parametrische gegevens werd beoordeeld met behulp van een F-test, en niet-parametrische gegevens variabiliteit werd beoordeeld met behulp van Levene test.
Meestal in de MCAO de procedures, de occluding gloeidraad wordt ingevoegd de CCA en de Europese Rekenkamer is afgebonden om te voorkomen dat deze gloeidraad passeren in de ECA in plaats van de ICA. Een ECA afbinding te vermijden en de toevoeging van analgesie toonde een tendens naar beperkte gewichtsverlies op 48 h post-MCAO, wanneer vergeleken met gegevens uit eerdere studies, genomen door de dezelfde chirurg voor MCAO tegelijkertijd ECA afbinding met geen Analgesie, overwegende dat de LV verscheen onaangetast, Zie Figuur 1.
Muizen onderging een 60 min MCAO-geïnduceerde ischemie gevolgd door reperfusie met CCA vaartuig reparatie of met de typische Afbinding van de CCA-aanpak. Een schematische voorstelling van de ligaturen en unligated gerepareerde CCA is afgebeeld in Figuur 2.
Laser Doppler flowmetrie werd gebruikt voor het bevestigen van de bloed stroom perfusie op het grondgebied van de MCA in MCAO, vóór en na de CCA vaartuig reparatie. Figuur 3 laat zien dat 5 min na de afschaffing van de gloeidraad, de regionale cerebrale doorbloeding (rCBF) aanzienlijk verhoogd in de regio van de hersenen van de MCA. De perfusie werd gehandhaafd tot de reparatie van het vaartuig, met een toename van de perfusie naar het grondgebied van de MCA komt te staan na de CCA vaartuig reparatie, wat suggereert dat de CCA reparatie toegestaan een verhoogde bloedverspreiding naar het ischemische grondgebied in vergelijking tot afhankelijkheid op de cirkel van Willis alleen.
MRI T2-gewogen werd gebruikt om te bepalen van de totale LV en DTI scans werden gebruikt om te bepalen van de kern LV, 48 h na de MCAO. Figuur 4A toont geen significant verschil in de totale of core LV tussen de reparatie en ligaturen procedure groepen. Echter, de variabiliteit van de gegevens voor beide totaal en core LV, zoals beoordeeld met behulp van de Lavene test voor niet-parametrische of de F-test voor parametrische gegevens, werd binnen de CCA reparatie groep aanzienlijk verminderd. De totale LV was onderverdeeld in corticale en subcorticale LV, zoals weergegeven in figuur 4B. De corticale gedeelte was aanzienlijk minder variabele in de CCA reparatie groep, terwijl de sub-corticale gedeelte van de laesie onaangetast tussen de twee procedurele groepen.
Een power-analyse aangegeven dat minder dieren per behandeling groep zouden moeten tonen een daling van 30% van de LV MCAO met CCA reparatie ten opzichte van de typische CCA-afgebonden procedure na, Zie tabel 1. Een machtsovername 1-β = 0,8 en significantieniveau α = 0,05 en een voorspelling van 30% reductie van de LV tussen de hypothetische controle en test groepen werden gebruikt voor de analyse van de macht. Bovendien werd een gelijke variantie tussen de fracties aangenomen. Tabel 1 toont het aantal dieren dat nodig is voor de test en de controlegroepen wanneer beide de typische CCA-afgebonden methode wordt gebruikt of de bijgewerkte CCA reparatie methode, zoals hier beschreven, wordt gebruikt. Merk op dat de testgroep naar een hypothetische testgroep van dieren en de controlegroep verwijst verwijst naar een hypothetische controlegroep; beide groepen zou MCAO ondergaan.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2.jpg"> Figuur 1: gecombineerde analgesie behandeling en de weglating van ECA afbinding op resultaten na MCAO. (A) lichaamsgewicht, weergegeven als een percentage van het gewicht van de pre-MCAO, daalde de eerste 2 d na de MCAO voor beide groepen. De ECA-unligated groep (analgesie behandeld met geen ECA afbinding op MCAO) bleek een tendens naar beperkte gewichtsverlies op de tweede dag na de MCAO. (B) dit deelvenster bevat de laesie volume (mm3) gemeten door standaard triphenyltetrazolium chloride (TTC) kleuring van 48 h na de MCAO. De gegevens die worden weergegeven zijn de gemiddelde ± standaardafwijking. ECA afgebonden: n = 17, ECA unligated: n = 10. Dit cijfer is gewijzigd van Trotman-Lucas et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig2.jpg"> Figuur 2: schematisch weergegeven: de standaardmethode van de CCA en de alternatieve CCA reparatie methode na MCAO. (A) dit schema toont een permanent ligaturen CCA met behulp van niet-oplosbaar hechtingen toegepast aan beide zijden van de CCA incisie, resulterend in de permanente Afbinding van de juiste CCA. (B) dit schema toont de alternatieve CCA