Name: Angst stress-Enhanced Learning, een robuuste knaagdier Model van Posttraumatische Stress-Stoornis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Leer stress-enhanced fear learning voor gedragsneurowetenschap bij knaagdieren. Deze methode biedt een robuust en betrouwbaar model om de biologische mechanismen van PTSS te bestuderen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gefinancierd door nationale Instituut van gezondheid R01AA026530 (MSF), Staglin centrum voor hersenen en gedrags gezondheid (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1 NARSAD 26612 (AKR) en NSF DGE-1650604 (SG).

1. onderwerpen
<ol><li>Ratten<ol>
<li>Bestel ratten te komen wanneer ze ongeveer 90 dagen oud en single-gehuisvest in standaard rat kooien. Opmerking: Interne behuizing wordt geadviseerd, zoals groepshuisvesting variabiliteit te wijten aan interacties tussen dieren in hun kooi produceert, vooral na blootstelling van de stress. SEFL is aangetoond bij mannelijke en vrouwelijke ratten, in lange-Evans en Sprague-Dawley ratten en bij ratten niet ouder dan 19 dagen oude7,10.</li>
		<li>Dieren willekeurig toewijzen in minstens twee voorwaarden: trauma (n = 8) en geen trauma (n = 8) (Zie Rau et al. 5 extra beperkende voorwaarden).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Muizen<ol>
<li>Bestel muizen te komen wanneer ze ongeveer 60 dagen oud en single-gehuisvest in standaardmuis kooien. Single-huis de muizen gedurende ten minste 4 weken vóór trauma en gedurende de duur van het experiment.</li>
		<li>Dieren willekeurig toewijzen in minstens twee voorwaarden: trauma (n = 8) en geen trauma (n = 8).</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. apparatuur Setup
<ol><li>Een set van vreesconditionering kamers instellen om te dienen als kader A en een tweede set van vreesconditionering kamers om te dienen als kader B (Zie Materialen tabel). Plaats elke vreesconditionering kamer binnen een geluid-verzachtende kast ter voorkoming van de intrusie van buitengeluid (Zie Materialen tabel).<ol>
<li>Ervoor zorgen dat een methode voor het verlichten van de kamers met zichtbaar licht (zoals een witte overhead huis licht) is aanwezig in de kamers bijeenkomen Context een (Zie Materialen tabel).</li>
		<li>Ervoor zorgen dat verschillende oplossingen beschikbaar voor het schoonmaken van de kamers tussen elk dier en verschillende geuren voorzien in elke kamer (bijv., verdunde oplossing en 1% azijnzuur reiniging). Opmerking: Het is cruciaal dat dier gegenereerde geuren geëlimineerd11 worden.</li>
		<li>Plaatsen kunststof inzetstukken in Context B bij de interne indeling van de twee contexten differentiëren. Een zwart Plexiglas driehoekige invoegen wordt aanbevolen. U kunt ook een witte plastic folie kunt maken van een gebogen rug muur (Zie Materialen tabel).</li>
		<li>Schakel raster vloeren in elke angst conditionering van de kamer voor de levering van de footshock, met behulp van een ander rooster patroon voor elke context om te onderscheiden van de vloer textuur tussen contexten (Zie Materialen tabel). Opmerking: Voldoende duidelijk raster patronen bevatten vlakke rasters (alle balken in een enkele horizontaal vlak gerangschikt), gespreid rasters (balken gerangschikt in twee offset horizontale vlakken), en rasters (balken gerangschikt in een enkele horizontaal vlak maar van verschillende afwisselend diameters).</li>
		<li>Plaats schoon metalen pannen onder elke verdieping van het raster voor het verzamelen van uitwerpselen. Vaporisators voor pannen met de reinigingsoplossing (Zie Materialen tabel).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Nauwkeurige tijdsbepaling en amplitude van footshock levering voorzien in elke context.<ol>
<li>Verbinding maken met een schok generator en scrambler geschikt voor het leveren van 1 mA of lagere amplitude schokken op elke verdieping van het raster voor de levering van footshock (Zie Materialen tabel). Opmerking: De schok generatoren en scramblers moeten buiten het geluid verzachtende kamer, met kabels verbinden de generatoren en scrambler naar de verdiepingen raster via openingen in het geluid verzachtende kamer bevindt. Dit zal het verhinderen van schade als gevolg van kauwen, schoonmaak oplossing, enz.</li>
		<li>Gebruik een multimeter voor het testen van de huidige verlost te worden door de schok generator door het plaatsen van elke sonde op een verschillende balk van de vloer van het raster en waarin wordt bevestigd dat de amplitude van de gewenste schok wordt geproduceerd (Zie Materialen tabel).</li>
