Name: Snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor GC-MS thermische desorptie bemonstering (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: Leer een snelle headspace-methode voor het verzamelen van bloemige geurvluchtige stoffen met GC-MS thermische desorptie. Deze niet-destructieve techniek verkort de bemonsteringstijd tot ongeveer 10 minuten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

USDA-ARS Research Project nummer 6036-22000-028-00D. Het gebruik van handels-, firma-of corporatie namen in deze publicatie is voor de informatie en het gemak van de lezer. Een dergelijk gebruik vormt geen officiële bekrachtiging of goedkeuring door het Amerikaanse ministerie van landbouw of de Landbouwonderzoekdienst van een product of dienst met uitsluiting van andere producten die geschikt kunnen zijn. Daarnaast financierde de Universiteit van Florida biologie Department-Lewis en Varina Vaughn Fellowship in Orchid Biology (2017), en een University of Florida Graduate Research Fellowship (2014-2018) ook financiering. We danken ook Cindy Bennington van Stetson University voor de orchideeën plant die tijdens het filmen van deze video werd gebruikt.

Opmerking: parfums of geurende lotions en producten mogen tijdens geen van deze procedures worden gedragen.
1. bloem selectie
Opmerking: bloemen die worden gebruikt, kunnen natuurlijk in het milieu groeien of onder kunstmatige omgevingsomstandigheden worden gehouden. Temperatuur, vochtigheid en lichtniveau tijdens het verzamelen kan variëren afhankelijk van de specifieke bloemsoorten die worden gebruikt, en welk type gegevens worden verzameld. Er zijn bijvoorbeeld gegevens verzameld overdag en 's nachts voor dezelfde bloem om te bepalen of de geur varieert in de tijd van de dag, en verzameld van zowel in situ als broeikas bloemen.
<ol><li>Selecteer een bloem die in eerste instantie ongeopend is om de tijd voor het verzamelen van monsters te standaardiseren. Deze regeling voor een bloem veranderende geur na verloop van tijd.</li>
	<li>Afhankelijk van de duur van de bloeitijd, indien mogelijk, wacht u ten minste 24 uur na de bloei om het monster te verzamelen, waarbij u een standaardtijd voor alle monsters instelt.</li>
	<li>Als er meerdere bloeiende bloemen op een plant, Markeer degene die zal worden gebruikt met het markeren van tape of iets dergelijks te zorgen voor herhaalde bemonstering van dezelfde bloem.</li>
</ol>2. materiaal voorbereiding
<ol><li>Gebruik oven zakken (ongeveer 40,5 cm × 44,5 cm) en gegolfde PTFE-slang.</li>
	<li>In eerste instantie, kook de oven zakken in water gedurende ~ 30 min om rest kunststof verbindingen te verwijderen. Om te drogen, bakken in een oven bij 175 °C.</li>
	<li>Zodra de zakken zijn gedroogd, voeg een polypropyleen schot Unie toe aan elke hoek van het gesloten uiteinde van de oven zakken. Deze bevestigingen maken aansluiting van buizen mogelijk om houtskool gefilterde lucht in te duwen en de geur uit de headspace te halen.</li>
	<li>Spoel alle tassen en buizen af met 75% ethanol. Laat beide lucht drogen na het spoelen.</li>
	<li>Nadat de oven zakken zijn gedroogd, bakken zakken en buizen in een oven bij laag vuur, ongeveer 74-85 °C gedurende 30 minuten.</li>
</ol>3. vluchtige inzameling
Opmerking: steriele neopreen handschoenen moeten tijdens dit proces worden gedragen, omdat het contact met de zak of filter cartridges de monsters kan verontreinigen.
