7 januari 2019
Hier presenteren we een protocol stellen de depressieve muismodel, observeren het gedrag veranderingen die zijn gekoppeld aan chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) en evalueren van het effect van de anti-depressie van Xiaoyaosan.
Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van depressie, preventie en behandeling met behulp van traditionele Chinese geneeskunde zoals Xiaoyaosan, een veel gebruikte formule in de psychologische ziekte voor duizenden jaren in China. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is om een experimentele ondersteuning voor de beschikbaarheid van Xiaoyaosan in de preventie en behandeling van depressie. De implicaties van deze techniek uit te breiden tot pre-kliniek onderzoek naar de behandeling van depressie, omdat het een gestandaardiseerd protocol voor het waarnemen van de anti-depressivum effect met behulp van traditionele Chinese geneeskunde.
Over het algemeen zullen personen die nieuw zijn bij deze methode het moeilijk hebben omdat het modelleringsproces erg ingewikkeld is en de belangrijke meetparameters voor depressief gedrag niet gemakkelijk te beheersen zijn. Om depressie te induceren, bloot muizen dagelijks aan een 2 van de volgende 7 stressoren voor 21 opeenvolgende dagen. Let op het toedienen van medicijnen aan de muizen in de twee behandelingsgroepen elke dag voor het modelleren en 0,5 milliliter gedestilleerd water te verstrekken aan de muizen in de controle- en modelgroepen.
Stel muizen bloot aan voedselgebrek door het voer van elke kooi te legen. Of watertekort door het verwijderen van de fles water voor 24 uur. Stel muizen bloot aan terughoudendheidstress, waarbij de muis 3 uur lang in een klein plastic bad wordt vastgehouden.
Of een lege kooi met de vulling verwijderd. Als een andere optie, bloot muizen aan natte en vervuilde kooien door het gieten van water in elke kooi en het houden van nat voor 24 uur. Stel muizen bloot aan overvolle kooien waarin vijf muizen 25 uur lang in één kooi worden geplaatst.
Voor de laatste optie, bloot muizen aan ijskoud zwemmen door te dwingen elke muis om te zwemmen in een helder glazen aquarium met ijswater voor vijf minuten. Tot slot, noteer de vacht staat en lichaamsgewicht wekelijks tot het einde van het modelleren op dag 21 en bereken de totale score van de vacht staat. Op de eerste twee dagen van de sucrose voorkeurstest, huis de muizen individueel met twee flessen gevuld met kraanwater.
Voor de komende twee dagen, geef de muizen twee flessen gevuld met 1%sucrose oplossing. Op de laatste dag, geef de muizen twee flessen voor 24 uur, een met kraanwater en de andere met 1%sucrose oplossing. Om een zijvoorkeur van de muizen in het drinken van gedrag te elimineren, schakelt u de positie van de twee flessen na 12 uur.
Nota van het volume van zowel de verbruikte sacharoseoplossing als kraanwater. Bereken ten slotte de sucrosevoorkeur. Begin met het verdelen van de vloer van een vierzijdige houten zwarte glansloze doos in 25 gelijke vierkanten door blauwe lijnen.
Reinig de open velddoos met 5% alcohol voorafgaand aan de toegang van elke muis. Plaats vervolgens de muis in het midden van het open veld. Hang een high definition digitale camera ongeveer 200 centimeter recht boven het veld en neem het gedrag van elke muis gedurende 5 minuten.
Tot slot, evalueren en analyseren van de muizen gedragsvideo door de video tracking systeem software en de gegevens van de totale loopafstand en het aantal vermeldingen in het centrum zone op te nemen. De vachttoestand van muizen werd met name verbeterd na continue behandeling met Xiaoyaosan of Fluoxetine in vergelijking met de modelgroep. Een aanzienlijke vermindering van het lichaamsgewicht manifesteerde zich in de derde week.
Bij baseline hadden muizen in alle groepen een vergelijkbare sucrose voorkeur. Echter, een aanzienlijke daling van de sucrose voorkeur werd waargenomen na 3 weken van stress procedure in de modelgroep. Verder, alle muizen vertoonden een soortgelijke gedragstoestand voor stress blootstelling bij baseline.
Echter, na stress blootstelling gedurende 3 weken, de totale afstand verplaatst in 5 minuten was aanzienlijk lager in de modelgroep dan de controlegroep. Het aantal vermeldingen in de centrale zone van de modelgroep is ook aanzienlijk afgenomen ten opzichte van de controlegroep. Tijdens een poging tot deze procedure, is het belangrijk om te onthouden om dit gedrag test uit te voeren en het toedienen van de twee geneeskunde, 1 tot 2 uur voor de dagelijkse modellering om de effecten van het geneesmiddel zelf te bevestigen.
Na deze procedure kunnen andere methoden zoals gedwongen zwemtest worden uitgevoerd om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals kan Xiaoyaosan het wanhopige gedrag van depressieve muizen in de gedwongen zwemtest verbeteren? Nadat het ontwikkeling, deze techniek de weg vrijgemaakt voor onderzoekers in de exploratie van het effect en het onderliggende mechanisme van de Chinese geneeskunde op het gebied van preventie en behandeling van depressie.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit artikel presenteert een protocol voor het vestigen van een muismodel voor depressie via chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) en evalueert de antidepressieve effecten van Xiaoyaosan, een traditioneel Chinees geneesmiddel.
Gestandaardiseerde gedragsmodellen, zoals chronische onvoorspelbare milde stress (CUMS) bij muizen, zijn essentieel voor het evalueren van nieuwe antidepressiva-kandidaten en het verminderen van risico's bij neuropsychiatrische middelen in een vroeg stadium. Kwantitatieve gedragsmatige eindpunten en gecontroleerde groepvergelijkingen maken een voorspellend vertrouwen in de target-engagement en de beoordeling van de functionele uitkomst mogelijk. Dit protocol ondersteunt de translationele continuïteit van de ontdekkingsfase tot de preklinische evaluatie van neuroactieve verbindingen, inclusief kandidaten uit de traditionele geneeskunde.
Dit protocol positioneert gedragstesten op basis van CUMS als een brug van vroege ontdekking naar preklinische evaluatie van lead-verbindingen bij de ontwikkeling van neuropsychiatrische geneesmiddelen.