		<li>Ervoor zorgen dat een methode voor de controle van de timing en de amplitude van de schok levering (bijvoorbeeld computersoftware) beschikbaar is (Zie Materialen tabel).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ervoor zorgen dat een methode voor video-opname elk dier tijdens elke experimentele sessie beschikbaar is (Zie Materialen tabel). Opmerking: Het kan nodig zijn om 1) wanneer de kamers worden verlicht door zichtbaar licht en 2) wanneer de kamers zijn donker. De laatste kan worden bereikt door met behulp van een nacht visie camera of lichtdoorlatende en opname van de verduisterde kamers met behulp van infrarood of nabij-infrarood licht.</li>
	<li>Zorg ervoor dat een kenmerkende methode voor het vervoer van dieren vanuit de vivarium naar Context B beschikbaar voor verder onderscheiden van de twee contexten. Opmerking: Hoewel methoden zoals een zwarte kunststof kuip (38 x 30 x 24 cm) onderverdeeld in vier compartimenten of schoon leeg kooien zijn met succes gebruikt, een andere vervoer doos die duidelijk verschilt van de kooi kan worden gebruikt.</li>
</ol>3. SEFL Procedure voor ratten en muizen
<ol><li>Omgaan met alle knaagdieren dagelijks door zachtjes te verwijderen op de homecage en elk voor 60-90 seconden voor ten minste 7 dagen voor het begin van de procedure van de SEFL te houden.</li>
	<li>Plaats op dag 1 van de procedure SEFL, onderwerpen in Context A, waar ze de traumatische stressor ontvangt.<ol>
<li>Kader A opgezet met één set van raster vloeren (bv., vlakke rasters) en verlichten van de kamers met zichtbaar licht.</li>
		<li>Gebruik een multimeter voor het testen van de huidige verlost te worden door de schok generator door elke sonde op een verschillende balk van de vloer van het raster te plaatsen en bevestigen dat de amplitude van de gewenste schok wordt geproduceerd. Opmerking: Schade of corrosie van de balken kan leiden tot zwakke of ongelijke schok levering. Vloeistoffen met inbegrip van urine aanraken van het raster langs de muur kunnen ook nadelig beïnvloeden schok levering.</li>
		<li>Veeg de muren van de kamer en de deuren en spray de pannen onder het raster vloeren met één oplossing (bijv., verdunde oplossing reiniging). Opmerking: Dit is nodig om te elimineren geuren uit de vorige dieren.</li>
		<li>Vervoer dieren uit de vivarium naar de laboratoriumruimte in hun huis kooien geplaatst op een kar en de plaats individueel in de angst conditionering kamers. Alleen brengen een ronde het waard van dieren (bepaald door het aantal angst conditionering chambers) naar de kamer van het experiment op een moment. Opmerking: Om te voorkomen dat kunstdiscours te wijten aan de orde of timing, moet elke ronde dieren in zowel het trauma en geen trauma voorwaarden bevatten.</li>
		<li>Rat experimenten, gebruik voor de schok generator en scramblers te leveren 15 1-s, 1-mA footshocks willekeurig gepresenteerd meer dan 90 minuten (gemiddelde ISI = 6 min) door de tralies raster van de kamers met trauma voorwaarde onderwerpen. Bloot de geen trauma besturingselementen dezelfde context voor 90 minuten zonder schok levering.</li>
		<li>Voor muis experimenten, gebruiken de schok generator en scramblers te leveren 10 1-s, 1-mA footshocks willekeurig gepresenteerd meer dan 60 minuten (gemiddelde ISI = 6 min) door het raster vloeren van de kamers met trauma voorwaarde onderwerpen. Bloot de geen trauma besturingselementen dezelfde context voor 60 minuten zonder schok levering.</li>
		<li>Na 90 minuten (rat experimenten) of 60 minuten (muis experimenten), alle dieren terug te keren naar hun homecages en onmiddellijk terugkeren naar het vivarium.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Op dag 2 van de SEFL-procedure, door de angst aan de context van de trauma's te beoordelen indien gewenst.<ol>
<li>Kader A als gedaan op dag 1 instellen.</li>
		<li>Het vervoer van dieren naar de kamer van het experiment in hun huis kooien als op dag 1.</li>
		<li>Plaats dieren in Context A 8 minuten zonder schok levering en video opnemen het gedrag tijdens de hele sessie.</li>
		<li>Na 8 minuten, alle dieren terug te keren naar hun homecages en onmiddellijk terugkeren naar het vivarium.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Op dag 3 van de procedure SEFL, bloot alle onderwerpen aan de milde stressor in Context B. Opmerking: Deze procedure kan overal optreden vanaf 24 uur tot 90 dagen na de traumatische stressor9.<ol>
<li>Kader B opgezet met een verschillende set van raster vloeren van degene die gebruikt zijn in kader A (bijvoorbeeld afwisselend of gespreide raster verdiepingen) en zwart driehoekige of witte gebogen Plexiglas inzetstukken. Niet verlicht de kamers met zichtbaar licht; Hoewel, infrarood of nabij-infrarood licht kan worden gebruikt als dit nodig is.</li>