<ol><li>Bedek de geselecteerde bloem met een gebakken oven tas. Steek de tas strak samen met een plastic ritssluiting onder de bloem om ongewenste luchtstroom in de zak te voorkomen.</li>
	<li>Bevestig een buis van de luchtuitlaat van de inzamel apparatuur en sluit deze aan op een van de schotten op de oven zak.</li>
	<li>Bevestig op de andere schottendek-Unie een glazen filterpatroon met poreus polymeer adsorbens.</li>
	<li>Bevestig een tweede buis aan de inzamel apparatuur op de vacuüm ingang. Sluit het uiteinde van de tweede buis aan op de glasvolatile Collection filter cartridge.</li>
	<li>Schakel zowel de luchtpomp als de vacuüm op dezelfde tijd in op ~ 0,05 L/min. De hoofdruimte rond de bloem vult met lucht, maar wordt niet overopgeblazen. Het systeem trekt lucht uit de zak door het filter, het vangen van de bloemen volatiles.</li>
	<li>Laat de machine 10 minuten draaien en schakel vervolgens zowel de luchtpomp als het vacuüm uit. Opmerking: bloemsoorten die een kleinere hoeveelheid geur produceren/uitstoten, moeten mogelijk voor een langere periode worden bemonsterd.</li>
	<li>Demonteer de buizen en het glas filterpatroon. Plaats het filter in een glazen injectieflacon met een schroefdop. Zodra de dop is ingeschakeld, verzegelen de injectieflacon met PTFE pijp draad tape.</li>
	<li>Bewaar de monsters in een vriezer tot ze worden geanalyseerd met GC-MS.</li>
	<li>Herhaal dit proces met een schone oven zak en glas filter, dit keer met een lege oven zak, om een blanco lucht monster als controle te verzamelen. Dit maakt het mogelijk om eventuele achtergrond vluchtige stoffen verzameld worden geïdentificeerd. Opmerking: herhalende monsterverzameling moet elke dag op ongeveer hetzelfde tijdstip worden uitgevoerd, omdat sommige bloemen in de loop van een dag wisselende geur niveaus produceren.</li>
</ol>4. GC-MS
<ol><li>Verwijder de glas filter cartridge uit de vriezer en plaats deze in een GC-MS in de injector poort.</li>
	<li>Verlos headspace-vluchtige vloeistof verzameld op poreus polymeer adsorbens van het adsorbens door verwarming in de thermische opvangval (TCT) tot 220 °C gedurende 8 minuten binnen een stroom van helium gas (snelheid: 1,2 mL/min).</li>
	<li>Verzamel desorbedverbindingen in de TCT Cold trap unit bij-130 °C. De temperatuur van de koude trap wordt gereguleerd door het GC-MS-programma.</li>
	<li>Flash Verwarm de TCT Cold trap-eenheid om de verbindingen te injecteren in de capillaire kolom van de gaschromatograaf waaraan de TCT Cold trap-eenheid was aangesloten. De methode voor de TCT begint bij-20 °C en eindigt bij 150 °C.</li>
	<li>Program meer de GC-MS van 40 °C tot 280 °C bij 15 °C/min, met een hold van 5 min bij 40 °C.</li>
</ol>5. gegevensanalyse
<ol><li>Vergelijk voor identificatie de massa spectra van het monster met die van Mass Spectra libraries (NIST en Department of Chemical Ecology, Goteborg University, Zweden11), evenals de retentietijden van de vluchtige stoffen tot tijden van authentieke samengestelde normen12.</li>
	<li>Vergelijk chromatogrammen van verzamelde vluchtige handelingen om gemeenschappelijke terugkerende pieken te identificeren.</li>
	<li>Na het identificeren van de piek volatiliteiten, gebruik Pherobase (online database van semiochemicals en feromonen) om te bepalen of ze eerder zijn beschreven in florale geuren10.</li>
</ol>

