Subclavian ader punctie als een alternatieve methode van bloed monster collectie bij ratten

Subclavian Vein Punctie als alternatieve methode van bloedmonsterverzameling bij ratten. Na algemene anesthesie, plaats ratten in supine positie en steriliseren infraclaviculaire ruimte met 75%ethanol. Identificeer superieure sternale fossa voor punctie.

Zoek de punctieplaats, caudal naar het buitenste een derde gebied van het sleutelbeen aan dezelfde kant. De richting van de naald werd geplaatst in de richting van de superieure sternale fossa en moet bijna parallel aan het sleutelbeen, net achterste aan. Na het afhouden van het bloed, druk op de punctie site voor een tot twee minuten, om te stoppen met bloeden.

Bloedafname met voldoende volume is altijd nodig in dierproeven. Bloedafname van ratten staart ader is populair en minder stressvol dan sommige agressieve methoden, zoals retro orbitale plexus monster collectie. Deze methode wordt echter beperkt door het slagingspercentage.

Hier introduceren we onze methode voor bloedafname met het gewenste bloedvolume van de subclavian ader. Onze resultaten tonen aan dat deze methode veilig en praktisch is, en kan worden overwogen in het geval bloedafname van staartader is mislukt. Om te beginnen, bereiden plakband, epilating agent, 75%ethanol, bloedafname buis, twee punt vijf milliliter spuit, haar scheerapparaat, elektronische schaal, heparine, en fysiologische zoutoplossing.

Huis ratten onder standaard omstandigheden, met vrije toegang tot voedsel en drinkwater, bewaard in 530 vierkante centimeter kooien met hout scheren beddengoed. Induceer algemene anesthesie bij alle dieren via intraperitoneale injectie vóór punctie. Plaats de rat in supine positie, bevestig de achterste ledematen in een comfortabele positie, en bevestig de bovenste ledematen parallel aan het lichaam, net naast de romp.

Reinig beide zijden van de infraclaviculaire ruimte om de vacht en zichtbaar vuil te verwijderen. Veeg de nek en thoracale huid af met 75% ethanol en houd het gebied schoon en droog met gaas. Beide zijden van de subclavian ader zijn geschikt voor punctie, en hier kiezen we de rechterkant voor punctie.

Identificeer de locatie en de richting van het rechtersleutelbeen met de linkerduim van de operator en lokaliseer de superieure sternale fossa voorzichtig met de wijsvinger. Spoel onze spuit af met 10 unit-per-milliliter heparine oplossing. Zoek de punctieplaats, punt vijf millimeter caudal aan het buitenste een derde gebied van het rechter sleutelbeen.

Beweeg de spuit voorzichtig in de huid van de punctieplaats. Zodra de naald in de infraclaviculaire huid komt, voert u een actieve druk aan via de rechterhand van de operator. De richting van de naald is gepositioneerd in de richting van de superieure sternale fossa, en moet bijna parallel aan het sleutelbeen, net achterste aan.

Meestal kan de subclavian ader worden bereikt door het inbrengen van de naald voor ongeveer twee millimeter in deze richting. Zodra de naald in de ader komt, komt het bloed onder actieve druk in de spuit terecht. Dan moet de actieve druk worden gehandhaafd totdat de juiste hoeveelheid bloed wordt getrokken.

Na het afhouden van het bloed, verwijder de punctie naald, en druk op de punctie site voor een tot twee minuten om te stoppen met bloeden. Let op: de druk moet zeer zacht zijn om choke te voorkomen. Breng het bloedmonster in een anti-gestolde vacuümbuis met EDTA en centrifuge op 1600G gedurende 10 minuten om plasma te verzamelen.

Aspirate de supernatent om opnieuw schoon buis en op te slaan bij min 18 Celsius graden. Om het slagingspercentage tussen de ervaren operators en de beginners te vergelijken, werden 20 SD-ratten willekeurig verdeeld in twee groepen. De resultaten tonen aan dat door de juiste subclavian ader, negen ratten in de geschoolde groep en acht ratten in de beginnersgroep geslaagd, respectievelijk.

Dan is de bloedafname van de resterende drie ratten geslaagd via de linkerkant. Het slagingspercentage had geen significant verschil tussen deze twee groepen. De tijdskoers was in deze twee groepen iets anders.

Geen ernstige complicaties, zoals pneumothorax, hemopneumothorax, en bloeding opgetreden tijdens of na de operatie. Alle dieren overleefden na de bloedafname. Om de moeilijkheden van het leren van de punctieprocedure aan te tonen, hebben we het aantal opnames tussen de geschoolde en de beginnersgroepen verder vergeleken.

Zoals blijkt uit tabel twee is het gemiddelde aantal opnames in geschoolde groepen iets lager dan de beginners, maar er is geen statistische significantie. Tot slot tonen onze resultaten aan dat de subclavian ader punctiestrategie voor bloedafname veilig en haalbaar is bij ratten. Deze methode is waardevol, vooral bij gelegenheden waarin grote hoeveelheid bloed nodig is.

Deze methode kan een optimaal alternatief zijn als de conventionele bloedafname mislukt.