reparatie methode. Een kleine weefsel pad bekleed met fibrinogeen en trombine afdichtmiddel wordt gebruikt ter dekking van de incisie CCA, afdichten zodat de volledige perfusie van het recht CCA. Dit cijfer is gewijzigd van Trotman-Lucas et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig3.jpg"> Figuur 3: regionale cerebrale stroom (rCBF) bloedparameters na MCAO. De rCBF gewijzigd 5 min na de verwijdering van de gloeidraad MCAO voor zowel de CCA-afgebonden en CCA-gerepareerd groepen (post-MCAO), ten opzichte van de rCBF tijdens MCAO gemeten. Dit paneel toont de gegevens van de rCBF onmiddellijk vóór de CCA vaartuig reparatie (pre reparatie) en 5 min na de reparatie van de CCA (na reparatie). Aanzienlijke stijging van de rCBF staan 5 min na de verwijdering van de gloeidraad (post-MCAO) in beide groepen. Een extra verhoging van de rCBF wordt weergegeven na de reparatie van de CCA (na reparatie) in de CCA reparatie groep. Geen verschil in de rCBF wordt weergegeven tussen 5 min post-MCAO en pre reparatie. De gegevens die worden weergegeven zijn gecondenseerd uit de geanalyseerde tijdsverloop gegevensrapportage belangrijke tijdstippen, hier als de gemiddelde ± standaardafwijking. CCA afgebonden: n = 10, CCA gerepareerd: n = 10; P < 0,01, ***P < 0.001, ns: niet-significant. Dit cijfer is gewijzigd van Trotman-Lucas et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig4.jpg"> Figuur 4: analyse van het volume van de laesie verkregen door MRI technieken. (A) dit paneel bevat het volume van de laesie (LV, mm3) bij 48 h na MCAO, de totale LV ontleend aan MRI T2-gewogen beelden (totale LV) en de kern LV onttrokken DTI scans en analyse (Core LV). Representatieve beelden tonen het volume van de totale laesie uit een T2 scan segment afbeelding met het DTI kern laesie volume masker toegepast. De variabiliteit binnen de fracties werd aanzienlijk teruggebracht voor zowel het totale LV (P = 0,015, CCA reparatie: n = 10, CCA afgebonden: n = 10, F-test) en de kern LV (P = 0,043, CCA reparatie: n = 9, CCA afgebonden: n = 6, Lavene de test), geschat aan de hand van een F-test voor parametrische gegevens of Levene de test voor niet-parametrische gegevens. (B) dit paneel toont de LV op 48 h na MCAO, ontleend aan MRI T2-gewogen beelden en corticale en subcorticale laesie gebieden verdeeld. De CCA reparatie aanzienlijk verminderd de variabiliteit van de gegevens (P = 0,03, F-test) in de corticale gedeelte van de laesie, maar geen invloed op de gegevens bleek de variabiliteit in de subcorticale gedeelte van de laesie. CCA reparatie: n = 10, CCA afgebonden: n = 10. De gegevens die worden weergegeven zijn de gemiddelde ± standaardafwijking. # P < 0.05 (F-test), xP < 0.05 (Lavene de test). Dit cijfer is gewijzigd van Trotman-Lucas et al. 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Aanpak</td>
			<td>Volume van de laesie (LV, mm3; gemiddelde ± s.d.)</td>
			<td>Macht</td>
			<td>Significantieniveau</td>
			<td>Anticiapted verschil</td>
			<td>De grootte van de groep vereist</td>
		</tr>
<tr>
<td>CCA afgebonden (traditionele benadering)</td>
			<td>94.08 ± 53.79</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0,05</td>
			<td>30%</td>
			<td>
n = 58</td>
		</tr>
<tr>
<td>CCA gerepareerd (nieuwe benadering)</td>
			<td>51.73 ± 22.78</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0,05</td>
			<td>30%</td>
			<td>
n = 35</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabel 1: analyse van het vergelijken van de traditionele CCA afbinding met het alternatief representatieve macht, CCA reparatie methode uitgelegd hier. Deze tabel toont de analyse van de macht om de groepsgrootte van de verwachte nodig voor de detectie van een significant verschil in de LV tussen een groep besturingselementen, de traditionele of alternatieve (nieuwe) aanpak en een testgroep (voorspelde) te berekenen. De tabel ziet u de grootte van de groep als vereist als een macht van 0.8 is verondersteld, een significantieniveau van 0,05 wordt toegepast, en als de voorspelde testgroep toont een verschil van 30% in de LV in vergelijking met de controlegroep. De tabel toont de resultaten voor beide benaderingen van de MCAO (de CCA-afgebonden en het CCA-gerepareerd) om te bepalen of er een verschil in het aantal dieren moet krijgen van een verschil van 30% in de LV. Voor beide methoden, is uitgegaan van een gelijke variantie tussen de test en de controlegroep. Dit cijfer is gewijzigd van Trotman-Lucas et al. 11.

