Name: Het snijden en drijvende methode voor paraffine-ingebedde weefsel voor het segmenteren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-05T15:30:00.000+00:00
Duration: 5 min
Description: Leer een verbeterde paraffine-inbeddingsmethode voor histologisch onderzoek met muis- en zebrafisweefsel. Dit protocol verhoogt de opbrengst van intacte secties en versnelt het snijproces aanzienlijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd gesteund door de National Natural Science Foundation of China (Grant nr. 31400936, 31460260) en de Natural Science Foundation van Jiangxi provincie van China (20171BAB215020). Wij danken ook de gezamenlijk programma tussen Nanchang Universiteit en Queen Mary University of London voor de ondersteuning van dit werk.

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de Animal Care en gebruik Comité van Nanchang Universiteit.
1. Monteer de apparatuur en sluit de microtoom
<ol><li>Het ontwerp van de parameter per de eisen (aanvullende Figuur 1).</li>
	<li>De parameter naar een plaatselijke fabriek voor de vervaardiging van de acryl planken leggen.</li>
	<li>Monteren van alle onderdelen in volgorde: chloroform kunt combineren 7 commerciële acryl planken in een tank met een sectie kanaal en water bad (Figuur 1). Let op: Chloroform produceert giftige stoffen bijeenkomt licht en zuurstof. Monteer het toestel in een zuurkast.</li>
	<li>Installeer de tubulaire elektrische verwarmingselement door het gat in acryl bestuur #1 (figuur 2A, pijlpunt).</li>
	<li>Om de temperatuur controller installeren, maken een klein gaatje op de #2 acryl bord met behulp van een elektrische boor en installeren van de temperatuur-detector (figuur 2A, pijl). Installeer een digitale thermostaat op de tank (figuur 2A). Opmerking: De temperatuur-detector moet binnen 1 cm onder het wateroppervlak.</li>
	<li>Macht om toegang te verlenen, de kruisspanning onder 24 V voordat ik overga op de apparatuur.</li>
	<li>Verwijder de sectie afval lade uit de microtoom.</li>
	<li>Het koppelen van het kanaal van de secties met de microtoom Messenhouder met neutrale silicone sealant (figuur 2B). Opmerking: neutrale silicone sealant boven de bovenkant van het blad niet smeren zodat het oude blad is gemakkelijk te vervangen.</li>
	<li>Droog 's nachts om de chloroform en neutrale silicone sealant tijd om te stollen.</li>
	<li>Het mes op de meshouder installeren. Giet water in het waterbad (figuur 2C). Het wateroppervlak moet enkel raken de top van het blad (figuur 2D, pijl hoofd).</li>
</ol>2. paraffine segmenteren
Opmerking: Puin verzamelt vaak op de randen van het boven- of ondergrens van de wax blok en het wateroppervlak. Dit puin moet regelmatig worden gewist.
<ol><li>
Conventionele paraffine afdelen10uit te voeren.
	<ol>
<li>Klem de paraffine-ingebedde specimen op rotary microtome en plaats het mes in een messenhouder.</li>
		<li>Zet de handknop en afdeling van het model.</li>
		<li>Het lint van paraffine gesegmenteerd overbrengen in de 38.5 ° C warm waterbad.</li>
		<li>Pick up die de secties op de Microscoop vanaf het wateroppervlak na ontvouwen glijden.</li>
		<li>De dia's in een oven bij 42 ° C's nachts droog.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Verbeterde paraffine segmenteren (Figuur 3)
	<ol>
<li>Schakel de apparatuur in.</li>
		<li>Open de kachel met temperatuur detectieschakeloptie en de gerichte temperatuur tussen 38.0 ° C tot 40.0 ° C gedurende 1 uur op voorhand te warm het water instellen.</li>
		<li>Wijzigen van het blok van de paraffine overgenomen door paraffine insluiten; vervolgens plaatst u het blok paraffine op van de microtoom cassette klem en vergrendelen. Opmerking: De superieure en inferieure grenzen van de paraffine blok moeten worden gewijzigd horizontaal om te voorkomen dat het lint van de sectie van de vorming van een boog en steeds kunnen doorstromen naar het kanaal van de smalle secties.</li>
		<li>Aanpak snel het monster door snijden dikker secties.</li>
		<li>Aangepast aan de dikte van een geschikt sectie (10 µm voor volwassen muis hersenen, volwassen muis nieren en embryo muis hersenen, 4 µm voor zebrafish ogen). Zet de handknop en de secties treedt automatisch het kanaal van de secties en bad.</li>
		<li>Het gedeelte van het model in een langzame en uniforme snijden beroerte (figuur 3A). Opmerking: Thethickness van de eerste sectie zal worden gewijzigd nadat de handknop is gestopt voor een paar minuten. De disposable messen moeten worden vervangen wanneer de secties opeenvolgende krassen hebben.</li>
		<li>Het begeleiden van de secties in de bad kamer te zweven in een lijn (figuur 3B, 3 C). Opmerking: Als de kopsectie houdt zich aan de muur van de kamer, gebruik een borstel-gids om het drijvende te houden.</li>
		<li>Secties in Microscoop dia's te houden. Na de secties volledig ontvouwen in het waterbad, aparte verschillende secties met een pincet. Dan halen ze uit het waterbad naar de Microscoop dia's (figuur 3D). Opmerking: Secties moeten worden opgepikt vanaf de achterkant van het waterbad, zoals die in het kanaal van de secties en de voorste van het waterbad zal nog niet volledig ontvouwen.</li>
		<li>Droog de dia's door ze te plaatsen in een oven van 42 ° C's nachts. De dia's kunnen vervolgens worden opgeslagen op kamertemperatuur voor onbepaalde tijd.</li>
	</ol>
</li>
	<li>De Haematoxyline-eosine (HE) kleuring omwille van de evaluatie van de verbeterde methode8gebruiken</li>
</ol>

