Name: Gedrags evaluaties van spontane voortbewegen in een lymfkliertest MPTP-geïnduceerde ziekte Parkinsons Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 38 s
Description: Leer gedragsbeoordelingen van spontane voortbeweging in een lymfkliertest met een MPTP-geïnduceerd muismodel voor de ziekte van Parkinson. Deze methode helpt onderzoekers motorische functie te evalueren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ons werk wordt gefinancierd door Tianjin Undergraduate opleidingen voor innovatie en ondernemerschap (Grant nr. 63183004). Dit project werd gestart in de staat sleutel laboratorium voor geneeskrachtige chemische biologie Nankai Universiteit. De auteurs verklaren dat er geen conflicten van belangen.

Deze studie is uitgevoerd volgens de regels van het internationaal, nationaal en institutioneel gezien van dierproeven. Het studie-protocol werd goedgekeurd door het Comité dierenethiek van Nankai Universiteit.
1. MPTP en levodopa administratie
Opmerking: Tien weken oude vrouwelijke BALB/c muizen werden verstrekt door het Instituut voor Dierkunde, Chinese Academie van Wetenschappen. Muizen werden gehuisvest zes per cage onder een 12u licht/donker cyclus (lichten op op 08:00-20:00), een constante temperatuur van 21-22 ° C en een relatieve vochtigheid van 55% ± 5%. Gesteriliseerde met autoclaaf standaard muizen chow van de dezelfde formulering en water ad libitum werd gegeven aan alle dieren.
<ol><li>Na een week van acclimatisatie, door de dieren te verdelen in drie groepen van elk zes muizen.</li>
	<li>Naar groep 1, beheren intraperitoneaal injecties (zie stap 1.5) van 250 µL/muis/dag zoutoplossing vanaf dag 1 tot dag 7 en voer intragastric beheer (zie stap 1.6) van 250 µL/muis zoutoplossing op dag 8.</li>
	<li>Groep 2, beheren intraperitoneaal injecties van 20 mg/kg/dag van de MPTP elke dag vanaf dag 1 tot dag 7 en voer intragastric beheer van 250 µL/muis zoutoplossing op dag 8.</li>
	<li>Groep 3, beheren intraperitoneaal injecties van 20 mg/kg/dag voor MPTP vanaf dag 1 tot dag 7 en voer intragastric toediening van levodopa 5 mg/kg op dag 8.</li>
	<li>De intraperitoneale injectie als volgt uitvoeren.<ol>
<li>Laad de drug in een steriele 1 mL injectiespuit met een naald 26 G. Verwijder lucht uit de spuit.</li>
		<li>Nekvel de muis met zijn buik naar boven. Houd het hoofd, de nek en het lichaam van de muis in een rechte lijn evenals met het hoofd vast.</li>
		<li>Hoek de naald te doordringen van het buikvlies. De naald voor een juiste afstand duwen totdat er weinig weerstand is, en vervolgens de drug te injecteren. Trek de naald soepel.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Voer de intragastric beheer als volgt.<ol>
<li>Bereiden de medicatie in een steriele 1 mL injectiespuit met een naald oral-maagsonde. Verwijder lucht uit de spuit.</li>
		<li>Houd de muis met zijn buik naar boven. Houd het hoofd, de nek en het lichaam van de muis in een rechte lijn met het hoofd vast.</li>
		<li>Houd de naald evenwijdig aan het lichaam van de muis, en het uit de hoek van de muis de mond, de tong ingedrukt te duwen tegen de bovenkaak innerlijke invoegen.</li>
		<li>Met weinig weerstand, waaruit blijkt dat de naald is het invoeren van de slokdarm soepel, duw voorzichtig de naald in een juiste afstand. Voordat het puntje van de naald het onderste deel van de borst bereikt, injecteren de medicatie.</li>
		<li>Trek de naald soepel.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. cilinder test