<ol><li>Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+scents-+A+checklist+of+volatile+compounds+isolated+by+head-space+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques.</a> Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).</li>
<li>Dudareva, N. A., Pichersky, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDudareva%2C+NA+%22Biology+of+floral+scent%22">Biology of floral scent</a>. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).</li>
<li>Altenburger, R., Matile, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhythms+of+fragrance+emission+in+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Rhythms of fragrance emission in flowers.</a> Planta. 174, 242-247 (1988).</li>
<li>Dodson, C. H., Dressler, R. L., Hills, H. G., Adams, R. M., Williams, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+active+compounds+in+orchid+fragrances%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biologically active compounds in orchid fragrances.</a> Science. 164, 1243-1249 (1969).</li>
<li>Theis, N., Raguso, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pollination+on+floral+fragrance+in+thistles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">The effect of pollination on floral fragrance in thistles.</a> Journal of Chemical Ecology. 31 (11), 2581-2600 (2005).</li>
<li>Heath, R. R., Manukian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+systems+to+collect+volatile+semiochemicals+from+insects+and+plants+using+a+charcoal-infused+medium+for+air+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of systems to collect volatile semiochemicals from insects and plants using a charcoal-infused medium for air purification.</a> Journal of Chemical Ecology. 18, 1209-1226 (1992).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+floral+fragrance+components+of+species+of+Encyclia+and+Prosthechea+%28Orchidaceae%29+from+Soconusco%2C+southeast+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Lankesteriana%22%5BJournal%5D)">Comparison of floral fragrance components of species of Encyclia and Prosthechea (Orchidaceae) from Soconusco, southeast Mexico.</a> Lankesteriana. 6, 83-139 (2006).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+analysis+of+euglossine+bee+pollinated+orchids+from+Soconusco%2C+south-east+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Species+Biology%22%5BJournal%5D)">Fragrance analysis of euglossine bee pollinated orchids from Soconusco, south-east Mexico.</a> Plant Species Biology. 22, 129-134 (2007).</li>
<li>Sadler, J. J., Smith, J. M., Zettler, L. W., Alborn, H. T., Richardson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+composition+of+Dendrophylax+lindenii+%28Orchidaceae%29+using+a+novel+technique+applied+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Environmental+Science%22%5BJournal%5D)">Fragrance composition of Dendrophylax lindenii (Orchidaceae) using a novel technique applied in situ.</a> European Journal of Environmental Science. 1, 137-141 (2011).</li>
<li>Ray, H. A., Stuhl, C. J., Gillett-Kaufman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+fragrance+analysis+of+Prosthechea+cochleata+%28Orchidaceae%29%2C+an+endangered+native%2C+epiphytic+orchid%2C+in+Florida%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Floral fragrance analysis of Prosthechea cochleata (Orchidaceae), an endangered native, epiphytic orchid, in Florida.</a> Plant Signaling and Behavior. , (2018).</li>
<li>National Institute of Standards and Technology. U.S. Department of Commerce. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nist.gov/">https://www.nist.gov/</a> (2019).</li>
<li>The Pherobase: Databse of Pheromones and Semiochemicals. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.pherobase.com/">http://www.pherobase.com/</a> (2019).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Hoewel deze techniek ongelooflijk waardevol is voor de Samplingsnelheid en draagbaarheid, gebruikt een beperking het voor epifytische soorten, of die op bomen groeien en niet vanaf de grond. In de originele studie10was een van de gesamplede bloemen epifytisch. Omdat de machine te zwaar is om vrij te hangen, moet een stabiele, verhoogde basis worden gemaakt voor bemonstering. Bovendien kan de machine ofwel worden aangesloten op een stopcontact of op batterijen, dus als er een langdurige veld bemons...