		<li>Gebruik een multimeter voor het testen van de huidige verlost te worden door de schok generator door elke sonde op een verschillende balk van de vloer van het raster te plaatsen en bevestigen dat de amplitude van de gewenste schok wordt geproduceerd. Gebruik een multimeter voor het testen van de huidige verlost te worden door de schok generator door elke sonde op een verschillende balk van de vloer van het raster te plaatsen en bevestigen dat de amplitude van de gewenste schok wordt geproduceerd. Opmerking: Schade of corrosie van de balken kan leiden tot zwakke of ongelijke schok levering. Vloeistoffen met inbegrip van urine aanraken van het raster langs de muur kunnen ook nadelig beïnvloeden schok levering.</li>
		<li>Veeg beneden de kamers en de pannen spray onder de vloeren van het raster met de oplossing niet gebruikt in Context A (bv., 1% azijnzuur).</li>
		<li>Vervoer dieren uit de vivarium naar de laboratoriumruimte in een methode verschilt van de methode gebruikt voor Context een (bijvoorbeeld een zwarte kunststof kuip) en plaats hen individueel in angst conditionering kamers. Alleen brengen een ronde van waarde van dieren naar de kamer experiment tegelijk (bepaald door het aantal angst conditionering kamers).</li>
		<li>Alle dieren aan de milde stressor (hieronder beschreven) en videoverslag bevriezing en activiteit bloot tijdens de sessie.<ol>
<li>Na een periode van 180-s basislijn, ofwel een enkel 1-s, 1-mA footshock (ratten) of een één 2-s, 1-mA footshock (muizen) aan alle dieren te leveren. Opmerking: Zorg ervoor dat tijdens de periode van 180-s basislijn invriezen mag niet meer dan 5%12.</li>
			<li>Verwijder alle dieren 30 seconden na de levering van de schok en onmiddellijk terug te keren naar vivarium.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Testen op dag 4 van de procedure SEFL, angst voor de milde stressor context.<ol>
<li>Instellen Context B gedaan op dag 3.</li>
		<li>Het vervoer van dieren uit de vivarium naar de laboratoriumruimte in de dezelfde vervoer zoals gedaan op dag 3.</li>
		<li>Plaats dieren gedurende 8 minuten in Context B zonder schok levering en video record bevriezen tijdens de sessie.</li>
		<li>Verwijder alle dieren na 8 minuten en onmiddellijk terug te keren naar de vivarium.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. de gegevensanalyse
<ol><li>Maatregel angst tijdens de opgenomen experimentele sessies met behulp van bevriezing, gedefinieerd als het ontbreken van alle verkeer behalve dat die nodig is voor de ademhaling. Opmerking: Bevriezing meest nauwkeurig gescoord wordt door een blinde mens scorer, maar er zijn verschillende geautomatiseerde programma's die goed presteren. Alle geautomatiseerde systemen moeten echter worden gekalibreerd naar een menselijke waarnemer te zijn accuraat13.<ol>
<li>Merkt het onderwerp elke 4 seconden gedurende de tijd van belang3score bevriezing met de hand te hebben een experimentator blind voor experimentele omstandigheden. Classificeren bij iedere waarneming, het onderwerp als "bevriezing" of "niet bevriezen". Vergelijk het aantal bevriezing waarnemingen aan het totale aantal opmerkingen bij het bepalen van het percentage tijd bevriezen.</li>
		<li>Voor het gebruik van geautomatiseerde videoanalyse te scoren bevriezing, moet u eerst controleren of dat de resultaten van geautomatiseerde videoanalyse overeenkomen met de resultaten van de hand te scoren, zoals een wezenlijk verschillende bevriezing score geautomatiseerde analyse tot onnauwkeurige resultaten leiden kan. Opmerking: Een rat of een muis die heeft nooit geschokt moet tonen bevriezing tussen 0 en 5%, terwijl hogere waarden arme kalibratie van de apparatuur suggereren</li>
	</ol>
</li>
	<li>Gebruik de methoden beschreven voor het meten van angst tijdens de perioden van belang (zie hieronder).<ol>
<li>De angst van de maatregel aan de context van de trauma's als het percentage tijd bevriezen van over de hele 8-min-testsessie op dag 2.</li>
		<li>Maatregel generalisatie van angst uit de context van het trauma aan de milde stressor context als het percentage tijd bevriezen tijdens de periode van de 3-min basislijn in Context B op dag 3 vóór de levering van de schok. Opmerking: Voor de SEFL, het is belangrijk om te onderscheiden van de context goed genoeg zodat er niet substantieel generalisatie.</li>
		<li>Het meten van angst onmiddellijk na de schok op dag 3 als het percentage tijd bevriezen tijdens de periode van de 30-s die volgt op de schok.</li>
		<li>De angst van de maatregel aan de milde stressor context als percentage verbruikte tijd over de hele 8-min-testsessie op dag 4.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Maatregel de reactiviteit van de schok door het bedrag, of de snelheid, van beweging tijdens de periode van 3-s tijdens en onmiddellijk na de schok op dag 3. Opmerking: De ANOVAs worden aanbevolen voor alle data-analyse, als extra groepen (bijv., drugsbehandeling) kunnen worden toegevoegd als dit nodig is.</li>
</ol>