Opmerking: De gedrags tests werden uitgevoerd op dag 8. Levodopa werd geïnjecteerd aan de derde groep van muizen 40 min vóór de gedrags tests. Als de gedrags test wordt niet uitgevoerd in dezelfde kamer waar de dieren zijn ondergebracht, moeten dieren worden acclimated aan de nieuwe ruimte voor 30-60 min vóór de test.
<ol><li>Voer de test 24 h uit na de laatste dosis van MPTP.</li>
	<li>Plaats een transparante glazen cilinder (hoogte = 19.5 cm, diameter = 15 cm, gewicht ≥1 kg) in het midden van een tabel. Omgeven door de cilinder aan drie zijden bekleed met zwart karton aan het effect van licht op het milieu verminderen. Laat één kant van de cilinder geconfronteerd met de camera voor video-opname. Opmerking: De afstand tussen de karton en de cilinder moet ongeveer 4 tot 8 cm.</li>
	<li>Hechten van een camera (> 1 miljoen-pixelresolutie) bij ~ 40-60 cm afstand van de cilinder om ervoor te zorgen dat de volledige cilinder zichtbaar is. Nota: Dit is ook het nabije noch te ver om de muis niet te storen tijdens het opnemen van de video van de beweging.</li>
	<li>Plaats van een muis in de cilinder op een moment en start tegelijk filmen. Stoppen met filmen na 3 min. Opmerking: Tijdens dit proces, probeer te voorkomen dat lawaai of licht verandert in volgorde te vermijden van de muis gedrag te beïnvloeden.</li>
	<li>Plaats de muis terug in hun kooi na het testen.</li>
	<li>De cilinder met water schoon en vervolgens 70% v/v ethanol te spuiten over de binnenwand het zuiveren en verwijderen van geuren van de muis. Veeg de cilinder droog voordat een andere muis in wordt geplaatst.</li>
	<li>Het afspelen van de video in een tempo van 0,5 x de normale snelheid en het aantal paw liften tegen de muur van elke muis. Opmerking: Paw liften optreden wanneer de muis omhoog op haar hindlimbs opsteekt, roept beide voorpoten boven schouderhoogte en landerijen. Één voorpoot lift niet meegeteld. Gewoonlijk verhoogt een muis haar voorpoten te raken van de muren van de cilinder. Als de muis haar voorpoten boven schouderhoogte meerdere malen continu zonder landing verhoogt, moet het slechts als één keer worden geteld.</li>
</ol>3. open veldtest
<ol><li>Het open veldtest 24 h uitvoeren na toediening van MPTP. Opmerking: Het kan worden uitgevoerd op hetzelfde moment van de test van de cilinder.</li>
	<li>Een vak van transparante open veld reactie voor te bereiden (45 cm L x 45 cm W x 25 cm H) met een houten plaat cover aan de onderkant door een zwarte doek. Repareren van een camera (> 1 miljoen-pixel resolutie) over het veld op een hoogte van 1 m. Opmerking: De kleur van het open veld vak onder verschillend moet zijn van de geteste muis kleur om de kleurcontrast in de video.</li>
	<li>Aanpassen van de camera om ervoor te zorgen dat het vak van de reactie open veld in het midden van de video ligt.</li>
	<li>Een test muis gestoken in het vak, en laat de muis zich vertrouwd te maken met het milieu voor ongeveer 1 minuut.</li>
	<li>Record een 5 min video met behulp van de camera op de computer aangesloten.</li>
	<li>Analyseren van de video met behulp van software-instrumenten (b.v., MATLAB) om de beweging trace figuur, de verdeling van de statische (snelheid < 1 cm/s), lopen (snelheid 1-20 cm/s) en uitvoeren (snelheid > 20 cm/s) tijd, de totale reisde afstand en gemiddelde snelheid van elke geteste muis. Opmerking: Bij het analyseren van de video, we volgen het hele lichaam van de muis. De gemiddelde snelheid van een instantie betekent dit dat de totale lengte van het pad onder, gedeeld door de verstreken tijd. Daarom, als een muis niet beweegt, de momentane snelheid zou worden beschouwd als nul.</li>
	<li>Clean-up elke ontlasting in het reactie veld openen. Spray van 70% ethanol op het vak en veeg het.</li>
</ol>