Bloemen produceren meestal een geur die wordt gebruikt om bestuivers aan te trekken. Deze geuren bestaan uit vele chemische verbindingen die allemaal samen fungeren als een bloemige Blend1,2,3. Zonder deze geuren zouden bloemen minder snel hun genetische informatie doorgeven met bestuivers. Florale geur is gedocumenteerd in veel bloeiende plantenfamilies, met Orchidaceae als een van de meest voorkomende families bestudeerd4. Om de rol van florale geur in bestuiving te begrijpen, is het belangrijk om de chemische verbindingen die uit de bloemen op verschillende tijdstippen van de dag worden uitgezonden, niet destructief te verzamelen en te analyseren en gedurende de enkele dagen tot weken zijn de bloemen bloeiers open, omdat geur kan variëren in de tijd5.
Een vroeg protocol voor dit soort monstername werd ontwikkeld door Heath en Manukian6. Het doel van hun bemonsteringsmethoden was om de stress op het preparaat (bijv. planten, insecten) te verminderen. In eerdere papers werd gedocumenteerd dat destructieve procedures voor de plant nodig waren, zoals het verwijderen van bloeiende bloemen om de geur te verzamelen. Meer recente florale geur publicaties van cancino en Damon7,8 gebruikten vergelijkbare methoden. Deze studie zette de bloemen in glazen kamers en gaf gezuiverde lucht over hen; vervolgens werden geurstoffen uit de kamer geabsorbeerd op poreuze polymeer adsorbenten in heldere Pasteur-pipetten. De geuren werden gedurende ten minste twee uur verzameld tijdens deze studie. Sadler et al.9 heeft florale geur studies uitgevoerd op een epifytische orchidee in Zuid-Florida, net als de originele studie10. Nogmaals, deze studie vereist dat de bloemen worden bemonsterd voor meer dan twee uur om de geur vluchtige stof te verzamelen, met geur verzameld op de poreuze polymeer adsorbens. Het papier bevat hier een niet-destructieve methode die een veel snellere bemonstering mogelijk maakt, die slechts 10 minuten duurt. Ook, in plaats van het gebruik van een glazen kamer oven bakken zakken worden gebruikt, die zorgen voor meer flexibele beweging van de kamer en de kans op schade aan de bloemen te verminderen. Deze tassen zijn er in verschillende maten waardoor de optie om de grootte van de zak die gemakkelijk zal passen individuele monsters zonder beschadiging van het monster of het omringende materiaal te selecteren. Het adsorbens gebruikt in deze studie was Tenax poreus polymeer Adsorbens. Dit verschilt van Porapak, omdat het monster thermisch kan worden gedesorverd op de GC-MS-kolom voor analyse, waardoor het gebruik van een chemisch oplosmiddel wordt geëlimineerd.
De methoden in deze studie bieden een manier om snel geuren van geur vluchtige stoffen geproduceerd door bloemen te proeven en kunnen worden gebruikt om vluchtige monsters van andere specimens te proeven, zoals insecten feromonen of champignon-vluchtige stoffen. De kortere bemonsteringstijd betekent dat er minder stress is op het monster en dat er in korte tijd veel monsters kunnen worden verzameld. Bijvoorbeeld, in Sadler et al.9, de bloem was alleen geurige 's nachts, dus slechts twee of drie monsters kunnen worden verzameld elke nacht. Met de methode hier, monsters kunnen worden genomen de hele nacht op 15-20-minuten intervallen van dezelfde bloem. Door het gebruik van zakken in plaats van glazen kamers kan de headspace bovendien gemakkelijker worden gesuspendeerd voor bemonstering in het veld voor in-situ inzameling van bedreigde of bedreigde plantensoorten. Met behulp van de hier gepresenteerde methode, waren we in staat om te proeven van bloemen 1,5 tot 2 meter boven de grond. Deze methoden zijn ongelooflijk nuttig voor het verzamelen van geuren in het laboratorium en het veld, en biedt onderzoekers een bemonsteringstechniek die snel en niet-destructief is voor het monster.

<table><tbody><tr><td>Bulkhead Union</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06390-10</td><td></td></tr><tr><td>FEP tubing</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06407-60</td><td></td></tr><tr><td>Gas Chromatography</td><td>Hewlett Packard</td><td>6890</td><td></td></tr><tr><td>Glass Wool, Silanized</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>20411</td><td></td></tr><tr><td>Inlet liner</td><td>Agilent</td><td>5062-3587</td><td></td></tr><tr><td>Mass Spectrometer</td><td>Hewlett Packard</td><td>5973</td><td></td></tr><tr><td>Reynolds oven bag</td><td>Reynolds Consumer Products</td><td>Turkey size</td><td></td></tr><tr><td>Tenax Porous Polymer Adsorbent</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>11982</td><td></td></tr></tbody></table>

snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor gc-ms thermische desorptie bemonstering