<ol><li>Bremner, J. D., Krystal, J. H., Southwick, S. M., Charney, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+neuroanatomical+correlates+of+the+effects+of+stress+on+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Traumatic+Stress%22%5BJournal%5D)">Functional neuroanatomical correlates of the effects of stress on memory.</a> Journal of Traumatic Stress. 8 (4), 527-553 (1995).</li>
<li>Dykman, R. A., Ackerman, P. T., Newton, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posttraumatic+stress+disorder%3A+a+sensitization+reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Integrative+Physiological+and+Behavioral+Science%22%5BJournal%5D)">Posttraumatic stress disorder: a sensitization reaction.</a> Integrative Physiological and Behavioral Science. 32 (1), 9-18 (1997).</li>
<li>Fanselow, M. S., Bolles, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Naloxone+and+shock-elicited+freezing+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+and+Physiological+Psychology%22%5BJournal%5D)">Naloxone and shock-elicited freezing in the rat.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 93 (4), 736-744 (1979).</li>
<li>Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0166223684802532">What is Conditioned Fear?</a> Trends in Neurosciences. 7, 460-462 (1984).</li>
<li>Rau, V., DeCola, J. P., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+enhancement+of+fear+learning%3A+an+animal+model+of+posttraumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Stress-induced enhancement of fear learning: an animal model of posttraumatic stress disorder.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 29 (8), 1207-1223 (2005).</li>
<li>Perusini, J. N., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobehavioral+perspectives+on+the+distinction+between+fear+and+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Neurobehavioral perspectives on the distinction between fear and anxiety.</a> Learning and Memory. 22 (9), 417-425 (2015).</li>
<li>Poulos, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitization+of+fear+learning+to+mild+unconditional+stimuli+in+male+and+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Sensitization of fear learning to mild unconditional stimuli in male and female rats.</a> Behavioral Neuroscience. 129 (1), 62-67 (2015).</li>
<li>Perusini, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+Expression+of+Fear+Sensitization+Caused+by+Acute+Traumatic+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Induction and Expression of Fear Sensitization Caused by Acute Traumatic Stress.</a> Neuropsychopharmacology. 41 (1), 45-57 (2016).</li>
<li>Rau, V., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+a+stressor+produces+a+long+lasting+enhancement+of+fear+learning+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stress%22%5BJournal%5D)">Exposure to a stressor produces a long lasting enhancement of fear learning in rats.</a> Stress. 12 (2), 125-133 (2009).</li>
<li>Poulos, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amnesia+for+early+life+stress+does+not+preclude+the+adult+development+of+posttraumatic+stress+disorder+symptoms+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Amnesia for early life stress does not preclude the adult development of posttraumatic stress disorder symptoms in rats.</a> Biological Psychiatry. 76 (4), 306-314 (2014).</li>
<li>Fanselow, M. S., Sigmundi, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Species-specific+danger+signals%2C+endogenous+opioid+analgesia%2C+and+defensive+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Psychology%3A+Animal+Behavior+Processes%22%5BJournal%5D)">Species-specific danger signals, endogenous opioid analgesia, and defensive behavior.</a> Journal of Experimental Psychology: Animal Behavior Processes. 12 (3), 301-309 (1986).</li>
<li>Jacobs, N. S., Cushman, J. D., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+accurate+measurement+of+fear+memory+in+Pavlovian+conditioning%3A+Resolving+the+baseline+issue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">The accurate measurement of fear memory in Pavlovian conditioning: Resolving the baseline issue.</a> Journal of Neuroscience Methods. 190 (2), 235-239 (2010).</li>
<li>Anagnostaras, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+assessment+of+pavlovian+conditioned+freezing+and+shock+reactivity+in+mice+using+the+video+freeze+system%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Automated assessment of pavlovian conditioned freezing and shock reactivity in mice using the video freeze system.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. , (2010).</li>
<li>Long, V. A., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-enhanced+fear+learning+in+rats+is+resistant+to+the+effects+of+immediate+massed+extinction%5BTitle%5D)+AND+%22Stress%22%5BJournal%5D)">Stress-enhanced fear learning in rats is resistant to the effects of immediate massed extinction.</a> Stress. 15 (6), 627-636 (2012).</li>
<li>Craske, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+inhibitory+learning+during+exposure+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+Research+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Optimizing inhibitory learning during exposure therapy.</a> Behaviour Research and Therapy. 46 (1), 5-27 (2008).</li>
<li>Paylor, R., Tracy, R., Wehner, J., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DBA%2F2+and+C57BL%2F6+mice+differ+in+contextual+fear+but+not+auditory+fear+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">DBA/2 and C57BL/6 mice differ in contextual fear but not auditory fear conditioning.</a> Behavioral Neuroscience. 108 (4), 810-817 (1994).</li>
<li>Graham, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1983-32882009000200015">Strain and sex differences in fear conditioning: 22 kHz ultrasonic vocalizations and freezing in rats.</a> Pyschology and Neuroscience. 2 (2), 219-225 (2009).</li>
</ol>