<ol><li>Dehay, B., Bourdenx, M., Gorry, P., Przedborski, S., Vila, M., Hunot, S., Singleton, A., Olanow, C. W., Merchant, K. M., Bezard, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+-synuclein+for+treatment+of+Parkinson%27s+disease%3A+mechanistic+and+therapeutic+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Targeting -synuclein for treatment of Parkinson's disease: mechanistic and therapeutic considerations.</a> Lancet Neurology. 14, 855-866 (2015).</li>
<li>Weintraub, D., Comella, C., Horn, L., S, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkinson%27s+disease+-+Part+1%3A+Pathophysiology%2C+symptoms%2C+burden%2C+diagnosis%2C+and+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Managed+Care%22%5BJournal%5D)">Parkinson's disease - Part 1: Pathophysiology, symptoms, burden, diagnosis, and assessment.</a> American Journal of Managed Care. 14, 40-48 (2008).</li>
<li>Ismaiel, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin%2C+besides+exhibiting+strong+in+vivo+anti-inflammatory+properties%2C+increases+mptp-induced+damage+to+the+nigrostriatal+dopaminergic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Metformin, besides exhibiting strong in vivo anti-inflammatory properties, increases mptp-induced damage to the nigrostriatal dopaminergic system.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. , 19-30 (2016).</li>
<li>Bayliss, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ghrelin-AMPK+signaling+mediates+the+neuroprotective+effects+of+calorie+restriction+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ghrelin-AMPK signaling mediates the neuroprotective effects of calorie restriction in Parkinson's disease.</a> Journal of Neuroscience. 36, 3049-3063 (2016).</li>
<li>Olanow, C. W., Stern, M. B., Sethi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+scientific+and+clinical+basis+for+the+treatment+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">The scientific and clinical basis for the treatment of Parkinson disease.</a> Neurology. 72 (21 Supplement 4), (2009).</li>
<li>Chiba, K., Trevor, A., Castagnoli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolism+of+the+neurotoxic+tertiary+amine%2C+MPTP%2C+by+brain+monoamine+oxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+%26+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Metabolism of the neurotoxic tertiary amine, MPTP, by brain monoamine oxidase.</a> Biochemical & Biophysical Research Communications. 120 (2), 574-578 (1984).</li>
<li>Bakay, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+and+behavioral+correction+of+MPTP+parkinson-like+syndrome+by+fetal+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Biochemical and behavioral correction of MPTP parkinson-like syndrome by fetal cell transplantation.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 495 (1), 623-638 (2010).</li>
<li>Kelly, P. H., Seviour, P. W., Iversen, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine+and+apomorphine+responses+in+the+rat+following+6-OHDA+lesions+of+the+nucleus+accumbenssepti+and+corpus+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Amphetamine and apomorphine responses in the rat following 6-OHDA lesions of the nucleus accumbenssepti and corpus striatum.</a> Brain Research. 94 (3), 507-522 (1975).</li>
<li>Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1-methyl-4-phenylpyridinium+ion+%28MPP%2B%29%3A+identification+of+a+metabolite+of+MPTP%2C+a+toxin+selective+to+the+substantia+nigra%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">1-methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra.</a> Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).</li>
<li>Katila, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin+lowers+%CE%B1-synuclein+phosphorylation+and+upregulates+neurotrophic+factor+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Metformin lowers α-synuclein phosphorylation and upregulates neurotrophic factor in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Neuropharmacology. 125, (2017).</li>
<li>Goldberg, N. R. S., Haack, A. K., Lim, N. S., Janson, O. K., Meshul, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopaminergic+and+behavioral+correlates+of+progressive+lesioning+of+the+nigrostriatal+pathway+with+MPTP%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dopaminergic and behavioral correlates of progressive lesioning of the nigrostriatal pathway with MPTP.</a> Neuroscience. 180, 256-271 (2011).</li>