Intraluminale gloeidraad occlusie van de middelste cerebrale slagader is het meest gebruikte in vivo model van experimentele beroerte in knaagdieren. Een alternatieve chirurgische benadering om gemeenschappelijke halsslagader reparatie gebeurt hier, waardoor de reperfusie van de gemeenschappelijke halsslagader en een volledige reperfusie naar het grondgebied van de middelste cerebrale slagader.

Occlusie van de middelste cerebrale slagader waardoor reperfusie via gemeenschappelijke halsslagader reparatie in muizen

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het veld experimentele lijn, zoals hoe u de samenhang met deze modellen verminderen en hoe de reproduceerbaarheid kan worden verbeterd. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het re-perfusie via de gemeenschappelijke halsslagader mogelijk maakt, en daarom niet afhankelijk is van de cirkel van Willis, die anatomisch kan variëren tussen dieren, en daarom kan bijdragen aan de variabiliteit gezien in experimentele uitkomstmaatregelen. Visuele demonstratie van deze methode is van cruciaal belang, omdat de CCA-herstelstappen moeilijk te leren zijn vanwege de technische problemen die gepaard gaan met het gebruik van de kit om ervoor te zorgen dat de CCA volledig patent heeft, na reparatie.Om te beginnen, voor te bereiden en verdoven de muis volgens het testprotocol. Gebruik dan een nummer 15 scalpel mes om een 1,5 cm middellijn incisie op de blootgestelde ventrale nek te maken. Met behulp van stompe dissectie technieken, voorzichtig intrekken van de speekselklieren aan de zijkant, om de luchtpijp bloot.Ontleden dan de gemeenschappelijke halsslagader, of CCA, vrij van het omringende weefsel en vagalzenuw. Na deze, passeren twee kleine delen van een niet-oplosbare 6-0 hechting onder de CCA, dorsale naar de CCA, en ventrale aan de vagale zenuw. Teken een zijden stropdas dichter bij de chirurg, en bind het losjes rond de CCA.Dan losjes binden een tweede zijden stropdas in de richting van de splitsing van de interne en externe halsslagaders. Breng vervolgens een microvasculaire clip net boven de distale das aan, zodat de splitsing niet wordt belemmerd. Gebruik micro veneuze schaar om een klein gaatje in de CCA te maken.Steek een 7-0 siliconen gecoate microfilament in de CCA en ga naar de microvasculaire clip. Draai vervolgens de distale das aan om de gloeidraad op zijn plaats vast te maken. En gebruik cliphouders om de microvasculaire clip te verwijderen.Vervolgens, vooraf de gloeidraad in de interne halsslagader, of ICA. Zodra de gloeidraad hoofd passeert de distale stropdas, trek de das strakker, om bloedverlies te voorkomen. Met behulp van de distale zijden das, til en trek de CCA aan de buitenkant van het lichaam van de muis, en stuur de gloeidraad naar de bocht, voorbij de opening van de pterygopalatine slagader, of PPA.Zodra de gloeidraad op zijn plaats is, zet het vast door de distale zijdeband verder aan te scherpen. Trek aan het einde van de MCAO-periode de gloeidraad in totdat de witte gloeidraadkop duidelijk zichtbaar is. Maak vervolgens de distale CCA-das net genoeg los om de gloeidraadkop het grootste deel van de weg uit het vat te verwijderen.Verwijder vervolgens de gloeidraadkop volledig uit het vat. Plaats hierna een microvasculaire clip in de horizontale positie, in de richting van de CCA-splitsing en naast de distale das. Plaats vervolgens een andere clip onder de proximale CCA-das, in de richting van de chirurg.Gebruik zorgvuldig Dumont 5 tangen om beide zijden banden te verwijderen. En droog het gebied met behulp van steriele wattenstaafjes. Voeg vervolgens Fibrinogen en Thrombin