Dr. Fanselow is een stichtend bestuurslid van Neurovation Labs.

SEFL is een robuuste gedrags model van PTSS die kan worden gerecapituleerd in muizen en ratten en kan worden gebruikt voor het bestuderen van de gesensibiliseerde angstreacties die kenmerkend zijn voor PTSS. Na traumatische stress weergeven knaagdieren een verhoogde angst reactie in een duidelijk andere context pas nadat die context is gekoppeld aan een milde stressor die als een herinnering aan een traumatische ervaring dient. Na de traumatische stress Toon knaagdieren is niet verwonderlijk dat hoge niveaus van angst to...

Angst is een kritische gedrag om te overleven, waardoor individuen om te herkennen en te reageren op bedreigingen. Echter kunnen overdreven angstreacties bijdragen tot de ontwikkeling van psychiatrische stoornissen zoals post-traumatische stressstoornis (PTSS). Een kenmerk van PTSS is een overdreven reactie op milde stressoren, met name die doet denken aan de oorspronkelijke trauma, en een neiging tot het ontwikkelen van nieuwe angsten1,2. In het laboratorium, wordt angst vaak gemeten door middel van bevriezing van gedrag, dat een betrouwbare en ethologically geldig index van angst in mensen en knaagdieren3,4 is. Terwijl het is bekend dat PTSS disregulatie van angst en verbeterde angst expressie met zich meebrengt, is er een gebrek aan robuuste diermodellen van PTSS, die betrouwbaar deze augmented angst reactie op een relatief onschuldige prikkel vangen.
Dit protocol biedt de gedetailleerde methodologie vereiste stress-enhanced angst leren (SEFL) experimenten, een betrouwbaar en robuust preklinische model van PTSS, bij zowel de ratten en muizen. SEFL maakt gebruik van aspecten van Pavlov angst conditionering, maar het produceert verschillende antwoorden van de normale vreesconditionering en recapituleert de verbeterde angst volgende traumatische stress waargenomen bij PTSS-patiënten5,6. In dit model, een enkele zeer stressvolle ervaring (waarnaar hier als trauma) leidt tot blijvende gedragsveranderingen, inclusief extreme angst van stimuli de traumatische gebeurtenis is gekoppeld, toegenomen angst, verhoogd schrikken reactiviteit en gewijzigd glucocorticoide signalering7,8. Het grote kenmerk van SEFL is dat na blootstelling aan een traumatische stressor (een reeks van unsignaled schokken) in een verschillende context, dieren vertonen een overdreven angst reactie op een milde stressor (bv., een enkele schok) in een andere context. Nog belangrijker is, is het SEFL-effect niet te wijten aan de generalisatie van de context van het trauma aan de nieuwe context of grotere schok gevoeligheid5. In ons model, we doelbewust gebruik maken van procedures die een generalisatie naar een nieuwe context zoals verschillende vervoers-, geur- en raster patroon van de vloer te verminderen. Dus, in tegenstelling tot normale vreesconditionering, SEFL is een niet-associatieve proces dat leidt tot een nieuwe angst leren die onevenredig betrekking heeft op de ecologische signalen niet rechtstreeks verband houden met de traumatische ervaring. Uitgebreide werk laat zien dat een 90 minuten durende sessie met 15 onvoorspelbare schokken in ratten (of een 60-minuten sessie met 10 onvoorspelbare schokken bij muizen) een langdurige sensibilisatie van vreesconditionering samen met verhoogde angst induceert en disregulatie in het circadiane ritme van basale corticosterone. In tegenstelling, pre blootstelling aan één footshock niet produceren SEFL9. Bovendien kunnen SEFL betrouwbaar worden gebruikt in zowel ratten en muizen.