<li>Schwarting, R. K., Sedelis, M., Hofele, K., Auburger, G. W., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-dependent+recovery+of+open-field+behavior+and+striatal+dopamine+deficiency+in+the+mouse+MPTP+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicity+Research%22%5BJournal%5D)">Strain-dependent recovery of open-field behavior and striatal dopamine deficiency in the mouse MPTP model of Parkinson's disease.</a> Neurotoxicity Research. 1 (1), 41(1999).</li>
<li>Shiguang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+test+as+a+method+for+ethology+in+Kunming+mice%3A+test-retest+reliability%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Behavioral+Medicine+and+Brain+Science%22%5BJournal%5D)">The open field test as a method for ethology in Kunming mice: test-retest reliability.</a> Chinese Journal of Behavioral Medicine and Brain Science. 19 (12), 1093-1095 (2010).</li>
<li>Roome, R. B., Vanderluit, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paw-Dragging%3A+a+Novel%2C+Sensitive+Analysis+of+the+Mouse+Cylinder+Test%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52701(2015).</li>
<li>Cotzias, G. C., Van Woert, M. H., Schiffer, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aromatic+amino+acids+and+modification+of+Parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Aromatic amino acids and modification of Parkinsonism.</a> New England Journal of Medicine. 282, 31-33 (1967).</li>
<li>Cassady, J. C., Johnson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+test+anxiety+and+academic+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Educational+Psychology%22%5BJournal%5D)">Cognitive test anxiety and academic performance.</a> Contemporary Educational Psychology. 27 (2), 270-295 (2002).</li>
<li>Rogalewski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semaphorin+6A+improves+functional+recovery+in+conjunction+with+motor+training+after+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Semaphorin 6A improves functional recovery in conjunction with motor training after cerebral ischemia.</a> Plos One. 5 (5), 0010737(2010).</li>
<li>Chen, W., Qiao, D., Liu, X., Shi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treadmill+exercise+improves+motor+dysfunction+and+hyperactivity+of+the+corticostriatal+glutamatergic+pathway+in+rats+with+6-ohda-induced+parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">Treadmill exercise improves motor dysfunction and hyperactivity of the corticostriatal glutamatergic pathway in rats with 6-ohda-induced parkinson's disease.</a> Neural Plasticity. 2017, 2583910(2018).</li>
<li>Colas-Zelin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+imposition+of%2C+but+not+the+propensity+for%2C+social+subordination+impairs+exploratory+behaviors+and+general+cognitive+abilities%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">The imposition of, but not the propensity for, social subordination impairs exploratory behaviors and general cognitive abilities.</a> Behavioural Brain Research. 232 (1), 294-305 (2012).</li>
<li>Spurney, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+drug+trials+in+the+mdx+mouse%3A+Assessment+of+reliable+and+sensitive+outcome+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Preclinical drug trials in the mdx mouse: Assessment of reliable and sensitive outcome measures.</a> Muscle Nerve. 39, 591-602 (2009).</li>
<li>Valle, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+strain%2C+sex%2C+and+illumination+on+open-field+behavior+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of strain, sex, and illumination on open-field behavior of rats.</a> American Journal of Psychology. 83, 103-111 (1970).</li>
<li>Tatem, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+Locomotor+Measurements+Using+an+Open+Field+Activity+Monitoring+System+for+Skeletal+Muscle+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Behavioral and Locomotor Measurements Using an Open Field Activity Monitoring System for Skeletal Muscle Diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (91), e51785(2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Als gevolg van de vernietiging van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra van de hersenen veroorzaakt MPTP Parkinson-achtige symptomen in muizen7. Levodopa is de meest aangewezen geneesmiddel voor PD ooit sinds het klinische gebruik ervan, omdat het helpt bij het handhaven van de normale dagelijkse activiteiten bij patiënten met PD, met effectieve onderdrukking van motor afwijkingen, met inbegrip van de Akinesie en rigiditeit15. De muizen behandeld met MPTP toonde b...