<ol><li>Chung, K., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23722210">CLARITY for mapping the nervous system.</a> Nature Methods. 10 (6), 508-513 (2013).</li>
<li>Fujita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+neuron+differentiation+in+the+central+nervous+system+by+tritiated+thymidine+autoradiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Analysis of neuron differentiation in the central nervous system by tritiated thymidine autoradiography.</a> Journal of Comparative Neurology. 122 (3), 311-327 (1964).</li>
<li>Mironov, V., Boland, T., Trusk, T., Forgacs, G., Markwald, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+printing%3A+Computer-aided+jet-based+3D+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Organ printing: Computer-aided jet-based 3D tissue engineering.</a> Trends in Biotechnology. 21 (4), 157-161 (2003).</li>
<li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryosectioning+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Cryosectioning tissues.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 3 (8), (2008).</li>
<li>Viebahn, C., Luttenberg, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+anti-roll+plate+as+a+remedy+for+the+ill-effects+of+electrical+charge+during+cryosectioning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+and+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">A modified anti-roll plate as a remedy for the ill-effects of electrical charge during cryosectioning.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 37 (7), 1157-1160 (1989).</li>
<li>Onozato, M. L., Hammond, S., Merren, M., Yagi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+completely+automated+tissue-sectioning+machine+for+paraffin+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Pathology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a completely automated tissue-sectioning machine for paraffin blocks.</a> Journal of Clinical Pathology. 66 (2), 151-154 (2013).</li>
<li>Sabaliauskas, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+zebrafish+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">High-throughput zebrafish histology.</a> Methods. 39 (3), 246-254 (2006).</li>
<li>Chen, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid-Cut%3A+An+Improved+Sectioning+Method+for+Recalcitrant+Plant+Tissue+Samples%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54754(2016).</li>
<li>Kucherenko, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paraffin-Embedded+and+Frozen+Sections+of+Drosophila+Adult+Muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Paraffin-Embedded and Frozen Sections of Drosophila Adult Muscles.</a> Journal of Visualized Experiments. (46), e2438(2010).</li>
<li>Cornell, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paraffin+Embedding+and+Thin+Sectioning+of+Microbial+Colony+Biofilms+for+Microscopic+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Paraffin Embedding and Thin Sectioning of Microbial Colony Biofilms for Microscopic Analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (133), e57196(2018).</li>
<li>Whiteland, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+detection+of+T-cell+subsets+and+other+leukocytes+in+paraffin-embedded+rat+and+mouse+tissues+with+monoclonal+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+and+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical detection of T-cell subsets and other leukocytes in paraffin-embedded rat and mouse tissues with monoclonal antibodies.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 43 (3), 313-320 (1995).</li>
<li>Tucker, D. K., Foley, J. F., Bouknight, S. A., Fenton, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sectioning+Mammary+Gland+Whole+Mounts+for+Lesion+Identification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e55796(2017).</li>
<li>Venegas-Pino, D. E., Banko, N., Khan, M. I., Shi, Y., Werstuck, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Analysis+and+Characterization+of+Atherosclerotic+Lesions+in+the+Murine+Aortic+Sinus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus.</a> Journal of Visualized Experiments. (82), e50933(2013).</li>
<li>Lau, S. K., Chu, P. G., Weiss, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD163%3A+A+specific+marker+of+macrophages+in+paraffin-embedded+tissue+samples%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+Pathology%22%5BJournal%5D)">CD163: A specific marker of macrophages in paraffin-embedded tissue samples.</a> American Journal of Clinical Pathology. 122 (5), 794-801 (2004).</li>
<li>Campbell-Thompson, M. L., Heiple, T., Montgomery, E., Zhang, L., Schneider, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staining+Protocols+for+Human+Pancreatic+Islets%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Staining Protocols for Human Pancreatic Islets.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e4068(2012).</li>
</ol>