kitoplossingen één en twee toe aan een steriel petrischaaltje.Met behulp van micro veneuze schaar en stompe dissectie techniek, het verkrijgen van een dunne ventrale plak van sternocleidomastoid spier. Neem vervolgens met Behulp van Dumont 5 tangen het tissuepad en meng het gelijkmatig over de Fibrinogen en Thrombin kitoplossingen. Hier is het belangrijk om ervoor te zorgen dat het weefselpad groot genoeg is om de CCA-incisie te bedekken.En zodra het over de twee oplossingen wordt gemengd, moet het onmiddellijk over de incisie worden geplaatst, om over-stolling en slechte hechting te verhinderen. Eenmaal gemengd tussen de twee oplossingen, verwijder het weefsel pad aan de CCA incisie. Plaats het weefsel pad plat naar beneden op de incisie met gemiddelde druk, en open tangen.Verwijder snel de distale microvasculaire clip, terwijl u het weefselkussen op zijn plaats houdt. Vervolgens, langzaam verlichten van de druk van het weefsel pad, waardoor het bloed te stromen onder de incisie gebied. Laat nu langzaam en voorzichtig de druk van de proximale microvasculaire clip los en verwijder deze vervolgens volledig.Het verwijderen van de bovenste clip maakt het mogelijk een kleine hoeveelheid bloed om de kit te activeren. Een gestage afgifte van de distale clip maakt een geleidelijke drukverhoging op de incisieplaats mogelijk, die verder activeert en helpt een mislukte reparatie te voorkomen. Ten slotte, zodra het vat is verzegeld, hecht de wond met oplosbare 6-0 hechtingen.In dit protocol, middelste cerebrale slagader occlusie, of MCAO, werd uitgevoerd op 24 volwassen mannelijke muizen. Een vermijding van ECA ligatie en de toevoeging van analgesie toonde een trend in de richting van verminderde gewichtsverlies op 48 uur na MCAO. Vijf minuten na de verwijdering van filamenten nam de regionale cerebrale bloedstroom aanzienlijk toe in het hersengebied van de MCA.De perfusie werd gehandhaafd tot aan de reparatie van het vat, met een verhoging van perfusie aan het grondgebied MCA, na cca schipreparatie. Dit suggereert dat de CCA reparatie toegestaan verhoogde bloedperfusie naar het ischemische gebied, in vergelijking met de afhankelijkheid van de cirkel van Willis alleen. Een T2 gewogen MRI werd gebruikt om de totale LV en DTI scans te bepalen werden gebruikt om de kern LV te bepalen op 48 uur na MCAO.Er was geen significant verschil tussen deze twee groepen. Interessant is dat een variabiliteit voor totale en kern LV aanzienlijk werd verminderd in de CCA reparatiegroep. Onze analyse wees uit dat minder dieren per behandelingsgroep nodig zouden zijn om een 30% vermindering van LV aan te tonen, na MCAO, met behulp van CCA-reparatie, versus typische CCA-ligatedprocedure.Tijdens een poging tot deze procedure, is het belangrijk om te onthouden om ervoor te zorgen het weefsel pack is van voldoende grootte om de CCA incisie te dekken. Ook is de snelheid belangrijk, om te voorkomen dat de kit over-coagulating, voorafgaand aan het plaatsen van de pad op de CCA.

middle-cerebral-artery-occlusion-allowing-reperfusion-via-common

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Filamenteuze occlusie van het Midden-cerebrale slagader is een gemeenschappelijk model voor het bestuderen van ischemische beroerte in muizen.

Modellering Stroke in Muizen - midden cerebrale slagader occlusie met de gloeidraad Model

De intraluminale midden cerebrale slagader occlusie (MCAO) model is de meest frequente gebruikte model onder experimentele ischemische beroerte modellen. Hier zullen we demonstreren het gehele model in detail met de gids van Laser Doppler flowmetry, en zijn vertegenwoordiger resultaten.