De ziekte van Parkinson (PD), een van de meest voorkomende ziekten onder oudere personen, is een lange termijn neurodegeneratieve stoornis1. Patiënten weergeven altijd het fenomeen schudden, stijfheid en traagheid van beweging en dementie die over tijd2verergeren. Andere symptomen zoals zintuiglijke, zijn slaap, en emotionele problemen ook vaak waargenomen2. De oorzaak van PD is nog onduidelijk, maar het is algemeen aangenomen dat zowel genetische en ecologische factoren, die leiden verlies van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra3, en ontwikkeling van Lewy organen en Lewy neurites in verschillende regio's van tot de hersenen4.
Tussen de studies van PD, wordt 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)5 wijd aangepast in het herscheppen van sommige symptomen PD in experimentele modellen. In 1984 vond Langston et al. eerst dat injecties van MPTP in doodshoofdaapjes in parkinsonisme6 resulteerde. Hoewel de MPTP knaagdier model niet de aanwezigheid van Lewy lichamen, oftewel de biomerker voor PD toont, veroorzaakt MPTP Parkinson-achtige symptomen door het vernietigen van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra van de hersenen-7. In vergelijking met andere drugs-model voor PD zoals die geïnduceerd door 6-hydroxydopamine (6-OHDA)8 en 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP +)9, injectie van MPTP is gemakkelijk uit te voeren en het MPTP-model kost minder tijd. Muizen ontvangen MPTP injecties (20-30 mg/kg/dag) voor zeven dagen, en de gedragsmatige tests worden uitgevoerd op de achtste dag10.
Het open veld test11 werd eerst ontwikkeld door Calvin S. Hall, een Amerikaanse12. In verschillende studies, worden verschillende soorten gedrag getest. In onderzoek dat zich op Parkinson ziekten richt, gedrag zoals motoriek activiteiten en de snelheid van voortbewegen worden getest om te zien als invloed van het dier mogelijkheid te bewegen. Vergeleken met andere methoden gebruikt voor het testen van de oprichting van PD dieren, open veldtest is eenvoudig uit te voeren omdat de apparatuur die nodig eenvoudig is, en prototyping en data analysesoftware (b.v., MATLAB, Excel) kan worden gebruikt om gemakkelijk te verzamelen en grafiek de gegevens. Ook is de variatiecoëfficiënt relatief klein13, wat betekent dat het resultaat van open veldtest betrouwbaar is. Een ander voordeel ten opzichte van andere methoden is dat de gedragingen die zijn opgenomen in dit experiment gemakkelijk zijn te onderscheiden; de muizen kunnen lopen, wandelen of stilstaat. Meestal kan de open veldtest op knaagdieren worden gebruikt wanneer de onderzoeker moet evalueren de certificaathouder mobiliteit.
De cilinder-test is een afkorting voor de test van asymmetrische gebruik van de voorpoten. Bij deze test eerst ontworpen is, werd gebruikt om te testen het asymmetrische gebruik van de rat voorpoten14. Hier, gebruiken we deze test om te analyseren van het dier kunnen strekken en zowel van haar voorpoten te gebruiken om nieuwe omgeving te verkennen. Wanneer de substantia nigra en de corpus striatum zijn beschadigd door de MPTP in de hersenen, het dier heeft de neiging om de boog zijn rug en wordt minder waarschijnlijk te strekken en de onbekende omgeving verkennen. Deze test is eenvoudig uit te voeren en een voorlopige resultaten kan geven. Echter heeft deze test hoge interne variabiliteit, dus het algemeen met samen met andere gedrag-experimenten gebruikt wordt.
Nemen van levodopa, die ook bekend staat als levodopa of L-3,4-dihydroxyphenylalanine, is een gemeenschappelijke manier om de ziekte van Parkinson te behandelen aangezien één oorzaak van PD is de daling van dopamine in de. Levodopa is de voorloper van dopamine. Maar in tegenstelling tot dopamine, kan het de bloed - hersen barrière, wat betekent dat het zal efficiënter zijn bij het vergroten van de concentratie van dopamine in de hersenen gebied cross. Nadat het kruist de bloed - hersen barrière, wordt levodopa omgezet in dopamine door L-amino acid decarboxylase15.
Hier beschrijven we de meting en analyse van motor functie in MPTP-induced-PD model muizen met behulp van een cilinder test14 en een gemodificeerde open veldtest. Wij beheren levodopa een voorbeeldfunctie te laten zien hoe dit model in de studie van PD drugs van toepassing. Onze resultaten wijzen erop dat MPTP induceert motor tekort, die kan worden verzacht door levodopa.