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

Geuren van veel bloemen families zijn bemonsterd en de vluchtige stoffen geanalyseerd. Het kennen van de verbindingen waaruit de geuren bestaan kan een belangrijke stap zijn voor het behoud van bloemen die bedreigd of bedreigd zijn. Omdat florale geur cruciaal is voor het aantrekken van bestuivers, kan deze methode worden gebruikt om de bestuiving beter te begrijpen of zelfs te verbeteren. We presenteren een protocol met behulp van een draagbare houtskool luchtfilter en vacuüm voor het verzamelen van bloemengeur volatiles, die vervolgens worden geanalyseerd door een GC-MS. Door deze methode te gebruiken, kunnen geur volatikels worden bemonsterd met behulp van een niet-destructieve methode met een machine die gemakkelijk kan worden vervoerd. Deze methodologie maakt gebruik van een snelle bemonsteringprocedure, snijden bemonstering tijd omlaag van 2-3 uur tot ongeveer 10 minuten. Met behulp van GC-MS kunnen de geurstoffen individueel worden geïdentificeerd, op basis van authentieke normen. De stappen die worden gebruikt voor het verzamelen van geur-en controlegegevens worden weergegeven, van materiaalinstellingen tot het verzamelen van de gegevensuitvoer.

Representatieve gegevens van de GC-MS worden weergegeven als een chromatogram in Figuur 1. Naast het chromatogram wordt ook een gegevensbestand met resultaten verstrekt (aanvullend bestand 1). Dit gegevensbestand biedt de retentietijd voor elke piek (RT) en een identificatie van welke verbinding die piek is (bibliotheek/ID). Pieken tussen 10:00 en 15:00 minuten zijn bloemen volatiles, als gevolg van het molecuulgewicht van de verbindingen10. De getall...

Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van de bloemige geur vluchtige stoffen uit bloeiende bloemen, met behulp van een niet-destructieve bemonsteringsprocedure.

Snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor GC-MS thermische desorptie bemonstering

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

Omdat bloemengeur is van cruciaal belang voor het aantrekken van bestuivers, deze methode kan worden gebruikt om beter te begrijpen of zelfs te verbeteren bestuiving van inheemse bloemsoorten. Met deze methode worden geurvolstelingen bemonsterd met behulp van een niet-destructieve methode met een gemakkelijk te vervoeren machine. Deze methode maakt gebruik van snelle bemonstering, het snijden van bemonstering tijd van twee tot drie uur tot 10 minuten.Deze methoden bieden een manier om snel te proeven vluchtige stoffen geproduceerd door bloemen en kunnen worden gebruikt om vluchtige stoffen monster van andere exemplaren ook, zoals insectenferomonen. Om te beginnen selecteert u een bloem die in eerste instantie ongeopend is en markeer u de bloem met markeringstape om herhaling van dezelfde bloem te garanderen. Kook ovenzakken in water gedurende 30 minuten om resterende plastic verbindingen te verwijderen.Om te drogen, bak in een oven op 175 graden Celsius gedurende 60 minuten. Zodra de zakken zijn gedroogd, voeg een polypropyleen schot unie aan elke hoek van het gesloten einde van de oven zakken. Spoel alle zakken en buizen af met 75% ethanol en laat ze aan de lucht drogen.Bak vervolgens de zakken en de buizen in een oven op laag vuur, tussen de 74 tot 85 graden Celsius gedurende 30 minuten. Afhankelijk van de duur van de bloeitijd, wacht indien mogelijk ten minste 24 uur na de bloei om het monster te verzamelen. Bedek de geselecteerde bloem met een gebakken oventas.Cinch de zak samen strak met een plastic zip tie onder de bloem om ongewenste luchtstroom in de zak te voorkomen. Het dragen van steriele neopreen handschoenen, bevestig een buis uit de lucht uitlaat van de collectie apparatuur en sluit deze aan op een van de schotten vakbonden op de oven zak. Op de andere schotten unie, bevestig een glasfilter cartridge met poreus polymeer adsorbent.Bevestig een tweede buis aan de opvangapparatuur op de vacuümingang. Sluit het uiteinde van de tweede buis aan op de glazen vluchtige inzamelfiltercartridge. Zet tegelijkertijd zowel de luchtpomp als het vacuüm aan en zet op 0,05 liter per minuut.De hoofdruimte rond de bloem is gevuld met lucht, maar niet overinflated. Het systeem trekt lucht uit de zak door het filter, het vangen van de florale vluchtige. Laat de machine 10 minuten draaien.En zet dan zowel de luchtpomp als het vacuüm uit. Demontage van de buizen en de glasfiltercartridge. Plaats het filter in een glazen flacon en schroef op een dop.Sluit de flacon af met PTFE pijpdraadtape. Bewaar het monster in een vriezer tot gcms-analyse. Herhaal dit proces met een lege ovenzak om een blanco luchtmonster als controle te verzamelen.Voor consistente replicaties van dezelfde vluchtige stoffen, herhaal monster collectie op hetzelfde tijdstip elke dag, zoals sommige bloemen produceren verschillende geurniveaus in de loop van de dag. Verwijder eerst de glasfiltercartridge uit de vriezer en plaats deze in een GCMS in de injectorpoort. Om hoofdruimte vluchtige stoffen verzameld op poreus polymeer adsorbent uit de adsorberend vrij te geven, verwarm de thermische opvangval tot 220 graden Celsius gedurende acht minuten binnen een stroom heliumgas met 1,2 milliliter per minuut.Vergelijk chromatogrammen van verzamelde vluchtige stoffen om veelvoorkomende terugkerende pieken te identificeren. Na het identificeren van de piek vluchtige, gebruik Pherobase om te bepalen of ze eerder zijn beschreven in florale geuren. In deze studie worden representatieve gegevens van het GCMS weergegeven als een chromatogram.Pieken tussen 10 en 15 minuten zijn bloemen vluchtige. De verzamelde vluchtige stoffen werden verwezen in Pherobase om te bepalen of ze eerder zijn beschreven in een bloemige geur. Bijvoorbeeld, samengestelde nummer 21, met een retentietijd van 10.311 is geïdentificeerd als benzaldehyde.Benzaldehyde is doorzoekbaar op Pherobase met een lijst van alle bloemsoorten, georganiseerd door plantenfamilie, waaruit die geurverbinding is geïdentificeerd. De orchideeënsoorten worden hier getoond, waaruit is vastgesteld dat benzaldehyde aanwezig is in de bloemengeur. Eerdere methoden duurden twee tot vier uur per monster.Het gebruik van een oplosmiddel om het monster uit het filter te verwijderen zou resulteren in een oplosmiddelpiek op het GCMS. Dit zou de verbindingen van nul tot 3,5 minuten verbergen. Deze methode maakt het mogelijk voor alle verbindingen te zien.