De auteurs hebben een patent op dit apparaat en verklaren geen concurrerende belangen.

Verbeteren van paraffine sectie morfologie en oplossen van het probleem van tijdverlies tijdens het conventionele paraffine afdelen, we een verbeterde paraffine afdelen methode die snijden en ontplooiing combineert gecreëerd. Deze verbeterde methode is gebaseerd op eenvoudige apparatuur die bestaat uit een sectie kanaal, een bad met water en een kachel met een temperatuur detectieschakeloptie. De sectie lint treedt het waterbad via het kanaal van de sectie en ontvouwt zich automatisch tijdens het snijden. Deze methode ve...

Morfologische studie is belangrijk in het biologisch onderzoek. Hoewel de nieuwe technologie heeft toegestaan onderzoekers te observeren hun doelstellingen rechtstreeks vanuit het hele weefsel of organismen1,2,3, snijden het specimen in dunne secties, gevolgd door de kleuring, blijft de primaire methode fornot enige weefsel morfologie maar ook eiwit gericht op direct in het weefsel. De lichte microscopie van gebruikt drie typen secties: paraffine, bevroren, en semithin. Hoewel cryosectioning gemeenschappelijk is voor de bescherming van de antigenicity van het weefsel, en de voorbereiding van het monster simpel is, is de morfologie van de ingehouden weefsel slecht en ongeschikt voor dunne vectorafbeeldingsbestanden4,5. Paraffine segmenteren is de meest gebruikte methode voor het tentoonstellen van goed bewaarde morfologie. Zoals de specimens zijn helemaal uitgedroogd en ingebed in de wax, kunnen de paraffineblokken voor onbepaalde tijd worden opgeslagen. Daarnaast produceert paraffine afdelen dunne secties die toegankelijker maken van biologische sonde in verdere experimenten en cel laag overlay in de Z-richting te verminderen.
Conventionele paraffine segmenteren is echter vervelend en exploitant vaardigheid vereist. Paraffine secties ondergaan fixatie, uitdroging, insluiten, snijden en zweven. Bovenal is sectie linten overzetten van de meshouder naar het waterbad noodzakelijk maar moeilijk voor junior exploitanten. Vooral in droge lucht, de sectie linten zal draai als gevolg van statische elektriciteit en zijn moeilijk te ontvouwen op het warme water. Ter verbetering van de afdeling worden kwaliteit, bevochtigen van het oppervlak van de blootgestelde weefsel tussen microtoom blade passeert, koeling van de wax blokken door ze onder te dompelen in ijs water, of het verhogen van de luchtvochtigheid met een luchtbevochtiger in de buurt van de microtoom aanbevolen6,7 . Nieuwere methoden ter verbetering van paraffine afdelen zijn hybride paraffine insluiten, cryosectioning8en commerciële afdeling overdracht systeem bijstand9. Hoewel deze methoden gedeeltelijk paraffine verbeteren afdelen van snelheid en kwaliteit, ze maken afdelen veel omslachtiger, en commerciële sectie overdracht systemen zijn duur.