<table><tbody><tr><td>70% Ethanol</td><td>Ruiboxing Company</td><td>RBX-64175</td><td></td></tr><tr><td>Camera</td><td>BASLER</td><td>acA645-100gm</td><td></td></tr><tr><td>Cylinder test</td><td>Gemaakt in-house aan Nankai University</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Levodopa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>72816</td><td></td></tr><tr><td>Matalb 2017a</td><td>Mathworks</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Mice</td><td>Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences</td><td>Balb/c</td><td>Volwassen vrouwelijke muizen (10 weken)</td></tr><tr><td>MPTP</td><td>Yuanye Biological Technology Company Ltd., Shanghai</td><td>S31504-500mg</td><td></td></tr><tr><td>Open field test</td><td>Gemaakt in-house aan Nankai University</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Spuit</td><td>Solelybio</td><td>S-xsgwz-w</td><td>Irrigation</td></tr><tr><td>Spuit</td><td>Jiangxi Fenglin Medical Application Co.</td><td>hc3824</td><td>Intraperitoneale injectie</td></tr></tbody></table>

gedrags evaluaties van spontane voortbewegen in een lymfkliertest mptp-geïnduceerde ziekte parkinson's model

Behavioral Assessments of Spontaneous Locomotion in a Murine MPTP-induced Parkinson's Disease Model

De ziekte van Parkinson (PD) is een gemeenschappelijk neurodegeneratieve stoornis ziekte, veroorzaakt het verschijnsel schudden, stijfheid en traagheid van beweging en dementie. 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) kan leiden tot bepaalde Parkinson-achtige symptomen door het vernietigen van de Dopaminerge neuronen in de substantia nigra van de hersenen. Het is dus gebruikt om PD modellen in verschillende dierstudies. Hier, muizen ontvangen MPTP injecties (20 mg/kg/dag) voor zeven dagen en de gedragsmatige tests worden uitgevoerd op de achtste dag. Dit model is efficiënt in de studie van PD aangepast. Hier de gedrags tests omvatten de cilinder en de veldtest van het open. Het experiment van de cilinder wordt gebruikt voor het detecteren van de dieren kunnen heffen hun voorste poten waarop in een andere omgeving gebracht. Als de PD model muizen Toon overkoepelende — de muis bogen zijn rug — het aantal paw liftings daling. Deze test is eenvoudig uit te voeren. Het open veldtest wordt gebruikt voor het detecteren van de hoeveelheid tijd dat de muizen op hardlopen, wandelen, en resterende immobiel. Wij analyseren van dieren bewegingen in open veld met behulp van software en gegevens te verkrijgen. Tot slot, we gebruiken levodopa, een van de meest gebruikte PD drugs, als een voorbeeld om te tonen hoe toe te passen van dit model op de studie van PD drugs. Onze resultaten wijzen erop dat MPTP neurotoxiciteit induceert motor tekort, die kan worden verzacht door levodopa.

In de test van de cilinder, werd de daling van steigert tegen de muur waargenomen in muizen (groep 2) behandeld met MPTP vanaf dag 1 tot dag 7 en zoute op dag 8 ten opzichte van saline-behandelde muizen (groep 1), terwijl een verhoging van steigert werd waargenomen in de muizen (groep 3) behandeld met MP TP vanaf dag 1 tot en met dag 7 en levodopa op dag 8 ten opzichte van de muizen (groep 2) behandeld met MPTP vanaf dag 1 tot dag 7 en zoute op dag 8 (Figuur 1</strong...

We beschrijven de oprichting van een lymfkliertest model voor de ziekte van Parkinson met behulp van MPTP en gedrags evaluaties met behulp van cilinder en open veldproeven voor het meten van de motorische functie. We gebruiken dan levodopa een voorbeeldfunctie te laten zien hoe dit model in de studie van PD drugs van toepassing.

Gedrags evaluaties van spontane voortbewegen in een lymfkliertest MPTP-geïnduceerde ziekte Parkinson's Model

Parkinson&#8217;s disease (PD) is a common neurodegenerative disorder disease, causing the phenomenon of shaking, rigidity, slowness of movement and ...