Vandaar, is het SEFL model van PTSS is een krachtig hulpmiddel voor het sonderen van de biologische mechanismen die betrokken zijn bij PTSS pathofysiologie. Met behulp van SEFL, kunnen onderzoekers bestuderen hoe de blootstelling aan een trauma kan invloed hebben op toekomstige angst leren. Bovendien, kan dit model bruikbaar zijn voor het onderzoeken van de specifieke cellulaire en moleculaire mechanismen die betrokken kunnen zijn bij het reguleren van verbeterde angst expressie zoals waargenomen in PTSS.

<table><tbody><tr><td>Fear Conditioning Chamber for Low Profile Floors</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-008-LP</td><td>Fear conditioning kamer</td></tr><tr><td>Sound Attenuating Cubicle</td><td>Med Associates Inc.</td><td>NIR-022SD</td><td>Geluidsdempingscabine om het binnendringen van buitenlawaai te voorkomen</td></tr><tr><td>NIR/White Light Control Box</td><td>Med Associates Inc.</td><td>NIR-100VR</td><td>Lichtcontrolebox die in staat is wit en nauwelijks zichtbaar infrarood licht af te geven</td></tr><tr><td>NIR VFC Light Box</td><td>Med Associates Inc.</td><td>NIR-100L2</td><td>Witte bovenlicht</td></tr><tr><td>Windex&nbsp;Original Glass Cleaner</td><td>Windex</td><td></td><td>Oplossing voor het schoonmaken en geurvermijding van fear conditioning kamers tussen dieren</td></tr><tr><td>Azijnzuur</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>Oplossing voor het schoonmaken en geurvermijding van fear conditioning kamers tussen dieren</td></tr><tr><td>A-Frame Chamber Insert</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-008-IRT</td><td>Zwarte Plexiglas driehoekige inzetstuk om interne lay-out van Contexts A en B te onderscheiden</td></tr><tr><td>Curved Wall Insert</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-008-CWI</td><td>Witte plastic blad om interne lay-out van Contexts A en B te onderscheiden</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Grid Rods for Mouse</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005A</td><td>Vlakke roostervloer voor muizen</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 1/8" &amp; 3/16" Grid Rods Mouse</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005-S</td><td>Verspringende roostervloer voor muizen</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Staggered Grid Rods for Mouse</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005A-L</td><td>Alternerende roostervloer voor muizen</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Grid Rods for Rat</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005</td><td>Vlakke roostervloer voor ratten</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 3/16" &amp; 3/8" Grid Rods</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005-L</td><td>Alternerende roostervloer voor ratten</td></tr><tr><td>Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Staggered Grid Rods for Rat</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VFC-005-S</td><td>Verspringende roostervloer voor ratten</td></tr><tr><td>Metal pans</td><td>Med Associates Inc.</td><td></td><td>Metalen schalen om druppels onder roostervloeren op te vangen</td></tr><tr><td>Standalone Aversive Stimulator/Scrambler</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-414S</td><td>Schoksgenerator en scrambler voor voetschokbezorging</td></tr><tr><td>Multimeter</td><td>Fluke</td><td>87-5</td><td>Gereedschap voor het meten van voetschok amplitude</td></tr><tr><td>VideoFreeze Software</td><td>Med Associates Inc.</td><td>SOF-843</td><td>VideoFreeze software voor het regelen van schokbezorging</td></tr><tr><td>High Speed Firewire Monochrome Video Camera</td><td>Med Associates Inc.</td><td>VID-CAM-MONO-4</td><td>Videocamera die in staat is om in nauwelijks zichtbaar infrarood licht op te nemen</td></tr></tbody></table>

angst stress-enhanced learning, een robuuste knaagdier model van posttraumatische stress-stoornis