In dit protocol, we laten zien hoe maak je eenvoudig, goedkoop en flexibel apparatuur stap voor stap, die kan worden aangesloten op de meshouder van rotary microtome. Deze apparatuur bestaat uit een sectie kanaal, een bad met water en een kachel met een temperatuur detectieschakeloptie. Na het uitsnijden, tientallen secties stromen in de sectie kanaal en voer het waterbad rechtstreeks, dus automatisch ontvouwen. Dit verbetert de efficiency van paraffine afdelen en maakt deze technologie geschikter. Met behulp van deze methode, meer volwassen muis hippocampal secties, volwassen muis nier secties, embryonale 15,5 dagen oude (E15.5) muis hersenen secties en volwassen zebrafish oog secties werden geoogst in minder tijd en morfologisch meer intact gebleven. Deze methode kan ook worden gebruikt voor andere weefselsteekproeven waarvoor versnelde paraffine afdelen terwijl het vermijden van verlies van onderscheid van de sectie.

<table><tbody><tr><td>Incubator</td><td>Boekel Scientific</td><td>133000-2</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol&nbsp;</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>Xyleen&nbsp;</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid</td><td>1330-20-7</td><td></td></tr><tr><td>Paraplast</td><td>Leica</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>Verwarmde paraffine-inbeddingsmodule</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Commercieel acrylbord</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trichloormethaand</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid</td><td>67-66-3</td><td></td></tr><tr><td>Rendier elektrisch verwarmingselement(12 V 200 W)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Temperatuurregelaar(12 V 120 W)</td><td>Mingsuo</td><td>XH-W3002</td><td></td></tr><tr><td>Roterende microtoom&nbsp;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Neutraal siliconen dichtingsmiddel</td><td></td><td></td><td>Koppel de waterkanaal met de microtoom messenhouder</td></tr><tr><td>Spanningstransformator</td><td>Dearll</td><td>S-250-12</td><td></td></tr><tr><td>Wegwerpblad</td><td>Accu-Edge</td><td>4689</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxyline</td><td>Baso Diagnostics Inc.</td><td>BA-4025</td><td></td></tr><tr><td>Eosine&nbsp;</td><td>Baso Diagnostics Inc.</td><td>BA-4025</td><td></td></tr><tr><td>Microslide</td><td>Sail Brand</td><td>7105</td><td></td></tr><tr><td>Neutraal balsem</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid</td><td>10004160</td><td></td></tr><tr><td>Dekglas&nbsp;</td><td>Citoglas</td><td>10212424C</td><td></td></tr><tr><td>Microscoop</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zoutzuur</td><td>Xilong Chemical</td><td>7647-01-0</td><td></td></tr><tr><td>Waterbad voor paraffine secties</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HistoCore Arcadia C&nbsp;- Koude Plaat</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>paraffine afstotende spray&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>9990420</td><td></td></tr></tbody></table>

het snijden en drijvende methode voor paraffine-ingebedde weefsel voor het segmenteren