In deze video introduceren we hoe je een cilinder- en open veldtest gebruiken om de motorische functie te beperken in het MPTP-model van de ziekte van Parkinson. Het belangrijkste voordeel is dat de muizen niet hoeven te worden getraind voor de gedragstest. Bovendien is deze methode efficiënt en zijn de kosten van de apparatuur laag.Personen die nieuw zijn in gedragstests kunnen het effect van milieu-interferentie onderschatten. Stil te houden en het vermijden van veranderingen in de voering zal helpen. Hier wordt gedragstesten uitgevoerd 24 uur na de laatste injectie van een zevendaags regime van MPTP- of zoutinjecties en 40 minuten na intragastrische toediening van LEV-DOPA aan een subset van de dieren.Als gedragstests niet worden uitgevoerd in dezelfde ruimte waar de dieren zijn gehuisvest, acclimatiseren de muizen naar de nieuwe kamer voor 30 tot 60 minuten voor de test. Begin met het plaatsen van een transparante glazen cilinder in het midden van een tafel. Omring de cilinder aan drie zijden met zwart karton, vier tot acht centimeter van de cilinder geplaatst om het effect van omgevingsverlichting te verminderen.Laat één kant van de cilinder naar de camera gericht voor video-opname. Bevestig een camera die ten minste een miljoen pixelresolutie 40 tot 60 centimeter van de cilinder kan gebruiken om ervoor te zorgen dat de hele cilinder zich in het gezichtsveld bevindt. Plaats een muis in de cilinder op een moment en beginnen met filmen in een keer.Probeer tijdens dit proces ruis- of lichtveranderingen te voorkomen om te voorkomen dat de muis het gedrag beïnvloedt. Pootliften optreden wanneer de muis opsteekt op zijn achterste ledematen, verhoogt beide voorpoten boven schouderniveau, en landt. Stop na drie minuten met filmen en plaats de muis terug in de kooi van het huis.Reinig de cilinder met water en spuit vervolgens 70% ethnol over de binnenwand om het te ontsmetten en muisgeuren te verwijderen. Veeg de cilinder droog voordat u de volgende muis test. Zodra het testen is voltooid, speelt u de video af met een snelheid van 0,5 keer de normale snelheid en tel het aantal pootliften tegen de muur van elke muis.Als de muis zijn voorpoten meerdere malen onafgebroken boven schouderniveau verhoogt zonder te landen, mag deze slechts één keer worden geteld. Voer open veldtests uit tijdens dezelfde sessie als de cilindertest. Maak een transparante open veldreactiedoos met een houten plaat, bedekt met een contrasterende zwarte of witte doek, afhankelijk van de kleur van de muis.Bevestig een camera over het veld op een hoogte van een meter. Pas de camera aan om ervoor te zorgen dat de open veldreactievak zich in het midden van de video bevindt. Doe een testmuis in de doos en laat de muis zich ongeveer een minuut vertrouwd maken met de omgeving.Neem een vijf minuten durende video op met de camera die op de computer is aangesloten. Tot slot, het opruimen van eventuele uitwerpselen in de open veld reactie doos, spray 70%ethanol op de doos, en veeg het. In de cilindertest werd een afname van het aantal opfok tegen de muur waargenomen bij muizen die met MPTP werden behandeld in vergelijking met met zout behandelde muizen.Verhoogde rears werden waargenomen in de MTPT behandelde muizen gegeven L-Dopamine op de dag van het testen in vergelijking met de MPTP behandelde muizen ontvangen zoutoplossing. Deze afbeelding toont de representatieve bewegingstracering en de verdeling van de statische tijd, de looptijd en de looptijd in controlemuizen die niet met MPTP zijn behandeld. Muizen behandeld met MTPT aangetoond lagere bewegingssnelheid, kortere bewegingsafstand, langere statische tijd, en kortere looptijd dan zoutoplossing behandeld muizen, waaruit blijkt een motortekort veroorzaakt door MTPT.MPTP behandelde muizen die L-Dopamine kregen, vertoonden een hogere bewegingssnelheid, een langere bewegingsafstand, een kortere statische tijd en een langere looptijd dan de muizen die behandeld worden met slechts MPTP, wat aangeeft dat L-Dopamine het MPTP-geïnduceerde motortekort vermindert. Bij het veranderen van de muizen die getest worden duidelijk het gebied volledig en spray ethanol om het effect van de geur van de voormalige muizen te elimineren. Na deze procedure kunnen andere maatregelen worden uitgevoerd, zoals de balkwandeltest, paaltest.Gegevens met betrekking tot balanscapaciteit en motorvermogen kunnen via deze methoden worden verkregen. MPTP is neurotoxisch voor zowel muizen als mensen en dus moeten strikte voorzorgsmaatregelen worden genomen om blootstelling te voorkomen. Extra BESCHERMINGSMIDDELEN, zoals een masker of beademingsapparaat, moeten worden gedragen.

behavioral-assessments-spontaneous-locomotion-murine-mptp-induced

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

Ziekte van Parkinson wordt veroorzaakt door het verlies van dopaminerge innervatie naar het striatum, die experimenteel kunnen worden geïnduceerd door 6-OH-dopamine. We beschrijven hoe u een stereotaxische laesie te voeren en op apomorfine-geïnduceerde rotatie gedrag bij muizen te controleren. Dit model is handig en betrouwbaar voor het testen van nieuwe therapieën voor de ziekte van Parkinson.