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Angst-gedrag zijn belangrijk om te overleven, maar onevenredig hoge niveaus van angst kunnen vergroten de kwetsbaarheid voor het ontwikkelen van psychiatrische stoornissen zoals post-traumatische stressstoornis (PTSS). Om te begrijpen de biologische mechanismen van angst disregulatie in PTSS, is het belangrijk om te beginnen met een geldige diermodel van de stoornis. Dit protocol beschrijft de methodologie vereiste stress-enhanced angst leren (SEFL) experimenten, een preklinische model van PTSS, bij zowel de ratten en muizen. SEFL is ontwikkeld om de kritieke aspecten van PTSS, met inbegrip van lange termijn sensibilisatie van angst leren veroorzaakt door een acute stressor recapituleren. SEFL aspecten van het gebruik van Pavlov angst conditionering, maar produceert een aparte en robuuste gesensibiliseerde angst reactie veel groter dan normale voorwaardelijke angstreacties. De trauma-procedure hiervoor is het plaatsen van een knaagdier in een kamer met airconditioning en het beheer van de 15 unsignaled schokken willekeurig verdeeld meer dan 90 minuten (voor rat experimenten; voor de muis experimenten, 10 unsignaled schokken willekeurig verdeeld meer dan 60 minuten worden gebruikt) . Op dag 2, worden knaagdieren geplaatst in een roman conditioning context waar zij ontvangen een enkele schok; dan op dag zijn 3 ze zoals op dag 2 terug in dezelfde context geplaatst en getest voor veranderingen in de bevriezing niveaus. Knaagdieren dat eerder is ontvangen als het trauma display verbeterd niveaus te bevriezen op de dag van de test in vergelijking met degenen die geen schokken op de eerste dag ontvangen. Dus, met dit model, een enkele zeer stressvolle ervaring (het trauma) produceert extreme angst van de stimuli die de traumatische gebeurtenis is gekoppeld.

Resultaten van de test van de context trauma op dag 2 worden weergegeven in Figuur 1. Dieren in de conditie van de trauma's bleek aanzienlijk hogere niveaus van bevriezing in Context A t.o.v. de geen trauma controles, met vermelding van de verwerving van angst naar de trauma-context [ratten: F(1,17) = 23.58, p < 0,01; muizen: F(1,14) = 666.50, p < 0,0001]. Bevriezing tijdens de periode van de basislijn voordat de single schok in de nieuwe co...

Hier beschrijven we de gedetailleerde methodologie vereiste stress-enhanced angst leren (SEFL) experimenten, een preklinische model van posttraumatische stress-stoornis, in zowel de ratten en muizen. Het model maakt gebruik van aspecten van Pavlov angst conditionering en bevriezing als een index van verbeterde angst in knaagdieren.

Angst stress-Enhanced Learning, een robuuste knaagdier Model van Posttraumatische Stress-Stoornis

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het gebied van gedragsneurowetenschappen, zoals hoe de onderliggende biologische mechanismen van PTSS beter te begrijpen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het robuust, betrouwbaar, kwantitatief is en bij meerdere soorten kan worden uitgevoerd. Begin met het opzetten van een set van angst conditionering kamers om te dienen als context A, en een tweede set van angst conditionering kamers om te dienen als context B.Place elke angst conditionering kamer in een geluid verzachtende hokje om inbraak van buitenaf lawaai te voorkomen.Plaats vervolgens rastervloeren in elke angstconditioneringskamer voor de levering van voetschokken, met behulp van een ander rasterpatroon voor elke context om de vloerstructuur tussen contexten te onderscheiden. Plaats vervolgens zwarte plexiglas driehoekige inserts in context B om de interne lay-out van de twee contexten te onderscheiden. Veeg de kamerwanden en deuren af en spuit de pannen onder de roostervloeren met een verdunde reinigingsoplossing.Nadat de roostervloer is gereinigd, sluit u een schokgenerator en scrambler aan die een schok van 1 milliamp of lagere amp

stress-enhanced-fear-learning-robust-rodent-model-post-traumatic

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

We beschrijven een rat model van post-traumatische stress-stoornis (PTSS) dat de aanhoudende veranderingen in neuro-endocriene functie en de vertraagde lange termijn, overdreven angst reactie, kenmerkend voor PTSS-patiënten laat zien. Het diermodel en de hier beschreven methoden zijn nuttig voor het correleren van biomarkers in hersenkernen, die mechanisch maar kan niet worden gemeten in patiënten met biomarkers in perifere witte bloedcellen, die kan.