The Cutting and Floating Method for Paraffin-embedded Tissue for Sectioning

Afdelen van het weefsel van paraffine-ingebedde wordt wijd gebruikt in de histologie en pathologie. Het is echter vervelend. Ter verbetering van deze methode, hebben verschillende commerciële bedrijven bedacht complexe sectie overdracht systemen met behulp van vloeibaar water. Om deze technologie te vereenvoudigen, wij gemaakt een eenvoudige methode om met behulp van zelfgemaakte apparatuur die combineert knippen en drijvende binnen een eenvoudige thermostatische kamer; Daarom voert de secties automatisch het waterbad op het wateroppervlak. De hippocampus van volwassen muis hersenen, volwassen muis nieren, hersenen van muis embryonale en volwassen zebrafish ogen werden gesneden met behulp van zowel conventionele paraffine segmenteren en de onderhavige methode voor vergelijking. Statistische analyse toont aan dat onze verbeterde methode tijd bespaarde en hogere kwaliteit secties geproduceerd. Daarnaast is het gemakkelijk voor junior exploitanten paraffine segmenteren voor een hele specimen in een korte tijd.

De verbeterde methode steeg het aantal intact paraffine secties. We testten deze nieuwe methode op volwassen muis hippocampal weefsel, volwassen muis nieren, hersenen embryonale muis en zebrafish ogen. Water werd toegevoegd aan de tank en de temperatuur van het water werd gehandhaafd tussen 38.0 ° C tot 40.0 ° C. Ze waren na een serieel voorbereiding van de weefselmonsters, gesegmenteerd en in vergelijking met conventionele segmenteren. De nieuwe methode voorkwam sectie nederlaag en steeg...

Hier presenteren we een protocol om paraffine segmenteren. Deze methode combineert snijden en zwevende met behulp van een eenvoudige thermostatische kamer om te voorkomen dat het proces van de overdracht vereist met de conventionele methode. Dientengevolge, waren de efficiëntie en het aantal intact paraffine secties sterk verbeterd.

Het snijden en drijvende methode voor paraffine-ingebedde weefsel voor het segmenteren

Sectioning of the paraffin-embedded tissue is widely used in histology and pathology. However, it is tedious. To improve this method, several commercial ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het morfologische veld, zoals paraffine-sectie. Het grote voordeel van deze techniek is dat het snijden en de vouwprocedure culmineren en het overdrachtsproces vermijden dat vereist is door de conventionele methode. Om te beginnen, verzamel alle voorgefabriceerde onderdelen in een afzuigkap.Gebruik chloroform om de zeven acrylplaten te combineren, zoals hier getoond. Het eindproduct zal een tank zijn uitgerust met een sectiekanaal en een waterbad. Installeer het buisvormige elektrische verwarmingselement door het gat in acrylplaat nummer twee.Maak met een elektrische boor een klein gaatje in acrylplaat nummer zeven en installeer een digitaal thermostaat op de tank, ervoor zorgen dat het minimaal een centimeter onder het niveau van het beoogde wateroppervlak is, wat wordt aangegeven door de zwarte stip op de tank. Pas de spanning aan zodat deze lager is dan 24 volt voordat u de apparatuur inschakelt. Verwijder de sectie-afvallade uit de microtoom.Gebruik vervolgens neutrale siliconenkit om het sectiekanaal te verbinden met de bladhouder van de microtoom, zorg ervoor dat er geen kit boven de bovenkant van het mes

the-cutting-floating-method-for-paraffin-embedded-tissue-for

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

The following video describes how to preserve morphology of a tissue with formalin fixation and paraffin embedding.

Formalin-Fixed Paraffin Embedded (FFPE) Tissue Preservation: A Method for Studying Tissue Morphology

In this video, we demonstrate the processing of FFPE or formalin-fixed paraffin-embedded sections obtained from gastrointestinal tumor tissue. The deparaffinization and rehydration steps allow the processing of the tissue specimen for subsequent analytical applications.