rapid-collection-floral-fragrance-volatiles-using-headspace-volatile

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Een eenvoudige methode is voorzien die het mogelijk maakt voor de snelle extractie en analyse van veelvoudige plantaardige hormonen uit kleine weefselmonsters. De procedure maakt gebruik van dampfase extractie als de plechtige zuiveringsstap. Monsters worden geanalyseerd door GC / MS met chemische ionisatie, die voornamelijk produceert (M +1) + ionen.

Monitoring plantenhormonen tijdens stress Reacties

Secundaire electrospray ionisatie massa spectrometrie (Sesi-MS) kan de detectie van vluchtige organische stoffen (VOS), zonder de noodzaak voor een monstervoorbehandeling. Dit protocol bevat instructies voor het snel (binnen minuten) karakterisering van bacteriële VOS met behulp van Sesi-MS.

Karakteriseren Bacteriële Vluchtige stoffen met behulp van secundaire electrospray ionisatie massaspectrometrie (Sesi-MS)

Een snelle methode voor vluchtige verbinding analyse fruit beschreven. De vluchtige stoffen in de kopruimte van een homogenaat van het monster snel gescheiden en gedetecteerd met ultrasnelle gaschromatografie (GC) gekoppeld met een akoestische oppervlaktegolf (IST) sensor. Een procedure voor data verwerking en analyse wordt ook besproken.

Fruit Vluchtige analyse met behulp van een elektronische neus

Olfactorische signalen bemiddelen veel verschillende gedragingen in insecten, en zijn vaak complexe mengsels bestaat uit tientallen tot honderden vluchtige verbindingen. Met gaschromatografie met meerkanaals opname in het insect antennelid lobe beschrijven we een werkwijze voor de identificatie van bioactieve verbindingen.