Biomarkers in een diermodel voor het openbaren van Neural, hematologische, en gedragsmatige correlaten van PTSS

Dit artikel beschrijft het gebruik van chronische inwoner indringer sociale spanning als een ethologically relevante paradigma naar model postpartum depressie en angst bij lacterende knaagdieren.

Met behulp van Chronische Sociale Stress om model postnatale depressie bij zogende Knaagdieren

Het onvoorspelbare chronische milde stress (UCMS) protocol is een gevalideerde methode voor het bestuderen van gedrags- en fysiologische veranderingen geassocieerd met chronische stress en depressieve symptomen. Acht weken van het opleggen van het UCMS-protocol induceert gedragsveranderingen en slechte gezondheidsuitkomsten bij knaagdieren van beide geslachten.

Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren

De sociale dreiging-veiligheidstest maakt een gelijktijdige beoordeling van de ontwikkeling van sociale vermijding mogelijk als een meting van aversief geconditioneerd leren en het vermogen om sociale dreiging en veiligheid te discrimineren, beide gebruikt om stressgevoelige en stressbestendige individuen te identificeren binnen een enkele groep chronisch sociaal verslagen mannelijke muizen.

Sociale dreigings-veiligheidstest onthult psychosociale stressgerelateerde fenotypes

Dit protocol schetst een chronisch onvoorspelbaar mild stress (CUMS) model voor depressie op basis van de Mongoolse medische theorie, samen met methoden voor het valideren van gedragstests.

Chronische onvoorspelbare milde stress bij ratten op basis van de Mongoolse geneeskunde

Om vluchtgedrag in een angstige context te bestuderen, introduceren we een aangepast angstconditioneringsprotocol. Dit protocol zorgt ervoor dat muizen consequent vluchtgedrag vertonen tijdens cue-presentatie in de angstconditionering.

Gemodificeerde angstconditionering voor het induceren van vlieggedrag bij muizen

Dit protocol beschrijft hoe 10 dagen chronische sociale nederlaagstress bij mannelijke muizen in de vroege adolescentie kan worden uitgevoerd om langdurige sociale vermijding op volwassen leeftijd te produceren bij meer dan 60% van de muizen.

Chronische sociale nederlaagstress bij mannelijke muizen in de vroege adolescentie

Door vier dagelijkse sociale stressoren te integreren, beschrijft de huidige studie een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel (MISS) voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen. Na tien dagen van herhaalde blootstelling aan MISS ontwikkelden de muizen depressieve en angstachtige fenotypes, waardoor een natuurlijk, op etiologie gebaseerd diermodel werd geboden voor het bestuderen van psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke proefpersonen.

Een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen

In het volgende experiment beschrijven we een protocol voor het trace vreesconditionering bij muizen. Deze vorm van associatief geheugen omvat een spoor periode dat de neutrale stimulus en de ongeconditioneerde stimulus scheidt.

Trace Angst Conditioning in Muizen

Potentiëring van de verrassingsreflex wordt gemeten via elektromyografie van de orbicularis oculi-spier tijdens een lage (onzekere) en hoge (zekere) waarschijnlijkheid van elektrische schokken in de Threat Probability Task. Dit biedt een objectieve maatstaf voor verschillende negatieve emotionele toestanden (angst/angstigheid) voor onderzoek naar psychopathologie, middelengebruik/misbruik en brede affectieve wetenschap.

Met behulp van de Threat Probability Task aan angst en vrees Tijdens Onzekere en bepaalde Threat Beoordelen

Leer stress-enhanced fear learning voor gedragsneurowetenschap bij knaagdieren. Deze methode biedt een robuust en betrouwbaar model om de biologische mechanismen van PTSS te bestuderen.

Angst stress-Enhanced Learning, een robuuste knaagdier Model van Posttraumatische Stress-Stoornis

Meer video's verkennen