Intraluminale midden cerebrale slagader Occlusie (MCAO) Model voor ischemische beroerte met Laser Doppler Flowmetry Begeleiding in Muizen

De intraluminale cerebralis occlusie bij muizen wordt hierin gepresenteerd. De omvang van herseninfarct wordt beoordeeld door een neurologische score en cresyl violet kleuring, een kleuring met TTC alternatief biedt het grote voordeel te testen in parallel veel belang markers.

Muis Model van Intraluminale mCaO: herseninfarct Evaluatie door cresyl Violet Staining

This video demonstrates the procedure of performing permanent distal middle cerebral artery occlusion, or MCAO, with the common carotid artery, or CCA ligation, in aged rats to model ischemic stroke. This blocks blood flow to the brain, leading to neuronal death and generating a model to study stroke mechanisms and potential treatments.

Inducing Ischemia via Middle Cerebral and Common Carotid Artery Occlusion in a Rat Model

Om de pathofysiologie van beroerte te begrijpen, is het belangrijk betrouwbare modellen. Dit document zal een van de meest gebruikte takt modellen beschrijven in muizen, genaamd de middelste cerebrale slagader occlusie (MCAo) model (ook aangeduid als de intraluminale filament of hechtdraad model) met reperfusie.

Chirurgische Aanpak voor midden cerebrale slagader occlusie en reperfusie Induced Stroke in Muizen

We beschrijven een muismodel van een beroerte veroorzaakt door de occlusie van de middelste hersenslagader met behulp van een met siliconen omhulde naald. Het protocol kan worden toegepast om een permanente occlusie of een tijdelijke ischemie te induceren, gevolgd door reperfusion.

Inductie van ischemische beroerte en ischemie-reperfusie in Muizen met behulp van het Midden-slagader occlusie Techniek en Visualisatie van Infarct Area

Een muismodel van cerebrale ischemie-reperfusie is gevestigd te onderzoeken de pathofysiologie van een beroerte. We distally de rechts midden cerebrale slagader en rechts gemeenschappelijke halsslagader afbinden en bloedstroom herstellen na 10 of 40 min van ischemie.

Muismodel van twee-schip occlusie van cerebrale ischemie-reperfusie

Het protocol heeft tot doel methoden te bieden voor encefalomyosynangiose - enting van een vasculaire temporalis-spierflap op het piale oppervlak van ischemisch hersenweefsel - voor de behandeling van niet-moyamoya acute ischemische beroerte. De werkzaamheid van de aanpak bij het verhogen van angiogenese wordt geëvalueerd met behulp van een voorbijgaand midden-hersenslagader occlusiemodel bij muizen.

Een model voor encefalomyosynangiose behandeling na middelste cerebrale arterie occlusie-geïnduceerde beroerte bij muizen

Dit protocol beschrijft het model van voorbijgaande focale cerebrale ischemie bij muizen door intraluminale occlusie van de middelste hersenslagader. Daarnaast worden voorbeelden van uitkomstbeoordeling getoond met behulp van magnetische resonantiebeeldvorming en gedragstests.

Voorbijgaand occlusiemodel van de middelste cerebrale slagader van een beroerte

Dit protocol presenteert een stapsgewijze handleiding voor onderzoekers om de occlusieprocedure van de middelste hersenslagader bij muizen uit te voeren met behulp van de gemodificeerde Longa externe halsslagadermethode. Wijzigingen die in dit artikel worden gepresenteerd, zijn bedoeld om de nauwkeurigheid van de occlusie van de middelste hersenslagader te vergroten en volledige reperfusie te garanderen.

Optimalisatie van de Longa occlusiemethode van de middelste cerebrale slagader voor volledige reperfusie

Dit protocol beschrijft het proces van voorbereiding op reperfusie van occlusie van de middelste hersenslagader via de gemeenschappelijke halsslagader.

Een gemodificeerd modelpreparaat voor reperfusie van occlusie van de middelste cerebrale slagader

Leer een chirurgische techniek voor reparatie van de arteria carotis communis bij muizen om reperfusie naar de arteria cerebri media te verbeteren. Deze methode vermindert variabiliteit in beroertemodellen en verhoogt de reproduceerbaarheid van experimentele resultaten.

Occlusie van de middelste cerebrale slagader waardoor reperfusie via gemeenschappelijke halsslagader reparatie in muizen

Meer video's verkennen