Deparaffinization and Rehydration of Tissue Sections: A Two-step Procedure to Remove Paraffin Wax from FFPE Tissue Slides Followed by Tissue Rehydration

We beschrijven een ovariële rage pad transplantatie assay die geschikt zijn voor studies van normale en getransformeerde epitheel van het vrouwelijke voortplantingssysteem. De muis vetkussentje maakt transplantatie van grote weefsel fragmenten, is gemakkelijk te bereiken voor een operatie en beeldvorming, en biedt de meest gunstige natuurlijke omgeving voor weefsels van Müller oorsprong.

Transplantatie in de muis ovariële vet pad

Dit protocol beschrijft een eenvoudige Hybrid-Cut methode voor weefselsecties die nuttig is voor moeilijk verwerkbare plantweefsels. Goede kwaliteit weefselsecties maken anatomische studies en andere biologische studies mogelijk, inclusief in situ hybridisatie (ISH).

Hybride-Cut: een verbeterde Sectioning Methode voor Recalcitrante plantenweefsel Samples

We ontwikkelden een methode om succesvol te verwijderen, verwerken, delen en vlek voor histopathologische evaluatie, mammariumweefsel dat oorspronkelijk op glijbanen was vastgezet als gehele mounts. Deze methode kan de verzameling en evaluatie van de hele membraan van de borstklier bevorderen in onderzoeken voor reproductieve en ontwikkelingstest.

Sectie Mammary Gland Whole Mounts voor Lesion Identificatie

Fluorescentie in situ hybridisatie (FISH) is vaak vereist in combinatie met histopathologie en moleculaire diagnostiek voor selectie van therapie in gepersonaliseerde geneeskunde. Een nieuwe niet-kruis-mailkoppeling, formaline-gratis weefsel-fixeerspray waarmee hoge kwaliteit morfologische, moleculaire en vis analyses van het zelfde model door toevoeging van een na fixatie stap voordat vis wordt aangeboden.

Protocol voor HER2 vissen combineren van de voordelen van Cryo-behoud en formaline fixatie met een niet-kruis-mailkoppeling, formaline-gratis weefsel fixatief

We beschrijven fixatie, paraffine insluiten en dunne vectorafbeeldingsbestanden technieken voor microbiële kolonie biofilms. In bereid monsters, kunnen biofilm substructuur en verslaggever expressiepatronen worden gevisualiseerd door microscopie.

Paraffine insluiten en dunne afdelen van microbiële kolonie Biofilms voor microscopische analyse

Ex vivo alvleesklier islet studies zijn belangrijk voor onderzoek naar diabetes. Bestaande technieken om te studeren van gekweekte eilandjes in hun oorspronkelijke 3-dimensionale architectuur zijn zelden gebruikte, tijdrovend en inefficiënt. Dit werk beschrijft een nieuwe, eenvoudige en efficiënte methode voor het genereren van kwalitatief hoogwaardige paraffine secties van hele gekweekte eilandjes.

Alvleesklier Islet insluiten voor paraffine secties

Wij bieden een methode voor de generatie, de teelt en de systematische analyse van organotypic plakjes afgeleid van lymfkliertest Long tumoren. Ook beschrijven we hoe u kunt optimaliseren voor segment dikte en drug concentraties te behandelen tumor segmenten te selecteren.

Vaststelling en analyse van Tumor segment Explants als een voorwaarde voor het kenmerkende testen

Dit artikel beschrijft een gedetailleerd protocol voor het produceren van een betrouwbaar en reproduceerbaar dun baarmoederslijmvlies met een zeer laag sterftecijfer en minimale intra-uteriene verklevingen door binnen 1-3 minuten 95% ethanol in de baarmoeder van de muis te injecteren.

Een muismodel van dun endometrium opstellen

Leer een verbeterde paraffine-inbeddingsmethode voor histologisch onderzoek met muis- en zebrafisweefsel. Dit protocol verhoogt de opbrengst van intacte secties en versnelt het snijproces aanzienlijk.

Het snijden en drijvende methode voor paraffine-ingebedde weefsel voor het segmenteren

Meer video's verkennen