Muismodel voor de ziekte van Parkinson: van 6-OH Dopamine Laesie naar Behavioral Test

De ziekte van Parkinson en bewegingsstoornissen in het algemeen, gevoelig en betrouwbaar gedrag assays zijn essentieel voor het testen van nieuwe potentiële geneesmiddelen. We beschrijven hier een beheersbare batterij sensorimotorische tests voor muizen die gevoelig zijn voor verschillende mate van schade aan het nigrostriatale systeem en nuttig voor preklinische studies.

Beoordeling van Sensorimotor Functie in muismodellen van de ziekte van Parkinson

Kinematische ganganalyse in het sagittale vlak levert zeer nauwkeurige informatie over hoe verkeer wordt uitgevoerd. We beschrijven de toepassing van deze technieken te identificeren gait tekorten voor muizen onderworpen aan auto-immuun-gemedieerde demyelinisatie. Deze methoden kunnen ook worden gebruikt om te karakteriseren gait tekorten voor andere Muismodellen met verminderde motoriek.

Sagittale vlak kinematische ganganalyse in C57BL/6 muizen onderworpen aan MOG35-55 geïnduceerde experimentele Autoimmune encefalomyelitis

In deze studie tonen wij het gebruik van kinematische ganganalyse, gebaseerd op het ventrale vliegtuig imaging als u wilt controleren de subtiele veranderingen in motorische coördinatie alsmede de progressie van neurodegeneratie met het bevorderen van leeftijd in muismodellen (bijvoorbeeld endophilin mutant muis lijnen).

Ganganalyse leeftijd-afhankelijke Motor bijzondere waardeverminderingen in muizen met neurodegeneratie

Footprint Analysis is een voordelig alternatief voor gedigitaliseerde gang analyseprogramma's voor onderzoekers die bewegings afwijkingen bij muizen kwantificeren. Door zijn snelheid, eenvoud en longitudinale potentiaal is het ideaal voor het gedragsfenotypen van Muismodellen.

Voordelige Gait-analyse voor Gedragsfenotypen van Muismodellen van neuromusculaire ziekte

Hier beschrijven we het RatWalker-systeem, gebouwd door het MouseWalker-apparaat opnieuw te ontwerpen om tegemoet te komen aan de toegenomen grootte en het gewicht van ratten. Dit systeem maakt gebruik van gefrustreerde totale interne reflectie (FTIR), snelle video-opname en open-access analysesoftware om loopparameters te volgen en te kwantificeren.

Het ratwalkersysteem toepassen voor loopanalyse in een genetisch rattenmodel van de ziekte van Parkinson

Dit manuscript presenteert een reeks zeer reproduceerbare gedragstests om een muismodel met het Angelman-syndroom te valideren.

Gedragskarakterisering van een Angelman Syndroom Muismodel

Een experimentele pijplijn om het bewegingspatroon van vrij lopende muizen kwantitatief te beschrijven met behulp van de MouseWalker (MW) toolbox wordt geleverd, variërend van initiële video-opnames en tracking tot post-kwantificeringsanalyse. Een dwarslaesiemodel bij muizen wordt gebruikt om het nut van het MW-systeem aan te tonen.

De MouseWalker gebruiken om locomotorische disfunctie te kwantificeren in een muismodel van dwarslaesie

Dit protocol stelt een gedragsfenotyperingsparadigma vast bij met MPTP behandelde zebravislarven om Parkinson-achtige motorische en niet-motorische tekorten te evalueren.

Fenotypische profilering van door MPTP geïnduceerde Parkinson-achtige gedragsfenotypes bij zebravislarven op basis van gedragsexperiment

We zien hoe objectieve maatstaf kan worden toegepast in de schaal toegepast rubberhand paradigma illusie. Deze maatregel wordt verkregen door het modificeren van de gevestigde crossmodaal congruentie taak. Deze taak toe het onderzoek van multi-processen die cruciaal zijn voor modulaties van het lichaam representaties zoals in de rubberen hand-illusie zijn.

De crossmodaal Congruentie Taak als een middel om een ​​doelstelling Behavioral Meet verkrijgen in de Rubber Hand Illusion Paradigm

Leer gedragsbeoordelingen van spontane voortbeweging in een lymfkliertest met een MPTP-geïnduceerd muismodel voor de ziekte van Parkinson. Deze methode helpt onderzoekers motorische functie te evalueren.

Gedrags evaluaties van spontane voortbewegen in een lymfkliertest MPTP-geïnduceerde ziekte Parkinson's Model

Meer video's verkennen