Identificatie van Olfactorische Vluchtige stoffen met behulp van gaschromatografie-en meergezins-Recordings (GCMR) in de Insect antennaal Lobe

Trace explosieve dampen van TNT en RDX verzameld op-Sorbens gevulde thermische desorptie buizen werden geanalyseerd met behulp van een geprogrammeerde temperatuur desorptie systeem gekoppeld aan GC van een electron capture detector. De instrumentele analyse wordt gecombineerd met directe depositie methode vloeistof monster variabiliteit en rekening voor instrumentatie drift en verliezen te beperken.

Kwantitatieve detectie van Trace explosieve dampen door ingestelde temperatuur desorptie gaschromatografie-Electron Capture Detector

Minderjarige werknemers van de mier soorten Colobopsis explodens worden ontleed om te isoleren van de inhoud van de wasachtige opgeslagen in hun hypertrophied mandibulaire klier reservoirs voor latere oplosmiddel-extractie en analyse met gaschromatografie-massaspectrometrie. De aantekening en de identificatie van vluchtige bestanddelen met behulp van de open-source software MetaboliteDetector wordt ook beschreven.

Isolatie van de mandibulaire klier Reservoir inhoud van Borneose ' exploderende mieren (Formicidae) voor Volatilome analyse door GC-MS en MetaboliteDetector

We hebben een effectieve methodologie ontwikkeld voor het bemonsteren en analyseren van geursignalen om te begrijpen hoe ze kunnen worden gebruikt in diercommunicatie. In het bijzonder gebruiken we headspace solid-phase microextractie in combinatie met gaschromatografie-massaspectrometrie om de vluchtige componenten van dierlijke geuren en geurmarkeringen te analyseren.

Bemonstering en analyse van geursignalen van dieren

Total Vaporization Solid Phase Microextraction (TV-SPME) verdampt een vloeibaar monster volledig terwijl analyten worden geabsorbeerd op een SPME-vezel. Dit maakt het mogelijk om de analyt te verdelen tussen alleen de oplosmiddeldamp en de SPME-vezelcoating.

Gaschromatografie-massaspectrometrie in combinatie met totale verdampingsvaste fase micro-extractie als forensisch hulpmiddel

Een headspace vaste fase micro-extractie-gas-chromatografie platform wordt hier beschreven voor snelle, betrouwbare en semi-geautomatiseerde vluchtige identificatie en kwantificering in rijpe zwarte bessenvruchten. Deze techniek kan worden gebruikt om de kennis over fruitaroma te vergroten en cultivars met verbeterde smaak te selecteren voor het doel van veredeling.

Profilering van vluchtige stoffen in zwarte bessenfruit met behulp van Headspace Solid-Phase Microextraction Coupled to Gas Chromatography-Mass Spectrometry

Dit protocol beschrijft de extractie van vluchtige organische stoffen uit een biologisch monster met de vacuümondersteunde sorptiemiddelextractiemethode, gaschromatografie in combinatie met massaspectrometrie met behulp van de Entech Sample Preparation Rail en data-analyse. Het beschrijft ook de kweek van biologische monsters en stabiele isotooponderzoek.

Het vastleggen van actief geproduceerde microbiële vluchtige organische stoffen uit mens-geassocieerde monsters met vacuümondersteunde sorptie-extractie

Hier wordt een methode gepresenteerd voor het verrijken en analyseren van de vluchtige componenten van thee-extracten met behulp van oplosmiddelondersteunde smaakverdamping en oplosmiddelextractie gevolgd door gaschromatografie-massaspectrometrie, die kan worden toegepast op alle soorten theemonsters.

Theearoma-analyse op basis van oplosmiddelondersteunde smaakverdampingsverrijking

Leer een snelle headspace-methode voor het verzamelen van bloemige geurvluchtige stoffen met GC-MS thermische desorptie. Deze niet-destructieve techniek verkort de bemonsteringstijd tot ongeveer 10 minuten.

Snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor GC-MS thermische desorptie bemonstering (Video) | JoVE Journal

Snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor GC-MS thermische desorptie bemonstering

Meer video's verkennen